專利名稱：毒蕈堿拮抗劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明背景本發(fā)明涉及用于治療識別障礙的二-N-取代哌嗪和1,4-二-取代哌啶，含所述的化合物的藥用組合物、使用所述化合物的治療方法以及涉及所述化合物與乙酰膽堿酯酶抑制劑組合的應(yīng)用。
最近，Alzheimer氏病和其它識別障礙已受到更多關(guān)注，至今治療這些疾病還沒有更有效的方法。根據(jù)Melchiorre et al,[J.Med.Chem.(1993),36,3734-3737]，選擇性拮抗M2毒蕈堿受體的化合物，尤其是關(guān)于M1毒蕈堿受體的化合物具有抗識別障礙的活性。Baumgold et al,[Eur.J.of pharmacol,251,(1994)315-317]公開了3-α-氯西貝母堿為高選擇性M2毒蕈堿拮抗劑。
一類二-N-取代哌嗪和1,4-二取代哌啶(其中一些化合物對M2的選擇性甚至高過對3-α-氯西貝堿的選擇性)的發(fā)現(xiàn)構(gòu)成了本發(fā)明的基礎(chǔ)。Logemann et al[Brit.J.Pharmacol et al,(1961),17,286-296]介紹了一些二-N-取代哌嗪化合物，但這些化合物是不同于本發(fā)明的發(fā)明化合物的。因此，未公開Logemann et al的化合物具有拮抗識別障礙的活性。
本發(fā)明概述本發(fā)明涉及根據(jù)結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物，
包含所有異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽，酯和其溶劑化物。
其中Y和Z之一是N而另一個是N、CH或C-烷基；X是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR6-、-CO、-CH2-、-CS-、-C(OR5)2-、-C(SR5)2-、CONR20-、C(烷基)2-、C(H)(烷基)-、-NR20SO2-、-SO2-NR20-、-NR20CO-、-O-CO-NH-、-NH-CO-O-、
R是
(其中X1是-CH2-,-O-，或-NR7-)
氫、酰基、烷基、烷氧基、鏈烯基、環(huán)烷基、具有一個或兩個選自烷基和羰基的基團(tuán)取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、雙環(huán)烷基、芳烯基、芐基、具有多至3個獨立選自R3基團(tuán)取代的芐基、環(huán)烷基烷基、多鹵酰基、芐氧烷基、羥基C2-C20烷基、鏈烯羰基、烷芳基磺?；⑼檠豸驶被；⑼榛酋；蚍蓟酋；?，另外，當(dāng)X是-CH2-,R也可以是-OH；此外，當(dāng)X不是N時，R也可以是羥甲基，而且，R和X可以結(jié)合形成Prot-(NOAA)r-NH-基團(tuán)，其中r是1-4的整數(shù)，Prot是氮保護(hù)基和當(dāng)r是1時，NOAA是天然存在的氨基酸或其對映體，或當(dāng)r是2-4時，每個NOAA是獨立選自天然存在的氨基酸或其對映體的肽。
R1和R21獨立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雙環(huán)烷基、炔基、氰基、氨基烷基、烷氧羰基、氨基羰基、羥基脒基、烷氧羰基烷基、苯基烷基、烷基羰基氧基烷基，
H、-OH、(條件是R1和R21不都是-OH及Y不是N)，甲?；?、-CO烷基、-CO?；?CO芳基和羥烷基；另外，R1和R21一起形成=CH2、=N-OR5、=N-CN、=N-N(R5)2、=CH-烷基、亞烷基、
或=C(鹵素)2；另外，R1和R21與它們所連接的碳原子一起形成基團(tuán)
或R1和R21與它們所連接的碳原子一起形成含有3-7個碳原子的飽和雜環(huán)，其中一個或多個碳原子可以由烷基，及一個或二個獨立選自S、O和N-R20的基團(tuán)任選取代；R2是
R3、R4、R22、R24和R25獨立選自烷基、H、鹵素、烷氧基、芐氧基、由硝基或氨基烷基取代的芐氧基、鹵代烷基、多鹵代烷基、硝基、氰基、磺酰基、羥基、氨基、烷基氨基、甲?；?、烷硫基、多鹵代烷氧基、酰氧基、三烷基甲硅烷基、烷基磺酰基、芳基磺?；?、?；?、烷氧羰基、烷基亞磺?；?；-OCONH2、-OCONH-烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、-COOH、-CON(R20)2、-OCON(烷基)2、-NHCOO-烷基、-NHCO-烷基、苯基、羥基烷基或嗎啉基；R5和R6各自獨立選自H和烷基，條件是當(dāng)X是C(OR5)2或C(SR5)2時，兩個R5不能都是H，另外，當(dāng)X是C(OR5)2或C(SR5)2時，X中
R7獨立選自H、烷基、芳烷基、環(huán)烷基、芳基和用在此定義的R3和R4取代的芳基；每個R8獨立選自H、羥基烷基或烷基或兩個R8基團(tuán)可以連接在一起形成亞烷基；R9是H、烷基、芳烷基或?；籖20是H、芳基或烷基；R27和R28獨立選自H、烷基、羥基烷基、芳基烷基、氨基烷基、鹵代烷基、硫代烷基、烷基硫代烷基、羧基烷基、咪唑基烷基和吲哚烷基或R27和R28可以組合形成亞烷基；R29是H、烷基、-CO-烷基、-CO-環(huán)烷基、烷氧羰基、氨基羰基、芳氧羰基、烷氨基羰基、二烷氨基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基或-SO2-NH-R20；R30是H、烷基、芳基、環(huán)烷基、羥基烷基、氨基烷基、-COOR20、-CON(R20)2或氰基；R31和R32與R30相同，另外，兩個R30、R31和R32基團(tuán)也可以形成-(CH2)r-基團(tuán)(其中r是1-6)，此外，R31和R32也可以是羥基、-N(R20)2、-O-?；?、-N(R20)?；?、-OCOOR20或-OCON(R20)2；R33是芳基或雜芳基，條件是當(dāng)R33是雜芳基時，CO-R33鍵須連在R33基團(tuán)的碳原子上；R34是烷基、環(huán)烷基或芳基，另外，R34也可以是H，此時R1和R21與它們所連接的碳原子一起形成含有3-7個碳原子的飽和雜環(huán)，兩個基團(tuán)獨立選自S、O和N-R20；R35是-CH2-、-NR20-或-O-；R36是-NH2-、烷基或烷氧基；R37獨立選自H和烷基；R38是-CO-(CH2)0-5-OR5、-SO2-(烷基)，或
其中q1和q2獨立是1-5，條件是q1和q2總數(shù)是2-5；和R39和R40獨立選自=O和(H,H)。
在化合物優(yōu)選的基團(tuán)中，Y和Z是N。
在化合物另一優(yōu)選的基團(tuán)中，Y是CH和Z是N。
在化合物另一優(yōu)選的基團(tuán)中，R是
和X是O、SO、SO2、CH2、CH(烷基)、C(烷基)2、-CH(OH)-或-N(R20)CO。
在化合物另一優(yōu)選的基團(tuán)中，R3和R4是H和R1是環(huán)烷基或烷基，及R21是H或R1和R21一起形成=O。
在化合物另一優(yōu)選的基團(tuán)中，R是
X是O、SO、SO2、CH2、CH(烷基)、C(烷基)2或-N(R20)CO；R3和R4是H和R1是環(huán)烷基或烷基；而R21是H或R1和R21一起形成=O或
在化合物另一優(yōu)選基團(tuán)中，R27和R28中至少一個是烷基。
在化合物另一優(yōu)選基團(tuán)中，R27或R28中的一個是甲基而另一個是氫。
在化合物另一優(yōu)選基團(tuán)中，R是
在化合物另一優(yōu)選基團(tuán)中，X是SO2、CH2或-N(CH3)-CO-。
在化合物另一優(yōu)選基團(tuán)中，R2具有下式
和R30是H或CH3；R31和R32是H；及R33是鄰位取代的芳基或雜芳基，優(yōu)選
在優(yōu)選化合物的另一基團(tuán)中，R2具有下式
R34是甲基和R31和R32是H。
在此列出本發(fā)明優(yōu)選的特定化合物的化合物序號為17、18、25、30、31、32、34、35、36、37、41、43、44、49、53、54、56、57、58、59、80、82、84、85、94、98、100、108、121、126、127、137、145、151、152、154、155、162、166、178、179、181、185、190、191、194、199、214、215、216、225、247、253、256、257、337、339、340、341、349、351、367、409、459、479、488、489、490、500、501、502、503、505、506、507、515、516、517、555、562。
本發(fā)明的另一方面是藥用組合物，它包含具有上述定義的結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物與藥學(xué)上可接受的載體組合。
本發(fā)明另一方面是式1化合物在治療識別障礙或神經(jīng)變性疾病例如Alzheimer氏病的藥用組合物的制備中的用途。
本發(fā)明的另一方面包含制備藥用組合物的方法，它包括使式Ⅰ化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合。
本發(fā)明的另一方面是治療識別障礙或神經(jīng)變性疾病的方法，該方法包括對患有所述疾病的患者給予有效量的式Ⅰ化合物。
本發(fā)明的另一方面是治療識別障礙或神經(jīng)變性疾病的方法，該方法包括對患有所述疾病的患者給予式Ⅰ化合物與乙酰膽堿酯酶抑制的有效量的組合物。
本發(fā)明的再一方面是包含分開的容器，其內(nèi)裝有單獨包裝的藥用化合物以用于聯(lián)合治療識別障礙的藥用盒，第一個容器裝有藥學(xué)上可接受載體中含有的式Ⅰ化合物，第二個容器中裝有藥學(xué)上可接受鹽體中含有的乙酰膽堿酯酶抑制劑，兩者按有效用量定量組合。詳細(xì)描述除另有說明外，下述定義應(yīng)用于本說明書和權(quán)利要求書中。不管術(shù)語是按其自身使用還是與其它術(shù)語組合使用，這些定義均可應(yīng)用，在此定義的“烷基”既應(yīng)用于“烷基”，也應(yīng)用于“烷氧基”、“鹵代烷基”等的“烷基”部分。
烷基代表具有1-20個碳原子，更優(yōu)選1-8個碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴鏈。
鏈烯基代表2-15個碳原子，更優(yōu)選2-12個碳原子，至少有一個碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈的烴鏈。
鏈炔基代表從2-10個碳原子，更優(yōu)選2-8個碳原子，至少有一個碳-碳叁鍵的直鏈或支鏈的烴鏈。
環(huán)烷基代表具有3-12個碳原子的飽和碳環(huán)。
環(huán)烯基代表具有從5-8個碳原子并在環(huán)中至少有一個碳-碳雙鍵的碳環(huán)。
雙環(huán)烷基代表具有5-12個碳原子飽和的橋碳環(huán)。
?；砭哂惺酵榛?CO-、芳基-CO-、芳烷基-CO-、環(huán)烷基-CO-、烷基環(huán)烷基-CO-和雜芳基-CO-的羧酸基團(tuán)。
鹵代代表氟代、氯代、溴代或碘代。
芳基代表由1-5個R3基團(tuán)任選取代的苯基或萘基。
雜芳基代表5或6個原子的環(huán)狀基團(tuán)或9或10個原子的雙環(huán)基團(tuán)，這些原子中至少有一個是碳并至少有一個中斷碳環(huán)并有足夠的pi電子數(shù)提供芳香特性的O、S或N原子。碳原子可由R3基團(tuán)任選取代。氮原子可由-R20或-COR20基團(tuán)任選取代。優(yōu)選的雜芳基是吡啶基、呋喃基、苯并呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、噻唑基、噻二唑基、咪唑基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、1,3,5-三嗪基和吲哚基。
多鹵代代表至少2個鹵代原子取代至由術(shù)語“多鹵代”修飾的基團(tuán)。
羥脒基代表具有下式的基團(tuán)
氮雜雙環(huán)代表含有4-8個碳原子并至少有一個氮原子的飽和橋環(huán)。
磺?；硎?SO2-基團(tuán)。
亞磺酰基代表式-SO-基團(tuán)。
亞烷基代表具有式-(CH2)q的基團(tuán)，其中q是從1-20的整數(shù)。
天然存在的氨基酸(NOAA)意思是選自下列的酸丙氨酸(ala)、精氨酸(arg)、天門冬酰胺(asn)、天門冬氨酸(asp)、半胱氨酸(cys)、谷氨酰胺(gln)、谷氨酸(glu)、甘氨酸(gly)、組氨酸(his)、異亮氨酸(ile)、亮氨酸(leu)、賴氨酸(lys)、蛋氨酸(met)、苯丙氨酸(phe)、脯氨酸(pro)、絲氨酸(ser)、蘇氨酸(thr)、色氨酸(trp)、酪氨酸(tyr)和纈氨酸(val)。
氮保護(hù)基(prot)意思是能夠保護(hù)天然存在的氨基酸(或其對映體)上的氮原子避免反應(yīng)能力的基團(tuán)。優(yōu)選氮保護(hù)基是芐氧羰基(CBZ)、CH3OCO(CH2)9CO和叔-丁氧羰基(BOC)。當(dāng)然包括任何可實施的氮保護(hù)基。
當(dāng)結(jié)構(gòu)式中的變量出現(xiàn)不止一次時，例如當(dāng)X是-C(OR5)2-時的R5，每個出現(xiàn)不止一次的具體變量可以獨立選自對變量的定義。
本發(fā)明化合物根據(jù)R1連接的不對稱碳，可以存在至少兩個立體構(gòu)型，條件是R1和R2不相同。當(dāng)X是SO或C(OR5)2時(當(dāng)兩個R5基不同時)或當(dāng)R27或R28不是氫時，存在其它的立體異構(gòu)體。在式Ⅰ內(nèi)也有許多其它立體異構(gòu)體的可能性。式Ⅰ的所有可能的立體異構(gòu)體均在本發(fā)明范圍內(nèi)。
式Ⅰ化合物可以非溶劑化物以及溶劑化物形式存在，包括水化物形式。一般講，具有藥學(xué)上可接受的溶劑如水、乙醇等的溶劑化物形式等同于本發(fā)明目的的非溶劑化物形式。
式Ⅰ化合物可以與有機(jī)和無機(jī)酸形成藥學(xué)上可接受的鹽。能形成鹽的適當(dāng)酸的實例是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的鹽酸、硫酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、丙二酸、水楊酸、蘋果酸、富馬酸、丁二酸、抗壞血酸、馬來酸、甲磺酸和其它無機(jī)酸和羧酸。用常規(guī)方法使游離堿形式與足量的所需的酸接觸產(chǎn)生鹽來制備所述的鹽。用適當(dāng)稀的堿水溶液如烯氫氧化鈉、碳酸鉀、氨或碳酸氫鈉水溶液處理鹽可以再生游離堿。在某些物理特性，如在極性溶劑中的溶解度上，游離堿形式不同于它們相應(yīng)的鹽形式，但其它方面上所述的鹽等同于本發(fā)明目的的相應(yīng)游離堿形式。
用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法根據(jù)下述反應(yīng)步驟可以制備根據(jù)式Ⅰ的化合物方法的一般描述可如圖式1所示制備其中R2具有下式的化合物
圖式1
其中R2具有下式的化合物
按下面圖式制備
用適當(dāng)活化的羧酸衍生物R33CO-X，這里X是離去基團(tuán)如鹵素或OCOCH3處理中間體Ⅲ。另外，在堿如三乙胺和溶劑如DMF存在下，用N-羥基苯并三唑和碳化二亞胺如N-乙基-N-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽或二環(huán)己基碳二亞胺處理化合物Ⅲ和R33COOH的混合物得到1。另外，在堿如三乙胺存在下，用基團(tuán)R29-X，這里X和R29如上述定義(除R29≠H外)，處理中間體Ⅲc。
經(jīng)各種方法可以制備中間體Ⅲ。當(dāng)X=CH2或CO時，按圖式2所示可以制備Ⅲ
圖式2
用烷基鋰如正-丁基鋰或叔-丁基鋰處理芳基鹵代物Ⅳ，隨后與RCON(CH3)OCH3反應(yīng)得到化合物Ⅲa，如上述所示，使其脫保護(hù)并轉(zhuǎn)化成Ⅰ。另外，用適合的還原劑如硼氫化鈉，還原Ⅲa成醇Ⅴ。也可用上述的烷基鋰處理Ⅳ，隨后與RCHO反應(yīng)制得化合物Ⅴ。在強(qiáng)酸如三氟乙酸存在下，用還原劑如三乙基甲硅烷處理Ⅴ，使化合物Ⅴ轉(zhuǎn)化成化合物Ⅲb。
經(jīng)如圖式3所示的有關(guān)順序可以制備式Ⅰa、Ⅰb和Ⅰc化合物圖式3
如圖式2所示制備中間體Ⅲa，脫保護(hù)，然后使用圖式1的方法轉(zhuǎn)化成Ⅰa。然后使用圖式2的方法可以轉(zhuǎn)化成Ⅰb和Ⅰc。
通過類似于圖式2-3中描述的方法，使其中衍生于Ⅳ的芳基鋰試劑與各種親電試劑反應(yīng)，制備本發(fā)明的其它化合物。例如，按圖式4所示可制備其中Ⅹ是NHCO或N(烷基)CO的化合物
圖式4
中間體Ⅳ與上述的烷基鋰反應(yīng)，隨后加入異腈酸酯RNCO。如圖式1所述，使中間體脫保護(hù)并轉(zhuǎn)化成類型Ⅰd化合物。在適當(dāng)堿如氫化鈉的存在下，通過與烷基碘化物如碘代甲烷反應(yīng)將類型Ⅰd化合物轉(zhuǎn)化成化合物Ⅰe。
經(jīng)下述方法之一可以制備中間體Ⅳ
圖式5
用鹵化試劑如溴、二溴二甲基乙內(nèi)酰脲或雙(三氟乙酰氧基)碘代苯處理，將苯胺Ⅴ保護(hù)成它的三氟乙酰胺，用堿水溶液脫保護(hù)得到Ⅵ。用含有離去基團(tuán)如2-位的三氟甲磺酸酯的羧酸酯衍生物處理，隨后經(jīng)氯乙酰氯處理得到Ⅶ。用氨處理Ⅶ，隨后經(jīng)NaBH4/BF3乙醚化物還原得到Ⅷ。在Lewis酸如四異丙醇鈦(titanium tetraisopropoxide)的存在下，用N-BOC 4-哌啶酮(piperidinone)衍生物處理Ⅷ，隨后經(jīng)還原劑如氰基硼氫化鈉還原得到Ⅳa。
圖式6
使用三氟乙酐保護(hù)氮原子上的哌啶4-羧酸衍生物Ⅸ并使用亞硫酰氯使其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的?；娶?。在Lewis酸如三氯化鋁的存在下，使中間體Ⅺ與芳鹵化物反應(yīng)得到Ⅻ。在強(qiáng)酸如甲苯磺酸存在下，用乙二醇處理，保護(hù)Ⅻ的羰基。使用醇-堿水溶液使氮去保護(hù)并用圖式5所述的N-BOC 4-哌啶酮衍生物處理得到的化合物，得到Ⅳb。
按圖式7所示制備式Ⅰf(其中R30≠H)和Ⅱ的化合物
圖式7
在Lewis酸如四異丙氧基鈦的存在下，優(yōu)選用N-BOC4-哌啶酮衍生物處理中間體ⅩⅢ，隨后用二乙基鋁氰化物處理，得到ⅪⅤ。用Grignard試劑R34MgCl處理，隨后酸水溶液水解得到Ⅲc。使用圖式1所示的方法將化合物Ⅲc轉(zhuǎn)化成類型Ⅰf和Ⅱ的化合物。
除了上述方法外，按圖式8的描述可制備式Ⅰg化合物(其中A是O、S或N-R20)。
圖式8
在化合物HA-(CH2)2-5-AH中，每個A獨立是O、S或N-R20和每個CH2基團(tuán)可任選由一個或多個烷基取代?；衔颒A-(CH2)2-5-AH的實例包括
按圖式7和10的描述可制備化合物ⅩⅤ(其中R11是R30或R34)。在酸催化劑和脫水劑的存在下，任選用HA-(CH2)2-5-AH處理。當(dāng)A是O時，優(yōu)選所述的酸催化劑是有機(jī)質(zhì)子酸如甲苯磺酸而脫水劑是原甲酸三乙酯。當(dāng)A是S時，Lewis酸如三氟化硼醚化物即作為酸催化劑又可作為脫水劑。用強(qiáng)堿如氫氧化鉀水解得到的產(chǎn)物ⅩⅥ，獲得ⅩⅦ。經(jīng)圖式1介紹的方法，可轉(zhuǎn)化成Ⅰe。
當(dāng)X=S、SO或SO2時，按下述圖式所示制備中間體Ⅲ圖式9
圖式10
若必要或需要時，可通過一個或多個下述步驟，進(jìn)行上述反應(yīng)(a)從所產(chǎn)生的化合物中除去任何保護(hù)基團(tuán)；(b)將所產(chǎn)生的化合物轉(zhuǎn)化成藥學(xué)上可接受的鹽、酯和/或溶劑化物；(c)將根據(jù)式Ⅰ所產(chǎn)生的化合物轉(zhuǎn)化成另一個根據(jù)式Ⅰ的化合物，及(d)分離出式Ⅰ化合物，包括分離出式Ⅰ的立體異構(gòu)體。
根據(jù)上述反應(yīng)順序，本領(lǐng)域技術(shù)人員將能夠選擇所需的起始原料制備任何根據(jù)式Ⅰ的化合物。
在上述方法中，有時需要和/或必要保護(hù)反應(yīng)過程中的某些基團(tuán)?？刹捎帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員熟知的常用保護(hù)基團(tuán)。反應(yīng)或多次反應(yīng)后，通過一般方法可以除去保護(hù)基團(tuán)。
式Ⅰ的化合物表現(xiàn)出選擇性的m2和/或m4毒蕈堿拮抗活性，它與治療識別障礙如Alzheimer氏病和老年性癡呆的藥物活性有關(guān)。
在所設(shè)計的試驗方法中，式Ⅰ化合物顯示出藥理活性，表現(xiàn)出M1和M2毒蕈堿拮抗劑活性?；衔镌谒幱弥委焺┝績?nèi)是無毒性的。下面介紹試驗方法。
毒蕈堿結(jié)合活性對本發(fā)明化合物抑制結(jié)合到克隆的人m1、m2、m3和m4毒蕈堿受體亞型的能力。在這些研究中，受體的來源是來自穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞系(可表達(dá)每個受體亞型)的膜。隨后生長，團(tuán)聚細(xì)胞，繼之在50體積冷的10mM Na/K磷酸緩沖液，pH7.4(BufferB)中，使用Polytron勻漿。在4℃,40000xg離心勻漿20分鐘。傾析得到的上清液并在BufferB中再懸浮團(tuán)聚物(pellets)，形成20mg濕組織/ml的最終濃度。在-80℃，貯存這些膜，在下述的結(jié)合分析中備用。
使用3H-奎寧環(huán)基benzilate(QNB)(Watson et al.,1986)實施結(jié)合克隆人的毒蕈堿受體試驗。簡單講，用3H-QNB(最終濃度100-200PM)并增加未標(biāo)記藥物濃度至最終2ml的體積，在25℃孵育膜90分鐘(對含有膜的m1、m2和m4分別對約8、20和14μg的蛋白分析)。在1μM阿托品的存在下，測定非特異性結(jié)合。使用Skarton過濾裝置，經(jīng)GF/B玻璃纖維過濾器，通過真空過濾終止孵育并用冷的10mMNa/K磷酸緩沖液pH7.4洗滌濾器。將閃爍粒合劑(Scintillation cocktail)加到濾器中并將容器孵育過夜。在液體閃爍計數(shù)器(50％效應(yīng))中計數(shù)閃爍放射配體(bound radioligand)。使用EBDA計算機(jī)程序(Mc Pherson,1985)，對所得到的數(shù)據(jù)作IC50值(即50％抑制結(jié)合所需的化合物濃度)分析。使用下式(Cheng and Prusoff,1973)測定親和值(Ki)
在此，低值的Ki表示有較大的結(jié)合親合力。
為了測定化合物對結(jié)合m2受體的選擇程度，用對m1受體的Ki值除以對m2受體的Ki值。較高的比值表明對結(jié)合m2毒蕈堿受體有較高的選擇性。試驗結(jié)果Ki(nM)化合物序號m1 m2 m417 47.33 0.142.2618 48.37 0.110.7725 337.68 0.556.5131 308.95 0.6312.1041 29.90.061.4744 36.79 0.110.7684 12.32 0.040.0694 28.99 0.020.76100 64.97 0.123.38554 0.810.010.04590 29.33 0.030.80對化合物表中出現(xiàn)的化合物，觀察毒蕈堿拮抗活性范圍如下m2:0.01nM-106nMm1:0.24nM-1900nM
m4:0.02nM-705nM為了由式Ⅰ的化合物制備藥用組合物，可將能增強(qiáng)ACh釋放的化合物和ACh酶抑制劑、藥學(xué)上可接受的惰性載體與活性化合物混合。藥學(xué)上可接受的載體可以是固體的或是液體的。固體制劑包括粉劑、片劑、分散顆粒劑、膠囊、扁膠囊和栓劑。固體載體可以是一種或多種物質(zhì)，可作為稀釋劑、調(diào)味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、粘合劑或片劑的崩解劑；也可以是包囊材料。
液體制劑包括溶液、懸浮劑和乳劑。作為實例可提及用于非腸道注射的水或水-丙二醇溶液劑。
也包括作為口服或非腸道給藥的，在使用前可迅速轉(zhuǎn)化成液體形式制劑的固體形式制劑。這樣的液體形式包括溶液、懸浮劑和乳劑。通常以單位劑量形式很方便提供這些特定的固體形式制劑，使用時，提供單一液體劑量單位。
本發(fā)明也設(shè)計其它的傳遞系統(tǒng)，包括(但不限于此)透皮傳遞。透皮組合物可采用霜劑、洗劑和/或乳劑的形式和包括有基質(zhì)的透皮貼或為本目的在本領(lǐng)域中常用的儲藥型的透皮貼。
藥用制劑優(yōu)選為單位劑量形式。在這樣的形式中，制劑可再分為含有適量活性成分的單位劑量。單位劑型可以是包裝的制劑，該包裝含有分量制劑，如包裝的片劑、膠囊和在小容器或安瓶中的粉劑。單位劑型也可以是膠囊、扁膠囊或片劑本身或可以在包裝形式中的這些單位的任何適當(dāng)?shù)臄?shù)量。
根據(jù)特定的應(yīng)用和活性成分的藥效及應(yīng)進(jìn)行的治療，可以改變單位劑量制劑中活性化合物的用量或調(diào)整為1mg-100mg。相應(yīng)為約0.001-約20mg/kg的劑量、可以分成每日1-3次給藥。若需要，該組合物也含有其它治療劑。
根據(jù)患者的需求、所治療癥狀的嚴(yán)重程度和所應(yīng)用的特定化合物可以改變劑量。具體情況下的適當(dāng)劑量的確定是醫(yī)療領(lǐng)域中技術(shù)人員的技術(shù)范圍內(nèi)的工作。一般講，總?cè)談┝靠稍谌熘蟹执谓o藥或通過連續(xù)給藥方法給藥。當(dāng)使用式Ⅰ化合物或能增強(qiáng)ACh釋放的化合物與乙酰膽堿酯酶抑制劑聯(lián)合治療識別障礙時，這兩種活性成分可以同時聯(lián)合給藥或先后給藥或可以給予含有式Ⅰ化合物或能增強(qiáng)ACh釋放的化合物的單一藥用組合物和給予藥學(xué)上可接受載體中含有的乙酰膽堿酯酶抑制劑?？梢砸匀魏纬Ｓ玫目诜蚍悄c道劑型如膠囊、片劑、粉劑、扁膠囊、懸浮劑、溶液劑、栓劑、鼻腔噴霧劑等分次或一起給予組合的成分。乙酰膽堿酯酶抑制劑的劑量范圍為0.001-100mg/kg(體重)。
本發(fā)明在此公開的下列制劑和實施例是示范性的，但并不構(gòu)成對本發(fā)明范圍的限制。另外，本領(lǐng)域技術(shù)人員能理解機(jī)理過程及類似的結(jié)構(gòu)。
下列實施例中，中間體數(shù)碼為簡體并用圓括號括起，如(5)。產(chǎn)物化合物為黑體字并帶下劃線，如5。
實施例1化合物4的合成
將t-BuLi(100ml,1.7M)滴加到在干冰丙酮浴中冷卻的溴(15.5g,0.07mol)的乙醚(650ml)溶液中。攪拌3小時后，加入硫黃粉(4.9g,0.15mol)并再繼續(xù)攪拌1小時。將溫度升溫至室溫并繼續(xù)攪拌16小時。用水驟停反應(yīng)后加入乙醚(Et2O)并用5％HCl、水、10％Na2CO3和鹽水洗滌有機(jī)相。濃縮溶液并用5％乙酸乙酯(EtOAc)/己烷層析純化(Rf=0.7/CH2Cl2∶己烷1∶1)，得33g黃色固體物。
將樣品溶解于THF(50ml)并冷卻在冰水浴中，將其加入LAH(0.91g,0.02mol)和20ml THF混合物中。繼續(xù)攪拌10分鐘，然后溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時。用EtOAc稀釋反應(yīng)物并用水驟停反應(yīng)。加入10％HCl并分離出有機(jī)層，用水和鹽水洗滌。濃縮后，真空干燥，收集6.6g黃色油狀物。
將硫醇(19g,124mmol)溶解于DMF(180ml)中并在冰浴中冷卻，分步加入NaH(4.9g,60％油中)。連續(xù)攪拌1小時，然后溫?zé)嶂潦覝夭⒃贁嚢?小時。滴加4-氟乙酰苯(18.7g,136mmol)，然后在70℃攪拌3小時。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(rotovap)濃縮反應(yīng)液，用EtOAc稀釋，用水和鹽水洗滌。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溶液并經(jīng)硅膠層析殘留物(20％EtOAc/己烷)，收集24.5g(73％)的淺黃色固體物。
向醇(10.1g,40mmol)在甲苯(100ml)中的溶液緩慢加入三甲基環(huán)硼氧烷(3.3g,27mmol)。4小時后，通過蒸餾(油浴溫=140-150℃)除去揮發(fā)性物質(zhì)。冷卻至室溫，隨后加入甲苯(50ml)，經(jīng)蒸餾(重復(fù))除去揮發(fā)性物質(zhì)。將殘留物置于高真空下，加熱燒瓶至150℃。真空下干燥過夜后，將灰白色的固體物溶解于THF(100ml)中并不需進(jìn)一步純化可使用。
將酮(36g,133mmol)溶解THF(200ml)中，隨后加入催化劑(8.8g,80ml THF中)。滴加BH3(CH3)2S(42ml,2mol/L THF中)，攪拌反應(yīng)液30分鐘。加入CH3OH(200ml)并濃縮溶液。將殘留物溶解在EtOAc中并用水和鹽水洗滌。Na2SO4干燥溶液，過濾并濃縮，得40.3g粉紅色油狀物。
將MCPBA(79.7g,70％)分步加入冷卻在冰水浴中的硫化物(40.3g,147mmol)的CH2Cl2(600ml)溶液中。攪拌1小時后，將溫度升至室溫并攪拌4小時。用CH2Cl2稀釋后，用10％Na2CO3、水和鹽水洗滌反應(yīng)混合物。Na2SO4干燥溶液，過濾并濃縮，收集42.5g灰白色固體物。
將甲磺酰氯(6.5ml)滴加到在冰水浴中冷卻的醇(21.4g,70mmol)和三乙胺(Et2N)(19.5ml)的CH2Cl2(250ml)溶液中。1小時后，用CH2Cl2稀釋反應(yīng)液并用2％HCl、水、飽和NaHCO3、水、鹽水洗滌、Na2SO4干燥。過濾并濃縮，得到27g的油狀物，不需進(jìn)一步純化可使用。
將甲磺酸酯(由21.4g的醇制得)、哌嗪(18g,0.07mol)和2,2,6,6-四甲基哌啶(11.8g,0.084mol)的混合物在CH3CN(200ml)中攪拌回流過夜。冷至室溫后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CH3CN并替換成EtOAc。用10％Na2CO3和水洗滌溶液。濃縮后，使用1∶3EtOAc/己烷經(jīng)硅膠層析殘留物。收集得21.9g(60％)膠狀物。
在100℃油浴中加熱CBZ胺(10.3g,19.6mmol)、100ml水、CH3OH(100ml)和100ml濃HCl的混合物5小時。在冰浴中冷卻該混合物并加入50％NaOH、直至pH=9為止。加入EtOAc，隨后分離，水洗。濃縮有機(jī)溶液，經(jīng)硅膠層析殘留物(CH2Cl2∶CH3OH 50∶1，并用NH4OH溶液飽和)。收集得到產(chǎn)物為重油，收率86％。
將胺(1.0g,2.5mmol),N-BOC哌啶酮(0.5g,2.5mmol)和HOAc(0.15ml)溶解于CH2Cl2(20ml)中。分次加入NaBH(OAc)3(0.55g,3.8mmol)并攪拌溶液過夜。加入CH2Cl2并用飽和的NaHCO3、水和鹽水洗滌。經(jīng)Na2SO4干燥溶液，過濾并濃縮。使用EtOAc層析殘留物。得到無色膠狀物(0.96g)，收率65％。
將N-BOC化合物(0.87g,1.5mmol)溶解于EtOAc(20ml)中，并在攪拌下加入6NHCl(3.5ml)。2小時后，加入CH2Cl2并用飽和NaHCO3洗滌該溶液，Na2SO4干燥。過濾后，濃縮溶液并在真空干燥下得到白色粉末(0.6g,85％)。
化合物4在室溫將中間體(1)(0.025g),N-羥苯并三唑(HOBT)(0.01g)、苯甲酸(0.0125g)、Et3N(0.01ml)和N-乙基-N-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(0.025g)在DMF(0.3ml)的溶液中攪拌20小時。用EtOAc稀釋，水洗及NaHC3溶液洗滌，MgSO4干燥，經(jīng)硅膠小塞墊過濾，用EtOAc洗滌。蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物的游離堿形式。將其溶解在CH2Cl2(0.2ml)中并加入HCl在二氧六環(huán)(4M；0.1ml)中的Et2O(1.5ml)的溶液。攪拌5分鐘，離心，懸浮洗滌并用Et2O離心3次，在室溫，N2下干燥，然后在高真空下干燥得到二鹽酸鹽物。mp:215-225℃，并分解；質(zhì)譜MH+=574。
實施例2化合物17的合成
將來自實施例1的中間體(1)(0.05g),CH2Cl2(1.5ml)，鄰-甲苯酰氯(0.1ml)和1NNaOH水溶液(2ml)的混合物攪拌20小時。分離有機(jī)相，干燥并蒸發(fā)。經(jīng)制備tlc純化，用5％CH3OH-CH2Cl2洗脫。用50％CH3OH-CH2Cl2提取主要色帶并蒸發(fā)。沉淀，洗滌并以上述制備的方法干燥鹽酸鹽(收率=0.065g)。mp:182-190℃，并分解；質(zhì)譜MH+=588實施例3化合物28的合成
使用按實施例10和11所示產(chǎn)生的中間體(3a)或是(3b)進(jìn)行本合成。在-70℃及N2下，向(3b)(1.86g)的干燥THF(30ml)的溶液中加入n-BuLi(2.5M，在己烷中；1.6ml)，攪拌10分鐘并加入在THF(1ml)中的N-胡椒基酰基-N,O-二甲基-羥胺(0.83g)的溶液。不用冷卻，攪拌2小時，加入EtOAc、水洗、干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。用EtOAc-CH2Cl2經(jīng)硅膠層析得到主要組分中間體(4)的粘稠油狀物(1.21g)。在室溫下將(4)(0.4g)在EtOAc(24ml)和濃HCl(4.5ml)中的溶液攪拌3小時。用EtOAc稀釋，用過量的1N NaOH溶液洗滌。用EtOAc提取，飽和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)得到NH化合物。將其溶解在CH2Cl2(10ml)中，在室溫，用鄰-甲苯酰氯(0.15g)和水(10ml)中的NaOH(0.8g)攪拌20小時。用CH2Cl2提取，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)并用4％CH3OH-CH2Cl2經(jīng)硅膠層析。蒸發(fā)純化流出物，得到泡沫狀游離堿(0.33g)。將其小部分溶解于CH2Cl2中并如前述制備中所述沉淀出鹽酸鹽。mp:200-210℃，并分解；質(zhì)譜MH+=554。
實施例4化合物30的化合物
在室溫下將實施例3的產(chǎn)物(0.3lg)、乙醇(15ml)和硼氫化鈉(0.042g)的溶液攪拌3小時。蒸發(fā)，加水，EtOAc提取，干燥，蒸發(fā)并用10％CH3OH-CH2Cl2經(jīng)硅膠層析得到白色泡沫物的產(chǎn)物(0.28g)，非對映異構(gòu)體混合物。mp:85-95℃；質(zhì)譜MH+=556。
實施例5化合物31的合成
攪拌實施例4的產(chǎn)物(0.1g)在CH2Cl2(3ml)中的溶液并加入三乙基甲硅烷(0.3ml)和三氟乙酸(0.12ml)。在室溫攪拌72小時。加入過量的1NNaOH溶液，用EtOAc提取，干燥，蒸發(fā)并經(jīng)制備tlc硅膠板純化，用5％CH3OH-CH2Cl2洗脫。并提取主要色帶，蒸發(fā)洗脫液并以常用方法轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽，得到白色粉末(0.08g)。mp:210-215℃，并分解；質(zhì)譜MH+=540。實施例6化合物24的制備
在-70℃，干燥的N2下，向(3b)(實施例10)(1.38g)在干燥的THF(20ml)中的溶液加入n-BuLi(2.5M，在己烷中；1.7ml)。攪拌5分鐘，并加入3,4-亞甲基二氧苯基異氰酸酯(粗品，在甲苯中，加熱相應(yīng)的?；B氮化物制得)(0.68g)在THF(5ml)中的溶液。不用冷卻下攪拌30分鐘，并溶于EtOAc-NaHCO3水溶液中，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。通過硅膠柱層析分離出所需的化合物(Rf=0.4，在5％CH3OH-CH2Cl2中)，蒸發(fā)得到淺棕色泡沫物(0.54g)。
以上述的方法將小部分轉(zhuǎn)化成HCl鹽。mp:240-250℃，并分解；質(zhì)譜MH+=551。
在室溫，將游離堿(8)(0.5g)、EtOAc(5ml)和濃HCl(3ml)的混合物攪拌2小時。加入過量的NaOH水溶液，用CH2Cl2提取，干燥并蒸發(fā)得到泡沫物(0.35g)。將0.12g該物質(zhì)溶解在CH2Cl2(4ml)中并在室溫與1N-NaOH(5ml)和鄰-甲苯酰氯(0.05ml)一起攪拌2小時。分離并蒸發(fā)有機(jī)相，用5％CH3OH-CH2Cl2經(jīng)制備tlc硅膠分離產(chǎn)物。以常用方法將小部分轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽。mp:220-230℃，并分解；質(zhì)譜MH+=569。
實施例7化合物25的合成
攪拌實施例6的產(chǎn)物(0.08g)在DMF(1ml)中的溶液并加入NaH(0.044g)，然后，10分鐘后，加入CH3I并攪拌30分鐘。在EtOAc-H2O中吸收，干燥，蒸發(fā)，經(jīng)制備tlc純化并按上述制備方法轉(zhuǎn)化成HCl鹽。mp:190-200℃，并分解；質(zhì)譜MH+=583。
實施例8化合物83和84的合成
在0℃，將300ml的三氟乙酐(TFAA)加到96g的異哌啶甲酸(isonipecotic acid)中。加畢后，加熱回流反應(yīng)混合物4小時。真空下除去過量的TFAA并使反應(yīng)混合物溶解到EtOAc中，用水洗滌并濃縮得到160g的酰胺。用300ml SOCl2處理50g該酰胺并加熱回流反應(yīng)混合物過夜。在結(jié)束時，真空下除去過量的SOCl2，得到54g酰氯。
在室溫，將11gAlCl3緩慢加到10g上述酰氯在40ml溴苯的溶液中并加熱回流反應(yīng)混合物4小時。然后冷卻并傾入濃HCl和冰的混合物中，用EtOAc提取產(chǎn)物。分離有機(jī)層并用水、半飽和NaHCO3溶液洗滌，濃縮得到16.21g的酮。
將16.21g的酮溶解在含25ml乙二醇和0.5g對-甲苯磺酸的200ml甲苯中。加熱回流反應(yīng)混合物，伴隨共沸除水，直到不再收集到水為止。濃縮反應(yīng)混合物，得到17.4g的縮酮。
將17.4g的粗品酮溶解在100ml甲醇中，并加進(jìn)25ml水和12g的K2CO3并在室溫攪拌反應(yīng)混合物過夜。用水稀釋反應(yīng)混合物，用EtOAc提取。分離出有機(jī)層并用水和鹽水洗滌，濃縮得到12.55g的(10)。
在室溫，將6.5g的(10)、4.15g的N-BOC-4-哌啶酮和10ml的Ti(OiPr)4的混合物攪拌過夜。冷卻反應(yīng)混合物至0℃和加入溶解在40mlCH3OH中的3.2g的NaCNBH3。然后使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時，用100mlEtOAc稀釋并用60ml水/20ml濃NH4OH驟停反應(yīng)。攪拌混合物1小時，經(jīng)硅藻土過濾。用3×100mlEtOAc提取水層。用MgSO4干燥合并的有機(jī)層，過濾并濃縮。使用100％EtOAc為洗脫液經(jīng)快速層析純化粗品。得到6.8g,66％的(11)。
在-78℃，向攪拌的(11)在25ml THF中的溶液加入1.7ml(1.6M，在己烷中)的n-BuLi。在-78℃攪拌混合物10分鐘。然后加入溶解在5mlTHF中的700mg胡椒醛。使混合物達(dá)到室溫并攪拌2小時。用30ml水使混合物驟冷，用3×50ml的EtOAc提取。用MgSO4干燥合并的有機(jī)層，過濾并濃縮。使用10％Et3N-乙醚經(jīng)硅膠快速層析純化粗品，得到475mg,41.5％的(12)。
向攪拌的475mg的(12)和1ml的Et3SiH在10ml CH2Cl2中的溶液加入3ml TFA。在室溫攪拌混合物2小時。蒸發(fā)掉溶劑并將殘留物溶解于20ml CH2Cl2中，用20ml的10％NaOH洗滌。用3×30ml的CH2Cl2提取水層，MgSO4干燥合并的有機(jī)層，過濾并濃縮。得到(13)和(14)的混合物，不用純化可使用。(350mg,90％)。
用0.5ml(1.2當(dāng)量)的鄰-甲苯酰氯處理350mg的(13)和(14)的粗品混合物和在10ml CH2Cl2中的1ml Et3N 3小時。然后濃縮混合物，使用4％Et3N-Et2O經(jīng)硅膠制備TLC純化殘留物，得到化合物83和84。通過將游離堿溶解在EtOAc中并加入HCl-乙醚溶液來制備化合物83和84的HCl鹽。蒸發(fā)溶劑后，收集得粉末狀的鹽。
化合物83(50mg,54％)(M+H)+計算值525.2753；實測值525.2746；化合物84(190mg,50％)(M+H)+計算值569.3015；實測值569.3022實施例9化合物85的合成
將按實施例1所述制備的哌嗪(17)(1.1g,2.8mmol)溶解在CH2Cl2(10ml)中，隨后加入N-BOC哌啶酮(0.85g,4.25mmol)和Ti(OiPr)4(0.8g,2.8mmol)。在室溫攪拌混合物過夜。經(jīng)注射器加進(jìn)氰化二乙基鋁的1摩爾甲苯溶液并再攪拌混合物20小時。然后用EtOAc稀釋混合物并用10％Na2CO3、水和鹽水洗滌，真空濃縮有機(jī)相，通過硅膠柱(1∶1EtOAc/己烷)層析殘留物。收集得無色油狀的產(chǎn)物(18)(0.93g,55％)。
將氰基中間體(18)(0.13g,0.19mmol)溶解在THF(4ml)中，隨后經(jīng)注射加進(jìn)CH3MgBr(0.64ml,3.0M,1.9mmol)。攪拌10分鐘后，升溫至60℃，繼續(xù)攪拌2.5小時。冷卻至室溫，隨后用水(1ml)，然后用飽和NaHCO3(20ml)驟停反應(yīng)。10分鐘后，加入EtOAc(50ml)，劇烈攪拌，分離。用鹽水洗滌有機(jī)層，Na2SO4干燥，過濾并在真空下濃縮，得到粘稠油狀物，并經(jīng)硅膠制備TLC板純化(100％EtOAc)。收集得到中間體(19)，收率60％。
將N-BOC哌啶(19)(0.27g,0.4mmol)溶解在EtOAc(10ml)中，在劇烈攪拌下加入1.5ml 6N HCl溶液。1.5小時后，加入飽和NaHCO3，直至pH顯堿性。加入CH2Cl2(25ml)，分離各層，用CH2Cl2提取水相。Na2SO4干燥有機(jī)層，過濾并濃縮收集0.22g,95％的(20)，為稠密的油狀物，該物質(zhì)在真空下固化。
將胺(20)(0.025g,0.044mmol)溶解在CH2Cl2(1ml)中，隨后加入Et3N(11μl,0.08mmol)和2,6-二氟-苯甲酰氯(0.014g,0.08mmol)。在室溫攪拌過夜后，加入飽和的NaHCO3和CH2Cl2。分離各層，用Na2SO4干燥有機(jī)相。除去溶劑，將殘留物溶解于EtOAc中。將溶液置于制備TLC板上，用EtOAc(100％)洗脫。收集得到澄清油狀物的化合物85(0.026g)，收率=95％。按下述方法將其轉(zhuǎn)化成二鹽酸鹽將游離胺(26mg)溶解在1mlEtOAc中，邊攪拌，邊加入HCl/Et2O，直至pH持續(xù)在2為止。將沉淀移至離心管中，旋轉(zhuǎn)離心。除去上清液，替換成Et2O(用刮鏟輕輕攪拌)，再旋轉(zhuǎn)樣品。重復(fù)3次。除去溶劑后，將固體物轉(zhuǎn)移至小瓶中。真空干燥。收集得15mg白色固體物(M.P.=242-245分解)。
實施例10實施例3的中間體(3a)的合成
步驟1將CH2Cl2(50ml)中的TFAA(150ml,1.06mol)冷卻至0℃。用30分鐘緩慢加入(S)-α-甲基芐胺(22)(100g,0.83mol)在CH2Cl2(200ml)中的溶液。除去冷浴，攪拌混合物約2小時，移至分液漏斗中，用水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾并濃縮，得189g(約100％)的(23)，為白色固體物。步驟2在室溫下向(23)(65.4g,301mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液加入碘(41g,162mmol)。加入[雙(三氟乙酰氧基)碘]-苯(75g,174mmol)。攪拌混合物30分鐘，產(chǎn)生溫和放熱(30℃)，然后置暗處過夜。緩緩地將混合物加入攪拌的NaHCO3(50g)，亞硫酸氫鈉(10g)和水(600ml)的混合物中，用CH2Cl2洗滌。攪拌混合物15分鐘，過濾，并用CH2Cl2充分洗滌濾餅，直至洗滌液中在TLC(100％CH2Cl2,Rf=0.75)不顯示產(chǎn)物為止。(注初始固體物中含有相當(dāng)多的產(chǎn)物，它中等程度溶于CH2Cl2)。用無水MgSO4干燥濾液，通過1”的快速硅膠層板過濾，用2％Et2O/CH2Cl2洗滌。蒸發(fā)濾液成淤漿，加入Et2O(約75ml)和己烷(～700ml)，攪拌混合物30分鐘，收集得到的固體物，用己烷充分洗滌，空氣干燥，然后在真空下干燥，得到白色固體的63.05g(61％)的(24)。蒸發(fā)濾液至油狀物和部分結(jié)晶，加入己烷(500ml)，室溫下攪拌1小時，收集得到另外4.6g(4％)的(24)。步驟3將(24)(10g,29.15mmol)溶解于CH3OH(150ml)和水(15ml)中。加入50％NaOH(30g)并在室溫攪拌混合物過夜(20小時)。TLC(50％EtOAc/己烷)指示起始原料的耗盡。真空中除去大部分的CH3OH，將殘留物溶解于水和CH2Cl2中，移至分液漏斗中并用CH2Cl2提取。合并提取液，無水Na2CO3干燥，過濾并濃縮，得到白色固體的6.7g(93％)的(25)。步驟4將三氟甲磺酸酐(10.6ml,62.98mmol)加到0℃的(S)乳酸乙酯(26)(7.0ml,61.75mmol)在CH2Cl2(100ml)的溶液中。在0℃，加入2,6-二甲基吡啶(7.55ml,64.83ml)，并攪拌混合物1小時。將混合物移至分液漏斗中，用0.5M HCl和鹽水洗滌，無水Na2SO4干燥，濃縮幾乎至干，經(jīng)硅膠塞層過濾，用CH2Cl2洗脫，濃縮，得到紅棕色油狀物的10.8g(70％)的(27)。步驟5將(25)(6.7g,27.11mmol)加到CH2Cl2(90ml)，水(90ml)和K2CO3(5.5g,39.6mmol)的混合物中。加入(S)乳酸乙酯三氟甲磺酸酯(Ethyl(S)lactase triflate)(27)(7.5g,29.82mmol)并攪拌混合物過夜(20小時)。TLC(50％EtOAc/己烷)指示起始原料的耗盡。加入氨(濃)(30ml)，攪拌15分鐘，移至分液漏斗中，用水洗滌，無水Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到10.3g(約110％)的(28)。步驟6將ClCH2OCl(12ml,150mmol)加入(28)(9.37g,27.11)在二氯甲烷(80ml)中的溶液中?；亓骰旌衔?小時。TLC(20％EtOAc/己烷)指示起始原料的耗盡。將溶液冷卻至室溫，用CH2Cl2、水(200ml)稀釋，隨后以小部分加入K2CO3(約15g)。再攪拌混合物15分鐘，轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，水洗，無水Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到11.53g(約110％)的(29)。步驟7將(29)(27.11mmol)溶解于二甲基亞砜(DMSO)(120ml)中。加入濃氨水(24ml)和NaI(13g)。將CH3OH(10ml)用于NaI中。攪拌混合物過周末(60小時，充分過夜)。TLC(50％EtOAc/己烷)指示起始原料的耗盡。加入水(500ml)，攪拌混合物30分鐘并通過真空過濾收集得到的沉淀。用水充分洗滌沉淀并真空干燥，得到8.2g(84％)的(30)。步驟8將(30)(8.2g,22.9mmol)加入NaBH4(8.66g,228.9mmol)在二甲氧乙烷(250ml)中的混合物中，加入三氟化硼合乙醚(16.9ml,137.3mmol)并在氮氣下，回流得到的混合物3小時。TLC(5％CH3OH/CH2Cl2)指示起始原料的耗盡。冷卻混合物至0℃，緩慢加入CH3OH(60ml)并攪拌生成的混合物20分鐘。緩慢加入濃HCl(10ml)并回流得到的混合物1小時。TLC(5％CH3OH/CH2Cl2)指示與胺一致的極性較大產(chǎn)物形成。冷卻混合物至室溫并濃縮幾乎至干。在2N NaOH和CH2Cl2之間分配殘留物，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中并用CH2Cl2提取。合并提取液，水洗，無水Na2SO4干燥，并濃縮，得到油狀物的6.5g(87％)的(31)。步驟9使用實施例8中所介紹的方法，將中間體(31)轉(zhuǎn)化成3a。
實施例11實施例3的中間體(3b)的合成
用在100ml CH2Cl2中的0.3mol(S)-α-甲基芐胺處理TFAA(0.4mol)在300ml冷的CH2Cl2中的溶液。冰浴下攪拌得到的混合物30分鐘和在室溫攪拌1.5小時。在冰浴中再冷卻溶液，加入80ml CH3SO3H，隨后加入45g二溴二甲基乙內(nèi)酰脲。攪拌直至混合物呈均相為止，然后將混合物置于暗處過夜。加入20g NaHSO3在300ml冰水中的溶液。分離出有機(jī)層，水洗兩次并用MgSO4干燥。通過4”快速級硅膠層墊過濾溶液，用400ml CH2Cl2洗脫，蒸發(fā)成固體物。在200ml Et2O中懸浮固體物并加入1升己烷。攪拌30分鐘后，收集固體物，用己烷洗滌，干燥，得到35.7g的中間體(24b)。使用圖式9中所介紹的同樣步驟將該化合物轉(zhuǎn)化成(3b)。
實施例12化合物53的合成
將干燥的乙二醇(1.33ml,23.8mmol)，三乙基原甲酸酯(1.70ml,10.2mmol)和對-甲苯磺酸一水化物(0.97g,5.12mmol)加入攪拌的(32)(由實施例14中介紹中間體(7)的方法制備，但使用N-乙氧羰基-4-哌啶酮替代N-t-BOC-4-哌啶酮)在甲苯(34ml)的溶液中，(1.80g,3.41mmol)。在55℃氮氣下，加熱反應(yīng)液過夜。用CH2Cl2稀釋混合物，依次用1NNaOH和鹽水洗滌，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。得到的產(chǎn)物(33)(2.40g)不需進(jìn)一步純化而可使用。
將粗品(33)(0.83g，約1.45mmol)溶解在乙二醇(44ml)中并將碾碎的KOH(2.90g,51.6mmol)加到劇烈攪拌的溶液中。在100℃加熱反應(yīng)物24小時。冷至室溫后，用EtOAc稀釋混合物，隨后加入1NNaOH。用EtOAc提取含水部分并合并有機(jī)層，用1NaOH洗滌幾次。Na2SO4干燥粗品溶液，過濾，濃縮得到0.31g的(34)，不需進(jìn)一步純化而可使用。
向(34)(31.4mg,62.8μmol)在CH2Cl2(0.60ml)的溶液中加入正-丙磺酰氯(20μl,178μmol)和Et3N(30μl,215μmol)。在室溫及氮氣下攪拌反應(yīng)物2小時。減壓下濃縮混合物并經(jīng)PTLC(10/90 CH3OH/CH2Cl2)純化，得到(35)(12.3mg，三步總收率32％)、LRMS(FAB):(M+H)=606。
實施例13化合物22的合成
向CH2Cl2(0.24ml)中的(36)(29.5mg,58μmol)(由實施例14制備中間體(7)所介紹的方法制備，其中4-巰基苯甲醚代替4-巰基亞甲基二氧苯和N-乙氧羰基-4-哌啶酮代替N-tBOC-4-哌啶酮)溶液加入乙二硫醇(7.4μl,88μmol)和BF3·OEt2(11μl,88μmol)。在室溫，氮氣下攪拌反應(yīng)混合物過夜。然后用CH2Cl2稀釋并用10％NaOH洗滌。Na2SO4干燥粗品混合物，過濾并減壓濃縮。經(jīng)PTLC(10/90CH3OH/CH2Cl2)純化，得到37(17mg,50％收率)。LRMS(FAB):(M+H)=591。
實施例14化合物43的合成
在0-10℃，向攪拌的41ml無水DMF溶液中加入43ml SO2Cl2,隨后緩慢加入61g的亞甲基二氧基苯。加畢后，在80℃加熱混合物10分鐘并在110℃再加熱5-10分鐘。反應(yīng)混合物變成暗棕色。冷卻混合物至40℃并傾入由200ml H2O/200g碎冰/300ml CHCl3組成的混合物中。分離各層，MgSO4干燥有機(jī)層，過濾，濃縮，得到粗品(1)，并用100ml己烷研磨(60.6g,53％)。
在0℃，向16g LAH在500ml THF的攪拌懸浮液中滴加60.6g的(1)溶于100ml THF的溶液中。使溫度升至室溫并在此溫度下攪拌混合物2小時。然后在0℃小心地用1N HCl驟冷反應(yīng)混合物，使之成pH=1，用1升EtOAc稀釋。用500ml的水洗滌有機(jī)相，MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到粗品(29g,68％)，不需純化而直接應(yīng)用于下一步中。
將28g粗品硫醇(2)溶解在20ml的DMF中的溶液加到攪拌的8gNaH(60％)在80ml DMF的懸浮液中。在室溫攪拌混合物1小時，立即加入溶在150ml DMF中的酮(3)溶液。在70℃加熱混合物過夜。用400ml CH2Cl2稀釋混合物，然后用300ml水驟冷。用3×200ml水洗滌有機(jī)相，用MgSO4干燥，過濾并濃縮，得粗品(4)，使用EtOAc/己烷/CH2Cl2=1/4.5/4.5作為洗脫液經(jīng)快速層析純化。(35g,53％)向攪拌的100ml CH2Cl2中的6g(4)的溶液中加入10ml的TFA。在室溫下攪拌混合物1小時。減壓下清除溶劑，將殘留物溶于100mlCH2Cl2中，用3×60ml CH2Cl2提取。合并的有機(jī)相為氯化物，用50ml的10％NaOH驟停反應(yīng)。MgSO4干燥水相，過濾并濃縮，得到粗品(5)，不需純化而可使用。(4.6g,100％)在室溫，攪拌3.4g的(5)、2.4g的N-BOC-4-哌啶酮和5.9ml的Ti(OiPr)4的混合物過夜。在0℃，加入1.6g的NaCNBH3溶于40mlCH3OH的溶液。在室溫攪拌混合物1小時，用100ml EtOAc稀釋，用60ml水/20mlNH4OH的混合物驟停反應(yīng)。在室溫下攪拌混合物1小時并經(jīng)硅藻土過濾。用3×100ml EtOAc提取水相。用MgSO4干燥合并的有機(jī)相，過濾并濃縮。使用100％EtOAc作為洗脫液快速層析純化粗品(6)。(3.8g,73％)向1.32g的(6)在15ml HOAc中的溶液加入1.4lg的NaBO3·4H2O，并在室溫攪拌混合物3天。蒸發(fā)溶劑并用20ml的10％NaOH驟冷殘留物，然后用3×50ml的EtOAc提取。用MgSO4干燥合并的有機(jī)提取物，過濾并濃縮。使用20％EtOH-EtOAc經(jīng)硅膠制備TLC純化粗品(7)。(620mg,44％)在室溫，攪拌620mg的(7)在15ml CH2Cl2和5mlTFA中的溶液3小時。蒸發(fā)溶劑并用10％NaOH處理殘留物，然后用EtOAc提取。MgSO4干燥有機(jī)提取物，過濾并濃縮，得到粗品(510mg,100％)。使0.052mmol的反應(yīng)粗品游離胺與1.2當(dāng)量的鄰-甲苯酰氯和3ml的CH2Cl2中的1.3當(dāng)量的Et3N反應(yīng)3小時。濃縮反應(yīng)混合物并使用20％EtOH-EtOAc經(jīng)硅膠制備的TLC純化殘留物。(18mg,50％)(M+H)+計算值575.2216；實測值575.2223。
通過將43溶解在EtOAc中并加入HCl-乙醚溶液來制備HCl鹽。蒸發(fā)溶劑后，收集的鹽為粉末狀。
實施例15化合物82的制備
在室溫，將來自實施例3的化合物(4)(0.5g)和在乙醇(3ml)中的NaBH4溶液攪拌3小時。加水，用CH2Cl2提取，MgSO4干燥并蒸發(fā)。向CH2Cl2(5ml)中的殘留物加入三乙基甲硅烷(3ml)和TFA(3ml)，回流3小時。蒸發(fā)，用CH2Cl2和1N NaOH水溶液分層，干燥并蒸發(fā)，得到稠密的油狀物(11)，隨后用于?；瘜嶒炛?。
攪拌(11)(0.03g),CH2Cl2(2ml)和1N NaOH水溶液(2ml)的混合物并加入2,3-二甲基苯甲酰氯(0.07g)。在室溫攪拌18小時，用CH2Cl2提取，干燥并蒸發(fā)。將殘留物溶解在1∶1的CH2Cl2∶丙酮中，通過硅膠小管塞過濾，用相同溶劑混合物洗滌。蒸發(fā)，用少量CH2Cl2溶解殘留物，按上述制備方法，通過加入過量的HCl的Et2O液沉淀二鹽酸鹽。用Et2O洗滌并干燥，得到灰白色粉末狀的產(chǎn)物化合物82(0.036g)。mp:207-212℃，并分解；MS:MH+=554。
實施例16化合物94的制備
分次將130mg的NaBH4加到攪拌的15ml無水甲醇中的899mg(1.72mmol)的(4)的溶液中。在室溫攪拌混合物30分鐘，然后用15ml的10％NaOH溶液驟停反應(yīng)。用4×20ml的EtOAc提取水層。用Na2SO4干燥合并的有機(jī)層，過濾并濃縮，得到859mg(95％)的(8)。
向5ml CH2Cl2中的850mg粗品(8)的攪拌溶液中加入563mg(3當(dāng)量)的三乙基甲硅烷，隨后加入2ml的TFA。在室溫攪拌混合物3小時，然后濃縮。將殘留物溶于15ml的CH2Cl2和15ml的10％NaOH中。用3×15ml的CH2Cl2提取水層。用MgSO4干燥合并的有機(jī)層，過濾并濃縮，得到600mg(92％)的粗品(9)。
向600mg的(9)和5ml CH2Cl2中的455mg的Et3N攪拌的溶液中加入464mg的鄰-甲苯甲酰氯。在室溫攪拌混合物2小時。用20ml水驟冷混合物，用3×20ml的EtOAc提取。用MgSO4干燥合并的有機(jī)層，過濾并濃縮，得到粗品。經(jīng)硅膠制備的TLC純化得到555mg(70％)的(10)。
在0℃，向43mg的(10)和5ml的CH2Cl2中的0.5ml CH3SO3H(0.5M,CH2Cl2)攪拌的溶液中加入58mg(57-86％)的mCPBA。在0℃攪拌混合物1小時并用15ml的10％NaHCO3驟停反應(yīng)。用3×15ml的EtOAc提取水層，用MgSO4干燥合并的有機(jī)層，過濾并濃縮，得到粗品。經(jīng)硅膠制備的TLC純化得到36mg化合物94(80％)的游離堿。將游離堿溶解于EtOAc中并加入HCl-乙醚溶液制備HCl鹽。蒸發(fā)溶劑后，收集粉末狀的鹽。(M+H)+計算值561.2423；實測值561.2416。
使用上述方法中適當(dāng)?shù)钠鹗荚希帽绢I(lǐng)域中已知的修飾方法，制備下述表中例舉的化合物
化合物表
實施例17
步驟1
在冰水浴中冷卻哌啶酮一水鹽酸鹽(27.5g,0.18mol)、K2CO3(50g)、350ml CH2Cl2、250ml水的混合物，滴加鄰-甲苯甲酰氯(26g,0.17mol)在25ml CH2Cl2中的溶液(1小時以上)。將混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。分離出有機(jī)相，水洗，Na2SO4干燥，過濾并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮。使用己烷∶EtOAc(4∶1)經(jīng)硅膠柱純化粗品。收率=93％。步驟2
向CH2Cl2(250ml)中的2-(R)-甲基哌嗪(6.1g,6lmmol)的溶液加入乙酸(3.6ml)、N-鄰-甲苯甲酰哌啶酮(13.3g,61mmol)和NaBH(OAc)3(15.5g,73mmol)。攪拌混合物過夜，隨后用CH2Cl2稀釋，用10％Na2CO3和水洗滌。濃縮有機(jī)相，隨后經(jīng)硅膠柱純化(CH2Cl2∶CH3OH=20∶1，用氨水飽和)。收率=50％。步驟3向NaBH(OAc)3(0.042g,0.2mmol)中加入步驟2產(chǎn)物(0.03g,0.1mmol)、乙酸(0.006nl)和4-苯氧基-苯甲醛(0.1mmol)的溶液。攪拌混合物過夜，隨后用CH2Cl2(10ml)稀釋，用10％Na2CO3洗滌，Na2SO4干燥。濃縮有機(jī)相，隨后經(jīng)硅膠柱(EtOAc)純化。通過將產(chǎn)物溶于最少量EtOAc中，隨后加無水HCl來制備鹽酸鹽。經(jīng)離心收集沉淀并用Et2O洗滌3次，隨后在真空下干燥。收率=66％。mp:217-219℃(分解)。
實施例18
向NaBH(OAc)3(0.026g,0.12mmol)加入CH2Cl2(1ml)、環(huán)己烷甲醛(0.125ml,1M)的溶液、乙酸(0.004ml)和實施例9的中間體(20)(0.03g,0.06mmol)。攪拌混合物過夜，隨后用CH2Cl2(10ml)稀釋，用10％Na2CO3洗滌，Na2SO4干燥。濃縮有機(jī)相，隨后經(jīng)硅膠柱(EtOAc)純化。按實施例17的介紹制備鹽酸鹽。收率67％。mp:208-209(分解)。
實施例19
將160mg的化合物28與45mg的H2NOH·HCl一起溶解于4ml的乙醇中，加入2ml吡啶。將混合物加熱回流5小時。真空除去溶劑，用CH2Cl2稀釋反應(yīng)液并用NaHCO3水溶液提取。用MgSO4干燥有機(jī)層，蒸發(fā)，以CH3OH/EtOAc的梯度經(jīng)柱層析純化殘留物。得到130mg的順和反式異構(gòu)體的混合物。FAB(MH+)=541。
實施例20A和20B20A
將1.1g的實施例19產(chǎn)物與2當(dāng)量的Et3N一起溶解于15ml CH2Cl2中并在N2下冷卻至-78℃。將440mg(1.1當(dāng)量)的氯二苯磷溶解2mlCH2Cl2中并在該溫度下緩慢地加到反應(yīng)液中。冷卻下攪拌反應(yīng)混合物2小時并升溫至室溫過夜。真空下除去溶劑并將粗品溶解在20ml THF中。加入100mg(過量)NaBH4，在室溫攪拌混合物16小時。真空下除去溶劑，將粗品溶解在10ml的6N HCl和30ml的CH3OH中。在室溫攪拌混合物過夜。從混合物中蒸發(fā)出CH3OH，并加入NaOH水溶液并將反應(yīng)液調(diào)至pH9。用CH2Cl2提取該溶液，用水洗滌有機(jī)層，MgSO4干燥，蒸發(fā)至粗品油狀物。以CH3OH/EtOAc梯度洗脫，經(jīng)柱層析純化該粗品，得到356mg的胺產(chǎn)物。MS(FAB):527.5(M+1),510.5。20B
將25mg的步驟20A的產(chǎn)物與90mg的三乙氧基硼氫化鈉一起溶解于2ml CH2Cl2中。加入9ml乙醛并在室溫攪拌混合物1.5小時。再加溶劑稀釋反應(yīng)液并用NaHCO3水溶液提取。用MgSO4干燥有機(jī)層，蒸發(fā)，以50％CH3OH/EtOAc經(jīng)制備的薄層層析純化。得到12mg所需的油狀產(chǎn)物。FAB(M+)=583。
實施例21
將44mg的28與2ml乙二醇和過量的對-甲苯磺酸一起溶解于20ml的干燥甲苯中。用連接的Dean-Stark水阱加熱回流反應(yīng)混合物24小時。NMR分析顯示進(jìn)行部分反應(yīng)。再加入乙二醇和酸，再加熱反應(yīng)物24小時。用NaHCO3水溶液提取混合物，蒸發(fā)，并以CH3OH/EtOAc梯度經(jīng)柱層析純化，得15mg的產(chǎn)物，仍含有少量的酮原料。MS(電子噴霧)598(M+1),302。
實施例22
將24mg的化合物30溶解于1ml的CF3CO2H中。加入過量的2-噁唑烷酮(oxazolidinone)，在室溫攪拌混合物72小時。加入過量飽和的NaHCO3溶液，用EtOAc提取混合物。用Na2SO4干燥，蒸發(fā)，以5％CH3OH/EtOAc經(jīng)柱層析純化殘留物，得到約15mg的油狀產(chǎn)物。MS(電子噴霧)625.2(M+1),302。
實施例23
步驟1
將11g的哌啶酮鹽酸鹽于100ml CH2Cl2中攪拌。劇烈攪拌下加入100ml的20％的K2CO3水溶液，隨后加入8.8ml的鄰-甲苯甲酰氯。在室溫攪拌混合物過夜。分離出有機(jī)層，用另外的溶劑洗滌水層。用Na2SO4干燥合并的CH2Cl2層，蒸發(fā)，以己烷/EtOAc梯度經(jīng)柱層析純化，得到油狀產(chǎn)物，放置固化。步驟2
將5.55g的步驟1產(chǎn)物與100ml CH2Cl2中的4.75g(1當(dāng)量)的N-(t-丁氧羰基)哌嗪化合。加入三乙酰氧基硼氫化鈉(5.4g)并在室溫攪拌反應(yīng)物72小時。加入1g三乙氧基硼氫化鈉的2ml乙酸，再攪拌混合物24小時。加入25ml的甲醇并蒸發(fā)混合物。將粗品溶解于CH2Cl2中并用水提取。用Na2SO4干燥有機(jī)層，蒸發(fā)，以EtOAc/己烷的梯度，經(jīng)柱層析純化殘留物，得到6.7g的產(chǎn)物。步驟3
將6.7g的步驟2產(chǎn)物溶解于100ml CH2Cl2中并在室溫緩慢加入20ml的CF3CO2H。攪拌反應(yīng)物24小時。加入20ml水并通過緩慢加入固體NaOH將反應(yīng)液調(diào)至pH10。分離出有機(jī)層并用另外的CH2Cl2洗滌水層。用Na2SO4干燥有機(jī)層并蒸發(fā)，得到5.1g固體產(chǎn)物，可直接使用。步驟4
與7.15g(3當(dāng)量)的1,4-(雙)-氯甲苯和2ml(1當(dāng)量)的Et3N一起將3.9g的步驟3產(chǎn)物溶解于200ml THF中。加熱回流混合物7小時并冷至室溫，加入300ml的Et2O并通過過濾除去沉淀的Et3N·HCl。分次加入Et2O(2.1當(dāng)量)中的34ml 1M HCl，并攪拌，濾出沉淀，真空干燥，得到5.6g產(chǎn)物的二鹽酸鹽，含有少量Et3N·HCl雜質(zhì)。化合物123將65mg的步驟4的產(chǎn)物(含60％Et3N·HCl的混合物)與過量的K2CO3一起溶解于2ml的干燥DMF中。在室溫攪拌混合物1小時，直到固體起始原料溶解為止。在室溫于分離燒瓶中，使過量的琥珀酰亞胺與lml干燥DMF中的NaH反應(yīng)30分鐘。從K2CO3中除去游離胺溶液的DMF并加到該陰離子中，在室溫攪拌混合物16小時。加水，并用EtOAc提取混合物兩次。用水洗滌有機(jī)層，Na2SO4干燥并蒸發(fā)。得到足夠純度的產(chǎn)物直接形成它的鹽酸鹽。MS(電子噴霧)489.1(M+1),276。化合物124以類似于化合物123中所介紹的方式，但使用吡咯烷酮代替琥珀酰亞胺及六甲基disilazide鉀(KHDMS)(在甲苯中)代替NaH，以足夠純度制備化合物124，直接形成HCl鹽。MS(電子噴霧)475(M+1),408。
實施例24
步驟1
在0℃，將0.8ml(6.35mmol)的N-甲基-鄰-甲苯胺、1.0g(5.29mmol)的4-氯甲基(苯甲酰氯)和1.4ml(7.93mmol)的(iPr)2NEt溶解于CH2Cl2(20ml)中。將溶液溫?zé)嶂潦覝兀谑覝財嚢?7小時。然后用CH2Cl2稀釋。用1M HCl(水溶液)洗滌。用CH2Cl2洗滌水層。用硫酸鈉干燥合并的CH2Cl2層，過濾并濃縮，得到所需的淺棕色油狀芐基氯(1.55g，定量)。步驟2
將步驟1的產(chǎn)物(1.45g,5.29mmol)、哌嗪-哌啶Boc化合物(1.42g,5.29mmol)和(iPr)2NEt(1.84ml,10.6mmol)溶解于CH3CN(25ml)中。加熱回流溶液2.75小時。在CH2Cl2和1N NaOH(水溶液)之間分配該溶液。用CH2Cl2提取水層。用Na2SO4干燥合并的CH2Cl2層。過濾和濃縮，得到黃褐色泡沫物(2.7g)。經(jīng)快速層析(15/1 CH2Cl2/MeOH,SiO2)純化，得到2.26g(84％)的無色泡沫物。步驟3將步驟2的BOC保護(hù)產(chǎn)物(2.26g,4.47mmol)溶解于CH2Cl2(20ml)中并冷卻至0℃。加入TFA(5ml)，并將溶液溫?zé)嶂潦覝?。在室溫，攪拌溶?0小時。濃縮溶液并用CH2Cl2/Et2O研磨殘留物，得到白色固體物。用Et2O洗滌固體物并干燥，得4.1g(99％)的胺的TFA鹽。步驟4使用實施例1中所述的類似方法，處理步驟3的產(chǎn)物，得到125。M.P.=235-240℃。C33H41N4O2(MH)的HRMS(FAB)計算值525.3230。實測值525.3239。
實施例25
步驟1在0℃，向10.0g(22.6mmol)的(61)在50ml的無水甲醇的攪拌溶液中分次加入NaBH4。在室溫，攪拌混合物30分鐘，然后用水驟停反應(yīng)。用EtOAc(4×30ml)提取水層。Na2SO4干燥合并的液層，過濾并濃縮，得到10.0g(99％)的可直接使用的醇。向攪拌的CH2Cl2(100ml)中的10.0g醇(22.5mmol)溶液中加入16ml的Et3SiH，隨后加入40ml的TFA。在室溫攪拌混合物3小時，然后用1NNaOH驟停反應(yīng)。用CH2Cl2(100ml)提取水層。用Na2SO4干燥合并的有機(jī)層，濃縮后得到6.0g(82％)的無色油狀物(62)。步驟2向(62)(5.0g,15.29mmol)在Et2O(200ml)和40ml的10％NaOH中的攪拌溶液中加入BOC2O。然后在室溫下攪拌混合物24小時。分離出液層并用水洗滌有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過濾，濃縮并層析，得到5.7g(87％)的無色油狀物(63)。步驟3向在乙酸中的(63)(5.7g,13.34mmol)的攪拌溶液中加入NaBO3·4H2O并在室溫攪拌24小時。然后用25％NaOH驟冷反應(yīng)混合物。然后用EtOAc(3×30ml)提取有機(jī)層。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層，過濾，濃縮并層析，得到2.8g(46％)的(64)。步驟4向CH2Cl2(35ml)中的(64)(1.5g,3.26mmol)的攪拌溶液中加入TFA(2ml)。在室溫攪拌混合物1小時并濃縮。用CH2Cl2稀釋殘留物并用10％NaOH洗滌。干燥(Na2SO4)提取物，過濾并濃縮，得到0.983g(84％)的(65)。步驟5向CH2Cl2(3ml)中的(65)(0.983g,2.73mmol)和叔-丁氧基羰基哌啶(0.571g,2.87mmol)的攪拌溶液中加入Ti(iOPr)4(1ml)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物24小時，向得到的溶液加入1.0M Et2AlCN(8.7ml)的甲苯溶液。在室溫攪拌反應(yīng)物2小時，用EtOAc(10ml)稀釋并用水(3ml)驟停反應(yīng)。然后經(jīng)硅藻土過濾得到的淤漿，濃縮并層析，得到1.1g(74％)的(66)。步驟6向攪拌的(66)(0.225g,0.398mmol)的CH2Cl2溶液中加入TFA(1ml)。在室溫下攪拌混合物1小時并濃縮。然后用CH2Cl2稀釋殘留物并用10％NaOH洗滌。干燥(Na2SO4)提取液，過濾并濃縮，得到不需要純化直接應(yīng)用于下一步反應(yīng)的粗品胺0.164g(89％)。
向CH2Cl2(1ml)中的粗品胺(0.053g,0.115mmol)的攪拌溶液中加入Et3N(0.100ml)，隨后加入n-PrSO2Cl(0.05ml)并在室溫下攪拌1小時。用2N NaOH驟停反應(yīng)并用CH2Cl2提取有機(jī)層。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層，過濾，濃縮并層析，得到0.025g(50％)的(67)。步驟7在室溫下，向在THF(2ml)中的(67)(0.018g,0.031mmol)的攪拌溶液中滴加在Et2O中的3M MeMgBr溶液。在室溫下攪拌反應(yīng)物2小時并用H2O驟停反應(yīng)。然后用EtOAc提取水層，干燥(Na2SO4)，過濾濃縮并層析，得到0.010g(60％)的126。LRMS計算值562；實測值(M+H+)563。
實施例26
將中間體(1)(0.029g)溶解于吡啶(0.1ml)中并加入N-羰氨基苯甲酸酐(0.044g)。在室溫攪拌反應(yīng)溶液48小時，然后用EtOAc(10ml)稀釋，水洗，用MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到固體物。通過薄層層析(硅膠為吸附劑；95∶5 EtOAc∶Et3N為洗脫劑)純化該固體物的丙酮可溶的部分，得到淺色泡沫物(0.029g)，收率65％。MP(鹽酸鹽)分解＞205℃。
實施例27
向127(0.096g)和CH2Cl2(0.32ml)的溶液中加入吡啶(0.01ml)、乙酸酐(0.02ml)和N,N-二甲基氨基吡啶(4.8mg)。攪拌得到的溶液1.5小時，加入水(0.4ml)并用CH2Cl2(3×1ml)提取混合物。用MgSO4干燥有機(jī)提取物，過濾并蒸發(fā)，得到固體殘留物，經(jīng)薄層層析純化(硅膠為吸附劑；9∶1 CH2Cl2∶CH3OH為洗脫液)，得到淺色泡沫物(0.036g)，收率37％。MP(鹽酸鹽)分解＞181℃。
實施例29
分3次，用3小時將Et3N(總計0.06ml)加入上述乙酸酯(如實施例1所述制備)的溶液中。在室溫攪拌得到的溶液3天，加入水并用CH2Cl2提取溶液。用MgSO4干燥有機(jī)提取液，過濾并蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(0.075g)，收率100％。M.P.(鹽酸鹽)分解＞130℃。
實施例29
向冷卻的(-78℃)中間體(3b)(0.41g；0.88mmol)和THF(4.2ml)的溶液中加入nBuLi(0.34ml的2.7M庚烷溶液)并攪拌得到的溶液3分鐘。用1.5分鐘以上時間滴加THF中含吡啶-3-uocarboxaldehyde的溶液(分別為2ml中的0.17ml)。在低溫攪拌溶液10分鐘，在室溫攪拌40分鐘，并傾入水中，用EtOAc提取，用鹽水洗滌并用MgSO4干燥。過濾和蒸發(fā)后，用76∶19∶5 EtOAc∶己烷∶Et3N洗脫，經(jīng)硅膠(77g)層析得到的粗品黃色油狀物。蒸發(fā)適當(dāng)?shù)牧鞣莸贸吻宓挠蜖钗?0.28g)，為甲醇非對映異構(gòu)體混合物(37)，收率64％。HRMS:MH+:C29H43N4O3計算值495.3335；實測值495.3319。步驟2使用實施例3中所介紹的類似方法，用鄰-甲苯甲酰氯處理步驟1的產(chǎn)物，得到所需的化合物130。MP(鹽酸鹽)174-177℃。
實施例30A和30B30A
步驟1-4
步驟1向冷卻的(-78℃)(24b)(17.9g)和THF(170ml)的溶液中加入CH3Li(43.2ml的1.4M己烷溶液)并攪拌得到的溶液10分鐘。加入N-BuLi(24.0ml的2.5M己烷溶液)并攪拌得到的溶液15分鐘。滴加胡椒醛的THF溶液(分別為在9.6g 30ml中)并除去冰浴。在室溫攪拌溶液15分鐘，傾入稀HCl和Et2O中，并用MgSO4干燥Et2O提取液。過濾和蒸發(fā)后，經(jīng)硅膠層析得到的粗品黃色油狀物，用1∶1己烷∶CH2Cl2然后0-20％Et2O∶CH2Cl2洗脫。合并含有所需產(chǎn)物的流份并蒸發(fā)，得到甲醇(38)的混合物(16.1g)，收率75％。步驟2向(38)(15.8g)，CH2Cl2(300ml)和Et3SiH(25ml)的溶液中加入TFA(25ml)。在室溫15分鐘后，用水，NaHCO3水溶液洗滌溶液，用MgSO4干燥并經(jīng)硅膠墊(20g)過濾，用CH2Cl2洗滌產(chǎn)物。蒸發(fā)并用己烷(200ml)研磨，過濾和干燥后得到白色固體物(39)(13.9g)，收率92％。mp:99-101℃。步驟3一次性向(39)(2.23g,6.37mmol),CH2Cl2(23ml)和碘(1.84g)的溶液中加入三氟乙酸銀(1.60g)。在室溫攪拌得到的混合物1.5小時，在5℃放置14小時，用CH2Cl2(126ml)稀釋并過濾。將得到的CH2Cl2提取液傾至硅膠(63g)柱上并用CH2Cl2洗滌產(chǎn)物。用10％Na2S2O3洗滌任何含有淺粉紅色的流份并干燥，然后與其它流份合并并蒸發(fā)，得到白色固體的(40)(2.86g)，收率94％。mp:125-127℃。步驟4將(40)(1.50g,3.14mmol)溶解于N,N-二甲基乙酰胺(10ml)中并加入CuCN(0.94g)和NaI(0.14g)。將得到的混合物進(jìn)行脫氣并在110℃加熱8小時。冷卻混合物，用CH2Cl2稀釋，過濾并用CH2Cl2洗滌得到的固體物。用1∶1 NH4OH∶H2O(3x)，水和鹽水洗滌合并的CH2Cl2提取液，MgSO4干燥，過濾，蒸發(fā)并施用于硅膠柱(55g)。用己烷(100ml)和4∶1己烷∶EtOAc洗脫后，蒸發(fā)所得到的流份，得蠟狀白色固體物(41),(1.10g)，收率94％。mp:114-116℃。步驟5和6
步驟5使用實施例10，步驟3所介紹的類似方法處理(41)，得到白色固體的胺(42)，收率70％。mp:55-58℃。步驟6向冷卻的(0℃)二醇(43)(0.88g)、CH2Cl2(29ml)和Et3N(1.21ml)的溶液中加入CH3SO2Cl(0.46ml)。在0℃，攪拌得到的溶液15分鐘和在室溫攪拌1小時。將溶液傾入CH2Cl2和冰水的混合物中，移出CH2Cl2層并用水、鹽水洗滌，用Na2SO4干燥。過濾及小心蒸發(fā)溶劑后，加入CH3CN(2.30ml)和iPr2EtN(1.20ml)和(42)(0.64g)，在80℃加熱混合物12小時。用EtOAc稀釋得到的溶液，用2N NaOH、水和鹽水洗滌，MgSO4干燥、過濾和蒸發(fā)，得到金黃色泡沫物，并上硅膠(91g)柱，用3∶1己烷∶EtOAc，然后2∶1己烷∶EtOAc洗脫。合并所需要的流份，蒸發(fā)得到金黃色泡沫物(44)(1.09)，收率87％。
HRMS:MH+:C28H29O6N4S計算值549.1808；實測值549.1803。步驟7
部分A向冷卻的(0℃)哌啶酮水合物鹽酸鹽(27.5g)CH2Cl2(350ml),K2CO3(50g)和水(250ml)的混合物中滴加鄰-甲苯甲酰氯(22ml)和CH2Cl2(25ml)溶液。加畢后，移走冷浴并攪拌混合物24小時，分離出CH2Cl2層，用水洗滌，MgSO4干燥，過濾和蒸發(fā)，得到澄清的油狀物。經(jīng)硅膠(320g)層析該油狀物，用4∶1己烷∶EtOAc洗脫，合并所需的流份并蒸發(fā)。放置結(jié)晶得到的澄清油狀物，得白色固體物(46)(35.7％)，收率92％。
部分B向(44)(0.2lg)和DMF(0.75ml)的溶液中加入PhsH(0.047ml)和K2CO3(0.15g)并攪拌得到的混合物28小時。用EtOAc稀釋反應(yīng)混合物并加入水和2N NaOH(1.0ml)。用EtOAc(3次)提取水層，合并EtOAc提取液并用鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾和蒸發(fā)，得到0.55g的油狀物(45)，將其溶解于CH2Cl2(0.55ml)和乙酸(9μl)中。向該溶液加入(46)(0.04g)和NaB(OAc)3H(0.048g)。攪拌6小時后，在CH2Cl2和2N NaOH之間分配反應(yīng)溶液。用水和鹽水洗滌CH2Cl2層、MgSO4干燥，過濾，蒸發(fā)并施用于薄層硅膠板。用2∶1 CH2Cl2∶丙酮洗脫后，收集泡沫狀的所需產(chǎn)物131(0.72g)，收率85％。M.P.(鹽酸鹽)165-167℃。30B
向131(0.029g)和THF(0.5ml)的溶液中加入nBu4NOH(0.085ml)和30％H2O2(0.017ml)。在3小時和48小時后，按上述的介紹加入更多的nBu4NOH和H2O2，然后在最后一次加料后，攪拌反應(yīng)物3小時以上。用EtOAc稀釋反應(yīng)液，除去水層，用EtOAc提取3次，合并EtOAc提取液，用水和鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾和蒸發(fā)，得到白色結(jié)晶固體物，經(jīng)層析進(jìn)一步純化(硅膠100mg；95∶5 EtOAc∶Et3N為洗脫劑)。收集所需的產(chǎn)物并蒸發(fā)得到的白色固體物132。(10.5mg)，收率35％。mp(鹽酸鹽)分解＞164℃。
實施例31
部分A
用2小時分4次向哌嗪(13g),N-BOC 4-哌啶酮(10g),CH2Cl2(200ml)和乙酸(2.0ml)的溶液中加入NaB(OAc)3H(20g)。攪拌混合物22小時，用CH2Cl2稀釋并緩慢加到1N NaOH(250ml)中。用CH2Cl2提取水層3次，合并CH2Cl2提取液，用水洗滌，MgSO4干燥。過濾溶液，濃縮并經(jīng)硅膠層析純化[洗脫液8∶1 CH2Cl2∶CH3OH，然后用10∶5∶1CH2Cl2∶CH3OH∶NH3(水溶液)]。蒸發(fā)溶劑后，收集白色固體物(47)(7.18g)，收率53％。
用40分鐘分8次向?qū)?溴苯甲醛(5.25g),CH2Cl2(100ml)和(47)(8.72g)的溶液中加入NaB(OAc)3H(8.05g)。攪拌19小時后，加入CH2Cl2(20ml)和NaB(OAc)3H(1.05g)，攪拌反應(yīng)混合物2小時，用CH2Cl2稀釋，傾入2N NaOH中并用CH2Cl2提取水層。用水和鹽水洗滌CH2Cl2提取液，MgSO4干燥，過濾，蒸發(fā)并經(jīng)硅膠(250g)層析，用76∶19∶5己烷∶EtOAc∶Et3N洗脫。合并所需的流份并蒸發(fā)，得到白色固體的(48)(8.48g)，收率69％。mp:87-90℃。部分B
向間-甲苯磺酰氯(13.2g)和丙酮(107ml)的溶液中緩慢滴加KF(11g)和水(87ml)的溶液。用EtOAc稀釋得到的溶液和移出有機(jī)層。用EtOAc提取水層，與初始的EtOAc提取液合并，MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到(49)(11.7g)，收率97％，不需進(jìn)一步純化可直接使用。
使用類似實施例29的方法制備(50)，用(49)取代3-吡啶甲醛。使用實施例1(或?qū)嵤├?)所介紹的方法，將(50)轉(zhuǎn)化成133。mp(鹽酸鹽)分解＞227℃。
實施例32
部分A
混合氨基酸(0.21g),DME(15ml)和1M NaOH(3ml)并加入氯甲酸烯丙酯。攪拌溶液15小時，冷卻至0℃，用1M HCl酸化和用EtOAc提取。用鹽水洗滌EtOAc提取液和用Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到無色泡沫物的(51)，可直接用于下一步驟。
在0℃，混合氰脲酰氟(0.41g),(51)(0.50g)，吡啶(0.15ml)和CH2Cl2(15ml)。在0℃，攪拌混合物3.75小時，用CH2Cl2稀釋并傾入冰水中。用CH2Cl2提取水層并用MgSO4干燥合并的CH2Cl2提取液，過濾和濃縮，得到稠的油狀物的粗品(52)(0.50g)可直接用于下一步驟中。
混合物酰氟(52)(0.31g)和CH2Cl2(10ml)并加入NaBH4(72mg)，用10分鐘滴加CH3OH(0.9ml)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物20分鐘，傾入含有1M HCl和EtOAc的分液漏斗中并用EtOAc提取水層。合并有機(jī)提取液，用鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾和濃縮，得到油狀的(53)(0.30g)，收率51％。
將乙酸鈀(4mg)、3,3’,3”-次膦基三(苯磺酸)鈉鹽(20mg),Et2NH(1.3g)和(53)(0.28g)與CH3CN(3ml)和水(3ml)混合并攪拌3小時。與甲苯(6ml)共蒸發(fā)反應(yīng)混合物得(54)，可直接用于下一部分中。部分B
將(55)(0.50g)[使用對-氟苯甲醛，應(yīng)用實施例1的方法制備]溶解于CH3OH(20ml)和CH2Cl2(10ml)中，冷卻至0℃和加入NaBH4(80mg)。在室溫攪拌2.5小時后，在EtOAc和1M HCl之間分配該溶液。移出EtOAc層，用EtOAc提取水層，合并有機(jī)提取液，用鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾和蒸發(fā)，得到無色油狀的(56)(0.52g)。在室溫攪拌CH2Cl2、SOCl2(0.13ml)和DMF(0.033ml)的溶液4小時并濃縮。與甲苯(2×20ml)共蒸發(fā)殘留物得黃色固體物(57)(0.20g)，并將其溶解于CH3CN(10ml)和二乙醇胺(0.24g)中。加熱回流2小時后，在水和EtOAc之間分配反應(yīng)溶液，移出EtOAc層，用EtOAc提取水層，合并有機(jī)提取液，用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，過濾和蒸發(fā)，得到無色油狀產(chǎn)物(58)(0.26g)。將該產(chǎn)物溶解在1,2-二氯乙烷(5ml)中，加入SOCl2(0.16ml)并加熱回流得到的混合物3小時。真空下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到稠密膠樣產(chǎn)物(59)，貯存在5℃固化。將該物質(zhì)(0.17g)與(54)(0.10g),NaI(0.20g),CH3CN(10ml)和二異丙基乙基胺(0.45ml)混合并加熱回流得到的混合物3.5小時。在水和EtOAc之間分配反應(yīng)液，移出EtOAc層，用EtOAc提取水層，合并有機(jī)提取液，用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，過濾和蒸發(fā)，得棕色油狀物。經(jīng)硅膠純化，用10∶1 CH2Cl2∶CH3OH洗脫，得到油狀的(60)(77mg)。HRMS:MH+:C29H40N3O7S計算值574.2587；實測值574.2580。
將(60)(77mg)溶解在CH3OH(5ml)中的1M HCl中，攪拌24小時，濃縮，將殘留物溶解于CH3OH中并用Et2O研磨，得到白色固體物(59mg)。應(yīng)用實施例1的方法，將(60)轉(zhuǎn)化成134。HRMS(FAB)計算值C32H38N3O6S(MH+):592.2481；實測值592.2467；mp:187-197℃。
實施例33
步驟1向冷卻的(-78℃)4-氨基芐醇(0.50g)、二異丙基乙基胺(1.41ml)和CH2Cl2(40ml)的混合物中加入TMSCl(0.52ml)。將得到的溶液于-78℃攪拌15分鐘，于0℃攪拌1小時。將生成的溶液冷卻至-78℃，加入對-甲氧基苯磺酰氯(0.84g)，移走冷浴，在室溫攪拌反應(yīng)混合物15小時。用CH2Cl2稀釋反應(yīng)液并加進(jìn)水。用CH2Cl2提取水層，合并有機(jī)提取液，MgSO4干燥，過濾和蒸發(fā)，得到黃色油狀物，并將其溶解在CH3OH(20ml)中并加入K2CO3(1.5g)。攪拌得到的混合物1小時，通過硅藻土墊過濾，濃縮，溶解在EtOAc中和用水洗滌。用EtOAc提取水層，用MgSO4干燥合并的有機(jī)提取液，過濾和蒸發(fā)，得到黃色油狀物(0.78g)，不需進(jìn)一步純化可用于下一步驟中。步驟2將(68)(0.47g)和MnO2(3.0g)與CH2Cl2(20ml)混合并攪拌20小時。通過硅藻土過濾溶液并濃縮得到稠的油狀物(69)(0.30g)，可直接用于下一步驟中。步驟3使用與實施例31中部分A的第二部分類似的方法，以中間體(69)和(70)為反應(yīng)物。粗品(71)(0.30g)直接用于下一步驟中。步驟4使用實施例32部分A的最后部分的類似方法處理(71)(148mg)，得到相應(yīng)棕色粗品胺，可直接用于下一步驟中。步驟4使用實施例1的方法，處理(71)，得到135。mp(分解)190-200℃。
實施例34
步驟1向4,4’-雙吡啶鹽酸鹽(2.53g,10.5mmol)在1∶1 Et2O/10％NaOH水溶液(26ml)中的攪拌的0℃溶液中用30分鐘并在劇烈攪拌下加入2.5M二-叔-丁基二碳酸酯在Et2O中的溶液。室溫攪拌2小時后，將混合物傾入分液漏斗中，用Et2O提取，用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。不需進(jìn)一步純化使用得到的產(chǎn)物(3.00g)。
將粗品雙吡啶(2.74g,7.44mmol)溶解在CH2Cl2(50ml)中并加入TFA(0.57ml,7.44mmol)到該溶液中。在室溫攪拌反應(yīng)物并由TLC監(jiān)測。加入兩當(dāng)量以上的TFA后，反應(yīng)混合物約為1∶2∶1的原料，(72)和4,4’-雙哌啶的混合物。用CH2Cl2稀釋混合物，用1N NaOH洗滌，Na2SO4干燥，過濾和濃縮。經(jīng)快速層析純化(10/90 CH3OH/CH2Cl2，然后用5/10/85 NH4OH/CH3OH/CH2Cl2)得到1.00g的(72)(收率53％)。步驟2向CH2Cl2(7.4ml)中的(73)(480mg,1.85mmol)的溶液中加入(72)(520mg,2.04mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(590mg,2.78mmol)。在室溫N2下，攪拌反應(yīng)物12小時。用NaHCO3(飽和液)驟冷混合物，用EtOAc提取，Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮，得到(74)(880mg，收率94％)。步驟3向CH2Cl2(8.6ml)中的(74)(880mg,1.72mmol)的溶液中加入CH2Cl2(4.7ml)中的CH3SO3H(0.17ml,2.58mmol)。攪拌下冷至0℃后，滴加CH2Cl2中的60％MCPBA(1.04g,3.61mmol)。在室溫N2下，攪拌反應(yīng)物1小時。用Na2S2O3(飽和)、1N NaOH和H2O洗滌混合物，Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到0.93g的砜(收率100％)。
將砜(0.93g,1.71mmol)溶解于CH2Cl2(11.4ml)中并加入TFA(2.6ml,34.2mmol)。在室溫N2下攪拌反應(yīng)混合物2小時。用CH2Cl2稀釋混合物，用1N NaOH洗滌，過濾并減壓濃縮，得到游離胺(0.45g，收率59％)。
向CH2Cl2(0.53ml)中的胺(23.6mg,53.3μmol)的溶液加入鄰-甲苯甲酰氯(8.3μl,64μmol)和Et3N(11μl,80μmol)。在室溫N2下，攪拌反應(yīng)物2小時。在減壓下濃縮混合物并經(jīng)PTLC(10/90 CH3OH/CH2Cl2)純化，在1N HCl/Et2O存在下濃縮，得到136(15.8mg，三步總收率50％以上)。LRMS計算值560；實測值(M+H):561。
實施例35
在0℃N2下，將NaH(0.59g,14.6mmol,60％純度)懸浮在DMF(10ml)中，隨后加入2-丙硫醇(1ml,11.2mmol)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物5分鐘。滴加DMF(10ml)中的(75)(2.94g,7.5mmol)。攪拌下加熱反應(yīng)混合物2小時。然后用1N NaOH(40ml)稀釋反應(yīng)混合物并用Et2O(3×80ml)提取。用NaHCO3干燥有機(jī)提取物。除去溶劑，用Et2O重結(jié)晶，得到(76)(1.08g,32％)。
將(76)(1.08g,2.4mmol)溶解在CH3OH(10ml)中，隨后加入NaBH4(0.14g,3.6mmol)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物1小時。用CH2Cl2(200ml)稀釋反應(yīng)混合物，隨后用1N NaOH(50ml)洗滌。用NaHCO3干燥有機(jī)溶液并濃縮得到固體殘留物，然后將其溶解在CH2Cl2(10ml)中。向該溶液加入Et3SiH(1.5ml)，隨后加入TFA(3ml)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物1小時。用CH2Cl2(100ml)稀釋反應(yīng)混合物，用1N NaOH(100ml)洗滌并用NaHCO3干燥。除去溶劑得到純(77)(0.7g,88％)。
將(77)(49mg,0.15mmol)溶解在CH2Cl2(3ml)和Et3N(0.3ml)的溶液中，隨后加入1-萘甲酰氯(0.5ml)。攪拌反應(yīng)混合物30分鐘并經(jīng)PTLC分離，得到137(53mg,74％)的游離堿。HRMS計算值(M+1):487.2783；實測值487.2798。
實施例36
將(78)(1g,3.6mmol)溶解在CH2Cl2(20ml)和Et3N(1.5ml)的溶液中，隨后加入(CF3CO)2O(0.82ml,5.7mmol)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物過夜。用CH2Cl2(150ml)稀釋反應(yīng)混合物，用1N HCl(50ml)洗滌，隨后用1N NaOH(50ml)洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑得到粗品(79)。
將(79)溶解在CH3OH(25ml)中，隨后加入NaBH4(0.2g,5.3mmol)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物1小時。用CH2Cl2(100ml)稀釋反應(yīng)混合物，隨后用1N NaOH(50ml)洗滌。用MgSO4干燥有機(jī)溶液并濃縮得到殘留物，將其溶解在CH2Cl2(30ml)中。向該溶液加入Et3SiH(3ml)，隨后加入TFA(10ml)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物4小時。用CH2Cl2(200ml)稀釋反應(yīng)混合物，用1N NaOH(100ml)洗滌，和用MgSO4干燥。除去溶劑得到粗品(80)。
將(80)溶解在CH2Cl2(5ml)中，隨后在0℃加入1M BBr3/CH2Cl2(8.6ml)。在0℃，攪拌反應(yīng)混合物1小時，用CH2Cl2(100ml)稀釋，用10％NaHCO3洗滌和用MgSO4干燥。除去溶劑，隨后經(jīng)柱層析(20％EtOAc/己烷)，得到(81)(0.725g，從(78)計收率58％)。
在N2下，將(81)(0.35g,1.2mmol)、2-丙醇(0.084g,1.4mmol)和PPh3(0.38g,1.4mmol)溶解在THF(5ml)中。冷卻反應(yīng)混合物至0℃，隨后加入DEAD(0.27ml,1.mmol)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物過夜并PTLC分離，不需處理可得到(82)(0.3g,75％)。
將(82)(0.3g,0.9mmol)溶解在CH3OH/水(5∶1)(10ml)的溶液中，隨后加入K2CO3(0.5g,3.6mmol)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物1小時。經(jīng)一般水處理，得到(83)(0.203g,96％)。
按實施例35中介紹的方法，將(83)轉(zhuǎn)化成138。HRMS計算值(M+1):471.3012；實測值471.3009。
實施例37
將(84)(0.85g,3.4mmol)和N-BOC-4-哌啶酮(1g,5.0mmol)溶解到1,2-二氯乙烷(50ml)中，隨后加入Na(OAc)3BH(2.2g,10.1mmol)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物2天。用CH2Cl2(200ml)稀釋反應(yīng)混合物，用1NNaOH(100ml)洗滌和用NaHCO3干燥。柱層析(5％CH3OH/CH2Cl2)得到(85)(1.27g；87％)。
在N2下，將(85)(0.2g,0.46mmol)溶解在THF(8ml)中并冷卻至-78℃，隨后加入2.5M n-BuLi(0.3ml,0.73mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物45分鐘，隨后加入(86)(0.06g,0.83mmol)的THF(1ml)溶液。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，用CH2Cl2(100ml)稀釋，用水(50ml)洗滌和用NaHCO3干燥。濃縮有機(jī)溶液并柱層析(5％CH3OH/CH2Cl2)，得到(87)(0.135g,69％)。
向(87)(0.135g,0.32mmol)和Et3SiH(1ml)的混合物中加入20％TFA/CH2Cl2(5ml)。在室溫攪拌反應(yīng)混合物1小時并濃縮得到(88)(0.09g,91％)。
以實施例35中所介紹的類似方法處理(88)，得到139。HRMS計算值(M+1):467.3062；實測值467.3066。
實施例38A和38B
將1.0g的叔-丁基硫醇緩慢加入500mg的NaH(60％在礦物油中)在60ml DMF的懸浮液中。在室溫攪拌混合物30分鐘。向該混合物滴加3.1g(10mmol)的酮(89)。在70℃，加熱混合物過夜。冷卻至室溫后，用100ml的水驟冷混合物。用3×100ml的CH2Cl2提取水相。用MgSO4干燥合并的有機(jī)相，過濾并濃縮。使用5％EtOAc-己烷，經(jīng)硅膠柱層析純化粗品(90)得到2.65g(69％)。
向2.65g的(90)在40ml CH2Cl2中的溶液加入10ml TFA。在室溫攪拌混合物2小時，然而濃縮。將殘留物溶解在100ml的CH2Cl2中，用10％NaOH洗滌，用Na2SO4干燥有機(jī)層，過濾并濃縮，得到粗品(91)(1.8g,92％)。
在室溫，將(91)(1.8g)、N-Boc-4-哌啶酮(1.5g,1.1當(dāng)量)、NaB(OAc)3H(2.8g,2當(dāng)量)和在40ml 1,2-二氯-乙烷中的0.5ml HOAc的混合物攪拌過夜。用10％NaOH驟冷混合物，用CH2Cl2提取。用Na2SO4干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。使用20％EtOH/EtOAc經(jīng)硅膠柱層析純化粗品(92)得到2.7g(90.3％)。
向(92)(2.5g)在100ml CH3OH中的溶液加入500mg(2當(dāng)量)的NaBH4。在室溫攪拌混合物1小時，然后濃縮至干。將殘留物溶解在70ml的10％NaOH中并用3×70ml CH2Cl2提取。用MgSO4干燥合并的有機(jī)相，過濾和濃縮(1.8g粗品)。將該粗品溶解在40ml CH2Cl2和1ml Et3SiH中。向該混合物加入20ml的TFA并在室溫攪拌1小時。濃縮混合物至干并用冷的己烷洗滌殘留物。將殘留物溶解在100mlCH2Cl2中并用10％NaOH洗滌。用MgSO4干燥合并的有機(jī)相，過濾并濃縮，得到粗品(93)(810mg,43％)。
將(93)和1.3ml(4當(dāng)量)的Et3N溶解在40ml 1,2-二氯乙烷中，使用該溶液與不同的酰氯反應(yīng)進(jìn)行平行合成。該偶合反應(yīng)的一般收率是80％。通過加入HCl·OEt2到游離堿中制備HCl鹽140:LRMS計算值500；實測值501；141:LRMS計算值478；實測值479。
實施例39
在150℃，將(89)(7.9g,25.6mmol)、芝麻酚(1.1g,1當(dāng)量)和在40ml的二甲基乙酰胺中的K2CO3(1.5g)的混合物加熱過夜。將混合物冷卻至室溫，然后用200ml水驟冷。用3×150ml的CH2Cl2提取水層，用MgSO4干燥合并的有機(jī)相，過濾和濃縮。使用20％EtOAc-己烷，經(jīng)柱層析純化粗品(94)(2.8g,26％)。
向(94)(2.8g)溶解在50ml CH2Cl2的溶液中加入5ml TFA。在室溫攪拌混合物1小時，然后濃縮至干。將殘留物溶解在150ml的CH2Cl2中，用100ml 10％NaOH洗滌。用3×100ml CH2Cl2提取水層。用MgSO4干燥合并的有機(jī)相，過濾并濃縮，得到固體的粗品(95)(1.7g,79％)。
以實施例38中所介紹的類似方法，用N-BOC-4-哌啶酮、NaB(OAc)3H和乙酸(1.3g,4當(dāng)量)處理粗品(95)(1.7g,5.2mmol)，得到粗品(96)(2.3g,87％)。
移去BOC-基，得到粗品(97)(1.7g,93％)，與按實施例14，步驟8中所介紹的方法使之與2-甲苯甲酰氯反應(yīng)，隨后使用20％EtOH-EtOAc經(jīng)硅膠TLC純化得到142(197mg,90％)。通過向游離堿加入HCl·Et2O來制備鹽酸鹽。LRMS計算值526；實測值527。
實施例40A和40B
在-78℃，向500mg的(98)在10ml THF中的攪拌溶液加入0.6ml的BuLi(2M在己烷中)。在該溫度下攪拌混合物15分鐘，然后加入179mg異氰酸酯在15ml THF中的溶液。在-78℃攪拌混合物1小時。用水驟冷混合物，用EtOAc提取。干燥有機(jī)相(Na2SO4)，過濾并濃縮。使用25％EtOA-EtOAc，經(jīng)硅膠制備TLC純化粗品(99)(385mg)。
將41mg NaH(60％在礦物油中)加到50ml THF中的328mg(99)的攪拌溶液中，隨后加入85mg CH3I。在室溫攪拌混合物1小時，然后使用25％EtOH-EtOAc經(jīng)硅膠制備的TLC純化，得到141mg的143。LRMS計算值593；實測值594。
向20ml CH2Cl2中的92mg的(99)中加入5ml的TFA。在室溫攪拌溶液1小時，用10％NaOH驟停反應(yīng)，用CH2Cl2提取。干燥(K2CO3)有機(jī)層，過濾和濃縮(66mg粗品)。將該粗品溶解于20ml CH2Cl2中，加入0.25ml Et3N，隨后加入0.25ml(CH2Cl2中1M)的2,3-二甲苯甲酰氯。在室溫攪拌混合物1小時并使用25％EtOH-EtOAc，經(jīng)制備TLC純化，得到81mg 144。LRMS計算值611；實測值612。
實施例41
向83(255mg)在50ml CH3OH中的攪拌溶液加入186mg的NaBH4，在室溫攪拌混合物30分鐘然后用水驟冷。用EtOAc提取混合物并用Na2SO4干燥有機(jī)層，過濾并濃縮，得到黃色油狀物(286mg)。將該粗品溶解在10ml CH2Cl2和2ml Et3SiH中。向該混合物加入2mlTFA并在室溫攪拌混合物5小時。用3NNaOH中和混合物，用Na2SO4干燥有機(jī)層，過濾并濃縮。使用25％EtOH-EtOAc經(jīng)硅膠制備TLC純化粗品(20mg,10％)。LRMS計算值510；實測值511。
實施例42
在(100)在10ml的DMSO中的攪拌溶液加入10ml的Ac2O，在室溫攪拌混合物2小時，用水驟冷并用CH2Cl2提取。干燥(Na2SO4)有機(jī)相，過濾并濃縮。使用25％EtOH-EtOAc，經(jīng)硅膠制備TLC純化粗品(101)(110mg)。將(101)溶解在40ml CH2Cl2中并加入5ml的TFA。在室溫攪拌混合物30分鐘，濃縮至干。將殘留物溶解在100ml CH2Cl2中并用10％NaOH洗滌。干燥(Na2SO4)有機(jī)相，過濾并濃縮，得到粗品(102)(108mg)。
向28mg的(102)和在3ml CH2Cl2中的0.1ml Et3N的攪拌溶液中加入0.25ml的2,3-二甲基苯甲酰氯(1.0M CH2Cl2溶液)。在室溫攪拌混合物1.5小時。使用25％EtOH-EtOAc，經(jīng)硅膠制備TLC純化粗品，得到146(25mg)。LRMS計算值596；實測值597。
實施例43
步驟1
在130℃,N2下，將在無水DMF(100ml)中的間-甲苯硫酚(5.0g)、1-溴-4-碘代苯(10.5g)、CuI(7.7g)和K2CO3(20.0g)加熱過夜。用EtOAc和10％NH4OH/NH4Cl稀釋混合物并暴露于空氣中攪拌2小時。分離出液層，用緩沖溶液洗滌有機(jī)相兩次，隨后水洗3次。用硫酸鈉干燥有機(jī)物，過濾并濃縮成深棕色油狀物。經(jīng)快速層析(硅膠)粗品用己烷洗脫，得到淺黃色油狀物，放置真空中固化[10.9g的(103)]。步驟2
向(103)(2.0g)在無水THF(50ml)的冷卻(-78℃)溶液中緩慢地加入n-BuLi(3.2ml,7.92mmol)并在-78℃攪拌混合物15分鐘。一次性加入三氟乙酸乙酸(1.35g，純品)并在-78℃攪拌該混合物至室溫3小時以上。將混合物傾入水中，真空除去THF用EtOAc提取含水殘留物。用鹽水洗滌有機(jī)相，用無水Na2SO4干燥并濃縮成1.97g的黃色油狀物，2(104)。步驟3
分次向粗品(104)(1.9g)和叔-丁基-1-哌嗪-羧酸酯(3.6g)在干燥二氯乙烷(20ml)的溶液中加入氯化鈦(Ⅳ)(6.4ml,6.4mmol)。在室溫攪拌2天。冷卻反應(yīng)液至0℃并加入CH3OH(2ml)中的NaBH3CN(1.2g)。在室溫攪拌混合物過夜，然后通過硅藻土墊過濾。分離各層并用水和鹽水洗滌有機(jī)相，然后用Na2SO4干燥，過濾并濃縮至淺紅色粘稠油狀物。將粗品經(jīng)柱層析純化，用己烷(純品)至10％EtOAc/己烷洗脫得到1.7g的粘稠淺黃色油狀物，(105)。步驟4
向(105)(1.72g)在CH2Cl2(25ml)的溶液中加入TFA(20ml)。攪拌反應(yīng)混合物1小時，冷卻至0℃并用NaHCO3中和。用NaCl晶體飽和水相并用CH2Cl2提取。用Na2SO4干燥有機(jī)層，過濾并濃縮成1.32g粘稠淺黃色油狀物(106)。步驟5
用NaBH(OAc)3(1.1g)處理(106)(1.32g)和1-叔-丁氧基羰基-4-哌啶酮(858mg)在二氯乙烷(15ml)中的溶液，隨后用HOAc(0.42ml,7.4mmol)處理。在室溫N2下攪拌混合物4天。用EtOAc稀釋反應(yīng)物，用1N NaOH(2次)、水和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)物，過濾并濃縮。經(jīng)柱層析純化粗品，用25％EtOAc/己烷洗脫，得到1.1g的粘性澄清油狀物(107)。
步驟6
用TFA(10ml)處理(107)(1.0g)在無水CH2Cl2(10ml)中的溶液并在室溫、N2下攪拌1小時。然后冷卻混合物至0℃，用飽和NaHCO3中和并用CH2Cl2提取。用Na2SO4干燥有機(jī)物，過濾并濃縮成949mg的淺黃色泡沫物(108)。步驟7
向(108)(100g)在含有Et3N(38μl,0.27mmol)的無水CH2Cl2(1.0ml)的溶液中加入1-萘甲酰氯(4lμl,0.27mmol)。在室溫攪拌該溶液過夜。直接用制備TLC板(1×2000微米)純化粗品，用5％Et3N/EtOAc洗脫，得到86.4mg的(109)。步驟8向(109)(63.3mg)在無水CH2Cl2(4.0ml)的溶液中加入0.5MCH3SO2H的CH2Cl2溶液(1.2ml,0.6mmol)。攪拌0.5小時后，加入30％H2O2(31μl,0.6mmol)并在室溫攪拌過夜。用CH2Cl2稀釋混合物，用飽和NaHCO3中和。分離各層，Na2SO4干燥，并用制備TLC板(2000微米)層析，以5％Et3N/EtOAc洗脫，分離得19.4mg的147。HRMS計算值636.2508；實測值636.2509。
實施例44
在-15℃，向(110)(9.3g,53.2mmol)和NH4NO3(4.4g,55.8mmol)的攪拌溶液中加入三氟乙酸酐(40ml)。在室溫真空下蒸發(fā)溶劑。然后用水稀釋得到的油狀物并用CH2Cl2(2×50ml)提取化合物。用稀NaHCO3和鹽水依次洗滌合并的有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，濃縮并層析得到無色油狀物(111)(3.8g,43％)。
向(111)(3.8g,12.0mmol)在CH3OH∶H2O(5∶1)100ml的攪拌溶液中加入K2CO3(3.3g,24.0mmol)并在室溫攪拌3小時。濃縮反應(yīng)混合物并傾入2N NaOH中，用CH2Cl2(2×50ml)提取。干燥(Na2SO4)合并的液層，過濾，濃縮成(112)(1.79g,70％)，為無色油狀物。
用N-BOC-4-哌啶酮處理(112)，然后按實施例38所述進(jìn)行提取，得到無色油狀物(113)(0.700g,20％)。
用TFA除去(113)上的BOC基團(tuán)，得到胺(114)，用實施例14，步驟8中所述的1-萘甲酰氯與(114)反應(yīng)，得到無色油狀物(115)(0.448g,73％)。
向(115)(0.170g,0.345mmol)在CH3OH(5ml)中的溶液加入SnCl2(0.262g,1.38mmol)和濃HCl(1ml)并加熱反應(yīng)混合物至回流12小時。然后將反應(yīng)混合物冷至室溫并傾入10％NaOH中并用CH2Cl2(2×10ml)提取。干燥(Na2SO4)提取物，過濾并濃縮，得到(116)(0.150g,100％)。
向(116)(0.02g,0.047mmol)在CH2Cl2(1ml)的溶液中加入Et3N(0.013ml,0.094mmol)，隨后加入異丁酰氯(0.010ml,0.07mmol)并在室溫攪拌混合物2小時。然后將反應(yīng)混合物傾入飽和的NaHCO3水溶液中并用CH2Cl2(2×5ml)提取。干燥(Na2SO4)提取液，過濾，濃縮并層析，得到148(0.014g,65％)。LRMS計算值497；實測值(M+H+):498。
實施例45
在0℃，向(1)(20.0mg,0.042mmol)在無水THF(0.4ml)的溶液中依次加入正-丁基氨磺酰氯(117)(文獻(xiàn)制備)(14.4mg,0.084mmol)和Et3N(11.8μl,0.084mmol)并在室溫攪拌得到的混合物14小時。蒸發(fā)溶劑后，用飽和NaHCO3水溶液(10ml)處理殘留物，用CH2Cl2(3×5ml)提取，Na2SO4干燥并蒸發(fā)。用制備的硅膠層析純化粗品(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH/NH396∶4∶1)，得到油狀物149(17.3mg,66％):MH+=621(鹽酸鹽)。
實施例46
用30分鐘在劇烈攪拌下向在1∶1的Et2O/10％NaOH水溶液(500ml)中的(118)(50.0g,205mmol)的0℃溶液加入2.5M的二-叔-丁基二碳酸酯的Et2O溶液(100ml,246mmol)。室溫攪拌2小時后，用Et2O提取混合物，用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。不需進(jìn)一步純化使用得到的產(chǎn)物(73.9g)。
將3,4-亞甲基二氧苯硫酚(19.1g,124mmol)滴加到攪拌的NaH(5.46g,60％分散相，136mmol)在DMF(75ml)的0℃懸浮液中。在0℃攪拌30分鐘后，加入在DMF(75ml)中的(118)(31.8g,103mmol)并溫?zé)崛芤褐潦覝剡^夜。用水驟停反應(yīng)并用EtOAc提取。用鹽水洗滌有機(jī)液，MgSO4干燥，過濾并真空濃縮。從EtOAc/己烷重結(jié)晶粗品，首次兩批收得15.8g純硫化物(收率35％)。
用TFA處理硫化物，得到游離胺，然后與實施例38中所述的N-BOC-4-哌啶酮反應(yīng)，得到(119)(8.20g，收率69％)。
除去BOC-基團(tuán)，以實施例14，步驟8中所介紹的類似方法，將得到的胺與2-甲苯甲酰氯反應(yīng)。減壓下濃縮混合物，得到芳酰胺(0.65g,收率100％)。
在N2下，將在THF(0.70ml)中的芳酰胺(0.21g,0.39mmol)溶液冷至0℃。以每份1ml加入在THF中Normant試劑(約0.5M)的溶液，直至TLC(10/90 CH3OH/CH2Cl2)檢測反應(yīng)完成為止。用NH4Cl(飽和)驟停反應(yīng)，用CH2Cl2稀釋并加入1N NaOH。用CH2Cl2提取水層，用K2CO3干燥合并的有機(jī)物，過濾，濃縮得到150(0.17g，收率71％)。LRMS計算值602；實測值(M+H):603。
實施例47
步驟1在N2下，將3-羥基-4-碘代苯甲酸乙酯(2.92g),3,4-亞甲基二氧基苯亞磺酸鈉(3.2g)，碘化銅(Ⅰ)(2.8g)和DMF(20ml)加熱20小時，加入到20％NaI水溶液(200ml)中，用EtOAc提取，干燥并蒸發(fā)。經(jīng)硅膠快速層析殘留物，用己烷-EtOAc洗脫，和蒸發(fā)純流份，得到固體的產(chǎn)物(120)(0.81g),mp:133-135℃。步驟2將在THF(5ml)中的(120)(0.40g)加入LiAlH4(0.08g)和THF(10ml)的攪拌冰冷的混合物中。0.5小時后，用H2O然后用1N HCl處理混合物，用EtOAc提取，MgSO4干燥并蒸發(fā)得到(121)，可用于下一步驟中。步驟3攪拌冰浴的CH2Cl2(20ml)中的(121)和Et3N(1.0ml)并加入CH3SO2Cl(0.21ml)。0.5小時后，用1N HCl，然后用NaHCO3溶液洗滌混合物，干燥并蒸發(fā)。在室溫，用二異丙基乙胺(0.3ml)和DMF(3ml)中的哌嗪衍生物(0.5g)攪拌殘留物20小時，在水-EtOAc中處理，干燥，蒸發(fā)并經(jīng)快速硅膠層析，用CH2Cl2中的1-3％CH3OH洗脫。蒸發(fā)純流份得到白色泡沫狀產(chǎn)物(122)(0.60g)。質(zhì)譜MH+=638。步驟4在CH2Cl2(2ml)和95％TFA(5ml)中，于室溫攪拌(122)(0.43g)45分鐘，蒸發(fā)，在EtOAc-NaHCO3水溶液中處理，干燥并蒸發(fā)得到白色泡沫狀(123)(0.27g)。質(zhì)譜MH+538。步驟5在室溫，于CH2Cl2(5ml)和飽和的NaHCO3(5ml)中攪拌(123)(0.07g)和鄰-甲苯甲酰氯(0.06g)。用CH2Cl2提取混合物并蒸發(fā)有機(jī)物。在95％CH3OH(4ml)中的5％NaOH溶液中攪拌殘留物0.5小時，用H2O和CH2Cl2稀釋和用小部分固體CO2攪拌處理，直至水相pH為7-8為止。干燥有機(jī)相并蒸發(fā)，將殘留物溶解在CH2Cl2(2ml)中并加到含有4M HCl-二噁烷(0.4ml)的Et2O(15ml)中。離心沉淀，用Et2O洗滌固體物兩次，在室溫下于N2中干燥，得到白色粉末狀的485鹽酸鹽(0.051g)。質(zhì)譜MH+=607。
實施例48
步驟1使3,4-亞甲基二氧溴代苯(20g)和在THF(60ml)中的Mg(3g)反應(yīng)制備的Grignard試劑在冰中冷卻，緩慢加入THF(60ml)中的3-芐氧苯甲醛。15分鐘后，將混合物加入冰和HCl(2N,75ml)的攪拌的混合物中，用Et2O提取，用NaHCO3溶液洗滌，干燥并蒸發(fā)。通過攪拌提取殘留物，隨后用己烷傾析(2×100ml)并在高真空中干燥殘留物成棕色油狀物。
在室溫下在EtOAc(150ml),HOAc(1.5ml)和20％碳上氫氧化鈀(1.5g)中，將原料于H2(60psi)中振搖4小時。過濾和蒸發(fā)后，用1∶1 Et2O-己烷(2×50ml)研磨殘留物并在室溫干燥，得到白色固體的(124)(8.2g)。mp:139-142℃。步驟2將(124)(8.1g)與CH2Cl2(200ml)中的Et3SiH(20ml)一起攪拌并滴加TFA(10ml)。0.5小時后，用H2O洗滌溶液兩次并蒸發(fā)。用1M的四丁基氟化銨的THF(50ml)溶液處理CH2Cl2(100ml)中的殘留物15分鐘用1N H2SO4洗滌，干燥，蒸發(fā)并經(jīng)快速硅膠層析，用在CH2Cl2中的0-2％Et2O洗脫。蒸發(fā)純流份得到稠的油狀物(125)(6.28g)。質(zhì)譜MH+=229。
步驟3將(125)(2.3g)、4-叔-丁氧羰基-2-(R)-甲基哌嗪(2.4g)、乙醇(40ml),37％甲醛(2.5ml)和4M HCl-二噁烷(1.25ml)的混合物回流24小時，用CH2Cl2∶NaHCO3水溶液處理，干燥，蒸發(fā)和快速硅膠層析殘留物，用5-30％Et2O-己烷洗脫。蒸發(fā)純流份得到白色泡沫狀(126)(2.6g)。質(zhì)譜MH+=441。步驟4
在室溫，將在CH2Cl2(20ml)中的(126)(1.7g)、H2O(0.5ml)和TFA(5ml)中的溶液攪拌1小時，用CH2Cl2和H2O稀釋并用小量的K2CO3處理，直至水相的pH保持在8-9為止。干燥有機(jī)相并蒸發(fā)得到白色泡沫狀的(127)(1.2g)。質(zhì)譜MH+=341。步驟5在室溫下，將(127)(1.12g),1-(鄰-甲苯甲?；?-4-哌啶酮(0.8g)、CH2Cl2(25ml)和NaBH(OAc)3(1.5g)的混合物攪拌20小時，用過量NaHCO3水溶液洗滌、干燥和蒸發(fā)。將殘留物溶解在含有4M HCl-二噁烷(2ml)的CH3OH中，蒸發(fā)，與CH3OH(100ml)共蒸發(fā)，和將該殘留物溶解在CH3OH(1ml)和CH2Cl2(15ml)中并加到含有4M HCl-二噁烷(1ml)的攪拌Et2O(100ml)中。過濾沉淀，用Et2O洗滌并干燥，得到白色粉末狀的300鹽酸鹽(1.76g)。質(zhì)譜MH+=542。
實施例49
步驟1將3-碘代苯酚(1.76g)、哌嗪(1.35g)、37％甲醛(1.25ml)和乙醇(15ml)的混合物回流1小時，然后再加入甲醛(0.75ml)并繼續(xù)加熱10小時。冷卻反應(yīng)物，在CH2Cl2-H2O中處理，干燥并蒸發(fā)。通過快速硅膠層析，用在EtOAc中的0-1.5％CH3OH洗脫分離出主要的產(chǎn)物。蒸發(fā)純流份得到黃色泡沫物(128)(1.31g)。質(zhì)譜MH+=502。步驟2將(128)(1.25g)和叔-丁基氯二甲基硅烷(0.8g)與Et3N(0.8ml)和二甲基氨基吡啶(0.03g)一起在CH2Cl2(30ml)中攪拌40小時，蒸發(fā)并以EtOAc洗脫的快速硅膠層析得到白色泡沫狀產(chǎn)物(129)(1.48g)。質(zhì)譜MH+=602。步驟3用n-BuLi的己烷溶液(2M；1.4ml)處理-70℃的(129)(1.42g)在干燥的THF(25ml)中的溶液，立即加入THF(1ml)中的3,4-亞甲基二氧苯磺酰氟(0.65g)的溶液并攪拌混合物至室溫0.5小時。在H2O-EtOAc中分配反應(yīng)物，干燥并蒸發(fā)，以己烷-EtOAc洗脫，快速硅膠層析殘留物。蒸發(fā)純流份得到淺黃色泡沫狀產(chǎn)物(130)(0.76g)。質(zhì)譜MH+=674。步驟4在含有HOAc(0.1g)和KF(1.0g)的CH3OH(15ml)中攪拌(130)(0.55g)20小時，在H2O-CH2Cl2中分配，干燥并蒸發(fā)。用EtOAc的硅膠快速層析，得到淺黃色泡沫狀純產(chǎn)物(131)(0.41g)。質(zhì)譜MH+=560。步驟5將(131)(0.37g)、CH2Cl2(3ml)、H2O(0.05ml)和TFA(2ml)的混合物在室溫下保持2小時，蒸發(fā)并在H2O-CH2Cl2中用足夠的NaHCO3分配，保持水相pH值在8-9。干燥CH2Cl2提取液并蒸發(fā)，在室溫下，用鄰-甲苯甲酸(0.2g),1-羥基苯并三唑(0.15g)和DECl(0.4g)攪拌DMF(15ml)中的該殘留物。在EtOAc和NaHCO3水溶液中分配混合物，干燥并蒸發(fā)。通過ptlc硅膠板，用3％CH3OH-CH2Cl2分離出主要的成分，得到白色泡沫物(0.38g)，主要是N,O-二-甲苯甲?；衔铩Ｔ贑H3OH(7ml)和H2O(0.8ml)中，將0.3g該物質(zhì)與NaOH(0.5g)一起在室溫攪拌24小時。與H2O-CH2Cl2一起攪拌溶液并用固體CO2中和至pH7-8。干燥有機(jī)相并蒸發(fā)，按上述的實施例方法沉淀210的鹽酸鹽并在室溫真空中干燥，得到白色固體物(0.22g)。質(zhì)譜MH+=578。
實施例50
將27mg的30溶解于1.5ml的冰乙酸中。在40℃攪拌溶液7小時。加入過量的飽和NaHCO3溶液，并用EtOAc提取混合物。Na2SO4進(jìn)行干燥，蒸發(fā)，通過柱層析純化殘留物并以10％CH3OH/EtOAc洗脫，得到約17mg的油狀物520。MS(FAB):598.4(M+1),538.5。
實施例51
向(132)(2.31g,6.00mmol)在無水CH3CN(30ml)中的溶液依次加入4-哌啶酮亞乙基縮酮(0.77ml,6.00mmol)和2,2,6,6-四甲基哌啶(1.22ml,7.20mmol)，并在60℃加熱混合物14小時。蒸發(fā)溶劑后，將殘留物溶解于飽和NaHCO3水溶液(100ml)中，用CH2Cl2(3×50ml)提取，Na2SO4干燥并蒸發(fā)。將這樣得到的油狀物(2.89g)與6N HCl(40ml)一起再回流7小時，然后蒸發(fā)。按上述處理并經(jīng)快速層析(SiO2,CH2Cl2/CH3OH/NH396∶4∶1)得到(133)(1.26g,49％)。
向(133)(470mg,1.21mmol)和N-Boc哌嗪(255mg,1.27mmol)在無水CH2Cl2(1ml)中的溶液加入異丙氧基鈦(Ⅳ)(447ml,1.21mmol)并在室溫攪拌混合物3天。用CH2Cl2(1ml)稀釋溶液，在0℃加入甲苯(3.65ml)中的1N Et2AlCN并使得到的混合物溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢?小時。加入硅藻土和水(100ml)并通過硅藻土過濾最后的懸浮液，Na2SO4干燥并蒸發(fā)。將這樣得到的粗品(655mg,93％)溶解于無水THF(7ml)中，在0℃，用Et2O中的3N CH3MgBr處理并使溶液溫?zé)嶂潦覝?，然后?5℃加熱3小時。冷卻后，加入硅藻土(2g)和CH2Cl2(10ml)并將懸浮液緩慢傾入冰中。通過硅藻土過濾得到的懸浮液并按上述方法處理，快速層析后(SiO2，洗脫劑CH2Cl2/CH3OH/NH380∶20∶1)，得到(134)(375mg,58％)。
用TFA除去Boc基團(tuán)，經(jīng)1N NaOH堿處理并用CH2Cl2提取后，得到260mg的中間體。該物質(zhì)(20mg,0.042mmol)經(jīng)過鄰-甲苯甲酰氯的N-?；磻?yīng)，在轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽后，得到白色固體的587(15mg):MH+=590.2。
以上述的方法或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的那些方法的改進(jìn)方法，使用適合的起始原料，可以制備下面表中所示的化合物。
權(quán)利要求
1．具有下式結(jié)構(gòu)的化合物，
包含所有異構(gòu)體和其藥學(xué)上可接受的鹽，酯和其溶劑化物。其中Y和Z之一是N而另一個是N、CH或C-烷基；X是-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR6-、-CO、-CH2-、-CS-、-C(OR5)2-、-C(SR5)2-、CONR20-、C(烷基)2-、C(H)(烷基)-、-NR20-SO2-、-SO2-NR20-、-NR20CO-、-O-CO-NH-、-NH-CO-O-、
R是
(其中X1是-CH2-,-O-，或-NR7-)
氫、酰基、烷基、烷氧基、鏈烯基、環(huán)烷基、具有一個或兩個選自烷基和羰基取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、雙環(huán)烷基、芳烯基、芐基、具有多至3個獨立選自R3基團(tuán)取代的芐基、環(huán)烷基烷基、多鹵?；⑵S氧烷基、羥基C2-C20烷基、鏈烯羰基、烷芳基磺?；?、烷氧羰基氨基酰基、烷磺酰基或芳基磺?；?，另外，當(dāng)X是-CH2-,R也可以是-OH；此外，當(dāng)X不是N時，R也可以是羥甲基，此外，R和X可以結(jié)合形成Prot-(NOAA)r-NH-基團(tuán)，其中r是1-4的整數(shù)，Prot是氮保護(hù)基團(tuán)和當(dāng)r是1時，NOAA是天然存在的氨基酸或其對映體，或當(dāng)r是2-4時，各自的NOAA是獨立選自天然存在的氨基酸或其對映體的肽。R1和R21獨立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雙環(huán)烷基、鏈炔基、氰基、氨基烷基、烷氧羰基、氨基羰基、羥基脒基、烷氧羰基烷基、苯基烷基、烷基羰基氧基烷基，
H、-OH、(條件是R1和R21不都是-OH及Y不是N)，甲?；?CO烷基、-CO?；?、-CO芳基和羥烷基；另外，R1和R21一起形成=CH2、=N-OR5、=N-CN、=N-N(R5)2、=CH-烷基、亞烷基、
或=C(鹵素)2；此外，R1和R21與它們所連接的碳原子一起形成基團(tuán)
或
或R1和R21與它們所連接的碳原子一起形成含有3-7個碳原子的飽和雜環(huán)，這些碳原子中的一個或多個可以由烷基和一個或二個獨立選自S、O和N-R20的基團(tuán)任選取代；R2是
R3、R4、R22、R24和R25獨立選自烷基、H、鹵素、烷氧基、芐氧基、由硝基或氨基烷基取代的芐氧基、鹵代烷基、多鹵代烷基、硝基、氰基、磺?；⒘u基、氨基、烷基氨基、甲?；⑼榱蚧?、多鹵代烷氧基、酰氧基、三烷基甲硅烷基、烷基磺?；⒎蓟酋；?、?；?、烷氧羰基、烷基亞磺?；?OCONH2、-OCONH-烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、-COOH、-CON(R20)2、-OCON(烷基)2、-NHCOO-烷基、-NHCO-烷基、苯基、羥基烷基或嗎啉基；R5和R6各自獨立選自H和烷基，條件是當(dāng)X是C(OR5)2或C(SR5)2時，兩個R5不能都是H，另外，當(dāng)X是C(OR5)2或C(SR5)2時，X中的兩個R5可以連接在一起形成-(CR202)P-，其中P是整數(shù)2-4；R7獨立選自H、烷基、芳烷基、環(huán)烷基、芳基和用在此定義的R3和R4取代的芳基；每個R5獨立選自H、羥基烷基或烷基或兩個R8基團(tuán)可以連接在一起形成亞烷基；R9是H、烷基、芳烷基或?；?；R20是H、芳基或烷基；R27和R28獨立選自H、烷基、羥基烷基、芳基烷基、氨基烷基、鹵代烷基、硫代烷基、烷基硫代烷基、羧基烷基、咪唑基烷基和吲哚烷基或R27和R28可以結(jié)合形成亞烷基；R29是H、烷基、-CO-烷基、-CO-環(huán)烷基、烷氧羰基、氨基羰基、芳氧羰基、烷氨基羰基、二烷氨基羰基、烷基磺?；?、芳基磺?；?SO2-NH-R20；R30是H、烷基、芳基、環(huán)烷基、羥基烷基、氨基烷基、-COOR20、-CON(R20)2或氰基；R31和R32與R30相同，另外，兩個R30、R31和R32基團(tuán)也可以形成-(CH2)r-基團(tuán)(其中r是1-6)，此外，R31和R32也可以是羥基、-N(R20)2、-O-?；?、-N(R20)?；?、-OCOOR20或-OCON(R20)2；R33是芳基或雜芳基，條件是當(dāng)R33是雜芳基時，CO-R33鍵須連接在R33基團(tuán)的碳原子上；R34是烷基、環(huán)烷基或芳基，另外，R34也可以是H，此時R1和R21與它們所連接的碳原子一起形成含有3-7個碳原子的飽和雜環(huán)，兩個基團(tuán)獨立選自S、O和N-R20；R35是-CH2-、-NR20-或-O-；R36是-NH2-、烷基或烷氧基；R37獨立選自H和烷基；R38是-CO-(CH2)0-5-OR5、-SO2-(烷基)，或
其中q1和q2獨立是1-5，條件是q1和q2總數(shù)是2-5；和R39和R40獨立選自=O和(H,H)。
2．權(quán)利要求1的化合物，其中Y和Z是N。
3．權(quán)利要求1的化合物，其中Y是CH和Z是N。
4．權(quán)利要求1、2或3中任何一項的化合物，其中R是
和X是O、SO、SO2、CH2、CH(烷基)、C(烷基)2、CH(OH)或N(R20)CO。
5．權(quán)利要求1、2、3、4或5中任何一項的化合物，其中R3和R4是氫；R1是H、環(huán)烷基或烷基而R21是H或R1和R21一起形成=O或
及其中R27和R28中至少一個是烷基。
6．權(quán)利要求1、2、3、4或5中任何一項的化合物，其中R2是
和R30是H或CH3；R31和R32是H；和R33是鄰一取代的芳基或雜芳基。
7．權(quán)利要求6的化合物，其中R33是
8．權(quán)利要求1-5中任何一項的化合物，其中R2是
和R34是甲基而R31和R32是H。
9．按權(quán)利要求1所定義的化合物選自說明書出現(xiàn)的化合物表中的化合物序號17、18、25、30、31、32、34、35、36、37、41、43、44、49、53、54、56、57、58、59、80、82、84、85、94、98、100、108、121、126、127、137、145、151、152、154、155、162、166、178、179、181、185、190、191、194、199、214、215、216、225、247、253、256、257、337、339、340、341、349、351、367、409、459、479、488、489、490、500、501、502、503、505、506、507、515、516、517、555和562。
10．藥用組合物，它包括權(quán)利要求1中所定義的化合物與藥學(xué)上可接受的載體的組合。
11．制備按權(quán)利要求10所定義的藥用組合物的方法，它包括將權(quán)利要求1-9中任何一項所要求的化合物與藥學(xué)上可接受的載體的混合。
12．權(quán)利要求1的化合物在制備治療識別障礙或神經(jīng)變性疾病藥物中的用途。
13．治療識別障礙或神經(jīng)變性疾病的藥盒，它包括用于聯(lián)合治療的單一包裝的藥用化合物的分開的容器，在一個容器中裝有根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，在另一個容器中裝有乙酰膽堿酯酶抑制劑，所述的化合物和抑制劑均在藥學(xué)上可接受的載體中，它們的組合量為有效量。
14．治療識別障礙或神經(jīng)變性疾病的方法，它包括對患有所述疾病的患者單獨給予或與乙酰膽堿酯酶抑制劑聯(lián)合給予有效量的權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
根據(jù)式Ⅰ的二－N－取代的哌嗪或1,4－二—取代的哌啶化合物(包括所有異構(gòu)體、鹽、酯和溶劑化物),其中R、R
文檔編號C07D295/13GK1232462SQ97198479
公開日1999年10月20日 申請日期1997年8月6日 優(yōu)先權(quán)日1996年8月8日
發(fā)明者D·B·洛維, W·K·常, J·A·科茲洛夫斯基, J·G·伯格爾, R·麥夸德, A·巴內(nèi)特, M·舍爾洛克, W·湯姆, S·杜加, 陳連勇, J·W·克拉德, S·查卡拉曼尼爾, 王玉光, S·W·麥科姆比, J·R·塔加特, S·F·維塞, W·D·瓦卡洛, M·J·格林, M·E·布勞內(nèi), T·阿斯貝洛姆, C·D·波伊勒, H·B·喬斯恩 申請人:先靈公司