專利名稱：Lh－rh受體拮抗劑的制作方法
專利說明LH-RH受體拮抗劑 本發(fā)明提供含具有LH-RH受體拮抗劑作用的環(huán)五肽或其鹽的LH-RH受體拮抗劑，和具有極好LH-RH受體拮抗劑作用的新的環(huán)五肽或其鹽。垂體前葉激素的分泌受器官分泌的外周激素和下丘腦分泌的促進分泌或延遲分泌的激素的控制，這些器官是各種垂體前葉激素的作用目標，下丘腦是垂體前葉的上部中心(下文將這些激素稱之為下丘腦激素)。目前，已證實有九種下丘腦激素，它們包括例如促甲狀腺素釋放激素(TRH)和促性腺激素釋放激素(GnRH)[也稱為促黃體生成激素釋放激素(LH-RH)](Irie，M.&Toyama，K.，生理學2，Bunkodo Publishing，第610-618頁，1986年)。據(jù)信這些下丘腦激素通過據(jù)認為是存在于垂體前葉的受體表現(xiàn)出它們的激素作用等(同上)，促進了對包括人類的那些下丘腦激素特異性的受體基因分析(Imura，H.等，Bases and Clinics of Receptors，Asakura Shoten Publishing，第297-304頁，1993年)。因此，這些受體特異性和選擇性的拮抗劑和激動劑將控制下丘腦激素的作用并控制垂體前葉激素的分泌。預期這樣的拮抗劑和激動劑可用于預防和治療依賴于這類垂體前葉激素的疾病。
重復給藥亮丙瑞林乙酸鹽，一種高活性的促黃體生成激素釋放激素(下丘腦激素的一種，下文稱之為LH-RH)衍生物(Fujino等，生物化學和生物物理學研究通訊，60卷，第406-413頁，1975；Oliver，R.T.D.等，英國癌癥雜志，59卷，第823頁，1989；和Toguchi等，國際藥物研究雜志，18卷，第35-41頁，1990)降低垂體生成激素在垂體的釋放和產(chǎn)生，降低睪丸和卵巢對促黃體生成激素的反應性并延遲睪丸素和雌激素的分泌。因此，據(jù)知亮丙瑞林乙酸鹽對依賴于這類激素的癌癥，如前列腺癌表現(xiàn)出抗腫瘤活性并已應用于臨床。此外，亮丙瑞林乙酸鹽已作為治療子宮內(nèi)膜異位、性早熟等的臨床用藥。據(jù)認為亮丙瑞林乙酸鹽的高制癌活性是基于其對蛋白酶的抗性比天然LH-RH要高的事實，和它對LH-RH受體具有高度親和性，因而LH-RH反應性對受體數(shù)量的降低不敏感的事實。然而，因為亮丙瑞林乙酸鹽是LH-RH受體的超強激動劑，據(jù)報道由于其首次給藥后立即出現(xiàn)的垂體-促性腺作用(急性作用)，該乙酸鹽引起暫時的病情惡化并伴隨血漿睪丸素濃度的升高。
已知的背景情況如上，因此需要具有極好治療作用，同時不表現(xiàn)出上述暫時性垂體-促性腺作用(急性作用)的LH-RH拮抗劑。
各種環(huán)五肽已有報道(FEBS LETTERS，291卷，No.1，50-54(1991)，生物化學協(xié)會學報，肽結(jié)構(gòu)和合成中的現(xiàn)代技術(shù)，1049-1052(1994)，USP4508711，EP-A 436189，EP-A 528312，EP-A 606881，日本專利公開平3-94692，平3-130299，平6-192293，平5-59098和平5-194589)。但是，它們均沒有公開有關(guān)LH-RH受體拮抗劑的作用。
顯示出LH-RH拮抗劑作用的線性肽(美國專利5140009和5171835)，環(huán)狀六肽衍生物(日本專利公開昭61-191698，EP-A 0190946)、雙環(huán)肽衍生物(藥物化學雜志，36卷，3265-3273，1993)等已有報道。本發(fā)明涉及含具有極好的促黃體生成激素釋放激素(LH-RH)受體拮抗劑作用的環(huán)五肽或其鹽的LH-RH受體拮抗劑和新的具有極好的LH-RH受體拮抗作用的環(huán)五肽或其鹽。
考慮到上述情況，本發(fā)明人致力研究獲得可用作LH-RH拮抗劑藥物的化合物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)下式(I)的環(huán)五肽或其鹽顯示出極好的LH-RH拮抗劑作用。基于這一發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明者進行了進一步的研究，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明涉及(1)一種LH-RH受體拮抗劑組合物，含有式(I)的環(huán)五肽或其鹽環(huán)(-A1-A2-A3-A4-A5-)(I)其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表α-氨基酸殘基。
(2)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表式-NH-CHX-CO-的基團，其中X表示(1)-(CH2)m-R，其中m表示0-10的整數(shù)，且R表示氫原子、任意取代的羥基、任意取代的氨基、任意取代的巰基或有機殘基，或者(2)-(CH2)n-NH-C(＝NH)-NH-R′，其中n表示1-10的整數(shù)，且R′表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；?。
(3)根據(jù)上述(2)的組合物，其中有機殘基R是任意取代的烷基，任意取代的芳基，任意取代的雜環(huán)基，?；蛘啧セ蝓０坊聂然?。
(4)根據(jù)上述(2)的組合物，其中A1是式-NH-CHX1-CO-的基團，其中X1表示(1)-(CH2)m1-R1，其中m1表示0-10的整數(shù)，且R1表示氫原子、任意取代的氨基、任意取代的烷基、任意取代的芳基或任意取代的雜環(huán)基，或者(2)-(CH2)n1-NH-C(＝NH)-NH-R2，其中n1表示1-5的整數(shù)，且R2表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；?。
(5)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A1是α-氨基酸殘基，選自Phe，Gly，Ala，Arg，Lys，Tyr，Leu和它們的衍生物。
(6)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A1是α-氨基酸殘基，選自Phe，(p-Cl)Phe，(p-F)Phe，Phg，Ala，Thg(2)，Arg，Lys，Tyr，Leu，Arg(Tos)和Lys(異丙基)。
(7)根據(jù)上述(2)的組合物，其中A2是式-NH-CHX2-CO-的基團，其中X2表示(1)-(CH2)m2-R3，其中m2表示0-10的整數(shù)，且R3表示任意取代的氨基、任意取代的雜環(huán)基或酰基，或者(2)-(CH2)n2-NH-C(＝NH)-NH-R4，其中n2表示1-5的整數(shù)，且R4表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；?。
(8)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A2是α-氨基酸殘基，選自Arg，Lys，Trp，Glu和它們的衍生物。
(9)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A2是α-氨基酸殘基，選自Arg，Arg(Mtr)，Arg(Tos)，Lys，Lys(SO2Nap(1))，Lys(SO2Nap(2))，Lys(COPh)，Lys(COCH2Ph)，Trp，Glu，Glu(NH-CH2CH2-Ph)，Glu(NH-CH2-Ph)，Glu(NH-CH-Ph2)，Glu(NH-CH2-Nap(1))，Glu(Php)，Glu(Bzlp)，Glu((2)-PyP)，Glu(2-MeOPhp)，Glu(4-MeOPhp)，Lys(CO-(CH2)3-Ph)，Lys(CO-(CH2)5-Ph)和Lys(Ac)。
(10)根據(jù)上述(2)的組合物，其中A3是式-NH-CHX3-CO-的基團，其中X3表示-(CH2)m3-R8，其中m3表示0-10的整數(shù)，且R8表示任意取代的芳基、任意取代的氨基、任意取代的雜環(huán)基或?；?。
(11)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A3是α-氨基酸殘基，選自Phe，Ala，Tyr，Lys，Asp，Trp和它們的衍生物。
(12)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A3是α-氨基酸殘基，選自Phe，Nal，(p-Cl)Phe，(p-F)Phe，Tyr，Lys(CO-Ph)，Lys(CO-Nap(1))，Asp(NH-CH2-Ph)，Trp和Lys(SO2Nap(1))。
(13)根據(jù)上述(2)的組合物，其中A4是式-NH-CHX4-CO-的基團，其中X4表示(1)-(CH2)m4-R11，其中m4表示0-10的整數(shù)，且R11表示氫原子、任意取代的羥基、任意取代的氨基、任意取代的烷基、任意取代的芳基或任意取代的雜環(huán)基，或者(2)-(CH2)n4-NH-C(＝NH)-NH-R12，其中n4表示1-5的整數(shù)，且R12表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺酰基。
(14)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A4是α-氨基酸殘基，選自Ala，Leu，Phe，Trp，Ser，Arg，Lys，Tyr和它們的衍生物。
(15)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A4是α-氨基酸殘基，選自Ala，Leu，Phe，Trp，Ser，Arg，Lys(Nic)和Tyr。
(16)根據(jù)上述(2)的組合物，其中A5是式-NH-CHX5-CO-的基團，其中X5表示(1)-(CH2)m5-R14，其中m5表示0-10的整數(shù)，且R14表示任意取代的芳基、任意取代的雜環(huán)基、任意取代的烷基或者任意取代的氨基。
(17)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A5是α-氨基酸殘基，選自Trp，Phe，Leu，Lys和它們的衍生物。
(18)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A5是α-氨基酸殘基，選自Trp，Phe，Leu和Lys(SO2Nap(1))。
(19)根據(jù)上述(1)的組合物，其中α-氨基酸殘基是L-或D-構(gòu)型的。
(20)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A1、A3和A5獨立代表的是L-構(gòu)型的，且A4是D-構(gòu)型的。
(21)根據(jù)上述(1)的組合物，其中A1、A3和A5獨立代表的是D-構(gòu)型的，且A4是L-構(gòu)型的。
(22)根據(jù)上述(1)的組合物，它是預防治療性激素依賴性疾病的藥物。
(23)根據(jù)上述(22)的組合物，其中性激素依賴性疾病是性激素依賴性癌癥。
(24)根據(jù)上述(23)的組合物，其中性激素依賴性癌癥是前列腺癌、子宮癌、乳腺癌或垂體腫瘤。
(25)根據(jù)上述(22)的組合物，其中性激素依賴性疾病是前列腺肥大、子宮內(nèi)膜異位、子宮肌瘤或性早熟。
(26)根據(jù)上述(22)的組合物，它是妊娠調(diào)節(jié)劑。
(27)根據(jù)上述(22)的組合物，它是月經(jīng)周期調(diào)節(jié)劑。
(28)根據(jù)上述(26)的妊娠調(diào)節(jié)劑，它用于避孕。
(29)式(II)的環(huán)五肽或其鹽環(huán)(-A1′-A2′-A3′-A4′-A5′-)(II)其中A1′代表Arg或其衍生物，且A2′、A3′、A4′和A5′獨立地表示除Gly、Pro和酸性氨基酸殘基以外的氨基酸殘基。
(30)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽，其中式(II)化合物至少包含Arg，Lys，Trp和Leu，其中Arg，Lys，Trp或Leu可以是其衍生物。
(31)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽，其中式(II)化合物至少包含Arg，Phe和Ala，其中Arg，Phe或Ala可以是其衍生物。
(32)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽，其中Arg的衍生物是Arg(Mtr)或Arg(Tos)。
(33)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽，其中A2′-A3′，A3′-A4′和A4′-A5′的任何一個是Trp-Leu或Ala-Trp。
(34)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽，其中A1′、A2′、A3′、A4′和A5′獨立地是L-構(gòu)型或D-構(gòu)型的。
(35)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽，其中A1′和A3′是L-構(gòu)型的，且A2′和A4′是D-構(gòu)型的。
(36)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽，其中A2′、A4′和A5′是L-構(gòu)型的，且A3′是D-構(gòu)型的。
(37)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽或其鹽，它包含Arg，Lys，Tyr，Trp和Leu，其中Arg，Lys，Tyr，Trp或Leu可以是其衍生物。
(38)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽或其鹽，它包含Arg，Glu，Lys，Trp和Leu，其中Arg，Glu，Lys，Trp或Leu可以是其衍生物。
(39)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽或其鹽，它包含Gly，Arg，Phe，Ala和Trp，其中Gly，Arg，Phe，Ala或Trp可以是其衍生物。
(40)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽或其鹽，它包含Ala，Arg，Phe，Ala和Trp，其中Ala，Arg，Phe，Ala或Trp可以是其衍生物。
(41)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽或其鹽，它包含Gly，Arg，Phe，Ala和Phe，其中Gly，Arg，Phe，Ala或Phe可以是其衍生物。
(42)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽或其鹽，它包含Arg，Phe，Phe，Trp和Ala，其中Arg，Phe，Phe，Trp或Ala可以是其衍生物。
(43)根據(jù)上述(29)的環(huán)五肽或其鹽，它是環(huán)(-Arg-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)，環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(CONap(1))-D-Trp-Leu-)，環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)，環(huán)(-Ala-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)，環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Phe-)或環(huán)(-Phg-D-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)。
(44)一種在需拮抗LH-RH的哺乳動物中拮抗LH-RH的方法，包括給患因LH-RH起源的疾病的哺乳動物服用有效量的式(I)環(huán)五肽或其鹽環(huán)(-A1-A2-A3-A4-A5-)(I)其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表α-氨基酸殘基。
(45)式(I)的環(huán)五肽或其鹽在制備LH-RH受體拮抗劑組合物中的用途環(huán)(-A1-A2-A3-A4-A5-)(I)其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表α-氨基酸殘基。
(46)式(I)的環(huán)五肽或其鹽在制備預防或治療性激素依賴性疾病的藥物中的用途環(huán)(-A1-A2-A3-A4-A5-)(I)其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表α-氨基酸殘基。[實現(xiàn)本發(fā)明的最佳方式]具體地說，本發(fā)明涉及含有式(I)環(huán)五肽或其鹽的LH-RH受體拮抗劑環(huán)(-A1-A2-A3-A4-A5-)(1)其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表α-氨基酸殘基。
A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表-NH-CHX-CO-的α-氨基酸殘基(其中X優(yōu)選表示-(CH2)m-R，其中m表示0-10的整數(shù)，且R表示氫原子、任意取代的羥基、任意取代的氨基、任意取代的巰基或有機殘基)或者-(CH2)n-NH-C(＝NH)-NH-R′(其中n表示1-10的整數(shù)，且R′表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；?。
關(guān)于R和R′，取代的羥基R包括(1)酰氧基，如C1-6鏈烷羰氧基(例如甲酰氧基、乙酸基或丙酸基)，C4-9脂族環(huán)羰氧基(例如環(huán)戊烷羰氧基或環(huán)己烷羰氧基)，C7-15芳基羰氧基(例如苯甲酰氧基和4-甲基苯甲酰氧基)或C8-18芳烷基羰氧基(例如苯基乙酰氧基、2-苯基丙酰氧基、3-苯基丙酰氧基或二苯基乙酰氧基)，芳香雜環(huán)-烷基羰氧基(例如吲哚-2-基乙酰氧基或吲哚-3-基乙酰氧基)；(2)C1-6烷氧基(例如甲基醚、乙基醚、正丙基醚或叔丁基醚)；(3)C3-8環(huán)烷氧基(例如環(huán)戊氧基或環(huán)己氧基)；(4)C6-14芳氧基(例如苯氧基或4-甲基苯氧基)；和(5)C7-15芳烷氧基(例如芐氧基、苯乙氧基或二苯基甲氧基)。
取代的氨基R可以是任何單取代的氨基和二取代的氨基。
取代的氨基包括單或二C1-6烷氨基(例如甲氨基、二甲氨基、乙氨基、二乙氨基、N-甲基-N-乙氨基、正丙氨基、異丙氨基、叔丁氨基或N-乙基-N-叔丁氨基)，C3-8環(huán)烷氨基(例如N-環(huán)戊氨基或N-環(huán)己氨基)，C6-14芳氨基(例如N-苯氨基或N-(4-甲苯基)氨基，N-1-萘氨基、N-2-萘氨基)，C7-15芳烷氨基(例如N-芐氨基、N-苯乙氨基、N-(4-氯芐基)氨基、N-(2-甲基芐基)氨基、N-(3-甲基芐基)氨基、N-(4-甲基芐基)氨基、N-(2-甲氧芐基)氨基、N-(3-甲氧芐基)氨基或N-(4-甲氧芐基)氨基)，N-C1-6烷基-N-C6-14芳氨基(例如N-甲基-N-苯氨基)，芳香雜環(huán)-C1-6烷氨基(例如2-呋喃甲氨基、3-呋喃甲氨基、2-噻吩甲氨基、3-噻吩甲氨基、吲哚-2-基甲氨基或吲哚-3-基甲氨基)，-NHSO2Y，其中Y是任意取代的芳香基團，和酰氨基NH-CO-(CH2)n5-R15，其中n5是0-10的整數(shù)，R15是任意取代的芳基、烷基或任意取代的雜環(huán)基團。
上述芳香基團Y優(yōu)選是芳香烴基。芳香烴基優(yōu)選含6-14個碳原子并優(yōu)選包括苯基和萘基。芳基可任意地被1-3個取代基取代。取代基是例如鹵原子(如氟、氯或溴)，羥基，C1-6烷基(如甲基、乙基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基或己氧基)，羧基或C1-6烷羰基(如甲酰基、乙?；蚣乎；?。
R15表示的任意取代的芳基中的芳基含6-14個碳原子并優(yōu)選包括苯基和萘基。芳基可以任意地被1-3個取代基取代。取代基是例如鹵原子(如氟、氯或溴)，羥基，C1-6烷基(如甲基、乙基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基)，羧基或C1-6烷羰基(如甲?；?、乙?；?。
R15表示的烷基是C1-6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、(1-甲基)丙基、叔丁基、正戊基、(2-甲基)丁基、(3-甲基)丁基、新戊基、正己基、(2，2-二甲基)丁基或(3，3-二甲基)丁基。
R15表示的任意取代的雜環(huán)基中的雜環(huán)基優(yōu)選是含1-4個雜原子如氧、硫和/或氮的五元或六元雜環(huán)基(例如吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑烷基、哌啶基、吡唑基、吡唑烷基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哌嗪基、噠嗪基、三唑基、四唑基、二氫三嗪基、吡啶基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、嗎啉基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噻唑啉基、噻二唑基、或三唑烷基)，或這些基團的任一個與其它環(huán)如苯環(huán)等稠合的稠合雜環(huán)基(如吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并吡啶基、四唑并噠嗪基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基或苯并噻二唑基)。雜環(huán)基在碳和/或氮原子上可任意地有1-3個取代基。碳原子上的取代基包括C1-6烷基(如甲基、乙基、正丙基或正丁基)，鹵原子(如氟、氯、溴或碘)，羥基，羧基，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基、正丙氧基或正丁氧基)，C1-6鏈烷酰基(如甲?；蛞阴；?。氮原子上的取代基包括C1-6烷基(如甲基、乙基、正丙基或正丁基)，C1-6烷羰基(如甲?；?、乙酰基等)，羥基-C1-6烷基(如羥甲基或2-羥乙基)。
取代的巰基R包括(1)酰硫基如C1-6鏈烷酰硫基(例如甲酰硫基、乙酰硫基或丙酰硫基)，C4-9脂環(huán)羰硫基(例如環(huán)戊烷羰硫基或環(huán)己烷羰硫基)，C7-15芳基羰硫基(例如苯甲酰硫基或4-甲基苯甲酰硫基)和C8-16芳烷羰硫基(例如苯乙酰硫基、2-苯丙酰硫基、3-苯丙酰硫基或二苯基乙酰硫基)；(2)C1-6烷硫基(例如甲硫基、乙硫基、正丙硫基或叔丁硫基)；(3)C3-8環(huán)烷硫基(例如環(huán)戊硫基或環(huán)己硫基)；(4)C6-12芳硫基(例如苯硫基或4-甲基苯硫基)；和(5)C7-15芳烷硫基(例如芐硫基、苯乙硫基或二苯基甲硫基)。
有機殘基R可以是分子中含碳原子的取代基并且在碳原子上有化學鍵。特別優(yōu)選的是任意取代的烷基，任意取代的芳基，任意取代的雜環(huán)基，酰基或者酯化或酰胺化的羧基。
任意取代的烷基R中的烷基優(yōu)選是C1-6烷基，包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、(1-甲基)丙基、叔丁基、正戊基、(2-甲基)丁基、(3-甲基)丁基、新戊基、正己基、(2，2-二甲基)丁基和(3，3-二甲基)丁基。烷基的取代基包括羥基，氨基，羧基，C1-6烷氨基(例如甲氨基、乙氨基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基)和鹵原子(如氟、氯或溴)。
任意取代的芳基R中的芳基含6-14個碳原子并且優(yōu)選是苯基和萘基。芳基可任意地被1-3個取代基取代。取代基是例如鹵原子(如氟、氯或溴)，羥基，C1-6烷基(如甲基、乙基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基)，羧基，C1-6烷基羰基(如甲?；?、乙?；?和C1-6烷氧羰基(如乙酰氧基)。
任意取代的雜環(huán)基R中的雜環(huán)基優(yōu)選是含1-4個O、S和/或N雜原子的五元或六元雜環(huán)基(例如吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑烷基、哌啶基、吡唑基、吡唑烷基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哌嗪基、噠嗪基、三唑基、四唑基、二氫三嗪基、吡啶基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、嗎啉基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噻唑啉基、噻二唑基或三唑烷基)，或者或這些基團的任一個與其它環(huán)如苯環(huán)等稠合的稠合雜環(huán)基(如吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并吡啶基、四唑并噠嗪基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基或苯并噻二唑基)。雜環(huán)基在碳和/或氮原子上可任意地有1-3個取代基。碳原子上的取代基包括C1-6烷基(如甲基、乙基、正丙基或正丁基)，鹵原子(如氟、氯、溴或碘)，羥基，羧基，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基、正丙氧基或正丁氧基)，C1-6烷基羰基(如甲?；?、乙?；?等。氮原子上的取代基包括C1-6烷基(如甲基、乙基、正丙基或正丁基)，C1-6烷基羰基(如甲酰基或乙?；?，羥基-C1-6烷基(如羥甲基或2-羥乙基)。
?；鵕包括有機酸衍生的?；ㄓ袡C羧酸、有機磺酸、有機磷酸衍生的?；?。優(yōu)選的是C1-13?；?例如C1-10鏈烷?；?，(如甲酰基、乙?；?、丙?；蚨□；?，C3-10鏈烯?；?如丙烯?；?、2-丁烯?；?、3-丙烯?；?，C3-10炔酰基(如丙炔?；?、2-丁炔酰基或3-丁炔?；?，C7-13芳?；?如苯甲?；?、1-萘甲酰基或2-萘甲?；?或下文提到的由-CO-R5表示的?；?。
羧基的酰胺化羧基包括氨基甲酰基(-CONH2)，N-C1-6烷基氨基甲酰基(如N-甲氨基甲?；-乙氨基甲?；?、N-(正丙基)氨基甲?；蚇-叔丁基氨基甲?；?，N-C3-8環(huán)烷基氨基甲?；?如N-環(huán)戊基氨基甲酰基和N-環(huán)己基氨基甲?；?，N-C6-12芳基氨基甲?；?如N-苯基氨基甲?；蚇-(4-甲苯基)氨基甲?；?，N-C7-15芳烷基氨基甲?；?如N-芐基氨基甲?；-苯乙基氨基甲?；-(1，2-二苯乙基)氨基甲?；?，N-(芳香雜環(huán)-C1-6烷基)氨基甲?；?如N[2-(吲哚-2-基)乙基]氨基甲?；蚇-[2-(吲哚-3-基)乙基]氨基甲酰基)，哌啶氨基甲?；?，哌嗪氨基甲酰基，N4-C1-6烷基哌嗪氨基甲?；?如N4-甲基哌嗪氨基甲酰基和N4-乙基哌嗪氨基甲?；?，N4-C3-8環(huán)烷基哌嗪氨基甲?；?如N4-環(huán)戊基哌嗪氨基甲酰基和N4-環(huán)己基哌嗪氨基甲?；?，N4-(五-七元雜環(huán))哌嗪氨基甲?；?如N4-吡啶基哌嗪氨基甲?；?、N4-呋喃基哌嗪氨基甲?；?、N4-噻吩基哌嗪氨基甲?；?，N4-C6-12芳基哌嗪氨基甲?；?如N4-苯基哌嗪氨基甲酰基和N4-(4-甲苯基)哌嗪氨基甲?；?，N4-C7-15芳烷基哌嗪氨基甲?；?如N4-芐基哌嗪氨基甲?；4-苯乙基哌嗪氨基甲?；?、N4-(1，2-二苯乙基)哌嗪氨基甲?；?，N4-(芳香雜環(huán)-C1-6烷基)哌嗪氨基甲?；?如N4-[2-(吲哚-2-基)乙基]哌嗪氨基甲?；蚇4-[2-(吲哚-3-基)乙基]哌嗪氨基甲?；?，N4-C1-6脂族?；哙喊被柞；?如N4-乙酰基哌嗪氨基甲?；蚇4-丙?；哙喊被柞；?，N4-C4-9脂環(huán)?；哙喊被柞；?如N4-環(huán)戊?；哙喊被柞；蚇4-環(huán)己酰哌嗪氨基甲?；?，N4-C7-15芳?；哙喊被柞；?如N4-苯甲?；哙喊被柞；蚇4-(4-甲基苯甲?；?哌嗪氨基甲?；?，N4-C8-16芳烷?；哙喊被柞；?如N4-苯乙?；哙喊被柞；4-(2-苯基丙酰)哌嗪氨基甲?；4-(3-苯基丙酰)哌嗪氨基甲?；?、N4-二苯基乙?；哙喊被柞；?，N4-(1-萘乙?；?哌嗪氨基甲?；蚇4-(2-萘乙?；?哌嗪氨基甲酰基)，N4-(芳香雜環(huán)-羰基)哌嗪氨基甲?；?如N4-(吲哚-2-基羰基)哌嗪氨基甲酰基和N4-(吲哚-3-基羰基)哌嗪氨基甲?；?，和N4-(芳香雜環(huán)-烷基羰基)哌嗪氨基甲?；?如N4-(吲哚-2-基乙酰基)哌嗪氨基甲?；蚇4-(吲哚-3-基乙酰基)哌嗪氨基甲?；?。
酯化的羧基是C1-6烷氧羰基(如甲氧羰基、乙氧羰基、正丙氧羰基)，C3-8環(huán)烷氧羰基(如環(huán)戊氧羰基或環(huán)己氧羰基)，和C7-15芳烷氧羰基(如芐氧羰基、苯乙氧羰基、1-苯基乙氧羰基或二苯基甲氧羰基)。
上述酰胺化羧基形式還包括與α-氨基酸形成的酰氨基和與寡肽(如二肽、三肽和四肽)形成的酰氨基。
任意取代的苯磺?；鵕′的取代基可在苯環(huán)的任何適宜位置上。取代基包括例如鹵原子(如氟、氯或溴)，被1-3個鹵原子(如氟、氯或溴)任意取代的C1-8烷基(如甲基、乙基、丙基、異丙基或新戊基)，被1-3個鹵原子(如氟、氯或溴)任意取代的C1-8烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基或異丁氧基)，被1-3個鹵原子(如氟、氯、溴)任意取代的含1-8個碳原子的任意鹵代的烷硫基(如甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基、丁硫基、異丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基、戊硫基、異戊硫基或新戊硫基)，C1-6酰氧基(如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基等)和羥基。特別優(yōu)選的是C1-8烷基或C1-8烷氧基。苯磺?；梢员簧鲜龆x的1-5個取代基取代。當該基團被兩個或兩個以上的取代基取代時，這些取代基可以是相同的或不同的。
任意取代的苯磺?；膬?yōu)選實例包括甲苯磺?；瑢籽醣交酋；?，五甲基苯磺酰基和4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基。
式(I)中A1代表的α-氨基酸殘基優(yōu)選由-NH-CHX1-CO-表示。
在此，X1優(yōu)選是(1)-(CH2)m1-R1，其中m1表示0-10的整數(shù)，且R1表示氫原子、任意取代的氨基、任意取代的烷基、任意取代的芳基或任意取代的雜環(huán)基，或者(2)-(CH2)n1-NH-C(＝NH)-NH-R2，其中n1表示1-5的整數(shù)，且R2表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺酰基。m1是0-10的整數(shù)，優(yōu)選是0-5的整數(shù)。n1是1-5的整數(shù)，優(yōu)選是3。
R1表示的任意取代的氨基中的取代氨基含義與取代的氨基R中的定義相同。取代的氨基優(yōu)選是單或二-C1-6烷氨基，如甲氨基、二甲氨基、乙氨基、二乙氨基、N-甲基-N-乙氨基、正丙氨基、異丙氨基、正丁氨基、異丁氨基、(1-甲基)丙氨基、叔丁氨基、N-乙基-N-叔丁氨基、正戊氨基、(2-甲基)丁氨基、(3-甲基)丁氨基、新戊氨基、正己氨基、(2，2-二甲基)丁氨基或(3，3-二甲基)丁氨基。在上述任意取代的氨基中，特別優(yōu)選的是氨基和異丙氨基。
R1表示的任意取代的烷基含義與任意取代的烷基R中的定義相同。特別優(yōu)選的是異丙基。
R1表示的任意取代的芳基中的芳基含義與芳基R中的定義相同。芳基R1的取代基優(yōu)選是鹵原子或羥基。優(yōu)選的取代芳基的實例包括苯基，4-氟苯基，4-氯苯基，4-溴苯基，4-羥苯基，4-甲氧苯基，4-甲苯基，1-萘基和2-萘基等。優(yōu)選的是苯基，4-氟苯基，4-氯苯基和4-羥苯基。
R1表示的任意取代的雜環(huán)基含義與任意取代的雜環(huán)基R中的定義相同。特別優(yōu)選的是噻吩基。
R2的含義與R′中定義的相同。R2特別優(yōu)選是氫原子或?qū)妆交酋；?甲苯磺?；?。
A1優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自Phe，Gly，Ala，Arg，Lys，Tyr，Leu或它們的衍生物。更具體地說，A1優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自Phe，(p-Cl)Phe，(p-F)Phe，Phg，Ala，Thg(2)，Arg，Lys，Tyr，Leu，Arg(Tos)，Lys(異丙基)。
式(I)中A2表示的氨基酸殘基優(yōu)選以-NH-CHX2-CO-表示。
在此，X2優(yōu)選是(1)-(CH2)m2-R3，其中m2表示0-10的整數(shù)，且R3表示任意取代的氨基、任意取代的雜環(huán)基或酰基(-CO-R5)，或者(2)-(CH2)n2-NH-C(＝NH)-NH-R4，其中n2表示1-5的整數(shù)；且R4表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；2是0-10的整數(shù)，優(yōu)選是0-5的整數(shù)。n2是1-5的整數(shù)，優(yōu)選是3。
R3表示的任意取代的氨基中的取代氨基可以是單取代的氨基和二取代的氨基。取代的氨基包括單或二-C1-6烷氨基(如甲氨基、二甲氨基、乙氨基、二乙氨基、N-甲基-N-乙氨基和叔丁氨基、N-乙基-N-叔丁氨基)，C3-8環(huán)烷氨基(如N-環(huán)戊氨基或N-環(huán)己氨基)，C6-14芳氨基(如N-苯氨基或N-(4-甲苯基)氨基、N-1-萘氨基、N-2-萘氨基)，C7-20芳烷氨基(如N-芐氨基、N-苯乙氨基、N-(4-氯芐基)氨基、N-(2-甲芐基)氨基、N-(3-甲芐基)氨基、N-(4-甲芐基)氨基、N-(2-甲氧芐基)氨基、N-(3-甲氧芐基)氨基、N-(4-甲氧芐基)氨基)，N-C16烷基-N-C6-14芳氨基(如N-甲基-N-苯氨基)，芳香雜環(huán)-C1-6烷氨基(如2-呋喃甲氨基、3-呋喃甲氨基、2-噻吩甲氨基、3-噻吩甲氨基、吲哚-2-基甲氨基和吲哚-3-基甲氨基)，-NH-CO-(CH2)n3-R7的酰氨基或-NHSO2Y1，其中Y1是任意取代的芳基。優(yōu)選是-NH-CO(CH2)n3-R7或-NHSO2Y1。
n3代表0或者1或更高的整數(shù)，優(yōu)選0或者1-10的整數(shù)，更優(yōu)選0或者1-7的整數(shù)。
R7優(yōu)選是任意取代的芳基或烷基。
R7表示的任意取代的芳基中的芳基優(yōu)選是芳香烴基。芳香烴基含6-14個碳原子，優(yōu)選是苯基或萘基。芳基可以任意被1-3個取代基取代。取代基包括鹵原子(如氟、氯或溴)，羥基，C1-6烷基(如甲基、乙基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基)，羧基或C1-6烷羰基(如甲酰基、乙?；?。任意取代的芳基的實例包括苯基，4-氟苯基，4-氯苯基， 4-溴苯基，4-羥苯基，4-甲氧苯基，4-甲苯基，1-萘基和2-萘基等。特別優(yōu)選的是苯基和萘基，如1-萘基和2-萘基。
R7表示的烷基是C1-6烷基，包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、異丁基、(1-甲基)丙基、叔丁基、(2-甲基)丁基、(3-甲基)丁基、新戊基、(2，2-二甲基)丁基或(3，3-二甲基)丁基。優(yōu)選的是甲基。
Y1優(yōu)選是芳香烴基。芳香烴基優(yōu)選含6-14個碳原子，優(yōu)選包括苯基和萘基。芳基可以被1-3個取代基任意地取代。這些取代基是例如鹵原子(如氟、氯或溴)，羥基，C1-6烷基(如甲基、乙基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基)，羧基，C1-6烷羰基(如甲酰基、乙?；?和C1-6烷氧羰基(如乙氧羰基)。任意取代的芳基Y1的實例包括苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-羥苯基、4-甲氧苯基、4-甲苯基、1-萘基和2-萘基。特別優(yōu)選的是萘基，如1-萘基和2-萘基。
R3表示的任意取代的雜環(huán)基含義與任意取代的雜環(huán)基R的定義相同。優(yōu)選的是吲哚基，尤其是吲哚-3-基。
R3表示的?；?-CO-R5)中的R5優(yōu)選是任意取代的雜環(huán)基，或任意取代的氨基。任意取代的雜環(huán)基R5優(yōu)選是含1-4個O、S和/或N的雜原子的五元或六元雜環(huán)基(如吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑烷基、哌啶基、吡唑基、吡唑烷基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哌嗪基、噠嗪基、三唑基、四唑基、二氫三嗪基、吡啶基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、嗎啉基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噻唑啉基、噻二唑基或三唑烷基)，或者這些基團的任一個與其它環(huán)如苯環(huán)等稠合的稠合雜環(huán)基(如吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并吡啶基、四唑并噠嗪基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基或苯并噻二唑基)。尤其優(yōu)選的是哌嗪基。這些雜環(huán)基可任意地含有1-3個取代基，它們優(yōu)選是任意取代的芳基、任意取代的C7-15芳烷基和任意取代的雜環(huán)基。任意取代的芳基中的芳基含6-14個碳原子并優(yōu)選包括苯基和萘基。作為雜環(huán)基R5的取代基的芳基可任意地被1-3個取代基取代。這些取代基是例如鹵原子(如氟、氯或溴)，羥基，C1-6烷基(如甲基、乙基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基)，羧基，C1-6烷氧羰基(如甲?；?、乙酰基)。任意取代的芳基的實例包括苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-羥苯基、4-甲氧苯基、4-甲苯基、2-甲氧苯基、4-甲氧苯基、1-萘基和2-萘基等。優(yōu)選的是苯基、2-甲氧苯基和4-甲氧苯基。
作為雜環(huán)基R5取代基的任意取代的C7-15芳烷基的實例包括芐基、苯乙基、4-氯芐基、2-甲基芐基、3-甲基芐基、4-甲氧芐基、二苯基甲基、三苯甲基、1-萘甲基、2-萘甲基。優(yōu)選的是芐基。
作為雜環(huán)基R5的取代基的任意取代的雜環(huán)基中的雜環(huán)基包括含1-4個O、S和/或N的雜原子的五元或六元雜環(huán)基(如吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑烷基、哌啶基、吡唑基、吡唑烷基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哌嗪基、噠嗪基、三唑基、四唑基、二氫三嗪基、吡啶基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、嗎啉基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、噻唑啉基、噻二唑基或三唑烷基)，或者這些基團的任一個與其它環(huán)如苯環(huán)等稠合的稠合雜環(huán)基(如吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并吡啶基、四唑并噠嗪基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基或苯并噻二唑基)。優(yōu)選的是吡啶基。這些雜環(huán)基可任意地在碳原子和/或氮原子上有1-3個取代基。碳原子上的取代基包括C1-6烷基(如甲基、乙基、正丙基或正丁基)，鹵原子(如氟、氯、溴或碘)，羥基，羧基，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基、正丙氧基或正丁氧基)，C1-6烷羰基(如甲?；⒁阴；?等。氮原子上的取代基包括C1-6烷基(如甲基、乙基、正丙基或正丁基)，C1-6烷羰基(如甲?；⒁阴；?，羥基-C1-6烷基(如羥甲基或2-羥乙基)。
R5表示的取代的氨基可以是任何單取代的氨基和二取代的氨基。
取代的氨基包括單或二C1-6烷氨基(例如甲氨基、二甲氨基、乙氨基、二乙氨基、N-甲基-N-乙氨基、叔丁氨基或N-乙基-N-叔丁氨基)，C3-8環(huán)烷氨基(例如N-環(huán)戊氨基或N-環(huán)己氨基)，C6-14芳氨基(例如N-苯氨基、N-(4-甲苯基)氨基，N-1-萘氨基、N-2-萘氨基)，C7-20芳烷氨基(例如N-芐氨基、N-苯乙氨基、N-(4-氯芐基)氨基、N-(2-甲基芐基)氨基、N-(3-甲基芐基)氨基、N-(4-甲基芐基)氨基、N-(2-甲氧芐基)氨基、N-(3-甲氧芐基)氨基或N-(4-甲氧芐基)氨基，二苯基甲氨基、三苯基甲氨基、1-萘甲氨基或2-萘甲氨基)，N-C1-6烷基-N-C6-14芳氨基(例如N-甲基-N-苯氨基)，芳香雜環(huán)-C1-6烷氨基(例如2-呋喃甲氨基、3-呋喃甲氨基、2-噻吩甲氨基、3-噻吩甲氨基、吲哚-2-基甲氨基或吲哚-3-基甲氨基)。優(yōu)選的是單取代的氨基-NHR6。
R6優(yōu)選是C6-14芳基(如苯基、萘基)或C7-20芳烷基(如芐基、苯乙基、4-氯芐基、2-甲基芐基、3-甲基芐基、4-甲基芐基、2-甲氧芐基、3-甲氧芐基、4-甲氧芐基、二苯甲基、三苯甲基、1-萘甲基、2-萘甲基)。
R4的含義與R′的相同。R4優(yōu)選是氫原子，對甲苯磺酰基(甲苯磺?；?或4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺?；?。
A2優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自Arg，Lys，Trp，GLu或它們的衍生物。具體地說，A2優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自Arg，Arg(Mtr)，Arg(Tos)，Lys，Lys(SO2Nap(1))，Lys(SO2Nap(2))，Lys(COPh)，Lys(COCH2Ph)，Trp，Glu，Glu(NH-CH2CH2-Ph)，Glu(NH-CH2-Ph)，Glu(NH-CH-Ph2)，Glu(NH-CH2-Nap(1))，GLu(Php)，GLu(Bzlp)，GLu((2)-Pyp)，GLu(2-MeOPhp)，GLu(4-MeOPhp)，Lys(CO-(CH2)3-Ph)，Lys(CO-(CH2)5-Ph)和Lys(Ac)。
式(I)中A3表示的α-氨基酸殘基優(yōu)選以-NH-CHX3-CO-表示。
在此，X3優(yōu)選是-(CH2)m3-R8基，其中m5是0-10的整數(shù)并且優(yōu)選是0-5的整數(shù)。
R8優(yōu)選是任意取代的芳基、任意取代的氨基、任意取代的雜環(huán)基或?；?br> R8表示的任意取代的芳基中的芳基含義與芳基R的定義相同。任意取代的芳基包括例如苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-羥基苯基、4-甲氧苯基、4-甲苯基、1-萘基或2-萘基。尤其優(yōu)選是苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-羥基苯基、1-萘基和2-萘基。
R8表示的任意取代的氨基中的取代氨基包括單或二C1-6烷氨基(例如甲氨基、二甲氨基、乙氨基、二乙氨基、N-甲基-N-乙氨基、N-叔丁氨基或N-乙基-N-叔丁氨基)，C3-8環(huán)烷氨基(例如N-環(huán)戊氨基或N-環(huán)己氨基)，C6-14芳氨基(例如N-苯氨基或N-(4-甲苯基)氨基，N-1-萘氨基、N-2-萘氨基)，C7-15芳烷氨基(例如N-芐氨基、N-苯乙氨基、N-(4-氯芐基)氨基、N-(2-甲基芐基)氨基、N-(3-甲基芐基)氨基、N-(4-甲基芐基)氨基、N-(2-甲氧芐基)氨基、N-(3-甲氧芐基)氨基或N-(4-甲氧芐基)氨基)，芳香雜環(huán)-C1-6烷氨基(例如2-呋喃甲氨基、3-呋喃甲氨基、2-噻吩甲氨基、3-噻吩甲氨基、吲哚-2-基甲氨基或吲哚-3-基甲氨基)，酰氨基-NH-CO-R10和-NHSO2Y2，其中Y2是任意取代的芳基。優(yōu)選是酰氨基-NH-CO-R10或-NHSO2Y2。
R10優(yōu)選是任意取代的芳基或烷基，尤其優(yōu)選是任意取代的芳基。
R10表示的任意取代的芳基，優(yōu)選是芳香烴基。芳香烴基含6-15個碳原子并優(yōu)選是苯基或萘基。芳基可任意地被1-3個取代基取代。取代基是例如鹵原子(如氟、氯、溴)，羥基，C1-6烷基(如甲基、乙基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基或己氧基)，羧基C1-6烷羰基(如甲?；?、乙?；蚣乎；?。任意取代的芳基的實例包括苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-羥基苯基、4-甲氧苯基、4-甲苯基、1-萘基和2-萘基。尤其優(yōu)選是苯基和萘基，如1-萘基或2-萘基。
R10表示的烷基是C1-6烷基，包括例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、(1-甲基)丙基、叔丁基、正戊基、(2-甲基)丁基、(3-甲基)丁基、新戊基、正己基、(2，2-二甲基)丁基或(3，3-二甲基)丁基。
Y2優(yōu)選是任意取代的芳基。芳基含有6-14個碳原子并優(yōu)選是苯基或萘基。芳基可以任意被1-3個取代基取代。取代基是例如鹵原子(如氟、氯、溴)，羥基，C1-6烷基(如甲基、乙基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基)，羧基，C1-6烷羰基(如甲酰基、乙?；?。任意取代的芳基實例包括苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-羥基苯基、4-甲氧苯基、4-甲苯基、1-萘基或2-萘基。尤其優(yōu)選是萘基，如1-萘基或2-萘基。
R8表示的任意取代的雜環(huán)基中的雜環(huán)基含義與任意取代的雜環(huán)基R的定義相同。優(yōu)選的是吲哚基，尤其優(yōu)選是吲哚-3-基。
R8表示的?；x與酰基R的定義相同。優(yōu)選是N-單取代的氨基甲酰基(-CO-NHR9)。
R9優(yōu)選是C1-6烷基(如甲基、乙基、叔丁基)或C7-20芳烷基(如芐基、苯乙基、4-氯芐基、2-甲基芐基、3-甲基芐基、4-甲基芐基、2-甲氧芐基、3-甲氧芐基、4-甲氧芐基、二苯甲基、三苯甲基、1-萘甲基、2-萘甲基)。尤其優(yōu)選是芐基。
A3優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自Phe，Ala，Tyr，Lys，Asp，Trp或它們的衍生物。更具體地說，A3優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自選自Phe，Nal，(p-Cl)Phe，(p-F)Phe，Tyr，Lys(CO-Ph)，Lys(CO-Nap(1))，Asp(NH-CH2-Ph)，Trp和Lys(SO2Nap(1))。
式(I)中A4代表的α-氨基酸殘基優(yōu)選以式-NH-CHX4-CO-表示。
在此，X4優(yōu)選是(1)-(CH2)m4-R11其中m4表示0-10的整數(shù)，且R11表示氫原子、羥基、任意取代的氨基、任意取代的烷基、任意取代的芳基或任意取代的雜環(huán)基，或者(2)-(CH2)n4-NH-C(＝NH)-NH-R12，其中n4表示1-5的整數(shù)，且R12表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；4是0-10的整數(shù)，優(yōu)選是0-5的整數(shù)。n4是1-5的整數(shù)，優(yōu)選是3。
R11表示的任意取代的氨基中的取代氨基含義與取代氨基R的定義相同。取代氨基優(yōu)選是-Nh-CO-R13表示的酰氨基。
R13優(yōu)選是C1-6烷基(如甲基、乙基或異丙基)，任意取代的C6-14芳基(如苯基、萘基)，任意取代的雜環(huán)基。
上述的R13芳基可任意地被1-3個取代基取代。取代基包括C1-6烷基(如甲基、乙基、正丙基或正丁基)，鹵原子(如氟、氯、溴或碘)，羥基，羧基，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基、正丙氧基或正丁氧基)，C1-6鏈烷酰基(如甲?；蛞阴；?。
R13表示的任意取代的雜環(huán)基含義與任意取代的雜環(huán)基R15的定義相同。優(yōu)選是吡啶基。
R11表示的任意取代的烷基與任意取代的烷基R的定義相同。優(yōu)選是異丙基。
R11表示的任意取代的芳基中的芳基與任意取代的芳基R的定義相同。任意取代的芳基R11的實例包括苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-羥基苯基、4-甲氧苯基、4-甲苯基、1-萘基或2-萘基。其中，優(yōu)選苯基和4-羥基苯基。
R11表示的任意取代的雜環(huán)基中的雜環(huán)基與任意取代的雜環(huán)基R的定義相同。優(yōu)選吲哚基，尤其優(yōu)選吲哚-3-基。
R12與R′的定義相同。R12優(yōu)選是氫原子或?qū)妆交酋；?甲苯磺酰基)。
A4優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自Ala，Leu，Phe，Trp，Ser，Arg，Lys，Tyr或它們的衍生物。更具體地說，A4優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自Ala，Leu，Phe，Trp，Ser，Arg，Lys(NiC)，Tyr。
式(I)中A2表示的α-氨基酸殘基優(yōu)選以-NH-CHX5-CO-表示。
在此，X5優(yōu)選是-(CH2)m5-R14基，其中m5表示0-10的整數(shù)，并優(yōu)選是0-5的整數(shù)。
R14優(yōu)選是任意取代的芳基，任意取代的雜環(huán)基，任意取代的烷基或任意取代的氨基。
任意取代的芳基R14的芳基與芳基R的定義相同。任意取代的芳基的實例包括苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-羥基苯基、4-甲氧苯基、4-甲苯基、1-萘基或2-萘基。尤其優(yōu)選苯基。
R14表示的任意取代的雜環(huán)基的雜環(huán)基與任意取代的雜環(huán)基R的定義相同。優(yōu)選的是吲哚基，尤其優(yōu)選是吲哚-3-基。
R14表示的任意取代的烷基與任意取代的烷基R的定義相同。優(yōu)選是異丙基。
取代的氨基R14與取代的氨基R的定義相同。
R14表示的任意取代的氨基優(yōu)選是-NHSO2Y3，其中Y3是任意取代的芳基。芳基Y3優(yōu)選是芳香烴基。芳香烴基含6-14個碳原子并優(yōu)選包括苯基和萘基。芳基可被1-3個取代基取代。取代基是例如鹵原子(如氟、氯、溴)，羥基，C1-6烷基(如甲基、乙基)，C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基或己氧基)，羧基，C1-6烷羰基(如甲?；?、乙?；蚣乎；?。任意取代的芳基的實例包括苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-羥基苯基、4-甲氧苯基、4-甲苯基、1-萘基和2-萘基等。尤其優(yōu)選是萘基，如1-萘基或2-萘基。
A5優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自Trp，Phe，Leu，Lys或它們的衍生物。具體地說，A5優(yōu)選是α-氨基酸殘基，選自Trp，Phe，Leu，Lys(SO2Nap(1))。
式(I)的環(huán)五肽中的所有α-氨基酸殘基是L-構(gòu)型或D-構(gòu)型的。
由其生理活性的觀點考慮，優(yōu)選A1、A3和A5是L-構(gòu)型的，A4是D-構(gòu)型的；或者優(yōu)選A1、A3和A5是D-構(gòu)型的，A4是L-構(gòu)型的。
為表現(xiàn)LH-RH受體拮抗劑活性，本發(fā)明的環(huán)五肽優(yōu)選含有Arg或其衍生物。
在式(I)表示的環(huán)五肽中，式(II)的環(huán)五肽或其鹽環(huán)(-A1′-A2′-A3′-A4′-A5′-)(II)是一種新化合物，其中A1′代表Arg或其衍生物，且A2′、A3′、A4′和A5′獨立地代表除Gly、Pro和酸性氨基酸以外的氨基酸殘基或它們的鹽。
環(huán)五肽優(yōu)選至少含有(1)Arg，Lys，Trp和Leu，其中Arg，Lys，Trp或Leu可以是它們的衍生物，或者(2)Arg，Phe和Ala，其中Arg，Phe或Ala可以是它們的衍生物。
在此，A1′、A2′、A3′、A4′和A5′獨立地是L-構(gòu)型或D-構(gòu)型的。在一實施方案中，A1′和A3′優(yōu)選代表L-構(gòu)型的且A2′和A4′代表D-構(gòu)型的。在另一實施方案中，A2′、A4′和A5′優(yōu)選代表L-構(gòu)型的，A3′代表D-構(gòu)型的。
Arg衍生物優(yōu)選包括在Arg的胍基上有保護基的Arg。
保護基包括例如硝基、甲苯磺?；?TOS)、對甲氧苯磺酰基、均三甲苯磺?；⑽寮谆交酋；?、4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基(Mtr)、芐氧羰基、異冰片基氧羰基或金剛烷氧羰基。
在上述基團中，保護基優(yōu)選硝基、甲苯磺酰基、對甲氧苯磺?；?、均三甲苯磺?；?、五甲基苯磺酰基、4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺?；?，尤其優(yōu)選甲苯磺?；?TOS)、4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺?；?Mtr)。
胍基可以以酸(如苯磺酸、甲苯磺酸、鹽酸和硫酸)的鹽形式被保護。
酸性氨基酸是例如帶酸性基團如羧基、磺酰基或四唑基為側(cè)鏈的氨基酸。這類氨基酸的實例包括谷氨酸、天冬氨酸、磺基丙氨酸、homocysteicacid、β-(5-四唑基)丙氨酸和2-氨基-4-(5-四唑基)丁酸。
環(huán)五肽或其鹽不包含任何酸性氨基酸殘基。但如果是喪失了酸性的氨基酸，則仍可包括于本發(fā)明的環(huán)五肽中。例如Glu或Asp是含酸性(羧基)基團的氨基酸殘基，而酸性基團被取代的Glu(NH-CH2-Ph)、Asp(NH-CH2-Ph)等是非酸性的。因此也可包括這些氨基酸殘基。
A2′-A3′、A3′-A4′和A4′-A5′的任一個優(yōu)選是Trp-Leu或Ala-Trp。
環(huán)五肽或其鹽包括例如包含Arg，Glu，Lys，Trp和Leu或者它們的衍生物的環(huán)五肽，包含Gly，Arg，Phe，Ala和Trp或者它們的衍生物的環(huán)五肽，包含Ala，Arg，Phe，Ala和Trp或者它們的衍生物的環(huán)五肽，包含Gly，Arg，Phe，Ala和Phe或者它們的衍生物的環(huán)五肽或者包含Arg，Phe，Phe，Trp和Ala或者它們的衍生物的環(huán)五肽。
Arg衍生物優(yōu)選是Arg(Mtr)，Arg(Tos)。Lys衍生物優(yōu)選是Lys(異丙基)，Lys(SO2Nap((1))，Lys(SO2Nap(2))，Lys(COPh)，Lys(COCH2Ph)，Lys(CO-(CH2)3-Ph)，Lys(CO-(CH2)5-Ph)，Lys(Ac)，Lys(CO-Nap(1))，Lys(Nic)。Glu衍生物優(yōu)選是Glu(NH-CH2CH2-Ph)，GLu(NH-CH2-Ph)，Glu(NH-CH-Ph2)，Glu(NH-CH2-Nap(1))，Glu(Php)，Glu(Bzlp)，GLu((2)-PYP)，GLu(2-MeOPhp)，6Lu(4-MeOPhp)。Gly衍生物優(yōu)選是Phg，Thg。Phe衍生物優(yōu)選是(p-Cl)Phe，(p-F)Phe。Ala衍生物優(yōu)選是Nal。
例如環(huán)五肽包括實施例中描述的環(huán)五肽。
優(yōu)選的是環(huán)(-Arg-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)，環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(CONap(1))-D-Trp-Leu-)，環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)，環(huán)(-Ala-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)，環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Phe-)，環(huán)(-Phg-D-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)或它們的鹽。
本發(fā)明的環(huán)五肽(I)的鹽(或可藥用鹽)包括例如其金屬鹽(如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽等)，其與堿或堿性化合物成的鹽(如銨鹽、精氨酸鹽等)，其無機酸加成鹽(如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等)，其有機酸加成鹽(如乙酸鹽、丙酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、蘋果酸鹽、草酸鹽等)等。
本文涉及的以IUPAC-IUB生物化學命名委員會定義的氨基酸和肽的縮寫是本領(lǐng)域中常用的那些?？s寫實例如下。
Ala 丙氨酸Leu 亮氨酸Trp 色氨酸Tyr 酪氨酸Phc 苯丙氨酸Glu 谷氨酸Asp 天冬氨酸Phg 苯基甘氨酸(p-Cl)Phe 對氯苯丙氨酸(p-F)Phe對氟苯丙氨酸Thi 2-噻吩基丙氨酸Lys 賴氨酸Arg 精氨酸Nal 2-萘基丙氨酸Thg 噻吩基甘氨酸Thg(2) 2-噻吩基甘氨酸Arg(Tos)Ng-對甲苯磺?；彼酇rg(Mtr)Ng-(4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基)精氨酸Lys(異丙基) Nε-異丙基賴氨酸Lys(SONap(1)) Nε-(1-萘磺?；?賴氨酸Lys(SONap(2)) Nε-(2-萘磺?；?賴氨酸Lys(COPh) Nε-苯甲酰賴氨酸Lys(COCH2ph) Nε-苯乙酰賴氨酸Lys(CO-(CH2)3-Ph)Nε-(4-苯基)丁酰賴氨酸Iys(CO-(CH2)5-Ph)Nε-(6-苯基)己酰賴氨酸Lys(Ac) Nε-乙酰賴氨酸Lys(CO-Nap(1))Nε-(1-萘甲?；?賴氨酸Lys(Nic) Nε-尼克酰賴氨酸Glu(NH-CH2CH2-Ph)N-γ-谷氨酰苯乙胺Glu(NH-CH2-Ph) N-γ-谷氨酰芐胺Glu(NH-CH2-Ph2) (N-γ-谷氨酰)二苯基甲胺Glu(NH-CH2-Nap(1))(N-γ-谷氨酰)-1-萘甲胺Glu(Php) 1-γ-谷氨酰-4-苯基哌嗪Glu(Bzlp) 1-γ-谷氨酰-4-芐基哌嗪Glu((2)-Pyp) 1-γ-谷氨酰-4-(2-吡啶基)哌嗪Glu(2-MeOPhp) 1-γ-谷氨酰-4-(2-甲氧苯基)哌嗪Glu(4-MeOPhp) 1-γ-谷氨酰-4-(4-甲氧苯基)哌嗪Asp(NH-CH2-Ph) N-β-天冬氨酰芐胺本發(fā)明涉及的取代基、保護基和試劑采用下述縮寫。DMF N，N-二甲基甲酰胺AcOEt 乙酸乙酯Boc 叔丁氧羰基Bzl 芐基OPac苯乙酰酯HONBN-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺ONB HONB酯HOBt1-羥基苯并三唑DCC N，N′-二環(huán)己基碳化二亞胺DCU N，N′-二環(huán)己基脲DCHAN，N′-二環(huán)己基胺CHA 環(huán)己胺WSCD1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺Tos 甲苯磺?；鵗osOH 對甲苯磺酸
Ph 苯基Php 苯基哌嗪Bzlp 芐基哌嗪(2)-Pyp2-吡啶基哌嗪MeOPhp 甲氧苯基哌嗪Nap(1) 1-萘Nap(2) 2-萘Nic 尼克?；鵅r-Z 2-溴芐氧羰基Cl-Z 2-氯芐氧羰基DIEA二異丙基乙胺TFA 三氟乙酸Fmoc9-芴基甲氧羰基Mtr 4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺?；鵇CM 二氯甲烷HBTU六氟磷酸2-苯并三唑基-1，1，3，3-四甲基銨鹽PyBop 六氟磷酸苯并三唑氧基-三吡咯烷子基鏻鹽Pyr 吡啶Ac 乙?；鵚ang樹脂4-(羥甲基)苯氧甲基樹脂本發(fā)明的式(I)環(huán)五肽或其鹽可采用制備肽的常規(guī)方法來生產(chǎn)。即，式(I)化合物可通過液相合成法或通過固相合成法生產(chǎn)，但在某些情況下，液相合成法是優(yōu)選的。生產(chǎn)肽的方法可按照已知方法進行，例如Bodansky，M.&Ondetti，M.A.，肽合成，Interscience，New Youk，1996；Finn，F(xiàn).M.&Hofman，K.，蛋白質(zhì)，第2卷(由Henrath，H.&Hill，R.L.編輯)，Academic Press Inc.，New York，1976；Izumiya，N.等，肽合成的基礎(chǔ)與實驗，Maruzen，1985；Yajima，H.，Sakakibara，S.等，生物化學實驗，Lecture 1(由日本生物化學會編輯)，Tokyo Kagaku Dojin，1977；Kimura，T.等，生物化學實驗(續(xù))，Lecture 2(由日本生物化學會編輯)，TokyoKagaku Dojin，1987；Steward，J.M.&Young，J.D.，固相肽合成，PierceChemical Co.，Illinois，1984等。例如提及的有疊氮化物法、氯化物法、酸酐法、混合酸酐法、DCC法、活化酯法、使用Woodward試劑K法、羰基二咪唑法、氧化還原法、DCC/HONB法、使用BOP試劑法等。作為可生產(chǎn)式(I)環(huán)五肽或其鹽的實例是通過肽合成領(lǐng)域已知的常規(guī)方法，將帶活潑羧基的原料化合物與另一種帶活潑氨基的原料化合物縮合得到線性四肽，前一原料對應于將氨基酸在任意需要的位置劃分所得的兩個片斷中的一個，后一原料對應于另一個片斷；然后采用已知的縮合方法閉環(huán)和縮合所得的中間體。如果如此生產(chǎn)的縮合物是帶保護基的，則保護基可用已知的方法脫去，得到目的肽。具體地說，在固相肽合成法中，其中在反應中不參與反應的功能基被保護的氨基酸通過氨基酸的羧基與不溶性載體如Pam樹脂等連接，然后脫去氨基保護基，之后將如此固定的氨基酸與另一種氨基酸縮合，后者的氨基酸中不參與反應的功能基是被保護的。重復該方法，直至獲得所需的、保護的肽。然后，將如此合成的肽中的保護基用常規(guī)方法脫去，例如采用氟化氫處理、用三氟甲磺酸處理、用三氟乙酸處理等，同時斷裂肽與不溶性載體間的鍵，分離出目的肽。
上述的第一種和第二種原料化合物一般是氨基酸和/或肽片斷。通過將兩種原料彼此鍵合，形成所需的(I)的環(huán)五肽或其鹽。這些原料通常是線性或支鏈的?！盎顫婔然笔侵隔然旧砘虮换罨聂然！盎顫姲被笔侵赴被旧砘虮换罨陌被?。通常，參與上述縮合反應的兩種功能基中的一個是活潑的。另一個不參與反應的羧基或氨基應在反應之前加以保護。
可適當選擇已知基團和已知方法保護原料和化合物保護基中不參與反應的功能基，脫去保護基及活化化合物中參與反應的功能基。
用作原料化合物中氨基保護基的實例可例舉芐氧羰基、叔丁氧羰基、叔戊氧羰基、異冰片基氧羰基、4-甲氧基芐氧羰基、2-氯芐氧羰基、金剛烷氧羰基、三氟乙?；⑧彵蕉柞；?、甲?；?、2-硝基苯亞磺酰基、二苯基硫膦基和9-芴基甲氧羰基等。作為原料化合物中羧基保護基的實例可例舉烷基酯(如甲、乙、丙、丁、叔丁、環(huán)戊、環(huán)己、環(huán)庚、環(huán)辛和2-金剛烷基酯等)，芐基酯，4-硝基芐基酯，4-甲氧基芐基酯，4-氯芐基酯，二苯甲基酯，苯甲酰甲基酯，芐氧羰基肼，叔丁氧羰基肼、三苯甲基肼。
半胱氨酸的硫醇保護基包括例如4-甲氧芐基，4-甲基芐基，芐基，叔丁基，金剛烷基，三苯甲基，乙酰氨甲基，甲酯基亞磺?；?，3-硝基-2-吡啶亞磺?；谆阴０奔谆?。
絲氨酸的羥基可通過酯化或醚化保護。適于酯化的基團包括低級鏈烷?；缫阴；?，芳?；绫郊柞；?，由碳酸衍生的基團如芐氧羰基、乙氧羰基等。適于醚化的基團包括例如芐基，四氫吡喃基，叔丁基等。但絲氨酸中的羥基也并不總是需要加以保護。
酪氨酸中的酚羥基的保護基包括例如芐基、2，6-二氯芐基、2-硝基芐基、2-溴芐氧羰基、叔丁基等。但酚羥基也并不總是需要加以保護。
甲硫氨酸可以其亞砜形式加以保護。
組氨酸咪唑部分的保護基包括例如對甲苯磺酰基，4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺?；?，4-二硝基苯基，芐氧甲基，叔丁氧甲基，叔丁氧羰基，三苯甲基，9-芴基甲氧羰基等。當然，咪唑部分也不總是需要保護的。
色氨酸的吲哚部分的保護基包括例如甲?；?，2，4，6-三甲基苯磺酰基，2，4，6，-三甲氧基苯磺?；?-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺?；?，2，2，2-三氯乙氧羰基，二苯基硫膦基等。當然吲哚部分也不總是需要保護的。
其中羧基被保護的原料化合物包括例如相應的酸酐，疊氮化物，活潑酯[例如醇酯(醇是如五氯苯酚、2，4，5-三氯苯酚、2，4-二硝基苯酚、氰基甲醇、對硝基苯酚、N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、N-羥基苯并三唑)]等。其中氨基被保護的原料化合物包括例如相應的磷酸酰胺。
縮合反應可在溶劑的存在下進行?？蛇m宜地選擇已知可用于肽縮合反應的那些溶劑作溶劑。例如可使用無水或含水的二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、吡啶、氯仿、二噁烷、二氯甲烷、四氫呋喃、乙腈、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮或它們的適宜混合物?？蓪⒎磻獪囟冗m宜地選定在已知適用于肽鍵形成的溫度范圍內(nèi)。通常，適當?shù)貙囟确秶x定在約-20℃至約30℃之間。反應時間-般在30分鐘至24小時之間。
分子內(nèi)環(huán)化反應可按照常規(guī)手段，運用已知方法在待環(huán)化肽的任意所需位置進行。例如采用已知方法脫去保護的肽中C末端氨基酸的α-羧基保護基，然后用已知方法活化如此脫保護的基團，此后用已知方法除去肽中N末端氨基酸的α-氨基酸殘基，同時肽進行分子內(nèi)環(huán)化?；蛘?，同時脫去被保護肽的C末端氨基酸的末端α-羧基保護基和N末端氨基酸的末端α-氨基酸保護基，之后將如此脫保護的肽用已知方法進行分子內(nèi)環(huán)化。也可以優(yōu)選在高度稀釋的條件下進行分子內(nèi)環(huán)化。
為脫去保護基，例如可將被保護肽在氫氣流中在催化劑如Pd黑或鈀炭等存在下催化還原；對其用無水氟化氫、甲磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸或它們的混合物處理，或者用液氨中的鈉將其還原。用酸處理進行的脫保護通常在-20℃至40℃間進行。在酸處理中，將陽離子螯合劑如苯甲醚、苯酚、硫代苯甲醚、間甲酚、對甲酚、甲硫醚、1，4-丁烷-二硫醇或1，2-乙烷-二硫醇加到反應體系中是有效的。用作組氨酸的咪唑保護基的2，4-二硝基苯基可用硫代苯酚處理脫去。除了上述的在1，2-乙烷-二硫醇或1，4-丁烷-二硫醇等的存在下用酸處理脫保護外，用作色氨酸的吲哚保護基的甲?；€可通過用堿，如稀氫氧化鈉、稀氨水等處理脫去。
以上述方法生產(chǎn)的環(huán)五肽(I)在反應后可采用常規(guī)的肽分離和純化手段收集，例如采用萃取、分配、再沉淀、重結(jié)晶、柱色譜、高壓液相色譜等手段。
可運用先前已知的方法，獲得本發(fā)明的環(huán)五肽(I)的金屬鹽(如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽等)，其與堿或堿性化合物成的鹽(如銨鹽、精氨酸鹽等)，和其酸加成鹽，尤其是其可藥用酸加成鹽。例如可例舉環(huán)五肽(I)與無機酸(如鹽酸、硫酸、磷酸)或有機酸(如鹽酸、丙酸、檸檬酸、酒石酸、蘋果酸、草酸、甲磺酸)等的鹽。
如此獲得的本發(fā)明環(huán)五肽(I)或其鹽具有極好的LH-RH受體拮抗作用和低毒性。因此這些化合物可安全地用于治療哺乳動物(如人類、猴、牛、馬、狗、貓、兔、大鼠、小鼠等)的雄性激素或雌性激素依賴性疾病，和那些由于這些性激素過多引起的疾病，那些由于促性腺激素延遲分泌引起的疾病，因為在這些疾病患者中化合物的LH-RH受體拮抗作用調(diào)節(jié)了患者血液中的激素濃度。具體地說，本發(fā)明的化合物可用于治療性激素依賴性癌癥(如前列腺癌、子宮癌、乳腺癌、垂體腫瘤等)，前列腺肥大，子宮內(nèi)膜異位，子宮肌瘤，性早熟，經(jīng)閉，月經(jīng)前綜合癥、多卵巢綜合癥，粉刺等。此外，本發(fā)明的化合物也用于雄性和雌性繁殖(如用作妊娠調(diào)節(jié)劑、月經(jīng)周期調(diào)節(jié)劑等)。再有，本發(fā)明的化合物可用作男性和女性避孕藥及女性排卵誘發(fā)劑。本發(fā)明的化合物還可用于飼料工業(yè)，用于調(diào)節(jié)動物動情期、提高肉的質(zhì)量和促進動物的生長。此外，本發(fā)明的化合物可用作魚的產(chǎn)卵促進劑。本發(fā)明的化合物可單獨使用，但與甾類或非甾類的抗雄激素藥物或抗雌激素藥物聯(lián)合使用也有效。本發(fā)明的化合物可用于抑制血中睪丸素濃度的暫時性升高(突發(fā)現(xiàn)象)，該升高或許是因服用超強激動劑如亮丙瑞林乙酸鹽引起的。
當本發(fā)明的化合物用作預防和治療上述疾病的藥物或者用于飼料或海產(chǎn)品工業(yè)時，可采用先前已知的方法，將它們經(jīng)非胃腸道或經(jīng)口施用。
本發(fā)明的化合物與可藥用載體或稀釋劑混合并通常以固體制劑如片劑、膠囊、顆粒劑或粉末經(jīng)口給藥，或者以靜脈、皮下或肌內(nèi)注射液不經(jīng)口給藥，或者作為栓劑或舌下給藥片劑使用。
當本發(fā)明的環(huán)五肽(I)或其鹽用作經(jīng)非胃腸道給藥的LH-RH拮抗劑時，通常它們可作為液體制劑(如注射液)給藥。注射液包括靜脈注射液，以及皮下注射液、透皮注射液、肌內(nèi)注射液、靜脈滴注液等。這些注射液可采用先前已知的方法制備，例如將具有LH-RH受體拮抗作用的化合物溶解、懸浮或乳化在無菌的水性或油性液體中。注射水溶液包括注射用蒸餾水、生理鹽溶液、含葡萄糖和其它滲透壓調(diào)節(jié)劑(如D-山梨醇、D-甘露醇、氯化鈉等)的等滲溶液等。它們可與適宜的助溶劑，如醇類(如乙醇)，多元醇(如丙二醇、聚乙二醇)，非離子表面活性劑(如吐溫80(注冊商品名)、HCO-50(注冊商品名))等結(jié)合使用。注射油溶液包括芝麻油、豆油等，它們可與助溶劑如苯甲酸芐基酯、苯甲醇等結(jié)合。此外，它們可與緩沖劑(如磷酸鹽緩沖劑、乙酸鈉緩沖劑)、疼痛減輕劑(如氯芐烷胺、普魯卡因鹽酸鹽等)、穩(wěn)定劑(如人血清白蛋白、聚乙二醇等)、防腐劑(如芐醇、苯酚)等結(jié)合。制備的注射劑通常填充到適宜的安瓿中。制劑的劑量可有所變化，這取決于被醫(yī)治的對象、靶器官、患者的條件、給藥途徑等因素。例如對于每公斤患者體重而言，有益的是注射約0.01-100mg，優(yōu)選約0.01-50mg，更優(yōu)選約0.01-20mg活性化合物。
對于口服給藥，本發(fā)明的化合物可作為口服制劑如粉末、片劑、顆粒劑、膠囊等給藥。為制備口服制劑，可將化合物與可藥用載體化合物混合。載體包括載體(如乳糖、淀粉等)，潤滑劑(如硬脂酸鎂、滑石等)，粘合劑(如羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素、聚乙二醇等)，崩解劑(如淀粉、羧甲基纖維素鈣等)等。如果需要，也可將其它輔劑加到制劑中，例如防腐劑(如芐醇、氯丁醇、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯等)，抗氧劑，著色劑，甜味劑等。對每公斤患者體重而言，該制劑的劑量通常為約5mg-1g，優(yōu)選為約10mg-100mg活性化合物。
另外，本發(fā)明的化合物可作為緩釋制劑例如在日本專利公開平7-69917中公開的制劑給藥。具體地說，本發(fā)明的環(huán)五肽(I)或其鹽可與生物可降解的聚合物(如脂肪酸的聚酯、乙醇酸和乳糖的共聚物等)結(jié)合制備緩釋制劑。[工業(yè)應用]本發(fā)明的LH-RH受體拮抗劑是有效的藥物，用于預防和治療性激素依賴性癌癥(如前列腺癌、子宮癌、乳腺癌、垂體腫瘤等)，前列腺肥大，子宮內(nèi)膜異位，子宮肌瘤，性早熟，經(jīng)閉綜合癥，多卵巢綜合癥，粉刺等；并可有效地作為妊娠調(diào)節(jié)劑(如避孕劑等)和月經(jīng)周期調(diào)節(jié)劑。再有，它們還可用于飼料工業(yè)，用于調(diào)節(jié)動物的動情期，提高肉的質(zhì)量和調(diào)節(jié)動物的生長，以及在海產(chǎn)品工業(yè)中用作魚的產(chǎn)卵促進劑。
下文用有關(guān)實施例更具體地描述本發(fā)明。
在實施例中，除非另有說明，除Gly外的所有氨基酸均是L-構(gòu)型的。
下列實施例中使用的薄層色譜和HPLC的條件如下(1)薄層色譜(TLC)Merck Kieselgel 60F254TLC溶劑氯仿-甲醇(95∶5)Rf遷移率(2)HPLC柱R-ODS-5-ST(4.6×150cm，YMC Co.生產(chǎn))洗脫劑溶液A(0.1％-三氟乙酸水溶液)溶液B(0.1％-三氟乙酸的乙腈)
洗脫條件將柱用溶液A洗脫1分鐘，然后用不同比例的溶液A與溶液B的混合物進行35分鐘的線性濃度梯度洗脫，溶液A∶溶液B從100∶0-30∶70。
流速1.0ml/min實施例1環(huán)(-Arg-D-Lys(SO2Nap(1))-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-D-Trp-Leu-OBzl的合成將H-Leu-OBzl·Tos(27.6g)溶于DMF(100ml)中并用冰冷卻，往其中加入二異丙基乙胺(13.9ml)和Boc-D-Trp-ONB(由23.4g Boc-D-Trp-OH，15.1g HONB和17.3g DCC制備)，攪拌過夜。過濾除去產(chǎn)生的DCU，所得濾液濃縮，將所得濃縮物溶于AcOEt(500ml)，并往其中加入N，N-二異丙基乙胺(10.0ml)，攪拌10分鐘。往所得混合物中加入水(500ml)，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。
產(chǎn)率35.8g(100％)FAB-MS(M+H)+508(理論值508)2)Boc-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-Trp-Leu-OBzl(34.3g)溶于甲醇(500ml)，然后在氫氣流中在10％Pd-碳催化劑的存在下進行催化還原。過濾除去催化劑，所得濾液濃縮至100ml，往其中滴加Cs2CO3(11.0g)的水溶液(10ml)。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于DMF(200ml)，并往其中加入苯甲酰甲基溴(13.5g)的DMF(50ml)溶液并攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于AcOEt(300ml)。然后所得溶液用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，用無水硫酸鈉干燥并濃縮得到油狀產(chǎn)物。用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel60，氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率37.6g(76.4％)Rf0.46熔點111-113℃FAB-MS(M+H)+535(理論值535)3)Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成
將Boc-D-Trp-Leu-OPac(16.1g)溶于10N-HCl/二噁烷(20ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(100ml)，往其中加入二異丙基乙胺(5.94ml)和Boc-Tyr(Br-Z)-ONB(由17.8g Boc-Tyr-(Br-Z)-OH，7.53g HONB和8.67g DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(4.68ml)并攪拌10分鐘。將水(300ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，0.5％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀產(chǎn)物。
產(chǎn)率25.8g(94.4％)Rf0.77熔點109.5-110.5℃元素分析C47H51N4O10Br計算值C，61.91；H，5.64；N，6.14實測值C，61.53；H，5.70；N，6.174)Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-OH-CHA的合成將Boc-D-Lys-OH(2.00g)溶于二噁烷(28ml)-水(14ml)中，往其中滴加1N-NaOH(17.1ml)和1-萘磺酰氯(2.03g)的二噁烷溶液(10ml)并在冰冷卻下攪拌。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)-水(100ml)中，在冰冷卻下往所得溶液中加入1N-HCl使其呈酸性，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用飽和鹽溶液洗(100ml×2)，無水硫酸鈉干燥并濃縮。所得濃縮物溶于氯仿，往其中加入環(huán)己胺(1.01ml)，蒸除溶劑。將石油醚加到殘余物中，得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率3.26g(74.9％)熔點93.0-96.0℃FAB-MS(M+H)+(Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-OH)436(理論值436)5)Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。
將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.30ml)和Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-ONB(由964mg Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-OH-CHA，376mgHONB和433mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.24ml)并攪拌10分鐘。將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。從氯仿石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.72g(93.2％)Rf0.70熔點98.0-99.0℃元素分析C63H69N6O13BrS·0.25H2O計算值C，61.28；H，5.67；N，6.81實測值C，61.06；H，5.94；N，7.106)Boc-Arg(Tos)-D-Lys(SO2Nap(1))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-Lys(SONap(1))-Tyr(Br-Z)D-Trp-Leu-OPac(1.60g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.26ml)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由972mg Boc-Arg(Tos)-OH 1/4 H2O 3/4AcOEt，420mg HONB和483mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.26ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.35g(67.4％)Rf0.67熔點115.0-117.0℃元素分析C76H87N10O16BrS2·H2O計算值C，58.57；H，5.76；N，8.99
實測值C，58.20；H，5.70；N，8.747)環(huán)(-Arg-D-Lys(SO2Nap(1))-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-Arg(Tos)-D-Lys(SO2Nap(1))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Lcu-OPac(500mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(1.06g)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(l00ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液(200ml)洗，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(117mg)和DCC(135mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.60ml)的DMF(300ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(100mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出沉淀。將沉淀溶在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。產(chǎn)物用YMC-ODS-25-20柱(2cm×25cm，YMC Co.生產(chǎn))經(jīng)分配液相色譜純化，獲得目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率33.5mg(30.0％)氨基酸分析(在110℃下、6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.90(1)；Lys 0.19(1)；Arg 0.99(1)FAB-MS(M+H)+937(理論值937)實施例2環(huán)(-Arg-D-Lys-(COPh)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Bod-Arg(Tos)-OBzl的合成將Cs2CO3(2.93mg)的水溶液(15ml)滴加到Boc-Arg(Tos)-OH·0.25HO·0.75AcEOt(10g)的甲醇(40ml)溶液中，減壓蒸除溶劑。將DMF(60ml)加到殘余物中形成溶液，往其中加入芐基氯(3.08g)的DMF(30ml)溶液，然后攪拌過夜。減壓蒸除溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(200ml)。用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉溶液和飽和鹽溶液洗，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率8.72g(93.2％)Rf0.41FAB-MS(M+H)+518(理論值518)2)Boc-Leu-Arg(Tos)-BOzl的合成將Boc-Arg(Tos)-BOzl(7.77g)溶于10N-HCl/二噁烷(30ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(10ml)，往其中加入二異丙基乙胺(2.86ml)和Boc-Leu-ONB(由4.50gBoc-Leu-OH·H2O，3.53g HONB和4.06g DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。過濾除去生成的DCU，所得濾液濃縮，所得濃縮物溶于乙酸乙酯(150ml)中，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(2.34ml)并攪拌10分鐘。將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮。然后由石油醚中沉淀，得到油狀目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率8.86g(93.5％)Rf0.40熔點71.0-73.0℃元素分析C31H45N5O7S計算值C，58.93；H，7.18；N，11.08實測值C，58.54；H，7.14；N，11.033)Boc-Leu-Arg(Tos)-OPac的合成將Boc-Leu-Arg(Tos)-OBzl(8.86g)溶于甲醇(500ml)，然后在氫氣流中在10％Pd-碳催化劑的存在下進行催化還原。過濾除去催化劑后，所得濾液濃縮至100ml，往其中滴加Cs2CO3(2.28g)的水溶液(15ml)。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于DMF(30ml)，并往其中加入苯甲酰甲基溴(2.79g)的DMF(10ml)溶液并攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于AcOEt(150ml)。然后所得溶液用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后由乙醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率8.95g(97.1％)Rf0.39
熔點78.0-81.0℃元素分析C32H45N5O8S計算值C，58.25；H，6.87；N，10.61實測值C，58.03；H，6.92；N，10.244)Boc-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac的合成將Boc-Leu-Arg(Tos)-OPac(8.95g)溶于10N-HCl/二噁烷(100ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(30ml)，往其中加入二異丙基乙胺(3.71ml)和Boc-D-Trp-ONB(由4.69g Boc-D-Trp-OH，3.01g HONB和3.47g DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去形成的DCU，濾液濃縮，將所得濃縮物溶于乙酸乙酯(150ml)并往其中加入N，N-二異丙基乙胺(2.00ml)并攪拌10分鐘。將水(150ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后由石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率10.61g(92.2％)Rf0.25熔點109.0-110.0℃元素分析C43H55N7O9S· 0.71 H2O計算值C，60.08；H，6.55；N，11.41實測值C，60.37；H，6.66；N，11.175)Boc-Try(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac的合成將Boc-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(10.11g)溶于10N-HCl/二噁烷(100ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(20ml)，往其中加入二異丙基乙胺(4.54ml)和Boc-Tyr(Br-Z)-ONB(由7.40g Boc-Tyr(Br-Z)-OH，2.92g HONB和3.37g DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去形成的DCU，濾液濃縮，將所得濃縮物溶于乙酸乙酯(150ml)并往其中加入N，N-二異丙基乙胺(1.95ml)并攪拌10分鐘。將水(150ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后由石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率14.67g(100％)Rf0.23熔點115.0-117.0℃元素分析C60H69N8O13BrS·0.25 H2O計算值C，58.75；H，5.71；N，9.13實測值C，58.49；H，5.59；N，9.026)Boc-D-Lys(COPh)-OH·CHA的合成將Boc-D-Lys-OH(2.00g)溶于二噁烷(28ml)-水(14ml)中，往其中滴加1N-NaOH(17.1ml)和苯甲酰氯(1.26g)的二噁烷溶液(10ml)并在冰冷卻下攪拌。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)-水(100ml)中，在冰冷卻下往所得溶液中加入1N-HCl使其呈酸性，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用飽和鹽溶液洗(100ml×2)，無水硫酸鈉干燥并濃縮。所得濃縮物溶于氯仿，往其中加入環(huán)己胺(1.01ml)，蒸除溶劑。將石油醚加到殘余物中，得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率2.75g(75.3％)熔點84.0-86.0℃FAB-MS(M+H)+(Boc-D-Lys(COPh)-OH)350(理論值350)7)Boc-D-Lys(COPh)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac的合成將Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(1.38g)溶于10N-HCl/二噁烷(20ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(10ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.43ml)和Boc-D-Lys(COPh)-ONB(由611mg Boc-D-Lys(COPh)-OH·CHA，292mg HONB和336mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.18ml)并攪拌10分鐘。將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱色譜純化(Merch Kieselgel 60，1％甲醇-氯仿)，由氯仿-石油醚獲得沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率950mg(57.8％)Rf0.63
熔點111.0-114.0℃元素分析C73H85N10O15BrS·0.75H2O計算值C，59.73；H，5.93；N，9.54實測值C，59.40；H，6.16；N，9.468)環(huán)(-Arg-D-Lys(COPh)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-D-Lys(COPh)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(400mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(899mg)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液洗(200ml)，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(101mg)和DCC(116mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.50ml)的DMF(100ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(100mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出沉淀。將沉淀溶在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。產(chǎn)物用YMC-ODS-25-20柱(2cm×25cm，YMC Co.生產(chǎn))經(jīng)分配液相色譜純化，獲得目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率26.0mg(32.7％)氨基酸分析(在110℃下、6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.93(1)；Lys 0.91(1)；Arg 1.02(1)FAB-MS(M+H)+851(理論值851)實施例3環(huán)(-Arg-D-Lys(SO2Nap(2))-Trp-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-D-Lys(SO2Nap(2))-OH·CHA的合成將Boc-D-Lys-OH(2.00g)溶于二噁烷(28ml)-水(14ml)中，往其中滴加1N-NaOH(17.1ml)和2-萘磺酰氯(2.03g)的二噁烷溶液(10ml)并其冰冷卻下攪拌。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)-水(100ml)中，在冰冷卻下往所得溶液中加入1N-HCl使其呈酸性，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用飽和鹽溶液(100ml×2)洗，無水硫酸鈉干燥并濃縮。所得濃縮物溶于氯仿，往其中加入環(huán)己胺(1.01ml)，蒸除溶劑。將石油醚加到殘余物中，得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率2.58g(59.3％)熔點95.0-97.5℃FAB-MS(M+H)+(Boc-D-Lys(SO2Nap(2))-OH)436(理論值436)2)Boc-D-Lys(SO2Nap(2))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac的合成將實施例2-5)得到的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Lcu-Arg(Tos)-OPac(1.38g)溶于10N-HCl/二噁烷(20ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(10ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.43ml)和Boc-D-Lys(SO2Nap(2))-ONB(由729mg Boc-D-Lys(SO2Nap(2))-OH·CHA，292mg HONB和336mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.18ml)并攪拌10分鐘。將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，1％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.39g(79.8％)Rf0.33熔點109.0-111.5℃元素分析C76H87N10O16BrS2·0.25H2O計算值C，59.08；H，5.70；N，9.07實測值C，58.66；H，5.86；N，9.003)環(huán)(-Arg-D-Lys(SO2Nap(2))-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-D-Lys(SO2Nap(2))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(TOs)-OPac(400mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(899mg)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。
合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液洗(200ml)，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(94mg)和DCC(108mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.47ml)的DMF(100ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(40mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出形成的沉淀。
產(chǎn)率22.0mg(27.1％)氨基酸分析(在110℃下、6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.90(1)；Lys 0.21(1)；Arg 0.94(1)FAB-MS(M+H)+937(理論值937)實施例4環(huán)(-Arg-D-Trp-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-D-Trp-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac的合成將實施例2-5)得到的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(1.38g)溶于10N-HCl/二噁烷(20ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(10ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.43ml)和Boc-D-Trp-ONB(由414mg Boc-D-Trp-OH，292mg HONB和336mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.18ml)并攪拌10分鐘。將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.45g(91.0％)
Rf0.71熔點116.0-119.0℃元素分析C71H79N10O14BrS·0.25H2O計算值C，60.35；H，5.56；N，9.91實測值C，60.11；H，5.76；N，9.922)環(huán)(-Arg-D-Trp-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-D-Trp-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(TOs)-OPac(500mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(899mg)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液(200ml)洗，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(128mg)和DCC(147mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(30ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.64ml)的DMF(320ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(40mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出形成的沉淀。
產(chǎn)率11.0mg(11.5％)氨基酸分析(在110℃下、6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.85(1)；Arg 0.95(1)FAB-MS(M+H)+805(理論值805)實施例5環(huán)(-Arg-D-Lys-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-D-Lys(Cl-Z)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac的合成將在實施例2-5)中制備的Boc-D-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-0Pac(1.38g)溶于10N-HCl/二噁烷(20ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(10ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.43ml)和Boc-D-Lys(Cl-Z)-ONB(由664mg Boc-D-Lys(Cl-Z)-OH- TBA，283mg HONB和326mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.18ml)并攪拌10分鐘。將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，1％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.54g(89.7％)Rf0.33熔點97.5-100.0℃元素分析C74H86N10O16ClBrS計算值C，58.51；H，5.71；N，9.22實測值C，58.59；H，6.02；N，9.272)環(huán)(-Arg-D-Lys-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-D-Lys(Cl-Z)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(TOs)-OPac(500mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(1.08g)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。
合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液洗(200ml)，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(117mg)和DCC(135mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(30ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.59ml)的DMF(320ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(100mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出形成的沉淀。
產(chǎn)率9.6mg(11.7％)
氨基酸分析(在110℃下，6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.93(1)；Lys 0.97(1)；Arg 0.98(1)FAB-MS(M+H)+747(理論值747)實施例6環(huán)(-Arg-D-Lys(COCH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-D-Lys(COCH2Ph)-OH·CHA的合成將Boc-D-Lys-OH(2.00g)溶于二噁烷(28ml)-水(14ml)中，往其中滴加1N-NaOH(17.1ml)和苯乙酰氯(1.38g)的二噁烷溶液(10ml)并在冰冷卻下攪拌。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)-水(100ml)中，在冰冷卻下往所得溶液中加入1N-HCl使其呈酸性，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用飽和鹽溶液洗(100ml×2)，無水硫酸鈉干燥并濃縮。所得濃縮物溶于氯仿，往其中加入環(huán)己胺(1.01ml)，蒸除溶劑。將石油醚加到殘余物中，得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.35g(35.9％)熔點102.0-104.5℃FAB-MS(M+H)+(Boc-D-Lys(COCH2Ph)-OH)364(理論值364)2)Boc-D-Lys(COCH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將在實施例1-3)中制備的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。
將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.30ml)和Boc-D-Lys(COCH2Ph)-ONB(由835mg Boc-D-Lys(COCH2Ph)-OH·CHA，376mg HONB和433mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.24ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.68g(96.7％)Rf0.64
熔點122.0-124.0℃元素分析C61H69N6O12Br計算值C，63.26；H，6.01；N，7.26實測值C，62.89；H，6.25；N，7.373)Boc-Arg(Tos)-D-Lys(COCH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-Lys(COCH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.51g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.26ml)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由972mg Boc-Arg(Tos)-OH·1/4 H2O·3/4 AcEOt，420mg HONB和483mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.26ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率680mg(35.6％)Rf0.66熔點107.0-109.0℃元素分析C74H87N10O15BrS- 0.75H2O計算值C，59.97；H，6.02；N，9.45實測值C，59.70；H，5.98；N，9.214)環(huán)(-Arg-D-Lys(COCH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-Arg(Tos)-D-Lys(COCH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(400mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(1.06g)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液洗(200ml)，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(98mg)和DCC(112mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.50ml)的DMF(300ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(100mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出形成的沉淀。將該沉淀溶于少量乙酸，用水稀釋并凍干。最后，使用YMCODS-25-20柱(2×25cm；YMC o.生產(chǎn))經(jīng)分配液相色譜純化，得到目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率24.0mg(30.6％)氨基酸分析(在110℃下，6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.92(1)；Lys 0.96(1)；Arg 0.95(1)FAB-MS(M+H)+865(理論值865)實施例7環(huán)(-Arg-Lys(SO2Nap(2))-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-Lys(SO2Nap(2))-OH·CHA的合成將Boc-Lys-OH(2.00g)溶于二噁烷(28ml)-水(14ml)中，往其中滴加1N-NaOH(17.1ml)和2-萘磺酰氯(2.03g)的二噁烷溶液(10ml)并在冰冷卻下攪拌。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)-水(100ml)中，在冰冷卻下往所得溶液中加入1N-HCl使其呈酸性，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用飽和鹽溶液洗(100ml×2)，無水硫酸鈉干燥并濃縮。所得濃縮物溶于氯仿，往其中加入環(huán)己胺(1.01ml)，蒸除溶劑。將石油醚加到殘余物中，得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率2.67g(61.4％)熔點99.0-102.0℃FAB-MS(M+H)+(Boc-Lys(SO2Nap(2))-OH)436(理論值436)2)Boc-Lys(SO2Nap(1))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將在實施例1-3)中制備的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。
將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.30ml)和Boc-Lys(SO2Nap(2))-ONB(由964mg Boc-Lys(SO2Nap(1))-OH·CHA，376mg HONB和433mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.24ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.87g(100.0％)Rf0.70熔點99.0-100.0℃元素分析C63H69N6O13BrS·0.25H2O計算值C，61.28；H，5.67；N，6.80實測值C，61.32；H，6.15；N，7.073)Boc-Arg(Tos)-Lys(SO2Nap(2))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-Lys(SO2Nap(2))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.60g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.26ml)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由972mg Boc-Arg(Tos)-OH·1/4 H2O·3/4 AcEOt，420mg HONB和483mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.26ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.00g(49.9％)Rf0.67
熔點110.0-112.0℃元素分析C76H87N10O16BrS2·0.5H2O計算值C，58.91；H，5.72；N，9.04實測值C，58.61；H，5.82；N，8.784)環(huán)(-Arg-Lys(SO2Nap(2))-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-Arg(Tos)-Lys(SO2Nap(2))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(500mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(1.06g)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液洗(200ml)，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(117mg)和DCC(135mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.60ml)的DMF(300ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(100mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出形成的沉淀。將該沉淀溶于少量乙酸，用水稀釋并凍干。最后，使用YMCODS-25-20柱(2×25cm；YMC Co.生產(chǎn))經(jīng)分配液相色譜純化，得到目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率49.0mg(48.3％)氨基酸分析(在110℃下，6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.90(1)；Lys 0.17(1)；Arg 0.96(1)FAB-MS(M+H)+937(理論值937)實施例8環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl的合成在冰冷卻下將HONB(0.73g)和DCC(0.84g)加到Boc-D-Glu-OBzl(1.25g)的乙腈(80ml)溶液中，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去形成的DCU，將所得濾液加到b-苯乙胺(0.72g)的乙腈(50ml)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸除溶劑，然后將殘余物懸浮在乙酸乙酯(50ml)和水(30ml)中，在攪拌和冰冷卻下往所得懸浮液中加入1N-HCl(6ml)使其呈酸性。分離乙酸乙酯層(50ml)并用水洗。然后往乙酸乙酯層中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48ml)并攪拌10分鐘。將乙酸乙酯層用飽和鹽水、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，然后濃縮。往所得濃縮物中加入石油醚，得到沉淀狀目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.59g(97.5％)熔點89.0-90.0℃元素分析C25H32N2O5計算值C，68.16；H，7.32；N，6.36實測值C，68.13；H，7.42；N，6.602)Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl(793mg)溶于甲醇(100ml)并在氫氣流和10％Pd-C的存在下攪拌1小時。過濾除去催化劑，然后減壓過濾除去溶劑。將DMF(10ml)加到殘余物中使其溶解。在冰冷卻下，往其中加入HONB(376mg)和DCC(433mg)并直接攪拌5小時(Boc-D-GLU(NHCH2CH2Ph)-ONB)。
將在實施例1-3)中制備的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.30ml)和預先制備的Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.24ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.04g(60.6％)Rf0.74
熔點149.0-150.5℃元素分析C60H67N6O12Br·0.5H2O計算值C，62.50；H，5.94；N，7.29實測值C，62.39；H，5.94；N，7.173)Boc-Arg(Tos)-D-GLu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-GLu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(708mg)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.23ml)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由464mg Boc-Arg(Tos)-OH·1/4 H2O 3/4AcEOt，200mg HONB和230mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，3％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率750mg(83.3％)Rf0.65熔點98.0-100.0℃元素分析C73H85N10O15BrS計算值C，60.28；H，5.98；N，9.63實測值C，60.22；H，6.34；N，9.544)環(huán)(-Arg-D-GLu(NHCH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-Arg(Tos)-D-GLu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(400mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(899mg)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液洗(200ml)，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(99mg)和DCC(113mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.60ml)的DMF(300ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(100mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出形成的沉淀。將該沉淀溶于少量乙酸，用水稀釋并凍干。最后，使用YMCODS-25-20柱(2×25cm；YMC Co.生產(chǎn))經(jīng)分配液相色譜純化，得到目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率24.0mg(30.9％)氨基酸分析(在110℃下，6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.93(1)；Glu 1.04(1)；Arg 0.93(1)FAB-MS(M+H)+851(理論值851)實施例9環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-D-Glu(NHCH2Ph)-OBzl的合成在冰冷卻下將HONB(0.73g)和DCC(0.84g)加到Boc-D-Glu-OBzl(1.25g)的乙腈(80ml)溶液中，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去形成的DCU，將所得濾液加到芐胺(0.63g)的乙腈(50ml)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸除溶劑，然后將殘余物懸浮在乙酸乙酯(50ml)和水(30ml)中，在攪拌和冰冷卻下往所得懸浮液中加入1 N-HCl(6ml)使其呈酸性。分離乙酸乙酯層(50ml)并用水洗。然后往乙酸乙酯層中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48ml)并攪拌10分鐘。將乙酸乙酯層用飽和鹽水、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，然后濃縮。往所得濃縮物中加入石油醚，得到沉淀狀目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.54g(97.5％)熔點92.0-94.0℃元素分析C24H30N2O5
計算值C，67.59；H，7.09；N，6.57實測值C，67.59；H，7.05；N，6.872)Boc-D-Glu(NHCH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-Glu(NHCH2Ph)-OBzl(768mg)溶于甲醇(100ml)并在氫氣流和10％Pd-C的存在下攪拌1小時。過濾除去催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。將DMF(10ml)加到殘余物中使其溶解。在冰冷卻下，往其中加入HONB(376mg)和DCC(433mg)并直接攪拌5小時(Boc-D-Glu(NHCH2Ph)-ONB)。
將在實施例1-3)中制備的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.30ml)和預先制備的Boc-D-Glu(NHCH2Ph)-ONB并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.23ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.04g(61.3％)Rf0.77熔點139.0-140.0℃元素分析C59H65N6O12Br·0.5H2O計算值C，62.21；H，5.84；N，7.38實測值C，62.19；H，5.94；N，7.393)Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-Glu(NHCH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(700mg)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.23ml)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由464mg Boc-Arg(Tos)-OH·1/4 H2O·3/4 AcEOt，200mg HONB和230mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，3％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率710mg(79.6％)Rf0.57熔點102.0-104.0℃元素分析C72H83N10O15BrS計算值C，60.04；H，5.81；N，9.72實測值C，59.97；H，6.18；N，9.504)環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(400mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(908mg)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液洗(200ml)，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(100mg)和DCC(115mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10 N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.60ml)的DMF(300ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(100mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出形成的沉淀。將該沉淀溶于少量乙酸，用水稀釋并凍干。最后，使用YMCODS-25-20柱(2×25cm；YMC Co.生產(chǎn))經(jīng)分配液相色譜純化，得到目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率21.0mg(27.1％)氨基酸分析(在110℃下，6N-HCl中24小時后)(括號中是理論值)
Leu 1.00(1)；Tyr 0.92(1)；Glu 1.02(1)；Arg 0.93(1)FAB-MS(M+H)+837(理論值837)實施例10環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCHPh2)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-D-Glu(NHCHPh2)-OBzl的合成在冰冷卻下將HONB(0.73g)和DCC(0.84g)加到Boc-D-Glu-OBzl(1.25g)的乙腈(80ml)溶液中，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去形成的DCU，將所得濾液加到氨基二苯基甲醇(1.08g)的乙腈(50ml)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸除溶劑，然后將殘余物懸浮在乙酸乙酯(50ml)和水(30ml)中，在攪拌和冰冷卻下往所得懸浮液中加入1 N-HCl(6ml)使其呈酸性。分離乙酸乙酯層(50ml)并用水洗。然后往乙酸乙酯層中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48ml)并攪拌10分鐘。將乙酸乙酯層用飽和鹽水、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，然后濃縮。往所得濃縮物中加入石油醚，得到沉淀狀目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.88g(100.0％)熔點130.0-131.5℃元素分析C30H34N2O5計算值C，71.69；H，6.82；N，5.57實測值C，71.36；H，6.87；N，5.672)Boc-D-Glu(NHCHPh2)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-Glu(NHCHPh2)-OBzl(905mg)溶于甲醇(100ml)并在氫氣流和10％Pd-C的存在下攪拌1小時。過濾除去催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。將DMF(10ml)加到殘余物中使其溶解。在冰冷卻下，往其中加入HONB(376mg)和DCC(433mg)并直接攪拌5小時(Boc-D-Glu(NHCHPh2)-ONB)。
將在實施例1-3)中制備的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.30ml)和預先制備的Boc-D-Glu(NHCHPh2)-ONB并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.23ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.14g(63.0％)Rf0.82熔點131.0-133.0℃元素分析C65H69N6O12Br計算值C，64.73；H，5.77；N，6.97實測值C，64.51；H，5.89；N，6.963)Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCHPh2)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-Glu(NHCHPh2)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(700mg)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.23ml)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由464mg Boc-Arg(Tos)-OH·1/4 H2O·3/4 AcEOt，200mg HONB和230mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，3％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率950mg(100.0％)Rf0.57熔點108.0-110.0℃元素分析G78H87N10O15BrS·H2O計算值C，61.05；H，5.84；N，9.12實測值C，61.28；H，6.23；N，8.844)環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCHPh2)-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCHPh2)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(400mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(862mg)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液洗(200ml)，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(95mg)和DCC(109mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10 N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.50ml)的DMF(300ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(l00mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(100mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出形成的沉淀。將該沉淀溶于少量乙酸，用水稀釋并凍干。最后，使用YMCODS-25-20柱(2×25cm；YMC Co.生產(chǎn))經(jīng)分配液相色譜純化，得到目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率21.0mg(26.1％)氨基酸分析(在110℃下，6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.93(1)；Glu 1.22(1)；Arg 1.08(1)FAB-MS(M+H)+913(理論值913)實施例11環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2Nap(1))-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成1)Boc-D-Glu(NHCH2Nap(1))-OBzl的合成在冰冷卻下將HONB(0.73g)和DCC(0.84g)加到Boc-D-Glu-OBzl(1.25g)的乙腈(80ml)溶液中，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去形成的DCU，將所得濾液加到1-萘甲胺(0.93g)的乙腈(50ml)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸除溶劑，然后將殘余物懸浮在乙酸乙酯(50ml)和水(30ml)中，在攪拌和冰冷卻下往所得懸浮液中加入1 N-HCl(6ml)使其呈酸性。分離乙酸乙酯層(50ml)并用水洗。然后往乙酸乙酯層中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48ml)并攪拌10分鐘。將乙酸乙酯層用飽和鹽水、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，然后濃縮。往所得濃縮物中加入石油醚，得到沉淀狀目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.76g(98.7％)熔點99.0-100.5℃元素分析C28H32N2O5計算值C，70.57；H，6.77；N，5.89實測值C，70.47；H，6.82；N，5.732)Boc-D-Glu(NHCH2Nap(1))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成將Boc-D-Glu(NHCH2Nap(1))-OBzl(858mg)溶于甲醇(100ml)并在氫氣流和10％Pd-C的存在下攪拌1小時。過濾除去催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。將DMF(10ml)加到殘余物中使其溶解。在冰冷卻下，往其中加入HONB(376mg)和DCC(433mg)并直接攪拌5小時(Boc-D-Glu(NHCH2Nap(1))-ONB)。
將如在實施例1-3)中制備的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37g)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.30ml)和預先制備的Boc-D-Glu(NHCH2Nap(1))-ONB并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.23ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率770mg(43.5％)Rf0.63熔點122.0-124.0℃元素分析C63H67N6O12Br·0.5H2O計算值C，63.63；H，5.76；N，7.02實測值C，63.55；H，5.83；N，6.943)Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2Nap(1))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac的合成
將Boc-D-Glu(NHCH2Nap(1))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(730mg)溶于10N-HCl/二噁烷(10ml)并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸除溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，往其中加入二異丙基乙胺(0.23ml)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由464mg Boc-Arg(Tos)-OH·1/4 H2O·3/4AcEOt，200mg HONB和230mg DCC制備)并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯，往其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12ml)并攪拌10分鐘。
將水(100ml)加到所得混合物中，分離AcOEt層。乙酸乙酯層用10％-檸檬酸水溶液、飽和鹽溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽溶液洗，然后用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物用硅膠柱色譜(Merck，Kieselgel 60，3％甲醇-氯仿)純化，由氯仿-石油醚得到沉淀形式的目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率920mg(99.7％)Rf0.58熔點109.0-112.0℃元素分析C76H85N10O15BrS·0.75H2O計算值C，60.09；H，5.79；N，9.31實測值C，61.00；H，6.20；N，9.004)環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2Nap(1))-Tyr-D-Trp-Leu-)的合成將Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2Nap(1))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(400mg)溶于90％乙酸(20ml)，往其中加入Zn(877mg)并攪拌30分鐘。除去Zn，然后蒸除溶劑，將乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)加到殘余物中。分離水層并用乙酸乙酯(100ml)洗。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽溶液洗(200ml)，無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。往其中加入乙醚，得到無色沉淀。將沉淀溶于二氯甲烷(20ml)，冰冷卻下，往其中加入HONB(96mg)和DCC(111mg)，然后在室溫攪拌2小時。除去形成的DCU，蒸除溶劑。然后將10 N-HCl/二噁烷(15ml)加到殘余物中并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，在氫氧化鈉存在下干燥殘余物。將殘余物溶于DMF(5ml)，然后往其中滴加二異丙基乙胺(0.49ml)的DMF(300ml)溶液并直接攪拌過夜。蒸除溶劑，殘余物用乙酸乙酯(100ml)洗兩次，得到淺黃色粉末。在對甲酚(100mg)和1，4-丁烷-二硫醇(0.1ml)的存在下，將如此獲得的粉末(100mg)溶于HF(5ml)并攪拌1小時。蒸除HF，然后往殘余物中加入乙醚，過濾出形成的沉淀。將該沉淀溶于少量乙酸，用水稀釋并凍干。最后，使用YMCODS-25-20柱(2×25cm；YMC Co.生產(chǎn))經(jīng)分配液相色譜純化，得到目的產(chǎn)物。
產(chǎn)率45.0mg(56.7％)氨基酸分析(在110℃下，6N-HCl中水解24小時后)(括號中是理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.93(1)；Glu 1.04(1)；Arg 0.97(1)FAB-MS(M+H)+887(理論值887)實施例12合成環(huán)(-Arg-D-Glu(Php)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-D-Glu(Php)-OBzl在用冰冷卻下，向Boc-D-Glu-OBzl(1.25克)的乙腈(80毫升)溶液中加入HONB(0.73克)和DCC(0.84克)，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去所形成的DCU，并將所得濾液加入苯基哌嗪(0.96克)的乙腈(50毫升)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸餾除去溶劑，然后將殘余物懸浮在乙酸乙酯(50毫升)和水(30毫升)中，并向所得懸浮液中加入1N鹽酸(6毫升)，同時攪拌并用冰冷卻，從而使其酸化。分離乙酸乙酯(50毫升)并用水洗滌。然后，向乙酸乙酯層中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48毫升)，并攪拌10分鐘。該乙酸乙酯層用飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。向所得濃縮物中加入石油醚，經(jīng)沉淀得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.70克(95.4％)熔點138.0-140.0℃元素分析C27H35N3O5計算值C，67.34；H，7.33；N，8.73實測值C，67.28；H，7.43；N，8.832)合成Boc-D-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac將Boc-D-Glu(Php)-OBzl(867毫克)溶解在甲醇(100毫升)中，并在10％Pd-C存在下、在氫氣流下攪拌1小時。濾出催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入DMF(10毫升)使其溶解。向其中加入HONB(376毫克)和DCC(433毫克)并直接攪拌5小時，同時用冰冷卻(Boc-D-Glu(Php)-ONB)。
在用冰冷卻的同時，將實施例1-3)中得到的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.30毫升)和預先制備的Boc-D-Glu(Php)-ONB，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.23毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率880毫克(45.9％)Rf0.80熔點99.0-100.0℃元素分析C62H70N7O12Br·0.75 H2O計算值C，62.12；H，6.01；N，8.18實測值C，61.87；H，5.84；N，7.873)合成Boc-Arg(Tos)-D-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(734毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.23毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·1/4 H2O·3/4 AcOEt(464毫克)、HONB(200毫克)和DCC(230毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該油狀產(chǎn)物經(jīng)凝膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，3％甲醇-氯仿)純化，并從氯仿石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率910毫克(98.2％)Rf0.50熔點111.0-113.5℃元素分析C75H88N11O15BrS·0.88 H2O計算值C，59.60；H，5.99；N，10.19實測值C，59.93；H，6.46；N，9.774)合成環(huán)(-Arg-D-Glu(Php)-Tyr-D-Trp-Leu-)將Boc-Arg(Tos)-D-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(400毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(874毫克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(96毫克)和DCC(110毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.49毫升)的DMF(300毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率57.0毫克(71.7％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.92(1)；Glu 0.98(1)；Arg 0.92(1)FAB-MS(M+H)+892(理論值892)實施例13合成環(huán)(-Arg-D-Glu(Bzlp)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-D-Glu(Bzlp)-OBzl在用冰冷卻下，向Boc-D-Glu-OBzl(1.25克)的乙腈(80毫升)溶液中加入HONB(0.73克)和DCC(0.84克)，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去所形成的DCU，并將所得濾液加入芐基哌嗪(1.30克)的乙腈(50毫升)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸餾除去溶劑，然后將殘余物懸浮在乙酸乙酯(50毫升)和水(30毫升)中，并向所得懸浮液中加入1N鹽酸(8毫升)，同時攪拌并用冰冷卻，從而使其酸化。分離乙酸乙酯(50毫升)并用水洗滌。然后，向乙酸乙酯層中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48毫升)，并攪拌10分鐘。該乙酸乙酯層用飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。向所得濃縮物中加入石油醚，經(jīng)沉淀得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.61克(87.8％)熔點118.0-119.0℃元素分析C28H37N3O5計算值C，67.86；H，7.52；N，8.48實測值C，67.56；H，7.57；N，8.342)合成Boc-D-Glu(Bzlp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac將Boc-D-Glu(Bzlp)-OBzl(893毫克)溶解在二噁烷(50毫升)中，并在用冰冷卻的同時，向其中加入1N氫氧化鈉(2.0毫升)并攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，然后將殘余物懸浮在乙酸乙酯(50毫升)和水(30毫升)中，向所得懸浮液中加入1N鹽酸(8毫升)，同時攪拌并用冰冷卻，從而使其酸化。分離水層，用乙酸乙酯(50毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(100毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并過濾。然后減壓蒸餾除去溶劑，向殘余物中加入DMF(10毫升)使其溶解。向其中加入HONB(376毫克)和DCC(433毫克)并直接攪拌5小時，同時用冰冷卻(Boc-D-Glu(Bzlp)-ONB)。
在用冰冷卻的同時，將實施例1-3)中得到的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.30毫升)和預先制備的Boc-D-Glu(Bzlp)-ONB，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.23毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.34克(74.5％)Rf0.58熔點102.0-104.0℃元素分析C63H72N7O12Br計算值C，63.10；H，6.05；N，8.18實測值C，62.92；H，6.26；N，8.103)合成Boc-Arg(Tos)-D-Glu(Bzlp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Glu(Bzlp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(742毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.23毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·1/4 H2O·3/4 AcOEt(464毫克)、HONB(200毫克)和DCC(230毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該油狀產(chǎn)物經(jīng)凝膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，并從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.07克(100.0％)Rf0.55熔點112.0-114.0℃元素分析C76H90N11O15BrS·H2O計算值C，59.75；H，6.07；N，10.09實測值C，59.33；H，6.03；N，10.004)合成環(huán)(-Arg-D-Glu(Bzlp)-Tyr-D-Trp-Leu-)將Boc-Arg(Tos)-D-Glu(Bzlp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.09克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(119毫克)和DCC(128毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.60毫升)的DMF(300毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率21.6毫克(21.6％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.92(1)；Glu 0.98(1)；Arg 0.91(1)FAB-MS(M+H)+906(理論值906)實施例14合成環(huán)(-Arg-D-Glu((2)-PYP)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-D-Glu((2)-Pyp)-OBzl在用冰冷卻下，向Boc-D-Glu-OBzl(1.25克)的乙腈(80毫升)溶液中加入HONB(0.73克)和DCC(0.84克)，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去所形成的DCU，并將所得濾液加入2-吡啶基哌嗪(1.13克)的乙腈(50毫升)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸餾除去溶劑，然后將殘余物溶解在乙酸乙酯(100毫升)中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48毫升)，并攪拌10分鐘。乙酸乙酯層用飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。向所得濃縮物中加入石油醚，經(jīng)沉淀得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.30克(72.8％)熔點137.0-138.5℃元素分析C26H34N4O5·0.75 H2O計算值C，62.94；H，7.21；N，11.29實測值C，62.86；H，7.05；N，11.212)合成Boc-D-Glu((2)-Pyp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac將Boc-D-Glu((2)-Pyp)-OBzl(869毫克)溶解在甲醇(100毫升)中，并在10％Pd-C存在下、在氫氣流下攪拌1小時。濾出催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入DMF(10毫升)使其溶解。向其中加入HONB(376毫克)和DCC(433毫克)并直接攪拌5小時，同時用冰冷卻(Boc-D-Glu((2)-Pyp)-ONB)。
在用冰冷卻的同時，將實施例1-3)中得到的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.30毫升)和預先制備的Boc-D-Glu((2)-Pyp)-ONB，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.23毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.30克(73.1％)Rf0.66熔點107.0-110.0℃元素分析C61H69N8O12Br計算值C，61.77；H，5.86；N，9.45實測值C，61.68；H，6.12；N，9.173)合成Boc-Arg(Tos)-D-Glu((2)-Pyp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Glu((2)-Pyp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(400毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.23毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·4/5 AcOEt(464毫克)、HONB(200毫克)和DCC(230毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該油狀產(chǎn)物經(jīng)凝膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，并從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率930毫克(100.0％)Rf0.62熔點116.0-118.0℃元素分析C74H87N12O15BrS·H2O計算值C，58.69；H，5.92；N，11.10實測值C，58.52；H，6.00；N，10.854)合成環(huán)(-Arg-D-Glu((2)-PYP)-Tyr-D-Trp-Leu-)將Boc-Arg(Tos)-D-Glu((2)-Pyp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.09克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(119毫克)和DCC(128毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.49毫升)的DMF(300毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率12.0毫克(12.1％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.92(1)；Glu 0.99(1)；Arg 0.93(1)FAB-MS(M+H)+893(理論值893)實施例15合成環(huán)(-Arg-D-Glu((2)-MeOPhp)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-D-Glu((2)-MeOPhp)-OBzl在用冰冷卻下，向Boc-D-Glu-OBzl(1.25克)的乙腈(80毫升)溶液中加入HONB(0.73克)和DCC(0.84克)，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去所形成的DCU，并將所得濾液加入2-甲氧基苯基哌嗪(854毫克)的乙腈(50毫升)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸餾除去溶劑，然后將殘余物溶解在乙酸乙酯(50毫升)中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48毫升)，并攪拌10分鐘。乙酸乙酯層用1N鹽酸、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。得到所需產(chǎn)物，為油狀物質(zhì)。
產(chǎn)率1.90克(100.0％)FAB-MS(M+H)+511(理論值511)2)合成Boc-D-Glu((2)-MeOPhp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac將Boc-D-Glu((2)-MeOPhp)-OBz1(921毫克)溶解在甲醇(100毫升)中，并在10％Pd-C存在下、在氫氣流下攪拌1小時。濾出催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入DMF(10毫升)使其溶解。向其中加入HONB(376毫克)和DCC(433毫克)并直接攪拌5小時，同時用冰冷卻(Boc-D-Glu((2)-MeOPhp)-ONB)。
在用冰冷卻的同時，將實施例1-3)中得到的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.30毫升)和預先制備的Boc-D-Glu((2)-MeOPhp)-ONB，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.23毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率780毫克(42.8％)Rf0.70熔點92.0-94.0℃元素分析C63H72N7O13Br·0.5 H2O計算值C，61.84；H，6.09；N，8.01實測值C，61.97；H，6.40；N，8.153)合成Boc-Arg(Tos)-D-Glu((2)-MeOPhp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Glu((2)-MeOPhp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(752毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.23毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·4/5 AcOEt(464毫克)、HONB(200毫克)和DCC(230毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該油狀產(chǎn)物經(jīng)凝膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，2％甲醇 氯仿)純化，并從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率950毫克(100.0％)Rf0.54熔點112.0-114.0℃FAB-MS(M+H)+1525(理論值1525)4)合成環(huán)(-Arg-D-Glu((2)-MeOPhp)-Tyr-D-Trp-Leu-)將Boc-Arg(Tos)-D-Glu((2)-MeOPhp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.09克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(119毫克)和DCC(128毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.60毫升)的DMF(300毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率9.3毫克(9.20％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.90(1)；Glu 1.01(1)；Arg 0.93(1)FAB-MS(M+H)+922(理論值922)實施例16合成環(huán)(-Arg-D-Glu((4)-MeOPhp)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-D-Glu((2)-MeOPhp)-OBzl在用冰冷卻下，向Boc-D-Glu-OBzl(1.25克)的乙腈(80毫升)溶液中加入HONB(0.73克)和DCC(0.84克)，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去所形成的DCU，并將所得濾液加入2-甲氧基苯基哌嗪(854毫克)的乙腈(50毫升)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸餾除去溶劑，然后將殘余物溶解在乙酸乙酯(50毫升)中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48毫升)，并攪拌10分鐘。乙酸乙酯層用1N鹽酸、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。得到所需產(chǎn)物，為油狀物質(zhì)。
產(chǎn)率1.90克(100.0％)FAB-MS(M+H)+511(理論值511)2)合成Boc-D-Glu((4)-MeOPhp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac將Boc-D-Glu((4)-MeOPhp)-OBzl(921毫克)溶解在甲醇(100毫升)中，并在10％Pd-C存在下、在氫氣流下攪拌1小時。濾出催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入DMF(10毫升)使其溶解。向其中加入HONB(376毫克)和DCC(433毫克)并直接攪拌5小時，同時用冰冷卻(Boc-D-Glu((4)-MeOPhp)-ONB)。
在用冰冷卻的同時，將實施例1-3)中得到的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.30毫升)和預先制備的Boc-D-Glu((4)-MeOPhp)-ONB，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.23毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.24克(68.9％)Rf0.70熔點96.0-98.0℃元素分析C63H72N7O13Br·0.5 H2O計算值C，62.27；H，5.97；N，8.07實測值C，61.94；H，6.27；N，8.033)合成Boc-Arg(Tos)-D-Glu((4)-MeOPhp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Glu((4)-MeOPhp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(752毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.23毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·4/5 AcOEt(464毫克)、HONB(200毫克)和DCC(230毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該油狀產(chǎn)物經(jīng)凝膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，并從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率950毫克(100.0％)Rf0.53熔點115.0-117.0℃元素分析C76H90N11O16BrS·0.5 H2O計算值C，59.58；H，5.97；N，10.04
實測值C，59.10；H，6.26；N，9.824)合成環(huán)(-Arg-D-Glu((4)-MeOPhp)-Tyr-D-Trp-Lcu-)將Boc-Arg(Tos)-D-Glu((4)-MeOPhp)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.09克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(119毫克)和DCC(128毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.60毫升)的DMF(300毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率24.6毫克(24.4％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.90(1)；Glu 1.02(1)；Arg 0.92(1)FAB-MS(M+H)+922(理論值922)實施例17合成環(huán)(-Arg-Glu(Php)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-Glu(Php)-OBzl在用冰冷卻下，向Boc-Glu-OBzl(1.25克)的乙腈(80毫升)溶液中加入HONB(0.73克)和DCC(0.84克)，然后在室溫攪拌3小時。過濾除去所形成的DCU，并將所得濾液加入苯基哌嗪(0.96克)的乙腈(50毫升)溶液中，然后直接攪拌11小時。蒸餾除去溶劑，然后將殘余物溶解在乙酸乙酯(100毫升)中，并向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48毫升)，并攪拌10分鐘。該乙酸乙酯層用1N鹽酸、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。向所得濃縮物中加入石油醚，經(jīng)沉淀得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.60克(89.8％)熔點140.0-141.5℃元素分析C27H35N3O5計算值C，67.34；H，7.33；N，8.73實測值C，67.28；H，7.43；N，8.832)合成Boc-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac將Boc-Glu(Php)-0Bzl(867毫克)溶解在甲醇(100毫升)中，并在10％Pd-C存在下、在氫氣流下攪拌1小時。濾出催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入DMF(10毫升)使其溶解。向其中加入HONB(376毫克)和DCC(433毫克)并直接攪拌5小時，同時用冰冷卻(Boc-Glu(Php)-ONB)。
在用冰冷卻的同時，將實施例1-3)中得到的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(1.37克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.30毫升)和預先制備的Boc-Glu(Php)-ONB，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.23毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.23克(69.2％)Rf0.70熔點95.0-98.0℃元素分析C62H70N7O12Br
計算值C，62.83；H，5.95；N，8.27實測值C，62.59；H，6.14；N，8.183)合成Boc-Arg(Tos)-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(734毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.23毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·4/5 AcOEt(464毫克)、HONB(200毫克)和DCC(230毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該油狀產(chǎn)物經(jīng)凝膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，并從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率930毫克(100.0％)Rf0.64熔點111.0-112.0℃元素分析C75H88N11O15BrS·0.25 H2O計算值C，60.05；H，5.95；N，10.27實測值C，59.65；H，6.06；N，9.974)合成環(huán)(-Arg-Glu(Php)-Tyr-D-Trp-Leu-)將Boc-Arg(Tos)-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(874毫克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(119毫克)和DCC(128毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.60毫升)的DMF(300毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率22.5毫克(22.7％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.91(1)；Glu 0.99(1)；Arg 0.91(1)FAB-MS(M+H)+892(理論值892)實施例18合成環(huán)(-Lys-D-Glu(Php)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-Lys(Cl-Z)-D-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將實施例12-2)中制備的Boc-D-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(734毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.23毫升)和Boc-Lys(Cl-Z)-ONB(由Boc-Lys(Cl-Z)-OH(309毫克)、HONB(155毫克)和DCC(179毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.12毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該油狀產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，并從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率920毫克(100.0％)Rf0.68熔點99.0-101.0℃元素分析C76H87N9O15BrCl計算值C，61.60；H，5.92；N，8.51實測值C，61.65；H，6.22；N，8.642)合成環(huán)(-Lys-D-Glu(Php)-Tyr-D-Trp-Leu-)將Boc-Lys(Cl-Z)-D-Glu(Php)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.10克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(121毫克)和DCC(139毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.60毫升)的DMF(300毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率22.8毫克(23.5％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.91(1)；Glu 1.00(1)；Arg 0.94(1)
FAB-MS(M+H)+864(理論值864)實施例19合成環(huán)(-Arg-D-Lys(COCH2CH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2Ph)-OH在用冰冷卻下，向4-苯基-正丁酸(381毫克)的DMF(20毫升)溶液中加入HONB(430毫克)和DCC(495毫克)，然后直接攪拌11小時(PhCH2CH2CH2CONB)。
在用冰冷卻下，向Boc-D-Lys-OH(2.00克)的DMF(15毫升)溶液中加入二異丙基乙胺(0.40毫升)和預先制備的PhCH2CH2CH2CONB，然后直接攪拌11小時。蒸餾除去溶劑，然后將殘余物溶解在乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)中，并在用冰冷卻的同時向所得溶液中加入0.1N鹽酸，從而使其酸化。然后分離乙酸乙酯層，并用飽和鹽水溶液(100毫升×2)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，并且不需純化基將如此得到的油狀產(chǎn)物直接用于下一步驟2)中。2)合成Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac在冰冷卻下，將實施例2-5)中制備的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(800毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(20毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(10毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.13毫升)和Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2Ph)-ONB(由前述步驟1)得到的Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2Ph)-OH、HONB(358毫克)和DCC(413毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.26毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率720毫克(73.4％)Rf0.45熔點112.0-115.0℃元素分析C76H91N10O15BrS·0.17 H2O
計算值C，60.51；H，6.17；N，9.28實測值C，60.89；H，6.57；N，9.493)合成環(huán)(-Arg-D-Lys(COCH2CH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)將Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.09克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(140毫克)和DCC(161毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.50毫升)的DMF(100毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率28.5毫克(28.7％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.90(1)；Lys 0.93(1)；Arg 0.95(1)FAB-MS(M+H)+893(理論值893)實施例20合成環(huán)(-Arg-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-OH在用冰冷卻下，向6-苯基己酸(423毫克)的DMF(20毫升)溶液中加入HONB(430毫克)和DCC(495毫克)，然后直接攪拌11小時(PhCH2CH2CH2CH2CH2CONB)。
在用冰冷卻下，向Boc-D-Lys-OH(2.00克)的DMF(15毫升)溶液中加入二異丙基乙胺(0.40毫升)和預先制備的PhCH2CH2CH2CH2CH2CONB，然后直接攪拌11小時。蒸餾除去溶劑，然后將殘余物溶解在乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)中，并在用冰冷卻的同時向所得溶液中加入0.1N鹽酸，從而使其酸化。然后分離乙酸乙酯層，并用飽和鹽水溶液(100毫升×2)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，并且不需純化基將如此得到的油狀產(chǎn)物直接用于下一步驟2)中。2)合成Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac在冰冷卻下，將實施例2-5)中制備的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(800毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(20毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(10毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.13毫升)和Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-ONB(由前述步驟1)得到的Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-OH、HONB(358毫克)和DCC(413毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.26毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率820毫克(80.1％)Rf0.59熔點107.0-110.0℃FAB-MS(M+H)+1524(理論值1524)3)合成環(huán)(-Arg-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)將Boc-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.07克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(140毫克)和DCC(161毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.50毫升)的DMF(100毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率27.0毫克(26.8％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.90(1)；Lys 0.93(1)；Arg 0.92(1)FAB-MS(M+H)+921(理論值921)實施例21合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-Lys(COPh)-OH·CHA將Boc-Lys-OH(2.00克)溶解在二噁烷(28毫升)和水(14毫升)中，并在用冰冷卻的同時，向其中滴加1N氫氧化鈉(17.1毫升)和苯甲酰氯(1.26克)的二噁烷溶液(10毫升)。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)中，然后在冰冷卻下，向所得溶液中加入1N鹽酸使其酸化，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用飽和鹽水溶液(100毫升×2)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。將所得濃縮物溶解在氯仿中，然后向其中加入環(huán)己胺(1.01毫升)，并蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入石油醚沉淀出所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率2.16克(59.2％)
熔點92.0-95.5℃FAB-MS(M+H)+(以Boc-Lys(COPh)-OH的形式)350(理論值350)2)合成Boc-Lys(COPh)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻下，將Boc-D-Trp-Leu-OPac(1.07克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(15毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.44毫升)和Boc-Lys(COPh)-ONB(由前述步驟1)中得到的Boc-Lys(COPh)-OH·CHA(1.08克)、HONB(466毫克)和DCC(537毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(4.68毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(300毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.53克(100.0％)Rf0.58熔點91.0-93.0℃元素分析C43H53N5O8·0.75 H2O計算值C，66.09；H，7.03；N，8.96實測值C，66.42；H，7.34；N，8.823)合成Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Leu-OPac將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl(793毫克)溶解在甲醇(100毫升)中，并在10％Pd-C存在下、在氫氣流下攪拌1小時。濾出催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入DMF(10毫升)使其溶解。向其中加入HONB(387毫克)和DCC(446毫克)并直接攪拌5小時，同時用冰冷卻(Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB)。
在用冰冷卻的同時，將前述步驟2)中制備的Boc-Lys(COPh)-D-Trp-Leu-OPac(1.34克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.35毫升)和預先制備的Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.32毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.24克(70.8％)Rf0.50熔點202.0-204.5℃元素分析C56H69N7O10計算值C，67.25；H，6.95；N，9.80實測值C，66.95；H，6.89；N，9.744)合成Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Leu-OPac(1.14克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.23毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·3/5 AcOEt·1/5 H2O(829毫克)、HONB(306毫克)和DCC(353毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.22毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該油狀產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，2％甲醇-氯仿)純化，并從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.44克(96.3％)Rf0.37熔點125.0-128.0℃元素分析C69H87N11O13S·1.5 H2O計算值C，61.95；H，6.78；N，11.52
實測值C，61.74；H，6.56；N，11.475)合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)D-Trp-Leu-)將Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Leu-OPac(1.25克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.25克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(140毫克)和DCC(161毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.70毫升)的DMF(100毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率67.5毫克(57.6％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Lys 0.84(1)；Glu 0.92(1)；Arg 0.83(1)FAB-MS(M+H)+920(理論值920)實施例22合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Asp(NHCH2Ph)-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-Asp(NHCH2Ph)-OBzl在用冰冷卻的同時，將HONB(0.73克)和DCC(0.84克)加至Boc-Asp-OBzl(1.20克)的乙腈(80毫升)溶液中，并在室溫攪拌3小時。過濾除去所形成的DCU，并將所得濾液加至芐胺(0.43克)的乙腈(50毫升)溶液中，然后直接攪拌11小時。
蒸餾除去溶劑，然后將殘余物溶解在乙酸乙酯(100毫升)中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.48毫升)，并攪拌10分鐘。向其中加入水，分離乙酸乙酯層，然后用飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。向所得濃縮物中加入石油醚，沉淀出所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.54克(100.0％)熔點123.0-125.0℃元素分析C23H28N2O5計算值C，66.97；H，6.84；N，6.79實測值C，67.39；H，6.95；N，7.172)合成Boc-Asp(NHCH2Ph)-D-Trp-Leu-OPac將Boc-Asp(NHCH2Ph)-OBzl(990毫克)溶解在甲醇(100毫升)中，并在10％Pd-C存在下、在氫氣流下攪拌1小時。濾出催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入DMF(10毫升)使其溶解。向其中加入HONB(466毫克)和DCC(537毫克)并直接攪拌5小時，同時用冰冷卻(Boc-Asp(NHCH2Ph)-ONB)。在用冰冷卻下，將Boc-D-Trp-Leu-OPac(1.07克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(15毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(100毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.44毫升)和預先制備的Boc-Asp(NHCH2Ph)-ONB，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.32毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(300毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.35克(91.0％)Rf0.57熔點100.0-103.0℃元素分析C41H49N5O8·H2O計算值C，64.98；H，6.78；N，9.24
實測值C，64.68；H，6.89；N，9.213)合成Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Asp(NHCH2Ph)-D-Trp-Leu-OPac將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl(793毫克)溶解在甲醇(100毫升)中，并在10％Pd-C存在下、在氫氣流下攪拌1小時。濾出催化劑，然后減壓蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入DMF(10毫升)使其溶解。向其中加入HONB(387毫克)和DCC(446毫克)并直接攪拌5小時，同時用冰冷卻(Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB)。
在用冰冷卻的同時，將前述步驟2)中制備的Boc-Asp(NHCH2Ph)-D-Trp-Leu-OPac(1.29克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.38毫升)和預先制備的Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.24毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該油狀產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，3％甲醇-氯仿)純化，并從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率360毫克(21.1％)Rf0.24熔點165.0-168.0℃元素分析C54H65N7O10·0.75 H2O計算值C，65.80；H，6.80；N，9.94實測值C，65.59；H，6.69；N，10.214)合成Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Asp(NHCH2Ph)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Asp(NHCH2Ph)-D-Trp-Leu-OPac(350毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.39毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·3/5 AcOEt·1/5 H2O(359毫克)、HONB(146毫克)和DCC(167毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.10毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率410毫克(91.3％)Rf0.39熔點148.0-150.0℃元素分析C67H83N11O13·2.5 H2O計算值C，60.60；H，6.68；N，11.60實測值C，60.70；H，6.57；N，11.885)合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Asp(NHCH2Ph)-D-Trp-Leu-)將Boc-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Asp(NHCH2Ph)-D-Trp-Leu-OPac(360毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.28克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(140毫克)和DCC(161毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.70毫升)的DMF(100毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20)柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率5.6毫克(6.72％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Asp 0.63(1)；Glu 1.05(1)；Arg 0.96(1)FAB-MS(M+H)+892(理論值892)實施例23合成環(huán)(-D-Tyr-Arg-D-Trp-Leu-D-Lys(SO2Nap(1))-)1)合成Boc-Arg(Tos)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻下，將實施例1-2)制備的Boc-D-Trp-Leu-OPac(2.14克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(15毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(15毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.79毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·3/4 AcOEt·1/4 H2O(3.59克)、HONB(1.58克)和DCC(1.82克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.94毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該乙酸乙酯層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率3.37克(100.0％)Rf0.53熔點94.0-96.5℃元素分析C43H55N7O9S·0.5 H2O計算值C，60.40；H，6.60；N，11.47實測值C，60.13；H，6.81；N，11.522)合成Boc-D-Tyr(Br-Z)-Arg(Tos)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-Arg(Tos)-D-Trp-Leu-OPac(1.69克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(15毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(100毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.79毫升)和Boc-D-Tyr(Br-Z)-ONB(由Boc-D-Tyr(Br-Z)-OH(1.09克)、HONB(430毫克)和DCC(495毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.29毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(300毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率2.09克(93.7％)Rf0.62熔點105.0-107.5℃元素分析C60H69N8O13BrS·2.5 H2O計算值C，56.86；H，5.58；N，8.84實測值C，56.52；H，5.76；N，8.883)合成Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr(Br-Z)-Arg(Tos)-D-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Tyr(Br-Z)-Arg(Tos)-D-Trp-Leu-OPac(800毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。
將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.26毫升)和Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-ONB(由實施例1-4)制備的Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-OH·CHA(643毫克)、HONB(251毫克)和DCC(289毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.16毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率0.99克(98.1％)Rf0.65熔點112.0-115.0℃
元素分析C76H87N10O16BrS2計算值C，59.25；H，5.69；N，9.09實測值C，58.95；H，6.08；N，9.094)合成環(huán)(-D-Tyr-Arg-D-Trp-Leu-D-Lys(SO2Nap(1))-)將Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr(Br-Z)-Arg(Tos)-D-Trp-Lcu-OPac(530毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.12克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(123毫克)和DCC(142毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.62毫升)的DMF(100毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率58.5毫克(54.3％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 1.03(1)；Lys(0.20(1)；Arg 0.99(1)FAB-MS(M+H)+937(理論值937)實施例24合成環(huán)(-D-Leu-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr-Arg-D-Trp-)1)合成H-D-Leu-OBzl·HCl向Boc-D-Leu-OH·H2O(24.93克)的甲醇(500毫升)-水(50毫升)溶液中滴加碳酸銫(16.29克)水溶液。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在DMF(50毫升)中。向其中滴加芐基溴(17.1克)的DMF(30毫升)溶液并攪拌過夜。然后蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(500毫升)中，用飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。在用冰冷卻的同時，向該油狀產(chǎn)物中加入10N鹽酸/二噁烷(300毫升)并攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
不需純化即將所得產(chǎn)物直接用于下一步驟2)中。2)合成Boc-D-Trp-D-Leu-OPac將H-D-Leu-OBzl·HCl(5.16克)溶解在乙腈(200毫升)中并用冰冷卻，向其中加入二異丙基乙胺(3.96毫升)和Boc-D-Trp-ONB(由Boc-D-Trp-OH(6.69克)、HONB(4.30克)和DCC(4.95克)制備)并攪拌過夜。過濾除去所產(chǎn)生的DCU，將所得濾液濃縮，并將濃縮物溶解在乙酸乙酯(500毫升)中。然后，向所得溶液中加入N，N-二異丙基乙胺(10.0毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(500毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。從氯仿-石油醚中沉淀，得到油狀產(chǎn)物。將該油狀產(chǎn)物溶解在甲醇(500毫升)中，然后在10％Pd-C存在下、在氫氣流中進行催化還原。還原后，過濾除去所用的催化劑，將所得濾液濃縮至50毫升，向其中滴加碳酸銫(3.26克)的水溶液(10毫升)。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在DMF(30毫升)中，向其中加入苯甲酰甲基溴(3.98克)的DMF(30毫升)溶液，并攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(300毫升)中，然后，用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌所得溶液，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。不需純化即將所得產(chǎn)物直接用于下一步驟3)中。
產(chǎn)率9.53克(89.0％)Rf0.81熔點111-113℃
元素分析C30H37N3O6計算值C，67.27；H，6.96；N，7.84理論值C，67.59；H，7.28；N，7.543)合成Boc-Arg(Tos)-D-Trp-D-Leu-OPac在用冰冷卻下，將Boc-D-Trp-D-Leu-OPac(2.14克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(15毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(15毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.79毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·3/4AcOEt·1/4H2O(3.59克)、HONB(1.58克)和DCC(1.82克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.94毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該乙酸乙酯層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率3.37克(100.0％)Rf0.53熔點108.0-110℃元素分析C43H55N7O9S計算值C，61.05；H，6.55；N，11.59實測值C，61.04；H，6.91；N，10.994)合成Boc-D-Tyr(Br-Z)-Arg(Tos)-D-Trp-D-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-Arg(Tos)-D-Trp-D-Leu-OPac(1.69克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(15毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(100毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.79毫升)和Boc-D-Tyr(Br-Z)-ONB(由Boc-D-Tyr(Br-Z)-OH(1.09克)、HONB(430毫克)和DCC(495毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.29毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.69克(69.1％)Rf0.59熔點105.0-107.0℃元素分析C60H69N8O13BrS·H2O計算值C，58.11；H，5.77；N，9.03實測值C，57.75；H，5.97；N，8.905)合成Boc-Lys(SO2Nap(1))-OH·CHA將Boc-Lys-OH(2.00克)溶解在二噁烷(28毫升)-水(14毫升)中，并在冰冷卻下，向其中滴加1N氫氧化鈉(17.1毫升)和1-萘磺酰氯(2.03克)的二噁烷溶液(10毫升)并攪拌。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(100毫升)-水(100毫升)中，在用冰冷卻的同時，向所得溶液中加入1N鹽酸使其酸化，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用飽和鹽水溶液(100毫升×2)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。將所得濃縮物溶解在氯仿中，向其中加入環(huán)己胺(1.01毫升)，蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入石油醚，經(jīng)沉淀得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率3.28克(75.4％)熔點90.0-93.5℃FAB-MS(M+H)+(以Boc-Lys(SO2Nap(1))-OH的形式)436(理論值436)6)合成Boc-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr(Br-Z)-Arg(Tos)-D-Trp-D-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Tyr(Br-Z)-Arg(Tos)-D-Trp-D-Leu-OPac(800毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。
將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.26毫升)和Boc-Lys(SO2Nap(1))-ONB(由實施例1-4)制備的Boc-Lys(SO2Nap(1))-OH·CHA(643毫克)、HONB(251毫克)和DCC(289毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.16毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。從氯仿石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.01克(100.0％)Rf0.60熔點115.0-117.0℃元素分析C76H87N10O16BrS2·0.25H2O計算值C，59.08；H，5.68；N，9.07實測值C，58.96；H，6.11；N，9.017)合成環(huán)(-D-Leu-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr-Arg-D-Trp-)將Boc-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr(Br-Z)-Arg(Tos)-D-Trp-D-Leu-OPac(530毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.12克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(123毫克)和DCC(142毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.62毫升)的DMF(100毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率56.1毫克(52.2％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.89(1)；Lys 0.17(1)；Arg 0.86(1)FAB-MS(M+H)+937(理論值937)實施例25合成環(huán)(-D-Tyr-Arg(Tos)-D-Trp-Leu-D-Lys(SO2Nap(1))-)將實施例23-3)制備的Boc-D-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr(Br-Z)Arg(Tos)-D-Trp-Leu-OPac(530毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.12克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(123毫克)和DCC(142毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.62毫升)的DMF(100毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。將如此得到的淡黃色粉末(50毫克)溶解在DMF(50毫升)中，并在鈀黑存在下、在氫氣流中進行催化還原。還原后，濾出所用的催化劑，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，10％甲醇-氯仿)純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率7.0毫克(16.9％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.95(1)；Lys 0.25(1)；Arg 0.65(1)FAB-MS(M+H)+1091(理論值1091)實施例26合成環(huán)(-Arg(Tos)-D-Lys(SO2Nap(1))-Tyr-D-Trp-Leu-)將實施例1-6)制備的Boc-Arg(Tos)-D-Lys(SO2Nap(1))-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-OPac(530毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.12克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(123毫克)和DCC(142毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.62毫升)的DMF(100毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。將如此得到的淡黃色粉末(80毫克)溶解在DMF(50毫升)中，并在鈀黑存在下、在氫氣流中進行催化還原。還原后，濾出所用的催化劑，并蒸餾除去溶劑。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率66毫克(100％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.91(1)；Lys 0.22(1)；Arg 0.52(1)FAB-MS(M+H)+1091(理論值1091)實施例27合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Phe-)1)合成Boc-Phe-Arg(Tos)-OPac按照與實施例2-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-Arg(Tos)-OBzl(520毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-Phe-ONB(由Boc-Phe-OH(531毫克)、HONB(394毫克)和DCC(454毫克)制備)，得到Boc-Phe-Arg(Tos)-OBzl。然后，按照與實施例2-3)相同的方法，通過在10％Pd-C存在下、在甲醇中進行催化還原，除去該化合物中的Bzl基團，用碳酸銫(358毫克)和苯甲酰甲基溴(418毫克)處理如此還原的化合物，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率693毫克(100％)Rf0.62熔點85.0-87.5℃
元素分析C35H43N5O8S計算值C，60.59；H，6.25；N，10.09實測值C，60.40；H，6.27；N，9.952)合成Boc-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac按照與實施例4-1)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-Phe-Arg(Tos)-OPac(690毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-D-Trp-ONB(由Boc-D-Trp-OH(670毫克)、HONB(430毫克)和DCC(495毫克)制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率660毫克(75.0％)Rf0.56熔點113.0-115.0℃元素分析C46H53N7O9S計算值C，62.78；H，6.07；N，11.14實測值C，62.52；H，6.00；N，11.003)合成Boc-Try(Br-Z)-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac按照與實施例1-3)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac(315毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-Tyr(Br-Z)-ONB(由Boc-Tyr(Br-Z)-OH(988毫克)、HONB(394毫克)和DCC(413毫克)制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率410毫克(91.2％)Rf0.60熔點108.0-110.0℃元素分析C63H67N8O13BrS·H2O計算值C，59.38；H，5.30；N，8.79實測值C，59.34；H，5.05；N，8.854)合成Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac按照與實施例8-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac(390毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB(通過用10％Pd-C催化還原除去Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl(441毫克)的Bzl基團、然后向其中加入HONB(197毫克)和DCC(227毫克)進行制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率470毫克(100％)Rf0.58熔點101.0-103.0℃元素分析C76H83N10O15BrS·H2O計算值C，61.14；H，5.60；N，9.38實測值C，60.95；H，5.55；N，9.275)合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Phe-)按照與實施例2-8)相同的方法，將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac(450毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(987毫克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在氯仿(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(541毫克)和DCC(623毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(30毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.54毫升)的DMF(250毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率99.0毫克(37.0％)
氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Phe 1.00(1)；Tyr 0.93(1)；Glu 1.02(1)；Arg 1.02(1)FAB-MS(M+H)+885(理論值885)實施例28合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Trp-)1)合成Boc-Trp-Arg(Tos)-OPac按照與實施例2-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-Arg(Tos)-OBzl(520毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-Trp-ONB(由Boc-Trp-OH(670毫克)、HONB(430毫克)和DCC(495毫克)制備)，得到Boc-Trp-Arg(Tos)-OBzl。然后，按照與實施例2-3)相同的方法，通過在10％Pd-C存在下、在甲醇中進行催化還原，除去該化合物中的Bzl基團，用碳酸銫(358毫克)和苯甲酰甲基溴(418毫克)處理如此還原的化合物，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率734毫克(100％)Rf0.60熔點107.0-109.0℃元素分析C37H44N6O8S計算值C，60.64；H，6.05；N，11.47實測值C，60.50；H，5.97；N，11.282)合成Boc-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac按照與實施例4-1)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-Trp-Arg(Tos)-OPac(734毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-D-Trp-ONB(由Boc-D-Trp-OH(670毫克)、HONB(430毫克)和DCC(495毫克)制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率900毫克(97.9％)Rf0.50熔點124.0-125.0℃元素分析C48H54N8O9S計算值C，62.73；H，5.92；N，12.19
實測值C，62.55；H，5.71；N，11.903)合成Boc-Try(Br-Z)-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac按照與實施例1-3)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac(450毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-Tyr(Br-Z)-ONB(由Boc-Tyr(Br-Z)-OH(988毫克)、HONB(394毫克)和DCC(413毫克)制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率530毫克(83.5％)Rf0.50熔點122.0-124.0℃元素分析C65H68N9O13BrS·0.25 H2O計算值C，60.06；H，5.27；N，9.70實測值C，59.94；H，5.27；N，9.554)合成Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac按照與實施例8-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac(510毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB(通過用10％Pd-C催化還原除去Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl(441毫克)的Bzl基團、然后向其中加入HONB(197毫克)和DCC(227毫克)進行制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率590毫克(100％)Rf0.50熔點112.0-114.0℃元素分析C78H84N11O15BrS·0.75 H2O計算值C，60.79；H，5.49；N，10.00實測值C，60.49；H，5.45；N，9.875)合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Trp-)按照與實施例2-8)相同的方法，將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac(570毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.22克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在氯仿(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(668毫克)和DCC(770毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(30毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.67毫升)的DMF(250毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率51.0毫克(14.8％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Tyr 0.93(1)；Glu 1.00(1)；Arg 1.02(1)FAB-MS(M+H)+924(理論值924)實施例29合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Phe-)1)合成Boc-Lys(COPh)-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac按照與實施例21-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OBzl(450毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-Lys(COPh)-ONB(由Boc-Lys(COPh)-OH·CHA(449毫克)、HONB(197毫克)和DCC(227毫克)制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率330毫克(60.5％)Rf0.57熔點116.0-118.5℃
元素分析C59H69N9O11S·0.25 H2O計算值C，63.45；H，6.23；N，11.29實測值C，63.24；H，6.17；N，10.992)合成Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac按照與實施例8-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-Lys(COPh)-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac(310毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB(通過用10％Pd-C催化還原、然后向其中加入HONB(197毫克)和DCC(227毫克)除去Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl(441毫克)的Bzl基團進行制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率376毫克(100％)Rf0.58熔點119.0-121.5℃元素分析C72H85N11O13S·1.5H2O計算值C，63.05；H，6.25；N，11.23實測值C，62.77；H，6.23；N，10.953)合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Phe-)按照與實施例2-8)相同的方法，將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Phe-Arg(Tos)-OPac(480毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.17克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在氯仿(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(640毫克)和DCC(737毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(30毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.64毫升)的DMF(250毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率19.5毫克(5.7％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Phe 1.00(1)；Lys 0.84(1)；Glu 1.02(1)；Arg 1.02(1)FAB-MS(M+H)+954(理論值954)實施例30合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Trp-)1)合成Boc-Lys(COPh)-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac按照與實施例21-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac(450毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-Lys(COPh)-ONB(由Boc-Lys(COPh)-OH·CHA(449毫克)、HONB(197毫克)和DCC(227毫克)制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率510毫克(90.4％)Rf0.46熔點128.0-131.0℃元素分析C61H70N10O11S計算值C，63.64；H，6.13；N，12.17實測值C，63.51；H，6.10；N，12.032)合成Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac按照與實施例8-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中除去Boc-Lys(COPh)-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac(310毫克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.4毫升)和Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB(通過用10％Pd-C催化還原除去Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl(441毫克)的Bzl基團、然后向其中加入HONB(197毫克)和DCC(227毫克)進行制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率386毫克(100％)Rf0.50熔點118.0-120.0℃3)合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Trp-)按照與實施例2-8)相同的方法，將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(COPh)-D-Trp-Trp-Arg(Tos)-OPac(360毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(851毫克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在氯仿(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(466毫克)和DCC(536毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(30毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.47毫升)的DMF(250毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率36毫克(13.9％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Lys 0.84(1)；Glu 1.02(1)；Arg 1.02(1)FAB-MS(M+H)+993(理論值993)實施例31合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(CONap(1))-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-Lys(Cl-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac按照與實施例2-4)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(100毫升)中除去Boc-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(29.7毫克)的Boc基團。然后，按照與實施例18-1)相同的方法，向所得化合物中加入二異丙基乙胺(7.60毫升)和Boc-Lys(Cl-Z)-ONB(由Boc-Lys(Cl-Z)-OH(16.1克)、HONB(7.63克)和DCC(8.79克)制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率34.3克(85.2％)Rf0.60熔點l03.0-105.0℃元素分析C57H72N9O12ClS·0.75 H2O計算值C，59.21；H，6.28；N，10.90實測值C，59.14；H，6.25；N，10.882)合成Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(Cl-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac按照與實施例8-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(200毫升)中除去Boc-Lys(Cl-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(25.0克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(4.40毫升)和Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB(通過用10％Pd-C催化還原除去Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl(10.7克)的Bzl基團、然后向其中加入HONB(4.77克)和DCC(5.49克)進行制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率27.1克(90.0％)Rf0.60熔點102.0-104.0℃元素分析C70H88N11O14ClS·0.25HO3)合成環(huán)(-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(Cl-Z)-D-Trp-Leu-)按照與實施例30-3)相同的方法，將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(Cl-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(5.00克)溶解在90％乙酸(200毫升)中，向其中加入鋅(11.9克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(500毫升)和水(500毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(500毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(500毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在氯仿(300毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(1.30克)和DCC(1.50克)，然后在4℃攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(200毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(300毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(6.30毫升)的DMF(3000毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙醇洗滌兩次，得到淡黃色粉末。
產(chǎn)率2.88克(72.3％)FAB-MS(M+H)+1138(理論值1138)4)合成環(huán)(-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(CONap(1))-D-Trp-Leu-)向1-萘甲酸(193毫克)的DMF(20毫升)溶液中加入HONB(224毫克)和DCC(258毫克)，并直接攪拌11小時(Nap(1)CO-ONB)。將環(huán)(-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(Cl-Z)-D-Trp-Leu-)(710毫克)溶解在DMF(150毫升)中，然后在鈀黑存在下、在氫氣流中攪拌3天。濾出催化劑，將溶劑濃縮至20毫升。向所得濃縮物中加入二異丙基乙胺(0.23毫升)和預先制備的Nap(1)CO-ONB，并在室溫直接攪拌11小時。減壓蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙醇洗滌兩次。由此得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率490毫克(70.0％)FAB-MS(M+H)+1124(理論值1124)5)合成環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(CONap(1))-D-Trp-Leu-)在對甲酚(200毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.2毫升)存在下，將環(huán)(-Arg(Tos)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(CONap(1))-D-Trp-Leu-)(150毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率117毫克(90.7％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Lys 0.84(1)；Glu 1.02(1)；Arg 1.02(1)FAB-MS(M+H)+970(理論值970)實施例32合成環(huán)(-Lys(異丙基)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr-D-Lys(Nic)-Leu-)1)合成Boc-D-Lys(Nic)-Leu-OBzl將H-Leu-OBzl·Tos(1.12克)溶解在DMF(100毫升)中，并用冰冷卻，向其中加入二異丙基乙胺(0.52毫升)和Boc-D-Lys(Nic)-ONB(由Boc-D-Lys(Nic)-OH(1.00克)、HONB(613毫克)和DCC(706毫克)制備)并攪拌過夜。過濾除去所形成的DCU，將所得濾液濃縮，將濃縮物溶解在乙酸乙酯(100毫升)中，向所得溶液中加入N，N-二異丙基乙胺(0.37毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.54克(97.5％)FAB-MS(M+H)+554(理論值554)2)合成Boc-D-Lys(Nic)-Leu-0Pac將Boc-D-Lys(Nic)-Leu-OBzl(1.45克)溶解在甲醇(300毫升)中，并在10％Pd-C存在下、在氫氣流中進行催化還原。濾出催化劑，將所得濾液濃縮至10毫升，向其中滴加碳酸銫(430毫克)的水溶液(15毫升)。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在DMF(20毫升)中，并向其中加入苯甲酰甲基溴(521毫克)的DMF(50毫升)溶液。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(150毫升)中。然后，用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌所得溶液，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.25克(82.1％)Rf0.59FAB-MS(M+H)+582(理論值582)3)合成Boc-Tyr(Br-Z)-D-Lys(Nic)-Leu-OPac將Boc-Lys(Nic)-Leu-OPac(1.97克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(20毫升)中，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將其溶解在DMF(100毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.75毫升)和Boc-Tyr(Br-Z)-ONB(由Boc-Tyr(Br-Z)-OH(1.42克)、HONB(562毫克)和DCC(646毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.38毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(300毫升)，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后，從氯仿石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.89克(100.0％)Rf0.60熔點106.0-108.0℃元素分析C48H56N5O11Br計算值C，60.12；H，5.89；N，7.30實測值C，60.10；H，5.74；N，7.284)合成Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Lys(Nic)-Leu-OPac按照與實施例8-2)相同的方法，在10N鹽酸/二噁烷(200毫升)中除去Boc-Tyr(Br-Z)-D-Lys(Nic)-Leu-OPac(1.68克)的Boc基團，并向所得化合物中加入二異丙基乙胺(0.66毫升)和Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-ONB(通過用10％Pd-C催化還原除去Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-OBzl(793毫克)的Bzl基團、然后向其中加入HONB(387毫克)和DCC(446毫克)進行制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.22克(58.5％)Rf0.59熔點145.0-148.0℃元素分析C61H72N7O13Br計算值C，60.82；H，6.02；N，8.14實測值C，60.73；H，5.88；N，7.955)合成Boc-Lys(Z，異丙基)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Lys(Nic)-Leu-OPac
將Boc-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Lys(Nic)-Leu-OPac(1.02克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(20毫升)中，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將其溶解在DMF(100毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.17毫升)和Boc-Lys(Z，異丙基)-ONB(由Boc-Lys(Z，異丙基)-OH(854毫克)、HONB(394毫克)和DCC(454毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.17毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后，從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率1.28克(100％)Rf0.63熔點148.0-150.0℃元素分析C78H96N9O16Br計算值C，62.64；H，6.47；N，8.43實測值C，62.47；H，6.44；N，8.396)合成環(huán)(-Lys(異丙基)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr-D-Lys(Nic)-Leu-)按照與實施例2-8)相同的方法，將Boc-Lys(Z，異丙基)-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Tyr(Br-Z)-D-Lys(Nic)-Leu-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.09克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在氯仿(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(140毫克)和DCC(161毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(30毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.70毫升)的DMF(250毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙醇洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率135毫克(44.3％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Lys 0.84(1)；Glu 1.02(1)；Leu 1.00(1)；Tyr 0.92(1)FAB-MS(M+H)+912(理論值912)實施例33合成環(huán)(-Arg-D-Lys(Ac)-Tyr-D-Trp-Leu-)1)合成Boc-D-Lys(Ac)-OH·CHA將Boc-D-Lys-OH(1.00克)懸浮在二氯甲烷(30毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.80毫升)和AcONB(由乙酸(0.26毫升)、HONB(873毫克)和DCC(1.00克)制備)，并在用冰冷卻下攪拌11小時。然后，蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(100毫升)中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.58毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用1N硫酸鈉洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥并濃縮。將所得濃縮物溶解在氯仿中，然后向其中加入環(huán)己胺(0.51毫升)，并蒸餾除去溶劑。如此得到所需產(chǎn)物，為油狀物質(zhì)。
產(chǎn)率1.56克(100％)FAB-MS(M+H)+288(理論值288)2)合成Boc-D-Lys(Ac)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac將在用冰冷卻下，將實施例2-5)制備的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(1.38克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(20毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(10毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.41毫升)和Boc-D-Lys(Ac)-ONB(由Boc-D-Lys(Ac)-OH·CHA(1.55克)、HONB(873毫克)和DCC(1.00克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N二異丙基乙胺(0.52毫升)并攪拌20分鐘。向所得混合物中加入水(300毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率990毫克(62.9％)Rf0.60熔點105.0-108.0℃元素分析C68H83N10O15BrS·0.88 H2O計算值C，58.00；H，5.94；N，9.95實測值C，57.74；H，5.75；N，9.803)合成環(huán)(-Arg-D-Lys(Ac)-Tyr-D-Trp-Leu-)按照與實施例2-8)相同的方法，將Boc-D-Lys(Ac)-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(530毫克)溶解在90％乙酸(50毫升)中，向其中加入鋅(1.24克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在氯仿(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(137毫克)和DCC(157毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(30毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.69毫升)的DMF(250毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率70.5毫克(23.9％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.90(1)；Lys 0.21(1)；Arg 0.94(1)FAB-MS(M+H)+772(理論值772)實施例34合成環(huán)(-Leu-D-Arg-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr-Trp-)1)合成Boc-Trp-Leu-OPac按照與實施例1-1)和-2)相同的方法，將H-Leu-OBzl·Tos(7.87克)溶解在DMF(100毫升)中并用冰冷卻，向其中加入二異丙基乙胺(3.96毫升)和Boc-Trp-ONB(由Boc-Trp-OH(6.69克)、HONB(4.30克)和DCC(4.95克)制備)并攪拌過夜。過濾除去所產(chǎn)生的DCU，將所得濾液濃縮，并將濃縮物溶解在乙酸乙酯(200毫升)中。然后，向所得溶液中加入N，N-二異丙基乙胺(2.86毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(500毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。從氯仿-石油醚中沉淀，得到油狀產(chǎn)物。將該油狀產(chǎn)物溶解在甲醇(500毫升)中，然后在10％Pd-C存在下、在氫氣流中進行催化還原。過濾除去所用的催化劑，將所得濾液濃縮至100毫升，向其中滴加碳酸銫(3.26克)的水溶液(10毫升)。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在DMF(200毫升)中，向其中加入苯甲酰甲基溴(3.98克)的DMF(50毫升)溶液，并攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(300毫升)中，然后，用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌所得溶液，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。如此得到所需產(chǎn)物，為油狀物質(zhì)。
產(chǎn)率9.84克(92.0％)Rf0.82FAB-MS(M+H)+535(理論值535)2)合成Boc-D-Tyr(Br-Z)-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻下，將Boc-Trp-Leu-OPac(12.14克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(20毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(100毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.79毫升)和Boc-D-Tyr(Br-Z)-ONB(由Boc-D-Tyr(Br-Z)-OH(2.18克)、HONB(0.86克)和DCC(0.99克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.57毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(300毫升)，分離乙酸乙酯層。該乙酸乙酯層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。該產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱色譜(Merck Kieselgel 60，0.5％甲醇-氯仿)純化，從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率3.63克(100.0％)Rf0.79熔點176.0-178.0℃元素分析C47H51N4O10Br計算值C，61.91；H，5.64；N，6.14實測值C，61.57；H，5.72；N，6.173)合成Boc-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr(Br-Z)-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-D-Tyr(Rr-Z)-Trp-Leu-OPac(912毫克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)中，并攪拌30分鐘。蒸餾掉溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。
將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，并向其中加入二異丙基乙胺(0.26毫升)和Boc-Lys(SO2Nap(1))-ONB(由實施例1-4)制備的Boc-Lys(SO2Nap(1))-OH·CHA(643毫克)、HONB(251毫克)和DCC(289毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾掉溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.16毫升)并攪拌10分鐘。
向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率0.99克(80.5％)Rf0.72
熔點108.0-110.0℃元素分析C63H69N6O13BrS·H2O計算值C，60.02；H，5.57；N，6.73實測值C，60.59；H，5.54；N，6.574)合成Boc-D-Arg(Tos)-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr(Br-Z)-Trp-Leu-OPac在用冰冷卻的同時，將Boc-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr(Br-Z)-Trp-Leu-OPac(0.95克)溶解在10N鹽酸/二噁烷(10毫升)，并攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將其溶解在DMF(5毫升)中，向其中加入二異丙基乙胺(0.15毫升)和Boc-Arg(Tos)-ONB(由Boc-Arg(Tos)-OH·1/4 H2O·3/4 AcOEt(562毫克)、HONB(249毫克)和DCC(287毫克)制備)，并在冰冷卻下攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(100毫升)中，向其中加入N，N-二異丙基乙胺(0.15毫升)并攪拌10分鐘。向所得混合物中加入水(100毫升)，分離乙酸乙酯層。該層用10％檸檬酸水溶液、飽和鹽水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。然后從氯仿-石油醚中沉淀，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率0.88克(74.0％)Rf0.65熔點113.0-115.0℃元素分析C76H87N10O16BrS2·H2O計算值C，58.57；H，5.76；N，8.99實測值C，58.20；H，5.70；N，8.745)合成環(huán)(-Leu-D-Arg-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr-Trp-)將Boc-D-Arg(Tos)-Lys(SO2Nap(1))-D-Tyr(Br-Z)-Trp-Leu-OPac(530毫克)溶解在90％乙酸(20毫升)中，向其中加入鋅(1.12克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在二氯甲烷(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(123毫克)和DCC(142毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(5毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.62毫升)的DMF(300毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率68毫克(21.1％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 100(1)；Tyr 0.92(1)；Lys 0.23(1)；Arg 0.99(1)FAB-MS(M+H)+937(理論值937)實施例35合成環(huán)(-Phe-D-Arg-(Mtr)-Phe-D-Ala-Trp-)1)合成Fmoc-D-Ala-Trp-Phe-D-Arg(Mtr)-Phe-OH用HBTU-HOBt作縮合劑，將Fmoc-Phe-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)依次縮合，并使用20％哌啶除去Fmoc，從而使得到的肽鏈逐步延長，得到Fmoc-D-Ala-Trp-Phe-D-Arg(Mtr)-Phe-Wang樹脂。在此使用Model 431A肽合成儀(由ABI Co.制造)進行肽合成。然后，將如此得到的肽樹脂(244毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，濾出樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-D-Ala-Trp-Phe-D-Arg(Mtr)-Phe-OH。
產(chǎn)率96毫克(82.8％)FAB-MS(M+H)+1161(理論值1161)洗脫時間36.2分鐘2)合成環(huán)(-Phe-D-Arg(Mtr)-Phe-D-Ala-Trp-)
將實施例35-1)得到的Fmoc-D-Ala-Trp-Phe-D-Arg(Mtr)-Phe-OH(87毫克)在10％二乙胺/DMF(10毫升)中攪拌2小時。減壓濃縮反應混合物并溶解在DMF(75毫升)中，在用冰冷卻下，向其中加入PyBOP(78毫克)和DlEA(26毫升)，并在室溫攪拌過夜。減壓濃縮后，向其中加入水，過濾收集所形成的沉淀。如此得到粗品環(huán)(-Phe-D-Arg(Mtr)-Phc-D-Ala-Trp-)。使用D-ODS-5-ST分配純化柱(2cm×15cm；由YMC Co.制備)，經(jīng)HPLC將上述得到的一半粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Phe-D-Arg(Mtr)-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率2.0毫克(5.8％)FAB-MS(M+H)+920(理論值920)洗脫時間32.6分鐘實施例36合成環(huán)(-Phe-D-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)將實施例35-2)得到的粗品環(huán)(-Phe-D-Arg(Mtr)-Phe-D-Ala-Trp-)(10毫克)在試劑K(含82.5％TFA、5％硫代苯甲醚、5％水、2.5％乙二硫醇)(5毫升)中攪拌12小時。減壓濃縮后，用乙醚洗滌，殘余物用D-ODS-5-ST分配純化柱(2cm×15cm；由YMC Co.制備)經(jīng)HPLC純化，得到環(huán)(-Phe-D-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率3.0毫克(39.0％)FAB-MS(M+H)+708(理論值708)洗脫時間26.5分鐘實施例37合成環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-D-Ala-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(562毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(產(chǎn)率245毫克，96.7％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(220毫克)環(huán)化，得到環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)粗品。該10毫克粗品經(jīng)HPLC純化，獲得環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率0.7毫克(10.8％)FAB-MS(M+H)+862(理論值862)洗脫時間30.2分鐘實施例38合成環(huán)(-pClPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-D-Ala-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Trp-pClPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(572毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-Trp-pClPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(產(chǎn)率259毫克，99.1％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-Trp-pClPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(179毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-pClPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。通過HPLC將10毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-pClPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率0.5毫克(7.5％)FAB-MS(M+H)+896(理論值896)洗脫時間31.4分鐘實施例39合成環(huán)(-pClPhe-D-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)在冰冷卻下，在對甲酚(100毫克)和乙二硫醇(100毫升)存在下，用HF處理實施例38得到的粗品環(huán)(-pClPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)(100毫克)2小時。蒸餾除去HF后，向殘余物中加入乙醚，過濾收集所形成的沉淀。經(jīng)凝膠色譜(G-25；2cm×80cm)純化。最后，使用D-ODS-5-ST分配純化柱(2cm×15cm；由YMC Co.制備)，經(jīng)HPLC將上述得到的1/5產(chǎn)物進一步純化，得到環(huán)(-pClPhe-D-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率4.3毫克(21.5％)FAB-MS(M+H)+742(理論值742)洗脫時間27.8分鐘實施例40合成環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-D-Ala-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(576毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-OH(產(chǎn)率244毫克，92.1％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-OH(182毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)。通過HPLC將10毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率1.1毫克(15.5％)FAB-MS(M+H)+912(理論值912)洗脫時間32.1分鐘實施例41合成環(huán)(-Phe-D-Arg-Nal(2)-D-Ala-Trp-)按照與實施例39相同的方法，由實施例40得到的環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)(100毫克)得到環(huán)(-Phe-D-Arg-Nal(2)-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率7.8毫克(39.0％)FAB-MS(M+H)+758(理論值758)洗脫時間28.2分鐘實施例42合成環(huán)(-Phe-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-D-Ala-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Trp-Phe-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(562毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-Trp-Phe-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(產(chǎn)率250毫克，98.6％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-Trp-Phe-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(172毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phe-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。15毫克該產(chǎn)品經(jīng)HPLC純化獲得環(huán)(-Phe-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率8.6毫克(71.5％)FAB-MS(M+H)+862(理論值862)洗脫時間30.2分鐘實施例43合成環(huán)(-Phe-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)按照與實施例39相同的方法，由實施例42得到的環(huán)(-Phe-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)(100毫克)得到環(huán)(-Phe-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率12.6毫克(63.0％)FAB-MS(M+H)+708(理論值708)洗脫時間25.5分鐘實施例44合成環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Leu-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-Phe-Wang樹脂(610毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-D-Leu-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(753毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-D-Leu-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-OH(產(chǎn)率232毫克，88.5％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-D-Leu-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-OH(229毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Leu-Trp-)。通過HPLC將10毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Leu-Trp-)。
產(chǎn)率3.0毫克(29.4％)FAB-MS(M+H)+904(理論值904)洗脫時間32.5分鐘實施例45合成環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Phe-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-Phe-Wang樹脂(610毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-D-Phe-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(742毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-D-Phe-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-OH(產(chǎn)率252毫克，93.0％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-D-Phe-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-OH(236毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Phe-Trp-)。將1/3的粗產(chǎn)物從甲醇-氯仿中重結(jié)晶，得到環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Phe-Trp-)。
產(chǎn)率44.2毫克(70.6％)FAB-MS(M+H)+938(理論值938)洗脫時間32.7分鐘實施例46合成環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Trp-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-Phe-Wang樹脂(610毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-D-Trp-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(750毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-D-Trp-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-OH(產(chǎn)率268毫克，95.7％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-D-Trp-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-OH(244毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Trp-Trp-)。將1/3粗產(chǎn)物從甲醇-氯仿中重結(jié)晶，得到環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Trp-Trp-)。
產(chǎn)率52.5毫克(83.0％)FAB-MS(M+H)+977(理論值977)洗脫時間32.6分鐘實施例47合成環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-pClPhe-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-D-Ala-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-pClPhe-D-Ala-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(565毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-pClPhe-D-Ala-OH(產(chǎn)率235毫克，89.9％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-pClPhe-D-Ala-OH(227毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-pClPhe-D-Ala-Trp-)。通過HPLC將15毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-pClPhe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率7.8毫克(50.5％)FAB-MS(M+H)+896(理論值896)洗脫時間31.3分鐘實施例48合成環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-Phe-Wang樹脂(610)毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-D-Ala-Trp-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(725毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-D-Ala-Trp-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-OH(產(chǎn)率234毫克，93.5％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-D-Ala-Trp-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-OH(217毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。通過HPLC將10毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率2.4毫克(28.3％)FAB-MS(M+H)+848(理論值848)洗脫時間28.2分鐘實施例49合成環(huán)(-pFPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-D-Ala-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Trp-pFPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(565毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-Trp-pFPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(產(chǎn)率254毫克，98.6％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-Trp-pFPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(201毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-pFPhe-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。通過HPLC將15毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-pFPhe-D-Arg(Tos)-Phc-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率6.6毫克(58.8％)FAB-MS(M+H)+880(理論值880)洗脫時間30.6分鐘實施例50合成環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-pFPhe-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-D-Ala-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-pFPhe-D-Ala-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(565毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-pFPhe-D-Ala-OH(產(chǎn)率228毫克，88.5％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-Trp-Phe-D-Arg(Tos)-pFPhe-D-Ala-OH(179毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-pFPhe-D-Ala-Trp-)。通過HPLC將15毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Phe-D-Arg(Tos)-pFPhe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率7.2毫克(65.6％)FAB-MS(M+H)+880(理論值880)洗脫時間30.6分鐘實施例51合成環(huán)(-Ala-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-D-Ala-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Trp-Ala-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(547毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-Trp-Ala-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(產(chǎn)率205毫克，86.9％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-Trp-Ala-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(185毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Ala-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。通過HPLC將10毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Ala-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率1.7毫克(21.8％)
FAB-MS(M+H)+786(理論值786)洗脫時間27.0分鐘實施例52合成環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ser-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-Phe-Wang樹脂(610毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-D-Ser-Trp-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(742毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-D-Ser-Trp-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-OH(產(chǎn)率246毫克，96.9％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-D-Ser-Trp-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-OH(199毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ser-Trp-)。通過HPLC將10毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ser-Trp-)。
產(chǎn)率1.2毫克(15.7％)FAB-MS(M+H)+864(理論值864)洗脫時間27.3分鐘實施例53合成環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Phe-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-D-Ala-Wang樹脂(417毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Phe-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂(557毫克)在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到Fmoc-Phe-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(產(chǎn)率236毫克，97.8％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將Fmoc-Phe-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-OH(191毫克)環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Phe-)。通過HPLC將10毫克該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Phe-)。
產(chǎn)率0.8毫克(13.1％)FAB-MS(M+H)+809(理論值809)洗脫時間29.4分鐘實施例54合成環(huán)(-Thg(2)-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)按照與實施例35-1)相同的方法，將Fmoc-Trp-Wang樹脂(472毫克，0.25毫摩爾)與組成Fmoc-氨基酸(各1毫摩爾)和Boc-Thg(2)(1毫摩爾)縮合，得到Fmoc-Thg(2)-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-Wang樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂在50％TFA/DCM(20毫升)(含2.5％乙二硫醇)中振搖30分鐘。之后，過濾從肽中除去樹脂，將母液濃縮。向所得濃縮物中加入乙醚使其固化，得到TFA·H-Thg(2)-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-OH(產(chǎn)率181毫克，72.4％)。然后，按照與實施例35-2)相同的方法將上述產(chǎn)物環(huán)化，得到粗品環(huán)(-Thg(2)-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。通過HPLC將1/3該粗產(chǎn)物純化，得到環(huán)(-Thg(2)-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率2.3毫克(13.8％)FAB-MS(M+H)+854(理論值854)洗脫時間29.0分鐘實施例55合成環(huán)(-Phg-D-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)在冰冷卻下，在對甲酚(75毫克)和乙二硫醇(50毫升)存在下，用HF處理實施例48得到的粗品環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)(100毫克)2小時。蒸餾除去HF后，向殘余物中加入乙醚，過濾收集所形成的沉淀。經(jīng)凝膠色譜(G-25；2cm×80cm)純化。最后，使用D-ODS-5-ST分配純化柱(2cm×15cm；由YMC Co.制備)，經(jīng)HPLC將上述得到的20克產(chǎn)物進一步純化，得到環(huán)(-Phg-D-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率3.5毫克(17.5％)FAB-MS(M+H)+695(理論值695)洗脫時間25.4分鐘實施例56合成環(huán)(-pClPhe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)1)合成Boc-D-Ala-肟樹脂將肟樹脂(1.86克；0.65毫摩爾/克取代度)在DCM(10毫升)中溶脹，向其中加入Boc-D-Ala(265毫克)和DCC(289毫克)，并振搖24小時。用DCM和甲醇洗滌后干燥，得到Boc-D-Ala-肟樹脂。
產(chǎn)率1.10克(0.59毫摩爾/克取代度)(92.9％)2)合成環(huán)(-pClPhe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)使用PyBOP(1.95毫摩爾)，將實施例56-1)得到的Boc-D-Ala-肟樹脂(1.08克，0.65毫摩爾)與組成Boc-氨基酸(各1.95毫摩爾)依次縮合，并使用25％TFA-DCM除去Boc，從而使得到的肽鏈逐步延長，得到Boc-Trp-pClPhe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-肟樹脂。然后，將如此得到的含肽樹脂用25％TFA/DCM處理，用DCM和異丙醇洗滌，并在DMF中溶脹，向其中加入二異丙基乙胺(227毫升)和乙酸(75毫升)并振搖18小時。之后，濾出樹脂，將所得濾液減壓濃縮。向所得濃縮物中加入水，過濾收集所形成的沉淀，如此得到環(huán)(-pClPhe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率571毫克(92.8％)FAB-MS(M+H)+946(理論值946)洗脫時間33.8分鐘實施例57合成環(huán)(-pClPhe-D-Arg-Nal(2)-D-Ala-Trp-)在冰冷卻下，在對甲酚(150毫克)和乙二硫醇(100毫升)存在下，用HF處理實施例56-2得到的環(huán)(-pClPhe-D-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)(200毫克)2小時。蒸餾除去HF后，向殘余物中加入乙醚，過濾收集所形成的沉淀。用G15進行純化。最后，使用D-ODS-5-ST分配純化柱(2cm×15cm；由YMC Co.制備)，經(jīng)HPLC將部分產(chǎn)物進一步純化，得到環(huán)(-pClPhe-D-Arg-Nal(2)-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率5.9毫克(39％)FAB-MS(M+H)+792(理論值792)洗脫時間30.0分鐘實施例58合成環(huán)(-pClPhe-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)按照與實施例56-2)相同的方法，將實施例56-1)得到的Boc-D-Ala-肟樹脂(1.10克，0.71毫摩爾)與組成Boc-氨基酸(各2.1毫摩爾)縮合，得到環(huán)(-pClPhe-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率397毫克(59.1％)FAB-MS(M+H)+946(理論值946)洗脫時間33.1分鐘實施例59合成環(huán)(-pClPhe-Arg-Nal(2)-D-Ala-Trp-)按照與實施例57相同的方法，處理實施例58得到的環(huán)(-pClPhc-Arg(Tos)-Nal(2)-D-Ala-Trp-)(200毫克)，得到環(huán)(-pClPhe-Arg-Nal(2)-D-Ala-Trp-)。
產(chǎn)率5.5毫克(37％)FAB-MS(M+H)+792(理論值792)洗脫時間29.O分鐘參照實施例1合成環(huán)(-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Trp-Pro-)1)合成Boc-Pro-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac用10N鹽酸/二噁烷(10毫升)處理實施例2-5)得到的Boc-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)OPac(917毫克)，以除去其Boc基團，向其中加入二異丙基乙胺(0.28毫升)和Boc-Pro-ONB(由Boc-Pro-OH(178毫克)、HONB(162毫克)和DCC(186毫克)制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率850毫克(85.9％)Rf0.24熔點118.0-121.0℃元素分析C65H76N9O14BrS·O.25 H2O計算值C，58.97；H，5.79；N，9.46實測值C，58.99；H，5.81；N，9.352)合成Boc-Trp-Pro-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac用10N鹽酸/二噁烷(10毫升)處理Boc-Pro-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(850毫克)，以除去其Boc基團，向其中加入二異丙基乙胺(0.25毫升)和Boc-Trp-ONB(由Boc-Trp-OH(178毫克)、HONB(162毫克)和DCC(186毫克)制備)，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率800毫克(82.8％)Rf0.36熔點132.0-134.0℃元素分析C76H86N11O15BrS·0.5 H2O計算值C，60.27；H，5.72；N，10.17
實測值C，60.00；H，5.89；N，9.983)合成環(huán)(-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Trp-Pro-)按照與實施例2-8)相同的方法，將Boc-Trp-Pro-Tyr(Br-Z)-D-Trp-Leu-Arg(Tos)-OPac(500毫克)溶解在90％乙酸(10毫升)中，向其中加入鋅(1.09克)并攪拌30分鐘。除去鋅，然后蒸餾除去溶劑，并向殘余物中加入乙酸乙酯(100毫升)和水(100毫升)。分離水層，用乙酸乙酯(100毫升)洗滌。合并乙酸乙酯層，用飽和鹽水溶液(200毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并濃縮，得到油狀產(chǎn)物。向其中加入乙醚，得到無色沉淀。將該沉淀溶解在氯仿(20毫升)中，在冰冷卻下，向其中加入HONB(119毫克)和DCC(137毫克)，然后在室溫攪拌2小時。除去所形成的DCU，并蒸餾除去溶劑。然后，向殘余物中加入10N鹽酸/二噁烷(15毫升)，并在冰冷卻下攪拌30分鐘。蒸餾除去溶劑，殘余物在氫氧化鈉的存在下干燥。將殘余物溶解在DMF(30毫升)中，然后滴加至二異丙基乙胺(0.60毫升)的DMF(300毫升)溶液中，并直接攪拌過夜。蒸餾除去溶劑，殘余物用總量100毫升的乙酸乙酯洗滌兩次，得到淡黃色粉末。在對甲酚(100毫克)和1，4-丁-二硫醇(0.1毫升)存在下，將如此得到的粉末(100毫克)溶解在HF(5毫升)中，并攪拌1小時。蒸餾除去HF，向殘余物中加入乙醚，并濾出所形成的沉淀。將該產(chǎn)物溶解在少量乙酸中，用水稀釋并凍干。最后，使用YMC ODS-25-20柱(2cm×25cm；由YMC Co.制備)經(jīng)分配液相色譜進行純化，得到所需產(chǎn)物。
產(chǎn)率45.9毫克(15.3％)氨基酸分析(在110℃于6N鹽酸中水解24小時后)(括號內(nèi)為理論值)Leu 1.00(1)；Tyr 0.90(1)；Pro 1.11(1)；Arg 0.94(1)FAB-MS(M+H)+902(理論值902)參照實施例2制備含有人LH-RH受體的CH0細胞(從中國倉鼠卵巢中收集)的細胞膜將表達人LH-RH受體的CHO細胞(109個細胞)懸浮在含有5mM EDTA的磷酸鹽緩沖的鹽水(PBS-EDTA)中，并以100×g的速度離心5分鐘。向所得細胞沉淀物中加入10毫升細胞勻漿緩沖液(10mM碳酸氫鈉，5nMEDTA，pH 7.5)，然后將所得混合物在polytron勻漿器中打成勻漿。然后以400×g的速度離心15分鐘，所得上清液收集在超速離心管中，并以100,000×g的速度再次離心1小時，得到細胞膜的沉淀物。將該沉淀物懸浮在2毫升分析緩沖液中，并以100,000×g的速度離心1小時。將如此收集的沉淀的細胞膜再懸浮于20毫升分析緩沖液中，裝入多個小瓶中，并在-80℃保藏。在使用前將其分別解凍。試驗實施例1測定對125I-亮丙瑞林與人LH-RH受體結(jié)合的抑制百分數(shù)用分析緩沖液稀釋參照實施例2制備的表達人LH-RH受體的CHO細胞的細胞膜，使其濃度達到200μg/ml，并將其分裝在多個試管中，每個試管中188μl。當使用表達人LH-RH受體的CHO細胞的細胞膜時，將2微升溶解在60％DMSO中的實驗化合物溶液(2mM)和10微升125I-亮丙瑞林(38nM)加入到該稀釋液中。為了測定與受體結(jié)合的125I-亮丙瑞林的最大量，制備含有2微升60％DMSO和10微升125I-亮丙瑞林(38nM)的反應體系。為了測定與受體非特異性結(jié)合的125I-亮丙瑞林的最大量，制備含有溶解在60％DMSO中的2微升亮丙瑞林(100nM)和10微升125I-亮丙瑞林(38nM)的反應體系。
將含有表達人LH-RH受體的CHO細胞的細胞膜的每一體系在25℃反應60分鐘。反應后，通過聚乙烯亞胺處理的Wattman玻璃濾器(GF-F)吸濾反應混合物。過濾后，用g-計數(shù)器測定濾紙上殘留的125I-亮丙瑞林的放射性。
由所得數(shù)據(jù)，計算[(TB-SB)/(TB-NSB)]×100(其中SB是加入實驗化合物的實驗體系的放射性；TB是最大結(jié)合體系的放射性；NSB是非特異性結(jié)合體系的放射性)值，該值表示實驗化合物的結(jié)合抑制百分數(shù)(％)。通過改變實驗化合物的濃度，得到每一實驗化合物的結(jié)合抑制百分數(shù)，采用Hill繪圖法計算表示50％結(jié)合抑制的實驗化合物濃度(IC50)。所得結(jié)果示于表1中。[表1]受體分析中的IC50(μM)
實驗用的實施例化合物IC50(μM)1 0.9191.0200.1210.4230.9310.2350.4360.9370.3431.0480.07510.2530.1540.3550.2實驗用的參照實施例化合物 IC50(μM)1 10制劑實施例1將50毫克實施例48得到的化合物溶解在50毫升日本藥典規(guī)定的注射用蒸餾水中，向其中加入日本藥典規(guī)定的注射用水至100毫升。將所得溶液無菌過濾，在每只注射瓶中裝入1毫升濾液，在無菌條件下凍干并密封。制劑實施例2將500毫克實施例48得到的化合物溶解在50毫升日本藥典規(guī)定的注射用蒸餾水中，向其中加入日本藥典規(guī)定的注射用水至100毫升。將所得溶液無菌過濾，在每只注射瓶中裝入1毫升濾液，在無菌條件下凍干并密封。制劑實施例3
將0.5克實施例20所得化合物的一鹽酸鹽溶解在50毫升日本藥典規(guī)定的注射用蒸餾水中，向其中加入日本藥典規(guī)定的注射用水至100毫升。將所得溶液無菌過濾，在每只注射瓶中裝入1毫升濾液，在無菌條件下凍干并密封。制劑實施例4將1.5克實施例31所得化合物的一鹽酸鹽溶解在50毫升日本藥典規(guī)定的注射用蒸餾水中，向其中加入日本藥典規(guī)定的注射用水至100毫升。將所得溶液無菌過濾，在每只注射瓶中裝入1毫升濾液，在無菌條件下凍干并密封。
權(quán)利要求
1.一種LH-RH受體拮抗劑組合物，含有式(I)的環(huán)五肽或其鹽環(huán)(-A1-A2-A3-A4-A5-)(I)其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表α-氨基酸殘基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表式-NH-CHX-CO-的基團，其中X表示(1)-(CH2)m-R，其中m表示0-10的整數(shù)，且R表示氫原子、任意取代的羥基、任意取代的氨基、任意取代的巰基或有機殘基，或者(2)-(CH2)n-NH-C(＝NH)-NH-R′，其中n表示1-10的整數(shù)，且R′表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；?br> 3.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中有機殘基R是任意取代的烷基，任意取代的芳基，任意取代的雜環(huán)基，?；蛘啧セ蝓０坊聂然?。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中A1是式-NH-CHX1-CO-的基團，其中X1表示(1)-(CH2)m1-R1，其中m1表示0-10的整數(shù)，且R1表示氫原子、任意取代的氨基、任意取代的烷基、任意取代的芳基或任意取代的雜環(huán)基，或者(2)-(CH2)n1-NH-C(＝NH)-NH-R2，其中n1表示1-5的整數(shù)，且R2表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；?。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A1是α-氨基酸殘基，選自Phe，Gly，Ala，Arg，Lys，Tyr，Leu和它們的衍生物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A1是α-氨基酸殘基，選自Phe，(p-Cl)Phe，(p-F)Phe，Phg，Ala，Thg(2)，Arg，Lys，Tyr，Leu，Arg(Tos)和Lys(異丙基)。
7.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中A2是式-NH-CHX2-CO-的基團，其中X2表示(1)-(CH2)m2-R3，其中m2表示0-10的整數(shù)，且R3表示任意取代的氨基、任意取代的雜環(huán)基或酰基，或者(2)-(CH2)n2-NH-C(＝NH)-NH-R4，其中n2表示1-5的整數(shù)，且R4表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；?。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A2是α-氨基酸殘基，選自Arg，Lys，Trp，Glu和它們的衍生物。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A2是α-氨基酸殘基，選自Arg，Arg(Mtr)，Arg(Tos)，Lys，Lys(SO2Nap(1))，Lys(SO2Nap(2))，Lys(COPh)，Lys(COCH2Ph)，Trp，Glu，Glu(NH-CH2CH2-Ph)，Glu(NH-CH2-Ph)，Glu(NH-CH-Ph2)，Glu(NH-CH2-Nap(1))，GLu(Php)，GLu(Bzlp)，GLu((2)-Pyp)，GLu(2-MeOPhp)，GLu(4-MeOPhp)，Lys(CO-(CH2)3-Ph)，Lys(CO-(CH2)5-Ph)和Lys(Ac)。
10.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中A3是式-NH-CHX3-CO-的基團，其中X3表示-(CH2)m3-R8，其中m3表示0-10的整數(shù)，且R8表示任意取代的芳基、任意取代的氨基、任意取代的雜環(huán)基或?；?。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A3是α-氨基酸殘基，選自Phe，Ala，Tyr，Lys，Asp，Trp和它們的衍生物。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A3是α-氨基酸殘基，選自Phe，Nal，(p-Cl)Phe，(p-F)Phe，Tyr，Lys(CO-Ph)，Lys(CO-Nap(1))，Asp(NH-CH2-Ph)，Trp和Lys(SO2Nap(1))。
13.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中A4是式-NH-CHX4-CO-的基團，其中X4表示(1)-(CH2)m4-R11其中m4表示0-10的整數(shù)，且R11表示氫原子、任意取代的羥基、任意取代的氨基、任意取代的烷基、任意取代的芳基或任意取代的雜環(huán)基，或者(2)-(CH2)n4-NH-C(＝NH)-NH-R12，其中n4表示1-5的整數(shù)，且R12表示氫原子、硝基或任意取代的苯磺?；?。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A4是α-氨基酸殘基，選自Ala，Leu，Phe，Trp，Ser，Arg，Lys，Tyr和它們的衍生物。
15.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A4是α-氨基酸殘基，選自Ala，Leu，Phe，Trp，Ser，Arg，Lys(Nic)和Tyr。
16.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中A5是式-NH-CHX5-CO-的基團，其中X5表示(1)-(CH2)m5-R14其中m5表示0-10的整數(shù)，且R14表示任意取代的芳基、任意取代的雜環(huán)基、任意取代的烷基或者任意取代的氨基。
17.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A5是α-氨基酸殘基，選自Trp，Phe，Leu，Lys和它們的衍生物。
18.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A5是α-氨基酸殘基，選自Trp，Phe，Leu和Lys(SO2Nap(1))。
19.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中α-氨基酸殘基是L-或D-構(gòu)型的。
20.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A1、A3和A5獨立代表的是L-構(gòu)型的，且A4是D-構(gòu)型的。
21.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中A1、A3和A5獨立代表的是D-構(gòu)型的，且A4是L-構(gòu)型的。
22.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，它是預防治療性激素依賴性疾病的藥物。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的組合物，其中性激素依賴性疾病是性激素依賴性癌癥。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的組合物，其中性激素依賴性癌癥是前列腺癌、子宮癌、乳腺癌或垂體腫瘤。
25.根據(jù)權(quán)利要求22的組合物，其中性激素依賴性疾病是前列腺肥大、子宮內(nèi)膜異位、子宮肌瘤或性早熟。
26.根據(jù)權(quán)利要求22的組合物，它是妊娠調(diào)節(jié)劑。
27.根據(jù)權(quán)利要求22的組合物，它是月經(jīng)周期調(diào)節(jié)劑。
28.根據(jù)權(quán)利要求26的妊娠調(diào)節(jié)劑，它用于避孕。
29.式(II)的環(huán)五肽或其鹽環(huán)(-A1′-A2′-A3′-A4′-A5′-) (II)其中A1′代表Arg或其衍生物，且A2′、A3′、A4′和A5′獨立地表示除Gly、Pro和酸性氨基酸殘基以外的氨基酸殘基。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽，其中式(II)化合物至少包含Arg，Lys，Trp和Leu，其中Arg，Lys，Trp或Leu可以是其衍生物。
31.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽，其中式(II)化合物至少包含Arg，Phe和Ala，其中Arg，Phe或Ala可以是其衍生物。
32.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽，其中Arg的衍生物是Arg(Mtr)或Arg(Tos)。
33.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽，其中A2′-A3′，A3′-A4′和A4′-A5′的任何一個是Trp-Leu或Ala-Trp。
34.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽，其中A1′、A2′、A3′、A4′和A5′獨立地是L-構(gòu)型或D-構(gòu)型的。
35.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽，其中A1′和A3′是L-構(gòu)型的，且A2′和A4′是D-構(gòu)型的。
36.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽，其中A2′、A4′和A5′是L-構(gòu)型的，且A3′是D-構(gòu)型的。
37.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽或其鹽，它包含Arg，Lys，Tyr，Trp和Leu，其中Arg，Lys，Tyr，Trp或Leu可以是其衍生物。
38.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽或其鹽，它包含Arg，Glu，Lys，Trp和Leu，其中Arg，Glu，Lys，Trp或Leu可以是其衍生物。
39.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽或其鹽，它包含Gly，Arg，Phe，Ala和Trp，其中Gly，Arg，Phe，Ala或Trp可以是其衍生物。
40.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽或其鹽，它包含Ala，Arg，Phe，Ala和Trp，其中Ala，Arg，Phe，Ala或Trp可以是其衍生物。
41.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽或其鹽，它包含Gly，Arg，Phe，Ala和Phe，其中Gly，Arg，Phe，Ala或Phe可以是其衍生物。
42.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽或其鹽，它包含Arg，Phe，Phe，Trp和Ala，其中Arg，Phe，Phe，Trp或Ala可以是其衍生物。
43.根據(jù)權(quán)利要求29的環(huán)五肽或其鹽，它是環(huán)(-Arg-D-Lys(COCH2CH2CH2CH2CH2Ph)-Tyr-D-Trp-Leu-)，環(huán)(-Arg-D-Glu(NHCH2CH2Ph)-Lys(CONap(1))-D-Trp-Leu-)，環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)，環(huán)(-Ala-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Trp-)，環(huán)(-Phg-D-Arg(Tos)-Phe-D-Ala-Phe-)或環(huán)(-Phg-D-Arg-Phe-D-Ala-Trp-)。
44.一種在需拮抗LH-RH的哺乳動物中拮抗LH-RH的方法，包括給患因LH-RH起源的疾病的哺乳動物服用有效量的式(I)環(huán)五肽或其鹽環(huán)(-A1-A2-A3-A4-A5-)(I)其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表α-氨基酸殘基。
45.式(I)的環(huán)五肽或其鹽在制備LH-RH受體拮抗劑組合物中的用途環(huán)(-A1-A2-A3-A4-A5-)(I)其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表α-氨基酸殘基。
46.式(I)的環(huán)五肽或其鹽在制備預防或治療性激素依賴性疾病的藥物中的用途環(huán)(-A1-A2-A3-A4-A5-)(I)其中A1、A2、A3、A4和A5獨立地代表α-氨基酸殘基。
全文摘要
本發(fā)明提供含有環(huán)五肽或其鹽的LH－RH受體拮抗劑以及新的環(huán)五肽或其鹽。本發(fā)明的LH－RH受體拮抗劑是有效的藥物,用于預防和治療性激素依賴性癌癥(如前列腺癌、子宮癌、乳腺癌、垂體腫瘤等),前列腺肥大,子宮內(nèi)膜異位,子宮肌瘤,性早熟,經(jīng)閉綜合癥,多卵巢綜合癥,粉刺等;并可有效地作為妊娠調(diào)節(jié)劑(如避孕劑等)和月經(jīng)周期調(diào)節(jié)劑。再有,它們還可用于飼料工業(yè),用于調(diào)節(jié)動物的動情期,提高肉的質(zhì)量和調(diào)節(jié)動物的生長,以及在海產(chǎn)品工業(yè)中用作魚的產(chǎn)卵促進劑。
文檔編號C07K7/23GK1183104SQ96193586
公開日1998年5月27日 申請日期1996年4月25日 優(yōu)先權(quán)日1995年4月28日
發(fā)明者北田千惠子, 古矢修一, 加藤光一 申請人:武田藥品工業(yè)株式會社