專利名稱：苯并咪唑衍生物在制備藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是CN95194960.8的分案申請(qǐng)。原申請(qǐng)的申請(qǐng)日是1995年7月6日；原申請(qǐng)的發(fā)明名稱是“治療學(xué)化合物”。
本發(fā)明涉及苯并咪唑類衍生物和它們?cè)卺t(yī)學(xué)治療中的應(yīng)用，特別是用于治療或預(yù)防如皰疹病毒引起的病毒感染。本發(fā)明也涉及苯并咪唑類衍生物和含有這些衍生物的藥物配方的制備。
在DNA病毒中，皰疹族病毒是人類中最常見(jiàn)病毒性疾病的病原。該族包括單純皰疹病毒1和2型(HSV)，水痘帶狀皰疹病毒(VZV)，巨細(xì)胞病毒(CMV)，EB病毒(EBV)，人類皰疹病毒6型(HHV-6)和人類皰疹病毒7型(HHV-7)。HSV-1和HSV-2是人類最常見(jiàn)感染性病原中的一些。這些病毒的多數(shù)能持續(xù)存在于宿主的神經(jīng)細(xì)胞中，一旦感染，這些個(gè)體即有感染的臨床癥狀復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)，這可引起身體和心理兩者的痛苦。
HSV感染常以皮膚、口腔和/或生殖器的廣泛而衰弱損害為特點(diǎn)。雖然原發(fā)感染傾向于比在以前曾暴露于此病毒的個(gè)體中的感染更嚴(yán)重，但原發(fā)感染可為臨床癥狀不顯著的。SHV的眼部感染可導(dǎo)致角膜炎或白內(nèi)障，從而危脅宿主的視力。新生兒中，免疫減弱病人中的感染或感染穿透而進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)可為致死性的。
VZV是一種可引起水痘和帶狀皰疹的皰疹病毒。水痘是在沒(méi)有免疫力的宿主中產(chǎn)生的原發(fā)疾病，并且在年幼的兒童中常為以水痘疹和發(fā)熱為特點(diǎn)的輕癥疾病。帶狀皰疹是該疾病的復(fù)發(fā)形式，它發(fā)生于以前感染過(guò)VZV的成年人中。帶狀皰疹的臨床表現(xiàn)特點(diǎn)為神經(jīng)痛以及單側(cè)和皮膚瘤樣分布的水痘性皮膚疹。感染的擴(kuò)散可引起麻痹或抽搐。如果腦膜受感染可發(fā)生昏迷。在以移植為目的或?yàn)橹委煇盒阅[瘤而接受免疫抑制藥物的病人中VZV是嚴(yán)重問(wèn)題，并且是AIDS病人的一種嚴(yán)重并發(fā)癥，因?yàn)樗麄兊拿庖呦到y(tǒng)是受損的。
與其他皰疹病毒一樣，CMV感染引起病毒和宿主的終身關(guān)聯(lián)。母親妊娠期感染后發(fā)生的先天性感染可引起臨床后果，如死亡或大的疾病(小頭癥，肝脾腫大，黃疸，智力發(fā)育遲緩)，導(dǎo)致失明，或者為不那么嚴(yán)重形式的視網(wǎng)膜炎，不能正常發(fā)育，以及易患胸部和耳部感染。免疫減弱病人中的CMV感染，例如作為惡性腫瘤，移植后免疫抑制藥物治療或人類免疫缺陷病毒感染的結(jié)果，可產(chǎn)生視網(wǎng)膜炎，肺炎，胃腸道疾患和神經(jīng)性疾病。
EBV引起的主要疾病是急性或慢性感染性單核細(xì)胞增多癥(腺熱病)。其中EBV或EBV相關(guān)疾病的實(shí)例包括經(jīng)常發(fā)生于有先天或獲得性細(xì)胞免疫缺陷的人中的淋巴增殖性疾病，發(fā)生于年輕男孩中的X-連鎖淋巴細(xì)胞性疾病，EBV相關(guān)的B-細(xì)胞腫瘤，何杰金病，鼻咽癌，伯基特淋巴瘤，非何金杰β-細(xì)胞淋巴瘤，胸腺瘤和口腔多毛粘膜白斑病。還發(fā)現(xiàn)EBV感染與許多上下呼吸道(包括肺)的上皮細(xì)胞衍生腫瘤相關(guān)。
HHV-6已顯示分別為兒童的infantum subitum腎和骨髓移植病人中的腎排異和間質(zhì)性肺炎的致病原，并可與其它疾病如多發(fā)性硬化相關(guān)聯(lián)。還有在骨髓移植病人中抑制干細(xì)胞計(jì)數(shù)的證據(jù)。HHV-7的疾病病原學(xué)未定。
乙型肝炎病毒(HBV)是一種具有世界性廣泛重要的病毒性致病原。該病毒病原學(xué)地與原發(fā)性肝細(xì)胞腫瘤相關(guān)，并被認(rèn)為引起全世界肝癌的80％。HBV感染的臨床表現(xiàn)包括頭痛，發(fā)熱，不適、惡心。嘔吐，厭食和腹痛。病毒的復(fù)制常被免疫反應(yīng)控制，在人類中恢復(fù)過(guò)程持續(xù)數(shù)周或數(shù)月，但感染可更嚴(yán)重，導(dǎo)致遷延性慢性肝疾病，如上所述。
PCT專利說(shuō)明書(shū)WO92/07867和WO94/08456號(hào)描述了某些抗病毒的多取代的苯并咪唑核苷類似物，包括β-D-呋喃核糖基核糖核苷類似物。PCT專利說(shuō)明書(shū)WO93/18009號(hào)描述了某些抗病毒的苯并咪唑類似物，其中糖基被碳環(huán)基取代。
現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)如下所述的某些左旋糖取代的苯并咪唑化合物在治療或預(yù)防某些病毒感染中有用。因此和第一方面，本發(fā)明提供了具有式(Ⅰ)的新化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物
其中R代表氫，鹵素原子，-NR1R2，其中R1和R2可相同或不同，它們各自獨(dú)立地選自氫，C1-6烷基，氰基C1-6烷基，羥基C1-6烷基，鹵素C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C1-6烷基C3-7環(huán)烷基，C2-6鏈烯基，C3-7環(huán)烷基C1-6烷基，C2-6炔基，芳基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)C1-6烷基，-COC1-6烷基或R1R2與它們所連接的N原子一起形成三，四，五或六元的雜環(huán)。
其他適合的式(Ⅰ)化合物是具有式(Ⅰa)及其藥學(xué)上可接受的衍生物，
其中R代表氫或-NR1R2，這里R1,R2可相同或不同，它們可分別獨(dú)立地選自氫，C1-6烷基，氰基C1-6烷基，羥基C1-6烷基，鹵素C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-6烷基，C2-6鏈烯基，C2-6炔基，芳基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)C1-6烷基，-COC1-6烷基(假定R1R2不都是氫)或R1R2與它們連接的N原子一起形成三，四，五或六元的雜環(huán)。
式(Ⅰ)化合物的實(shí)例包括下列β端基異構(gòu)體式(Ⅰb)及其藥學(xué)上可接受的衍生物，
其中R代表鹵素原子或-NR1R2，其中R1代表氫，R2選自C1-6烷基，羥基C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C1-6烷基C3-7環(huán)烷基，C2-6鏈烯基，C2-6炔基，芳基，芳基烷基；或R1和R2(R1和R2可為相同或不同)，均為C1-6烷基，或R1R2與它們連接的N原子一起形成三，四，五或六元的雜環(huán)。
另外，式(Ⅰb)化合物及其藥物學(xué)上可接受的衍生物中R代表鹵素原子或單C1-6烷基氨基，單(C1-6羥基烷基)氨基，二-C1-6烷基氨基，C3-7環(huán)烷基氰基，C1-6烷基-C3-7環(huán)烷基氨基，C2-6鏈烯基氨基C2-6炔基氨基，芳基氨基，芳基烷基氨基，或式-N(CH2)n基團(tuán)，其中n為2、3、4或5。
上述式(Ⅰ)化合物的其它實(shí)例包括下文描述的實(shí)施例1至38。
本文使用的術(shù)語(yǔ)烷基可作為一個(gè)基團(tuán)或一個(gè)基團(tuán)的一部分，意指直鏈或支鏈烷基。這種烷基優(yōu)選具有1-6個(gè)碳原子，最優(yōu)選1至4個(gè)碳原子的烷基，并且特別地包括甲基、乙基、異丙基、叔丁基。關(guān)于鏈烯基包括E-或Z-型或其混合物的形式，并且當(dāng)它們含有至少3個(gè)碳原子時(shí)，可為有支鏈的鏈烯基。術(shù)語(yǔ)鹵素包括氯。溴，氟和碘。術(shù)語(yǔ)鹵素C1-6烷基意指其中有一個(gè)或更多個(gè)氫被鹵素取代的烷基，并優(yōu)選含有1、2或3個(gè)鹵素基團(tuán)。所述基團(tuán)的實(shí)例包括三氟甲基和氟異丙基。術(shù)語(yǔ)芳基作為一個(gè)基團(tuán)或一個(gè)基團(tuán)的一部分，意指由選自C1-6烷氧基(如甲氧基)，硝基，鹵素(如氯)，氨基，羧酸酯和羥基的一個(gè)或多個(gè)取代基任意取代的苯基。術(shù)語(yǔ)雜環(huán)意指含有獨(dú)立地選自氮，氧和硫的一個(gè)或多個(gè)(如1至4個(gè))雜原子的飽和或部分飽和的(即，非芳香族的)三、四、五或六元環(huán)。這種基團(tuán)的實(shí)例包括吡咯烷。
本發(fā)明范圍內(nèi)包括式(Ⅰ)化合物的每一種可能的α和β端基異構(gòu)體以及它們的生理上有功能的衍生物，基本上不含其它端基異構(gòu)體，也就是說(shuō)只存在少于約5％w/w的其它端基異構(gòu)體，優(yōu)選少于約2％w/w，特別優(yōu)選少于約1％w/w，以及這種α和β端基異構(gòu)體任何比例的混合物。β端基異構(gòu)體形式的式(Ⅰ)化合物是優(yōu)選的。
優(yōu)選的式(Ⅰb)化合物包括R代表-NR1R2的化合物和其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R1代表氫，R2選自C1-6烷基C3-7環(huán)烷基和鹵素C1-6烷基。
特別優(yōu)選的式(Ⅰb)化合物包括其中R代表異丙基氨基，異丁基氨基，叔-丁基氨基，環(huán)丙基氨基，環(huán)戊基氨基和2-氟-1-甲基乙基氨基者以及其藥學(xué)上可接受的衍生物。
具有β構(gòu)型作為抗病毒劑特別有利的式(Ⅰ)化合物是2-環(huán)丙基氨基-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑，5,6-二氯-2-((2-氟-1-甲基乙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑和5,6-二氯-2-異丙基氨基-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑及其藥學(xué)上可接受的衍生物。
化合物5,6-二氯-2-異丙基氨基-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑已被發(fā)現(xiàn)在CMV感染的治療中特別有用。
包括上述式(Ⅰa)和(Ⅰb)的式(Ⅰ)化合物以及它們藥學(xué)上可接受的衍生物在下文中稱作本發(fā)明化合物。
“藥學(xué)上可接受的衍生物”是指本發(fā)明化合物的任何藥物學(xué)上或藥理學(xué)上可接受的鹽，酯和這種酯的鹽，或任何一種施用于接受者后能提供(直接或間接地)本發(fā)明化合物或其抗病毒活性代謝物或殘基的化合物。
本發(fā)明化合物優(yōu)選的酯獨(dú)立地選自(1)通過(guò)2′-,3′-和/或5′-羥基基團(tuán)酯化獲得的羧酸酯，其中酯基團(tuán)羧酸部分的非羰基部分選自直鏈或支鏈烷基(例如，n-丙基，t-丁基，或n-丁基)，烷氧基烷基(如，甲氧基甲基)，芳烷基(如，苯甲基)，芳氧基烷基(如，苯氧基甲基)，芳基(如，如由鹵素，C1-4烷基，或C1-4烷氧基或氨基任選的苯基)；(2)磺酸酯，如烷基或芳烷基磺酰(如，甲磺酰)；(3)氨基酸酯(如，L-纈氨酰或L-異亮氨酰)；(4)膦酸酯和(5)單-、二-或三磷酸酯。該磷酸酯可通過(guò)C1-20醇或其活性衍生物，或通過(guò)2,3-二(C6-24)?；视瓦M(jìn)一步酯化。
在這些酯中，除非特別指出，否則存在的任何烷基優(yōu)選含1至18個(gè)碳原子，特別是1至6個(gè)碳原子，更特別優(yōu)選1至4個(gè)碳原子。在這種酯中存在的任何環(huán)烷基有利地含3至6個(gè)碳原子。在這種酯中存在的任何芳基有利地含一個(gè)苯基基團(tuán)。
本發(fā)明優(yōu)選的羧酸酯包括醋酸酯，丁酸酯和戊酸酯。L-纈氨酰是特別優(yōu)選的氨基酸酯。
提到的任何上述化合物也包括其藥學(xué)上可接受的鹽。
藥學(xué)上可接受的鹽包括有機(jī)羧酸的鹽，這些有機(jī)羧酸如抗壞血酸，醋酸，檸檬酸，乳酸，酒石酸，蘋果酸，馬來(lái)酸，羥乙基磺酸，乳糖酸，對(duì)-氨基苯甲酸和琥珀酸；有機(jī)磺酸如甲磺酸，乙磺酸，苯甲磺酸和對(duì)甲苯磺酸，無(wú)機(jī)酸如鹽酸，硫酸，磷酸，氨基磺酸和焦磷酸。
為用于治療，式(Ⅰ)化合物的鹽應(yīng)為藥物學(xué)上可接受的。然而，非藥學(xué)上可接受的酸和堿的鹽也有用途，如，用于制備或純化一種藥學(xué)上可接受的化合物。所有的鹽，不管是否衍生自藥學(xué)上可接受的酸或鹽，均在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
優(yōu)選的鹽包括從鹽酸，硫酸，醋酸，琥珀酸，檸檬酸和抗壞血酸形成的鹽。
本發(fā)明的另一方面，提供了本發(fā)明化合物用于醫(yī)學(xué)治療，特別用于治療或預(yù)防病毒感染如皰疹病毒感染。本發(fā)明化合物已顯示具有抗CMV感染的活性，雖然早期研究結(jié)果提示這些化合物也具有抗其它皰疹病毒感染如HSV-1和-2,HHV6和7,VZV,EBV和HBV感染的活性。
按照本發(fā)明，其它可予以治療的病毒性疾病已在前文的介紹中討論。本發(fā)明化合物特別適合治療或預(yù)防CMV感染的相關(guān)疾病。按照本發(fā)明，可被治療的CMV疾病的實(shí)例已在前文的介紹中討論。
按照另一方面，本發(fā)明提供了用于治療或防止病毒感染的癥狀或影響的一種方法，這種感染發(fā)生于受感染的動(dòng)物，例如，一種哺乳類動(dòng)物，包括人類，該方法包含用治療上有效劑量的本發(fā)明化合物治療所述動(dòng)物。按照本發(fā)明這方面的特別實(shí)施方案，該病毒感染是皰疹病毒感染，如CMV,HSV-1,HSV-2,VZV,EBV,HHV6或HHV7。本方面的另一方面包括一種治療或防止HBV感染癥狀和影響的方法。
本發(fā)明進(jìn)一步提供用于治療動(dòng)物(如哺乳類，包括人類)中臨床疾病的一種方法，其臨床疾病包括那些已在前文介紹中討論，該方法包含用治療上有效劑量的本發(fā)明化合物治療所述動(dòng)物。本發(fā)明也包括用于治療或預(yù)防任何前述感染或疾病的一種方法。
又一方面，本發(fā)明還提供應(yīng)用本發(fā)明化合物制造用于治療或預(yù)防任何上述病毒感染或疾病的藥物。
上述本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物可與其它治療藥物一起用于治療上述感染或疾病。本發(fā)明的聯(lián)合治療包含服用至少一個(gè)式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物和至少一個(gè)其它藥學(xué)上有活性的成分。這些活性成分或藥學(xué)上有活性的藥物可以在相同或不同的藥學(xué)配方中同時(shí)服用，或以任何次序順序應(yīng)用。選擇這些活性成分和藥學(xué)上有活性藥物的劑量以及用藥的相對(duì)時(shí)間以獲得所希望的聯(lián)合治療的效果。該聯(lián)合治療最好包括服用一個(gè)本發(fā)明化合物和一個(gè)下述藥物。
這些其它治療藥物的實(shí)例包括治療病毒感染或相關(guān)疾病有效的藥物如(1α,2β,3α)-9-[2,3-二(羥甲基)環(huán)丁基]鳥(niǎo)嘌呤[(-)BHCG,SQ-34514],oxetanocin-G(3,4-二-(羥甲基)-2-oxetanosyl]鳥(niǎo)嘌呤)，無(wú)環(huán)核苷(如，無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷，valaciclovir,famciclovir，更昔洛韋，penciclovir)，無(wú)環(huán)核苷膦酸酯(如(S)-1-(3-羥基-2-磷酰-甲氧基丙基)胞嘧啶(HPMC)，核糖核苷酸還原酶抑制劑如2-乙酰吡啶5-〔(2-氯苯氨基)硫代羰基〕硫代羰基腙，3′-疊氮-3′-脫氧胸腺嘧啶，其它2′,3′-雙脫氧核苷，如2′,′-雙脫氧胞苷，2′,3′-雙脫氧腺苷和2′,3′-雙脫氧次黃嘌呤核苷，2′,3′-雙脫氧胸腺嘧啶，蛋白酶抑制劑如N-叔-丁基-脫氫-2-〔-2(R)-羥基-4-苯基-3(S)-
-(喹啉基羰基)-L-天冬酰氨基丁基〕-(4aS,8aS)-異喹啉-3(S)-甲酰胺(Ro 31-8959)氧雜硫環(huán)戊烷核苷類似物如(-)-順式-1-(2-羥甲基)-1,3，氧雜硫環(huán)戊烷-5-基)胞嘧啶(3TC)或順式-1-(2-羥甲基)-1,3-氧雜硫環(huán)戊烷-5-基)-5-氟胞嘧啶(FTC)，3′-脫氧-3′-氟胸腺嘧啶，5-氯-2′,3′-雙脫氧-3′-氟尿嘧啶，(-)-順式-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇，病毒唑，9-〔4-羥基-2-(羥甲基)丁-1-基〕-胍(H2G)，tat抑制劑如7-氯-5-(2-吡咯基)-3H-1,4-苯并二氮雜卓-2(H)-酮(Ro5-3335)，或7-氯-1,3-二氫-5-(1H-吡咯-2-基)-3H-1,4-苯并二氮雜卓-2-胺(Ro 24-7429)，干擾素如α-干擾素，腎分泌抑制劑如丙磺舒，核苷轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑如潘生丁；己酮可可堿，N-乙酰半胱氨酸，Procysteine，α-括樓精〔α-trichosanthin)，膦?；姿?，以及免疫調(diào)節(jié)劑如干擾素Ⅱ或胸腺素，粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子，促紅細(xì)胞生成素，可溶性CD4和某遺傳工程的衍生物，或非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑如nevirapine(BI-RG-587)，1oviride(α-APA)和delavuridine(BHAP)，和膦?；姿?。
更優(yōu)選的所述聯(lián)合治療涉及服用上述藥物之一和上述式(Ⅰ)中優(yōu)選或特別優(yōu)選的亞組中的一個(gè)化合物。最優(yōu)選的所述聯(lián)合治療涉及聯(lián)合使用上面指出的藥物之一以及在此特別指出的式(Ⅰ)化合物中的一個(gè)。
本發(fā)明還包括應(yīng)用本發(fā)明化合物配制藥物，該藥物用于與至少一種如上文所定義的其它治療藥物同時(shí)或順序應(yīng)用。
本發(fā)明的化合物在本文中也稱為活性成分，可經(jīng)任何合適的途徑給藥用于治療，這些途徑包括口服，經(jīng)直腸，經(jīng)鼻，局部(包括經(jīng)皮，經(jīng)口腔含化和舌下)，經(jīng)陰道和胃腸道外(包括皮下，肌肉內(nèi)，靜脈內(nèi)，皮內(nèi)和玻璃體內(nèi))。應(yīng)認(rèn)識(shí)到優(yōu)選途徑可因接受者的疾病和年齡，感染的性質(zhì)和所選的活性成分不同而改變。
總的來(lái)說(shuō)，上述各種疾病的適合劑量在每日每公斤體重(接受者，如人)0.01～250mg范圍內(nèi)，優(yōu)選每日每公斤體重0.1～100mg范圍內(nèi)，最優(yōu)選每日每公斤體重0.5-30mg范圍內(nèi)，特別是每日每公斤體重1.0～20mg范圍內(nèi)。(除非特別指出，否則所有活性成分的重量按式(Ⅰ)的化合物的母體計(jì)算對(duì)其鹽或酯，其重量應(yīng)相應(yīng)增加)。所希望的劑量可在全天以適當(dāng)間隔以1、2、3、4、5、6或更多分劑量給藥。在一些情況下，所要求的劑量可隔天給予。這些分劑量可以單位劑量形式給藥，例如，每單位劑量形式含10至1000mg或50至500mg，優(yōu)選20至500mg，最優(yōu)選100至400mg活性成分。
理想地，應(yīng)給予活性成分以獲得活性化合物峰值血漿濃度約0.025至100μM，優(yōu)選約0.1至70μM，最優(yōu)選約0.25至50μM?？赏ㄟ^(guò)如靜脈內(nèi)注射活性成分的0.1至5％溶液，最好溶于鹽水中，或通過(guò)口服含活性成分為約0.1至約250mg/kg的丸劑，得到上述峰值血漿濃度?？赏ㄟ^(guò)連續(xù)輸注以提供約0.01至約5.0mg/kg/小時(shí)或通過(guò)間斷輸注含約0.4至約15mg/kg活性成分維持希望的血漿水平。
雖然可以單獨(dú)服用該活性成分，但優(yōu)選作為藥物制劑使用該活性成分。本發(fā)明的制劑包含至少一種如上所述之活性成分，以及一或多種可接受的載體以及任選的其它治療藥物。每種載體必須是“可接受的”，它是指與制劑的其它成分相容和對(duì)病人無(wú)害。制劑包括適合口服，經(jīng)直腸，經(jīng)鼻，局部(包括經(jīng)皮，經(jīng)口腔含化和舌下)，經(jīng)陰道或胃腸道外(包括皮下，肌肉內(nèi)，靜脈內(nèi)，皮下和玻璃體內(nèi))施用者。該制劑可方便地制成單位劑量形式，并可通過(guò)藥學(xué)領(lǐng)域中任何公知的方法制備。這種方法包括將活性成分與由一或多種輔助成分構(gòu)成的載體結(jié)合在一起的步驟。一般來(lái)說(shuō)，該制劑的制備是通過(guò)將活性成分與液體載體或精細(xì)分配的固體載體或兩者緊密結(jié)合，然后，如果需要的話再使產(chǎn)物形成一定形狀。
本發(fā)明還包括一種上文定義的藥物制劑，其中式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物和至少一種其它治療藥物分別獨(dú)立存在并作為一套小藥盒。
適合經(jīng)皮給藥的組合物可制成單個(gè)的膏藥以便長(zhǎng)時(shí)間與接受者的外皮保持密切接觸。這種膏藥可含活性化合物1)在任選的緩沖水溶液或2)溶于和/或分散于粘合劑或3)分散于多聚體中?；钚曰衔锏倪m合濃度是約1％至25％，優(yōu)選約3％至15％。作為一種特殊的可能性，該活性化合物可通過(guò)電轉(zhuǎn)運(yùn)或離子電泳從膏藥上釋放，概述參見(jiàn)藥物研究(Pharmaceutical Research),3(6),318(1986)。
適合口服用藥的本發(fā)明的制劑可制成獨(dú)立的單位如膠囊劑，扁囊劑或片劑，它們分別含有預(yù)定量的活性成分，制成粉或顆粒；制成水相或非水相中的溶液或混懸液；或制成水包油液體乳劑或油包水乳劑。該活性成分也可制成大丸藥，干藥糖劑或糊劑。
片劑可壓制或模制，可任選加入一或多種輔助成分。壓制的片劑可通過(guò)在合適的機(jī)器中對(duì)處于自由流動(dòng)形式如粉或顆粒的活性成分加壓而制備，可任選與一種粘合劑(如聚乙烯吡咯烷酮，明膠，羥丙基甲基纖維素)潤(rùn)滑劑，惰性稀釋劑，防腐劑，崩解劑(如淀粉羥基乙酸鈉，交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)，表面活性劑或分散劑混合。模制的片劑可通過(guò)在合適的機(jī)器中對(duì)用惰性液體稀釋劑潤(rùn)濕的粉狀化合物的混合物進(jìn)行模壓而制備。該片劑可任選包衣或壓痕，并可制劑以便使其中的活性成分緩慢地或控制地釋放，例如，使用不同比例的羥丙基甲基纖維素以提供期望的釋放曲線。片劑可任選包有腸衣，以便在腸中而不是在胃中釋放。
適合口腔中局部應(yīng)用的制劑包括糖錠劑、軟錠和漱口水，這些糖錠劑的活性成分包含在矯味劑基質(zhì)(通常為蔗糖和阿拉伯樹(shù)膠或黃蓍膠)中；軟錠劑的活性成分包含在惰性成分(如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯樹(shù)膠)中；漱口水的活性成分包含合適的液體載體中。
直腸給藥的制劑可與合適的基質(zhì)如可可脂或水楊酸酯配制成栓劑。
適合陰道給藥的制劑可制成陰道栓劑。棉塞。霜?jiǎng)?，凝膠，糊狀的，泡沫劑或噴霧劑型，除活性成分外它們還含有一些本領(lǐng)域中公認(rèn)為合適的載體。
其中載體為固體的適合直腸給藥的藥物制劑最優(yōu)選制成單位劑量栓劑。合適的載體包括可可脂和其它本領(lǐng)域中通常使用的物質(zhì)。通過(guò)將活性組合物與軟化的或融熔的載體混合后在模型中冷模和成形，可方便地形成所述栓劑。
適合胃腸外給藥的制劑包括水和非水的等張滅菌注射溶液劑，它可含有抗氧化劑，緩沖劑，抑菌劑和使該制劑與接受藥物者的血液等張的溶質(zhì)；以及水和非水滅菌混懸液劑，它可包括懸浮劑和增稠劑。該制劑可以單位劑量或多劑量密封于容器(例如安瓿瓶和小玻璃瓶)內(nèi)，并可貯存于冰凍干燥(凍干)狀態(tài)，只需在使用前加入滅菌液體載體，如注射用水?？蓮纳鲜龈黝悳缇勰?，顆粒和片劑制備臨時(shí)的注射溶液和混懸液。
優(yōu)選的單位劑量制劑應(yīng)含一日劑量或單位，一日分劑量，如上文所述，或其適當(dāng)部分的活性成分。
應(yīng)理解，除上面特別提到的成分外，本發(fā)明的制劑還可包括本領(lǐng)域中常規(guī)使用的與所涉及制劑類型有關(guān)的其它試劑，如，適合口服給藥的制劑還可包括另外的試劑如甜味劑，增稠劑和矯味劑。
本發(fā)明還包括用于制備上述式(Ⅰ)化合物及其衍生物的下列方法，該方法包含(A)使式(Ⅱ)化合物與合適的鹵化劑如N-溴琥珀酰胺反應(yīng)；或者當(dāng)L是一個(gè)適當(dāng)?shù)碾x去原子或基團(tuán)，如鹵素原子如溴或有機(jī)基團(tuán)(如烷基)砜，或有機(jī)基團(tuán)(如烷基或芳烷基)硫酸酯如甲基砜(MeS(O)2)，甲基磺酸酯(MeS(O)2O)或甲苯磺酸酯(4-MePhS(O)2O)基團(tuán)，并且R3,R4和R5如上所定義時(shí)，與式H-NR1R2(其中R1和R2如上所定義)的胺反應(yīng)，
其中L是氫，R3,R4和R5各自為羥基或被保護(hù)的羥基；或者(B)將式(Ⅲ)化合物與式(Ⅳ)化合物反應(yīng)，其中R如上所定義，
其中R3,R4和R5各自是羥基或被保護(hù)的羥基，并且L1是處于α-或β-位合適的離去基團(tuán)，如鹵素(如氟，氯或溴)，烷基，或芳硫基(如苯硫基)，或芳香或脂肪族的酯基團(tuán)如苯甲酸酯或醋酸酯。隨后或與此同時(shí)，可以任何希望的或需要的次序進(jìn)行下列步驟之一或多步(ⅰ)脫去任何殘留的保護(hù)基團(tuán)；(ⅱ)將式(Ⅰ)化合物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為另一式(Ⅰ)化合物或其被保護(hù)的形式；(ⅲ)將式(Ⅰ)化合物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為式(Ⅰ)的化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物或其被保護(hù)的形式；(ⅳ)將式(Ⅰ)化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為式(Ⅰ)化合物或其被保護(hù)的形式；(ⅴ)將式(Ⅰ)化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物或其被保護(hù)的形式轉(zhuǎn)化為式(Ⅰ)化合物的另一種藥學(xué)上可接受的衍生物或其被保護(hù)的形式；(ⅵ)當(dāng)需要時(shí)，分離式(Ⅰ)化合物或其被保護(hù)的衍生物形式或式(Ⅰ)化合物的藥學(xué)上可接受衍生物的α和β端基異構(gòu)體。
方法(A)可方便地用于制備R是鹵素的式(Ⅰ)化合物。通過(guò)將其中L是氫而R3,R4和R5是被保護(hù)的羥基，優(yōu)選為OC(O)CH3的式(Ⅱ)化合物與鹵化劑反應(yīng)，可方便地制備所述化合物。鹵化可以常規(guī)方式進(jìn)行，例如，在質(zhì)子惰性溶劑如THF或優(yōu)選1,4-二尪烷(加熱至60-150℃，優(yōu)選100℃)中使用溴化劑如N-溴丁二酰亞胺(NBS)進(jìn)行溴化。
其中R為-NR1R2(其中R1和R2按前述定義)的式(Ⅰ)化合物可有利地從其中L為鹵素原子，如溴或氯原子的式(Ⅱ)化合物制備。通過(guò)與胺H-NR1R2(其中R1和R2如前所定義)反應(yīng)。該反應(yīng)在升高的溫度下，如70-80℃，在有機(jī)溶劑如乙醇或二甲基亞砜中有利地進(jìn)行。
可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)化學(xué)技術(shù)脫去保護(hù)基團(tuán)。
其中R3,R4和R5各為羥基基團(tuán)的式(Ⅱ)化合物，例如，從其中R3,R4和R5各為被保護(hù)的羥基基團(tuán)的相應(yīng)式(Ⅱ)化合物制備。常規(guī)的保護(hù)基團(tuán)可用于R3,R4和R5。可以有利地應(yīng)用那些如上述與式(Ⅰ)化合物的酯有關(guān)的酯基團(tuán)。這些保護(hù)性基團(tuán)可通過(guò)常規(guī)化學(xué)技術(shù)如甲醇中的碳酸鈉或用酶脫去，如使用豬肝酶。另外，R3,R4和R5可包括甲硅烷基保護(hù)基團(tuán)如叔丁基二苯基-，叔丁基二甲基-，三異丙基甲硅烷基基團(tuán)，它們可使用合適的氟源如HF/吡啶，n-Bu4NF或Et4NF脫去?；颦h(huán)縮醛或縮酮如苯亞甲基或異亞丙基基團(tuán)，它們可在酸性條件下，如使用對(duì)甲苯磺酸和甲醇脫去。
另外，其中R3,R4和R5為被保護(hù)的羥基基團(tuán)的式(Ⅱ)化合物可與一種試劑或在某些條件下反應(yīng)，從而使離去基團(tuán)L被轉(zhuǎn)化為希望的R基團(tuán)同時(shí)脫去保護(hù)性基團(tuán)。這種試劑的實(shí)例包括環(huán)丙胺和其它伯和仲胺，只要這些試劑足夠親核而不位阻。
其中R如前文所定義的式(Ⅰ)化合物和其中L為如前所定義的式(Ⅱ)化合物可通過(guò)下法制備將式(Ⅴ)化合物(其中X等價(jià)于前文中定義的R或L)與式(Ⅳ)化合物(其中R3,R4和R5各為羥基或被保護(hù)的羥基基團(tuán)并且L1如前文所定義)反應(yīng)而制備，P17(Ⅴ)
式(Ⅳ)和(Ⅴ)化合物的反應(yīng)可使用路易斯酸進(jìn)行，這些酸如三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，四氯化錫，或三氟化硼，優(yōu)選前者。該反應(yīng)常在質(zhì)子惰性溶劑中和升高的溫度下進(jìn)行，如在乙腈中于15-30℃或在1,2-二氯乙烷中于70-90℃進(jìn)行。
式(Ⅴ)化合物在上述步驟中有利地在N1位三甲基甲硅烷基化，以提高可溶性，例如通過(guò)用三甲基甲硅烷基氯。六甲基二硅氮烷或，最優(yōu)選N,O-雙三甲基甲硅烷基乙酰胺(BSA)處理。這種甲硅烷基化可在溶劑(優(yōu)選1,2-二氯乙烷或乙腈)中，優(yōu)選在70-80℃進(jìn)行。在甲硅烷基化反應(yīng)成后，可在加入式(Ⅳ)化合物加入路易斯酸。
式(Ⅳ)化合物可通過(guò)熟練技術(shù)人員公知的方法制備，例如，以公知的D-核糖衍生物制備方法相似的方法或可從化學(xué)文獻(xiàn)(例如，Acton等，J.Am.Chem,Soc,1964,86,5352)中描述的方法制備。式(Ⅳ)優(yōu)選化合物是其中R3,R4和R5和L1各自是OC(O)CH3的化合物。該化合物可以按類似于D-核糖的制備方法制備(R.D.Guthrie和S.C.Smith.，化學(xué)工業(yè)(Chemitry and Industry),1968,pp547-548)，隨后有利地用乙醇重結(jié)晶。
其中X是L或-NR1R2基團(tuán)的式(Ⅴ)化合物(其中L,R1和R2按前文所定義)，可按照在本文中引入作為參考的PCT專利申請(qǐng)書(shū)WO92/07867中描述的方法制備。
另外其中X為R并且R為-NR1R2基團(tuán)(這里R1和R2如前所定義)的式(Ⅴ)化合物可通過(guò)下述方法制備將式(Ⅵ)化合物與一種或多種能使二胺環(huán)化為苯并咪唑的試劑反應(yīng)。
典型地，式(Ⅰ)化合物可與式(Ⅶ)的異硫氰酸酯反應(yīng)，S=C=NR1R2(Ⅶ)其中R1和R2如前所定義。
該反應(yīng)可在碳化二亞胺如二環(huán)己基碳二亞胺或1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳二亞胺N-甲-對(duì)-甲苯磺酸鹽存在下進(jìn)行，方便地，在質(zhì)子惰性的芳香族溶劑如甲苯并最優(yōu)選吡啶存在下和升高的溫度，優(yōu)選75-150℃下進(jìn)行。
其中X為鹵素的式(Ⅴ)化合物可商購(gòu)或也可通過(guò)將式(Ⅵ)化合物在稀酸條件下，在室溫至80℃與甲脒反應(yīng)而制備。
式(Ⅵ)和(Ⅶ)化合物可通過(guò)技術(shù)人員公知的方法，或可從化學(xué)文獻(xiàn)中獲得的方法制備或商購(gòu)。
本發(fā)明的酯可通過(guò)本領(lǐng)域中公知的方法制備，例如可通過(guò)用合適的酯化劑，如，合適的?；u或酸酐反應(yīng)，將式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的酯。
按常規(guī)方法通過(guò)與合適的烷化劑反應(yīng)，可以將式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式(Ⅰ)的藥學(xué)上可接受的酯。
式(Ⅰ)化合物包括其酯，可按常規(guī)方法，例如通過(guò)用合適的酸處理，可以將它們轉(zhuǎn)化為其藥學(xué)上可接受的鹽。式(Ⅰ)的酯或酯的鹽可轉(zhuǎn)化為母體化合物，例如，通過(guò)水解。
β和α端基異構(gòu)體可通過(guò)硅膠層析法，使用單一溶劑或數(shù)種溶劑合用如1∶20甲醇∶二氯甲烷分開(kāi)并分離為純的形式。
本發(fā)明還包括作為新的中間產(chǎn)物的如前文定義的式(Ⅱ)化合物。優(yōu)選的式(Ⅱ)化合物包括其中L是氫或鹵素原子，優(yōu)選氯或溴，并且R3,R4和R5為羥基或被保護(hù)的羥基基團(tuán)，優(yōu)選OO(O)CH3的化合物。
特別優(yōu)選的式(Ⅱ)化合物是2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑和2-溴-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑。
本發(fā)明還包括式(Ⅴ)中間產(chǎn)物，其中X是R，并且R是-NR1R2基團(tuán)，這里R1和R2如前文所定義，但是R1和R2不能都是氫或甲基。
優(yōu)選的式(Ⅴ)化合物包括2-(環(huán)丙氨基)-5,6-二氯-1H-苯并咪唑；5,6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑和5,6-二氯-2-(2-氟-1-甲基乙氨基)-1H-苯并咪唑。
下列實(shí)施例僅是為了闡述本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。用于藥學(xué)實(shí)施例的術(shù)語(yǔ)“活性成分”是指式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。該術(shù)語(yǔ)還包括與一或多種治療藥劑并用的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。實(shí)施例12-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使2-溴-5,6-二氯苯并咪唑(1.0g,5.8mmol),N,O-雙(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(Aldrich,0.94mL,3.8mmol)和乙腈(Aldrich Sure Seal,25mL)混合并在氮?dú)庀禄亓饕恍r(shí)。將溶液冷卻至室溫并加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(Aldrich,1.5mL,7.6mmol)。15分鐘后，加入固體1,2,3,5-四-O-乙?；?L-呋喃核糖(1.2g,3.8mmol)(除L-核糖被用作起始物質(zhì)外按照Guthrie和Smith的方法(Chemistry and Industry,1968,pp547-548)制備)。該溶液在室溫下于氮?dú)庵袛嚢?8小時(shí)，然后倒入10％碳酸氫鈉水溶液(100ml)中并用二氯甲烷(2×150mL)提取。有機(jī)層用硫酸鎂(無(wú)水)干燥，過(guò)濾，并蒸發(fā)。粗殘留物在硅膠柱(5×20cm,30-400目)上純化，用1∶30丙酮∶CH2Cl2洗脫得到2-溴-5,6-二氯-1-(3,4,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.2g,2.2mmol,60％)；m.p.142℃,[a]20D=(+)87.4(c=0.5DMF)；Uvmax(e)pH=7.0:298nm(7,600),289(7,400),254(8,800)；0.1N NaOH:298nm(7,600),289(7,400),256(7,300)；MS(EI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)524(0.15,M+)；1H NMR(DMSO-d6)d8.08(s,1H,Ar-H),8.01(s,1H,Ar-H),6.22(d,1H,H-1′,J=7.1Hz),5.56(dd,1H,H-2′,J=7.1Hz,J=7.2Hz),5.45(dd,1H,H-3′,J=7.2Hz,J=4.5Hz),4.55-4.47(m,2H,H-4′和5′),4.37(d,1H,H-5″,J=9.7Hz),2.15(s,3H,OAc),2.14(s,3H,OAc),2.01(s,3H,OAc).元素分析C18H17N2O7Cl2Br，計(jì)算值C,41.25；H,3.27；N,5.34。
測(cè)定值C,41.16；H,3.39, N,5.20。
另外，得到少量的α端基異構(gòu)體(2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.11g,022mmol,6％)；m.p.＜65℃；[a]20D=(-)206.8(c=0.5DMF)；MS(AP+):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)524(0.8,M+)；1H NMR(DMSO-d6)d7.95(s,1H,Ar-H),7.91(s,1H,Ar-H),6.66(d,1H,H-1′,J=4.2Hz),5.68(t,1H,H-2′,J=4.6Hz),5.52(t,1H,H-3′,J=5.9Hz),4.87-4.81(m,1H,H-4′),4.37-424(m,2H,H-5′),2.08(s,3H,OAc),2.03(s,3H,OAc),1.51(s,3H,OAc).元素分析C18H17N2O7Cl2Br，計(jì)算值C,41.25；H,3.27；N,5.34。
測(cè)定值C,41.39；H,3.35, N,5.29。實(shí)施例22-溴-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使碳酸鈉(0.28g,2.65mmol)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.39g,2.65mmol)與水(4mL)，甲醇(20mL)和乙醇(20mL)混合并在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)。加入醋酸(0.3mL,5.3mmol)并將混懸液濃縮為固體。殘留物在硅膠柱(2.5×20cm,230-400目)上純化，用1∶9乙醇∶CH2Cl2洗脫，得到白色無(wú)定形固體2-溴-5,6-二氯-1-β-L-呋喃核糖基-1H-苯并咪唑(0.7g,2.0mmol,75％)；m.p.169℃；[a]20D=(+)105(c=0.5DMF)；UVlmax(e):pH7.0:298nm(6,700),289(6,500),255(6,900)；0.1N NaOH:298nm(6,700),295(5,400),256(6,700)；MS(CI):m/z399(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d8.57(s,1H,Ar-H),7.96(s,1H,Ar-H),5.89(d,J=7.9Hz,H-1′),5.48(d,1H,OH,J=6.3Hz),5.42(t,1H,OH,J=45Hz),5.29(d,1H,OH,J=4.2Hz),4.43(明顯的dd,1H,H-2′,J=13.3Hz,J=6.1Hz),4.14(明顯的t,1H,H-3′,J=4.3Hz),4.01(明顯的d,1H,H-4′,J=1.7Hz),3.77-3.63(m,2H,H-5′).元素分析C12H11N2O4Cl2Br·0.20C2H6O計(jì)算值C,36.57；H,3.02；N,6.88。測(cè)定值C,36.68；H,2.85, N,7.05。實(shí)施例32-(環(huán)丙基氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)丙基胺(5mL)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.10g,0.25mmol)與無(wú)水乙醇(5ml)混合并在75℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×14cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.073g產(chǎn)物。此物質(zhì)在另一硅膠柱(2.5cm×10cm,230-400目)上進(jìn)一步純化，1∶5∶5甲醇∶乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到白色固體(0.051g,0.14mmol,55％)；m.p.228-230℃(分解)；[a]20D=(-)17.4(c=0.5乙醇，無(wú)水)；Uvlmax(e):pH7.0:303nm(10,400),274(1,700),259(9,100)；0.1N NaOH:304nm(10,700),295(1,900),259(8,800)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)374(13.2,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d7.6(s,1H,Ar-H),7.42(s,1H,Ar-H),5.71(d,1H,J=7.6Hz,H-1′),5.65(t,1H,OH,J=4.3Hz),5.25-5.21(m,2H,OH),4.22(明顯的dd,1H,H-2′,J=13.4Hz,J=7.6Hz),4.02(明顯的t,1H,H-3′,J=7.1Hz),3.95(s,1H,H-4′),3.67-3.62(m,2H,H-5′),2.78-2.74(m,1H,環(huán)丙基-CH),0.67((d,2H,J=7.1Hz，環(huán)丙基-CH2),0.53-0.47(m,2H，環(huán)丙基-CH2).元素分析C15H16N3O4Cl2·0.50C4H8O2·0.15C6H14計(jì)算值C,49.98；H,5.18；N,9.77。測(cè)定值C,49.86；H,5.18, N,9.80。實(shí)施例42-(烯丙基氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使烯丙胺(5mL)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.60g,1.14mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在75℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×20cm,230-400目)上純化，用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.325g,0.87mmol,76％)；m.p.220℃(分解)；[a]20D=(-)16.0(c=0.5DMF)；Uvlmax(e):pH7.0:303nm(11,200)，275(2,000),259(9,900)；0.1N NaOH:304nm(11,300),275(2,000),259(9,200)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)374(100,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d 7.66(s,1H,Ar-H),7.35(s,1H,Ar-H),5.98-5.85(m,1H,CH=CH2),5.76(d,1H,J=7.6Hz,H-1′),5.62(t,1H,OH,J=43Hz),5.28(d,1H,OH,J=7.6Hz),5.23(d,1H,OH,J=4.2Hz),5.16(d,1H,CH=CH2,J=18.6Hz),5.05(d,1H,CH=CH2,J=10.2Hz),4.30(明顯的dd,1H,H-2′,J=13.1Hz,J=7.6Hz),4.06(明顯的t,1H,H-3′,J=5.6Hz),3.97(br.s,1H,H-4′,CH2CH=CH2),3.71-3.60(m,2H,H-5′).元素分析C15H17N3O4Cl2·0.30H2O計(jì)算值C,47.46；H,4.67；N,11.07。測(cè)定值C,47.50；H,4.68；N,11.02。實(shí)施例55,6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使異丙基胺(10mL)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.0g,1.9mmol)與無(wú)水乙醇(20ml)混合并在75℃攪拌48小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到混有少量較高Rf物質(zhì)的產(chǎn)物。將此產(chǎn)物在chromatotron上再純化，該chromatotron安裝有2mm硅膠轉(zhuǎn)動(dòng)體，用1∶25甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.43g,1.15mmol,60％)；[a]20D=(-)22.4(c=0.5DMF)；Uvlmax(e):pH7.0:304nm(9,500),275(1,800),260(8,300)；0.1N NaOH:304nm(9,900),275(1,900),260(8,100)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)376(100,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d7.59(s,1H,Ar-H),7.35(s,1H,Ar-H),6.90(d,1H,NH,J=7.8Hz),5.73(d,1H,H-1′,J=6.5Hz),5.62(t,1H,OH,J=4.2Hz),5.27-5.23(m,2H,OH),4.27(明顯的dd,1H,J=13.4Hz,J=7.6Hz),4.11-3.99(m,2H),3.97(br.s,1H),3.72-3.61(m,2H,H-5′),1.18(d,6H,CH(CH3)2,J=6.6Hz).元素分析C15H19N3O4Cl2·1.00H2O計(jì)算值C,45.70；H,5.37；N,10.66。測(cè)定值C,45.75；H,4.98, N,10.50。實(shí)施例62-(環(huán)戊基氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)戊基胺(5mL)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在70℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶9乙醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.27g,0.68mmol,59％)；m.p.140℃；℃；[a]20D=(-)24.0(c=0.5DMF)；UVlmax(e):pH7.0:305nm(12,700),276(2,400),260(10,600),245(7400)；0.1N NaOH:305nm(12,600),276(2,200),260(9,900),247(7,300)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)402(100,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d 7.60(s,1H,Ar-H),7.36(s,1H,Ar-H),6.91(d,1H,NH,J=6.8Hz),5.74(d,1H,H-1′,J=7.6Hz),5.61(t,1H,OH,J=4.2Hz),5.26(d,1H,OH,J=8.1Hz),5.23(d,1H,OH,J=5.5Hz),4.30-4.14(m,2H,NHCH,H-2′),4.05(明顯的t,1H,H-3′,J=4.9Hz),3.96(br.s,1H,H-4′),3.72-3.59(m,2H,H-5),1.91(br.s,2H,CH2),1.66(br.s,2H,CH2),1.52(br.s,4H,CH2).元素分析C17H21N3O4Cl·0.20H2O計(jì)算值C,50.31；H,5.31；N,10.38。測(cè)定值C,50.13；H,5.31, N,10.05。實(shí)施例72-(芐氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使芐胺(10mL)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.0g,1.9mmol)與無(wú)水乙醇(20ml)混合并在70℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶9乙醇∶二氯甲烷洗脫。粗產(chǎn)物含芐胺。該物質(zhì)在另一硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上進(jìn)一步純化，用3∶7丙酮∶己烷洗脫，得到含少量雜質(zhì)的產(chǎn)物。使用與第二支柱相同的第三支硅膠柱進(jìn)行最終純化，得到灰白色固體(0.26g,0.62mmol,32％)；m.p.123℃；[a]20D=(-)4.6(c=0.5DMF)；UVlmax(e):pH7.0:304nm(10,600),276(1,800),260(9,600)；0.1N NaOH:305nm(10,500),276(1,500),260(8,500)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)424(100,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d7.78(t,1H,J=5.9Hz,NH),7.68(s,1H,Ar-H),7.34(s,1H,Ar-H),734-7.18(m,5H,Ar-H),5.80(d,1H,H-1′,J=7.6Hz),5.67(t,1H,OH,J=4.1Hz),5.32(d,1H,OH,J=7.6Hz),5.25(d,1H,OH,J=4.6Hz),4.55(d,2H,PhCH2,J=5.7Hz),4.34(明顯的dd,1H,H-2′,J=13.1Hz,J=7.4Hz),4.08(明顯的t,1H,H-3′,J=3.8Hz),4.00(br.s,1H,H-4′),3.73-3.61(m,2H,H-5′).元素分析C19H19N3O4Cl2·0.10H2O計(jì)算值C,53.56；H,4.54；N,9.86。測(cè)定值C,53.23；H,4.62, N,9.71。實(shí)施例82-氮雜環(huán)丁烷-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑氮雜環(huán)丁烷(1g)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在75℃攪拌72小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.35g,0.93mmol,82％)；mp.244-245℃；[a]20D=(+)69.6(c=0.5DMF)；UVlmax(e):pH7.0:305nm(9,900),275(1,500),260(9,800)；0.1N NaOH:305nm(9,800),276(1,600),260(7,800)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)376(100,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d8.60(s,1H,Ar-H),7.49(s,1H,Ar-H),5.43(d,1H,H-1′,J=7.6Hz),5.33(d,1H,OH,J=6.6Hz),5.26(t,1H,OH,J=4.7Hz),5.13(d,1H,OH,J=4.7Hz),4.35(明顯的dd,1H,H-2′,J=12.6Hz,J=6.0Hz),4.17(t,4H,CH2,J=7.6Hz),4.07(明顯的t,1H,H-3′,J=6.1Hz),3.88(d,1H,H-4′,J=2.4Hz),3.64(br.s,2H,H-5′),2.39-2.29(m,2H,CH2).元素分析C15H17N3O4Cl2計(jì)算值C,48.14；H,4.58；N,11.23。測(cè)定值C,48.00；H,4.59, N,11.15。實(shí)施例95,6-二氯-2-(炔丙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使炔丙基胺(4mL)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在70℃攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(25cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶20乙醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.18g粗產(chǎn)物。該物質(zhì)在安裝有2mm轉(zhuǎn)化體的chromatotron上進(jìn)一步純化，用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到淡黃色固體(0.135g,0.36mmol,32％)；m.p.182-184℃；[a]20Dx=(-)9.2(c=0.5DMF)；UVlmax(e):pH7.0:300nm(8,900),272(1,700),258(8,300)；0.1N NaOH:301nm(8,700),272(1,800),259(7,500)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)372(100,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d7.73(s,1H,Ar-H),7.58(t,1H,J=55Hz,NH),7.43(s,1H,Ar-H),5.75(d,1H,H-1′,J=5.0Hz),5.66(t,1H,OH,J=4.3Hz),5.29(d,1H,OH,J=7.6Hz),5.24(d,1H,OH,J=4.2Hz),4.28(明顯的dd,1H,H-2′,J=13.2Hz,J=7.4Hz),4.11-4.04(m,3H,H-3′,CH2),3.97(br.s,1H,H-4′),3.73-3.61(m,2H,H-5′),3.10(s,1H,CH).元素分析C15H15N3O4Cl2·0.75H2O計(jì)算值C,46.71；H,4.31；N,10.89。測(cè)定值C,46.52；H,4.23, N,10.72。實(shí)施例105,6-二氯-2-(n-丙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使丙胺(7ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在70℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶9乙醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.36g,0.96％mmol,84％)；m.p.231-233℃；[a]20D=(-)23.6(c=0.5DMF)；UVlmax(e):pH7.0:305nm(9,900),275(1,500),260(9,800)；0.1N NaOH:305nm(9,800),276(1,600),260(7,800)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)376(100,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d7.60(s,1H,Ar-H),7.35(s,1H,Ar-H),7.15(t,1H,J=5.4Hz,NH),5.74(d,1H,H-1′,J=7.6Hz),5.66(t,1H,OH,J=4.0Hz),5.28(d,1H,OH,J=7.6Hz),5.24(d,1H,OH,J=4.2Hz),4.34-4.25(m,1H,H-2′),4.06(表觀t,1H,H-3′,J=4.7Hz),4.00(br.s,1H,H-4′),3.72-3.61(m,2H,H-5′),3.31-3.24(m,2H,NH2CH2),1.57(q,2H,J=7.3Hz,CH2),0.88(t,3H,J=7.5Hz,CH3).元素分析C15H19N3O4Cl2·0.25H2O計(jì)算值C,47.32；H,5.16；N,11.04。測(cè)定值C,47.43；H,5.20, N,10.74。實(shí)施例115,6-二氯-2-(異丁基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使異丁基胺(10ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(50ml)混合并在75℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷(500ml)，然后用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到褐色固體(0.39g,1.0mmol,90％)；m.p.136℃[a]20D=(-)28.4(c=0.5DMF)。元素分析C16H21N3O4Cl2計(jì)算值C,48.13；H,5.55；N,10.52。測(cè)定值C,48.08；H,5.57, N,10.41。實(shí)施例122-((5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑-2-基)氨基)乙醇使乙醇胺(25ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.62g,1.2mmol)與無(wú)水乙醇(50ml)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷(500ml)，然后用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫。獲得的粗產(chǎn)物進(jìn)一步在硅膠濾墊上純化，用1∶1丙酮∶二氯甲烷而后用1∶2乙醇∶二氯甲烷洗脫。在裝有2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上進(jìn)一步純化，用1∶6乙醇∶乙酸乙酯洗脫，得到純的產(chǎn)物(0.064g,0.17mmol,14％)；[a]20D=(-)14.2(c=0.5DMF)。元素分析C14H17N3O5Cl2·0.50H2O計(jì)算值C,43.43；H,4.69；N,10.85。測(cè)定值C,43.74；H,5.02, N,10.53。實(shí)施例135,6-二氯-2-((1-乙基丙基)氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使1-乙基丙基胺(5ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(20ml)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到含少量雜質(zhì)的產(chǎn)物(0.31g)。該物質(zhì)在裝有2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上進(jìn)一步純化，使用1∶2丙酮∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.24g,0.59mmol,52％)；[a]20D=(-)39.4(c=0.5DMF)。元素分析C17H23N3O4Cl2計(jì)算值C,50.50；H,5.73；N,10.39。測(cè)定值C,50.44；H,5.88, N,10.14。實(shí)施例142-(環(huán)己基氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)己基胺(5ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(20ml)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物并在硅膠柱(2.5cm×16m,230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到含少量雜質(zhì)的產(chǎn)物(0.38g)。該物質(zhì)在裝有2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上進(jìn)一步純化，用1∶2丙酮∶二氯甲烷洗脫，得到除了0.25g稍微不純的物質(zhì)外，還有白色固體的純產(chǎn)物(0.059g,0.14mmol,12％)；[a]20D=(-)24.0(c=0.5DMF)。元素分析C18H23N3O4Cl2·0.30H2O計(jì)算值C,51.27；H,5.64；N,9.96。測(cè)定值C,51.18；H,5.68, N,9.88。實(shí)施例152-苯氨基-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使芐胺(5ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(35ml)混合，并在80℃攪拌14天。濃縮反應(yīng)混合物并在80℃于高真空下蒸餾去除苯胺。棕色殘留物溶于甲醇(50ml)并加入K2CO3。將該溶液攪拌18小時(shí)。過(guò)濾該溶液濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.024g,0.06mmol,5％)。MS(AP+):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)410(19.39,M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d9.09(s,1H,NH),7.83(s,1H,Ar-H),7.78(d,1H,Ar-H,J=7.9Hz),7.58(s,2H,Ar-H),7.31(t,2H,Ar-H,J=7.9Hz),6.99(t,1H,Ar-H,J=7.5Hz),5.95(d,1H,H-1′,J=7.8Hz),5.86(t,1H,OH,J=4.4Hz),5.38(d,1H,OH,J=7.6Hz),5.30(d,1H,OH,J=4.2Hz),4.33(明顯的dd,1H,H-4′,J=13.4Hz,J=7.8Hz),4.11(明顯的t,1H,H-2′,J=4.8Hz),4.05(s,1H,H-4′),3.79-3.71(m,2H,H-5′).實(shí)施例165,6-二氯-2-(正戊氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使正戊胺(5ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.55g含一些雜質(zhì)的產(chǎn)物。該物質(zhì)在另一硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上再純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷再洗脫，得到灰白色固體(0.40g,0.99mmol,87％)m.p.102-103℃；[a]20D=(-)22.0(c=0.5DMF)。元素分析C17H23N3O4Cl2計(jì)算值C,50.50；H,5.73；N,10.40。測(cè)定值C,50.25；H,5.85, N,10.26。實(shí)施例172-((5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑-2-基)氨基)乙腈使鹽酸氨基乙腈(1.2g,13mmol)，三乙胺(5ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(40ml)混合并在80℃攪拌3天。濃縮反應(yīng)混合物，殘余物用乙酸乙酯(150mL)稀釋，并用10％碳酸氫鈉溶液(25mL)提取，然后用水(2×25ml)提取。將乙酸乙酯層干燥(Na2SO4)、傾析和濃縮為棕色的油狀物(0.67g)并在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫。離柱的兩種主要產(chǎn)物是2-溴-5,6-二氯-1-(5-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.32g)和2-溴-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.14g)。還分離到一種較低Rf物質(zhì)(0.19g)并在裝有2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上進(jìn)一步純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.024g,0.06mmol,5％)；MS(AP-):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)371(80,M-2)；1H NMR(DMSO-d6)d 7.87(t,1H,NH,J=5.9Hz),7.83(s,1H,Ar-H),7.52(s,1H,Ar-H),5.74(d,1H,H-1′,J=7.6Hz),5.68(t,1H,OH,J=4.1Hz),5.32(d,1H,OH,J=7.1Hz),5.23(d,1H,OH,J=4.2Hz),4.37(d,2H,CH2CN,J=5.3Hz),4.28(明顯的dd,1H,H-4′,J=13.0Hz,J=7.2Hz),4.07(明顯的t,1H,1H-3′,J=3.5Hz),3.98(s,1H,H-3′),3.73-3.63(m,2H,H-5′).元素分析C14H14N4O4Cl2·0.30CH4O·0.15CH2Cl2計(jì)算值C,43.88；H,3.95；N,14.16。測(cè)定值C,43.81；H,3.90, N,14.21。實(shí)施例182-(正丁基氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使正丁胺(5ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌18小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物并在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上純化，用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫。獲得粗產(chǎn)物(0.73g)并在裝有2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上進(jìn)一步純化，用1∶2丙酮∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.20g,0.51mmol,45％)；m.p.220-222℃；[a]20D=(-)17.2(c=0.5DMF)。元素分析C16H21N3O4Cl2·1/10H2O·1/2C3H6O計(jì)算值C,49.91；H,5.79；N,9.98。測(cè)定值C,49.75；H,5.90, N,10.16。實(shí)施例192-(仲-丁基氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使仲-丁胺(3ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌18小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物并在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，獲得粗產(chǎn)物(0.37g)并在裝有2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上進(jìn)一步純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體，它是一種非對(duì)映體的混合物(0.21g,0.55mmol,48％)；mp.121-122℃；[a]20D=(-)23.8(c=0.5DMF)。元素分析C16H21N3O4Cl2·7/10H2O計(jì)算值C,47.70；H,5.60；N,10.43。測(cè)定值C,47.76；H,5.51, N,10.16。實(shí)施例202-(環(huán)丁基氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)丁基胺(3ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物并在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上純化，用2∶1乙酸乙酯∶己烷洗脫。獲得粗產(chǎn)物(0.42g)并在裝有2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上經(jīng)多次循環(huán)進(jìn)一步純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.26g,0.67mmol,59％)；m.p.220-221℃；[a]20D=(-)22.4(c=0.5DMF)。元素分析C16H19N3O4Cl2計(jì)算值C,49.50；H,4.93；N,10.82。測(cè)定值C,49.22；H,4.90, N,10.61。實(shí)施例212-(環(huán)庚基氨基)-5.6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)庚基胺(2ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.4g,1.0mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物并在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上純化，用1∶20∶20甲醇∶乙酸乙酯∶己烷洗脫。得到灰白色固體(0.13g,0.3mmol,30％)；m.p.137-138℃；[a]20D=(-)21.6(c=0.5DMF)。元素分析C16H19N3O4Cl2·11/10H2O計(jì)算值C,50.70；H,6.09；N,9.33。測(cè)定值C,50.91；H,5.91, N,9.13。實(shí)施例225,6-二氯-2-((2-(1-吡咯烷基)乙基)氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使1-(2-氨基乙基)吡咯烷(1.9mL,13.5mmol)，三乙胺(2ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫。主要離柱產(chǎn)物溶于去離子水，中和并提取到二氯甲烷中，得到灰白色固體(0.26g,0.6mmol,53％)；m.p.123-124℃；[a]20D=(-)20.4(c=0.5DMF)。元素分析C18H24N4O4Cl2·3/2H2O·1/2C4H8O2計(jì)算值C,47.82；H,6.22；N,11.15。測(cè)定值C,47.79；H,6.06, N,10.97。實(shí)施例232-((環(huán)丙基甲基)氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使鹽酸(氨基甲基)環(huán)丙烷(1.6g,15mmol)，三乙胺(2ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.55g,1.05mmol)與無(wú)水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫。主要離柱產(chǎn)物在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上再純化，用1∶10∶10甲醇∶乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到灰白色固體(0.30g,0.77mmol,74％)；m.p.229-1230℃；[a]20D=(-)24.8(c=0.5DMF)。元素分析C16H19N3O4Cl2計(jì)算值C,49.50；H,4.93；N,10.83。測(cè)定值C,49.30；H,5.02, N,10.66。實(shí)施例242-(叔-丁基氨基)-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使2-(叔-丁基氨基)-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑在甲醇(40ml)和乙醇(40ml)中的溶液與碳酸鈉(0.61g,5.8mmol)在水(10ml)中的溶液混合。該溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上去除甲醇和乙醇。然后用乙酸乙酯(150ml)和飽和NaCl(20ml)提取該溶液，濃縮有機(jī)相并在硅膠柱(2.5cm×14cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(1.25g,3.2mmol,83％)m.p.118-120℃；[a]20D=(-)30.2(c=0.5DMF)。元素分析C16H21N3O4Cl2·2/5H2O·2/5CH4O計(jì)算值C,48.01；H,5.75；N,10.24。測(cè)定值C,48.20；H,5.73, N,10.05。實(shí)施例252-(叔-丁基氨基)-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使無(wú)水1,2-二氯乙烷(15ml),2-(叔-丁基氨基)-5,6-二氯苯并咪唑(1.5g,5.84mmol和N,O-雙三甲基甲硅烷基乙酰胺(2.2mL,8.8mmol)混合并在80℃攪拌30分鐘。加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(1.1ml,5.84mmol)，該溶液在80℃攪拌45分鐘。加入固體1,2,3,4-四-O-乙酰基-L-呋喃核糖苷(L-TAR)(20g,6.42mmol)并在80℃繼續(xù)攪拌3小時(shí)。在此時(shí)再加入L-TAR(0.5g,1.6mmol)。1小時(shí)后用冷的飽和碳酸氫鈉(40mL)終止反應(yīng)，然后用二氯甲烷(2×150mL)提取。將合并的有機(jī)相干燥(硫酸鈉)，傾析并濃縮，得到4.0g金黃色固體。該物質(zhì)在硅膠柱(5cm×16cm,230-400目)上純化，用1∶30甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(2.21g,4.3mmol,73％)；[a]20D=(-)28.4(c=0.5DAF)。元素分析C22H27N3O7Cl2·1CH4O計(jì)算值C,50.37；H,5.70；N,7.66。測(cè)定值C,50.74；H,5.41, N,7.28。實(shí)施例262-(叔-丁基氨基)-5,6-二氯-1H-苯并咪唑使4,5-二氯苯二胺(8.0g,54.2mmol)(Aldrich,Milkwaukee,WI)與叔-丁基異硫氰酸酯(6.3mL,49.7mmol)Aldrich,Milwaukee,WI在無(wú)水吡啶(100ml)中混合。該溶液在氮?dú)庀掠?0℃加熱1小時(shí)。1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對(duì)-甲苯磺酸鹽(24.9g,58.8mmol)(Fluka Chemika)與無(wú)水吡啶(90mL)一起加入。該溶液在90℃加熱2.5小時(shí)。通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除吡啶。殘留物溶于乙酸乙酯(300μM)并用水(4×100ml)提取。乙酸乙酯層用脫色碳處理并通過(guò)硅膠濾墊(4×8cm,230-400目)，用乙酸乙酯洗滌。粗粗產(chǎn)物在硅膠柱(5×16cm,230-400目)上純化，用(1∶4)乙酸乙酯∶己烷洗脫。粗級(jí)分在另一相同柱上再純化，用(1∶3)乙酸乙酯∶己烷洗脫。將來(lái)自兩個(gè)柱的純級(jí)分合并，得到褐色固體(3.13g,12.1mmol,27％)；m.p.219-221℃；MS(API+):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)258(100,M+1)；1H MRR(DMSO-d6)d10.31(s,1H,NH),7.31(s,2H,Ar-H),6.61(s,1H,NH),1.38(s,9H，叔丁基)。元素分析C11H13N3Cl2計(jì)算值C,51.18；H,5.08；N,16.28。測(cè)定值C,51.11；H,5.12；N,16.18。實(shí)施例272-氨基-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使2-氨基-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.0g,2.2mmol)在甲醇(17ml)和乙醇(17ml)中的溶液與碳酸鈉(0.25g,2.4mmol)在水(4ml)中的溶液混合。該溶液在室溫?cái)嚢?4小時(shí)，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上去除甲醇和乙醇。再在用乙酸乙酯(2×100ml)與飽和NaCl(20ml)之間提取該溶液。濃縮有機(jī)相并在硅膠柱(2.5cm×14cm,230-400目)上純化用1∶10甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(4.1g,1.24mmol,57％)m.p.110-112℃；[a]20D=(-)4.2(c=0.5DMF)。元素分析C12H13N3O4Cl2·3/5H2O·2/5CH4O計(jì)算值C,41.63；H,4.45；N,11.74。測(cè)定值C,41.47；H,4.27, N,11.58。實(shí)施例282-氨基-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使無(wú)水1,2-二氯乙烷(100ml)，2-氨基-5,6-二氯-苯并咪唑(10g,49.5mmol)(按Homer和Henry J.Med.Chem.1968,11,946-949的方法合成)和N,O-三甲基甲硅烷基乙酰胺(18.3mL,74.2mmol)混合并在80℃攪拌30分鐘。所有固體被溶解。將三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(9.3mL,48.3mmol)；加入并使溶液在80℃攪拌20分鐘。在3小時(shí)內(nèi)將固體1,2,3,4-四-O-乙酰基-L-呋喃核糖苷(L-TAR)(173g,54.4mmol)分4份加入，同時(shí)繼續(xù)在80℃攪拌。最后一次加入后45分鐘，用冷的飽和碳酸氫鈉(100mL)終止反應(yīng)，然后用二氯甲烷(200mL)提取、將合并的有機(jī)相干燥(硫酸鈉)，傾析并濃縮得到24.8g稠的紅色油狀物。該物質(zhì)在在硅膠柱(5cm×20cm,230-400目)上純化，用1∶40甲醇∶二氯甲烷洗脫。NMR顯示經(jīng)柱層析的高Rf產(chǎn)物含三甲基甲硅烷基基團(tuán)。這些級(jí)分與氟化四丁銨的THF溶液反應(yīng)24小時(shí)，然后通過(guò)硅膠濾墊過(guò)濾，用1∶10甲醇∶二氯甲烷洗滌。
將所有含級(jí)分的產(chǎn)物合并并在硅膠柱(5cm×14cm,230-400目)上純化，用1∶1丙酮∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(3.4g,7.4mmol,15％)；[a]20D=(+)48.0(c=0.5DMF)。元素分析C18H19N3O7Cl2·1/4CH2Cl2·1/2C3H6O計(jì)算值C,46.46；H,4.44；N,8.23。測(cè)定值C,46.59；H,4.35,N,8.07。實(shí)施例295,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)-1H-苯并咪唑使三乙胺(2ml),2,2,2-三氟乙胺(2mL)和2-溴-5,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.4g,1.0mmol)與DMSO(10ml)混合并在封閉管中，于80℃攪拌17天。反應(yīng)混合物在水(30mL)和二氯甲烷(3×100mL)間提取。濃縮有機(jī)相并在裝有2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上經(jīng)多次循環(huán)純化，用1∶4丙酮∶二氯甲烷，隨后用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.02g,0.05mmol,5％)；MS(API+)；m/z(相對(duì)強(qiáng)度)416(100,M+)。元素分析C14H14N3O4FCl2·1/2CH2O·4/5CH4O計(jì)算值C,39.42；H,4.13；N,9.25。測(cè)定值C,39.34；H,3.95, N,9.08。實(shí)施例305,6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.43g,0.96mmol)在甲醇(10ml)和乙醇(10ml)中的溶液與碳酸鈉(0.15g,1.4mmol)在水(2.5ml)中的溶液混合。該溶液在室溫?cái)嚢?4小時(shí)。然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上去除甲醇和乙醇。隨后在乙酸乙酯(4×100ml)和飽和NaCl(20mL)之間提取該溶液。濃縮有機(jī)相，得到分析純的白色固體(0.27g,0.85mmol,88％)m.p.209-210℃；[a]20D=(+)63(c=0.5DMF)。元素分析C12H12N2O4Cl2·2/5H2O·1/10C4H8O2計(jì)算值C,44.44；H,4.09；N,8.36。測(cè)定值C,44.49；H,3.91, N,8.14。實(shí)施例315,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使無(wú)水乙腈(20mL),5,6-二氯-苯并咪唑(FMS-Dottikon AG)(0.59g,3.1mmol)和N,O-雙三甲基甲硅烷基乙酰胺(0.77mL,3.1mmol)混合并在80℃攪拌30分鐘。溶解所有固體。加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(0.75mL,3.9mmol)，該溶液在室溫下攪拌15分鐘，在這段時(shí)間里形成大量固體。加入固體1,2,3,4-四-O-乙酰基-L-呋喃核糖苷，(L-TAR),(1.0g,3.1mmol)，然后將溶液加溫至80℃。所有固體溶解。1.5小時(shí)后將反應(yīng)混合物用冷的飽和碳酸氫鈉(10mL)終止反應(yīng)，然后用二氯甲烷(100ml)提取。干燥有機(jī)相(用硫酸鈉)，傾析并濃縮，得到1.7g黃色油狀物。將該物質(zhì)在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上純化，用1∶40甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到137g部分純的產(chǎn)物。經(jīng)過(guò)另一硅膠柱(2.5cm×16cm,230-400目)上純化，得到純的白色固體產(chǎn)物(0.8g,1.78mmol,57％)，[a]20D=(+)468(c=0.5DMF)。元素分析C18H18N2O7Cl2計(jì)算值C,48.56；H,4.07；N,6.29。測(cè)定值C,48.45；H,4.11, N,6.19。實(shí)施例322-乙酰氨基-5,6-二氯-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使2-乙酰氨基-5,6-二氯-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.35g,0.75mmol)在甲醇(8ml)和乙醇(8ml)中的溶液與碳酸鈉(0.12g,1.1mmol)在水(2ml)中的溶液混合。該溶液在室溫?cái)嚢?4小時(shí)，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上去除甲醇和乙醇。該溶液再在乙酸乙酯(2×150ml)與飽和NaCl(20ml)之間提取。濃縮有機(jī)相并通過(guò)裝有2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron多次循環(huán)而純化，用1∶10甲醇∶二氯乙烷洗脫，得到白色固體(0.067g,0.18mmol,23％)；該物質(zhì)經(jīng)1H NMR,MS和HPLC鑒定，經(jīng)1H NMR鑒定，它含約7％2-氨基-5,6-二氯-β-L-呋喃核糖基-1H-苯并咪唑。HPLC顯示有兩種少量(-5％)雜質(zhì)。實(shí)施例335,6-二氯-2-(甲氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使鹽酸甲胺(3.0g,45mmol)，三乙胺(3ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(25ml)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。反應(yīng)混合物在飽和碳酸氫鈉(50mL)和乙酸乙酯(150mL)之間分離。用硫酸鈉干燥有機(jī)層，濃縮并吸收到硅膠(15g)上。將其干燥并裝填在硅膠柱(55cm×10cm,230-400目)上純化，用1∶10甲醇∶二氯甲烷洗脫。離柱的主要產(chǎn)物為白色固體(0.22g,0.62mmol,54％)m.p.238-240℃；[a]20D=(-)15.2(c=0.5DMF)。元素分析C13H15N3O4Cl2·1/2CH4O計(jì)算值C,44.52；H,4.70；N,11.54。測(cè)定值C,44.43；H,4.58, N,11,36。實(shí)施例345,6-二氯-2-(乙氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使鹽酸乙胺(3.7g,46mmol)，三乙胺(7ml)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.60g,1.1mmol)與無(wú)水乙醇(20ml)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。反應(yīng)混合物在飽和碳酸氫鈉(2×50mL)和乙酸乙酯(200mL)之間分離。有機(jī)相用硫酸鈉干燥，濃縮，并在硅膠柱(2.5cm×18cm,230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫。離柱的主要產(chǎn)物是白色固體(0.30g,0.96mmol,87％)m.p.155-157℃；[a]20D=(-)20.6(c=05DMF)。元素分析C14H17N3O4Cl2·1/2H2O計(jì)算值C,45.30；H,4.89；N,11.32。測(cè)定值C,45.44；H,4.78, N,11.18。實(shí)施例352-環(huán)丙基氨基-5,6-二氯-1-(α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)丙基胺(10mL)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.60g,1.1mmol)(作為合成β端基異構(gòu)體的次要產(chǎn)物獲得，見(jiàn)實(shí)施例1)與無(wú)水乙醇(50mL)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5×16cm,230-400目)上純化，用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.25g粗產(chǎn)物。該物質(zhì)在裝有1mm硅膠轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上多次循環(huán)而進(jìn)一步純化，用1∶15甲醇∶二氯乙烷洗脫，得到白色固體(0.060g,0.14mmol,14％)；m.p.140-141℃；[a]20D=(-)51.8(c=0.5DMF)；UVlmax(e):pH7.0:303nm(10,600),274(1,700)；0.1N NaOH:304nm(10,800),275(2,400)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)374(29.7,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d7.48(s,1H,Ar-H),7.38(s,1H,Ar-H),7.08(br.s,1H,NH),5.86(d,1H,H-1′,J=3.4Hz),5.50(d,1H,OH,J=4.5Hz),5.22(d,1H,OH,J=7.1Hz),4.84(t,1H,OH,J=5.7Hz),4.15(dd,1H,H-2′,J=7.9Hz,J=4Hz),4.10(dd,1H,H-3′,J=7.3Hz,J=4.5Hz),4.05-4.01(m,1H,H-4′),3.66-3.61(m,1H,H-5′),3.47-3.41(m,1H,H-5″),2.74-2.71(dd,1H,環(huán)丙基-CH,J=6.7Hz,J=3.3Hz),0.69(d,2H,J=6.9Hz，環(huán)丙基-CH2),0.51-0.45(m,2H,環(huán)丙基-CH2)。元素分析C15H17N3O4Cl2·0.60CH4O·0.2CH2Cl2計(jì)算值C,46.24；H,4.86；N,10.24。測(cè)定值C,46.13；H,4.83, N,10.28。實(shí)施例365,6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使異丙基胺(10mL)和2-溴-5,6-二氯-1-(2,3,5-三-O-乙?；?α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.60g,1.1mmol)(作為β端基異構(gòu)體合成的次要產(chǎn)物獲得)與無(wú)水乙醇(10mL)混合并在80℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并在硅膠柱(2.5×18cm,230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.39％粗產(chǎn)物。該物質(zhì)在裝有1mm硅膠轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上進(jìn)一步純化，用1∶2丙酮∶二氯乙烷洗脫，得到白色固體(0.29g,0.78mmol,68％)；m.p.131-133℃；[a]20D=(-)41.4(c=0.5DMF)；UV1max(e):pH7.0:3.04nm(11,000),276(2,000)；0.1N NaOH:306nm(11,500),277(2,500)；MS(CI):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)376(34.8,M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d7.46(s,1H,Ar-H),7.31(s,1H,Ar-H),6.63(d,1H,NH,J=7.4Hz),5.94(d,1H,H-1′,J=3.4Hz),5.53(d,1H,OH,J=4.4Hz),5.22(d,1H,OH,J=7.1Hz),4.86(t,1H,OH,J=5.7Hz),4.15(dd,1H,H-2′,J=7.7Hz,J=4.0Hz),4.10(dd,1H,H-3′,J=7.3Hz,J=4.3Hz),4.05-3.94(m,2H,異丙基CH,H-4′),3.69-3.63(m,1H,H-5′),3.49-3.41(m,1H,H-5″),1.19(d,3H,J=6.5Hz異丙基-CH3),1.18(m,3H,異丙基-CH3)。元素分析C15H17N3O4Cl2·0.4CH2Cl2計(jì)算值C,45.09；H,4.86；N,10.24。測(cè)定值C,45.10；H,4.97, N,10.00。實(shí)施例375,6-二氯-2-((2-氟-1-甲基乙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使碳酸鈉(0.032g,0.30mmol)和5,6-二氯-2-(2-氟異丙基氨基)-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.10g,0.20mmol)與水(1mL)，甲醇(2.5mL)和乙醇(2.5mL)混合并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。濃縮該溶液以去除大部分甲醇和乙醇，并隨后與乙酸乙酯(75ml)混合。該溶液用飽和NaCl(2×5ml)提取。有機(jī)相用Na2SO4干燥。傾析并濃縮。殘留物在裝有1mm硅膠轉(zhuǎn)動(dòng)體的chromatotron上純化，用1∶10甲醇∶CH2Cl2洗脫，得到白色固體(0.066g,0.17mmol,84％)；[a]20D=(-)24.8(c=0.5DMF)；MS(AP+):m/z(相對(duì)強(qiáng)度)394(98,M+)；1H NMR(DMSO-d6)d 7.64(s,1H,Ar-H),7.37(s,1H,Ar-H),7.13(d,0.5H,NH,J=7.9Hz),7.07(d,0.5H,NH,J=7.6Hz),5.76(d,1H,J=7.9Hz,H-1′),5.69(m,1H,OH),5.31-5.23(m,2H,OH),4.51-4.45(m,1H,CH2F),4.35-4.32(m,1H,CH2F),4.29-4.17(m,2H,H-2′and H-3′),4.06-3.97(m,1H,NHCH),3.97(br.s,1H,H-4′),3.70-3.31(m,2H,H-5′),1.22-1.18(m,3H,CH(CH3)).元素分析C15H18N3O4Cl2F·0.4H2O計(jì)算值
C,44.88；H,4.72；N,10.47。測(cè)定值C,44.98；H,4.76, N,10.46。實(shí)施例385,6-二氯-2-((2-氟-1-甲基乙基氨基)-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使氟代丙酮(5g)和5,6-二氯2-氨基-1-(2,3,5-三-O-乙酰基-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.38g,0.82mmol)與對(duì)甲苯磺酸(0.050g,0.26mmol)混合并在裝有迪安-斯達(dá)克榻分水器的燒瓶中回流攪拌。4小時(shí)后加入氰基硼氫化鈉(0.16g,2.4mmol)并繼續(xù)回流6小時(shí)。該溶液用乙酸乙酯(200ml)稀釋并用飽和NaCl(2×50ml)和水(50ml)洗滌。將有機(jī)相干燥(Na2SO4)傾析和濃縮。粗產(chǎn)物在硅膠柱(230-400目，2.5×18cm)上純化，用1∶25甲醇∶CH2Cl2洗脫得到0.19g粗產(chǎn)物。該物質(zhì)在chromatotron(2mm轉(zhuǎn)動(dòng)體)上進(jìn)一步純化，用1∶1乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到淡黃色固體(0.10g,0.20mmol,24％)；MS(API+；m/z(相對(duì)強(qiáng)度)520(62.63,M+)；1H NMR(DMSO-d6)d7.66(s,1H,Ar-H),7.51(s,1H,Ar-H),7.30(d,1H,NH,J=7.6Hz),6.25(d,1H,H-1′,J=7.5Hz),5.31-5.23(m,1H,H-2′),5.48-5.44(m,1H,H-3′),4.63-4.26(m,6H,CH2F,CH,H-4′and 5′),2.21(s,3H,OAc),2.19(s,3H,OAc),2.02(s,3H,OAc),1.24(d,3H,CH(CH3),J=7.5Hz).元素分析C20H24N3O7Cl2F計(jì)算值C,48.47；H,4.65；N,8.08。測(cè)定值C,48.60；H,4.73, N,7.94。實(shí)施例395,6-二氯-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑使5,6-二氯-1,2-苯二胺(0.61g,3.4mmol)和異丙基異硫氰酸酯(0.39g,3.8mmol)在無(wú)水吡啶(10ml)中混合，加熱至80℃并保持15分鐘。然后加入二環(huán)己基碳化二亞胺(1.06g,5.14mmol)并將產(chǎn)生的混合物在100℃攪拌5小時(shí)。加入甲苯(30ml)并將混合物通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。留下棕色的殘留物。該產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)一步純化，用6.5∶3∶0.5乙酸乙酯/己烷/三乙胺洗脫，得到粘性的固體，該固體用乙腈重結(jié)晶，得到0.46g(60％)褐色固體；m.p.218-220℃。元素分析C10H11Cl2N3計(jì)算值C,49.20；H,4.54；N,17.21。測(cè)定值C,49.31；H,4.54, N,17.33。通法Ⅰ用1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對(duì)-甲苯磺酸鹽作為脫硫劑合成2-(烷基氨基)-1H-苯并咪唑使合適的1,2-苯二胺與合適的異硫氰酸鹽(1.0-1.25mmol/mmol二胺)和無(wú)水吡啶(3-5mL/mmol二胺)混合。得到的混合物加熱至80℃并保持30分鐘，然后一次加入固體1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對(duì)-甲苯磺酸鹽(1.1-1.35mmol/mmol二胺)。得到的混合物在80-90℃攪拌3-20小時(shí)，之后讓其冷卻至室溫。該步驟的其余部分與上述相同，只是產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析或用乙腈或用1,4-二尪烷重結(jié)晶純化。5,6-二氯-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑按通法Ⅰ，應(yīng)用5,6-二氯-1,2-苯二胺(200.0g,1.13mol)，異丙基異硫氰酸酯(122.0g,1,21mol),1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對(duì)甲苯磺酸鹽(622.0g,1.47mol)和吡啶(4L)。產(chǎn)物用乙腈重結(jié)晶，得到184g(67％)棕色固體。分析數(shù)據(jù)與上面報(bào)告的一致。2-(環(huán)丙基氨基)-5,6-二氯-1H-苯并咪唑按通法Ⅰ，應(yīng)用4,5-二氯-1,2-苯二胺(6.04g,34.1mmol)、環(huán)丙基異硫氰酸酯(3.69g,37.2mmol),1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對(duì)-甲苯磺酸鹽(20.1g,47.4mmol)和吡啶(135ml)。產(chǎn)物用乙腈重結(jié)晶，得到5.82g(70％)黃色固體；m.p.223-225℃。元素分析C10H9Cl2N3計(jì)算值C,49.61；H,3.75；N,17.36。測(cè)定值C,49.53；H,3.78, N,17.12。通法Ⅱ2-(烷基氨基)-1H-苯并咪唑與1,2,3,5-三-O-乙酰基-L-呋喃核糖的偶合使合適的2-(烷基氨基)-1H-苯并咪唑與1,2-二氯乙烷(2-3mL/mmol苯并咪唑)和N,O-雙(三甲基甲硅烷基)，乙酰胺(1-1.25mmol/mmol苯并咪唑)混合，將得到的混合物加熱至80℃并保持30分鐘。加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(0.5-0.7mmol/mmol苯并咪唑)并將混合物在80℃再攪拌15分鐘，隨后-次加入固化1,2,3,5-四-O-乙?；?L-呋喃核糖(1-1.25mmol/mmol苯并咪唑)。得到的混合物在80℃攪拌2-20小時(shí)，之后將其冷卻至室溫。然后用5％碳酸氫鈉水溶液(10mL/mmol苯并咪唑)和二氯甲烷(3-5ml/mmol苯并咪唑)稀釋并將兩相混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘。收集有機(jī)層并將水層再用另外一份二氯甲烷(3-5ml/mmol苯并咪唑)反提取，合并的有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器去除溶劑。該產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)一步純化。5,6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑按通法Ⅱ，應(yīng)用5,6-二氯-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑(25.0g,102mmol),N,O-雙(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(25.9mL,21.3g,105mmol,103相當(dāng)量)，1、2-二氯乙烷(300ml)。三乙基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(12.8mL,14.7g66.2mmol,0.65相當(dāng)量)和1,2,3,5-三-O-乙?；?L-呋喃核糖(34.0g,107mmol,1.05相當(dāng)量)經(jīng)硅膠層析用35∶1二氯甲烷/甲醇洗脫，得到39.6g(77％)黃色泡沫狀物。MS(CI):m/z501(M+1)。通法Ⅲ2-(烷基氨基)-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑的脫保護(hù)將適當(dāng)?shù)?-(烷基氨基)-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑溶于乙醇(4-5mL/mmol三乙酸酯)中。在另外的燒瓶中放入碳酸鈉(1.0-1.3mmol/mmol三乙-醋酸酯)、水(1-2mL/mmol三乙-醋酸酯)和甲醇(3ml/mmol三乙-醋酸酯)。在室溫下一次性地將碳酸鈉懸液加到三乙-醋酸酯的乙醇溶液中。所得到的溶液在室溫?cái)嚢?8小時(shí)?；旌衔镌儆靡宜嵋阴?25mL/mmol三乙-醋酸酯)稀釋。收集有機(jī)層并用飽和鹽水(100mL/mmol三乙酸酯)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾，并通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑。產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析進(jìn)一步純化。5,6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑按通法Ⅲ，應(yīng)用5,6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(2,3,5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(7.50g,14.93mmol)、碳酸鈉(1.72g,16.23mmol)、水(29mL)，甲醇(100mL)和乙醇(100mL)。產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析純化用55∶45二氯甲烷/甲醇洗脫，得到4.72g(84％)白色泡沫狀物。分析數(shù)據(jù)與指定的結(jié)構(gòu)一致。實(shí)旋例40人巨細(xì)胞病毒(HCMV)測(cè)定法HCMV株系A(chǔ)D169在96孔培養(yǎng)板中的單層人胚胎肺細(xì)胞(MRC5細(xì)胞)上生長(zhǎng)。以約每細(xì)胞0.01個(gè)感染性病毒顆粒的比率感染細(xì)胞后，以6個(gè)不同濃度，每個(gè)3孔，將被測(cè)試化合物加至選擇的孔中。相同濃度的化合物也加至含單層未感染細(xì)胞的孔以分析化合物毒性。將培養(yǎng)板溫育5天。通過(guò)顯微鏡檢查估測(cè)最低毒性劑量?？共《咀饔玫腎C50通過(guò)使用印跡和定量特異性DNA雜交測(cè)定每孔中的HCMV DNA進(jìn)行估測(cè)，類似于Gadler的方法。(Antimicrob.Agents Chemother.1983,24,370-374)。實(shí)施例 HCMV MRG5toxIC50 CC50實(shí)施例3 0.06-023μM 30μM實(shí)施例4 0.91-2.5μM 100μM實(shí)施例5 0.03-0.05μM 100μM實(shí)施例10 1.1-1.3μM100μM實(shí)施例8 41μM 100μM實(shí)施例12 3.5-5.8μM100μM實(shí)施例34 0.75-0.85μM 100μM實(shí)施例41片劑將各成分和聚乙烯吡咯烷酮溶液通過(guò)溫法制成顆粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓片，將下列配方A和B制成片劑。配方Amg/片 mg/片(a)活性成分250250(b)乳糖B.P.21026(c)聚乙烯吡咯烷酮 15 9(d)淀粉羥基乙酸鈉 20 12(e)硬脂酸鎂5 3500300配方Bmg/片 mg/片(a)活性成分250250(b)乳糖150-(c)Avicel pH10160 26(d)聚乙烯吡咯烷酮B.P. 15 9(e)淀粉羥基乙酸鈉 20 12(f)硬脂酸鎂5 3500300配方Cmg/片活性成分 100乳糖 200淀粉 50聚乙烯吡咯烷酮5硬脂酸鎂 4359
通過(guò)混合后的各成分直接壓片，將下列配方D和E制成片劑。用于配方E中的乳糖是直接壓制型(Dairy Crest-“Zeparox”)。配方Dmg/片活性成分 250預(yù)膠凝化淀粉NF15 150400配方Emg/片活性成分 250乳糖 150Avicel 100500配方F(控釋制劑)成分(如下)的聚乙烯吡咯烷酮溶液按濕法制成顆粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓片將下列配方制成片劑。
mg/片(a)活性成分 500(b)羥丙基甲基纖維素 112(Methocel K4M Premium)(c)乳糖B.P. 53(d)聚乙烯吡咯烷酮B.P.C. 28(e)硬脂酸鎂 7700實(shí)施例42膠囊劑配方A通過(guò)將上面實(shí)施例1配方D中的成分混合，并裝入兩節(jié)的硬明膠膠囊而制成。配方B(下文)以類似方法制備。配方Bmg/片(a)活性成分 250(b)乳糖B.P. 143(c)淀粉羥基乙酸鈉25(d)硬脂酸鎂 2420配方Cmg/片(a)活性成分 250(b)Macrogol 4000 BP 350600通過(guò)融熔macogol 4000 BP，活性成分分散在融熔物中，并將融熔物裝入兩節(jié)的硬明膠膠囊而制成膠囊劑。配方Dmg/片活性成分 250卵磷脂100花生油100450通過(guò)活性成分分散在卵磷脂和花生油中，并將分散體裝入軟的彈性明膠膠囊中而制成膠囊劑。配方E(控釋膠囊)用擠壓機(jī)擠壓成分a,b或c，然后使擠壓物成球形和干燥而制成下列控釋膠囊劑。干燥的小丸隨后用控釋膜(d)包衣并裝入兩節(jié)硬明膠膠囊。
mg/片(a)活性成分 250(b)微晶纖維素 125(c)乳糖BP 125(d)乙基纖維素 13513實(shí)施例43注射劑配方A活性成分 0.200g鹽酸溶液，0.1M 適量至pH4.0～7.0氫氧化鈉溶液，0.1M 適量至pH4.0～7.0無(wú)菌水 適量至10ml活性成分溶于大部分水(35-40℃)中并且按需要用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至4.0和7.0間。用水加至一定體積，通過(guò)滅菌微孔濾器濾入滅菌的10mL琥珀色玻璃小瓶(類型1)并無(wú)菌密封和外蓋封閉。配方B活性成分0.125g滅菌，無(wú)熱原，pH7磷酸鹽緩沖液 適量至25mL實(shí)施例44肌肉內(nèi)注射劑活性成分0.20g苯甲醇 0.10gGlycofurol 1.45g注射用水 適量至3.00ml將活性成分溶于glyoofurol。然后加入苯甲醇并溶解，加水至3ml。該混合物隨后通過(guò)滅菌微孔濾器過(guò)濾并密封入滅菌的3ml琥珀色玻璃小瓶(類型1)中。實(shí)施例45糖漿劑活性成分 0.2500g山梨醇溶液 1.5000g甘油2.0000g苯甲酸鈉0.0050g芳香劑，桃17.42.31690.0125ml純化水適量至5.0000ml將活性成分溶于甘油和大部分純化水的混合物中。然后將苯甲酸鈉的水溶液加至該溶液中，隨后加入山梨醇溶液并最后加入芳香劑。用純化水補(bǔ)足溶液體積并混合均勻。實(shí)施例46栓劑mg/栓劑活性成分(631m)*250硬脂肪，BP(Witepsol H15-Dynamit Nobel) 17702020*該活性成分作為粉末使用，其中至少90％的顆粒直徑為631m或更小。
將1/5 Witepsol H15于最高45℃的有蒸氣套的鍋中融熔?；钚猿煞纸?jīng)1001m篩過(guò)篩，并使用裝有切割頭的silvrson在攪拌混合下加至融化的基質(zhì)中，直至獲得均勻的分布?；旌衔锉３钟?5℃，將剩下的WitepsolH15加至混懸液中并攪拌以保證均勻混合。使整個(gè)混懸液通過(guò)2501m不銹鋼濾網(wǎng)，同時(shí)在連續(xù)攪拌下冷卻至40℃。在38～40℃，將2.02g混合物裝入合適的2ml塑料模子中。使栓劑在室溫下冷卻。實(shí)施例47陰道栓劑mg/陰道栓活性成分(631m) 250無(wú)水葡萄糖 380馬鈴薯淀粉 363硬脂酸鎂 71000將上述成分直接混合，并將得到的混合物直接壓制制備陰道栓劑。
權(quán)利要求
1．式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯或該酯的鹽在制備一種可與至少一種治療或預(yù)防病毒感染的其他治療劑同時(shí)或順序使用的藥物中的應(yīng)用，式(1)為
其中R代表氫，鹵素原子，-NR1R2，這里R1和R2可相同或不同，各自獨(dú)立地選自氫，C1-6烷基，氰基C1-6烷基，羥基C1-6烷基，鹵素C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C1-6烷基C3-7環(huán)烷基，C2-6鏈烯基，C3-7環(huán)烷基C1-6烷基，C2-6炔基，芳基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)C1-6烷基，-COC1-6烷基或R1R2與它們所連接的N原子一起形成含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧和硫的飽和或不飽和的三，四，五或六元的雜環(huán)。
全文摘要
本發(fā)明涉及苯并咪唑衍生物在制備一種可與至少一種治療或預(yù)防病毒感染的其他治療劑同時(shí)或順序使用的藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)C07H19/052GK1236616SQ9910516
公開(kāi)日1999年12月1日 申請(qǐng)日期1999年4月19日 優(yōu)先權(quán)日1994年7月7日
發(fā)明者S·D·張伯倫, G·W·科斯扎爾卡 申請(qǐng)人:惠爾康基金會(huì)集團(tuán)公司