專利名稱：新的異羥肟酸化合物及其制備方法和含有它們的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新的異羥肟酸化合物及其制備方法和含有它們的藥物組合物。這些新化合物是一類新的金屬蛋白酶抑制劑。
胞外基質(zhì)的重建在眾多生理和病理過程中涉及例如胚胎發(fā)育、瘢痕形成、正常的和病理性的血管生成、結締和關節(jié)組織的退化、癌癥的入侵和轉移。
胞外基質(zhì)的金屬蛋白酶(“基質(zhì)金屬蛋白酶”或MMPs)，起初被描述為在調(diào)節(jié)胞外物質(zhì)的形成和破壞中所涉及的酶，在這類過程期間被過度表達并與病癥發(fā)展有關。鋅蛋白酶家族擁有至少十四個成員。已知其底物的主要成員是膠原酶(間質(zhì)MMP-1、嗜中性MMP-8和膠原酶-3或MMP-13)、明膠酶(IV型膠原酶MMP-2和MMP-9或明膠酶A和B)、金屬彈性蛋白酶MMP-12、基質(zhì)溶素(包括基質(zhì)溶素-1或MMP-3)和明膠酶A激活劑(MT-MMPs，具有跨膜結構域的唯一MMPs)。
在腫瘤的病理中，癌細胞和腫瘤外周基質(zhì)的正常細胞分泌的那些酶直接參與間質(zhì)組織中內(nèi)皮細胞和腫瘤細胞的開放性遷移途徑，并間接參與胞外基質(zhì)中膜因子或隔離因子(血管生成或生長因子，炎癥介質(zhì)，例如α腫瘤壞死因子或α-TNF等)的釋放和成熟化，因而有助于所有階段的腫瘤發(fā)展(初期腫瘤的生長、血管生成、局部入侵和轉移的形成)。因此，MMP抑制劑作為能夠抑制許多病癥，包括癌癥發(fā)展的新藥理學物質(zhì)是特別有效的。
文獻中已記載有各種金屬蛋白酶抑制劑，更具體地說，其中包括專利申請EP 606046、WO 96/40101、WO 96/00214和WO 97/27174以及在“藥物化學雜志”(J.Med.Chem.1998，41，640-649)中描述的化合物。
除了本發(fā)明化合物是新化合物的事實以外，據(jù)證明它們還是一類比文獻中所描述的那些金屬蛋白酶抑制劑更強的金屬蛋白酶抑制劑，因此使得它們具有治療癌癥、風濕性疾病，如關節(jié)病和類風濕性關節(jié)炎等的潛在價值。
更具體地說，本發(fā)明涉及式(I)化合物
其中R1表示-直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基(可任意地被一個或多個相同或不同的取代基取代，所述取代基各自彼此獨立地選自羥基、鹵素、直鏈或支鏈的(C1-C6)烷氧基、巰基、支鏈或支鏈(C1-C6)烷硫基、芳基、直鏈或支鏈(C1-C6)?；桶被被陨磉€可任意地被一個或兩個相同或不同的直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基、環(huán)烷基或芳基取代)，-直鏈或支鏈(C1-C6)?；?環(huán)烷基，-芳基，-雜環(huán)基，-氨基羰基-(C1-C4)烷基，氨基部分可任意地被一直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基所取代，所述(C1-C6)烷基可任意地被一個或多個相同或不同的選自芳基、芳基-(C1-C6)烷基(其中的烷基部分可以是直鏈或支鏈的)、環(huán)烷基和直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基氨基羰基的基團所取代，R2表示直鏈或支鏈的(C1-C4)亞烷基，R3表示X或Y基團，其中·X表示直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)?；⒅辨溁蛑ф?C1-C6)烷氧羰基、氨基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基(該氨基部分自身可任意地被一個或兩個相同或不同的直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代)、羥基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、羧基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、氨基羰基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、巰基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，和·Y表示式T-U-V-的基團(V部分與硫原子鍵合)，其中-T表示芳基或雜環(huán)基，-U表示一單鍵、硫原子、氧原子、NH、C＝O或式-R8O-、-R8S-、-R8NH-、-R8OR9-、-R8SR9-、-R8-NH-R9-、-R8-CO-R9-或-R9-的基團，其中R8表示直鏈或支鏈(C1-C6)亞烷基并且R9表示亞芳基或亞雜芳基，應該理解在這些基團中R8鍵于Y基團的T部分上并且R9或雜原子鍵于Y基團的V部分，-V表示直鏈或支鏈(C1-C6)亞烷基，R4表示-當R3表示Y基團時，表示選自下述的基團直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、環(huán)烷基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、被雜環(huán)基取代的直鏈或支鏈(C1-C6)烷基和雜環(huán)基，-或者當R3表示X或Y基團時，表示選自下述的基團聯(lián)芳基、芳基雜芳基和雜芳基芳基，涉及其異構體和其與可藥用酸或堿的加成鹽。
應該理解-“環(huán)烷基”應理解為3-10個碳原子的單環(huán)或雙環(huán)體系，-“芳基”應理解為苯基、萘基、四氫萘基、二氫萘基、茚基或二氫茚基，它們各自可任意地被一個或多個相同或不同的取代基取代，所述取代基選自鹵素、羥基、氰基、硝基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)三鹵代烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、直鏈或支鏈(C1-C6)?；?、羧基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧羰基和氨基，氨基本身可任意地被一個或兩個相同或不同的直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代，-“聯(lián)芳基”應理解為其中環(huán)碳原子之一被第二個芳基取代的芳基，-“雜環(huán)基”應理解為具有4-12個環(huán)原子并且含有一、二或三個相同或不同的雜原子的飽和或不飽和單環(huán)或雙環(huán)基團，所述雜原子選自氧、氮和硫，應理解該雜環(huán)基可任意地被一個或多個相同或不同的取代基取代，所述取代基選自鹵素、羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)三鹵代烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基和氨基，氨基本身可任意地被一個或多個相同或不同的直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代，-“雜芳基”應理解為不飽和的芳香雜環(huán)。
有利的是，本發(fā)明的優(yōu)選化合物是那些其中R1表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，更優(yōu)選R1是異丁基的化合物。
根據(jù)本發(fā)明的一個有益變化，優(yōu)選的化合物是那些其中R3表示上文定義的基團X并且R4表示聯(lián)芳基、芳基雜芳基或雜芳基芳基的化合物。
根據(jù)本發(fā)明的另一個有益變化，優(yōu)選的化合物是那些其中R3表示上文定義的基團Y并且R4表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，環(huán)烷基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、被雜環(huán)基取代的直鏈或支鏈(C1-C6)烷基或雜環(huán)基的化合物。
根據(jù)第三種尤為有益的變化，本發(fā)明的優(yōu)選化合物是那些其中R3表示上文定義的基團Y并且R4表示聯(lián)芳基、芳基雜芳基或雜芳基芳基的化合物。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物是-4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸；-4-{[4-(苯基)-芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸；-4-{[4-(芐氧基)-芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸；-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}-4-(甲硫基)丁異羥肟酸；-4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸；和-2-{[2-(二苯甲基氨基)-2-氧代乙基]-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}-4-(芐硫基)丁異羥肟酸。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物的異構體以及它們與可藥用酸或堿的加成鹽是本發(fā)明整體的一部分。
可藥用酸可列舉，但不限于鹽酸、氫溴酸、硫酸、膦酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、酒石酸、馬來酸、檸檬酸、抗壞血酸、草酸、甲磺酸、樟腦酸等。
可藥用堿可舉例，但不限于氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁基胺等。
本發(fā)明還包括制備式(I)化合物的方法，該方法的特征在于使用式(II)化合物作為原料
其中R2如式(I)中所定義，Ra和Rb形成一個連接羰基與硫原子的單鍵，或者Ra表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷氧基并且Rb表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，在常規(guī)有機合成的條件下，用式(II’)化合物取代式(II)化合物的伯胺官能基R1-Z (II’)其中R1如式(I)所定義并且Z表示有機化學中的常見離去基團，得到式(III)化合物
其中R1和R2如式(I)中所定義并且Ra和Rb如上文所定義，式(III)化合物在堿性條件下用式(IV)化合物處理R4-SO2-Cl (IV)其中R4如式(I)所定義，得到式(V)化合物，
其中R1、R2、R4、Ra和Rb定義如上，當Ra和Rb形成一單鍵時，式(V)化合物在甲醇和鈉的存在下用式(VI)化合物處理R3-Hal(VI)其中R3如式(I)所定義并且Hal表示鹵素原子，得到式(VII)化合物
其中R1、R2、R3和R4如式(I)所定義，式(VII)與式(V)化合物合起來構成式(IX)化合物
其中R1、R2、R3、R4和Ra如上文所定義，式(IX)化合物的酯官能基在常規(guī)條件下水解，得到式(X)化合物
其中R1、R2、R3和R4如上文所定義，式(X)化合物直接用羥胺鹽酸鹽處理或用O-取代的羥胺處理，后者隨后在常規(guī)操作條件下脫保護，得到上文定義的式(I)化合物，如果需要，可采用常規(guī)純化技術純化式(I)化合物，可任意地采用常規(guī)分離技術將其分離為其異構體，并且如果需要，可用可藥用酸或堿將其轉化為加成鹽。
式(II)、(II’)、(IV)和(VI)化合物均是市售化合物，或者它們可按照有機合成的常規(guī)方法得到。
本發(fā)明還涉及含有至少一種式(I)化合物、其旋光異構體或其與可藥用酸或堿的加成鹽作為活性成分的藥物組合物，該藥物組合物可以是所述的活性成分本身，也可以結合有一種或多種惰性的無毒可藥用賦形劑或載體。
本發(fā)明的藥物組合物中具體可提及適于口服、胃腸外(靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下)、經(jīng)皮或透皮、經(jīng)鼻、直腸、經(jīng)舌、眼或呼吸道給藥的組合物，尤其是片劑或糖錠劑，舌下片劑、軟明膠膠囊、硬明膠膠囊、栓劑、霜劑、軟膏劑、皮膚用凝膠、可注射或飲用制劑、氣霧劑、滴眼劑或滴鼻劑等。
根據(jù)患者的年齡和體重，給藥途徑，疾病的性質(zhì)和嚴重程度以及可能的相關治療，給藥的劑量有所變化，對于每日給藥一次或多次，該劑量范圍為1-500mg。
下列實施例將進一步說明而非限制本發(fā)明。
使用的原料是已知的產(chǎn)物或可按照已知方法制備。各種合成步驟得到用于制備本發(fā)明化合物的合成中間體。
實施例和合成步驟中所述的化合物的結構已通過常規(guī)的分光光度技術測定(紅外、NMR、質(zhì)譜)。實施例14-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸步驟A3-(異丁基氨基)四氫-2-噻吩酮在0℃和惰性氣氛下，將4.6mmol三乙胺加到4.23mmol D-高半胱氨酸硫內(nèi)酯(thiolactone)鹽酸鹽和8.46mmol異丁醛在20ml甲醇的溶液中。在室溫攪拌4小時后，將該反應混合物冷卻到0℃，用40分鐘緩慢地加入8.8mmol NaCNBH3。在0℃攪拌30分鐘后，將反應混合物水解，然后用乙醚萃取。合并的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。經(jīng)硅膠色譜(二氯甲烷/甲醇99/1)分離，得到糖漿形式的目的產(chǎn)物。步驟BN1-異丁基-N1-(2-氧代四氫-3-噻吩基)-4-甲氧基-1-苯磺酰胺在0℃下，將5mmol N-甲基嗎啉和2.5mmol 4-甲氧基苯磺酰氯加到2.5mmol步驟A獲得的化合物在15ml二氯甲烷中的溶液中。在室溫攪拌12小時后，將該反應混合物傾入水中并用二氯甲烷萃取。合并的有機相用2N鹽酸水溶液、再用5％碳酸氫鈉溶液和水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥后，過濾并蒸發(fā)，經(jīng)硅膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇20/1)，得到目的產(chǎn)物。熔點92℃步驟C4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁酸甲酯在室溫下，將1.1mmol步驟B獲得的化合物加到1.26mmol鈉的3ml甲醇溶液中。攪拌15分鐘后，加入1.1mmol芐基溴并持續(xù)攪拌2小時。蒸發(fā)甲醇后，將所得固體在乙酸乙酯中研制并過濾。蒸發(fā)濾液，得到殘余物，經(jīng)硅膠色譜純化(二氯甲烷/甲醇20/1)，得到糖漿狀預期產(chǎn)物。質(zhì)譜FAB+∶[M++1]m/z＝466步驟D4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁酸將1.77mmol氫氧化鉀加到0.95mmol步驟C獲得的化合物在3/1二噁烷/水的混合液中。于50℃攪拌3小時后，蒸除二噁烷，殘余的水相用水稀釋，加入5％鹽酸溶液酸化到pH2，然后用乙酸乙酯萃取。合并的有機相經(jīng)洗滌，干燥、過濾并減壓蒸發(fā)。經(jīng)硅膠色譜(二氯甲烷/甲醇93/7)分離，得到糖漿狀預期產(chǎn)物。步驟EN-叔丁氧基-4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁酰胺將0.6mmol步驟D得到的化合物、0.6mmol 1-羥基苯并三唑、3mmolN-甲基嗎啉和1.2mmol O-叔丁基羥胺鹽酸鹽溶于9ml二氯甲烷中。然后往該溶液中加入0.78mmol N-[(二甲氨基)丙基]-N-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽并將該反應混合物在室溫攪拌12小時。加入水稀釋該反應混合物后，用二氯甲烷萃取。合并的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。經(jīng)硅膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇99/1)，得到糖漿狀的產(chǎn)物。質(zhì)譜FAB+∶(M++1)m/z＝523步驟F4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}-丁異羥肟酸將含有0.31mmol步驟E獲得的化合物在2ml二氯甲烷和2ml三氟乙酸中的溶液在室溫攪拌6小時，減壓濃縮后，經(jīng)硅膠色譜(二氯甲烷/甲醇98/2)分離。獲得糖漿狀殘余物，之后溶于乙酸乙酯。將該溶液濾過硅藻土后減壓濃縮，分離得到糖漿狀的預期產(chǎn)物。質(zhì)譜FAB+∶(M++1)m/z＝467 (M+-CONHOH)m/z＝406實施例24-{[4-(苯基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸按照實施例1描述的方法，在步驟C使用4-(苯基)芐基溴作為反應試劑得到該產(chǎn)物。步驟C4-{[4-(苯基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁酸甲酯步驟D4-{[4-(苯基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁酸步驟EN-叔丁氧基-4-{[4-(苯基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]氨基}丁酰胺步驟F4-{[4-(苯基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}-丁異羥肟酸實施例34-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸按照實施例1描述的方法，在步驟B使用4-聯(lián)苯基磺酰氯作為反應試劑得到該產(chǎn)物。步驟BN1-異丁基-N1-(2-氧代四氫-3-噻吩基)-4-苯基-1-苯磺酰胺步驟C4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}丁酸甲酯步驟D4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}丁酸步驟EN-叔丁氧基-4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}丁酰胺步驟F4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺酰基]氨基}丁異羥肟酸實施例44-{[4-(芐氧基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸按照實施例1步驟A～D描述的方法，在步驟C使用4-(芐氧基)芐基溴作為反應試劑，然后進行下述步驟G得到該產(chǎn)物。步驟C4-{[4-(芐氧基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁酸甲酯步驟D4-{[4-(芐氧基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁酸步驟G4-{[4-(芐氧基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸將1mmol步驟D獲得的化合物、1mmol 1-羥基苯并三唑、5mmol N-甲基嗎啉和2mmol羥胺鹽酸鹽溶于15ml二氯甲烷中。然后往該溶液中加入1.2mmol N-[(二甲氨基)丙基]-N-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽并將該反應混合物在室溫攪拌12小時。該反應混合物加入水水解，水相隨后用二氯甲烷萃取。合并的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。經(jīng)硅膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇98/2)，得到糖漿狀的預期產(chǎn)物。實施例52-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺酰基]氨基}-4-(甲硫基)丁異羥肟酸步驟H2-氨基-4-(甲硫基)丁酸甲酯鹽酸鹽在-10℃下，往15ml甲醇中加入16.5mmol亞硫酰氯，然后少量多次地加入11mmol D-甲硫氨酸。添加完畢后，使反應混合物升至室溫。12小時后，將反應混合物減壓濃縮，得到晶體，用乙醚/甲醇混合液重結晶，分離得到預期產(chǎn)物。熔點143℃步驟I2-(異丁基氨基)-4-(甲硫基)丁酸甲酯在0℃和惰性氣氛下，將4.3mmol三乙胺加到3.9mmol步驟H獲得的化合物和7.8mmol異丁醛在20ml甲醇中的溶液中。在室溫反應6小時后，將反應混合物冷卻到0℃并用40分鐘加入7.8mmol硼氫化鈉。添加完畢后，在0℃繼續(xù)攪拌30分鐘，之后加入碳酸氫鈉水溶液水解該反應混合物。用乙醚萃取后，合并的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并減壓濃縮。經(jīng)硅膠色譜(二氯甲烷/甲醇99/1)分離，得到預期產(chǎn)物。步驟J2-{異丁基-[(4-苯基)苯基磺酰基]氨基}-4-(甲硫基)丁酸甲酯在0℃下，將3.71mmol三乙胺和1.8mmol 4-聯(lián)苯基磺酰氯加到1.8mmol步驟I獲得的化合物在15ml二氯甲烷中的溶液中。使該反應混合物升至室溫并攪拌12小時，之后傾入水中，用二氯甲烷萃取。合并的有機相用2N鹽酸溶液洗滌，然后用碳酸氫鈉溶液洗滌，干燥，過濾并減壓濃縮。經(jīng)硅膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇20/1)，得到糖漿狀預期產(chǎn)物。步驟K2-{異丁基-[4-(聯(lián)苯基)磺酰基]氨基}-4-(甲硫基)丁異羥肟酸按照實施例1步驟D～F描述的方法處理步驟J得到的產(chǎn)物，獲得預期產(chǎn)物。質(zhì)譜FAB+∶(M++1)m/z＝437；[M+-CONHOH]m/z＝376實施例62-{[2-(二苯甲基氨基)-2-氧代乙基]-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]氨基}-4-(芐硫基)丁異羥肟酸制備12-[(2-氧代四氫-3-噻吩基)氨基]乙酸叔丁酯在0℃下，將5.5mmol二異丙基乙基胺，然后將5.5mmol溴乙酸叔丁酯加到5mmol硫內(nèi)酯的10ml乙腈溶液中。攪拌30分鐘后，將反應混合物升至室溫并放置12小時。將其減壓濃縮，隨后經(jīng)硅膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇97/3)，得到預期產(chǎn)物。步驟B2-{[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-(2-氧代四氫-3-噻吩基)氨基}乙酸叔丁酯按照實施例1步驟B的方法，使用制備例1得到的產(chǎn)物為反應物。質(zhì)譜FAB+∶(M++1)m/z＝402步驟C4-(芐硫基)-2-{[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基]-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]氨基}丁酸甲酯按照實施例1步驟C的方法，使用上面步驟獲得的產(chǎn)物。質(zhì)譜FAB+∶(M++1)m/z＝524步驟L2-{[3-(芐硫基)-1-(甲氧羰基)丙基]-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]氨基}乙酸將0.8mmol步驟C獲得的化合物在2ml二氯甲烷和3ml三氟乙酸中的溶液在室溫下攪拌2小時。將反應混合物減壓濃縮后，殘余物經(jīng)硅膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇95/5)，得到預期產(chǎn)物。質(zhì)譜FAB+∶(M++1)m/z＝468步驟M2-{[2-(二苯甲基氨基)-2-氧代乙基]-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]氨基}-4-(芐硫基)丁酸甲酯在0℃下，將1.8mmol苯并三唑-1-基三(二甲氨基)六氟磷酸鏻，然后將3mmol二異丙基乙基胺加到1.5mmol步驟L獲得的化合物和1.6mmol氨基二苯甲烷在20ml乙腈中的溶液中。然后使該反應混合物緩慢地升至室溫。反應6小時后，蒸除乙腈，殘余物溶于乙酸乙酯中，用飽和氯化鈉溶液洗滌。有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。經(jīng)硅膠色譜分離(二氯甲烷/甲醇20/1)，得到預期產(chǎn)物。質(zhì)譜FAB+∶(M++1)m/z＝633步驟N2-{[2-(二苯甲基氨基)-2-氧代乙基]-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}-4-(芐硫基)丁異羥肟酸按照實施例1步驟D～F的方法，使用上面步驟M獲得的產(chǎn)物作為反應物。質(zhì)譜FAB+∶(M++1)m/z＝634實施例72-{[2-(二苯甲基氨基)-2-氧代乙基]-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}-4-(芐硫基)丁異羥肟酸按照實施例6描述的方法，在步驟B中使用4-聯(lián)苯基磺酰氯作為反應試劑，獲得產(chǎn)物。實施例84-{[(1-甲基-3-哌啶基)甲基]硫基}-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸按照實施例1步驟A～F描述的方法，在步驟B中使用實施例3中使用的試劑，在步驟C中使用3-氯甲基-1-甲基哌啶作為反應試劑，獲得產(chǎn)物。實施例94-[(1-萘甲基)硫基]-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸按照實施例1步驟A～F描述的方法，在步驟C中使用1-(氯甲基)萘作為反應試劑，獲得產(chǎn)物。實施例104-{[(苯硫基)甲基]硫基}-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺酰基]氨基}丁異羥肟酸按照實施例1步驟A～F描述的方法，在步驟B中使用實施例3中使用的試劑，在步驟C中使用甲硫基苯基氯作為反應試劑，獲得產(chǎn)物。實施例114-[(3-吡啶甲基)硫基]-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺酰基]氨基}丁異羥肟酸按照實施例1步驟A～F描述的方法，在步驟B中使用實施例3中使用的試劑，在步驟C中使用3-氯甲基吡啶作為反應試劑，獲得產(chǎn)物。實施例124-{[2-(四氫-2H-吡喃基)甲基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸按照實施例1步驟A～F描述的方法，在步驟C中使用2-(氯甲基)-四氫-2H-吡喃作為反應試劑，獲得產(chǎn)物。實施例134-[(苯硫基乙基)硫基]-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸按照實施例1步驟A～F描述的方法，在步驟C中使用乙硫基苯基氯作為反應試劑，獲得產(chǎn)物。本發(fā)明化合物的藥理學研究實施例14金屬蛋白酶的酶抑制作用對所有或某些下列四種純化的人體酶在溶液中進行化合物的酶篩選試驗間質(zhì)膠原酶MMP-1、明膠酶MMP-2和MMP-9、基質(zhì)溶素-1MMP-3。用適應96孔培養(yǎng)板模式的熒光測定法測定活性。MMPs的活化該步驟可使金屬酶的酶原形式轉化為可裂解所用底物的活化形式。在37℃和有2mM APMA(4-氨基苯基醋酸汞)的存在下，以等份量貯存于-80℃的市售酶在50mM Tris緩沖液、200mM NaCl、5mM CaCl2、0.1％Brij 35(pH7.7)中經(jīng)30分鐘(MMP-2和MMP-9)或1小時(MMP-1和MMP-3)以355μg/ml(MMP-1)、444μg/ml(MMP-2)、187μg/ml(MMP-3)和500μg/ml(MMP-9)的酶濃度稀釋。熒光試驗該原理基于在活化酶的存在下，肽模擬底物裂解后出現(xiàn)熒光。在活化酶MMP-1、MMP-2和MMP-9的作用下，肽Dnp-Pro-β-環(huán)己基-Ala-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(N-Me-Abz)-NH2(Bachem，瑞士)在甘氨酸和半胱氨酸之間裂解(分析生物化學(Anal.Biochem.)1993，212，58-64)。在活化酶MMP-3的作用下，肽(7-甲氧基香豆素-4-基)-Arg-Pro-Lys-Pro-Tyr-Ala-Nva-Trp-Met-Lys(Dnp)-NH2(Bachem)在Ala和Nva之間裂解(分析生物化學，1993，212，58-64)(生物化學，1992，31，12618-12623)。該試驗在含有稀釋的純化酶的50mM Tris緩沖液、200mM NaCl、5mM CaCl2、0.1％Brij 35(pH 7.7)中進行(MMP-1、MMP-2、MMP-3和MMP-9酶的終濃度分別為1.25、2、1.25和1μg/ml)。將酶本身或酶與試驗產(chǎn)物(10∶10稀釋5個劑量中最小者)一起預溫育后，以總終體積為100μl(96孔培養(yǎng)板模式)的量加入20μM(終濃度)適宜肽的模擬底物以引發(fā)裂解反應。在潮濕環(huán)境下、37℃溫育6小時后，將含樣品的培養(yǎng)板在安裝有分別為340nm和440nm的激發(fā)濾器和發(fā)射濾器的細胞熒光計(Cytofluor 2350，Millipore PerSeptiveSystems，法國)中讀數(shù)。在各種條件下的試驗均重復三次。然后由作為試驗量函數(shù)顯示裂解產(chǎn)物的熒光強度的曲線測定抑制50％反應的濃度(IC50)。每種試驗至少進行兩次。
在上面的試驗中，本發(fā)明的化合物對MMP-1酶表現(xiàn)出的IC50值為100～200nM，對MMP-2、MMP-3和MMP-9酶表現(xiàn)出的IC50值為0.2～50nM。實施例15藥物組合物片劑制備每片含20mg活性成分的1000個片劑的配方實施例2的化合物 20g羥丙基纖維素2g小麥淀粉10g乳糖100g硬脂酸鎂3g滑石3g
權利要求
1.式(I)化合物及其異構體和其與可藥用酸或堿的加成鹽
其中R1表示-直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基(可任意地被一個或多個相同或不同的取代基取代，所述取代基各自彼此獨立地選自羥基、鹵素、直鏈或支鏈的(C1-C6)烷氧基、巰基、支鏈或支鏈(C1-C6)烷硫基、芳基、直鏈或支鏈(C1-C6)?；桶被?，氨基自身還可任意地被一個或兩個相同或不同的直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基、環(huán)烷基或芳基取代)，-直鏈或支鏈(C1-C6)?；?，-環(huán)烷基，-芳基，-雜環(huán)基，-氨基羰基-(C1-C4)烷基，氨基部分可任意地被一直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基所取代，所述(C1-C6)烷基可任意地被一個或多個相同或不同的選自芳基、芳基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、環(huán)烷基和直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基氨基羰基的基團所取代，R2表示直鏈或支鏈的(C1-C4)亞烷基，R3表示X或Y基團，其中·X表示直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)?；⒅辨溁蛑ф?C1-C6)烷氧羰基、氨基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基(該氨基部分自身可任意地被一個或兩個相同或不同的直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代)、羥基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、羧基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、氨基羰基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、巰基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，和·Y表示式T-U-V-的基團(V部分與硫原子鍵合)，其中-T表示芳基或雜環(huán)基，-U表示一單鍵、硫原子、氧原子、NH、C＝O或式-R8O-、-R8S-、-R8NH-、-R8OR9-、-R8SR9-、-R8-NH-R9-、-R8-CO-R9-或-R9-的基團，其中R8表示直鏈或支鏈(C1-C6)亞烷基并且R9表示亞芳基或亞雜芳基，應該理解在這些基團中R8鍵于Y基團的T部分上并且R9或雜原子鍵于Y基團的V部分，-V表示直鏈或支鏈(C1-C6)亞烷基，R4表示-當R3表示Y基團時，表示選自下述的基團直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、環(huán)烷基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、被雜環(huán)基取代的直鏈或支鏈(C1-C6)烷基和雜環(huán)基，-或者當R3表示X或Y基團時，表示選自下述的基團聯(lián)芳基、芳基雜芳基和雜芳基芳基。
2.權利要求1的式I化合物及其異構體和其與可藥用酸或堿的加成鹽，其特征在于其中R3表示上文定義的基團X并且R4表示聯(lián)芳基、芳基雜芳基或雜芳基芳基。
3.權利要求1的式I化合物及其異構體和其與可藥用酸或堿的加成鹽，其特征在于其中R3表示上文定義的基團Y并且R4表示直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、環(huán)烷基、芳基、芳基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，環(huán)烷基-直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、被雜環(huán)基取代的直鏈或支鏈(C1-C6)烷基或雜環(huán)基。
4.權利要求1的式I化合物及其異構體和其與可藥用酸或堿的加成鹽，其特征在于其中R3表示基團Y并且R4表示聯(lián)芳基、芳基雜芳基或雜芳基芳基。
5.權利要求1的式I化合物及其異構體和其與可藥用酸或堿的加成鹽，其特征在于其中R1表示直鏈或支鏈(C1-C6)烷基。
6.權利要求1-5任一項的式I化合物及其異構體和其與可藥用酸或堿的加成鹽，其特征在于R1表示異丁基。
7.權利要求1的式I化合物，為4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]氨基}丁異羥肟酸。
8.權利要求1的式I化合物，為4-{[4-(苯基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸。
9.權利要求1的式I化合物，為4-(芐硫基)-2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸。
10.權利要求1的式I化合物，為4-{[4-(芐氧基)芐基]硫基}-2-{異丁基-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氨基}丁異羥肟酸。
11.權利要求1的式I化合物，為2-{異丁基-[(4-聯(lián)苯基)磺?；鵠氨基}-4-(甲硫基)丁異羥肟酸。
12.權利要求1的式I化合物，為2-{[2-(二苯甲基氨基)-2-氧代乙基]-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]氨基}-4-(芐硫基)丁異羥肟酸。
13.制備權利要求1的式(I)化合物的方法，該方法的特征在于使用式(II)化合物作為原料
其中R2如式(I)中所定義，Ra和Rb形成一個連接羰基與硫原子的單鍵，或者Ra表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷氧基并且Rb表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基，在常規(guī)有機合成的條件下，用式(II’)化合物取代式(II)化合物的伯胺官能基R1-Z (II’)其中R1如式(I)所定義并且Z表示有機化學中的常見離去基團，得到式(III)化合物
其中R1和R2如式(I)中所定義并且Ra和Rb如上文所定義，式(III)化合物在堿性條件下用式(IV)化合物處理R4-SO2-Cl (IV)其中R4如式(I)所定義，得到式(V)化合物，
其中R1、R2、R4、Ra和Rb定義如上，當Ra和Rb形成一單鍵時，式(V)化合物在甲醇和鈉的存在下用式(VI)化合物處理R3-Hal (VI)其中R3如式(I)所定義并且Hal表示鹵素原子，得到式(VII)化合物
其中R1、R2、R3和R4如式(I)所定義，式(VII)與式(V)化合物合起來構成式(IX)化合物
其中R1、R2、R3、R4和Ra如上文所定義，式(IX)化合物的酯官能基在常規(guī)條件下水解，得到式(X)化合物
其中R1、R2、R3和R4如上文所定義，式(X)化合物直接用羥胺鹽酸鹽處理或用O-取代的羥胺處理，后者隨后在常規(guī)操作條件下脫保護，得到上文定義的式(I)化合物，如果需要，可采用常規(guī)純化技術純化式(I)化合物，可任意地采用常規(guī)分離技術將其分離為其異構體，并且如果需要，可用可藥用酸或堿將其轉化為加成鹽。
14.一種藥物組合物，含有至少一種權利要求1～12任一項的式(I)化合物作為活性成分，該藥物組合物可以是所述的活性成分本身，也可以結合有一種或多種惰性的無毒可藥用賦形劑或載體。
15.權利要求14的藥物組合物，含有權利要求1～12任一項的活性成分，用作金屬蛋白酶抑制劑。
全文摘要
式(Ⅰ)化合物及其異構體和其與可藥用酸或堿的加成鹽:其中R
文檔編號C07D309/00GK1245798SQ99117519
公開日2000年3月1日 申請日期1999年8月10日 優(yōu)先權日1998年8月10日
發(fā)明者S·哈尼斯安, G·阿塔斯, G·圖克, D-H·加格那德, P·蘭那德 申請人:阿迪爾公司