專利名稱：：新的天冬氨?；０费苌锖驮鎏饎┑闹谱鞣椒?br>技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新的天冬氨酰基酰胺衍生物和其鹽以及含有它們作為活性成分的增甜劑。近年來(lái)，飲食習(xí)慣已有了很大程度的改善，由過(guò)量攝取糖引起的肥胖和肥胖所伴隨的疾病己引起人們的爭(zhēng)議。因此，人們要求開發(fā)替代糖的低熱值增甜劑。目前廣泛使用的增甜劑是天冬酰苯丙氨酸甲酯(Aspartame)，它在安全和甜度性質(zhì)方面是極好的，然而，它存在一個(gè)穩(wěn)定性的問(wèn)題。為了改善穩(wěn)定性和甜度強(qiáng)度，研究了天冬氨?；０费苌铮翘於彼岷挺?氨基-醇的縮合物，并且是沒(méi)有酯鍵的。于是，發(fā)現(xiàn)了在US4423029、EP0203540A1、J.Med.Chem.，13，1217(1970)或TetrahedronLetters，35，6891(1994)描述的化合物。期間，在法國(guó)專利2697844中描述的其中烷基被引入氨基中的天冬氨?；难苌镲@示甜度的很高的增加程度，然而，這些化合物的穩(wěn)定性是不令人滿意的。本發(fā)明提供了通過(guò)使用容易得到的氨基-醇組分而得到的天冬氨?；０费苌锖推潲}，它顯示高水平的安全性的，以及含有它們作為活性成分的低熱值增甜劑。為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明人在天冬氨?；０费苌锏腘-烷基和氨基-醇組分方面進(jìn)行了刻苦的研究，并隨之發(fā)現(xiàn)，由如下式(I)表示的天冬氨酰基酰胺衍生物用作增甜劑，它在甜度強(qiáng)度、穩(wěn)定性和甜度性質(zhì)方面是極好。這一發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致本發(fā)明的完成。R1-NHC1H(CH2COOH)CONH-C2R2R3-C3H(OH)-R4其中R1表示H、含有1至13個(gè)碳原子的飽和或不飽和直鏈或環(huán)狀烴基或它們的混合烴基；R2和R3分別表示H或選自含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有2至7個(gè)碳原子的烷氧基烷基、含有2至7個(gè)碳原子的羥基烷基、苯基、2-呋喃基、二亞甲基、三亞甲基、四亞甲基和五亞甲基的取代基；當(dāng)R1表示含有1至13個(gè)碳原子的飽和或不飽和直鏈或環(huán)狀烴基或它們的混合烴基，R4表示含有1至12個(gè)碳原子的烷基或由式(II)或(III)表示的取代基，和當(dāng)R1是H，R4表示由式(III)表示的取代基-(CHR5)n-R6(II)-(CH2)mC4HR7R8(III)其中，在式(II)中，R5表示H或含有1-4個(gè)碳原子的烷基，R6表示共含有12個(gè)或更少碳原子的3-10元環(huán)烷基、環(huán)烯基、被烷基取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、二環(huán)烷基、二環(huán)烯基或三環(huán)烯基，和n表示0或1，和在式(III)中R7和R8分別表示H、含有3-4個(gè)碳原子的環(huán)烷基、含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有2-7個(gè)碳原子的烷氧基烷基、苯基、在2-、3-或4-位上帶有選自氟、氯、溴、碘、羥基、含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有2-7個(gè)碳原子的烷氧基、氰基、硝基、乙?；?、氨基和乙酰氨基的苯基、在2-和3-位上或在3-和4-位上帶有亞甲二氧基、三亞甲基或四亞甲基的苯基、2-、3-或4-吡啶基、2-或3-呋喃基或2-或3-噻吩基，和m表示0或1；和C1構(gòu)型是(S)，C2-、C3-和C4-構(gòu)型(R)、(S)或(RS)。本發(fā)明新的天冬氨?；０费苌锸鞘?I)化合物和它們的鹽。在本發(fā)明中，化合物的鹽的實(shí)例包括與堿金屬，例如鈉和鉀形成的鹽；與堿土金屬，例如，鈣和鎂形成的鹽；與胺，例如單乙醇胺形成的鹽；與無(wú)機(jī)酸，例如鹽酸和硫酸形成的鹽；和與有機(jī)酸，例如檸檬酸和乙酸形成的鹽。本發(fā)明的天冬氨酰基酰胺衍生物可通過(guò)常規(guī)的肽合成方法(Izumiyaetal.，BasisofPeptideSynthesisandExperimentsthereof，Maruzen，1985年1月20日)得到。即，所需的α-L-天冬氨?；０房赏ㄟ^(guò)首先使氨基-醇與其中在β-位置上的羧酸和氨基是被保護(hù)的L-天冬氨酸縮合得到酰胺，然后除去保護(hù)基團(tuán)得到，或首先將其中在β-位置上的羧酸和氨基是被保護(hù)的L-天冬氨酸轉(zhuǎn)化為活性酯，使該活性酯與氨基醇反應(yīng)得到酰胺，然后除去保護(hù)基團(tuán)得到。然而，制備本發(fā)明的化合物的方法并非限制于此。N-烷基天冬氨?；０费苌锟赏ㄟ^(guò)得到具有保護(hù)基團(tuán)的L-天冬氨酸和氨基-醇的酰胺、隨后選擇性地除去N-保護(hù)基團(tuán)、用醛還原烷基化生成的化合物[A.F.Abdel-Magidetal.，TetrahedronLetters，31，5595(1990)]，并進(jìn)一步除去的其余的保護(hù)基團(tuán)制備。即，氨基-醇首先與與其中在β-位置上的羧酸和氨基是被保護(hù)的L-天冬氨酸縮合得到酰胺，或首先將其中在β-位置上的羧酸和氨基是被保護(hù)的L-天冬氨酸轉(zhuǎn)化為活性酯，和該活性酯隨后與氨基-醇反應(yīng)得到酰胺。選擇性地除去該保護(hù)天冬氨?；０返腘-保護(hù)基團(tuán)，得到的物質(zhì)用醛和還原劑[NaB(OAc)3H]進(jìn)行還原烷基化，然后除去其余的保護(hù)基團(tuán)得到所需的N-烷基-α-L-天冬氨酰基酰胺。N-烷基-α-L-天冬氨?；０芬部梢酝ㄟ^(guò)用醛和還原劑(例如，披鈀炭)進(jìn)行還原性烷基化得到。然而，形成本發(fā)明的化合物的方法并不限于此。用于制備本發(fā)明的化合物的氨基-醇可容易地由作為旋光物質(zhì)的氨基酸采用參考文獻(xiàn)中描述的已知方法制備[TetrahedronLetters，byM.W.Holladayetal.，24，4401(1983)，或Angew.Chem.Int.Ed.Engle.，byM.T.Reetsetal.，26，1141(1987)]。然而，在本發(fā)明中制備氨基-醇的方法并不限制于此。作為感覺(jué)評(píng)價(jià)的結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物和它們的鹽具有強(qiáng)的甜度和類似于糖的甜度質(zhì)量。例如，N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的甜度是糖甜度的約2500倍，N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4R)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的甜度是糖甜度的約1500倍，N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的甜度是糖甜度的約2300倍，N-α-L-(N’-3，3-二甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的甜度是糖甜度的約5500倍，N-α-L-(N’-3，3-二甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4R)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的甜度是糖甜度的約3000倍，N-α-L-(N’-2-乙基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的甜度是糖甜度的約3000倍，N-α-L-(N’-3-甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的甜度是糖甜度的約4000倍。在酸性水溶液中N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的半衰期(在70℃，PH3的磷酸鹽緩沖液中)約為289小時(shí)，它比天冬酰苯丙氨酸甲酯(半衰期約24小時(shí))穩(wěn)定得多。此外，N-α-L-天冬氨酰基-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺通過(guò)給ICR種小鼠口服(2.0g/kg)進(jìn)行毒性試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在安全方面該化合物沒(méi)有問(wèn)題。制備的天冬氨酰基酰胺衍生物的結(jié)構(gòu)和其感覺(jué)評(píng)價(jià)結(jié)果示于表1中。R1-NHC1H(CH2COOH)CONH-C2R2R3-C3H(OH)-R4(I)表1天冬氨?；０费苌锏慕Y(jié)構(gòu)和它們的甜度表1(續(xù))</tables>1)相對(duì)于4％的蔗糖水溶液的甜度2)C1-構(gòu)型是(S)當(dāng)本發(fā)明的化合物或它們的鹽用作增甜劑時(shí)，除非招致任何麻煩，這些化合物可與其它增甜劑結(jié)合使用。實(shí)施例1N-α-L-天冬氨酰基-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法將LAH(0.73g，19.25mmol)懸浮于50ml乙醚中，將懸浮液保持0℃。在該懸浮液中加入3.44g(11.0mmol)N，N-二芐基-α-D-氨基丙酸的N-甲氧基-N-甲基羧酰胺。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，向其中加入50ml1-M硫酸氫鈉水溶液。反應(yīng)溶液用50ml乙醚提取兩次，有機(jī)層用50ml5％碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥。過(guò)濾除去硫酸鎂，濃縮濾液得到2.76g(10.9mmol)(R)-2-N，N-二芐基氨基丙醛。將鎂(0.24g，9.9mmol)懸浮于1mlTHF中，向懸浮液中滴加1.41g(6.6mmol)(R)-2-苯基丁基溴在2mlTHF中的溶液。將反應(yīng)溶液在室溫下攪拌1小時(shí)，向其中加入5mlTHF，將混合的溶液冷卻至0℃。在反應(yīng)溶液加入通過(guò)將如上得到的1.37g(5.5mmol)(R)-2-N，N-二芐基氨基丙醛溶解于10mlTHF中得到的溶液，混合物在0℃攪拌1小時(shí)。向該反應(yīng)溶液中加入50ml氯化銨飽和水溶液，混合物用50ml乙醚提取兩次，有機(jī)層用5％碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥。過(guò)濾除去硫酸鎂，濃縮濾液。殘余物經(jīng)PTLC純化得到1.46g(3.77mmol)N，N-二芐基-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己胺(2S∶2R＝＞5∶1)。將N，N-二芐基-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己胺(1.46g，3.77mmol)溶解于25ml甲醇，向其中加入0.43ml(7.53mmol)乙酸和0.6g5％披鈀炭(水含量50％)，反應(yīng)溶液在氫氣氛下在50℃攪拌16小時(shí)，隨后過(guò)濾除去催化劑，濃縮濾液。向殘余物中加入15ml飽和碳酸氫鈉水溶液，混合物用50ml二氯甲烷提取兩次。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾除去硫酸鎂。濃縮濾液得到0.61g(2.96mmol)(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己胺。在30ml二氯甲烷中加入1.17(3.26mmol)N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-β-芐基酯和0.61g(2.96mmol)(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己胺。將反應(yīng)溶液冷卻至0℃，向其中加入0.63g(3.26mmol)水溶性碳化二亞胺鹽酸鹽和0.44g(3.26mmol)HOBt?；旌衔镌诶鋮s下攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。在減壓濃縮反應(yīng)混合物后，在殘余物中加入50ml水，混合物用50ml乙酸乙酯提取兩次。有機(jī)層用5％檸檬酸水溶液洗滌兩次，用50ml水洗滌一次，用50ml5％碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次和用50ml氯化鈉飽和水溶液洗滌一次。在有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥后，過(guò)濾除去硫酸鎂。減壓濃縮濾液，經(jīng)PTLC純化得到N-α-L-(N′-芐氧羰基-β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺油狀物。將N-α-L-(N′-芐氧羰基-β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(1.32g，2.42mmol)溶解于40ml甲醇中，向其中加入5ml水和0.85g5％披鈀炭(水含量50％)。在氫氣氛下將混合溶液在室溫下還原過(guò)夜。過(guò)濾除去催化劑，減壓濃縮濾液。干燥殘余物得到0.72g(2.23mmol)N-α-L-天冬氨酰基-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(2S∶2R＝5∶1)。1HNMR(DMSO-d6)δ0.67(t，3H)，0.99(d，3H)，1.38-1.60(m，2H)，1.63-1.76(m，2H)，2.53-2.65(m，1H)，2.60-2.80(2dd，2H)，3.49(m，1H)，3.74(m，1H)，3.94(t，1H)，7.14-7.31(m，5H)，8.32(d，1H)ESI-MS323.2(MH-)甜度(相對(duì)于糖)2500倍實(shí)施例2N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4R)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例1，只是用(S)-2-苯基丁基溴代替(R)-2-苯基丁基溴得到N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4R)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(2S∶2R＝＞9∶1)固體，總收率54.2％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.69(t，3H)，0.93(d，3H)，1.45-1.68(m，4H)，2.64-2.77(m，3H)，3.10(m，1H)，3，57(m，1H)，3.94(t，1H)，7.14-7.31(m，5H)，8.28(d，1H)ESI-MS322.9(MH+)甜度(相對(duì)于糖)1500倍實(shí)施例3N-α-L-天冬氨酰基-(1R，2S，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例1，只是用(RS)-2-苯基丁基溴代替(R)-2-苯基丁基溴得到N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺固體，總收率16.7％。1NMR(DMSO-d6)δ0.66(t，1.5H)，0.70(d，1.5H)，0.93(d，1.5H)，0.97(d，1.5H)，1.40-1.75(m，4H)，2.10-2.65(m，3H)，3.00(m，0.5H)，3.40(m，0.5H)，3.55-3.90(m，2H)，7.13-7.29(m，5H)，8.07(brd，0.5H)，8.17(brd，0.5H)ESI-MS322.8(MH+)甜度(相對(duì)于糖)2300倍實(shí)施例4N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基戊基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例1，只是用(RS)-2-苯基丙基溴代替(R)-2-苯基丁基溴得到N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基戊基酰胺(2S∶2R＝7∶3)固體，總收率29.3％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.94(d，1.5H)，1.00(d，1.5H)，1.16(d，1.5H)，1.18(d，1.5H)，1.46-1.72(m，2H)，2.33-2.60(m，2H)，2.92(m，0.5H)，3.06(m，0.5H)，3.45-3.83(m，2H)，7.12-7.38(m，5H)8.14(d，0.5H)，8.24(d，0.5H)ESI-MS309.3(MH+)甜度(相對(duì)于糖)700倍實(shí)施例5N-α-L-天冬氨酰基-(1R，2S，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基-5-甲氧基戊基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例1，只是用(RS)-2-苯基-3-甲氧基丙基溴代替(R)-2-苯基丁基溴得到N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基-5-甲氧基戊基酰胺(2S∶2R＝7∶3)固體，總收率34.5％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.93(d，1.5H)，0.98(d，1.5H)，1.446-1.84(m，2H)，2.68-2.80(m，2H)，2.94-3.22(m，2H)，3.18(s，3H)，3.29-3.53(m，2H)，3.53-3.78(m，1H)，3.90-4.00(m，1H)，7.14-7.32(m，5H)，8.30(d，0.5H)，8.39(d，0.5H)ESI-MS339.1(MH+)甜度(相對(duì)于糖)100倍實(shí)施例6N-α-L-天冬氨酰基-(1R，2S，4RS)-1-乙基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例1，只是分別用(RS)-2-苯基丁基溴代替(R)-2-苯基丁基溴，和用N，N-二芐基-α-D-氨基丁酸N-甲氧基-N-甲基羧酰胺代替N，N-二芐基-α-D-氨基丙酸N-甲氧基-N-甲基羧酰胺，得到N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4RS)-1-乙基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(2S∶2R＝＞9∶1)固體，總收率35.3％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.60-0.84(m，6H)，1.15-1.78(m，6H)，2.33-2.75(m，3H)，2.97(m，1H)，3.45(m，1H)，3.59(m，1H)，3.77(m，1H)，7.13-7.38(m，5H)，7.95-8.23(brd，1H)ESI-MS337.5(MH+)甜度(相對(duì)于糖)250倍實(shí)施例7N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4RS)-1-α-羥基乙基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例1，只是分別用(RS)-2-苯基丁基溴代替(R)-2-苯基丁基溴，和用N，N-二芐基-O-芐基-α-D-蘇氨酸N-甲氧基-N-甲基羧酰胺代替N，N-二芐基-α-D-氨基丙酸N-甲氧基-N-甲基羧酰胺，得到N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4RS)-1-α-羥基乙基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(2S∶2R＝9∶1)固體，總收率16.7％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.60-0.72(m，3H)，0.82-0.98(m，3H)，1.30-1.84(m，4H)，2.24-2.40(m，2H)，2.50-2.60(m，1H)，2.66-2.80(m，1H)，2.35-3.65(m，1H)，3.65-3.90(m，1H)，4.00-4.40(m，1H)，7.12-7.34(m，5H)，8.06(brs，1H)ESI-MS353.6(MH+)甜度(相對(duì)于糖)100倍實(shí)施例8N-α-L-天冬氨酰基-(1R，2S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基丁基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例1，只是用2-苯基乙基溴代替(R)-2-苯基丁基溴得到N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基丁基酰胺(2S∶2R＝9∶1)固體，總收率28.5％。1HNMR(DMSO-d6)δ1.00(d，3H)，1.46-1.65(m，1H)，1.65-1.73(m，1H)，2.19(dd，1H)，2.39(dd，1H)，2.55-2.60(m，1H)，2.69-2.80(m，1H)，3.30-3.38(m，1H)，3.58-3.64(m，1H)，3.66-3.74(m，1H)ESI-MS295.2(MH+)甜度(相對(duì)于糖)50倍實(shí)施例9N-α-L-天冬氨?；?(1R，2R，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法將LAH(0.40g，10.5mmol)懸浮于20ml乙醚中，將懸浮液保持0℃。在該懸浮液中加入1.63g(7.0mmol)N-叔丁基氧羰基-α-D-氨基丙酸的N-甲氧基-N-甲基羧酰胺。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，向其中加入25ml1-M硫酸氫鉀水溶液。反應(yīng)溶液用50ml乙醚提取兩次，有機(jī)層用50ml5％碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥。過(guò)濾除去硫酸鎂，濃縮濾液得到1.21g(7.0mmol)(R)-2-N-叔丁氧羰基氨基丙醛固體。將鎂(0.63g，26.3mmol)懸浮于2mlTHF中，向懸浮液中滴加3.73g(17.5mmol)(RS)-2-苯基丁基溴在3mlTHF中的溶液。將反應(yīng)溶液在室溫下攪拌1小時(shí)，向其中加入5mlTHF，將混合的溶液冷卻至-78℃。在反應(yīng)溶液中加入通過(guò)將如上得到的1.21g(7.0mmol)(R)-2-N-叔丁氧羰基氨基丙醛溶解于10mlTHF中得到的溶液，使溫度由-78℃逐漸上升，混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。向該反應(yīng)溶液中加入50ml氯化銨飽和水溶液，混合物用50ml乙醚提取兩次，有機(jī)層用5％碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥。過(guò)濾除去硫酸鎂，濃縮濾液。殘余物經(jīng)PTLC純化得到0.91g(2.96mmol)(1R，2S，4RS)-N-叔丁氧羰基-1-甲基-2-羥基-4-苯基己胺(2S∶2R＝3∶7)油狀物。將15ml含有4N鹽酸和二惡烷的溶液加入0.91g(2.96mmol)(1R，2R，4RS)-N-叔丁氧羰基-1-甲基-2-羥基-4-苯基己胺中，混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)溶液，殘余物在加入25ml乙醚后進(jìn)一步濃縮。將得到的殘余物溶解于25ml二氯甲烷中。將反應(yīng)溶液冷卻至0℃，向其中加入1.17g(3.26mmol)N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-β-芐基酯、0.45ml(3.26mmol)三乙胺、0.63g(3.26mmol)水溶性碳化二亞胺和0.44g(3.26mmol)HOBt?；旌衔镌诶鋮s下攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。在減壓濃縮反應(yīng)混合物后，在殘余物中加入50ml水，得到的溶液用50ml乙酸乙酯提取兩次。有機(jī)層用5％檸檬酸水溶液、50ml水、50ml5％碳酸氫鈉水溶液和50ml氯化鈉飽和水溶液洗滌二次。在有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥后，過(guò)濾除去硫酸鎂。減壓濃縮濾液，經(jīng)PTLC純化得到1.15g(2.11mmol)N-α-L-(N′-芐氧羰基-β-O-芐基天冬氨酰基)-(1R，2R，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺粘性油狀物。將N-α-L-(N′-芐氧羰基-β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2R，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(1.15g，2.11mmol)溶解于35ml甲醇中，向其中加入5ml水和0.35g5％披鈀炭(水含量50％)。在氫氣氛下將混合溶液在室溫下還原過(guò)夜。過(guò)濾除去催化劑，減壓濃縮濾液。干燥殘余物得到0.59g(1.84mmol)N-α-L-丁基天冬氨酰基-(1R，2R，4RS)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(2S∶2R＝3∶7)固體。1HNMR(DMSO-d6)δ0.67(t，1.5H)，0.69(t，1.5H)，0.91(d，1.5H)0.96(d，1.5H)，1.40-1.75(m，4H)，2.40-2.70(m，3H)，2.95-3.90(m，3H)，7.10-7.35(m，5H)，8.07(brs，1H)ESI-MS323.1(MH+)甜度(相對(duì)于糖)1000倍實(shí)施例10N-α-L-天冬氨?；?(1R，2R，4R)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例9，只是用(S)-2-苯基丁基溴代替(RS)-2-苯基丁基溴得到N-α-L-天冬氨?；?(1R，2R，4R)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(2S∶2R＝3∶7)固體，總收率38.6％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.58-0.73(m，3H)，0.88-1.00(m，3H)，1.35-1.75(m，4H)，2.45-2.75(m，3H)，3.05-3.95(m，3H)，7.13-7.32(m，5H)，8.07(d，1H)ESI-MS323.1(MH+)甜度(相對(duì)于糖)800倍實(shí)施例11N-α-L-天冬氨?；?(2RS，4RS)-1，1-二甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例9，只是用N-叔丁氧羰基-α，α-二甲基甘氨酸N-甲氧基-N-甲基羧酰胺代替N-叔丁氧羰基-α-D-氨基丙酸N-甲氧基-N-甲基羧酰胺，得到N-α-天冬氨?；?(2RS，4RS)-1，1-二甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺固體，總收率8.3％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.64-0.75(m，3H)，1.05-1.25(m，6H)，1.25-1.90(m，4H)，2.10-2.50(m，2H)，2.58(m，1H)，3.05(m，1H)，3.45-3.90(m，2H)，7.13-7.30(m，5H)，7.93(brs，0.5H)，8.07(brd，0.5H)甜度(相對(duì)于糖)250倍實(shí)施例12N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法將如實(shí)施例1中得到的N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-β-芐基酯(0.91g，2.80mmol)和(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己胺(0.58g，2.80mmol)加入30ml二氯甲烷中。將反應(yīng)溶液冷卻至0℃，向其中加入0.59g(3.08mmol)水溶性碳化二亞胺鹽酸鹽和0.42g(3.08mmol)HOBt?；旌衔镌诶鋮s下攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。在減壓濃縮反應(yīng)混合物后，在殘余物中加入50ml水，混合物用50ml乙酸乙酯提取兩次。有機(jī)層用5％檸檬酸水溶液洗滌兩次、用50ml水洗滌一次，用50ml5％碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次和用50ml氯化鈉飽和水溶液洗滌一次。在有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥后，過(guò)濾除去硫酸鎂。減壓濃縮濾液得到(1.43g，2.78mmol)N-α-L-(N′-叔丁氧羰基-β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺粘性油狀物。將7ml含有4N鹽酸和二惡烷加入1.43g(2.78mmol)N-α-L-(N′-叔丁氧羰基-β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己酰胺中，混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)溶液，向殘余物中加入50ml5％碳酸氫鈉水溶液。反應(yīng)溶液用50ml乙酸乙酯提取兩次。有機(jī)層用氯化鈉飽和水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥后。過(guò)濾除去硫酸鎂。減壓濃縮濾液得到1.13g(2.73mmol)N-α-L-(β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺淺黃色油狀物。將N-α-L-(β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(1.13g，2.73mmol)懸浮于20mlTHF中，懸浮液保持在0℃。向懸浮液中加入0.16ml(2.73mmol)乙酸、0.34ml(2.73mmol)3，3-二甲基丁醛和0.87g(4.10mmol)NaB(OAc)3H。混合物在0℃攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌過(guò)夜。向反應(yīng)溶液中加入30ml碳酸氫鈉飽和水溶液，混合物用50ml乙酸乙酯提取兩次。有機(jī)層用飽和氯化鈉水溶液洗滌然后用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾除去硫酸鎂，減壓濃縮濾液。殘余物以PTLC純化得到1.04g(2.09mmol)N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基-β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺淺黃色油狀物。將N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基-β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(1.04g，2.09mmol)溶解于40ml甲醇中，向其中加入5ml水和0.50g5％披鈀炭(水含量50％)。在氫氣氛下將混合溶液在室溫下還原過(guò)夜。過(guò)濾除去催化劑，減壓濃縮濾液。干燥殘余物得到0.74g(1.81mmol)N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基天冬氨酰基)-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(2S∶2R＝＞5∶1)固體。1HNMR(DMSO-d6)δ0.66(t，3H)，0.83(s，9H)，1.00(d，3H)，1.35-1.56(m，4H)，1.63-1.76(m，2H)，2.55-2.72(m，5H)，3.40-3.48(m，1H)，3.75-3.88(m，2H)，4.70(brs，1H)，7.10-7.30(m，5H)，8.34(d，1H)ESI-MS407.4(MH+)甜度(相對(duì)于糖)5500倍實(shí)施例13N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4R)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例12，只是用(S)-2-苯基丁基溴代替(R)-2-苯基丁基溴得到N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4R)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺(2S∶2R＝＞9∶1)固體，總收率52.2％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.69(t，3H)，0.85(s，9H)，0.93(d，3H)，1.38-1.66(m，6H)，2.60-2.78(m，5H)，3.00-3.10(m，1H)，3.58-3.67(m，1H)，3.81(t，1H)，7.10-7.30(m，5H)，4.60(brs，1H)，8.26(d，1H)ESI-MS407.4(MH+)甜度(相對(duì)于糖)3000倍實(shí)施例14N-α-L-(N′-2-乙基丁基天冬氨酰基)-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例12，只是用2-乙基丁醛代替3，3-二甲基丁醛得到N-α-L-(N′-2-乙基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺固體，總收率30.6％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.66(t，3H)，0.79(t，6H)，1.00(d，3H)，1.22-1.36(m，4H)，1.36-1.54(m，3H)，1.64-1.77(m，2H)，2.50-2.66(m，5H)，3.38(brs，1H)，3.67(t，1H)，3.73-3.83(m，1H)，4.66(brs，1H)，7.10-7.23(m，5H)，8.17(d，1H)ESI-MS407.4(MH+)甜度(相對(duì)于糖)3000倍實(shí)施例15N-α-L-(N′-3-甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例12，只是用3-甲基丁醛代替3，3-二甲基丁醛得到N-α-L-(N′-3-甲基丁基天冬氨酰基)-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺固體，總收率25.4％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.66(t，3H)，0.83(d，3H)，0.84(d，3H)，1.00(d，3H)，1.30-1.62(m，5H)，1.62-1.76(m，2H)，2.40-2.54(m，3H)，2.60(t，2H)，3.34-3.44(m，1H)，3.64(t，1H)，3.70-3.80(m，1H)，4.67(brs，1H)，7.12-7.32(m，5H)，8.14(d，1H)ESI-MS393.4(MH+)甜度(相對(duì)于糖)4000倍實(shí)施例16N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基天冬氨酰基)-(1R，2S)-1-甲基-2-二羥基-3-環(huán)己基丙酰胺的合成方法重復(fù)實(shí)施例12，只是用環(huán)己基甲基溴代替(R)-2-苯基丁基溴得到N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2S)-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙酰胺固體，總收率11.3％。1HNMR(DMSO-d6)δ0.88(s，9H)，0.99(d，3H)，0.80-1.80(m，15H)，2.60(d，2H)，2.69(t，2H)，3.41-3.48(m，1H)，3.62-3.72(m，1H)，3.77(t，1H)，4.57(brs，1H)，8.25(d，1H)ESI-MS371.4(MH+)甜度(相對(duì)于糖)100倍實(shí)施例17N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2R)-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙酰胺的合成方法將LAH(0.66g，17.5mmol)懸浮于40ml乙醚中，將懸浮液保持0℃。在該懸浮液中加入2.32g(10.0mmol)N-叔丁基氧羰基-α-D-氨基丙酸的N-甲氧基-N-甲基羧酰胺。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，向其中加入25ml1M硫酸氫鉀水溶液。反應(yīng)溶液用50ml乙醚提取兩次，有機(jī)層用50ml5％碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥。過(guò)濾除去硫酸鎂，濃縮濾液得到1.29g(7.43mmol)(R)-2-N-叔丁氧羰基氨基丙醛固體。將鎂(0.68g，27.8mmol)懸浮于2mlTHF中，向懸浮液中滴加3.29g(18.6mmol)環(huán)己基甲基溴在3mlTHF中的溶液。將反應(yīng)溶液在室溫下攪拌1小時(shí)，向其中加入5mlTHF，將混合的溶液冷卻至-78℃。在反應(yīng)溶液中加入通過(guò)將如上得到的1.29g(7.43mmol)(R)-2-N-叔丁氧羰基氨基丙醛溶解于10mlTHF中得到的溶液，使溫度由-78℃逐漸上升，混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。向該反應(yīng)溶液中加入50ml氯化銨飽和水溶液，混合物用50ml乙醚提取兩次，有機(jī)層用5％碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥。過(guò)濾除去硫酸鎂，濃縮濾液。殘余物經(jīng)PTLC純化得到0.88g(3.25mmol)(1R，2R)-N-叔丁氧羰基-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙胺(2S∶2R＝3∶7)油狀物。將15ml含有4N鹽酸和二惡烷的溶液加入0.88g(3.25mmol)(1R，2R)-N-叔丁氧羰基-1-甲基-2-羥基丙胺中，混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)溶液，殘余物在加入25ml乙醚后進(jìn)一步濃縮。將得到的殘余物溶解于30ml二氯甲烷中。將溶液冷卻至0℃，向上述得到的溶液中加入N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-β-芐基酯1.11g(3.42mmol)、0.50ml(3.58mmol)三乙胺、0.69g(3.58mmol)水溶性碳化二亞胺和0.48g(3.58mmol)HOBT。混合物在冷卻下攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。在減壓濃縮反應(yīng)混合物后，在殘余物中加入50ml水，混合物用50ml乙酸乙酯提取兩次。有機(jī)層用50ml5％檸檬酸水溶液洗滌兩次、用50ml水洗滌一次、用5％碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次和50ml氯化鈉飽和水溶液洗滌一次。在有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥后，過(guò)濾除去硫酸鎂。減壓濃縮濾液，經(jīng)PTLC純化得到0.81g(1.69mmol)N-α-L-(N′-叔丁氧羰基-β-O-芐基天冬氨酰基)-(1R，2R)-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙酰胺粘性油狀物。將8ml含有4N鹽酸和二惡烷的溶液加入0.81g(1.69mmol)N-α-L-(N′-叔丁氧羰基-β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2R)-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙酰胺中，混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)溶液，向殘余物中加入50ml5％碳酸氫鈉水溶液?；旌衔镉?0ml乙酸乙酯提取兩次。有機(jī)層用氯化鈉飽和水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥。過(guò)濾除去硫酸鎂，減壓濃縮濾液得到0.60g(1.60mmol)N-α-L-(β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2R)-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙酰胺淺黃色粘性油狀物。將N-α-L-(β-O-芐基天冬氨?；?-(1R，2R)-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙酰胺(0.60g，1.60mmol)懸浮于12mlTHF中，將懸浮液保持在0℃。向懸浮液中加入0.092ml(1.60mmol)乙酸、0.20ml(1.60mmol)3，3-二甲基丁醛和0.51g(2.41mmol)NaB(OAc)3H?；旌衔镌?℃攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌過(guò)夜。向反應(yīng)溶液中加入20ml碳酸氫鈉飽和水溶液，混合物用50ml乙酸乙酯提取兩次。有機(jī)層用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾除去硫酸鎂，減壓濃縮濾液。殘余物經(jīng)PTLC純化得到0.50g(1.09mmol)N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基-β-O-芐基天冬氨酰基)-(1R，2R)-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙酰胺淺黃色油狀物。將N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基-β-O-芐基天冬氨酰基)-(1R，2R)-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙酰胺(0.50g，1.09mmol)溶解于30ml甲醇中，向其中加入5ml水和0.25g5％披鈀炭(水含量50％)。在氫氣氛下將溶液在室溫下還原4小時(shí)。過(guò)濾除去催化劑，減壓濃縮濾液。干燥殘余物得到0.36g(0.98mmol)N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基天冬氨酰基)-(1R，2R)-1-甲基-2-羥基-3-環(huán)己基丙酰胺固體。1HNMR(DMSO-d6)δ0.86(s，9H)，1.02(d，3H)，0.80-1.74(m，15H)，2.48-2.56(m，2H)，2.60-2.70(m，2H)，3.40-3.55(m，1H)，3.63-3.83(m，2H)，4.53(brs，1H)，8.06(d，1H)ESI-MS3714(MH+)甜度(相對(duì)于糖)750倍。權(quán)利要求1.由式(I)表示的新的天冬氨酰基酰胺衍生物R1-NHC1H(CH2COOH)CONH-C2R2R3-C3H(OH)-R4(I)其中R1表示H、含有1至13個(gè)碳原子的飽和或不飽和直鏈或環(huán)狀烴基或它們的混合烴基；R2和R3分別表示H或選自含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有2至7個(gè)碳原子的烷氧基烷基、含有2至7個(gè)碳原子的羥基烷基、苯基、2-呋喃基、二亞甲基、三亞甲基、四亞甲基和五亞甲基的取代基；當(dāng)R1表示含有1至13個(gè)碳原子的飽和或不飽和直鏈或環(huán)狀烴基或它們的混合烴基，R4表示含有1至12個(gè)碳原子的烷基或由式(II)或(III)表示的取代基，和當(dāng)R1是H，R4表示由式(III)表示的取代基-(CHR5)n-R6(II)-(CH2)mC4HR7R8(III)其中，在式(II)中，R5表示H或含有1-4個(gè)碳原子的烷基，R6表示共含有12個(gè)或更少碳原子的3-10元環(huán)烷基、環(huán)烯基、被烷基取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、二環(huán)烷基、二環(huán)烯基或三環(huán)烯基，和n表示0或1，和在式(III)中R7和R8分別表示H、含有3-4個(gè)碳原子的環(huán)烷基、含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有2-7個(gè)碳原子的烷氧基烷基、苯基、在2-、3-或4-位上帶有選自氟、氯、溴、碘、羥基、含有1-6個(gè)碳原子的烷基、含有2-7個(gè)碳原子的烷氧基、氰基、硝基、乙酰基、氨基和乙酰氨基的苯基、在2-和3-位上或在3-和4-位上帶有亞甲二氧基、三亞甲基或四亞甲基的苯基、2-、3-或4-吡啶基、2-或3-呋喃基或2-或3-噻吩基，和m表示0或1；和C1構(gòu)型是(S)，C2-、C3-和C4-構(gòu)型(R)、(S)或(RS)。2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是H，R2是H，R3是甲基，R4是(S)-、(R)-或(RS)-2-苯基丁基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是H，R2是H，R3是甲基，R4是(S)-、(R)-或(RS)-2-苯基丙基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。4.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是H，R2是H，R3是甲基，R4是(S)-、(R)-或(RS)-2-苯基-3-甲氧基丙基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。5.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是H，R2是H，R3是乙基，R4是(S)-、(R)-或(RS)-2-苯基丁基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。6.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是H，R2是H，R3是1-羥基乙基，R4是(S)-、(R)-或(RS)-2-苯基丁基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。7.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是H，R2和R3是甲基，R4是(S)-、(R)-或(RS)-2-苯基丁基，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。8.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是H，R2是H，R3是甲基，R4是2-苯基乙基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。9.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是3，3-二甲基丁基，R2是H，R3是甲基，R4是(S)-、(R)-或(RS)-2-苯基丁基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。10.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是2-乙基丁基，R2是H，R3是甲基，R4是(S)-、(R)-或(RS)-2-苯基丁基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。11.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是3-甲基丁基，R2是H，R3是甲基，R4是(S)-、(R)-或(RS)-2-苯基丁基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。12.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是3，3-二甲基丁基，R2是H，R3是甲基，R4是環(huán)己基甲基，C2-構(gòu)型是(R)，C3-構(gòu)型是(S)、(R)或(RS)。13.增甜劑，其含有作為活性成分的式(I)的新的天冬氨?；０费苌锘蛩鼈兊柠}。全文摘要本發(fā)明提供了一種具有高穩(wěn)定性、杰出安全性和杰出甜度的低熱值增甜劑，新的天冬氨?；０费苌?，例如N-α-L-天冬氨?；?(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己酰胺，N-α-L-(N′-3，3-二甲基丁基天冬氨?；?-(1R，2S，4S)-1-甲基-2-羥基-4-苯基己基酰胺等等和含有上述衍生物或其鹽作為活性成分的增甜劑。文檔編號(hào)C07C237/08GK1163261SQ97101268公開日1997年10月29日申請(qǐng)日期1997年1月12日優(yōu)先權(quán)日1996年1月12日發(fā)明者竹本正,網(wǎng)野裕正,中村良一郎申請(qǐng)人:味之素株式會(huì)社