專利名稱：用作鎮(zhèn)痛劑的異喹啉的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可以用作鎮(zhèn)痛劑的化合物。
背景技術(shù)：
許多哺乳動物和兩棲類起源的內(nèi)源肽都與特異性類鴉片受體結(jié)合，引起與典型的麻醉藥鴉片制劑類似的鎮(zhèn)痛反應(yīng)。已經(jīng)表明，許多不同類型的類鴉片受體共同存在于高等動物中。例如參見W.Martin等，J.Pharmacol.Exp.Ther.,197，第517頁(1975)；和J.Lord等，Nature(倫敦)，257，第495頁(1977)。已經(jīng)鑒定出三種不同類型的類鴉片受體。第一種受體μ表現(xiàn)出對于腦啡肽樣肽的鑒別親和性。第二種受體δ表現(xiàn)出對于嗎啡和其它多環(huán)生物堿較高的選擇性。第三種受體κ表現(xiàn)出對或者以上兩種配體相同的親和性和對強啡肽的優(yōu)先親和性。一般來說，μ受體似乎更涉及鎮(zhèn)痛作用。δ受體似乎涉及行為作用，盡管δ和κ受體也可以介導(dǎo)鎮(zhèn)痛。
每種類鴉片受體當與鴉片制劑結(jié)合時，引起該類型受體特有的特異性生物學(xué)反應(yīng)。當鴉片制劑激活一種以上的受體時，影響每種受體的生物學(xué)反應(yīng)，由此產(chǎn)生副作用。鴉片制劑特異性和選擇性越低，給與該鴉片制劑引起較強副作用的機會越大。
在現(xiàn)有技術(shù)中，鴉片制劑、類鴉片肽及其類似物或者不能表現(xiàn)出對它們結(jié)合的受體類型或受體的特異性和選擇性，或表現(xiàn)出有限程度特異性和選擇性。
鎮(zhèn)痛類鴉片的主要作用部位是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)。常規(guī)的麻醉性鎮(zhèn)痛藥一般是相當疏水的，因此極適于滲透諸如血腦障礙之類的脂質(zhì)膜。由于這種物理能力，鎮(zhèn)痛劑傾向于與腦內(nèi)中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的類鴉片受體結(jié)合，然而，它們不必與同源受體亞型結(jié)合。這種結(jié)合引起醫(yī)學(xué)上不良的副作用發(fā)生。
鴉片制劑可以引起嚴重的和潛在的致死副作用。與中樞神經(jīng)系統(tǒng)受體的非特異性相互作用引起諸如呼吸窘迫、耐受性、身體依賴能力和加速的(precipitated)脫癮性腦綜合癥的副作用。參見K.Budd,InInternational Encyclopedia of Pharmacology and Therapeutics；N.E.Williams和H.Wilkinson,Eds.,Pergammon(牛津)，112，第51頁(1983)。因此，由于與類鴉片鎮(zhèn)痛劑相關(guān)的那些副作用影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，預(yù)期主要通過外周神經(jīng)系統(tǒng)中的類鴉片受體起作用的類鴉片鎮(zhèn)痛劑不引起類似的不想要的副作用。
迄今為止，已知發(fā)揮外周鎮(zhèn)痛作用的較少幾類的藥劑中的一類是非甾體抗炎藥劑，諸如阿斯匹林、異丁苯丙酸和ketorolac。這些藥劑不與類鴉片受體相互作用，但已知抑制環(huán)氧合酶并減弱前列腺素的合成。這些弱鎮(zhèn)痛劑沒有中樞介導(dǎo)的副作用，但它們可以引起其它副作用，諸如胃腸道潰瘍。
因此，需要可以實際影響外周神經(jīng)系統(tǒng)并因此通過實際防止不想要的副作用發(fā)生而克服常規(guī)鴉片制劑的某些缺點的類鴉片鎮(zhèn)痛劑。
因此需要提供類類鴉片樣肽，它們在外周神經(jīng)系統(tǒng)上起作用，但實際避免了與常規(guī)外周作用的鎮(zhèn)痛劑有關(guān)的不想要的副作用。
也需要可以口服的類鴉片鎮(zhèn)痛劑。
發(fā)明概述本發(fā)明提供通式(Ⅰ)的鎮(zhèn)痛化合物
其中Z為
其中n為1或2，而R0為C6-12芳基或C7-18烷芳基；R1選自氫；-NH-C1-6烷基；C1-6烷基；C6-12芳基；C7-18芳烷基；精氨酰基和R30NHC(=NH)-，其中R30為氫、C6-12芳基、C7-18芳烷基或C1-6烷基；R2為氫；C1-6烷基或OH；R3為C6-12芳基或C6-18芳烷基；R4為C6-12芳基；C7-18芳烷基或C1-12烷基；R5為C1-6烷基；氫；OH；鹵素；SH；NO2；NH2；-NH-C1-6烷基；NH2C(=NH)-；NH2C(=NH)-NH-；-COOR31，其中R31為氫或C1-6烷基；X為-CH2NHC(O)-；-CH2NHC(O)O-；-C(O)NH-或-CH2NH-；L為C1-12烷基鏈，它可以用至少一個選自以下的取代基取代環(huán)部分；C1-6烷基；OR31，其中R31為氫或C1-6烷基；SR32，其中R32為氫或C1-6烷基；-NHC(O)R33，其中R33為C6-12芳基、C7-18芳烷基或C1-6烷基；-OC(O)R34，其中R34為氫、C6-12芳基、C7-18芳烷基、C1-6烷基、-NHR35，其中R35為氫、C6-12芳基或C1-6烷基；和NR6R7，其中R6和R7每個獨立地為氫或C1-6烷基；條件是當R5為氫時，Z為
和X為-C(O)NH-或-CH2NH-；L為用至少一個選自以下的取代基取代的C1-12烷基鏈環(huán)部分；C1-6烷基；OR31，其中R31為氫或C1-6烷基；SR32，其中R32為氫或C1-6烷基；-NHC(O)R33，其中R33為C6-12芳基、C7-18芳烷基或C1-6烷基；-OC(O)R34，其中R34為氫、C6-12芳基、C7-18芳烷基、C1- 6烷基、-NHR35，其中R35為氫、C6-12芳基或C1-6烷基；和NR6R7，其中R6和R7每個獨立地為氫或C1-6烷基。
本發(fā)明也提供包含那些用于治療疼痛的化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。
本發(fā)明還提供式(Ⅰ)化合物用于生產(chǎn)治療疼痛的外周鎮(zhèn)痛劑的用途，其中L為C1-12烷基鏈，它可以用至少一個選自以下的取代基取代環(huán)部分；C1-6烷基；OR31，其中R31為氫C1-6烷基；SR32，其中R32為氫或C1-6烷基；-NHC(O)R33，其中R33為C6-12芳基、C7-18芳烷基或C1-6烷基；-OC(O)R34，其中R34為氫、C6-12芳基、C7-18芳烷基、C1-6烷基、-NHR35，其中R35為氫、C6-12芳基或C1-6烷基；和NR6R7，其中R6和R7每個獨立地為氫或C1-6烷基。本發(fā)明的詳細描述Z最好為
，其中R1、R2和R3每個如上定義。R1優(yōu)選為氫；NH2C(=NH)-或C1-6烷基；R1更優(yōu)選為氫；NH2C(=NH)-或-CH3。R1最優(yōu)選為氫。R2優(yōu)選為氫或-CH3。R2更優(yōu)選為氫。R3優(yōu)選為-CH2-C6H2R8R9-或-CH2-HOC6HR8R9，其中R8和R9的每個獨立地為-CH3或氫。R3更優(yōu)選為
；其中R8和R9的每個如上定義。R8和R9最好為CH3。X優(yōu)選為-C(O)NH-或-CH2NH-。X更優(yōu)選為-C(O)NH-。L優(yōu)選為-(CH2)1-3-CHR10-(CH2)1-3-，其中R10為OH或NH2。L更優(yōu)選為-(CH2)-CHR10-(CH2)-，其中R10為OH或NH2。L更優(yōu)選為-(CH2)-CHOH-(CH2)-。R4優(yōu)選為C1-12烷基；
其中R11、R12、R13、R14和R15的每個獨立地為CH3、氫、鹵素、OH、SH、NH2或NO2。R4更優(yōu)選為-CH3；-C(CH3)3；-CH(CH3)2；
其中R13如上定義。R4最優(yōu)選選自
本發(fā)明化合物優(yōu)選自以下的化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物2-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#1；2-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快(fast)異構(gòu)體)化合物#1A；2-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢(slow)異構(gòu)體)化合物#1B；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-7-羥基1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#2；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#3；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#3A；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#3B；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#4；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#4A；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#4B；鹽酸S-2-(2-氨基-3-(羥基-苯基)-S-1,2,3,4-四氫異喹啉-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-酰胺(外消旋混合物)化合物#8；鹽酸S-2-(2-氨基-3-(4-羥基-苯基)-S-1,2,3,4-四氫異喹啉-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-酰胺(慢異構(gòu)體)化合物#8A；2-S-氨基-3-(4-羥基-苯基)-1-{3-(R-2-羥基-3-苯基-丙基氨基)-甲基)-S-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}丙-1-酮二三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#9A；2-(酪氨酰)-3S-(D-苯丙酰氨基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#10A；2-(酪氨酰)-3S-苯丙酰氨基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#11A；2-酪氨酰-3S-酪氨酰氨基甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#12A；2-酪氨酰-3-芐氧基甲酰氨基甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#13A；反-2-(3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-2-羰基-S-1,2,3,4-四氫喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#14；反-2-(3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-2-羰基-S-1,2,3,4-四氫喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#14A；反-2-(3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-2-羰基-S-1,2,3,4-四氫喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#14B。
本發(fā)明化合物更優(yōu)選自以下的化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物2-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#1B；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-7-羥基1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#2；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#3A；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#3B；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#4A；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#4B。
本發(fā)明化合物最優(yōu)選為2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#3A及其藥學(xué)上可接受的衍生物。
也提供用于治療疼痛、包含本發(fā)明鎮(zhèn)痛化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。
在本發(fā)明的另一方面，提供選自以下的鎮(zhèn)痛化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物用于生產(chǎn)治療疼痛的外周鎮(zhèn)痛劑的用途(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#5；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#5A；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#5B；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#6；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#6A；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#6B；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#7；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#7A；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#7B。
在一個優(yōu)選實施方案中，提供選自以下的鎮(zhèn)痛化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物用于生產(chǎn)治療疼痛的外周鎮(zhèn)痛劑的用途2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#5A；和2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#5B；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#7A。
所謂“藥學(xué)上可接受的衍生物”是指式(Ⅰ)化合物或任何給與受者時，能夠提供(直接或間接)式(Ⅰ)化合物或其活性代謝物或殘留物的其它化合物的任何藥學(xué)上可接受的鹽、酯或這種酯的鹽。
本領(lǐng)域技術(shù)人員會意識到，根據(jù)所述的取代基，式(Ⅰ)化合物可以含有一個或多個手性中心，因此以許多不同的異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體(即對映體)及其包括外消旋混合物在內(nèi)的混合物形式存在。所有這類異構(gòu)體、對映體以及包括外消旋混合物在內(nèi)的它們的混合物都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
用于本申請中的術(shù)語“烷基”表示(用鹵素、羥基、氨基或C6-20芳基)取代或未取代的直鏈、支鏈或環(huán)狀烴部分，其中所述直鏈、支鏈或環(huán)狀烴部分可以插入一個或多個雜原子(諸如氧、氮或硫)。
術(shù)語“烷氧基”表示取代或未取代的烷基，其中該烷基通過氧原子與相鄰原子共價連接(例如甲氧基和乙氧基)。
術(shù)語“烷氧基烷基”表示通過烷基與相鄰基團連接的烷氧基(例如甲氧基甲基)。
術(shù)語“芳基”表示一個碳環(huán)部分，它可以被取代或插入至少一個雜原子(例如N、O或S)，并含有至少一個苯環(huán)型環(huán)(例如苯基和萘基)。
術(shù)語“芳烷基”表示通過烷基與相鄰原子連接的芳基(例如芐基)。
術(shù)語“?；笔侵竿ㄟ^置換-OH基團，由(鹵素(F、Cl、Br、I)、C6-20芳基或C1-6烷基)取代或未取代的羧酸衍生的基團。同與其相關(guān)的酸一樣，?；梢允侵寤蚍甲宓模?用鹵素、C1-5烷氧基烷基、硝基或O2)取代或未取代的，并且無論該分子的其余部分的結(jié)構(gòu)如何，該官能團的性質(zhì)都基本保持相同(例如乙酰基、丙?；惗□；?、新戊酰基、己酰基、三氟乙酰基、氯乙?；铜h(huán)乙?；?。
術(shù)語“環(huán)狀部分”是指插入至少一個雜原子(諸如O、N或S)的C3-12環(huán)烷基。環(huán)狀部分的實例包括(但不限于)哌嗪、嗎啉和硫代嗎啉。
術(shù)語“氨基保護基團和氧保護基團”是肽合成領(lǐng)域眾所周知的。在T.W Greene,Protective Groups In Organic Synthesis,(John Wiley＆Sons，第2版1991)中可以發(fā)現(xiàn)這類氨基保護基團和氧保護基團。正如肽化學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員眾所周知的，用于具體合成流程的合適保護基團取決于許多因素，包括其它反應(yīng)性官能團的存在和用于去除過程所需的反應(yīng)條件。
表1中PBQ扭體檢測的術(shù)語“ED50”的定義為與對照相比，使觀察扭體數(shù)減少50％的藥物劑量。用于熱板檢測中的術(shù)語“ED50”的定義為與對相比，提高反應(yīng)潛伏期2倍所需的藥物劑量，它通過平行線機率單位分析測定。
術(shù)語“Ki”為結(jié)合抑制常數(shù)。
除非另外陳述，否則本發(fā)明鎮(zhèn)痛化合物中存在的氨基酸為天然L-構(gòu)型。
在整個本申請中，異構(gòu)體通常根據(jù)它們通過HPLC(高效液相色譜)分析時的保留時間，鑒定為慢異構(gòu)體和快異構(gòu)體。該特征方法是肽化學(xué)領(lǐng)域中廣為接受的，參見例如于1986年7月8日頒發(fā)的美國專利4,599,325中。
用于氨基酸的術(shù)語“殘基”是指通過除去羧基的羥基和氨基的一個氫，由相應(yīng)的氨基酸衍生的基團。
已經(jīng)制備了大量的基于通式(Ⅰ)的化合物，并將其作為類鴉片受體配體和全身性作用鎮(zhèn)痛劑進行評價。這些化合物與它們各自的結(jié)合抑制常數(shù)一起列于表1中。
本發(fā)明也提供藥用組合物。合適的組合物具有藥學(xué)有效量的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體或輔助劑本發(fā)明也提供治療動物諸如哺乳動物，包括人類疼痛的方法。該方法包括給與病人藥學(xué)有效量的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物的步驟。也可以使用上述藥用組合物。
以下實施例用來更好的描述本發(fā)明。這些實施例僅用于說明，不以任何方式限制本發(fā)明。
在體外用豚鼠回腸(GPI)縱肌制品評價所述肽的類鴉片活性，并在嚙齒動物中，在BPQ誘導(dǎo)的扭體模型(外周神經(jīng)活性)和熱板試驗(中樞神經(jīng)活性)中體內(nèi)測定它們的抗感受傷害活性。在用外周類鴉片拮抗劑N-甲基烯丙嗎啡引起的抗感受傷害的拮抗作用并與扭體試驗和熱板試驗中的活性的比較，證實主要在外周神經(jīng)中介導(dǎo)鎮(zhèn)痛作用。外周神經(jīng)止痛法在扭體試驗中表現(xiàn)出高效力，并且在熱板試驗中表現(xiàn)出低效力。
PBQ(苯基-ρ-苯醌)誘導(dǎo)的小鼠扭體為對中樞神經(jīng)止痛法和外周神經(jīng)止痛法兩者的評價。對于試驗操作步驟，參見Sigmund等，Proc,Soc.Exp.Biol.Med.,95，第729頁(1957)，該論文通過引用結(jié)合到本文中。通過抑制小鼠熱板反應(yīng)，測定中樞神經(jīng)止痛效果。對于試驗操作步驟，參見G.Woolfe和A.Macdonald,J.Pharmacol.Exp.Ther.,80，第300頁(1944)，該論文通過引用結(jié)合到本文中。通過Schiller等，Biophys.Res.Commun.,85，第1322頁(1975)中提出的試驗操作步驟，確定測定類鴉片受體對μ和δ的結(jié)合親和性的檢測以及GPI和MVD檢測，該論文通過引用結(jié)合到本文中。實施例1放射性配體結(jié)合檢測A．膜的制備通過吸入CO2處死重350-450g的雄性Sprague-Dawley大鼠。將大鼠斷頭，取出去小腦的腦，將其置于冰冷的鹽水溶液，然后在冰冷的50mM Tris緩沖液pH7.4(10ml/腦)中勻漿。將所述膜于4℃以14000rpm離心30分鐘。將沉淀重懸浮于冰冷的Tris緩沖液50mM pH7.4中，大約為6ml/腦，將其貯存于-78℃直至使用。根據(jù)所購買的蛋白分析試劑盒(Bio-Rad)，進行該腦勻漿液的蛋白定量測定。B．放射性配體抑制(3H)-DAMGO和(3H)DAGLE分別用作μ和δ受體的放射性配體。將50μl放射性配體、100μl膜和連續(xù)稀釋的測試化合物于22℃孵育1小時。用過量500倍的非標記配體在示蹤物和膜的存在下測定非特異性結(jié)合。通過Whatman GF/B紙(在1％聚氮丙啶水溶液中預(yù)浸泡)過濾，將游離配體與結(jié)合配體分離，并用Brandel細胞收集器，用冰冷的50mM Tris緩沖液pH7.4沖洗。將濾器干燥，在24孔微量測定板中，在每孔500ml閃爍體存在下，對放射性活性計數(shù)。采用Wallac 1450Microbeta計數(shù)器測量放射性活性。
按照Cheng和Prusoff公式，由IC50確定各種化合物的Ki值。該結(jié)合分析的結(jié)果總結(jié)于表1中。
按照Schiller等(Biophys,Res.Commun.,85，第1322頁(1975))所述步驟，采用豚鼠回腸(GPI)分析(縱肌制品)，測定肽化合物對μ受體的活性?；钚越Y(jié)果總結(jié)于表1中。C)扭體分析在重18-22g的CD#1雄性小鼠上進行該試驗。將小鼠稱重并進行標記。通過腹膜內(nèi)途徑，給它們注射0.3ml/20g(重量)的0.02％苯醌溶液。對注射后15分鐘期間出現(xiàn)的扭體計數(shù)。苯醌注射的間隔時間為皮下注射所述化合物(或介質(zhì)或標準品)后5、20或60分鐘。
按以下方式制備0.02％苯醌溶液。將20mg苯醌溶解在5ml 90％乙醇(Sigma，試劑，乙醇)中。將溶解的苯醌緩慢地加入連續(xù)震蕩和預(yù)熱(未沸騰)的95ml蒸餾水中。使用前2小時以及在所有時候，都讓該苯醌溶液避光。每天制備新溶液用于該試驗。
分析結(jié)果總結(jié)于表1。
表1
實施例2本發(fā)明化合物在37℃大鼠全血(RWB)中和在37℃腎刷狀緣蛋白酶(KBBP)中的體外穩(wěn)定性a)在37℃ RWB中的體外穩(wěn)定性步驟●將所述化合物最初溶于水中或溶于10％甲基亞砜(DMSO)/水中，以制備10mg/ml的貯液。
●將該貯液加入15ml新得的大鼠全血中，并于37℃孵育。
●在大鼠全血中不用化合物進行抑制，制備空白。
●然后以特定的時間間隔取出等份樣品，離心，用乙腈或乙腈和10％乙酸的溶液萃取該上清液部分。
●通過蒸發(fā)除去溶劑。通過HPLC分析產(chǎn)生的殘留物。
●結(jié)果示于表2中。
表2本發(fā)明化合物在37℃大鼠全血中的體外穩(wěn)定性
b)在37℃ KBBP中的體外穩(wěn)定性步驟●將1.0mg化合物溶于1ml PBS pH7.4中，加入500UL蛋白酶(1.14mg蛋白/ml)?！裨?時取出最初的等份樣品，通過將該樣品置于沸水浴中2分鐘立刻終止該反應(yīng)(其它的時間間隔為5、15、30、60、120、1440分鐘)?！褚仓苽錄]有化合物的空白樣品?！裨?.45微米濾器上過濾等份樣品，通過HPLC分析產(chǎn)生的樣品?！窠Y(jié)果示于表3中。
表3在37℃ KBBP中的體外穩(wěn)定性
實施例32-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#1的合成步驟1S-2-氯-3-苯基-丙酸的合成
將于0℃預(yù)冷的含硝酸鈉(3.34g,4841mmol)的15ml水滴加到用冰/氯化鈉浴冷卻的懸浮于80ml 5N鹽酸中的S-苯丙氨酸(5g,30.29mmol)中。5小時后，除去該冷浴，讓反應(yīng)物靜置過夜。一邊劇烈地攪拌該混合物，一邊小心地少量多次地加入固體碳酸鈉(6.05g)。該反應(yīng)混合物用醚萃取3次。干燥并蒸發(fā)合并的醚部分并蒸發(fā)。減壓(5mmHg)蒸餾該殘留物，產(chǎn)生所需的產(chǎn)物油(3.63g,65％)。1H NMR(CDCl3)δ:9-10(br,1H),7.31(m,5H),4.51(dd,1H,J=6.75Hz,J=7.81Hz),3.64(dd,1H,J=14.10Hz,J=6.75Hz),3.49(dd,1H,J=7.81Hz,J=14.10Hz).步驟2S-2-氯-3-苯基-丙-1-醇的合成
于0℃將含S-2-氯-3-苯基-丙酸(3.63g,19.66mmol)的乙醚(10ml)加入含氫化鋁鋰(0.82g,21.63mmol)的乙醚(20ml)中。15分鐘后，加入水(2ml)。將沉淀濾出。蒸發(fā)該濾液。于120℃在低壓(5mmHg)下蒸餾該殘留物，產(chǎn)生所需的產(chǎn)物油(2.13g,64％)。1H NMR(CDCl3)δ:7.30(m,5H),4.23(m,1H),3.81(m,1H),3,71(m,1H),3.61(dd,1H,J=14.42Hz,J=6.93Hz),3.08(1H,dd,J=14.42Hz,J=7.49Hz).13C NMR(CDCl3)δ:136,128,127,126,65,64,40.IR(NaCl膜)νmax:3382,2931,1497,1455,1078,1045cm-1.步驟3R-2-芐基-環(huán)氧乙烷的合成
于0℃將含氫氧化鉀(4.45g,79.24mmol)的水(10ml)滴加到含S-2-氯-3-苯基-丙-1-醇(1.93g,11.32mmol)的CH2Cl2(15ml)中。于室溫下將該溶液攪拌過夜。分離有機相，通過MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)。于85℃減壓(5mmHg)蒸餾該殘留物，產(chǎn)生所需產(chǎn)物液體(1.20g,79％)。1H NMR(CDCl3)δ:7.30(m,5H),3.18(m,1H),2.95(dd,1H),2.84(dd,1H),2.82(dd,1H),2.57(dd,1H,).13C NMR(CDCl3)δ:134,128,127,125,52,46,38.IR(NaCl膜)νmax:3029,1497,1455,847,818cm-1.步驟4R-1-氨基-3-苯基-丙-2-醇的合成
將R-2-芐基-環(huán)氧乙烷(5.02g,37.13mmol)的氫氧化銨水溶液(25％)(80ml)于室溫下攪拌72小時。蒸發(fā)水。于140℃減壓(5mmHg)蒸餾該殘留物,產(chǎn)生所需白色固體產(chǎn)物(3.24g,58％)。1H NMR(CDCl3)δ:7.30(m,5H),3.73(m,1H),2.78(m,3H),2.56(dd,1H).步驟5S-3-(R-2-羥基-3-苯基-丙基氨基甲酰基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸叔丁酯
將含S-3,4-二氫-1H-異喹啉-2,3-二羧酸2-叔丁酯(0.50g,1.8mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液冷卻至0℃(N2氛圍)，加入三乙胺(0.18g,73mmol)，然后加入氯甲酸異丁酯(0.25g,1.8mmol)。將該反應(yīng)混合物攪拌1小時。加入R-1-氨基-3-苯基-丙-2-醇(0.27g,1.8mmol)。將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，再攪?小時。將該混合物用二氯甲烷稀釋，用10％KHSO4水溶液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，然后通過硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。在硅膠上，采用乙酸乙酯作為洗脫劑將該殘留物進行色譜分離，提供所需的白色固體產(chǎn)物(0.59g,80％)。1H NMR(CDCl3)δ:7.2(m,9H),4.8-4.5(br,2H),4.0(br,1H),3.80(br,1H),3.1(br,4H),2.5(br,2H),1.4-1.3(2s,9H).LRMS:m/z MH+411.4,(C24H31N2O4)+要求411.5.步驟6S-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺的合成
將S-3-(R-2-羥基-3-苯基-丙基氨基甲酰基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸叔丁酯(0.55g,1.28mmol)溶于TFA/CH2Cl2(1∶1)(5ml)中。將該溶液于室溫下攪拌1小時。蒸發(fā)溶劑。將殘留物溶于乙酸乙酯中,用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，產(chǎn)生所需的白色固體產(chǎn)物(0.325g,83％)。1H NMR(丙酮)δ:7.9(br,1H),7.25-7.08(m,9H),4.09(d,1H),4.04(d,1H,J=16.3Hz),3.93(m,1H),3.66(dd,1H,J=4.8Hz,J=10.26Hz),3.37(m 1H),3.27(m 1H),3.15(m,1H),2.89(dd,1H,J=10.5Hz,J=16.2Hz),2.75(m,2H).步驟7{2-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-1-S-[3-R-(2-羥基-3-苯基-丙基氨基甲酰基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯的合成
于0℃，在氮氣下向含2-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酸(0.54g,1.75mmol)、S-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸[R-2-羥基-3-苯基-丙基]酰胺(0.62g,1,75mmol)和HOBt.H2O(0.29g,1.93mmol)的DMF(5ml)溶液中，加入EDCI(0.37g,1.93mmol)。于室溫下攪拌過夜后，用乙酸乙酯稀釋該反應(yīng)混合物，用10％硫酸氫鉀水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，然后通過硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。在硅膠上，采用乙酸乙酯/二氯甲烷(1∶)作為洗脫劑將殘留物色譜分離，產(chǎn)生作為所需產(chǎn)物的快組分(0.40g,38％)和作為其異構(gòu)體的慢組分(0.40g,38％)。1H NMR(丙酮)(部分)δ:8.1(s,1H),7.63(br,1H),6.46(2H),2.18(s,6H),1.39(s,9H).步驟82-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#1A的合成
將{2-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-1-S-[3-R-(2-羥基-3-苯基-丙基氨基甲?；?-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(0.40g,0.66mmol)溶于TFA/二氯甲烷(1∶1)(5ml)。將該溶液于室溫下攪拌1小時。蒸發(fā)該溶劑。通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.29g,71％)。1H NMR(甲醇)δ:7.87(t,1H),7.2-7.1(m,9HO,6.79(d,1H,J=7.2Hz),6.37(s,2H),4.93(t,1H,J=5.0Hz),4.67(dd,1H,J=11.8Hz,J=4.2Hz),4.47(d,1H,J=14.5Hz),3.74(m,1H),3.67(s,1H),3.37(d,1H,J=14.5Hz),3.26(d,1H,J=11.9Hz),3.15(m,4H),2.83(dd,1H,J=5.7Hz),2.50(m,2H),2.30(s,6H).LRMS:m/z MH+502.6,[C30H36N3O4]+要求502.6HPLC，純度94％,rt=20.84步驟92-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#1B的合成
將{2-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-1-S-[3-R-(2-羥基-3-苯基-丙基氨基甲?；?-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(0.40g,0.66mmol)溶于TFA/二氯甲烷(1∶1)(5ml)的溶液中。將該溶液于室溫下攪拌1小時。蒸發(fā)該溶劑。通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.30g,73％)。1H NMR(甲醇)δ:7.68(t,1H),7.30-7.00(m,9H),6.88(d,1H),6.60(s,1H),6.42(s,2H),5.02(t,H),4.72(d,1H,J=12.7Hz),4.40(d,H),4.2 3(dd,1H,J=11.9Hz,J=4.0Hz),3.80(d,H),3.70(m,1H),3.25(m,1H),3.15(m,3H),2.82(dd,1H,J=4.4Hz,J=15.81Hz),2.5-2.3(m,2H).LRMS:m/z MH+502.6,[C30H36N3O4]+要求502.6HPLC,純度96％,rt=22.18
如實施例3中一般描述的合成以下化合物，只是進行合適的替代。
a)2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-7-羥基1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#2；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.125g,74％)。HPLC純度為97％。
b)2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#3；
c)2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽化合物#3A；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.087g,87％)。1H NMR(甲醇)δ:7.91(br,1H),7.51(d,1H,J=8.4Hz),7.25-7.00(m,9H),6.41(s,2H),5.02(m,1H),4.91(m,1H),4.70(d,1H,J=14.6Hz),3.96(d,1H,J=14.6Hz),3.76(m,1H),3.15(m,4H),3.05(m,2H),2.52(m,2H).HPLC純度90％,rt=19.18d)2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽化合物#3B；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.078g,78％)。1H NMR(甲醇)δ:7.88(t,1H),7.25-7.03(m,9H),6.47(s,2H),4.68(d,1H,J=17.0Hz),4.49(dd,1H,J=4.3Hz,J=11.16Hz),4.40(d,1H,J=17.0Hz),3.88(t,1H,J=4.4Hz),3.64(m,1H),3.24(m,2H),3.12(t,2H,J=5.8Hz),3.05(dd,1H,J=4.3Hz,J=13.8Hz),2.87(dd,1H,J=3.7Hz,J=16.3Hz),2.30(m,2H),2.21(s,6H).HPLC,純度87％,rt=19.57e)2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#4；
f)2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#4A；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.040g,42％)。1H NMR(甲醇)δ:7.87(t,1H),7.2-7.1(m,9HO,6.79(d,1H,J=7.2Hz),6.37(s,2H),4.93(t,1H,J=5.0Hz),4.67(dd,1H,J=11.8Hz,J=4.2Hz),4.47(d,1H,J=14.5Hz),3.74(m,1H),3.67(s,1H),3.37(d,1H,J=14.5Hz),3.26(d,1H,J=11.9Hz),3.15(m,4H),2.83(dd,1H,J=5.7Hz),2.50(m,2H),2.30(s,6H).LRMS:m/z MH+502.6,[C30H36N3O4]+要求502.6HPLC純度99％,rt=22.0g)2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#4B；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.043g,55％)。1H NMR(甲醇)δ:7.68(t,1H),7.30-7.00(m,9H),6.88(d,1H),6.60(s,1H),6.42(s,2H),5.02(t,H),4.72(d,1H,J=12.7Hz),4.40(d,H),4.23(dd,1H,J=11.9Hz,J=4.0Hz),3.80(d,H),3.70(m,1H),3.25(m,1H),3.15(m,3H),2.82(dd,1H,J=4.4Hz,J=15.81Hz),2.5-2.3(m,2H).LRMS:m/z MH+502.6,[C30H36N3O4]+要求502.6HPLC純度96％,rt=23.58h)2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#5；
i)2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#5A；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.074g,62％)。1H NMR(甲醇)δ:7.94(t,1H),7.23-7.04(m,9H),6.79(d,1H,J=7.2Hz),6.37(s,2H),4.92(t,1H,J=5.0Hz),4.64(dd,1H,J=11.8Hz,J=4.3Hz),4.45(d,1H,J=14.6Hz),3.68(d,1H,J=14.6Hz),3.2 6(d,1H,J=12.0Hz),3.15(m,4H),2.84(dd,1H,J=15.55Hz,J=5.6Hz),2.41(t,2H,7.5Hz),2.29(s,6H),1.60(m,2H).LRMS:m/z MH+486.3,[C30H36N3O3]+要求486.6HPLC純度95％,rt=19.77j)2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#5B；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.074g,75％)。1H NMR(甲醇)δ:7.78(t,1H),7.23-6.90(m,9H),6.47(s,2H),5.03(t,H),4.67(d,1H,J=16.9Hz),4.66(m,H),4.45(d,H),4.21(dd,1H,J=4.0Hz,J=11.9Hz),3.80(d,H),3.72(t,1H,J=4.4Hz),3.15(m,2H),2.83(dd,1H,J=16.04 Hz,J=3.6Hz),2.25(m,1H),2.21(s,6H),2.11(dd,1H,J=16.05Hz,J=5.2Hz),1.53(m,2H).LRMS:m/z MH+486.3,[C30H36N3O3]+要求486.6HPLC，純度95％,rt=20.4k)2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#6；
1)2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#6A；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.074g,62％)。1H NMR(甲醇)δ:7.94(t,1H),7.23-7.04(m,9H),6.79(d,1H,J=7.2Hz),6.37(s,2H),4.92(t,1H,J=5.0Hz),4.64(dd,1H,J=11.8Hz,J=4.3Hz),4.45(d,1H,J=14.6Hz),3.68(d,1H,J=14.6Hz),3.2 6(d,1H,J=12.0Hz),3.15(m,4H),2.84(dd,1H,J=15.55Hz,J=5.6Hz),2.41(t,2H,7.5Hz),2.29(s,6H),1.60(m,2H).LRMS:m/z MH+486.3,[C30H36N3O3]+要求486.6HPLC純度98％,rt=19.65m)2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#6B；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.074g,75％)。1H NMR(甲醇)δ:7.78(t,1H),7.23-6.90(m,9H),6.47(s,2H),5.03(t,H),4.67(d,1 H,J=16.9Hz),4.66(m,H),4.45(d,H),4.21(dd,1H,J=4.0Hz,J=11.9Hz),3.80(d,H),3.72(t,1H,J=4.4Hz),3.15(m,2H),2.83(dd,1H,J=16.04Hz,J=3.6Hz),2.25(m,1H),2.21(s,6H),2.11(dd,1H,J=16.05Hz,J=5.2Hz),1.53(m,2H).LRMS:m/z MH+486.3,[C30H36N3O3]+要求486.6HPLC，純度98％,rt=20.11n)2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#7；
o)2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#7A；
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.106g,57％)。1H NMR(甲醇)δ:7.98(t,1H),7.17-6.77(m,8H),6.35(s,2H),4.92(dd,1H,J=4.1Hz,J=5.6Hz),4.64(dd,1H,J=4.2Hz,J=11.8Hz),4.40(d,1H,J=14.6Hz),3.37(d,1H,J=14.6Hz),3.25(m,3H),3.14(dd,1H,J=4.3Hz,J=13.7Hz),3.05(dd,1H,J=4.0Hz,J=15.6Hz),2.78(dd,1H,J=5.8Hz,J=15.6Hz),2.58(t,1H,J=7.0Hz),2.28(s,6H).HPLC，純度99％,rt=18.62.
p)2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#7B。
通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物。1H NMR(甲醇)δ:7.84(t,1H),7.2 5-7.05(m,4H),6.98-6.88(m,5H),6.61(s,1H),6.43(s,2H),5.05(t,H,J=5.0Hz),4.70(d,1H,J=17.0Hz),4.69(m,H),4.44(d,H,J=15.0Hz),4.40(d,1H,J=17.0Hz),4.19(dd,1H,J=4.0Hz,J=11.97Hz),3.77(d,1H,J=15.0Hz),3.68(t,1H,J=4.5Hz),3.25(m,1H),3.15(m,1H),2.74(dd,1H,J=3.6Hz,J=16.2Hz),2.55(m,2H),2.17(s,6H),2.04(dd,1H,J=16.1Hz,J=5.2Hz).
q)S-2-(2-氨基-3-(羥基-苯基)-S-1,2,3,4-四氫異喹啉-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-酰胺鹽酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#8A；
LRMS,m/z MH+474.4,[C28H32N3O4]+474.6HPLC，純度98％,rt=45.69實施例42-S-氨基-3-(4-羥基-苯基)-1-{3-(R-2-羥基-3-苯基-丙基氨基)-甲基)-S-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}丙-1-酮二三氟乙酸鹽化合物#9A；步驟1S-(1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-基)-甲醇的合成
在氮氣下，將甲硼烷-二甲硫復(fù)合物(31.0mmol)加入微回流的含S-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉羧酸(5.0g,28.22mmol)和醚合三氟化硼(28.22mmol)的THF(100ml)溶液中。然后將該溶液回流過夜。將該反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并通過緩慢加入甲醇(5ml)驟冷。蒸發(fā)該溶劑，并將該殘留物溶于氫氧化鈉水溶液(6M)中，回流2小時。通過鈰硅石墊過濾該混合物。濾液用氯仿萃取，用鹽水洗滌，通過硫酸鎂干燥，并且蒸發(fā)。該粗產(chǎn)物從CHCl3中重結(jié)晶，產(chǎn)生所需的結(jié)晶產(chǎn)物(4.0g,87％)。1H NMR(CDCl3)δ:7.10(4H,m),4.06(2H,s),3.77(1H,dd,J=10.95Hz,J=3.64Hz),3.52(1H,dd,J=10.95Hz,J=7.80Hz),3.08(1H,m),2.70(1H,dd,J=16.27Hz,J=4.26Hz),2.59(1H,dd,J=16.27Hz,J=10.85Hz).13C NMR(CDCl3)δ:128.43,125.34,12 5.14,124.98,64.81,54.18,46.97,3 0.05.步驟2S-3-羥甲基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸芐酯的合成
將氯甲酸芐酯(4.55g,26.69mmol)加入含S-(1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-基)-甲醇(3.96g,24.26mmol)的水/二氯甲烷(1∶1,100ml)溶液中。將該溶液劇烈攪拌3小時。有機相用10％硫酸氫鉀水溶液、5％碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)作為洗脫劑將該殘留物進行色譜分離，產(chǎn)生標題化合物的油(7.13g,99％)。1H NMR(CDCl3)δ:7.38(5H,m),7.16(4H,m),5.21(2H,dd),4.80(1H,dd),4.77(1H,br),4.42(1H,dd),3.46-3.56(2H,br),3.06(1H,dd,J=15.98Hz,J=5.88Hz),2.69(1H,dd,J=16.0Hz,J=5.88Hz),2.66(1H,br).步驟3S-3-甲?；?3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸芐酯的合成
于室溫下，將高碘烷(periodinane)(8.96g,21.20mmol)加入含S-3-羥甲基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸芐酯(5.73g,19.27mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中。將該混合物攪拌20分鐘。該溶液用5％碳酸氫鈉和5％Na2S2O4水溶液、鹽水洗滌，通過硫酸鎂干燥并蒸發(fā)。用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)作為洗脫劑色譜分離該殘留物，產(chǎn)生所需產(chǎn)物的油(4.15g,73％)。1H NMR(CDCl3)δ:9.54-9.48(2s,1H),7.46-7.09(m,9H),5.27(s,1H),5.21(s,1H),4.94(dd,H,J=6.4Hz,J=3.5Hz),4.80(d,1H,J=16.4Hz),4.72(t,H,J=4.7Hz),4.65(d,1H,J=16.5Hz),3.28(dd,1H,J=6.0Hz,J=13.3Hz),3.10(m 2H).步驟4S-3-[(R-2-羥基-3-苯基-丙氨基)-甲基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸芐酯的合成
將S-3-甲酰基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸芐酯(1.18g,3.99mmol)、R-1-氨基-3-苯基-丙-2-醇(0.60g,3.99mmol)、NaOAc(0.65g,7.98mmol)和4-分子篩(1.0g)在甲醇(20ml)中的混合物于室溫下攪拌3小時。加入NaBH3CN(0.38g,5.99mmol)。將該混合物再攪拌3小時。加入10％硫酸氫鉀水溶液，使pH=4。該混合物用飽和碳酸氫鈉堿化，減壓除去大部分甲醇。該混合物用乙酸乙酯萃取。有機相用水和鹽水洗滌，通過硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。采用乙酸乙酯作為洗脫劑色譜分離該殘留物，產(chǎn)生標題化合物白色固體(0.80g,46％)。1H NMR(CDCl3)δ:7.14-7.41(m,14H),5.24-5.16(dd,2H),4.87(br,1H),4.55(br,1H),4.33(br,1H),3.80(br,1H),3.10(br,1H),2.70(m,4H),2.40(m,3H).步驟5S-3-{[叔丁氧基羰基-(2-R-羥基-2-苯基-丙基)-氨基]-甲基}-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸芐酯的合成
將(Boc)2O(0.44g,2.0mmol)加入三乙胺(0.19g,1.83mmol)和S-3-[(R-2-羥基-3-苯基-丙氨基)-甲基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸芐酯(0.79g,1.83mmol)的DMF(5ml)的混合物中。將該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌2小時。將該混合物注入水中，用乙酸乙酯萃取。有機相用10％硫酸氫鉀水溶液和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。采用乙酸乙酯/己烷(3∶7)作為洗脫劑色譜分離該殘留物，產(chǎn)生所需的產(chǎn)物油(0.83g,85％)。步驟6S-(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-(1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-基甲基)-氨基甲酸叔丁酯的合成
將10％Pd-C(0.015g)催化劑加入S-3-{[叔丁氧基羰基-(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-氨基)-甲基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸芐酯(0.066g,0.14mmol)在含HOAc(0.1ml)的甲醇(10ml)中的溶液中。將該混合物在氫氣下攪拌1小時。過濾除去催化劑。蒸發(fā)濾液。將殘留物在飽和碳酸氫鈉水溶液和乙酸乙酯間分配。有機相用鹽水洗滌，通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)，產(chǎn)生所需的白色固體產(chǎn)物(0.039g,71％)。1H NMR(HOAc鹽形式)(丙酮)δ:7.99(br,2H),7.28-7.07(m,9H),4.15(m,Br,3H),3.85(m,2H),3.45(br,1H),3.25(br,1H),2.95(br,1H),2.7 5(br,4H).LRMS,m/z MH+397.2,[C24H33N2O3]+要求397.5步驟7S-[1-(3-{[叔丁氧基羰基-(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-氨基]-甲基}-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-S-羰基)-2-(4-叔丁氧基-苯基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯的合成
將含N-t-Boc-O-叔丁基-S-酪氨酸(0.1g,0.26mmol)的THF(5ml)溶液冷卻至0℃(N2氛圍)，加入三乙胺(0.026g,0.26mmol)，然后加入氯甲酸異丁酯(0.036g,0.26mmol)。將該反應(yīng)混合物攪拌1小時。加入S-(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-(1,2,3,4-四氫-異喹啉-3-基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(0.1g,0.26mmol)。將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀贁嚢?小時。該混合物用二氯甲烷稀釋，用10％硫酸氫鉀水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，然后通過硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。采用乙酸乙酯作為洗脫劑，在硅膠上色譜分離該殘留物，提供所需的白色固體產(chǎn)物(0.14g,70％)。步驟82-S-氨基-3-(4-羥基-苯基)-1-{3-(R-2-羥基-3-苯基-丙基氨基)-甲基)-S-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}丙-1-酮二三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#9A；
將S-[1-(3-{[叔丁氧基羰基-(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-氨基]-甲基}-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-S-羰基)-2-(4-叔丁氧基-苯基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(0.14g,0.23mmol)溶于含4N HCl的二噁烷(5ml)中。將該溶液于室溫下攪拌0.5小時。蒸發(fā)溶劑。將該殘留物溶于乙酸乙酯中，用水洗滌。水相通過冷凍干燥。通過HPLC，在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.070g,58％)。LRMS,m/z MH+460.1,[C28H33N3O3]+460.6HPLC，純度98％,rt=39.12實施例52-(酪氨酰)-3S-(D-苯丙氨?；谆?-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#10A的合成步驟13S-芐氧基甲酰氨基甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉的合成
用4-二甲基氨基吡啶(2mg)和芐酯基咪唑(109mg,0.54mmol)處理二氯甲烷(5ml)中的二胺(87mg,0.54mmol)。將該混合物攪拌5天。粗產(chǎn)物在制備型TLC上純化，產(chǎn)生所需產(chǎn)物(120mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3),δ:2.55(dd,J1=13.8 Hz,J2=10.4Hz,1H),2.78(dd,J1=13.8Hz,J2=3.0Hz,1H),3.04(m,1H),3.15(m,1H),3.49(m,1H),4.02(s,2H),5.14(s,2H),5.69(s,1H),7.01-7.37(m,9H).步驟21S-叔丁氧基甲酰胺基-2-(4-叔丁氧基-苯基)-(3-芐氧基甲酰胺基甲基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基)-酮的合成
向單CBZ-保護的二胺(94mg,0.34mmol)、Boc-Tyr-(t-Bu)-OH和1-羥基苯并三唑(48.4mg.0.358mmol)的冷凍DMF溶液(4ml)中加入1,1’-環(huán)己基碳二亞胺(DCC,73.8mg,0.358mmol)。將產(chǎn)生的混合物溫?zé)嶂潦覝氐耐瑫r，攪拌36小時。蒸發(fā)溶劑，在硅膠上純化(己烷∶EtOAc=2∶1)粗產(chǎn)物，產(chǎn)生所需產(chǎn)物(60mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3),δ:1.24-1.37(ms,18H),1.96(dd,J1=14.8Hz,J2=5.2Hz,1H),2.35 and 2.70(2d,JA=14.8Hz,JB1=14.8Hz,JB2=1.7Hz,1H),2.90-3.07(m,3H),3.39(m,1H),3.99 and 4.70(2d,J=16.5Hz,1H),4.25(m,1H),4.94-5.10 and 5.20(m,3H),5.45 and 5.46(2d,J=8.6Hz,1H),6.01(m,1H),6.71 and 6.90(2d,J=8.5Hz,2H),7.06(d,J=8.5Hz,2H),7.08-7.34(m,9H).步驟32-(N-Boc-(O-t-Bu))-酪氨酰-3S-氨甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉的合成
在Pd/C催化劑(10％,34.5mg)下，將1S-叔丁氧基甲酰胺基-2-(4-叔丁氧基-苯基)-(3-芐氧基甲酰胺基甲基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基)-酮(190mg,0.325mmol)的甲酸溶液氫化3小時。將其過濾，將該濾液蒸發(fā)，產(chǎn)生的固體用NaOH(0.1N)處理，并用CHCl3萃取。將有機層蒸發(fā)至干，產(chǎn)生所需的產(chǎn)物(112mg)。1H NMR(400HHz,CDCl3),δ:1.21,1.26,1.36,1.39(ms,6xCH3),2.05(dd,J1=19Hz,J2=7Hz,1H),2.44(d,J=19.0Hz,1H),2.53(m,1H),2.75,2.85-3.00(m,4H),3.73,4.15,4.65,4.95(4d,J=20Hz,2H),3.97(m,1H),4.76-5.06(m,2H),4.44,4.48(2d,J=11.0Hz,1H),6.68-7.20(m,8H).步驟42-(N-Boc-(O-t-bu)-酪氨酰)-3-(N-Boc-D-苯丙氨酰胺甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉的合成
將游離胺2-(N-Boc-(O-t-bu))-酪氨酰-3S-氨甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(56mg.0.117mmol)與用氯甲酸異丙酯(1.0M溶液，0.135ml,0.135mmol)激活的Boc-D-Phe(35.5mg,0.13mmol)偶合。色譜分離后，獲得所需產(chǎn)物(72mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3),δ:1.29,1.34,1.3 6,1.40,1.41,1.43(ms,27H),2.07(dd,J1=17.1Hz,J2=4.8Hz,1H),2.41(d,J=17.1Hz,1H),2.64(btr,J=15.2Hz,1H),2.86-3.21(m,4H),3.96,4.64(2d,J=14.3Hz,1H),4.25,5.02(2d,J=18.6Hz,2H),4.03-5.15(m,5H),5.24(d,J=5.7Hz,1H),5.3 9,5.48(2d,J=8Hz,1H),6.84-7.32(m,13H).步驟52-(酪氨酰)-3S-(D-苯丙氨酰胺甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物5A的合成
采用通常的方法，將2-(N-Boc-(O-t-bu)-酪氨酰)-3-(N-Boc-D-苯丙氨酰胺甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉去保護，產(chǎn)生為鹽酸鹽的標題化合物(22mg)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4),δ:1.18(dd,J1=14.9Hz,4.0Hz),2.54(d,J=14.9Hz),2.65(dd,J1=15Hz,J2=3.0Hz),2.81(m)(共4組峰,2H),3.00-3.25(m,4H),3.92(d,J=14.9Hz),4.00(m)4.06(tr,J=8.9Hz),4.16(tr,J=8.9Hz),4.43(d,J=18.8Hz),4.63(d,J=18.8Hz),4.67(tr,J=7.9Hz),4.74(d,J=18.8Hz),5.00(m)(共9組峰7H),6.72(d,J=8.9Hz),6.90(d,J=8.9Hz),7.09(d,J=8.9Hz),7.17(d,J=8.9Hz),7.03-7.70(m)(共5組峰,13H),8.04(d,J=7.9Hz),8.48(m),8.60(m)(共3組峰,1H).
如實施例5中的一般描述合成以下化合物，只是進行適當?shù)奶鎿Q。
a)2-(酪氨酰)-3S-苯丙氨酰胺基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#11A；
1H NMR(400MHz,MeOH-d4),δ:1.85(d,J=14.9Hz,1H),1.93(dd,J1=14.9Hz,J2=5Hz,1H),2.52,2.76(2m,2H),3.03-3.17(m,2H),3.64(m,1H),4.05(m,1H),4.44(d,J=18.8Hz,1H),4.61(d,J=18.8Hz,1H),5.04(m,1H),6.78-7.50(m,13H),7.60-8.03(2d,J=8.9Hz,1H),8.27-8.47(2m,1H).
b)2-酪氨酰-3-芐氧基甲酰胺基甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#13A；
1H NMR(400MHz,HeOH-d4),δ:2.16(dd,J1=14.6Hz,J2=4.9Hz,1H),2.58(dd,J1=14.6Hz,J2=2Hz,1H),2.62(dd,J1=12Hz,J2=9.8Hz,1H),2.90-3.15(m,2H),3.75(bs,1H),4.44(d,J=17.6Hz,1H),4.66(d,J=17.6Hz,1H),4.30-4.76(2d,J=15.6Hz,1H),5.05(tr.J=3.5Hz,1H),5.10(d,J=11.7Hz,1H),5.23(d,J=11.7Hz,1H),6.67-7.40實施例62-酪氨酰-3S-酪氨酰胺基甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#12A的合成步驟13-(4-叔丁氧基-苯基)-2S-叔丁氧基-甲酰氨基-1-[{3-(4-叔丁氧基-苯基)-2S-叔丁氧基甲酰胺基丙酰氨胺基甲基}-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-丙-1-酮的合成
將含Boc-Tyr-(t-Bu)-OH(200mg,0.592mmol)的THF(8ml)溶液冷卻至-10℃，然后用氯甲酸異丁酯(81.5μl,0.628mmol)處理，隨后用n-甲基嗎啉(69μl,0.628mmol)處理。攪拌15分鐘后，加入含二胺(67.5mg,2.287mmol)的2ml與三乙胺(79.9μl,0.574mmol)一起預(yù)熱的THF溶液。當產(chǎn)生的混合物溫?zé)嶂潦覝貢r，將其攪拌2天。蒸發(fā)該反應(yīng)混合物，以除去THF，將其再溶于乙醚中。然后該溶液用稀K2CO3溶液洗滌，然后通過硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生粗產(chǎn)物，將其進行色譜分離，產(chǎn)生產(chǎn)物A(130mg).1H NMR(400MHz,CDCl3),δ:1.26-1.41(m,36H,12xCH3),2.57-3.46(m,6H,3xCH2),3.92(br s,1H,CH),4.25-4.48(m,2H,CH2),4.25(d,J=17.4Hz,1H),4.60-4.70 and 4.85-4.96(m,1H),4.83(q,J=7.5Hz,1H),5.12(d,J=17.4,1H),5.25-5.35(2xd,J=7.5Hz,1H),5.81(d,J=8.0Hz,1H),6.80-7.20(m,12H).步驟22-酪氨酰-3S-酪氨酰胺基甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽的合成
向含3-(4-叔丁氧基-苯基)-2S-叔丁氧基-甲酰胺基-1-[{3-(4-叔丁氧基-苯基)-2S-叔丁氧基甲酰胺基丙酰胺基甲基}-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-丙-1-酮(130mg,0.162mmol)的乙醚(5ml)溶液中通入HCl氣流，直至出現(xiàn)白色懸浮液。當產(chǎn)生的混合物溫?zé)嶂潦覝貢r，將其攪拌1小時。蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生白色固體，將其在HPLC(NH4OAc緩沖液)上純化，產(chǎn)生所需的粉末產(chǎn)物(61.3mg)。1H NMR(400MHz,MeOH-d4),δ:1.08(dd,J1=17.9Hz,J2=5.0Hz,1H),2.16(dd,J1=17.9Hz,J2=2Hz,1H),2.75-3.04(m,6H),3.54(tr,J=6.0Hz,1H),4.03(q,J=7.0Hz,1H),4.28(d,J=18.9Hz,1H),4.53(dd,J1=6.0Hz,J2=9.0Hz,1H),4.75(d,J=18.9Hz,1H),6.68(d,J=9.4Hz,2H),6.75(d,J=9.4Hz,2H),7.02(d,J=9.4Hz,2H),7.03(d,J=9.4Hz,2H),6.95-7.20(m,5H).實施例7反-2-(3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-2-羰基-S-1,2,3,4-四氫喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#14的合成步驟1反-2-(3S-{[叔丁氧基羰基(2R-羥基-3-苯基-丙基)-氨基]-甲基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-S-羰基)-3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的合成
在氮氣下，于0℃向按J.Med.Chem.1994,37,4371-4383所述方法制備的反3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-1,2-二羧酸1-叔丁酯(0.10g,0.35mmol)、1,2,3,4-四氫-異喹啉-3S-羧酸[2R-羥基-3-苯基-丙基]-酰胺(0.12g,0.35mmol)和DIEA(0.090g,0.70mmol)的DMF(5ml)溶液中加入PyBrOP(0.16g,0.35mmol)。于室溫下攪拌過夜后，將該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用10％硫酸氫鉀水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，然后通過硫酸鎂干燥，過濾和濃縮。采用乙酸乙酯/己烷(3∶7)作為洗脫劑，在硅膠上色譜分離該殘留物，提供作為TLC快異構(gòu)體的快組分(0.69g,36％)和作為TLC慢異構(gòu)體的慢組分(0.75g,39％)。1H NMR(400MHz,Bruker,丙酮-d6)(TLC 慢異構(gòu)體)δ:8.35(s,1H),7.48(br,1H),7.20-6.70(m,13H),5.32(dd,1H,J=1.7Hz,J=6.5Hz),4.83(d,1H,J=15.3Hz),4.76(d,1H,J=8.7Hz),4.10(m,1H),3.80(m,2H),3.60-3.40(m,3H),3.25(m,1H),2.85(m,1H),2.76(dd,1H,J=14.5Hz,J=5.3Hz),2.52(dd,1H,J=13.5Hz,J=8.2Hz),2.25.(m,2H),1.43(s,9H).1H NMR(400MHz,Bruker,丙酮-d6)(TLC快異構(gòu)體)δ:8.53(m,1H),7.94(br,1H),7.30-6.70(,13H),5.00(m,1H),4.80-4.68(m,1H),4.25(m,1H),3.75(m,2H),3.50(m,2H),3.45(m,1H),3.25(m,1H),3.10(m,4H),2.55(m,2H),2.20(m,2H),1.44(2s,9H).步驟2反-2-(3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-2-羰基-S-1,2,3,4-四氫喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#14A的合成
將反-2-(3S-{[叔丁氧基羰基-(2R-羥基-3-苯基-丙基)-氨基]-甲基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羰基)-3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.069g,0.12mmol)溶于含4N HCl的二噁烷(5ml)中。于室溫下將該溶液攪拌0.5小時。蒸發(fā)溶劑。通過HPLC，在Vydac C18柱上在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.027g,38％)。LRMS,m/z MH+500.6,[C30H34N3O4]+要求500.6步驟2反-2-(3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-2-羰基-S-1,2,3,4-四氫喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#14B的合成
將反-2-(3S-{[叔丁氧基羰基-(2R-羥基-3-苯基-丙基)-氨基]-甲基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羰基)-3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(TLC快異構(gòu)體)(0.069g,0.12mmol)溶于含4N HCl的二噁烷(5ml)中。于室溫下將該溶液攪拌0.5小時。蒸發(fā)溶劑。通過HPLC，在Vydac C18柱上在梯度條件下[水中的0.1％(W/V)三氟乙酸(TFA)/乙腈中的0.1％(W/V)TFA(80/20至50/50，流速為3ml/min]純化該殘留物，然后冷凍干燥產(chǎn)生所需的白色粉末產(chǎn)物(0.028g,38％)。
LRMS,m/z MH+500.5,[C30H34N3O4]+要求500.權(quán)利要求
1．通式(Ⅰ)的鎮(zhèn)痛化合物
其中Z為
其中n為1或2，而R0為C6-12芳基或C7-18烷芳基；或R1選自氫；-NH-C1-6烷基；C1-6烷基；C6-12芳基；C7-18芳烷基；精氨酰基和R30NHC(=NH)-，其中R30為氫、C6-12芳基、C7-18芳烷基或C1-6烷基；R2為氫；C1-6烷基；或OH；R3為C6-12芳基或C7-18芳烷基；R4為C6-12芳基；C7-18芳烷基或C1-12烷基；R5為C1-6烷基；氫；OH；鹵素；SH；NO2；NH2；-NH-C1-6烷基；NH2C(=NH)-；NH2C(=NH)-NH-；-COOR31，其中R31為氫或C1-6烷基；X為-CH2NHC(O)-；-CH2NHC(O)O-；-C(O)NH-或-CH2NH-；以及L為C1-12烷基鏈，它可以用至少一個選自以下的取代基取代環(huán)部分；C1-6烷基；OR31，其中R31為氫或C1-6烷基；SR32，其中R32為氫或C1-6烷基；-NHC(O)R33，其中R33為C6-12芳基、C7-18芳烷基或C1-6烷基；-OC(O)R34，其中R34為氫、C6-12芳基、C7-18芳烷基、C1-6烷基、-NHR35，其中R35為氫、C6-12芳基或C1-6烷基；和NR6R7，其中R6和R7每個獨立地為氫或C1-6烷基；條件是當R5為氫時，Z為
和X為-C(O)NH-或-CH2NH-；L為用至少一個選自以下的取代基取代的C1-12烷基鏈環(huán)部分；C1-6烷基；OR31，其中R31為氫或C1-6烷基；SR32，其中R32為氫或C1-6烷基；-NHC(O)R33，其中R33為C6-12芳基、C7-18芳烷基或C1-6烷基；-OC(O)R34，其中R34為氫、C6-12芳基、C7-18芳烷基、C1- 6烷基、-NHR35，其中R35為氫、C6-12芳基或C1-6烷基；和NR6R7，其中R6和R7每個獨立地為氫或C1-6烷基。
2．根據(jù)權(quán)利要求1的鎮(zhèn)痛化合物，其中Z為
，其中R1、R2和R3每個如權(quán)利要求1所定義。
3．根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的鎮(zhèn)痛化合物，其中R1為氫；NH2C(=NH)-或C1-6烷基；R2為氫或-CH3；以及R3最好選自-CH2-C6H2R8R9-或-CH2-HOC6HR8R9，其中R8和R9的每個獨立地為-CH3或氫。
4．根據(jù)權(quán)利要求3的鎮(zhèn)痛化合物，其中R1為氫；NH2C(=NH)-或-CH3；R2為氫；以及
R3為其中R8和R9的每個獨立地為-CH3或氫。
5．根據(jù)權(quán)利要求4的鎮(zhèn)痛化合物，其中R8和R9為CH3。
6．根據(jù)權(quán)利要求1-5的任一項的鎮(zhèn)痛化合物，其中X為-C(O)NH-或-CH2NH-。
7．根據(jù)權(quán)利要求1-5的任一項的鎮(zhèn)痛化合物，其中X為-C(O)NH-。
8．根據(jù)權(quán)利要求1-5的任一項的鎮(zhèn)痛化合物，其中L為-(CH2)1-3-CHR10-(CH2)1-3-，其中R10為OH或NH2。
9．根據(jù)權(quán)利要求1-5的任一項的鎮(zhèn)痛化合物，其中L為-(CH2)-CHR10-(CH2)-，其中R10為OH或NH2。
10．根據(jù)權(quán)利要求1-5的任一項的鎮(zhèn)痛化合物，其中L更優(yōu)選為-(CH2)-CHOH-(CH2)-。
11．根據(jù)權(quán)利要求1-10的任一項的鎮(zhèn)痛化合物，其中R4選自C1-12烷基；
其中R11、R12、R13、R14和R15的每個獨立地為CH3、氫、鹵素、OH、SH、NH2或NO2。
12．根據(jù)權(quán)利要求1-10的任一項的鎮(zhèn)痛化合物，其中R4選自-CH3；-C(CH3)3；-CH(CH3)2；
其中R13如上定義。
13．根據(jù)權(quán)利要求1-10的任一項的鎮(zhèn)痛化合物，其中R4選自
14．選自以下的鎮(zhèn)痛化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物2-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#1；2-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#1A；2-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#1B；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-7-羥基1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#2；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#3；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#3A；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#3B；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#4；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#4A；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#4B；S-2-(2-氨基-3-(4-羥基-苯基)-S-1,2,3,4-四氫異喹啉-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-酰胺(外消旋混合物)鹽酸鹽化合物#8；S-2-(2-氨基-3-(4-羥基-苯基)-S-1,2,3,4-四氫異喹啉-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)-酰胺(慢異構(gòu)體)鹽酸鹽化合物#8a；2-S-氨基-3-(4-羥基-苯基)-1-{3-(R-2-羥基-3-苯基-丙基氨基)-甲基)-S-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}丙-1-酮二三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#9A；2-(酪氨酰)-3S-(D-苯丙氨酰胺基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#10A；2-(酪氨酰)-3S-苯丙氨酰胺基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#11A；2-酪氨酰-3S-酪氨酰胺基甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#12A；2-酪氨酰-3-芐氧基甲酰氨基甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽化合物#13A；反-2-(3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-2-羰基-S-1,2,3,4-四氫喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#14；反-2-(3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-2-羰基-S-1,2,3,4-四氫喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#14A；反-2-(3-(4-羥基-苯基)-吡咯烷-2-羰基-S-1,2,3,4-四氫喹啉-3-羧酸(R-2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#14B。
15．選自以下的鎮(zhèn)痛化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物2-R-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#1B；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-7-羥基1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#2；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#3A；2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#3B；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#4A；2-S-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-羥基-3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#4B。
16．一種鎮(zhèn)痛化合物2-(2-胍基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-R-羥基-3-苯基-丙基)酰胺二三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#3A及其藥學(xué)上可接受的衍生物。
17．用于治療疼痛的藥學(xué)上可接受的組合物，包含根據(jù)權(quán)利要求1-16任一項的鎮(zhèn)痛化合物。
18．權(quán)利要求1中所述的鎮(zhèn)痛化合物用于生產(chǎn)治療疼痛的外周神經(jīng)鎮(zhèn)痛劑的用途，其中L為可以用至少一個選自以下的取代基取代的C1-12烷基鏈環(huán)部分；C1-6烷基；OR31，其中R31為氫或C1-6烷基；SR32，其中R32為氫或C1-6烷基；-NHC(O)R33，其中R33為C6-12芳基、C7-18芳烷基或C1-6烷基；-OC(O)R34，其中R34為氫、C6-12芳基、C7-18芳烷基、C1-6烷基、-NHR35，其中R35為氫、C6-12芳基或C1-6烷基；和NR6R7，其中R6和R7每個獨立地為氫或C1-6烷基。
19．根據(jù)權(quán)利要求18的用途，其中該鎮(zhèn)痛化合物選自以下化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#5；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#5A；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#5B；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#6；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#6A；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#6B；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽(外消旋混合物)化合物#7；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙酰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#7A；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#7B。
20．根據(jù)權(quán)利要求18的用途，其中該鎮(zhèn)痛化合物選自以下化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(快異構(gòu)體)化合物#5A；和2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-S-羧酸(3-苯基-丙基)酰胺三氟乙酸鹽(慢異構(gòu)體)化合物#5B；2-(2-氨基-3-(4-羥基-2,6-二甲基-苯基)-丙?；?-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸(2-氟-(4-苯基-乙基)酰胺三氟乙酸鹽化合物#7A。
全文摘要
本發(fā)明涉及可以用作鎮(zhèn)痛劑的化合物。更具體地說,本發(fā)明的鎮(zhèn)痛化合物為可以與類鴉片受體結(jié)合的肽模擬化合物。
文檔編號C07D217/14GK1211990SQ97192558
公開日1999年3月24日 申請日期1997年2月25日 優(yōu)先權(quán)日1996年2月28日
發(fā)明者J·迪麥奧, W·王 申請人:阿斯特拉公司