專利名稱：新的人核受體協(xié)阻抑物編碼序列、其編碼的多肽及制法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及一種新的人基因核苷酸序列。更具體地說，本發(fā)明涉及人HNRCR的cDNA序列，該蛋白是核受體協(xié)阻抑物(nuclear receptor coreceptor，簡(jiǎn)稱NRCR)的同系物。本發(fā)明還涉及由該核苷酸序列編碼的多肽，這些多核苷酸和多肽的應(yīng)用，以及所述多核苷酸和所述多肽的生產(chǎn)方法。
核受體協(xié)阻抑物是一種能和核受體共同作用，調(diào)節(jié)靶基因轉(zhuǎn)錄的蛋白分子。類固醇、類視黃醇、甲狀腺素能夠通過對(duì)細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的受體調(diào)節(jié)，開啟特異基因的表達(dá)。這些激素的受體組成了一個(gè)稱作核調(diào)節(jié)蛋白的超家族，其成員都是具有高度特異性和選擇性的，依賴于配體作用的轉(zhuǎn)錄因子。這些受體結(jié)合于基因的上游調(diào)控區(qū)，當(dāng)它們未和相應(yīng)配體結(jié)合時(shí)，能通過和核受體協(xié)阻抑物的作用，抑制這些基因的表達(dá)(Gene Dev.11835-846，1997)。
1995年Howard Hughes醫(yī)學(xué)院的Horlein等人用結(jié)合分析法率先從CV-1細(xì)胞中分離得到一個(gè)分子量為270kD的人核受體協(xié)阻抑物蛋白(N-CoR)。他們的方法是將CV-1全細(xì)胞的抽提物經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳后轉(zhuǎn)移至硝纖膜上，用32P標(biāo)記甲狀腺素受體C末端與之進(jìn)行雜交。隨后他們又用酵母雙雜交法獲得了編碼該蛋白的部分cDNA順序，并且在鼠的垂體cDNA庫中篩選到了該cDNA的全長(zhǎng)序列(Nature377397-404，1995)。同年，該醫(yī)學(xué)院的Chen等人用相似的方法得到了另一個(gè)轉(zhuǎn)錄協(xié)阻抑物——類視黃醇和甲狀腺素受體沉默中介體(silencing mediator for retinoidand thyroid hormone receptor，SMRT)的cDNA全長(zhǎng)序列(Nature 377454-457，1995)。近年來又有一些270kD核受體協(xié)阻抑物蛋白的不同剪切的形式的產(chǎn)物被報(bào)道發(fā)現(xiàn)(Mol.Endocrinol.10(12)1646-1655，1996)。1997年，Zamir等人克隆了一個(gè)和已知N-CoR、SMRT無同源關(guān)系的協(xié)阻抑物SUN-CoR(P.A.N.S.9414400-14405，1997)。
在本發(fā)明之前，尚沒有任何人公開過本申請(qǐng)中涉及的另一種人類核受體協(xié)阻抑物成員HNRCR。
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種新的多核苷酸序列，該多核苷酸序列編碼人的核受體協(xié)阻抑物同源蛋白，本發(fā)明的核受體協(xié)阻抑物同源基因被命名為HNRCR。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種新的蛋白，該蛋白被命名為HNRCR蛋白。
本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供一種利用重組技術(shù)生產(chǎn)所述的新的人HNRCR蛋白的方法。
本發(fā)明還提供了這種人HNRCR編碼序列和多肽的應(yīng)用。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種分離出的DNA分子，它包括編碼具有人HNRCR蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度嚴(yán)緊條件下與SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位的核苷酸序列雜交。較佳地，所述的序列編碼一多肽，該多肽具有SEQ ID NO.20所示的序列。更佳地，該序列具有SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位的核苷酸序列。
在本發(fā)明的另一方面，提供了一種分離的HNRCR蛋白多肽，它包括具有SEQ ID NO.20氨基酸序列的多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ ID NO.20序列的多肽。
在本發(fā)明的另一方面，提供了一種載體，它含有上述分離出的DNA。
在本發(fā)明的另一方面，提供了一種所述載體轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞。
在本發(fā)明的另一方面，提供了一種產(chǎn)生具有HNRCR蛋白活性的多肽的方法，該方法包括(a)將編碼具有HNRCR蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地連于表達(dá)調(diào)控序列，形成HNRCR蛋白表達(dá)載體，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位的核苷酸序列有至少70％的同源性；(b)將步驟(a)中的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞，形成HNRCR蛋白的重組細(xì)胞；(c)在適合表達(dá)HNRCR蛋白多肽的條件下，培養(yǎng)步驟(b)中的重組細(xì)胞；(d)分離出具有HNRCR蛋白活性的多肽。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明的分離的多核苷酸全長(zhǎng)為7900個(gè)核苷酸，其詳細(xì)序列見SEQ ID NO.19，其中開放讀框位于75-7106位核苷酸。
在本發(fā)明中，“分離的”、“純化的”或“基本純的”DNA是指，該DNA或片段已從天然狀態(tài)下位于其兩側(cè)的序列中分離出來，還指該DNA或片段已經(jīng)與天然狀態(tài)下伴隨核酸的組份分開，而且已經(jīng)與在細(xì)胞中伴隨其的蛋白質(zhì)分開。
在本發(fā)明中，術(shù)語“HNRCR蛋白(或多肽)編碼序列”指編碼具有HNRCR蛋白活性的多肽的核苷酸序列，如SEQ ID NO.19中75-7106位核苷酸序列及其簡(jiǎn)并序列。該簡(jiǎn)并序列是指，位于SEQ ID NO.19序列的編碼框75-7106位核苷酸中，有一個(gè)或多個(gè)密碼子被編碼相同氨基酸的簡(jiǎn)并密碼子所取代后而產(chǎn)生的序列。由于密碼子的簡(jiǎn)并性，所以與SEQ ID NO.19中75-7106位核苷酸序列同源性低至約70％的簡(jiǎn)并序列也能編碼出SEQ ID NO.20所述的序列。該術(shù)語還包括能在中度嚴(yán)緊條件下，更佳地，在高度嚴(yán)緊條件下與SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位的核苷酸序列雜交的核苷酸序列。此外，該術(shù)語還包括與SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位的核苷酸序列的同源性至少70％，較佳地至少80％，更佳地至少90％的核苷酸序列。
該術(shù)語還包括能編碼具有與人HNRCR相同功能的蛋白的、SEQ ID NO.19中開放讀框序列的變異形式。這些變異形式包括(但并不限于)若干個(gè)核苷酸的缺失、插入和/或取代，以及在5’和/或3’端添加數(shù)個(gè)核苷酸。
在本發(fā)明中，“基本純的”蛋白質(zhì)或多肽是指其至少占樣品總物質(zhì)的至少20％，較佳地至少50％，更佳地至少80％，最佳地至少90％(按干重或濕重計(jì))。純度可以用任何合適的方法進(jìn)行測(cè)量，如用柱層析、PAGE或HPLC法測(cè)量多肽的純度?；炯兊亩嚯幕旧喜缓烊粻顟B(tài)下的伴隨其的組分。
在本發(fā)明中，術(shù)語“HNRCR蛋白多肽”指具有HNRCR蛋白活性的SEQ IDNO.20序列的多肽。該術(shù)語還包括具有與人HNRCR相同功能的、SEQ ID NO.20序列的變異形式。這些變異形式包括(但并不限于)若干個(gè)氨基酸的缺失、插入和/或取代，以及在C末端和/或N末端添加一個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸。例如，在本領(lǐng)域中，用性能相近或相似的氨基酸進(jìn)行取代時(shí)，通常不會(huì)改變蛋白質(zhì)的功能。又比如，在C末端和/或N末端添加一個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸通常也不會(huì)改變蛋白質(zhì)的功能。該術(shù)語還包括HNRCR蛋白的活性片段和活性衍生物。
該多肽的變異形式包括同源序列、等位變異體、天然突變體、誘導(dǎo)突變體、在高或低的嚴(yán)謹(jǐn)度條件下能與HNRCR DNA雜交的DNA所編碼的蛋白、以及利用抗HNRCR多肽的抗血清獲得的多肽或蛋白。本發(fā)明還提供了其他多肽，如包含HNRCR多肽或其片段的融合蛋白。除了幾乎全長(zhǎng)的多肽外，本發(fā)明還包括了HNRCR多肽的可溶性片段。通常，該片段具有HNRCR多肽序列的至少約10個(gè)連續(xù)氨基酸，通常至少約50個(gè)連續(xù)氨基酸，較佳地至少約100個(gè)連續(xù)氨基酸，更佳地至少約200個(gè)連續(xù)氨基酸，最佳地至少約400個(gè)連續(xù)氨基酸。
發(fā)明還提供HNRCR蛋白或多肽的類似物。這些類似物與天然HNRCR多肽的差別可以是氨基酸序列上的差異，也可以是不影響序列的修飾形式上的差異，或者兼而有之。這些多肽包括天然或誘導(dǎo)的遺傳變異體。誘導(dǎo)變異體可以通過各種技術(shù)得到，如通過輻射或暴露于誘變劑而產(chǎn)生隨機(jī)誘變，還可通過定點(diǎn)誘變法或其他已知分子生物學(xué)的技術(shù)。類似物還包括具有不同于天然L-氨基酸的殘基(如D-氨基酸)的類似物，以及具有非天然存在的或合成的氨基酸(如β、γ-氨基酸)的類似物。應(yīng)理解，本發(fā)明的多肽并不限于上述例舉的代表性的多肽。
修飾(通常不改變一級(jí)結(jié)構(gòu))形式包括體內(nèi)或體外的多肽的化學(xué)衍生形式如乙?；螋然Ｐ揎椷€包括糖基化，如那些在多肽的合成和加工中或進(jìn)一步加工步驟中進(jìn)行糖基化修飾而產(chǎn)生的多肽。這種修飾可以通過將多肽暴露于進(jìn)行糖基化的酶(如哺乳動(dòng)物的糖基化酶或去糖基化酶)而完成。修飾形式還包括具有磷酸化氨基酸殘基(如磷酸酪氨酸，磷酸絲氨酸，磷酸蘇氨酸)的序列。還包括被修飾從而提高了其抗蛋白水解性能或優(yōu)化了溶解性能的多肽。
本發(fā)明還包括HNRCR多肽編碼序列的反義序列。這種反義序列可用于抑制細(xì)胞內(nèi)HNRCR的表達(dá)。
本發(fā)明還包括一種探針分子，該分子通常具有HNRCR多肽編碼序列的8-1000個(gè)，較佳地15-800個(gè)連續(xù)核苷酸，最佳地50-500個(gè)連續(xù)核苷酸。該探針可用于檢測(cè)樣品中是否存在編碼HNRCR的核酸分子。
本發(fā)明還包括檢測(cè)HNRCR核苷酸序列的方法，它包括用上述的探針與樣品進(jìn)行雜交，然后檢測(cè)探針是否發(fā)生了結(jié)合。較佳地，該樣品是PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物，其中PCR擴(kuò)增引物對(duì)應(yīng)于HNRCR多肽的編碼序列，并可位于該編碼序列的兩側(cè)或中間。引物長(zhǎng)度一般為20-50個(gè)核苷酸，或更長(zhǎng)。
在本發(fā)明中，可選用本領(lǐng)域已知的各種載體，如市售的載體。
在本發(fā)明中，術(shù)語“宿主細(xì)胞”包括原核細(xì)胞和真核細(xì)胞。常用的原核宿主細(xì)胞的例子包括大腸桿菌、枯草桿菌等。常用的真核宿主細(xì)胞包括酵母細(xì)胞，昆蟲細(xì)胞、和哺乳動(dòng)物細(xì)胞。較佳地，該宿主細(xì)胞是真核細(xì)胞，如CHO細(xì)胞、COS細(xì)胞等。
另一方面，本發(fā)明還包括對(duì)HNRCRDNA或是其片段編碼的多肽具有特異性的多克隆抗體和單克隆抗體，尤其是單克隆抗體。這里，“特異性”是指抗體能結(jié)合于HNRCR基因產(chǎn)物或片段。較佳地，指那些能與HNRCR基因產(chǎn)物或片段結(jié)合但不識(shí)別和結(jié)合于其它非相關(guān)抗原分子的抗體。本發(fā)明中抗體包括那些能夠結(jié)合并抑制HNRCR蛋白的分子，也包括那些并不影響HNRCR蛋白功能的抗體。本發(fā)明還包括那些能與修飾或未經(jīng)修飾形式的HNRCR基因產(chǎn)物結(jié)合的抗體。
本發(fā)明不僅包括完整的單克隆或多克隆抗體，而且還包括具有免疫活性的抗體片段，如Fab′或(Fab)2片段；抗體重鏈；抗體輕鏈；遺傳工程改造的單鏈Fv分子(Ladner等人，美國(guó)專利No.4,946,778)；或嵌合抗體，如具有鼠抗體結(jié)合特異性但仍保留來自人的抗體部分的抗體。
本發(fā)明的抗體可以通過本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員已知的各種技術(shù)進(jìn)行制備。例如，純化的HNRCR基因產(chǎn)物或者其具有抗原性的片段，可被施用于動(dòng)物以誘導(dǎo)多克隆抗體的產(chǎn)生。與之相似的，表達(dá)HNRCR或其具有抗原性的片段的細(xì)胞可用來免疫動(dòng)物來生產(chǎn)抗體。本發(fā)明的抗體也可以是單克隆抗體。此類單克隆抗體可以利用雜交瘤技術(shù)來制備(見Kohler等人，Nature 256；495，1975；Kohler等人，Eur.J.Immunol.6511，1976；Kohler等人，Eur.J.Immunol.6292，1976；Hammerling等人，In Monoclonal Antibodies and T Cell Hybridomas，Elsevier，N.Y.，1981)。本發(fā)明的抗體包括能阻斷HNRCR功能的抗體以及不影響HNRCR功能的抗體。本發(fā)明的各類抗體可以利用HNRCR基因產(chǎn)物的片段或功能區(qū)，通過常規(guī)免疫技術(shù)獲得。這些片段或功能區(qū)可以利用重組方法制備或利用多肽合成儀合成。與HNRCR基因產(chǎn)物的未修飾形式結(jié)合的抗體可以用原核細(xì)胞(例如E.Coli)中生產(chǎn)的基因產(chǎn)物來免疫動(dòng)物而產(chǎn)生；與翻譯后修飾形式結(jié)合的抗體(如糖基化或磷酸化的蛋白或多肽)，可以用真核細(xì)胞(例如酵母或昆蟲細(xì)胞)中產(chǎn)生的基因產(chǎn)物來免疫動(dòng)物而獲得。
本發(fā)明的HNRCR核苷酸序列全長(zhǎng)序列或其片段通?？梢杂肞CR擴(kuò)增法、重組法或人工合成的方法獲得。對(duì)于PCR擴(kuò)增法，可根據(jù)本發(fā)明所公開的SEQ ID NO.19序列，尤其是開放閱讀框序列來設(shè)計(jì)引物，并用各種市售的cDNA庫或按已知方法制備的cDNA庫作為模板，擴(kuò)增而得有關(guān)序列。當(dāng)序列較長(zhǎng)時(shí)，常常需要進(jìn)行兩次或多次PCR擴(kuò)增，然后再將各次擴(kuò)增出的片段按正確次序拼接在一起。
一旦獲得了有關(guān)的序列，就可以用重組法來大批量地獲得有關(guān)序列。這通常是將其克隆入載體，再轉(zhuǎn)入細(xì)胞，然后通過常規(guī)方法從增殖后的宿主細(xì)胞中分離得到有關(guān)序列。
此外，還可用人工合成的方法來合成有關(guān)序列，尤其是片段長(zhǎng)度較短時(shí)。當(dāng)然，通過先合成多個(gè)小片段，然后再進(jìn)行連接而獲得序列很長(zhǎng)的片段。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，人HNRCR的cDNA核苷酸序列是如此獲得的，以人睪丸入gtllcDNA文庫(購自Clontech公司)為模板，合成正向引物和反向引物九對(duì)，進(jìn)行PCR，獲得的目的片段經(jīng)測(cè)序、拼接后得到SEQ ID NO.19的全長(zhǎng)cDNA序列。
研究已表明，類固醇、類視黃醇、甲狀腺素能夠通過細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的受體調(diào)節(jié)，開啟特異基因的表達(dá)。這些激素的受體組成了一個(gè)稱作核調(diào)節(jié)蛋白的超家族。它們結(jié)合于基因的上游調(diào)控區(qū)。而當(dāng)它們未和相應(yīng)配體結(jié)合時(shí)，能通過和核受體協(xié)阻抑物的作用，抑制這些基因的表達(dá)(Gene Dev.11835-846，1997)。
近年來的研究還表明，核受體協(xié)阻抑物還和一類孤兒受體家族成員作用(Nucleic Acids Research 24(22)4379-4386，1996)。該研究提示不同受體可通過不同的抑制域和核受體協(xié)阻抑物作用，而核受體協(xié)阻抑物提供了一個(gè)通用的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的下游途徑(Mol.Cell.Bio.16(10)5458-5465，1996)。
核受體協(xié)阻抑物是核受體蛋白發(fā)揮抑制作用的關(guān)鍵分子。研究表明降低核受體協(xié)阻抑物水平或者干擾協(xié)阻抑物和核受體的結(jié)合，都能有效提高核受體拮抗物在某些特殊細(xì)胞中，如乳腺癌晚期細(xì)胞中激活基因表達(dá)的作用(P.N.A.S.952920-2925，1998)。本發(fā)明的多肽可以為研究基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機(jī)制及抗腫瘤機(jī)制提供一條新途徑。
熒光免疫分析表明，在低水平表達(dá)時(shí)核受體協(xié)阻抑物在細(xì)胞核中任意分布，而在高水平表達(dá)時(shí)就會(huì)形成許多點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)的亞群。過表達(dá)的核受體協(xié)阻抑物會(huì)表現(xiàn)出去除抑制作用的功能，而不是增強(qiáng)抑制作用。研究表明，核受體協(xié)阻抑物mRNA在發(fā)育過程中顯示下降趨勢(shì)(Mol.Endo.11(6)682-692，1997)。本發(fā)明的多核苷酸及多肽可以為進(jìn)一步研究核受體協(xié)阻抑物參與生理功能的普遍原理提供新的研究材料。
另外，已有報(bào)道，一種非典型的急性早幼粒細(xì)胞的白血病和核受體協(xié)阻抑物直接相關(guān)(Blood 91(8)2634-3642，1998)。本發(fā)明可為深入研究該疾病的分之機(jī)制及尋找有效的治療方法提供可能。例如，本發(fā)明HNRCR核酸(編碼序列或反義序列)可以被引入細(xì)胞，以提高HNRCR的表達(dá)水平或者抑制HNRCR的過度表達(dá)。本發(fā)明的HNRCR蛋白或其活性多肽片段可以施用于病人，以治療或減輕因HNRCR缺失、無功能或異常而導(dǎo)致的有關(guān)病癥。此外，還可以用基于本發(fā)明的核酸序列或抗體進(jìn)行有關(guān)的診斷或預(yù)后判斷。
在附圖中，

圖1為本發(fā)明的人HNRCR與鼠HNRCR的核酸序列的同源比較圖。其中，相同的核苷酸用“|”標(biāo)出。
圖2為本發(fā)明的人HNRCR與鼠HNRCR蛋白的氨基酸序列的同源比較圖。其中，相同的氨基酸在兩個(gè)序列之間用“|”標(biāo)出，相似的氨基酸用“.”標(biāo)出。
下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件如Sambrook等人，分子克隆實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(New YorkColdSpring Harbor Laboratory Press，1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。
實(shí)施例1HNRCR的cDNA序列的克隆和測(cè)定1.引物擴(kuò)增以人睪丸λgtllcDNA文庫(購自Clontech公司)為模板，用九對(duì)寡核苷酸為引物——A15’-GTAGATGGTTTCCTAGACACATG-3′(SEQ ID NO.1)、A25′-CCATTGCTAGGAGTGAGCATGAG-3’(SEQ ID NO.2)、A35’-TCTTGACAACCTCTTACAGC AGC-3’(SEQ ID NO.3)、A45’-GCTATGCTCTCTACCAGCGACAC-3’(SEQ ID NO.4)、A55’-GATGTCAATGAGGGAGTCTCCTG-3’(SEQ ID NO.5)、A65’-ATCGGAGCCACCTGCCCA CGCAC-3’(SEQ ID NO. 6)、A75’-GTGAACAGCAGCAGCTAGAGCAG-3’(SEQ ID NO. 7)、A85’-CAGGACAGCTTGCTGCTCTTGTC-3’(SEQ ID NO. 8)和A95’-AGAACAGGATCTGG GAGCGAGAG-3’(SEQ ID NO.9)為正向引物，寡核苷酸B15′-CATTACTTTCCTGCTCAG AGAGC-3′(SEQ ID NO.10)、B25′-TGAGCAGAAACAGTGGAAGCGAC-3’(SEQ ID NO.11)、B35’-TCTGTTCTTGTCTCTGCCGCTGC-3’(SEQ ID NO.12)、B45’-TTGTTGCTCTTGGTGTCCCCTGC-3’(SEQ ID NO.13)、B55’-ACTTGGGTAACCTGGAGTTGGTG-3’(SEQ ID NO.14)、B65’-ACAGATCTCTTCTCCACCTCCAG-3’(SEQ ID NO.15)、B75’-GGTGAAGAATGAAGGCAAGTAGC-3’(SEQ ID NO.16)、B85’-ACTTCCATCATTTCTT CATCATC-3’(SEQ ID NO.17)和B95’-AGTGTGCGTAACAGTGAGGTATG-3’(SEQ ID NO.18)為反向引物，進(jìn)行PCR。A1/B1的PCR條件為93℃4分鐘，隨之以93℃1分鐘、66℃1分鐘和72℃1分鐘進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5分鐘；A2/B2的PCR條件為93℃4分鐘，隨之以93℃1分鐘、68℃1分鐘和72℃1分鐘進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5分鐘；A3/B3的PCR條件為93℃4分鐘，隨之以93℃1分鐘、68℃1分鐘和72℃1分鐘進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5分鐘；A4/B4的PCR條件為93℃4分鐘，隨之以93℃1分鐘、70℃1分鐘和72℃1分鐘進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5分鐘；A5/B5的PCR條件為93℃4分鐘，隨之以93℃1分鐘、68℃1分鐘和72℃1分鐘進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5分鐘；A6/B6的PCR條件為93℃4分鐘，隨之以93℃1分鐘、70℃1分鐘和72℃1分鐘進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5分鐘；A7/B7的PCR條件為93℃4分鐘，隨之以93℃1分鐘、68℃1分鐘和72℃1分鐘進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5分鐘；A8/B8的PCR條件為93℃4分鐘，隨之以93℃1分鐘、63℃1分鐘和72℃1分鐘進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5分鐘；A9/B9的PCR條件為93℃4分鐘，隨之以93℃1分鐘、68℃1分鐘和72℃1分鐘進(jìn)行35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5分鐘；電泳檢測(cè)得到的PCR片段，A1/B1為905bp的目的片段，A2/B2為990bp的目的片段，A3/B3為952bp的目的片段，A4/B4為1025bp的目的片段，A5/B5為996bp的目的片段，A6/B6為930bp的目的片段，A7/B7為985bp的目的片段，A8/B8為970bp的目的片段，A9/B9為849bp的目的片段。
2.PCR產(chǎn)物的測(cè)序?qū)⑦@九段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物A1/B1、A2/B2、A3/B3、A4/B4、A5/B5、A6/B6、A7/B7、A8/B8和A9/B9分別與pGEM-T載體(Promega)連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM103，用QIAprep Plasmid試劑盒(QIAGEN)提取質(zhì)粒，用雙鏈嵌套式缺失試劑盒(Pharmacia)對(duì)插入片段進(jìn)行定向系列缺失，然后用PCR對(duì)缺失子進(jìn)行快速鑒定及排序。用SequiTherm EXCELTMDNA測(cè)序試劑盒(Epicentre Technologies)對(duì)依次截短的缺失子進(jìn)行測(cè)序，最后用電腦軟件拼接順序，獲得全長(zhǎng)cDNA序列，共7900bp，詳細(xì)序列見SEQ ID NO.19，其中開放讀框位于75-7106位核苷酸。
根據(jù)得到的全長(zhǎng)cDNA序列推導(dǎo)出HNRCR的氨基酸序列，共2343個(gè)氨基酸殘基，其氨基酸序列詳見SEQ ID NO.20。
實(shí)施例2同源比較用HNRCR的全長(zhǎng)cDNA序列及其編碼蛋白在Non-redundantGenBank+EMBL+DDBJ+PDB數(shù)據(jù)庫及Non-redundant GenBank CDStranslations+PDB+SwissProt+Spupdate+PIR數(shù)據(jù)庫中用BLAST進(jìn)行核酸和蛋白同源檢索。結(jié)果發(fā)現(xiàn)它們與鼠核受體協(xié)阻抑物基因及其編碼蛋白具有極高同源性，用PCGENE軟件比較發(fā)現(xiàn)在核酸水平上的同一性達(dá)到了77.9％(圖1)，在蛋白水平上的同一性達(dá)到92.2％，并且另有3.4％的氨基酸相似(圖2)。因此，可以確定它們構(gòu)成一個(gè)家族，并可以從該家族基因或蛋白的功能來推測(cè)HNRCR的功能。
基因表達(dá)的調(diào)控對(duì)細(xì)胞分化、發(fā)育和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定有著決定作用。類固醇、類視黃醇、甲狀腺素能夠通過細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的受體調(diào)節(jié)，開啟特異基因的表達(dá)。這些激素的受體組成了一個(gè)稱作核調(diào)節(jié)蛋白的超家族，其成員都是具有高度特異性和選擇性的依賴于配體作用的轉(zhuǎn)錄因子。這些受體結(jié)合于基因的上游調(diào)控區(qū)，當(dāng)它們未和相應(yīng)配體結(jié)合時(shí)，能通過和核受體協(xié)阻抑物的作用，抑制這些基因的表達(dá)(Gene Dev.11835-846，1997)。核受體協(xié)阻抑物能夠結(jié)合一些組氨酸去乙?；?，這些酶可去除染色體上組蛋白的乙?；?，使染色體結(jié)構(gòu)更為緊密，從而實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄抑制作用(Nature 38716-17；43-48，1997)。
一個(gè)蛋白是否是核受體協(xié)阻抑物，可通過以下原則進(jìn)行判斷1)它和轉(zhuǎn)錄因子的抑制域相互作用；2)當(dāng)它和異源DNA結(jié)合域融合時(shí)，能夠抑制轉(zhuǎn)錄；3)當(dāng)轉(zhuǎn)錄因子的抑制域發(fā)生失活突變時(shí)，它的結(jié)合也變得敏感；4)它以濃度相關(guān)的方式實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子的抑制作用(Mol.Cell Bio.16(10)5458-5465，1996)。
近年來的研究表明，核受體協(xié)阻抑物也和一類孤兒受體家族成員作用(Nucleic Acids Research 24(22)4379-4386，1996)。孤兒受體是一種無已知配體的轉(zhuǎn)錄因子，可能是激素受體家族的祖先。研究最深入的是RevErb，其與核受體分別同核受體協(xié)阻抑物結(jié)合的抑制域的一級(jí)氨基酸順序是不同的，提示不同受體可通過不同的抑制域和核受體協(xié)阻抑物作用，而核受體協(xié)阻抑物提供了一個(gè)通用的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的下游途徑(Mol.Cell Bio.16(10)5458-5465，1996)。
核受體協(xié)阻抑物是核受體蛋白發(fā)揮抑制作用的關(guān)鍵分子。核受體蛋白開啟或抑制靶基因的表達(dá)取決于細(xì)胞內(nèi)共活化物和協(xié)阻抑物之間的比例，而這個(gè)比例與核受體蛋白種類、靶基因啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)及這些內(nèi)源共活化物和協(xié)阻抑物的組織特異性表達(dá)相關(guān)(Endocrinology 139(5)2493-2500，1998)。這個(gè)比例可能是不同組織對(duì)激素有著不同敏感性的決定因素。研究表明降低核受體協(xié)阻抑物水平或者干擾協(xié)阻抑物和核受體的結(jié)合，都能有效提高核受體拮抗物在某些特殊細(xì)胞中，如乳腺癌晚期細(xì)胞的活化基因表達(dá)的作用(P.N.A.S.952920-2925，1998)。本發(fā)明的多肽可以為研究基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機(jī)制及抗腫瘤機(jī)制提供一條新途徑。
熒光免疫分析表明，在低水平表達(dá)時(shí)核受體協(xié)阻抑物在細(xì)胞核中任意分布，而在高水平表達(dá)時(shí)就會(huì)形成許多點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)的亞群。其低水平時(shí)的分布情況和組蛋白去乙?；阜植疾糠种睾?，提示兩者在功能上有聯(lián)系。過表達(dá)的核受體協(xié)阻抑物能表現(xiàn)出去抑制作用的功能，而不是增強(qiáng)抑制作用(Mol.Endo.11(6)682-692，1997)。研究表明，核受體協(xié)阻抑物mRNA在胚胎組織中水平很高，在發(fā)育的較晚階段中顯著下降，而在成熟組織中達(dá)到極低水平(Mol.Endo.11(6)682-692，1997)。本發(fā)明的多核苷酸及多肽可以為進(jìn)一步研究核受體協(xié)阻抑物參與生理功能的分子機(jī)理及抑癌基因的作用機(jī)理提供新的研究材料。
另外，一種非典型的急性早幼粒細(xì)胞的白血病和核受體協(xié)阻抑物直接相關(guān)。該病變細(xì)胞產(chǎn)生一種融合蛋白，可和核受體協(xié)阻抑物作用產(chǎn)生病理性的抑制作用，并且不和典型治療藥物反全視黃酸響應(yīng)(Blood 91(8)2634-3642，1998)。這提示本發(fā)明的HNRCR的缺失、無功能或表達(dá)異常會(huì)導(dǎo)致人們患病或死亡。本發(fā)明可為深入研究該疾病的分子機(jī)制及尋找有效的治療方法提供可能。
本發(fā)明的人HNRCR除了可作為該家族一員用于進(jìn)一步的功能研究，還可用于與其他蛋白一起產(chǎn)生融合蛋白，比如與免疫球蛋白一起產(chǎn)生融合蛋白。此外，本發(fā)明人HNRCR還可以與該家族的其他成員進(jìn)行融合或交換片段，以產(chǎn)生新的蛋白。例如將本發(fā)明人HNRCR的N端與鼠的HNRCR的N端進(jìn)行交換，以產(chǎn)生新的活性更高或具有新特性的蛋白。
針對(duì)本發(fā)明人HNRCR的抗體，用于篩選該家族的其他成員，或者用于親和純化相關(guān)蛋白(如該家族的其他成員)。
實(shí)施例3HNRCR在大腸桿菌中的表達(dá)在該實(shí)施例中，分別表達(dá)HNRCR的四個(gè)片段。將實(shí)施例1中獲得的cDNA序列A1/B1、A2/B2、A5/B5和A8/B8用對(duì)應(yīng)于該DNA序列的5′和3′端的PCR寡核苷酸引物進(jìn)行擴(kuò)增，獲得的cDNA作為插入片段。
PCR反應(yīng)中使用的5′寡核苷酸引物序列為A1/B15’-TGTAGTCGACATGTCAAGTTCAGTTATCC-3′(SEQ ID NO.21)，該引物含有SalI內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，在該酶切位點(diǎn)之后是由起始密碼子開始的A1/B1編碼序列的19個(gè)核苷酸；A2/B25’-TGTAGTCGACATGATTGCTAGGAGTGAGCATG-3′(SEQ IDNO.22)，該引物含有SalI內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，在該酶切位點(diǎn)之后是起始密碼子以及A2/B2編碼序列的19個(gè)核苷酸；A5/B55’-TGTAGTCGACATGTCAATGAGGGAGTCTCCTG-3′(SEQ IDNO.23)，該引物含有SalI內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，在該酶切位點(diǎn)之后是由起始密碼子開始的A5/B5編碼序列的19個(gè)核苷酸；A8/B85’-TGTAGGATCCATGCAGGACAGCTTGCTGCTCT-3′(SEQ IDNO.24)，該引物含有BamHI內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，在該酶切位點(diǎn)之后是起始密碼子以及A8/B8編碼序列的19個(gè)核苷酸；3′端引物序列為A1/B15’-CCTCAAGCTTTTAATTACTTTCCTGCTCA-3’(SEQ ID NO.25)，該引物含有HindIII內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)、翻譯終止子和A1/B1的部分編碼序列；A2/B25’-CCTCAAGCTTTTAAGCAGAAACAGTGGAAGCG-3’(SEQ IDNO.26)，該引物含有HindIII內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)、翻譯終止子和A2/B2的部分編碼序列；A5/B55’-CCTCGTCGACTTAACTTGGGTAACCTGGAGTT-3’(SEQ IDNO.27)，該引物含有SalI內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)、翻譯終止子和A5/B5的部分編碼序列；A8/B85’-CCTCGTCGACTTATTCCATCATTTCTTCATCA-3’(SEQ IDNO.28)，該引物含有SalI內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)、翻譯終止子和A8/B8的部分編碼序列。
引物上的限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)對(duì)應(yīng)于細(xì)菌表達(dá)載體pQE-9(Qiagen Inc.，Chatsworth，CA)上的限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)，該質(zhì)粒載體編碼抗生素抗性(Ampr)、一個(gè)細(xì)菌復(fù)制起點(diǎn)(ori)、一個(gè)IPTG-可調(diào)啟動(dòng)子/操縱子(P/O)、一個(gè)核糖體結(jié)合位點(diǎn)(RBS)、一個(gè)6-組氨酸標(biāo)記物(6-His)以及限制性內(nèi)切酶克隆位點(diǎn)。
分別用各片段引物對(duì)應(yīng)的限制性內(nèi)切酶消化pQE-9載體及插入片段，隨后分別將插入片段連接到pQE-9載體并保持開放讀框在細(xì)菌RBS起始。隨后用連接混合物轉(zhuǎn)化購自Qiagen，商品名為M15/rep4的E.coli菌株，M15/rep4含有多拷貝的質(zhì)粒pREP4，其表達(dá)lacI阻遏物并攜帶卡那霉素抗性(Kanr)。在含有Amp和Kan的LB培養(yǎng)皿上篩選轉(zhuǎn)化子，抽提質(zhì)粒，分別用BamHI(A1/B1、A2/B2)和PstI(A5/B5、A8/B8)酶切鑒定插入片段大小及方向，并測(cè)序驗(yàn)證各cDNA片段已正確插入了載體。
在補(bǔ)加Amp(100μg/ml)和Kan(25μg/ml)的LB液體培養(yǎng)基中過夜培養(yǎng)(O/N)含所需構(gòu)建物的陽性轉(zhuǎn)化子克隆。過夜(O/N)培養(yǎng)物以1∶100-1∶250的稀釋率稀釋，然后接種到大體積培養(yǎng)基中，培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)至600光密度(OD600)為0.4-0.6時(shí)，加入IPTG(“異丙基硫代-β-D-半乳糖苷”)至終濃度為1mM。通過使lacI阻遏物失活，IPTG誘導(dǎo)啟動(dòng)P/O導(dǎo)致基因表達(dá)水平提高。繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞3-4小時(shí)，隨后離心(6000×g，20分鐘)。超聲裂解包涵體，收集細(xì)胞并將細(xì)胞沉淀溶于6M的鹽酸胍中。澄清后，通過在能使含6-His標(biāo)記物蛋白緊密結(jié)合的條件下，用鎳-螯合柱層析從溶液中純化溶解的HNRCR片段。用6M鹽酸胍(pH5.0)從柱中洗脫HNRCR?？捎脦追N方法從鹽酸胍中變性沉淀蛋白。或者使用透析步驟除去鹽酸胍，或者從鎳-螯合柱中分離出純化多肽，純化后的多肽可以結(jié)合到第二個(gè)柱中，該柱中具有遞減的線性鹽酸胍梯度。在結(jié)合到該柱時(shí)多肽變性，隨后用鹽酸胍(pH5.0)洗脫。最后，將可溶的多肽對(duì)含PBS進(jìn)行透析，然后將多肽保存在終濃度為10％(w/v)甘油的貯存液中。
用12％的SDS-PAGE膠進(jìn)行電泳檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)有與預(yù)計(jì)大小相近的條帶。
此外，用常規(guī)方法對(duì)各表達(dá)多肽的N端和C端各10個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的氨基酸進(jìn)行測(cè)序，發(fā)現(xiàn)與預(yù)計(jì)的序列一致。
實(shí)施例4HNRCR在真核細(xì)胞(CHO細(xì)胞株)中的表達(dá)在該實(shí)施例中，分別表達(dá)HNRCR的四個(gè)片段。將實(shí)施例1中獲得的cDNA序列A2/B2、A3/B3、A4/B4和A6/B6用對(duì)應(yīng)于該DNA序列的5′和3′端的PCR寡核苷酸引物進(jìn)行擴(kuò)增，獲得的cDNA作為插入片段。
PCR反應(yīng)中使用的5′寡核苷酸引物序列為A2/B25’-TGTAAAGCTTATGATTGCTAGGAGTGAGCATG-3′(SEQ IDNO.29)，該引物含有HindIII內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，在該酶切位點(diǎn)之后是起始密碼子以及A2/B2編碼序列的19個(gè)核苷酸；A3/B35’-TGTAAAGCTTATGCTTGACAACCTCTTACAGC-3′(SEQ IDNO.30)，該引物含有HindIII內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，在該酶切位點(diǎn)之后是起始密碼子以及A3/B3編碼序列的19個(gè)核苷酸；A4/B45’-TGTAAAGCTTATGTATGCTCTCTACCAGCGAC-3′(SEQ IDNO.31)，該引物含有HindIII內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，在該酶切位點(diǎn)之后是起始密碼子以及A4/B4編碼序列的19個(gè)核苷酸；A6/B65’-TGTAAAGCTTATGCGGAGCCACCTGCCCACGC-3′(SEQ IDNO.32)，該引物含有HindIII限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，在該酶切位點(diǎn)之后是起始密碼子以及A6/B6編碼序列的19個(gè)核苷酸；3′端引物序列為A2/B25’-CCTCGAGCTCTTAAGCAGAAACAGTGGAAGCG-3’(SEQ IDNO.33)，該引物含有SacI限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)、翻譯終止子和A2/B2的部分編碼序列；
A3/B35’-CCTCGAGCTCTTACTGTTCTTGTCTCTGCCGC-3’(SEQ IDNO.34)，該引物含有SacI限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)、翻譯終止子和A3/B3的部分編碼序列；A4/B45’-CCTCGAGCTCTTATGTTGCTCTTGGTGTCCCC-3’(SEQ IDNO.35)，該引物含有SacI限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)、翻譯終止子和A4/B4的部分編碼序列；A6/B65’-CCTCGAGCTCTTAAGATCTCTTCTCCACCTCC-3’(SEQ IDNO.36)，該引物含有SacI限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)、翻譯終止子和A6/B6的部分編碼序列；引物上的限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)對(duì)應(yīng)于CHO細(xì)胞表達(dá)載體pcDNA3上的限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)，該質(zhì)粒載體編碼抗生素抗性(Ampr和Neor)、一個(gè)噬菌體復(fù)制起點(diǎn)(fl ori)、一個(gè)病毒復(fù)制起點(diǎn)(SV40 ori)、一個(gè)T7啟動(dòng)子、一個(gè)病毒啟動(dòng)子(P-CMV)、一個(gè)Sp6啟動(dòng)子、一個(gè)SV40啟動(dòng)子、一個(gè)SV40加尾信號(hào)和相應(yīng)的polyA順序、一個(gè)BGH加尾信號(hào)和相應(yīng)的polyA順序。
分別用各片段引物對(duì)應(yīng)的限制性內(nèi)切酶消化pcDNA3載體及插入片段，隨后分別將插入片段連接到pcDNA3載體。隨后用連接混合物轉(zhuǎn)化E.coli DH5α菌株。在含有Amp的LB培養(yǎng)皿上篩選轉(zhuǎn)化子，在補(bǔ)加Amp(100μg/ml)的LB液體培養(yǎng)基中過夜培養(yǎng)(O/N)含所需構(gòu)建物的克隆。抽提質(zhì)粒，分別用BamHI(A2/B2)、XhoI(A3/B3)和ApaI(A4/B4、A6/B6)酶切鑒定插入片段大小及方向，并測(cè)序驗(yàn)證各cDNA片段已正確插入了載體。
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞是用脂轉(zhuǎn)染法，用Lipofectin試劑盒(GiBco Life)進(jìn)行，轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，經(jīng)2-3周的持續(xù)G418加壓篩選，收集細(xì)胞及細(xì)胞上清測(cè)定表達(dá)蛋白酶活力。去G418，連續(xù)傳代培養(yǎng)；對(duì)混合克隆細(xì)胞極限稀釋，選擇具有較高蛋白活性的細(xì)胞亞克隆。按常規(guī)方法大量培養(yǎng)上述陽性亞克隆。48小時(shí)后，開始收集細(xì)胞及上清，用超聲裂解方法破碎細(xì)胞。以含0.05％Triton的50mMTris·HCl(pH7.6)溶液為平衡液及洗脫液，用經(jīng)預(yù)平衡的Superdex G-75柱收集上述多肽的活性峰。再用50mMTris·HCl(pH8.0)平衡的DEAE-Sepharose柱，以含0-1M NaCl的50mMTris·HCl(pH8.0)溶液為洗脫液進(jìn)行梯度洗脫，收集上述多肽的活性峰。然后以PBS(pH7.4)為透析液對(duì)表達(dá)多肽溶液進(jìn)行透析。最后凍干保存。
用12％的SDS-PAGE膠進(jìn)行電泳檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)有與預(yù)計(jì)大小相近的條帶。
此外，用常規(guī)方法對(duì)各表達(dá)多肽的N端和C端各10個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的氨基酸進(jìn)行測(cè)序，發(fā)現(xiàn)與預(yù)計(jì)的序列一致。
實(shí)施例5制備抗體將實(shí)施例3和4獲得的蛋白片段用來免疫動(dòng)物以產(chǎn)生抗體，具體如下。如上獲得的多肽片段用層析法進(jìn)行分離后備用。也可用SDS-PAGE凝膠電泳法進(jìn)行分離，將電泳條帶從凝膠中切下，并用等體積的完全Freund’s佐劑乳化。用50-100μg/0.2ml乳化過的蛋白，對(duì)小鼠進(jìn)行腹膜內(nèi)注射。14天后，用非完全Freund’s佐劑乳化的同樣抗原，對(duì)小鼠以50-100μg/0.2ml的劑量進(jìn)行腹膜內(nèi)注射以加強(qiáng)免疫。每隔14天進(jìn)行一次加強(qiáng)免疫，至少進(jìn)行三次。獲得的抗血清的特異反應(yīng)活性用它在體外沉淀各對(duì)應(yīng)翻譯產(chǎn)物的能力加以評(píng)估。
在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
序列表(1)一般信息(i)申請(qǐng)人上海新黃浦復(fù)旦基因工程有限公司(ii)發(fā)明名稱新的人核受體協(xié)阻抑物編碼序列、其編碼的多肽及制法(iii)序列數(shù)目36(2)SEQ ID NO.1的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.1GTAGATGGTT TCCTAGACAC ATG23(2)SEQ ID NO.2的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.2CCATTGCTA GGAGTGAGCAT GAG23(2)SEQ ID NO.3的信息(i)序列特征
(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.3TCTTGACAAC CTCTTACAGC AGC23(2)SEQ ID NO.4的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.4GCTATGCTCT CTACCAGCGA CAC23(2)SEQ ID NO.5的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.5GATGTCAATG AGGGAGTCTC CTG23(2)SEQ ID NO.6的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸
(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.6ATCGGAGCCA CCTGCCCACG CAC23(2)SEQ ID NO.7的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.7GTGAACAGCA GCAGCTAGAG CAG23(2)SEQ ID NO.8的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.8CAGGACAGCT TGCTGCTCTT GTC23(2)SEQ ID NO.9的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.9AGAACAGGAT CTGGGAGCGA GAG23(2)SEQ ID NO.10的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.10CATTACTTTC CTGCTCAGAG AGC23(2)SEQ ID NO.11的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.11TGAGCAGAAA CAGTGGAAGC GAC23(2)SEQ ID NO.12的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.12TCTGTTCTTG TCTCTGCCGC TGC23(2)SEQ ID NO.13的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.13TTGTTGCTCT TGGTGTCCCC TGC23(2)SEQ ID NO.14的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.14ACTTGGGTAA CCTGGAGTTG GTG23(2)SEQ ID NO.15的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.15ACAGATCTCT TCTCCACCTC CAG23(2)SEQ ID NO.16的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.16GGTGAAGAAT GAAGGCAAGT AGC23(2)SEQ ID NO.17的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.17ACTTCCATCA TTTCTTCATC ATC23(2)SEQ ID NO.18的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度23堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.18AGTGTGCGTA ACAGTGAGGT ATG23(2)SEQ ID NO.19的信息(i)序列特征
(A)長(zhǎng)度7900bp(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型cDNA(xi)序列描述SEQ ID NO.191GTAGATGGTT TCCTAGACAC ATGATTGTTT ATTGGCGTTG ATCTCGCAGT CTGGTGAGAA61 CTTCTTTACT GATAATGTCA AGTTCAGTTT ATCCTCCCAA CCAAGGAGCA TTCAGCACAG121 AACAAAGTCG TTCTCCTCCT CACTCTGTAA AGTATACGTT TCCCAGCACC CACCACCAGC181 AGGATCCAGC ATTCGGAGGC AAACATGAAG CTCCATCCTC TCCAATTTCG GGGCAACCAT241 GTGGAGATGA TCAAAATGCT TCACCTTCAA AACTCTCAAA GGAAGAGTTA ATACAGAGTA301 TGGATCGTGT AGATCGAGAA ATTGCAAAAG TAGAACAGCA GATCCTTAAA CTGAAAAAGA361 AACAACAACA GCTTGAAGAA GAGGCAGCTA AACCTCCTGA GCCTGAGAAG CCCGTGTCCC421 CTCCTCCTGT GGAGCAGAAA CACCGCAGTA TTGTCCAAAT TATTTATGAT GAGAATCGGA481 AAAAAGCAGA AGAAGCTCAT AAAATTTTTG AAGGTCTTGG CCCAAAAGTT GAACTGCCAC541 TGTATAACCA GCCATCAGAT ACCAAGGTGT ACCATGAGAA CATCAAGACA AACCAGGTGA601 TGAGGAAAAA ACTCATTTTA TTTTTTAAAA GAAGAAATCA TGCAAGAAAA CAAAGGGAAC661 AAAAAATCTG CCAGCGTTAT GATCAGCTCA TGGAGGCATG GGAGAAAAAA GTGGACAGAA721 TAGAAAATAA TCCTCGGAGG AAAGCTAAAG AAAGCAAAAC AAGGGAATAC TATGAAAAGC781 AGTTTCCAGA AATTCGAAAA CAAAGAGAAC AGCAAGAAAG ATTTCAGCGA GTTGGGCAGA841 GGGGAGCTGG TCTTTCAGCC ACCATTGCTA GGAGTGAGCA TGAGATTTCT GAAATTATTG901 ATGGGCTCTC TGAGCAGGAA AGTAATGAGA AACAAATGCG GCAGCTCTCT GTGATTCCAC961 CTATGATGTT TGATGCAGAA CAAAGACGAG TCAAGTTCAT TAACATGAAT GGGCTTATGG1021 AGGACCCTAT GAAAGTGTAT AAAGATAGGC AGTTTATGAA TGTTTGGACT GACCATGAAA1081 AGGAGATCTT TAAGGACAAG TTTATCCAGC ATCCAAAAAA CTTTGGACTA ATTGCATCAT1141 ACTTGGAGAG GAAGAGTGTT CCTGATTGTG TTTTGTATTA CTATTTAACC AAGAAAAATG1201 AGAATTATAA AGCCCTCGTC AGAAGGAATT ATGGGAAACG CAGAGGCAGA AACCAGCAAA1261 TTGCTCGACC CTCGCAAGAA GAAAAAGTAG AAGAAAAAGA AGAGGATAAA GCAGAAAAAA1321 CAGAAAAAAA AGAAGAAGAA AAGAAAGATG AAGAGGAAAA AGATGAAAAA GAAGACTCCA1381 AAGAAAATAC CAAGGAAAAG GACAAGATAG ATGGTACAGC AGAAGAAACT GAGGAAAGAG1441 AGCAAGCCAC ACCCCGGGGG CGAAAGACTG CCAACAGTCA GGGCCGCCGT AAGGGCCGGA1501 TCACCAGGTC CATGACAAAC GAAGCTGCAG CTGCCAGTGC TGCAGCCGCA GCGGCTACTG1561 AAGAGCCCCC ACCACCTCTG CCACCGCCAC CAGAACCCAT TTCTACAGAG CCTGTGGAGA1621 CCTCTCGATG GACAGAAGAA GAAATGGAAG TTGCTAAAAA AGGTCTAGTA GAACATGGTC1681 GTAACTGGGC AGCAATTGCT AAAATGGTGG GAACGAAAAG TGAAGCTCAA TGTAAAAACT1741 TCTATTTTAA CTATAAAAGG CGACACAATC TTGACAACCT CTTACAGCAG CATAAACAGA1801 AAACTTCACG AAAACCTCGT GAAGAGCGAG ATGTGTCTCA ATGTGAAAGT GTCGCTTCCA1861 CTGTTTCTGC TCAGGAGGAT GAAGATATTG AAGCCTCCAA TGAAGAAGAA AATCCAGAAG1921 ACAGCGAAGG TGCAGAAAAT AGTTCTGATA CAGAAAGTGC TCCTTCTCCT TCACCAGTTG1981 AAGCTGTCAA GCCCAGCGAG GACAGTCCTG AAAATGCTAC TTCTCGAGGA AACACAGAAC2041 CTGCGGTTGA GCTTGAGCCC ACCACGGAAA CTGCACCCAG TACATCTCCC TCCTTAGCAG2101 TTCCAAGTAC AAAACCAGCT GAAGATGAAA GTGTGGAGAC CCAGGTGAAT GACAGCATCA2161 GTGCTGAGAC AGCAGAGCAG ATGGATGTAG ATCAGCAGGA GCACAGTGCT GAAGAGGGTT2221 CTGTTTGTGA TCCCCCACCC GCTACCAAAG CTGACTCTGT GGACGTTGAA GTGAGGGTGC2281 CAGAAAACCA TGCATCTAAA GTTGAAGGTG ATAATACCAA AGAAAGAGAC TTGGATAGAG2341 CCAGTGAGAA GGTGGAACCT AGAGATGAAG ATTTGGTGGT AGCTCAGCAA ATAAATGCCC2401 AAAGGCCCGA GCCCCAGTCA GACAATGATT CCAGTGCCAC GTGCAGCGCT GATGAGGATG2461 TGGATGGAGA GCCAGAGAGG CAGAGAATGT TTCCTATGGA CTCAAAGCCT TCACTGTTAA2521 ACCCCACTGG ATCTATACTC GTCTCATCTC CGTTAAAACC AAATCCACTG GATCTGCCAC2581 AGCTTCAGCA TCGAGCTGCT GTTATCCCAC CAATGGTATC CTGCACCCCA TGTAACATAC2641 CAATTGGAAC CCCAGTGAGC GGCTATGCTC TCTACCAGCG ACACATTAAA GCAATGCATG2701 AGTCAGCACT CCTGGAGGAG CAGCGGCAGA GACAAGAACA GATAGATTTG GAATGTAGAA2761 GTTCTACAAG TCCATGTGGC ACATCCAAGA GTCCAAACAG AGAGTGGGAA GTCCTTCAGC2821 CTGCTCCACA TCAAGTGATA ACTAATCTCC CTGAAGGCGT TCGGCTTCCG ACAACTCGAC2881 CAACCAGGCC ACCGCCCCCT CTCATCCCGT CATCCAAAAC CACAGTGGCT TCAGAAAAAC2941 CATCTTTTAT AATGGGAGGC TCCATCTCAC AGGGAACACC AGGCACTTAT TTGACTTCTC3001 ATAATCAGGC TTCCTACACT CAAGAAACAC CCAAGCCGTC AGTGGGATCT ATCTCTCTTG3061 GACTGCCACG GCAACAGGAA TCTGCCAAAT CAGCTACTTT GCCCTACATC AAGCAGGAAG3121 AATTTTCTCC CCGAAGCCAA AACTCACAAC CTGAGGGTCT GTTGGTCAGG GCCCAACATG3181 AAGGTGTAGT CAGAGGTACC GCAGGAGCCA TACAAGAAGG AAGTATAACT CGGGGAACTC3241 CAACCAGCAA AATTTCAGTG GAGAGCATTC CATCCCTACG GGGCTCTATC ACTCAGGGCA3301 CCCCGGCTCT GCCCCAGACT GGCATACCAA CAGAGGCTTT GGTGAAGGGG TCCATTTCGA3361 GAATGCCCAT TGAAGACAGC AGTCCTGAGA AAGGCAGAGA GGAAGCTGCA TCCAAAGGCC3421 ATGTTATTTA TGAAGGCAAA AGTGGACATA TCTTGTCATA TGATAATATT AAGAATGCCC3481 GAGAAGGGAC TAGGAGTCCA AGAACAGCTC ATGAAATCAG TTTAAAGAGA AGCTATGAAT3541 CAGTGGAAGG AAATATAAAG CAAGGGATGT CAATGAGGGA GTCTCCTGTA TCAGCACCGT3601 TAGAGGGGCT GATATGCCGA GCATTACCCA GGGGGAGTCC TCATTCTGAC CTCAAAGAAA3661 GGACTGTATT GTCTGGCTCC ATAATGCAGG GGACACCAAG AGCAACAACT GAAAGCTTTG3721 AAGATGGCCT TAAATATCCC AAACAAATTA AAAGGGAAAG TCCTCCCATA CGAGCATTTG3781 AAGGTGCCAT TACCAAAGGA AAACCATATG ATGGCATCAC CACCATCAAA GAAATGGGGC3841 GTTCCATTCA TGAGATTCCA AGGCAAGATA TTTTAACTCA GGAAAGTCGG AAAACTCCAG3901 AAGTGGTCCA GAGCACACGG CCGATAATTG AGGGTTCCAT TTCCCAGGGC ACACCAATAA3961 AGTTTGACAA CAACTCAGGT CAATCTGCCA TCAAACACAA TGTCAAATCC TTAATCACGG4021 GGCCTAGCAA ACTATCCCGT GGAATGCCTC CGCTGGAAAT TGTGCCAGAG AACATAAAAG4081 TGGTAGAACG GGGAAAATAT GAGGATGTGA AAGCAGGCGA GACCGTGCGT TCCCGGCACA4141 CGTCAGTGGT AAGCTCTGGC CCCTCCGTTC TTAGGTCCAC ACTGCATGAA GCTCCCAAAG4201 CACAACTGAG CCCTGGGATT TATGATGACA CCAGTGCACG GAGGACCCCT GTGAGTTATC4261 AAAACACCAT GTCCAGAGGC TCACCCATGA TGAACAGAAC TTCTGATGTT TCTTCTAACA4321 AGTCTACCAA TCATGAAAGG AAATCGACAC TGACCCCTAC CCAGAGGGAA AGTATCCCAG4381 CGAAGTCTCC AGTGCCTGGG GTGGACCCTG TCGTGAGCCA CAGTCCGTTT GATCCCCATC4441 ACAGAGGCAG CACTGCAGGC GAGGTTTATC GGAGCCACCT GCCCACGCAC TTGGATCCAG4501 CCATGCCTTT TCACAGGGCT TTGGATCCTG CGGCTGCTTA CCTGTTTCAG AGACAGCTTT4561 CACCAACTCC AGGTTACCCA AGTCAGTATC AGCTTTACGC AATGGAGAAC ACAAGACAGA4621 CAATCTTAAA TGATTACATT ACCTCACAAC AGATGCAAGT GAACTTGCGT CCAGATGTGG4681 CCAGAGGACT CTCCCCAAGA GAGCAGCCAC TGGGTCTCCC ATACCCAGCA ACGAGAGGAA4741 TCATTGACCT GACCAATATG CCTCCAACAA TTTTAGTGCC TCATCCAGGG GGAACAAGCA4801 CTCCTCCCAT GGACAGAATC ACTTATATTC CTGGTACACA GATTACTTTC CCTCCCAGGC4861 CGTACAACTC TGCTTCCATG TCTCCAGGAC ACCCAACACA CCTTGCAGCT GCTGCAAGTG4921 CTGAGAGGGA ACGGGAACGG GAGCGGGAGA AGGAGCGGGA GCGGGAACGG ATTGCTGCAG4981 CTTCCTCCGA CCTCTACCTG CGGCCAGGCT CAGAACAGCC TGGCCGACCT GGCAGTCATG5041 GATATGTTCG CTCCCCTTCC CCTTCAGTAA GAACTCAGGA GACCATGTTG CAACAGAGAC5101 CCAGTGTTTT CCAAGGAACC AATGGAACCA GTGTAATCAC ACCTTTGGAT CCAACTGCTC5161 AGCTACGAAT CATGCCACTG CCTGCTGGGG GCCCTTCAAT AAGCCAAGGC CTGCCAGCCT5221 CCCGTTACAA CACTGCTGCG GATGCCCTGG CTGCTCTTGT GGATGCTGCA GCTTCTGCAC5281 CCCAGATGGA TGTGTCCAAA ACAAAAGAGA GTAAGCATGA AGCTGCCAGG TTAGAAGAAA5341 ATTTGAGAAG CAGGTCAGCA GCAGTTAGTG AACAGCAGCA GCTAGAGCAG AAAACCCTGG5401 AGGTGGAGAA GAGATCTGTT CAGTGTTTAT ACACTTCTTC AGCCTTTCCA AGTGGCAAGC5461 CCCAGCCTCA TTCTTCAGTA GTTTATTCTG AGGCTGGGAA AGATAAAGGG CCTCCTCCAA5521 AATCCAGATA TGAGGAAGAG CTAAGGACCA GAGGGAAGAC TACCATTACT GCAGCTAACT5581 TCATAGACGT GATCATCACC CGGCAAATTG CCTCGGACAA GGATGCGAGG GAACGTGGCT5641 CTCAAAGTTC AGACTCTTCT AGTAGCTTAT CTTCTCACAG GTATGAAACA CCTAGCGATG5701 CTATTGAGGT GATAAGTCCT GCCAGCTCAC CTGCGCCACC CCAGGAGAAA CTGCAGACCT5761 ATCAGCCAGA GGTTGTTAAG GCAAATCAAG CGGAAAATGA TCCTACCAGA CAATATGAAG5821 GACCATTACA TCACTATCGA CCACAGCAGG AATCACCATC TCCCCAACAA CAGCTGCCCC5881 CTTCTTCACA GGCAGAGGGA ATGGGGCAAG TGCCCAGGAC CCATCGGCTG ATCACACTTG5941 CTGATCACAT CTGTCAAATT ATCACACAAG ATTTTGCTAG AAATCAAGTT TCCTCGCAGA6001 CTCCCCAGCA GCCTCCTACT TCTACATTCC AGAACTCACC TTCTGCTTTG GTATCTACAC6061 CTGTGAGGAC TAAAACATCA AACCGTTACA GCCCAGAATC CCAGGCTCAG TCTGTCCATC6121 ATCAAAGACC AGGTTCAAGG GTCTCTCCAG AAAATCTTGT GGACAAATCC AGGGGAAGTA6181 GGCCTGGAAA ATCCCCAGAG AGGAGTCACG TCTCTTCGGA GCCCTACGAG CCCATCTCCC6241 CACCCCAGGT TCCGGTTGTG CATGAGAAAC AGGACAGCTT GCTGCTCTTG TCTCAGAGGG6301 GCGCAGAGCC TGCAGAGCAG AGGAATGATG CCCGCTCACC AGGGAGTATA AGCTACTTGC6361 CTTCATTCTT CACCAAGCTT GAAAATACAT CACCCATGGT TAAATCAAAG AAGCAGGAGA6421 TTTTTCGTAA GTTGAACTCC TCTGGTGGAG GTGACTCTGA TATGGCAGCT GCTCAGCCAG6481 GAACTGAGAT CTTTAATCTG CCAGCAGTTA CTACGTCAGG CTCAGTTAGC TCTAGAGGCC6541 ATTCTTTTGC TGATCCTGCC AGTAATCTTG GGCTGGAAGA CATTATCAGG AAGGCTCTCA6601 TGGGAAGCTT TGATGACAAA GTTGAGGATC ATGGAGTTGT CATGTCCCAG CCTATGGGAG6661 TAGTGCCTGG TACTGCCAAC ACCTCAGTTG TGACCAGTGG TGAGACACGA AGAGAGGAAG6721 GGGACCCATC ACCTCATTCA GGAGTTTGCA AACCAAAGCT GATCAGCAAG TCAAACAGCA6781 GGAAATCTAA GTCTCCTATA CCTGGGCAAG GCTACTTAGG AACGGAACGG CCCTCTTCAG6841 TCTCCTCTGT ACATTCAGAA GGGGATTACC ATAGGCAGAC GCCAGGGTGG GCCTGGGAAG6901 ACAGGCCCTC TTCAACAGGC TCAACTCAGT TTCCTTATAA CCCTCTGACT ATGCGGATGC6961 TCAGCAGTAC TCCACCAACA CCGATTGCAT GTGCTCCCTC TGCGGTGAAC CAAGCAGCTC7021 CTCACCAACA GAACAGGATC TGGGAGCGAG AGCCTGCCCC ACTGCTCTCA GCACAGTACG7081 AGACCCTGTC GGATAGTGAT GACTGAACTG CACAAAGTGA GGGGAACAGG GTGCAGGAGA7141 GGGATCTCTA GTTTTTGTGG TTTAATTTTT AGTAGCAGGT CAAAAACCTG CCCTCCTGTG7201 ACTTATTCCC TGAGACTTTT CAGGAGAGCC AGCCCACAGA TGATGAAGAA ATGATGGAAG7261 TTCATTTGGA GAGTCAAATG GGAAAAAAAC AAACAAAAAA CTGCCTTTGA TACAGGCAAT7321 TCAGTGGACT ATAATAATAG TGGAGGGTTG AGATGTAGAG TTTTTAAAAA GTGAACAGTT7381 GCTGTTCTTA CATCTGTAAA GAAAACCATA ATGTCTTTAA ATCACTCTTC TGTAAATAGA7441 TGACCTTTTT GCAGTGTATA TCCCCTTGCT GTAGTATCTG GTGTACTTAT GTTCAAATCA7501 GCGCATCAAC TTTGGGGGTG ATTTTTAAAA ATCTTTTTGT CTATCTATCT TTTTAACCCT7561 AGCCTTCTAA ACAACCTCAT ACAGCCCAGT TACATAATGT TGGCTGTCAC GGGCATTGTA7621 CTTTTATCTG ATATTGTTTC CTCTAAATTC AGCTTTCCAG TGATGTTTAA AATCTTGTGA7681 AAATGTTTAG ATTTTTAACA CAGACCCTGT CATAAAATCT GTACATTAGG GTCAAAAGGT7741 AAAAGTAACA AATTCTGCCA TATTGTAAAT TTCCAGTGCA GGCTTTAATT TTTTTTTTTC7801 ATTAGTAGCA CTGAAAAAAT ATTACTGCAT GGGTATGTTC TAGTTCAGTT TATAAAGTTT7861 TAAAGGCTTA TTTGAGGCAT ACCTCACTGT TACGCACACT(2)SEQ ID NO.20的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度2343個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型多肽(xi)序列描述SEQ ID NO.201 Met Ser Ser Ser Val Tyr Pro Pro Asn Gln Gly Ala Phe Ser Thr16 Glu Gln Ser Arg Ser Pro Pro His Ser Val Lys Tyr Thr Phe Pro31 Ser Thr His His Gln Gln Asp Pro Ala Phe Gly Gly Lys His Glu46 Ala Pro Ser Ser Pro Ile Ser Gly Gln Pro Cys Gly Asp Asp Gln61 Asn Ala Ser Pro Ser Lys Leu Ser Lys Glu Glu Leu Ile Gln Ser76 Met Asp Arg Val Asp Arg Glu Ile Ala Lys Val Glu Gln Gln Ile91 Leu Lys Leu Lys Lys Lys Gln Gln Gln Leu Glu Glu Glu Ala Ala106 Lys Pro Pro Glu Pro Glu Lys Pro Val Ser Pro Pro Pro Val Glu121 Gln Lys His Arg Ser Ile Val Gln Ile Ile Tyr Asp Glu Asn Arg136 Lys Lys Ala Glu Glu Ala His Lys Ile Phe Glu Gly Leu Gly Pro151 Lys Val Glu Leu Pro Leu Tyr Asn Gln Pro Ser Asp Thr Lys Val166 Tyr His Glu Asn Ile Lys Thr Asn Gln Val Met Arg Lys Lys Leu181 Ile Leu Phe Phe Lys Arg Arg Asn His Ala Arg Lys Gln Arg Glu196 Gln Lys Ile Cys Gln Arg Tyr Asp Gln Leu Met Glu Ala Trp Glu211 Lys Lys Val Asp Arg Ile Glu Asn Asn Pro Arg Arg Lys Ala Lys226 Glu Ser Lys Thr Arg Glu Tyr Tyr Glu Lys Gln Phe Pro Glu Ile241 Arg Lys Gln Arg Glu Gln Gln Glu Arg Phe Gln Arg Val Gly Gln256 Arg Gly Ala Gly Leu Ser Ala Thr Ile Ala Arg Ser Glu His Glu271 Ile Ser Glu Ile Ile Asp Gly Leu Ser Glu Gln Glu Ser Asn Glu286 Lys Gln Met Arg Gln Leu Ser Val Ile Pro Pro Met Met Phe Asp301 Ala Glu Gln Arg Arg Val Lys Phe Ile Asn Met Asn Gly Leu Met316 Glu Asp Pro Met Lys Val Tyr Lys Asp Arg Gln Phe Met Asn Val331 Trp Thr Asp His Glu Lys Glu Ile Phe Lys Asp Lys Phe Ile Gln346 His Pro Lys Asn Phe Gly Leu Ile Ala Ser Tyr Leu Glu Arg Lys361 Ser Val Pro Asp Cys Val Leu Tyr Tyr Tyr Leu Thr Lys Lys Asn376 Glu Asn Tyr Lys Ala Leu Val Arg Arg Asn Tyr Gly Lys Arg Arg391 Gly Arg Asn Gln Gln Ile Ala Arg Pro Ser Gln Glu Glu Lys Val406 Glu Glu Lys Glu Glu Asp Lys Ala Glu Lys Thr Glu Lys Lys Glu421 Glu Glu Lys Lys Asp Glu Glu Glu Lys Asp Glu Lys Glu Asp Ser436 Lys Glu Asn Thr Lys Glu Lys Asp Lys Ile Asp Gly Thr Ala Glu451 Glu Thr Glu Glu Arg Glu Gln Ala Thr Pro Arg Gly Arg Lys Thr466 Ala Asn Ser Gln Gly Arg Arg Lys Gly Arg Ile Thr Arg Ser Met481 Thr Asn Glu Ala Ala Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Ala Ala Thr496 Glu Glu Pro Pro Pro Pro Leu Pro Pro Pro Pro Glu Pro Ile Ser511 Thr Glu Pro Val Glu Thr Ser Arg Trp Thr Glu Glu Glu Met Glu526 Val Ala Lys Lys Gly Leu Val Glu His Gly Arg Asn Trp Ala Ala541 Ile Ala Lys Met Val Gly Thr Lys Ser Glu Ala Gln Cys Lys Asn556 Phe Tyr Phe Asn Tyr Lys Arg Arg His Asn Leu Asp Asn Leu Leu571 Gln Gln His Lys Gln Lys Thr Ser Arg Lys Pro Arg Glu Glu Arg586 Asp Val Ser Gln Cys Glu Ser Val Ala Ser Thr Val Ser Ala Gln601 Glu Asp Glu Asp Ile Glu Ala Ser Asn Glu Glu Glu Asn Pro Glu616 Asp Ser Glu Gly Ala Glu Asn Ser Ser Asp Thr Glu Ser Ala Pro631 Ser Pro Ser Pro Val Glu Ala Val Lys Pro Ser Glu Asp Ser Pro646 Glu Asn Ala Thr Ser Arg Gly Asn Thr Glu Pro Ala Val Glu Leu661 Glu Pro Thr Thr Glu Thr Ala Pro Ser Thr Ser Pro Ser Leu Ala676 Val Pro Ser Thr Lys Pro Ala Glu Asp Glu Ser Val Glu Thr Gln691 Val Asn Asp Ser Ile Ser Ala Glu Thr Ala Glu Gln Met Asp Val706 Asp Gln Gln Glu His Ser Ala Glu Glu Gly Ser Val Cys Asp Pro721 Pro Pro Ala Thr Lys Ala Asp Ser Val Asp Val Glu Val Arg Val736 Pro Glu Asn His Ala Ser Lys Val Glu Gly Asp Asn Thr Lys Glu751 Arg Asp Leu Asp Arg Ala Ser Glu Lys Val Glu Pro Arg Asp Glu766 Asp Leu Val Val Ala Gln Gln Ile Asn Ala Gln Arg Pro Glu Pro781 Gln Ser Asp Asn Asp Ser Ser Ala Thr Cys Ser Ala Asp Glu Asp796 Val Asp Gly Glu Pro Glu Arg Gln Arg Met Phe Pro Met Asp Ser811 Lys Pro Ser Leu Leu Asn Pro Thr Gly Ser Ile Leu Val Ser Ser826 Pro Leu Lys Pro Asn Pro Leu Asp Leu Pro Gln Leu Gln His Arg841 Ala Ala Val Ile Pro Pro Met Val Ser Cys Thr Pro Cys Asn Ile856 Pro Ile Gly Thr Pro Val Ser Gly Tyr Ala Leu Tyr Gln Arg His871 Ile Lys Ala Met His Glu Ser Ala Leu Leu Glu Glu Gln Arg Gln886 Arg Gln Glu Gln Ile Asp Leu Glu Cys Arg Ser Ser Thr Ser Pro901 Cys Gly Thr Ser Lys Ser Pro Asn Arg Glu Trp Glu Val Leu Gln916 Pro Ala Pro His Gln Val Ile Thr Asn Leu Pro Glu Gly Val Arg931 Leu Pro Thr Thr Arg Pro Thr Arg Pro Pro Pro Pro Leu Ile Pro946 Ser Ser Lys Thr Thr Val Ala Ser Glu Lys Pro Ser Phe Ile Met961 Gly Gly Ser Ile Ser Gln Gly Thr Pro Gly Thr Tyr Leu Thr Ser976 His Asn Gln Ala Ser Tyr Thr Gln Glu Thr Pro Lys Pro Ser Val991 Gly Ser Ile Ser Leu Gly Leu Pro Arg Gln Gln Glu Ser Ala Lys1006 Ser Ala Thr Leu Pro Tyr Ile Lys Gln Glu Glu Phe Ser Pro Arg1021 Ser Gln Asn Ser Gln Pro Glu Gly Leu Leu Val Arg Ala Gln His1036 Glu Gly Val Val Arg Gly Thr Ala Gly Ala Ile Gln Glu Gly Ser1051 Ile Thr Arg Gly Thr Pro Thr Ser Lys Ile Ser Val Glu Ser Ile1066 Pro Ser Leu Arg Gly Ser Ile Thr Gln Gly Thr Pro Ala Leu Pro1081 Gln Thr Gly Ile Pro Thr Glu Ala Leu Val Lys Gly Ser Ile Ser1096 Arg Met Pro Ile Glu Asp Ser Ser Pro Glu Lys Gly Arg Glu Glu1111 Ala Ala Ser Lys Gly His Val Ile Tyr Glu Gly Lys Ser Gly His1126 Ile Leu Ser Tyr Asp Asn Ile Lys Asn Ala Arg Glu Gly Thr Arg1141 Ser Pro Arg Thr Ala His Glu Ile Ser Leu Lys Arg Ser Tyr Glu1156 Ser Val Glu Gly Asn Ile Lys Gln Gly Met Ser Met Arg Glu Ser1171 Pro Val Ser Ala Pro Leu Glu Gly Leu Ile Cys Arg Ala Leu Pro1186 Arg Gly Ser Pro His Ser Asp Leu Lys Glu Arg Thr Val Leu Ser1201 Gly Ser Ile Met Gln Gly Thr Pro Arg Ala Thr Thr Glu Ser Phe1216 Glu Asp Gly Leu Lys Tyr Pro Lys Gln Ile Lys Arg Glu Ser Pro1231 Pro Ile Arg Ala Phe Glu Gly Ala Ile Thr Lys Gly Lys Pro Tyr1246 Asp Gly Ile Thr Thr Ile Lys Glu Met Gly Arg Ser Ile His Glu1261 Ile Pro Arg Gln Asp Ile Leu Thr Gln Glu Ser Arg Lys Thr Pro1276 Glu Val Val Gln Ser Thr Arg Pro Ile Ile Glu Gly Ser Ile Ser1291 Gln Gly Thr Pro Ile Lys Phe Asp Asn Asn Ser Gly Gln Ser Ala1306 Ile Lys His Asn Val Lys Ser Leu Ile Thr Gly Pro Ser Lys Leu1321 Ser Arg Gly Met Pro Pro Leu Glu Ile Val Pro Glu Asn Ile Lys1336 Val Val Glu Arg Gly Lys Tyr Glu Asp Val Lys Ala Gly Glu Thr1351 Val Arg Ser Arg His Thr Ser Val Val Ser Ser Gly Pro Ser Val1366 Leu Arg Ser Thr Leu His Glu Ala Pro Lys Ala Gln Leu Ser Pro1381 Gly Ile Tyr Asp Asp Thr Ser Ala Arg Arg Thr Pro Val Ser Tyr1396 Gln Asn Thr Met Ser Arg Gly Ser Pro Met Met Asn Arg Thr Ser1411 Asp Val Ser Ser Asn Lys Ser Thr Asn His Glu Arg Lys Ser Thr1426 Leu Thr Pro Thr Gln Arg Glu Ser Ile Pro Ala Lys Ser Pro Val1441 Pro Gly Val Asp Pro Val Val Ser His Ser Pro Phe Asp Pro His1456 His Arg Gly Ser Thr Ala Gly Glu Val Tyr Arg Ser His Leu Pro1471 Thr His Leu Asp Pro Ala Met Pro Phe His Arg Ala Leu Asp Pro1486 Ala Ala Ala Tyr Leu Phe Gln Arg Gln Leu Ser Pro Thr Pro Gly1501 Tyr Pro Ser Gln Tyr Gln Leu Tyr Ala Met Glu Asn Thr Arg Gln1516 Thr Ile Leu Asn Asp Tyr Ile Thr Ser Gln Gln Met Gln Val Asn1531 Leu Arg Pro Asp Val Ala Arg Gly Leu Ser Pro Arg Glu Gln Pro1546 Leu Gly Leu Pro Tyr Pro Ala Thr Arg Gly Ile Ile Asp Leu Thr1561 Asn Met Pro Pro Thr Ile Leu Val Pro His Pro Gly Gly Thr Ser1576 Thr Pro Pro Met Asp Arg Ile Thr Tyr Ile Pro Gly Thr Gln Ile1591 Thr Phe Pro Pro Arg Pro Tyr Asn Ser Ala Ser Met Ser Pro Gly1606 His Pro Thr His Leu Ala Ala Ala Ala Ser Ala Glu Arg Glu Arg1621 Glu Arg Glu Arg Glu Lys Glu Arg Glu Arg Glu Arg Ile Ala Ala1636 Ala Ser Ser Asp Leu Tyr Leu Arg Pro Gly Ser Glu Gln Pro Gly1651 Arg Pro Gly Ser His Gly Tyr Val Arg Ser Pro Ser Pro Ser Val1666 Arg Thr Gln Glu Thr Met Leu Gln Gln Arg Pro Ser Val Phe Gln1681 Gly Thr Asn Gly Thr Ser Val Ile Thr Pro Leu Asp Pro Thr Ala1696 Gln Leu Arg Ile Met Pro Leu Pro Ala Gly Gly Pro Ser Ile Ser1711 Gln Gly Leu Pro Ala Ser Arg Tyr Asn Thr Ala Ala Asp Ala Leu1726 Ala Ala Leu Val Asp Ala Ala Ala Ser Ala Pro Gln Met Asp Val1741 Ser Lys Thr Lys Glu Ser Lys His Glu Ala Ala Arg Leu Glu Glu1756 Asn Leu Arg Ser Arg Ser Ala Ala Val Ser Glu Gln Gln Gln Leu1771 Glu Gln Lys Thr Leu Glu Val Glu Lys Arg Ser Val Gln Cys Leu1786 Tyr Thr Ser Ser Ala Phe Pro Ser Gly Lys Pro Gln Pro His Ser1801 Ser Val Val Tyr Ser Glu Ala Gly Lys Asp Lys Gly Pro Pro Pro1816 Lys Ser Arg Tyr Glu Glu Glu Leu Arg Thr Arg Gly Lys Thr Thr1831 Ile Thr Ala Ala Asn Phe Ile Asp Val Ile Ile Thr Arg Gln Ile1846 Ala Ser Asp Lys Asp Ala Arg Glu Arg Gly Ser Gln Ser Ser Asp1861 Ser Ser Ser Ser Leu Ser Ser His Arg Tyr Glu Thr Pro Ser Asp1876 Ala Ile Glu Val Ile Ser Pro Ala Ser Ser Pro Ala Pro Pro Gln1891 Glu Lys Leu Gln Thr Tyr Gln Pro Glu Val Val Lys Ala Asn Gln1906 Ala Glu Asn Asp Pro Thr Arg Gln Tyr Glu Gly Pro Leu His His1921 Tyr Arg Pro Gln Gln Glu Ser Pro Ser Pro Gln Gln Gln Leu Pro1936 Pro Ser Ser Gln Ala Glu Gly Met Gly Gln Val Pro Arg Thr His1951 Arg Leu Ile Thr Leu Ala Asp His Ile Cys Gln Ile Ile Thr Gln1966 Asp Phe Ala Arg Asn Gln Val Ser Ser Gln Thr Pro Gln Gln Pro1981 Pro Thr Ser Thr Phe Gln Asn Ser Pro Ser Ala Leu Val Ser Thr1996 Pro Val Arg Thr Lys Thr Ser Asn Arg Tyr Ser Pro Glu Ser Gln2011 Ala Gln Ser Val His His Gln Arg Pro Gly Ser Arg Val Ser Pro2026 Glu Asn Leu Val Asp Lys Ser Arg Gly Ser Arg Pro Gly Lys Ser2041 Pro Glu Arg Ser His Val Ser Ser Glu Pro Tyr Glu Pro Ile Ser2056 Pro Pro Gln Val Pro Val Val His Glu Lys Gln Asp Ser Leu Leu2071 Leu Leu Ser Gln Arg Gly Ala Glu Pro Ala Glu Gln Arg Asn Asp2086 Ala Arg Ser Pro Gly Ser Ile Ser Tyr Leu Pro Ser Phe Phe Thr2101 Lys Leu Glu Asn Thr Ser Pro Met Val Lys Ser Lys Lys Gln Glu2116 Ile Phe Arg Lys Leu Asn Ser Ser Gly Gly Gly Asp Ser Asp Met2131 Ala Ala Ala Gln Pro Gly Thr Glu Ile Phe Asn Leu Pro Ala Val2146 Thr Thr Ser Gly Ser Val Ser Ser Arg Gly His Ser Phe Ala Asp2161 Pro Ala Ser Ash Leu Gly Leu Glu Asp Ile Ile Arg Lys Ala Leu2176 Met Gly Ser Phe Asp Asp Lys Val Glu Asp His Gly Val Val Met2191 Ser Gln Pro Met Gly Val Val Pro Gly Thr Ala Asn Thr Ser Val2206 Val Thr Ser Gly Glu Thr Arg Arg Glu Glu Gly Asp Pro Ser Pro2221 His Ser Gly Val Cys Lys Pro Lys Leu Ile Ser Lys Ser Asn Ser2236 Arg Lys Ser Lys Ser Pro Ile Pro Gly Gln Gly Tyr Leu Gly Thr2251 Glu Arg Pro Ser Ser Val Ser Ser Val His Ser Glu Gly Asp Tyr2266 His Arg Gln Thr Pro Gly Trp Ala Trp Glu Asp Arg Pro Ser Ser2281 Thr Gly Ser Thr Gln Phe Pro Tyr Asn Pro Leu Thr Met Arg Met2296 Leu Ser Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ile Ala Cys Ala Pro Ser Ala2311 Val Asn Gln Ala Ala Pro His Gln Gln Asn Arg Ile Trp Glu Arg2326 Glu Pro Ala Pro Leu Leu Ser Ala Gln Tyr Glu Thr Leu Ser Asp2341 Ser Asp Asp(2)SEQ ID NO.21的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度29堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.21TGTAGTCGAC ATGTCAAGTT CAGTTATCC 29(2)SEQ ID NO.22的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.22TGTAGTCGAC ATGATTGCTA GGAGTGAGCA TG 32(2)SEQ ID NO.23的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.23TGTAGTCGAC ATGTCAATGA GGGAGTCTCC TG 32(2)SEQ ID NO.24的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.24TGTAGGATCC ATGCAGGACA GCTTGCTGCT CT 32(2)SEQ ID NO.25的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度29堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.25CCTCAAGCTT TTAATTACTT TCCTGCTCA 29(2)SEQ ID NO.26的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.26CCTCAAGCTT TTAAGCAGAA ACAGTGGAAG CG 32(2)SEQ ID NO.27的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.27CCTCGTCGAC TTAACTTGGG TAACCTGGAG TT 32(2)SEQ ID NO.28的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.28CCTCGTCGAC TTATTCCATC ATTTCTTCAT CA 32(2)SEQ ID NO.29的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.29TGTAAAGCTT ATGATTGCTA GGAGTGAGCA TG 32(2)SEQ ID NO.30的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.30TGTAAAGCTT ATGCTTGACA ACCTCTTACA GC 32(2)SEQ ID NO.31的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.31TGTAAAGCTT ATGTATGCTC TCTACCAGCG AC 32(2)SEQ ID NO.32的信息(i)序列特征
(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.32TGTAAAGCTT ATGCGGAGCC ACCTGCCCAC GC 32(2)SEQ ID NO.33的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.33CCTCGAGCTC TTAAGCAGAA ACAGTGGAAG CG 32(2)SEQ ID NO.34的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度29堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.34CCTCGAGCTC TTACTGTTCT TGTCTCTGCC GC 32(2)SEQ ID NO.35的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32堿基(B)類型核酸
(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.35CCTCGAGCTC TTATGTTGCT CTTGGTGTCC CC 32(2)SEQ ID NO.36的信息(i)序列特征(A)長(zhǎng)度32.堿基(B)類型核酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型寡核苷酸(xi)序列描述SEQ ID NO.36CCTCGAGCTC TTAAGATCTC TTCTCCACCT CC 3權(quán)利要求
1.一種分離出的DNA分子，其特征在于，它包括編碼具有人HNRCR蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度嚴(yán)緊條件下與SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位的核苷酸序列雜交。
2.如權(quán)利要求1所述的DNA分子，其特征在于，所述的序列編碼一多肽，該多肽具有SEQ ID NO.20所示的序列。
3.如權(quán)利要求1所述的DNA分子，其特征在于，該序列是SEQ ID NO.19中核苷酸75-7106位的序列。
4.一種分離的HNRCR蛋白多肽，其特征在于，它包括具有SEQ ID NO.20氨基酸序列的多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。
5.如權(quán)利要求4所述的多肽，其特征在于，該多肽是具有SEQ ID NO.20序列的多肽。
6.一種載體，其特征在于，它含有權(quán)利要求1所述的DNA。
7.一種用權(quán)利要求6所述載體轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞。
8.如權(quán)利要求7所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，該細(xì)胞是大腸桿菌。
9.如權(quán)利要求7所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，該細(xì)胞是真核細(xì)胞。
10.一種產(chǎn)生具有HNRCR蛋白活性的多肽的方法，其特征在于，該方法包括(a)將編碼具有HNRCR蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地連于表達(dá)調(diào)控序列，形成HNRCR蛋白表達(dá)載體，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位的核苷酸序列有至少70％的同源性；(b)將步驟(a)中的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞，形成HNRCR蛋白的重組細(xì)胞；(c)在適合表達(dá)HNRCR蛋白多肽的條件下，培養(yǎng)步驟(b)中的重組細(xì)胞；(d)分離出具有HNRCR蛋白活性的多肽。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，該序列為SEQ ID NO.19中從核苷酸75-7106位。
12.一種能與權(quán)利要求4所述的HNRCR蛋白多肽特異性結(jié)合的抗體。
13.一種核苷酸分子，其特征在于，它是權(quán)利要求1所述DNA分子的反義序列。
14.一種探針分子，其特征在于，它含有權(quán)利要求1所述的DNA分子中約8-1000個(gè)連續(xù)核苷酸。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種新的人基因核苷酸序列。更具體地說,本發(fā)明涉及人HNRCR的cDNA序列,該序列編碼的蛋白是核受體協(xié)阻抑物(nuclear receptorcoreceptor,簡(jiǎn)稱NRCR)的同系物。本發(fā)明還涉及由該核苷酸序列編碼的多肽,這些多核苷酸和多肽的應(yīng)用,以及所述多核苷酸和所述多肽的生產(chǎn)方法。
文檔編號(hào)C07K16/18GK1250094SQ98120919
公開日2000年4月12日 申請(qǐng)日期1998年10月6日 優(yōu)先權(quán)日1998年10月6日
發(fā)明者余龍, 屠強(qiáng), 趙勇, 張宏來, 趙壽元 申請(qǐng)人:上海新黃浦復(fù)旦基因工程有限公司