專利名稱：作為基質(zhì)金屬蛋白質(zhì)酶和tace抑制劑的鄰－亞磺酰氨基雜芳基異羥肟酸的制備和應(yīng)用的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及基質(zhì)金屬蛋白酶(如明膠酶、溶基質(zhì)素和膠原酶)和TNF-α轉(zhuǎn)化酶(TACE，腫瘤壞死因子-α轉(zhuǎn)化酶)的新的低分子量非肽抑制劑的發(fā)現(xiàn)，此類抑制劑可以用于治療與這些酶有關(guān)的疾病，例如關(guān)節(jié)炎、腫瘤轉(zhuǎn)移、組織潰瘍、異常的傷口愈合、牙周病、骨病、蛋白尿、主動脈瘤、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎后的退行性軟骨丟失、神經(jīng)系統(tǒng)的脫髓鞘病及HIV感染。
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)為一組與結(jié)締組織和基膜的病理學(xué)破壞有關(guān)的疾病[Woessner，J.F.，Jr.FASEB J.，1991，5，2145；Birkedal-Hansen，H.；Moore，W.G.I.；Bodden，M.K.；Windsor，L.J.；Birkedal-Hansen，B.；DeCarlo，A.；Engler，J.A.Crit.Rev.OralBiol.Med.1993，4，197；Cawston，T.E.Pharmacol.Ther.1996，70，163；Powell，W.C.；Matrisian，L.M.Cur.Top.Microbiol.andImmunol.1996，213，1]。這些含鋅的內(nèi)肽酶由酶如膠原酶、溶基質(zhì)素和明膠酶的幾種亞型組成。在這幾類酶中，已顯示明膠酶是與腫瘤的生長和擴(kuò)散最密切相關(guān)的MMPs，而膠原酶與骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)理有關(guān)[Howell，D.S.；Pelletier，J.-P.In Arthritis and AlliedConditions；McCarthy，D.J.；Koopman，W.J.，Eds.；Lea andFebigerPhiladelphia，1993；第12版，2卷，1723頁；Dean，D.D.Sem.Arthritis Rheum.1991，20，2；Crawford，H.C；Matrisian，L.M.Invasion Metast.1994-95，14，234；Ray，J.M.；Stetler-Stevenson，W.G.Exp.Opin.Invest.Drugs，1996，5，323]。
已知在惡性腫瘤中明膠酶的表達(dá)水平升高，且明膠酶能降解可導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移的基膜[Powell，W.C.；Matrisian，L.M.Cur.Top.Microbiol.and Immunol.1996，213，1；Crawford，H.C；Matrisian，L.M.Invasion Metast.1994-95，14，234；Ray，J.M.；Stetler-Stevenson，W.G.Exp.Opin.Invest.Drugs，1996，5，323；Himelstein，B.P.；Canete-Soler，R.；Bernhard，E.J.；Dilks，D.W.；Muschel，R.J.Invasion Metast.1994-95，14，246；Nuovo，G.J.；MacConnell，P.B.；Simsir，A.；Valea，F(xiàn).；French，D.L.CancerRes.1995，55，267-275；Walther，M.M.；Levy，A，；Hurley，K.；Venzon，D.；Linehen，W.M.；Stetler-Stevenson，W.J.Urol.1995，153(Suppl.4)，403A；Tokuraku，M；Sato，H.；Murakami，S.；Okada，Y.；Watanabe，Y.；Seiki，M.Int.J.Cancer，1995，64，355；Himelstein，B.；Hua，J.；Bernhard，E.；Muschel，R.J.Proc.Am.Assoc.Cancer Res.Ann.Meet.1996，37，632；Ueda，Y.；Imai，K.；Tsuchiya，H.；Fujimoto，N.；Nakanishi，I.；Katsuda，S.；Seiki.，M.；Okada，Y.Am.J.Pathol.1996，148，611；Gress，T.M.；Mueller-Pillasch，F(xiàn).；Lerch，M.M.；Friess，H.；Buechler，M.；Adler，G.Int.J.Cancer，1995，62，407；Kawashima，A.；Nakanishi，I.；Tsuchiya，H.；Roessner.A.；Obata，k.；Okada，Y.Virchows Arch.，1994，424，547-552.]。最近表明實(shí)體瘤生長所需的血管生成從其病因?qū)W來說，也具有明膠成分[Crawford，H.C；Matrisian，L.M.Invasion Metast.1994-95，14，234；Ray，J.M.；Stetler-Stevenson，W.G.Exp.Opin.Invest.Drugs，1996，5，323]。而且，有證據(jù)提示明膠酶與動脈粥樣硬化相關(guān)的蝕斑破裂(plaque rupture)有關(guān)[Dollery，C.M.；McEwan，J.R.；Henney，A.M.Circ.Res.1995，77，863；Zempo，N.；Koyama，N.；Kenagy，R.D.；Lea，H.J.；Clowes，A.W.Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.1996，16，28；Lee，R.T.；Schoen，F(xiàn).J.；Loree，H.M.；Lark，M.W.，Libby，P.Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.1996，16，1070.]。由MMPs介導(dǎo)的其它疾病有再狹窄、MMP-介導(dǎo)的骨質(zhì)減少、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥疾病、皮膚老化、腫瘤生長、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、角膜潰瘍、異常的傷口愈合、骨病、蛋白尿、主動脈瘤、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎后的退行性軟骨丟失、神經(jīng)系統(tǒng)的脫髓鞘病、肝硬化、腎小球疾病、胎膜的早期破裂(premature rupture)、炎性腸道疾病、牙周病、老年性視網(wǎng)膜黃斑變形、糖尿病性視網(wǎng)膜病、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病、早熟性視網(wǎng)膜病、眼部炎癥、圓錐形角膜、Sjogren’s綜合癥、近視、眼瘤、眼血管生成/新血管生成和角膜移植排斥反應(yīng)。
自從首次認(rèn)識到這些酶能夠降解為軟骨的主要結(jié)構(gòu)成分的膠原蛋白和蛋白聚糖，長期以來一直假定MMPs是發(fā)生在關(guān)節(jié)炎組織破壞的重要介質(zhì)[Sapolsky，A.I.；Keiser，H.；Howell，D.S.；Woessner，J.F.，Jr.；J.Clin.Invest.1976，58，1030；Pelletier，J.-P.；Martel-Pelletier，L.；Howell，D.S.；Ghandur-Mnaymneh，L.；Enis，J.E.；Woessner，J.F.，Jr.，Arthritis Rheum.1983，26，63.]，并由于鑒定了新的MMPs，該假設(shè)得到進(jìn)一步的發(fā)展，例如，1994年從乳癌細(xì)胞中克隆出膠原酶-3(MMP-13)，并在1995年首次報(bào)告膠原酶-3與關(guān)節(jié)炎有關(guān)[Freiji，J.M.；Diez-Itza，I.；Balbin，M.；Sanchez，L.M.；Blasco，R.；Tolivia，J.；Lopez-Otin，C.J.Biol.Chem.1994，269，16766；Flannery，C.R.；Sandy，J.D.102-17，41stAnn.Meet.Orth.Res。Soc.Orlando，F(xiàn)L.1995年二月13-16日]。越來越多的證據(jù)提示MMP-13與關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)理有關(guān)。關(guān)節(jié)軟骨的主要結(jié)構(gòu)成分，即II型膠原蛋白，為MMP-13的優(yōu)選底物，并且該酶在裂解II型膠原酶方面明顯比其它膠原酶更有效[Knauper.V.；Lopez-Otin，C.Smith，B，；Knight，G.；Murphy，G.J.Biol.Chem.，1996，27l，1544-1550；Mitchell，P.G.；Magna，H.A.；Reeves，L.M.；Lopresti-Morrow，L.L.；Yocum，S.A.；Rosner，P.J.；Geoghegan，K.F.；Hambor，J.E.J.Clin.Invest.1996，97，761.]。MMP-13由軟骨細(xì)胞產(chǎn)生，在人骨關(guān)節(jié)組織中已發(fā)現(xiàn)MM-13的水平升高[Reboul，P.；Pelletier，J-P.；Hambor，J.；Magna，H.；Tardif，G.；Cloutier，J-M.；Martel-Pelletier，J.；Arthritis Rheum.1995，38(Suppl，9)，S268；Shlopov，B.V.；Mainardi，C.L.；Hasty，K.A.ArthritisRheum.1995，38(Suppl，9)，S313；Reboul，P.；Pelletier，J-P.；Tardif，G.；Cloutier，J-M.；Martel-Pelletier，J.J.Clin.Invest.1996，97，2011]。盡管10年前已對有效的MMPs抑制劑作了描述，但這些早期發(fā)現(xiàn)的肽的底物模擬MMP抑制劑的生物利用度較差，結(jié)果它們被排除在關(guān)節(jié)炎動物模型之外。生物利用度更高的非-肽MMP抑制劑可優(yōu)選用于治療由MMPs介導(dǎo)的疾病。
THF-α轉(zhuǎn)化酶催化由膜結(jié)合的THF-α前體蛋白形成THF-α。THF-α是一種促炎細(xì)胞因子，目前認(rèn)為該因子在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膿毒性休克、移植排斥反應(yīng)、胰島素抵抗和HIV感染以及它的為文獻(xiàn)所充分證明的抗腫瘤特性中起作用。例如，用抗-THF-α抗體和轉(zhuǎn)基因動物進(jìn)行的研究證實(shí)，阻斷THF-α的形成可抑制關(guān)節(jié)炎的進(jìn)展[Rankin，E.C.；Choy，E.H.；Kassimos，D.；Kingsley，G.H.；Sopwith，A.M.；Isenberg，D.A.；Panayi，G.S.Br.J.Rheumatol.1995，34，334；Pharmaprojects，1996，Therapeutic Updates 17(Oct.)，au197-M2Z.]。這種觀察近來也擴(kuò)大到人。由TNF-α介導(dǎo)的其它疾病有充血性心力衰竭、惡病質(zhì)、食欲低下、炎癥、發(fā)熱、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥疾病和炎性腸道疾病。
因此，期望小分子明膠酶和TACE抑制劑能有效治療各種疾病狀態(tài)。盡管在所述文獻(xiàn)中已經(jīng)鑒定和公開了多種MMP和TACE抑制劑，但絕大多數(shù)此類分子為肽的或肽-樣化合物，這類化合物具有生物利用度和藥代動力學(xué)的問題，以致限制它們的臨床效果。為了上述疾病狀態(tài)的有效的長期治療，因而非常需要低分子量的、強(qiáng)效的及長效的、口服可生物利用的明膠酶、膠原酶和/或TACE抑制劑。近來已公開了多種非肽，含硫異羥肟酸，現(xiàn)列于下。
美國專利5455258、5506242和5552419，以及歐洲專利申請EP606046Al和WIPO國際申請WO96/00214和WO97/22587公開了非肽基質(zhì)金屬蛋白酶排制劑，其中以化合物CGS27023A為代表。
該類MMP抑制劑的發(fā)現(xiàn)由MacPherson等在J.Med.Chem.，(1997)，40，2525中給予進(jìn)一步的描述。其它的公開以氨磺酰(sulfonamide)為基礎(chǔ)的MMP抑制劑的出版物為歐洲專利申請EP-757984-A1和WIPO國際公布WO95/35275、WO95/35276、WO96/27583、WO97/19068和WO97/27174，這些抑制劑為如所示的氨磺酰-異羥肟酸酯或類似的氨磺酰-甲酸酯。
在WIPO國際專利申請WO96/33172和WO97/20824中公開了β-磺酰胺-異羥肟酸酯MMP抑制劑CGS27023A的類似物，其中異羥肟酸的α碳連在磺酰胺氮環(huán)上。
德國專利申請DE19,542,189-A1公開了其它作為MMP抑制劑的環(huán)磺酰胺的實(shí)例。此處含磺酰胺的環(huán)與苯環(huán)稠合形成異喹啉。
歐洲專利申請EP-780386-A1和WIPO國際專利申請WO97/24117公開了磺酰胺-異羥肟酸酯MMP抑制劑的類似物，其中磺酰胺的氮由碳原子取代，見以下結(jié)構(gòu)通式。
本發(fā)明概述本發(fā)明抑制TACE和MMP的鄰-亞磺酰氨基雜芳基異羥肟酸由下式及其藥學(xué)上可接受的鹽和其光學(xué)異構(gòu)體及非對映體來表示
其中異羥肟酸部分和亞磺酰胺部分與基團(tuán)A的相鄰的碳原子結(jié)合，其中A是個(gè)任選由R1、R2和R3取代的5-6元雜芳基；其具有1-3個(gè)獨(dú)立選自N，O，和S的雜原子；Z是芳基、雜芳基、或稠合于苯基的雜芳基，其中芳基是苯基、萘基、或稠合于雜芳基的苯基，其中雜芳基定義同上，芳基和雜芳基可任選由R1、R2、R3和R4取代；雜芳基定義同上且任選由R1、R2、R3和R4取代；R1、R2、R3和R4獨(dú)立為-H、-COR5、-F、-Br、-Cl、-I、-C(O)NR5OR6、-CN、-OR5、-C1-C4-全氟烷基、-S(O)xR5其中x是0-2、-OPO(OR5)OR6、-PO(OR6)R5、-OC(O)NR5R6、-COOR5、-CONR5R6、-SO3H、-NR5R6、-NR5COR6、-NR5COOR6、-SO2NR5R6、-NO2、-N(R5)SO2R6、-NR5CONR5R6、-NR5C(＝NR6)NR5R6、具有1-3個(gè)獨(dú)立選自N、O、和S的雜原子且任選具有1或2個(gè)雙鍵及任選由1-3個(gè)各自獨(dú)立選自R5取代的3-6元環(huán)雜烷基；如上定義的芳基或雜芳基、-SO2NHCOR5或-CONHSO2R5其中R5不是H、-四唑-5-基、-SO2NHCN、-SO2NHCONR5R6或直鏈或支鏈的-C1-C6烷基、任選具有1或2個(gè)雙鍵的-C3-C6環(huán)烷基，-C2-C6鏈烯基、或-C2-C6鏈炔基，其各自任選由選自下列的基團(tuán)取代-COR5、-CN、-C2-C6鏈烯基、-C2-C6鏈炔基、-OR5、-C1-C4-全氟烷基、-S(O)xR5其中x是0-2、-OC(O)NR5R6、-COOR5、-CONR5R6、-SO3H、-NR5R6、-NR5COR6、-NR5COOR6、-SO2NR5R6、-NO2、-N(R5)SO2R6、-NR5CONR5R6、如上定義的-C3-C6環(huán)烷基、如上定義的-C3-C6環(huán)雜烷基、如上定義的芳基或雜芳基、-SO2NHCOR5或-CONHSO2R5其中R5不是H，-OPO(OR5)OR6、-PO(OR6)R5、-四唑-5-基、-C(O)NR5OR6、-NR5C(＝NR6)NR5R6、-SO2NHCONR5R6或-SO2NHCN；條件是當(dāng)R1和R2在A相鄰的碳原子上時(shí)，R1和R2與其相連的碳原子一起可形成具有1或2個(gè)獨(dú)立選自N，O，和S的雜原子的5-7元飽和或不飽和的碳環(huán)或雜環(huán)，各自可任選由1-4個(gè)獨(dú)立選自R4的基團(tuán)取代；R5和R6獨(dú)立定義為H、如上定義的芳基或雜芳基、如上定義的-C3-C6環(huán)烷基、如上定義的-C3-C6環(huán)雜烷基、-C1-C4-全氟烷基、或直鏈或支鏈的-C1-C6烷基、-C2-C6鏈烯基、或-C2-C6鏈炔基，其各自任選由-OH、-COR8、-CN、-C(O)NR8OR9、-C2-C6鏈烯基、-C2-C6鏈炔基、-OR8、-C1-C4-全氟烷基、-S(O)xR8其中x是0-2、OPO(OR8)OR9、-PO(OR8)R9、-OC(O)NR8R9、-COOR8、-CONR8R9、-SO3H、-NR8R9、-NCOR8R9、-NR8COOR9、-SO2NR8R9、-NO2、-N(R8)SO2R9、-NR8CONR8R9、如上定義的-C3-C6環(huán)烷基、如上定義的-C3-C6-環(huán)雜烷基、如上定義的芳基或雜芳基、-SO2NHCOR8或-CONHSO2R8其中R8不是H，-四唑-5-基、-NR8C-(＝NR9)NR8R9、-SO2NHCONR8R9或-SO2NHCN取代；R7是氫、直鏈或支鏈的-C1-C6烷基、-C2-C6鏈烯基、或-C2-C6鏈炔基，其各自任選由-OH、-COR5、-CN、-C2-C6鏈烯基、-C2-C6鏈炔基、-OR5、-C1-C4-全氟烷基、-S(O)xR5其中x是0-2、-OPO(OR5)OR6、-PO(OR5)R6、-OC(O)NR5R6、-COOR5、-CONR5R6、-SO3H、-NR5R6、-NR5COR6、-NR5COOR6、-SO2NR5R6、-NO2、-N(R5)SO2R6、-NR5CONR5R6、如上定義的-C3-C6環(huán)烷基、如上定義的-C3-C6-環(huán)雜烷基、如上定義的芳基或雜芳基、-SO2NHCOR5或-CONHSO2R5其中R5不是H，-四唑-5-基、-NR5C(＝NR6)NR5R6、-C(O)NR5OR6、-SO2NHCONR5R6或-SO2NHCN；或R7是任選由R1、R2、R3和R4取代的苯基或萘基，或是具有1-3個(gè)獨(dú)立選自N、O、和S的雜原子且任選由R1、R2、R3和R4取代的5-6元雜芳基；或R7是定義同上的-C3-C6環(huán)烷基或3-6元環(huán)雜烷基；或R7-CH2-N-A，其中A定義同上，可形成任選再含有一個(gè)選自O(shè)、S和N雜原子的非芳族的1，2-稠合雜芳基的7-10元雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可任選與另一個(gè)苯環(huán)稠合；R8和R9獨(dú)立為H、如上定義的芳基或雜芳基、如上定義的-C3-C7環(huán)烷基或環(huán)雜烷基、-C1-C4-全氟烷基、直鏈或支鏈的-C1-C-6烷基、-C2-C6鏈烯基、或-C2-C6鏈炔基，其各自任選由羥基、烷氧基、芳氧基、-C1-C4-全氟烷基、氨基、單-或雙-C1-C6-烷基氨基、羧酸、羰基烷氧基和羰基芳氧基、硝基、氰基、一級甲酰胺基、單-或雙-C1-C6烷基氨基甲酰基取代。
優(yōu)選的化合物是那些其中與連有亞磺酰氨基碳相鄰的A的兩個(gè)碳都具有非氫取代基的化合物。優(yōu)選化合物還有其中Z是4-烷氧基苯基、4-芳氧基苯基或4-雜芳氧基苯基的化合物。
以上定義的術(shù)語“雜芳基”包括，但不限于，吡咯、呋喃、噻吩、吡啶、嘧啶、噠嗪、吡嗪、三唑、吡唑、咪唑、異噻唑、噻唑、異噁唑和噁唑。術(shù)語“5-7元飽和或不飽和的雜環(huán)”包括，但不限于噁唑烷、噻唑烷、咪唑烷、四氫呋喃、四氫噻吩、四氫噻吩砜、二氫吡喃、四氫吡喃、哌啶、吡咯烷、二噁烷、嗎啉、氮雜卓和二氮雜卓。術(shù)語“稠于苯基的雜芳基”包括，但不限于吲哚、異吲哚、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并異噻唑、喹啉、異喹啉、喹喔啉、喹唑啉、苯并三唑、吲唑、苯并咪唑、苯并噻唑、苯并異噁唑和苯并噁唑。
用于制備本發(fā)明化合物的下列化合物(I-V)是熟知的，以下給出參考。下面所列僅作說明，并不以任何方式構(gòu)成限制。
這些物質(zhì)的參考文獻(xiàn)如下化合物Ia)Dolle，RE；Hoyer，DW；Schmidt，SJ；Ross，TM；Rinker，JM；Ator，MA Eur.Pat.Appl.EP-628550.
b)Wermuth，C-G；Schlewer，G；Bourguignon，J-J；Maghioros，G；Bouchet，M-Jet.al.J.Med.Chem(1989)，32，528-537c)Yutugi，S et.al.Chem.Pharm.Bull，(1971)19，2354-2364d)Dolle，RE；Hoyer，D；Rinker，JM；Ross，TM；Schmidt，SJ
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Med.Chem.(1996)，39，2482.化合物V商業(yè)上提供。
本發(fā)明的化合物還顯示出抑制酶MMP-1、MMP-9、MMP-13和TNF-α轉(zhuǎn)化酶(TACE)的能力，因此可用于治療關(guān)節(jié)炎、腫瘤轉(zhuǎn)移、組織潰瘍、異常傷口愈合、牙周病、移植排斥反應(yīng)、胰島素抵抗、骨病和HIV感染。本發(fā)明詳述下列反應(yīng)流程(流程I)說明由鄰氨基雜芳基甲酸酯合成本發(fā)明化合物的通用方法。僅供說明，所示的鄰氨基雜芳基甲酸酯是3-氨基-噻吩-4-甲酸甲酯其中A代表噻吩，將其用其中Z是4-甲氧基苯的對甲氧基苯磺酰氯胺磺?；?，然后再用其中R7為芐基的芐基溴烷基化。再接著用兩步將得到的酯轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的異羥肟酸。顯然，在通用的反應(yīng)流程中，可用具有與羧基相鄰的氨基且具有任選取代基R1、R2和R3(其中Z和R7如上所定義)的其它雜芳香基團(tuán)來制備本發(fā)明的異羥肟酸。
流程I.
流程II所示的是合成其中A是吡啶基的本發(fā)明的實(shí)施例化合物的方法。通過將被保護(hù)的-BOC氨基吡啶金屬化及隨后的羧化作用來合成鄰氨基酯。將得到的酯化合物(2)脫保護(hù)，再將該胺(3)磺酰化，得到其中Z是4-甲氧基苯基的(4)。按流程I中方法將(4)的NH-磺酰胺烷基化，再將該酯官能基水解，將得到的羧酸(6)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的異羥肟酸而得到吡啶基-異羥肟酸酯(7)。通過相同的路線可得到其它的吡啶基-異羥肟酸酯。
流程II
流程III和IV說明將氨基結(jié)合在與本發(fā)明化合物的磺酰胺的氮相連的取代基上的兩個(gè)方法。因此，在流程III中，將NH-磺酰胺用炔丙基溴烷基化得到炔丙基磺酰胺。該炔在伯胺或仲胺及氯化亞銅存在下與多聚甲醛反應(yīng)得到炔丙基胺，將其同前一樣轉(zhuǎn)化成所要求的異羥肟酸。
流程III
流程IV中，將對乙酯基苯甲磺酰胺基團(tuán)的酯選擇性水解得到單羧酸?？蓪⒃撍徂D(zhuǎn)化成酰胺(未圖示)，再將第二級酯A-CO2R轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的異羥肟酸酯，或用乙硼烷將其還原成相應(yīng)的醇?？蓪⒃摯纪ㄟ^芐基溴轉(zhuǎn)化成類似的胺，再將該酯A-CO2R轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的異羥肟酸酯。流程IV
合成磺酰芳基上不同取代基的方法見流程V-VIII中所示。如流程V中所示，聯(lián)芳基磺?；峭ㄟ^在溴取代的苯磺酰胺上Suzuki偶合來合成。起始原料溴取代的苯磺酰胺由商業(yè)提供的溴代苯磺酰氯和氨基-酸或氨基-酯，H2N-A-CO2R來合成，再將得到的NH-磺酰胺烷基化而制得。另外，可將溴代芳基磺酰胺用Ishiyama等[J.Org.Chem.(1995)，60，7508]的方法轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的硼酸，再與適當(dāng)?shù)姆蓟u偶合而制得。
流程V
合成磺酰芳基醚的方法見流程VI-VIII中所示。在流程VI中，聯(lián)芳基醚或芳基雜芳基醚由熟知的磺酰氯為原料合成(見例如ZookSE；Dagnino，R；Deason，ME，Bender，SL；Melnick，MJ WO 97/20824)。
流程VI
另外，該聯(lián)芳基醚可按流程VII中所示由相應(yīng)的硼酸或通過磺酰苯酚來制備。
流程VII.
芳基醚也可按流程VIII中所示由對氟代苯磺酰胺的氟取代來制備。也可用此方法制備芳基或烷基醚。
流程VIII
異羥肟酸的堿性鹽可用藥學(xué)上可接受的形成堿的金屬陽離子如鋰、鈉、鉀、鈣和鋁來形成。酸加成鹽在當(dāng)取代基含有堿性氨基時(shí)，用藥學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸、乙酸、苯甲酸、琥珀酸、乳酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸或甲磺酸來形成。
下列特別的實(shí)施例只用于說明，對本說明并不以任何方式構(gòu)成限制。用于制備本發(fā)明化合物的其它方法對于有機(jī)合成領(lǐng)域的技術(shù)熟練人員來講可能是顯而易見的。
實(shí)施例13-(4-甲氧基-苯磺?；被?-噻吩-2-甲酸甲酯在5.00g(0.032mol)3-氨基-2-甲酯基噻吩溶于40ml氯仿的溶液中加入7.73mL(0.032mol)吡啶，再加入6.57g(0.032mol)對甲氧基苯磺酰氯。將混合液室溫下攪拌5小時(shí)，然后用3N HCl洗滌。再將有機(jī)相用Na2SO4干燥，過濾，真空濃縮。將得到的乳色固體用乙醚洗滌，真空干燥得到6.89g(66％)所要求的磺酰胺。電噴霧質(zhì)譜328.2(M+H)。
實(shí)施例24-(4-甲氧基-苯磺?；被?-噻吩-3-甲酸甲酯按實(shí)施例1所述相同的方法，用5.00g(0.026mol)3-氨基-4-甲酯基噻吩鹽酸鹽，經(jīng)乙醚研磨后提供3.50g(41％)所要求的磺酰胺，為棕色固體。電噴霧質(zhì)譜328.2(M+H)。
實(shí)施例35-(4-甲氧基-苯磺?；被?-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯按實(shí)施例1所述相同的方法，用2.00g(0.012mol)1-甲基-2-氨基-3-乙酯基吡唑，經(jīng)EtOAc/己烷重結(jié)晶后提供0.923g(23％)所要求的磺酰胺，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜340.2(M+H)。
實(shí)施例45-(4-甲氧基-苯磺酰基氨基)-4-甲基-噻吩-2-甲酸甲酯按實(shí)施例1所述相同的方法，用4.14g(0.024mol)3-氨基-4-甲基-2-甲酯基噻吩，經(jīng)乙醚研磨后提供4.89g(47％)所要求的磺酰胺，為白色固體。EI質(zhì)譜340.9(M+H)。
實(shí)施例53-[芐基-(4-甲氧基-苯磺酰基)-氨基]-噻吩-2-甲酸甲酯在2.0g(6.116mmol)實(shí)施例1的產(chǎn)物的25ml DMF溶液中加入0.257g(6.422mmol)60％的氫化鈉。將得到的混合液于室溫下攪拌30分鐘，然后加入0.76mL(6.422mmol)的芐基溴。將反應(yīng)混合液室溫下攪拌過夜，倒入水中，再用乙醚提取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。殘留物在硅膠上層析，用EtOAc/己烷(1∶3)洗脫得到1.62g(65％)所要求的產(chǎn)物，為白色結(jié)晶。CI質(zhì)譜418(M+H)。
實(shí)施例64-[芐基-(4-甲氧基-苯磺酰基)-氨基]-噻吩-3-甲酸甲酯按實(shí)施例5所述相同的方法，用1.50g(4.587mmol)的實(shí)施例2的產(chǎn)物，在硅膠上層析，用EtOAc/己烷(1∶10)洗脫提供1.257g(66％)所要求的產(chǎn)物，為棕色油狀物。CI質(zhì)譜418(M+H)。
實(shí)施例75-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯按實(shí)施例5所述相同的方法，0.843g(2.484mmol)的實(shí)施例3的產(chǎn)物，用乙醚研磨后提供0.924g(87％)所要求的產(chǎn)物為白色固體。CI質(zhì)譜430(M+H)。
實(shí)施例8
3-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-4-甲基-噻吩-2-甲酸甲酯按實(shí)施例5所述相同的方法，用2.00g(4.64mmol)的實(shí)施例4的產(chǎn)物，用乙醚研磨后提供1.648g(68％)所要求的產(chǎn)物為白色固體。CI質(zhì)譜432(M+H)。
實(shí)施例93-[芐基-(4-甲氧基-苯磺酰基)-氨基]-噻吩-2-甲酸在1.494g(3.583mmol)的實(shí)施例5產(chǎn)物溶于15mL甲醇及15Ml THF的混合液中加入15ml 1N NaOH溶液。將反應(yīng)混合液室溫下攪拌36小時(shí)，真空除去有機(jī)液。將得到的混合液用10％HCl酸化，用EtOAc提取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。將得到的殘留物用乙醚研磨，過濾得到1.327g(92％)所要求的羧酸，為白色固體。CI質(zhì)譜404(M+H)。
實(shí)施例104-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-噻吩-3-甲酸按實(shí)施例9所述相同的方法，用1.157g(2.775mmol)的實(shí)施例6的產(chǎn)物，用乙醚研磨后提供0.94g(84％)所要求的羧酸為褐色固體。電噴霧質(zhì)譜404(M+H)。
實(shí)施例115-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸在0.799g(1.862mmol)的實(shí)施例7產(chǎn)物的20mL甲醇/THF(1∶1)溶液中加入9.3ml 1N NaOH溶液，將得到的混合液加熱回流18小時(shí)。然后將反應(yīng)冷卻至室溫，真空除去有機(jī)物。將得到的混合液用10％HCl酸化，用EtOAc提取。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。將得到的殘留物用乙醚研磨，過濾得到0.697g(93％)所要求的羧酸，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜402(M+H)。
實(shí)施例123-[芐基-(4-甲氧基-苯磺酰基)-氨基]-4-甲基-噻吩-2-甲酸按實(shí)施例11所述相同的方法，用1.366g(2.622mmol)的實(shí)施例8的產(chǎn)物，用乙醚研磨后提供1.16g(87％)所要求的羧酸為白色固體。電噴霧質(zhì)譜416(M-H)-。
實(shí)施例133-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-噻吩-2-甲酸羥基酰胺在0.80g(1.985mmol)的實(shí)施例9產(chǎn)物的20mL的二氯甲烷溶液中加入0.154ml DMF，再加入2.0ml 2M的草酰氯溶液，將得到的反應(yīng)混合液室溫下攪拌1小時(shí)。
在一分離瓶中，將1.66ml(11.91mmol)三乙胺加入到0℃的0.552g(7.94mmol)鹽酸羥胺的8.7mL THF和2.2mL水的混合液中。將混合物在0℃下攪拌15分鐘后，將酰氯溶液一次性加入其中，將得到的溶液攪拌過夜下溫?zé)嶂潦覝亍Ｈ缓髮⒎磻?yīng)混合液用10％HCl酸化至pH3，用EtOAc提取。將合并的有機(jī)相用Na2SO4干燥，過濾，真空濃縮。將粗品殘留物用乙醚研磨得到0.66g(80％)所要求的異羥肟酸，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜419(M+H)。
實(shí)施例144-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-噻吩-3-甲酸羥基酰胺按實(shí)施例13所述相同的方法，用0.80g(1.985mmol)的實(shí)施例10的產(chǎn)物提供0.61g(73％)所要求的異羥肟酸，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜419(M+H)。
實(shí)施例155-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸羥基酰胺按實(shí)施例13所述相同的方法，用0.580g(1.446mmol)的實(shí)施例11的產(chǎn)物提供0.446g(74％)所要求的異羥肟酸，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜417(M+H)。
實(shí)施例163-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-4-甲基-噻吩-2-甲酸羥基酰胺按實(shí)施例13所述相同的方法，用0.50g(0.986mmol)的實(shí)施例12的產(chǎn)物提供0.30g(58％)所要求的異羥肟酸，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜433(M+H)。
實(shí)施例175-溴-4-(4-甲氧基-苯磺酰基氨基)-噻吩-3-甲酸甲酯于室溫下，在實(shí)施例2的產(chǎn)物的5.0mL AcOH-CHCl3(1∶1)溶液中加入0.299g(1.682mmol)N-溴代琥珀酰亞胺。將反應(yīng)物攪拌18小時(shí)，然后用乙醚稀釋，用水和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。將褐色固體殘留物用乙醚-己烷(1∶1)洗滌得到0.504g(81％)所要求的產(chǎn)物，為褐色固體。電噴霧質(zhì)譜406.1(M+H)+。
實(shí)施例184-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-5-溴-噻吩-3-甲酸甲酯按實(shí)施例5所述相同的方法，用0.424g(1.044mmol)的實(shí)施例17的產(chǎn)物得到0.400g(77％)所要求的異羥肟酸，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜496.1(M+H)+。
實(shí)施例194-[芐基-(4-甲氧基-苯磺酰基)-氨基]-5-溴-噻吩-3-甲酸按實(shí)施例11所述相同的方法，用0.356g(0.718mmol)的實(shí)施例18的產(chǎn)物提供0.290g(84％)所要求的異羥肟酸，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜482.1(M+H)+。
實(shí)施例204-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-5-溴-噻吩-3-甲酸羥基酰胺按實(shí)施例13所述相同的方法，用0.250g(0.519mmol)的實(shí)施例19的產(chǎn)物提供0.222g(86％)所要求的異羥肟酸，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜497.1(M+H)+。
實(shí)施例214-[芐基-(4-甲氧基-苯磺酰基)-氨基]-5-乙炔基-噻吩-3-甲酸甲酯在0.294g(0.634mmol)實(shí)施例18的產(chǎn)物的2.5mlDMF和2.5ml三乙胺溶液中加入0.448g(3.168mmol)三甲硅烷基乙炔、0.022g(0.032mmol)二氯化雙(三苯膦)-鈀(II)和3mg碘化亞銅(I)。然后將反應(yīng)混合物加熱至80℃6小時(shí)，再冷卻至室溫，用乙醚稀釋。將有機(jī)相用5％HCl溶液、水和鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。將殘留物溶于5mL THF中，加入1mL 1M氟化四丁基銨的THF溶液，將反應(yīng)液室溫下攪拌1小時(shí)，然后用乙醚稀釋，用5％HCl溶液、水和鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。殘留物在硅膠上層析，用EtOAc-己烷(1∶5)洗脫得到0.159g(61％)所要求的產(chǎn)物，為棕色油狀物。電噴霧質(zhì)譜442.2(M+H)+。
實(shí)施例224-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-5-乙炔基-噻吩-3-甲酸按實(shí)施例11所述相同的方法，用0.136g(0.333mmol)的實(shí)施例21的產(chǎn)物，在硅膠上層析，用EtOAc-己烷(1∶1)洗脫后提供0.075g(57％)所要求的產(chǎn)物為褐色固體。電噴霧質(zhì)譜428.1(M+H)+。
實(shí)施例234-[芐基-(4-甲氧基-苯磺酰基)-氨基]-5-乙炔基-噻吩-3-甲酸羥基酰胺按實(shí)施例13所述相同的方法，用0.055g(0.634mmol)的實(shí)施例22的產(chǎn)物提供0.044g(77％)所要求的產(chǎn)物，為棕色泡沫狀物。電噴霧質(zhì)譜443.1(M+H)+。
實(shí)施例245-溴-4-[(4-甲氧基-苯磺酰基)-吡啶-3-基甲氨基]噻吩-3-甲酸甲酯在4.8g(11.82mmol)實(shí)施例17產(chǎn)物的5.0mL DMF溶液中加入2.04g(12.41mmol)3-吡啶甲基氯鹽酸鹽和4.89g(35.46mmol)碳酸鉀。然后將反應(yīng)混合液室溫下攪拌18小時(shí)，然后用水稀釋，用乙醚提取。再將有機(jī)相用6N HCl溶液提取，然后將酸性水溶液層用6N NaOH溶液堿化，再用乙醚提取。將得到的醚層用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮得到4.16g(71％)所要求的產(chǎn)物，為褐色固體。電噴霧質(zhì)譜498(M+H)。
實(shí)施例255-溴-4-[(4-甲氧基-苯磺?；?-吡啶-3-基甲氨基]噻吩-3-甲酸在0.40g(0.860mmol)實(shí)施例24產(chǎn)物的9.0mL THF-MeOH(1∶1)溶液中加入0.072g(1.72mmol)氫氧化鋰一水合物。將反應(yīng)混合液加熱回流18小時(shí)，然后真空濃縮。將殘留物用THF洗滌，過濾。真空濃縮濾液得到0.388g(100％)所要求的產(chǎn)物，為白色泡沫狀物。電噴霧質(zhì)譜483(M+H)。
實(shí)施例265-溴-4-[(4-甲氧基-苯磺酰基)-吡啶-3-基甲氨基]噻吩-3-甲酸羥基酰胺在0℃下向0.82mL(1.63mmol)2M草酰氯的二氯甲烷溶液中加入0.126ml(1.63mmol)DMF，將混合液在0℃下攪拌15分鐘，然后升至室溫，再攪拌1小時(shí)。將0.374g(0.817mmol)實(shí)施例193的產(chǎn)物的1mL DMF溶液加入到該反應(yīng)混合液中，將反應(yīng)室溫下攪拌1小時(shí)。
在一分離瓶中，將1.70ml(12.25mmol)三乙胺加入到0℃的0.567g(8.165mmol)鹽酸羥胺的8.1mL THF和2.3mL水的混合液中。將混合物在0℃下攪拌15分鐘后，將酰氯溶液一次性加入其中，將得到的溶液攪拌過夜下溫?zé)嶂潦覝?。將反?yīng)混合液用CH2Cl2稀釋，用水和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。將有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾，真空濃縮。將粗品殘留物用乙醚研磨得到0.235g(61％)所要求的異羥肟酸，為褐色泡沫狀物。電噴霧質(zhì)譜498(M+H)。
實(shí)施例27N-(2，6-二甲氧基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯在3-氨基-2，6-二甲氧基吡啶(1.5g，7.87mmol)混懸液中加入二碳酸二叔丁酯(3.43g，15.7mmol)。將混合液加熱回流36小時(shí)，冷至室溫，用水稀釋。將水溶液用EtOAc提取3次，將有機(jī)提取液合并，用鹽水洗滌，MgSO4干燥，真空濃縮。殘留物經(jīng)柱層析純化，用己烷/乙酸乙酯作洗脫劑(梯度100％至1/4)洗脫得到2.00g(100％)N-(2，6-二甲氧基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯，為黃色油狀物。電噴霧質(zhì)譜254.9(M+H)+。
實(shí)施例28N-(4-甲酯基-2，6-二甲氧基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯將實(shí)施例27的產(chǎn)物(1g，3.93mmol)溶解于Et2O(35mL)和TMEDA(1.7mL，1.18mmol)中，冷卻至-78℃。滴加正丁基鋰(4.75mL，11.87mmol)，將反應(yīng)在-78℃下攪拌15分鐘，再升至-10℃攪拌2.5小時(shí)。再將溶液冷至-78℃，滴加氯代甲酸甲酯(0.6mL，7.8mmol)的Et2O(4.5mL)液。將反應(yīng)保持-78℃10分鐘，然后升至-10℃攪拌1.5小時(shí)，加入NH4Cl(飽和)終止反應(yīng)。將反應(yīng)混合液用EtOAc提取3次。將有機(jī)提取液合并，用鹽水洗滌，MgSO4干燥，真空濃縮。殘留物經(jīng)柱層析純化，用己烷/乙酸乙酯作洗脫劑(梯度9/1至4/1)得到0.423g(34％)N-(4-甲酯基-2，6-二甲氧基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯，為白色固體。電噴霧質(zhì)譜312.8(M+H)+。
實(shí)施例293-氨基-2，6-二甲氧基異煙酸甲酯將對甲苯磺酸水合物(0.282g，1.48mmol)溶解于甲苯(11mL)中，加熱回流過夜，共沸除去水(Dean-Stark分水器)。次日，將反應(yīng)冷至室溫，加入溶于甲苯(4mL)的實(shí)施例28的產(chǎn)物。再將反應(yīng)加熱回流0.5小時(shí)。將反應(yīng)物冷至室溫，倒入NaHCO3(飽和)中，用乙醚提取3次。將有機(jī)物合并，用鹽水洗滌，MgSO4干燥，真空濃縮。殘留物經(jīng)柱層析純化，用己烷/乙酸乙酯作洗脫劑(梯度100％至9/1)洗脫得到0.278g(97％)3-氨基-2，6-二甲氧基異煙酸甲酯，為黃色固體。電噴霧質(zhì)譜212.8(M+H)+。
實(shí)施例303-(4-甲氧基-苯磺?；被?-2，6-二甲氧基-異煙酸甲酯在實(shí)施例29產(chǎn)物(0.278g，1.31mmol)的吡啶(2mL)溶液中加入對甲氧基苯磺酰氯(0.28g，1.38mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜，加入水終止反應(yīng)。將混合液用乙醚提取3次。將有機(jī)提取液合并，用鹽水洗滌，MgSO4干燥，真空濃縮得到0.444g(89％)3-(4-甲氧基-苯磺酰基氨基)-2，6-二甲氧基-異煙酸甲酯，為一固體。電噴霧質(zhì)譜382.8(M+H)+。
實(shí)施例313-[芐基-(4-甲氧基-苯磺酰基)-氨基]-2，6-二甲氧基-異煙酸甲酯將實(shí)施例30的產(chǎn)物(0.444g，1.16mmol)溶解于DMF(4mL)中，冷卻至0℃。先加入芐基溴(0.186mL，1.6mmol)，再加入NaH(56mg，1.39mmol，60％分散于礦油中)，將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝亍?小時(shí)后，將反應(yīng)用水稀釋，用Et2O提取4次。將有機(jī)提取液合并，用鹽水洗滌，MgSO4干燥，真空濃縮得到0.545g(100％)純品3-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-2，6-二甲氧基-異煙酸甲酯，為油狀物。電噴霧質(zhì)譜472.9(M+H)+。
實(shí)施例323-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-2，6-二甲氧基-異煙酸用實(shí)施例25的方法，將實(shí)施例31的產(chǎn)物水解成相應(yīng)的羧酸得到3-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-2，6-二甲氧基-異煙酸。電噴霧質(zhì)譜459.0(M+H)+。
實(shí)施例333-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-N-羥基-2，6-二甲氧基-異煙酰胺用實(shí)施例26的方法，將實(shí)施例32的羧酸產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的異羥肟酸，3-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-N-羥基-2，6-二甲氧基-異煙酰胺。電噴霧質(zhì)譜470.4(M+H)+。
藥理學(xué)測定MMP-1，MMP-9，和MMP-13抑制作用的方法這些測定是以用基質(zhì)金屬蛋白質(zhì)酶MMP-1、MMP-13(膠原酶)或MMP-9(明膠酶)卵裂(cleavage)硫肽底物如Ac-Pro-Leu-Gly(2-巰基-4-甲基-戊酰基)-Leu-Gly-OEt為基礎(chǔ)，其導(dǎo)致能與DTNB(5，5-二硫雙(2-硝基-苯甲酸))進(jìn)行比色反應(yīng)的底物產(chǎn)物釋放。通過色率增加測定酶活性。將硫肽底物在100％DMSO中按20mM原液新鮮制備，將DTNB按100mM原液溶于100％DMSO中，并于室溫下暗處儲存。使用前，將底物和DTNB用底物緩沖液(50mM HEPES pH7.5，5mM CaCl2)兩者一起稀釋至1mM。將酶原液用測試緩沖液(50mM HEPES pH7.5，5mM CaCl2，0.02％Brij)稀釋至要求的最終濃度。將測試緩沖液、酶、溶媒或抑制劑、及DTNB/底物按此順序加入到96孔平板(反應(yīng)總體積200μl)中，在一平板讀出器上在405nm處分光光度監(jiān)測顏色增加5分鐘，繪出顏色增加對時(shí)間的線性直線。
另外，還使用熒光肽底物。在此實(shí)驗(yàn)中，該肽底物含有熒光基團(tuán)及猝滅基團(tuán)。在用MMP切斷底物時(shí)，用熒光平板讀數(shù)器定量產(chǎn)生的熒光。該測定用HCBC測試緩沖液(50mM HEPES pH7.0，5mM Ca+2，0.02％Brij，0.5％半胱胺酸)及人重組MMP-1、MMP-9或MMP-13進(jìn)行。將底物溶于甲醇中，以1mM等份試樣冷凍儲存。測定時(shí)，將底物和酶用HCBC緩沖液稀釋到所要求的濃度。將化合物加入到含酶的96孔平板中，通過加入底物開始反應(yīng)。觀測反應(yīng)(激發(fā)340nm，發(fā)射444nm)10分鐘，繪出熒光增加對時(shí)間的線性直線。
無論是硫肽或是熒光肽測定都用直線的斜率計(jì)算及代表反應(yīng)率。確定反應(yīng)率的線性(r2＞0.85)。用Dunnett’S多點(diǎn)對比實(shí)驗(yàn)，計(jì)算對照率的均值(x±sem)，并與藥物處理率比較統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.05)。用多劑量的藥物得出量效關(guān)系，用線性回歸估算具有95％CI的IC50值。
測定TACE抑制作用的方法用96孔微量滴定板，每孔加入由10μl TACE(Immunex，最終濃度1μg/mL)、70μl(pH7.4)含10％甘油的Tris緩沖液(最終濃度10mM)，及10μl待測化合物的DMSO溶液(最終濃度1μM，DMSO濃度＜1％)組成的溶液，室溫下孵育10分鐘。加入熒光肽基底物(最終濃度100μM)至每孔開始反應(yīng)，然后在振搖器中振搖5秒鐘。
觀測反應(yīng)(激發(fā)340nm，發(fā)射420nm)10分鐘，繪出熒光增加對時(shí)間的線性直線。計(jì)算直線的斜率，其代表反應(yīng)率。
確定反應(yīng)率的線性(r2＞0.85)。用Dunnett’S多點(diǎn)對比實(shí)驗(yàn)，計(jì)算對照率的均值(x±sem)，并與藥物處理率比較統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.05)。用多劑量的藥物得出量效關(guān)系，用線性回歸估算具有95％CI的IC50值。
以上體外基質(zhì)金屬蛋白質(zhì)酶抑制作用和TACE抑制作用的藥理測定結(jié)果在下表I中給出。表I.MMP和TACE的抑制作用實(shí)施例MMP-11MMP-91MMP-131TACE11319.3(1)57.3(10)1440(1) 66.8(10)1522.1(1)93016 104.120638.5 236.4471.52348.9(1)38.4(300)35(300)261000 70 296 42％(1)331227 15 472941.IC50nM或％抑制作用(濃度，μM)藥用組合物可將本發(fā)明化合物單獨(dú)或與藥用載體一起給與需要此治療的患者服用。藥用載體可以是固體或液體。
所用的固體載體可包括一或多種物質(zhì)，其也可用作香味劑、潤滑劑、助溶劑、混懸劑、填充劑、潤滑劑、助壓劑、粘合劑或片劑崩解劑或包封物質(zhì)。粉末劑中，載體是細(xì)分散的固體，其與分散較好的活性組分混合。片劑中，活性組分與適當(dāng)比例的具有必需的壓制性質(zhì)的載體混合，按所要求的形狀和尺寸壓緊。粉末劑和片劑優(yōu)選含有高達(dá)99％的活性組分。適當(dāng)?shù)墓腆w載體包括，如，磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石粉、糖、乳糖、糊精、淀粉、明膠、纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷、低熔點(diǎn)蠟和離子交換樹脂。
液體載體可用在制備溶液、混懸液、乳液、糖漿劑和酏劑中。可將本發(fā)明的活性組分溶解或混懸于藥學(xué)上可接受的液體載體如水、有機(jī)溶劑、二者混合物或藥學(xué)上可接受的油類或油脂中。液體載體可含有其它適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)用添加劑如助溶劑、乳化劑、緩沖劑、保護(hù)劑、甜味劑、香味劑、混懸劑、增稠劑、著色劑、粘度調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑或滲透壓調(diào)節(jié)劑。口服及非腸道給藥的適當(dāng)?shù)囊后w載體實(shí)施例包括水(部分含有以上的添加劑，如纖維素衍生物，優(yōu)選羧甲基纖維素鈉溶液)、醇類(包括單元醇及多元醇，如乙二醇)和其衍生物、及油類(如精餾的椰子油和花生油)。非腸道給藥的載體也可以是油酯如油酸乙酯和十四烷酸異丙酯。無菌液體載體可用于非腸道給藥的無菌液體形式的組合物中。
可利用是無菌溶液或混懸液的液體藥用組合物進(jìn)行如肌內(nèi)、腹膜內(nèi)或皮下注射。也可以靜脈內(nèi)給予無菌溶液。口服給藥可用液體或固體組合物的形式。
本發(fā)明的化合物也可以常用的栓劑形式直腸給藥。對于鼻腔內(nèi)或支氣管內(nèi)吸入或吹入給藥，可將本發(fā)明化合物制成水或部分水溶液，然后利用其氣霧劑的形式。本發(fā)明化合物也可通過利用含有活性組分和載體的透皮貼片透皮給藥，該載體對活性組分惰性、對皮膚無毒、且可通過皮膚將藥劑轉(zhuǎn)運(yùn)入血全身吸收。該載體可采用各種形式如乳油和膏劑、糊劑、凝膠劑、及吸附裝置。乳油和膏劑可以是水包油或油包水類型的粘性液體或半固體乳劑。由分散在含有活性組分的石油或親水性石油中的吸附粉末組成的糊劑也是適合的?？捎酶鞣N吸附裝置將活性組分釋放至血流中，如覆蓋有一含活性組分及有或無載體的儲層的半透膜，或含有活性組分的基膜。其它吸附裝置可從文獻(xiàn)中得知。
治療患有MMP或TACE依賴疾病的特殊患者所用的劑量必須由主治醫(yī)生主觀決定?？勺円蛩匕C(jī)能障礙的嚴(yán)重性、體重、年齡、患者的反應(yīng)方式。治療一般從小于該化合物最適劑量的小劑量開始。然后增加劑量直至達(dá)到最佳效果。準(zhǔn)確的口服、非腸道、鼻腔、或支氣管內(nèi)的給藥劑量將由主治醫(yī)生根據(jù)對所治療的個(gè)體經(jīng)驗(yàn)及標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)療原則來決定。
優(yōu)選的藥用組合物是單位劑量形式，如片劑或膠囊。在這些形式中，組合物再分為含有適量活性組分的單位劑型；該單位劑型可被包裝成組合物，如袋裝的粉末、含有液體的小瓶、安瓿、預(yù)充滿的注射器或小藥囊。單位劑量形式可以是，如膠囊或片劑本身，或是任何這些組合物的適量的包裝形式。
權(quán)利要求
1.具有下式的化合物，其可以形成的藥學(xué)上可接受的鹽，及其存在的光學(xué)異構(gòu)體及非對映體
其中異羥肟酸部分和亞磺酰胺部分與基團(tuán)A的相鄰的碳原子結(jié)合，其中A是具有1-3個(gè)獨(dú)立選自N、O、和S的雜原子且任選由R1、R2、R3和R4取代的5-6元雜芳基；Z是芳基、雜芳基、或稠合于苯基或另一雜芳基的雜芳基，其中芳基是苯基、萘基、或稠合于雜芳基的苯基，其中雜芳基定義同上，芳基和雜芳基可任選由R1、R2、R3和R4取代；其中雜芳基定義同上且任選由R1、R2、R3和R4取代；R1、R2、R3和R4獨(dú)立為-H、-COR5、-F、-Br、-Cl、-I、-C(O)NR5OR6、-CN、-OR5、-C1-C4-全氟烷基、-S(O)xR5其中x是0-2、--OPO(OR5)OR6、-PO(OR6)R5、-OC(O)NR5R6、-COOR5、-CONR5R6、-SO3H、-NR5R6、-NR5COR6、-NR5COOR6、-SO2NR5R6、-NO2、-N(R5)SO2R6、-NR5CONR5R6、-NR5C(＝NR6)NR5R6、具有1-3個(gè)獨(dú)立選自N、O、和S的雜原子且任選具有1或2個(gè)雙鍵及任選由1-3個(gè)各自獨(dú)立選自R5取代的3-6元環(huán)雜烷基；如上定義的芳基或雜芳基、-SO2NHCOR5或-CONHSO2R5其中R5不是H、-四唑-5-基、-SO2NHCN、-SO2NHCONR5R6或直鏈或支鏈的-C1-C6烷基、任選具有1或2個(gè)雙鍵的-C3-C6環(huán)烷基，-C2-C6鏈烯基、或-C2-C6鏈炔基，其各自任選由選自下列的基團(tuán)取代-COR5、-CN、-C2-C6鏈烯基、-C2-C6鏈炔基、-OR5、-C1-C4-全氟烷基、-S(O)xR5其中x是0-2、-OC(O)NR5R6、-COOR5、-CONR5R6、-SO3H、-NR5R6、-NR5COR6、-NR5COOR6、-SO2NR5R6、-NO2、-N(R5)SO2R6、-NR5CONR5R6、如上定義的-C3-C6環(huán)烷基、如上定義的-C3-C6環(huán)雜烷基、如上定義的芳基或雜芳基、-SO2NHCOR5或-CONHSO2R5其中R5不是H，-OPO(OR5)OR6、-PO(OR6)R5、-四唑-5-基，-C(O)NR5OR6、-NR5C(＝NR6)NR5R6、-SO2NHCONR5R6或-SO2NHCN；條件是當(dāng)R1和R2在A相鄰的碳原子上時(shí)，R1和R2與其相連的碳原子-起可形成具有1或2個(gè)獨(dú)立選自N，O，和S的雜原子的5-7元飽和或不飽和的碳環(huán)或雜環(huán)，各自可任選由1-4個(gè)獨(dú)立選自R4的基團(tuán)取代；R5和R6獨(dú)立為H、如上定義的芳基或雜芳基、如上定義的-C3-C6環(huán)烷基、如上定義的-C3-C6環(huán)雜烷基、-C1-C4-全氟烷基、或直鏈或支鏈的-C1-C6烷基、-C2-C6鏈烯基、或-C2-C6鏈炔基，其各自任選由-OH、-COR8、-CN、-C(O)NR8OR9、-C2-C6鏈烯基、-C2-C6鏈炔基、-OR8、-C1-C4-全氟烷基、-S(O)xR8其中x是0-2、OPO(OR8)OR9、-PO(OR8)R9、-OC(O)NR8R9、-COOR8、-CONR8R9、-SO3H、-NR8R9、-NCOR8R9、-NR8COOR9、-SO2NR8R9、-NO2、-N(R8)SO2R9、-NR8CONR8R9、如上定義的-C3-C6環(huán)烷基、如上定義的-C3-C6-環(huán)雜烷基、如上定義的芳基或雜芳基、-SO2NHCOR8或-CONHSO2R8其中R8不是H，-四唑-5-基、NR8C-(＝NR9)NR8R9、-SO2NHCONR8R9或-SO2NHCN取代；R7是氫、直鏈或支鏈的-C1-C6烷基、-C2-C6鏈烯基、或-C2-C6鏈炔基，其各自任選由-OH、-COR5、-CN、-C2-C6鏈烯基、-C2-C6鏈炔基、-OR5、-C1-C4-全氟烷基、-S(O)xR5其中x是0-2、-OPO(OR5)OR6、-PO(OR5)R6、-OC(O)NR5R6、-COOR5、-CONR5R6、-SO3H、-NR5R6、-NR5COR6、-NR5COOR6、-SO2NR5R6、-NO2、-N(R5)SO2R6、-NR5CONR5R6、如上定義的-C3-C6環(huán)烷基、如上定義的-C3-C6-環(huán)雜烷基、如上定義的芳基或雜芳基、-SO2NHCOR5或-CONHSO2R5其中R5不是H，-四唑-5-基、--NR5C(＝NR6)NR5R6、-C(O)NR5OR6、-SO2NHCONR5R6或-SO2NHCN；或R7是任選由R1、R2、R3和R4取代的苯基或萘基，或是具有1-3個(gè)獨(dú)立選自N、O、和S的雜原子且任選由R1、R2、R3和R4取代的5-6元雜芳基；或R7是定義同上的-C3-C6環(huán)烷基或3-6元環(huán)雜烷基；或R7-N-A，其中A定義同上，可形成任選再含有一個(gè)選自O(shè)、S和N雜原子的非芳族的1，2-稠合的雜芳基的7-10元雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可任選與另一個(gè)苯環(huán)稠合；R8和R9獨(dú)立為H、如上定義的芳基或雜芳基、如上定義的-C3-C7環(huán)烷基或環(huán)雜烷基、-C1-C4-全氟烷基、直鏈或支鏈的-C1-C6-烷基、-C2-C6鏈烯基、或-C2-C6鏈炔基，其各自任選由羥基、烷氧基、芳氧基、-C1-C4-全氟烷基、氨基、單-或雙-C1-C6-烷基氨基、羧酸、羰基烷氧基和羰基芳氧基、硝基、氰基、一級甲酰氨基、單-或雙-C1-C6-烷基氨基甲酰基取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中與連有亞磺酰氨基碳相鄰的A的兩個(gè)碳原子都具有非氫的取代基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中Z基團(tuán)是對烷氧基苯基、對芳氧基苯基或?qū)﹄s芳氧基苯基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其選自3-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-4-甲基-噻吩-2-甲酸羥基酰胺，4-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-5-溴-噻吩-3-甲酸羥基酰胺，4-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-5-乙炔基-噻吩-3-甲酸羥基酰胺，5-溴-4-[(4-甲氧基-苯磺?；?-吡啶-3-基-甲氨基]-噻吩-3-甲酸羥基酰胺和3-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-N-羥基-2，6-二甲氧基-異煙酰胺。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其選自3-[芐基-(4-甲氧基-苯磺酰基)-氨基]-噻吩-2-甲酸羥基酰胺4-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-噻吩-3-甲酸羥基酰胺5-[芐基-(4-甲氧基-苯磺?；?-氨基]-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸羥基酰胺。
6.抑制哺乳動物由基質(zhì)金屬蛋白酶介導(dǎo)的病理改變的方法，其包括給予需要此治療的哺乳動物治療有效量的抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中治療的病癥是動脈粥樣硬化、動脈粥樣硬化蝕斑形成、由動脈粥樣硬化蝕斑破裂引起的冠狀血栓形成、MMP-誘發(fā)的骨質(zhì)疏松癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎性疾病、皮膚老化、血管生成、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤生長、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、角膜潰瘍、異常創(chuàng)傷愈合、骨病、蛋白尿、主動脈瘤、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)損傷后的退行性軟骨丟失、神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘疾病、肝硬化、腎小球疾病、胎膜的過早破裂(premature rupture)、炎性腸道疾病或牙周病。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中治療的病癥是老年性視網(wǎng)膜黃斑變形、糖尿病性視網(wǎng)膜病、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病、早熟性視網(wǎng)膜病、眼部炎癥、圓錐形角膜、Sjogren’s綜合征、近視、眼瘤、眼血管生成/新血管生成和角膜移植排斥反應(yīng)。
9.抑制哺乳動物由TNF-α轉(zhuǎn)化酶(TACE)誘發(fā)的病理變化的方法，其包括給予需要此治療的哺乳動物治療有效量的抑制TACE的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中治療的癥狀是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、移植排斥反應(yīng)、惡病質(zhì)、厭食癥、炎癥、發(fā)熱、胰島素抵抗、敗血性休克、充血性心力衰竭、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥疾病、炎性腸道疾病、或HIV感染。
11.藥用組合物，其包括藥物載體及治療有效量的抑制基質(zhì)金屬蛋白酶或TACE的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及基質(zhì)金屬蛋白酶(如明膠酶、溶基質(zhì)素和膠原酶)和TNF－α轉(zhuǎn)化酶(TACE,腫瘤壞死因子－α轉(zhuǎn)化酶)的新的低分子量非肽抑制劑,其可用于治療與這些酶有關(guān)的疾病,例如關(guān)節(jié)炎、腫瘤生長和轉(zhuǎn)移、血管生成、組織潰瘍、異常的傷口愈合、牙周病、骨病、蛋白尿、主動脈瘤、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎后的退行性軟骨丟失、神經(jīng)系統(tǒng)的脫髓鞘病、移植排斥反應(yīng)、惡病質(zhì)、食欲低下、炎癥、發(fā)熱、胰島素抵抗、膿毒性休克、充血性心力衰竭、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎性疾病、炎性腸道疾病、HIV感染、老年性視網(wǎng)膜黃斑變形、糖尿病性視網(wǎng)膜病、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病、早熟性視網(wǎng)膜病、眼部炎癥、圓錐形角膜、Sjogren’s綜合征、近視、眼瘤、眼血管生成/新血管生成。本發(fā)明抑制TACE和MMP的鄰－亞磺酰氨基異羥肟酸由式(1)及其藥學(xué)上可接受的鹽和其光學(xué)異構(gòu)體及非對映體來表示,其中異羥肟酸部分和亞磺酰胺部分與相鄰的基團(tuán)A的碳原子結(jié)合,其中:A定義為具有1－3個(gè)獨(dú)立選自N、O和S的雜原子且任選由R
文檔編號C07D213/78GK1240437SQ97180607
公開日2000年1月5日 申請日期1997年10月8日 優(yōu)先權(quán)日1997年10月8日
發(fā)明者J·I·萊文, F·C·納爾遜 申請人:美國氰胺公司