專利名稱：一種毛蕊花甙的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從天然產(chǎn)物中提取某種糖甙方法，更確切講是從玄參科植物(Scrophulariaceae)中提取毛蕊花甙的方法。
從玄參科植物中提取的毛蕊花甙因其所具有的某些特殊的藥理作用而受到人們的重視，但其提取方法卻鮮有披露。
本發(fā)明是提供一種從玄參科植物提取毛蕊花甙的方法，而且根據(jù)本發(fā)明的方法可以提取到更為純凈的毛蕊花甙。
本發(fā)明的方法是先將玄參科植物全草粉碎，用乙醇充分浸泡，再將浸泡液蒸餾得乙醇浸膏，將乙醇浸膏用水溶解，濾去不溶物后依次用石油醚，乙酸乙酯和正丁醇萃取，將用正丁醇萃取物用甲醇溶解，在溶解液中加入硅膠拌勻后放置一段時間后再將溶液烘干，將烘干物上柱，用體積比為12比1至3比1的氯仿-甲醇溶劑洗脫層析，將洗脫層析物再上硅膠柱，再用乙酸乙酯-乙醇溶劑再洗脫，最終得到毛蕊花甙。
本發(fā)明還可以用以下所述的方法提取在將玄參科植物粉碎、用乙醇浸泡并蒸餾得乙醇浸膏后，先用溫度為40～70℃的熱水溶解乙醇浸膏，再用60～90℃的石油醚進(jìn)行萃取，然后再用乙酸乙酯萃取，所得萃取物再用正丁醇萃取，萃取物用減壓蒸餾的方法進(jìn)行蒸餾。
在本發(fā)明中最好將所得的正丁醇浸膏用甲醇溶解并加入硅膠后采用間接加熱方式烘干，烘干物置于2000克的200～300目硅膠柱上進(jìn)行層析。
在本發(fā)明中在將正丁醇浸膏干法上柱后，依次用氯仿-甲醇體積比為(A)12比1；(B)10比1；(C)8比1；(D)6比1；(E)4比1；(F)3比1的溶劑順序進(jìn)行層析洗脫，取經(jīng)F組份的層析液洗脫的層析物再上硅膠柱，再用乙酸乙酯-乙醇溶劑進(jìn)行層析。
在本發(fā)明中對用F組份的層析液洗脫的層析物進(jìn)行再層析時，所用層析液中乙酸乙酯-乙醇的比例應(yīng)為3比1為最好。
本發(fā)明可以從玄參科植物中提取毛蕊花甙，并且通過本發(fā)明的最佳實施例可以提取出極純的毛蕊花甙。
以下結(jié)合本發(fā)明的實施例進(jìn)行解說
實施例1取玄參科馬先蒿屬(Pedicularis)的馬先蒿全草3．5公斤進(jìn)行粉碎，用乙醇充分浸泡使其中有效成份充分浸出后濾出浸液，采用蒸餾方法蒸去乙醇得乙醇浸膏約510克。將所得乙醇浸膏用1000毫升水溶解，待乙醇浸膏完全溶解后進(jìn)行過濾，濾除不溶物，再對乙醇浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得石油醚萃取物約60克，乙酸乙酯萃取物約40克左右，正丁醇浸膏約190至200克。再將正丁醇浸膏用少量甲醇溶解，在溶解液中加入硅膠拌勻后放置一段時間后再將溶液用間接加熱的方式烘干，將烘干物上200～300目的2000克硅膠柱，用體積比為3比1的氯仿-甲醇溶劑洗脫層析，將所得層析物再上硅膠柱，再用乙酸乙酯-乙醇溶劑再次洗脫，得到色澤較深，不足1克的含有毛蕊花甙的混合物。
當(dāng)采用的前期方法(注指層析前的處理方法)與上基本相同，但在層析時用體積比較大的氯仿-甲醇溶劑進(jìn)行層析(其中洗脫液中氯仿與甲醇的重量比可以從12比1到3比1)，也同樣可以獲得含毛蕊花甙的混合物，而且在一定范圍內(nèi)隨使用的層析液中氯仿份量的增多，所得混合物數(shù)量也增多，這些即可構(gòu)成本發(fā)明的不同實施例，但經(jīng)測定這些混合物中毛蕊花甙的含量卻隨氯仿-甲醇體系洗脫液中氯仿用量的增大呈現(xiàn)減少的趨勢。
實施例2取馬先蒿全草3．5公斤進(jìn)行粉碎，再用乙醇浸泡充分浸泡后濾出浸液，再將經(jīng)浸泡后的馬先蒿再次用乙醇浸泡后濾出浸液，如此重復(fù)三次，合并三次乙醇提取液。采用減壓蒸餾方法蒸去乙醇得約570克乙醇浸膏。將所得乙醇浸膏用1000毫升熱水溶解，待乙醇浸膏完全溶解后置于室溫下冷卻，然后將水溶液過濾，濾除約200克的水不溶物，再對乙醇浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得石油醚萃取物約75克，乙酸乙酯萃取物約50克左右，正丁醇部分浸膏約230克。再將正丁醇浸膏用少量甲醇溶解，在溶解液中加入硅膠拌勻后放置一段時間后再將溶液置紅外燈下烘干，將烘干物上200～300目的2000克硅膠柱，依次用不同體積比的氯仿-甲醇溶劑洗脫層析，其中各次洗脫液中氯仿-甲醇體積比分別為(A)12比1；(B)10比1；(C)8比1；(D)6比1；(E)4比1；(F)3比1，的溶劑進(jìn)行層析洗脫，取F組份的洗脫液所洗脫的部分再上硅膠柱，再用重量比為3比1的乙酸乙酯-乙醇溶劑再次洗脫，即得到白色粉未的毛蕊花甙約重100毫克，經(jīng)實測得Rf=0．67。對所得毛蕊花甙進(jìn)行有關(guān)檢測結(jié)果如下
分子式為C29O15H36，分子量為624，其結(jié)構(gòu)的物理常數(shù)為比旋光[α]D20]]>-68(C=0．4，MeOH)紫外UVλmaxMeOH]]>(nm)208(lgε4．30)，217(lgε4．45)292(lgε4．10)，329(lgε4．25)紅外IRvmaxKBr(cm-1)]]>3400(OH)，2932(C-H)，1700(共軛酯基)，1631(C-C)，1604，1521(芳環(huán))。
氫譜1HNMR(400MHz，DMSO-d6，TMS)δppm0．97(d，J=6．0Hz，3H，鼠李糖的甲基)，2．70(t，J=7．0Hz，2H，Ar-CH2-CH2)，4．36(d，J=7．2Hz，1H，葡萄糖的H-1)，4．72(t，J=9．6Hz，1H，葡萄糖的H-4)，5．03(d，J=1．1Hz，1H，鼠李糖的H-1)，6．21(d，J=15．8Hz，1H，Ar-CH=CH)，6．49-7．01(6H，芳環(huán)H)，7．47(d，J=15．8Hz，1H，Ar-CH=CH)，8．69，8．75，9．19，9．62(4×OH)。
碳 譜13CNMR(100MHz，DMSO-d6，TMS)δppm129．1(C-1)，116．3(C-2)， 145．0(C-3)，143．5(C-4)，115．8(C-5)，119．5(C-6)，70．2(C-α)，35．0(C-β)，125．5(C-1’)，114．7(C-2’)，145．5(C-3’)，148．4(C-4’)，113．6(C-5’)，121．4(C-6’)，115．5(C-α’)，145．5(C-β’)，165．7(C=O)。葡萄糖102．3(C-1)，74．5(C-2)，79．1(C-3)，69．1(C-4)，74．5(C-5)，60．7(C-6)。鼠李糖101．2(C-1)，70．5(C-2)，70．4(C-3)，71．7(C-4)，68．7(C-5)，18．1(C-6)。
質(zhì)譜FABMS(m／s)631[M+Li]+，64．7[M+Na]+。
其分子結(jié)構(gòu)如下
權(quán)利要求
1.毛蕊花甙的提取方法，用玄參科植物全草粉碎、浸取制得，其特征在于將玄參科植物全草粉碎后先用乙醇浸泡，再將浸泡液蒸餾得乙醇浸膏，將乙醇浸膏用水溶解，濾去不溶物后再依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，所得正丁醇浸膏用甲醇溶解，在溶解液中加入硅膠拌勻后放置一段時間后再將溶液烘干，將烘干物上柱，用體積比為12比1至3比1的氯仿-甲醇溶劑洗脫層析，將洗脫層析物再上硅膠柱，用乙酸乙酯-乙醇溶劑再洗脫，得到毛蕊花甙。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛蕊花甙提取方法，其特征在于用溫度為40～70℃熱水溶解乙醇浸膏，再用60～90℃的石油醚進(jìn)行萃取，然后再用乙酸乙酯萃取，再用正丁醇萃取，然后用減壓蒸餾的方法進(jìn)行蒸餾。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述毛蕊花甙的提取方法，其特征在于正丁醇浸膏用甲醇溶解并加入硅膠后采用間接加熱方式烘干，烘干物置于2000克的200～300目硅膠柱上進(jìn)行層析。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述毛蕊花甙的提取方法，其特征在于正丁醇浸膏干法上柱后依次用氯仿-甲醇體積比為(A)12比1；(B)10比1；(C)8比1；(D)6比1；(E)4比1；(F)3比1的溶劑進(jìn)行層析洗脫，取F組份的層析物再上硅膠柱并再用乙酸乙酯-乙醇溶劑進(jìn)行層析。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述毛蕊花甙的提取方法，其特征在于對F組份的層析物進(jìn)行再層析時層析液乙酸乙酯-乙醇的重量比為3比1。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從天然產(chǎn)物中提取某種糖甙方法,更確切講是從玄參科植物中提取毛蕊花甙的方法。本發(fā)明的方法是:將粉碎的玄參科植物全草用乙醇浸泡蒸餾后得乙醇浸膏,將乙醇浸膏用水溶解后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,所得正丁醇浸膏用甲醇溶解,在溶解液中加入硅膠攪勻后放置一段時間,將溶液烘干,將烘干物上柱,用重量比為12比1至3比1的氯仿－甲醇溶劑洗脫層析,將洗脫層析物再上硅膠柱,再用乙酸乙酯－乙醇溶劑再洗脫,得到毛蕊花甙。
文檔編號C07H1/08GK1291613SQ9912301
公開日2001年4月18日 申請日期1999年10月12日 優(yōu)先權(quán)日1999年10月12日
發(fā)明者賈忠建, 鄭榮梁 申請人:蘭州大學(xué)