專(zhuān)利名稱(chēng)：作為磷酸二酯酶4抑制劑的取代1,8－二氮雜萘－4(1h)－酮類(lèi)化合物的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及1-芳基-3-芳甲基-1,8-二氮雜萘-4(1H)-酮類(lèi)化合物，它們是4型磷酸二酯酶(PDE4)和產(chǎn)生腫瘤壞死因子(TNF)的選擇性抑制劑，并且由此適用于治療呼吸性、變應(yīng)性、類(lèi)風(fēng)濕性、體重調(diào)節(jié)、炎性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，例如哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸性疾病綜合征、中毒性休克、纖維變性、肺動(dòng)脈高血壓、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、體重控制、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎癥狀和其他炎性疾病、抑郁癥、多梗塞性癡呆和AIDS。
本發(fā)明還涉及一種在治療哺乳動(dòng)物尤其是人體的上述疾病中應(yīng)用所述化合物的方法，并且涉及含有此類(lèi)化合物的藥物組合物。
因認(rèn)識(shí)到3’,5’-環(huán)腺苷酸(cAMP)是一種細(xì)胞內(nèi)第二信使，所以抑制磷酸二酯酶可以靶向調(diào)節(jié)且由此治療性干預(yù)一定范圍的病變。目前，已經(jīng)識(shí)別出不同類(lèi)型的PDE，并且對(duì)它們的選擇性抑制導(dǎo)致藥物療法有所改進(jìn)。具體而言，人們發(fā)現(xiàn)，抑制PDE4可以抑制炎癥介質(zhì)的釋放并且導(dǎo)致呼吸道平滑肌松弛。因此，可抑制PDE4但對(duì)其他型的PDE活性較弱的化合物將能夠抑制炎癥介質(zhì)的釋放并且松弛呼吸道平滑肌，而不引起心血管效應(yīng)或抗血小板作用。
最新的分子克隆揭示出PDE4酶的復(fù)雜度和多樣性。目前已知存在4種不同的PDE4同工酶(A、B、C和D)，它們各自通過(guò)獨(dú)立基因編碼。人重組物質(zhì)的動(dòng)力學(xué)研究表明，這4種同工酶的不同之處在于其水解cAMP的Km(米氏常數(shù))和Vmax。PDE4 mRNAs的組織分布的分析顯示各種同工酶可以以細(xì)胞特異性模式定位。例如，與人體骨骼肌不同的是，人體外周血的白細(xì)胞不表達(dá)PDE4C信息，但豚鼠嗜曙紅細(xì)胞主要表達(dá)PDE4D信息。PDE4同工酶的結(jié)構(gòu)和分布多樣性為發(fā)現(xiàn)一種只阻斷炎癥細(xì)胞機(jī)能的同工酶選擇性抑制劑提供了機(jī)遇。利用PDE4D同工酶選擇性抑制劑，我們已經(jīng)證明PDE4D同工酶在調(diào)節(jié)人體嗜曙紅細(xì)胞的活化和脫粒中起關(guān)鍵作用。在靈長(zhǎng)類(lèi)哮喘模型中，PDE4D同工酶選擇性化合物可以抑制抗原誘發(fā)性肺嗜曙紅細(xì)胞增多。因此，通過(guò)選擇性阻斷D同工酶，PDE4 D抑制劑表現(xiàn)出副作用減小而保留抗哮喘(抗炎)功效。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及式Ⅰ的化合物 或其可藥用鹽，其中R1和R2各自獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C6-C10)芳基、(C5-C9)雜芳基和(C2-C9)雜環(huán)烷基，其中所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)烷基被鹵素、羥基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、((C1-C6)烷基))2氨基、硫代、(C1-C6)烷硫基、氰基、羧基、羧基(C1-C6)烷基、羥基(C1-C6)烷基、(C1-C6)?；被酋；?、(C1-C6)烷基氨基磺?；?(C1-C6)烷基)2氨基磺酰基任選取代；和R3是氫、鹵素、羥基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、((C1-C6)烷基))2氨基、硫代、(C1-C6)烷硫基、羧基、羧基(C1-C6)烷基、羥基(C1-C6)烷基、(C1-C6)酰基、氨基磺?；?C1-C6)烷基氨基磺?；?(C1-C6)烷基)2氨基磺酰基。
本發(fā)明還涉及式Ⅰ化合物的可藥用酸加成鹽。用于制備上述本發(fā)明堿性化合物的可藥用酸加成鹽的酸是那些生產(chǎn)無(wú)毒酸加成鹽的酸，即含有可藥用陰離子的鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、酒石酸氫鹽、琥珀酸鹽、馬來(lái)酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、糖二酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽和撲酸鹽[即1,1’-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽)]。
本發(fā)明還涉及式Ⅰ的堿加成鹽?？勺鳛樵噭┯糜谥苽渚哂兴嵝员举|(zhì)的式Ⅰ化合物的可藥用堿鹽的化學(xué)堿是那些與所述化合物形成無(wú)毒堿性鹽的堿。此類(lèi)無(wú)毒堿性鹽包括但不限于衍生自可藥用陽(yáng)離子的那些，例如堿金屬陽(yáng)離子(如鉀和鈉)和堿土金屬陽(yáng)離子(如鈣和鎂)；銨或水溶性胺加成鹽，例如N-甲基葡糖胺-(葡甲胺)；和低級(jí)鏈烷醇銨和其他可藥用有機(jī)胺的堿性鹽。
除非另外指出，此處涉及的烷基和鏈烯基以及其他基團(tuán)(如烷氧基)中的烷基部分可以是直鏈或支鏈，并且它們也可以環(huán)狀(如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基)，或是直鏈或支鏈同時(shí)含有環(huán)狀部分。除非另外指出，鹵素包括氟、氯、溴和碘。
此處所用的(C2-C10)環(huán)烷基是指含有0-2個(gè)不飽和度的環(huán)烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、1,3-環(huán)己二烯基、環(huán)庚基、環(huán)庚烯基、雙環(huán)[3.2.1]辛烷、降冰片烷基等。
此處所用的(C2-C9)雜環(huán)烷基是指氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫吡喃基、吡喃基、噻喃基、氮雜環(huán)丙烷基、環(huán)氧乙基、亞甲基二氧基、色烯基、異噁唑烷基、1,3-噁唑烷-3-基、異噻唑烷基、1,3-噻唑烷-3-基、1,2-吡唑烷-2-基、1,3-吡唑烷-1-基、哌啶基、硫代嗎啉基、1,2-四氫噻嗪-2-基、1,3-四氫噻嗪-2-基、四氫噻二嗪、嗎啉、1,2-四氫二嗪-2-基、1,3-四氫二嗪-1-基、四氫氮雜基、哌嗪基、苯并二氫吡喃基等。一名所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)懂得該(C2-C9)雜環(huán)烷基環(huán)是通過(guò)碳或sp3雜化氮雜原子連接。
此處所用的(C2-C9)雜芳基是呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡咯基、三唑基、四唑基、咪唑基、1,3,5-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,3,5-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,3-噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、1,2,4-三嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、吡唑并[3,4-b]吡啶基、噌啉基、蝶啶基、嘌呤基、6,7-二氫-5H-[1]氮茚基、苯并[b]噻吩基、5,6,7,8-四氫-喹啉-3-基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并異噁唑基、苯并咪唑基、硫茚基、異硫茚基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、異吲哚基、吲哚基、中氮茚基、吲唑基、異喹啉基、喹啉基、2,3-二氮雜萘基、喹喔啉基、喹唑啉基、苯并噁嗪基等。一名所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)懂得該(C2-C9)雜環(huán)烷基環(huán)是通過(guò)碳或sp3雜化氮雜原子連接。
此處所用的(C6-C10)芳基是指苯基或萘基。
優(yōu)選的式Ⅰ化合物包括那些其中R1是(C6-C10)芳基或(C5-C9)雜芳基的化合物。
式Ⅰ的其他優(yōu)選化合物包括其中R2是(C6-C10)芳基或(C5-C9)雜芳基的化合物。
本發(fā)明還涉及一種含有治療有效量的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽和可藥用載體的藥物組合物，該組合物可用于治療呼吸性、變應(yīng)性、類(lèi)風(fēng)濕性、體重調(diào)節(jié)性、炎性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，例如哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸性疾病綜合征、中毒性休克、纖維變性、肺動(dòng)脈高血壓、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、體重控制、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎癥狀和其他炎性疾病、抑郁癥、多梗塞性癡呆和AIDS。
本發(fā)明還涉及一種用于治療哺乳動(dòng)物(包括人體)中的呼吸性、變應(yīng)性、類(lèi)風(fēng)濕性、體重調(diào)節(jié)性、炎性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的方法，所述疾病可例如哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸性疾病綜合征、中毒性休克、纖維變性、肺動(dòng)脈高血壓、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、體重控制、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎癥狀和其他炎性疾病、抑郁癥、多梗塞性癡呆和AIDS，該方法包括向該哺乳動(dòng)物施用治療有效量的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽。
本發(fā)明還涉及一種在哺乳動(dòng)物(包括人體)中選擇性抑制PDE4 D同工酶的藥物組合物，該組合物在呼吸性、變應(yīng)性、類(lèi)風(fēng)濕性、體重調(diào)節(jié)性、炎性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疾病如哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸性疾病綜合征、中毒性休克、纖維變性、肺動(dòng)脈高血壓、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、體重控制、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎癥狀和其他炎性疾病、抑郁癥、多梗塞性癡呆和AIDS的治療中可有效調(diào)節(jié)人體嗜曙紅細(xì)胞的活化和脫粒；所述組合物含有施用給哺乳動(dòng)物的PDE4 D同工酶抑制、治療有效量的式Ⅰ的PDE4D同工酶抑制化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體。
本發(fā)明還涉及一種在哺乳動(dòng)物(包括人體)中選擇性抑制PDE4D同工酶方法，該方法在呼吸性、變應(yīng)性、類(lèi)風(fēng)濕性、體重調(diào)節(jié)性、炎性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疾病如哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸性疾病綜合征、中毒性休克、纖維變性、肺動(dòng)脈高血壓、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、體重控制、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎癥狀和其他炎性疾病、抑郁癥、多梗塞性癡呆和AIDS的治療中可有效調(diào)節(jié)嗜曙紅細(xì)胞的活化和脫粒；該方法包括給所述哺乳動(dòng)物施用PDE4 D同工酶抑制、治療有效量的PDE4 D同工酶抑制化合物或其可藥用鹽。發(fā)明詳述下列反應(yīng)路線(xiàn)舉例說(shuō)明了本發(fā)明化合物的制備方法。除非另外指出，反應(yīng)路線(xiàn)和隨后的討論中的R1、R2和R3定義如上反應(yīng)路線(xiàn)1
反應(yīng)路線(xiàn)2 在反應(yīng)路線(xiàn)1的反應(yīng)1中，式Ⅴ的羧酸化合物通過(guò)在1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、堿如三乙胺和極性非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷的存在下與式H3C-NH-OCH3·HCl的胺鹽反應(yīng)可轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式Ⅳ的酰胺化合物。該反應(yīng)在0℃至室溫的溫度內(nèi)，優(yōu)選在室溫下進(jìn)行約1至32小時(shí)，優(yōu)選約24小時(shí)。
在反應(yīng)路線(xiàn)1的反應(yīng)2中，通過(guò)式Ⅳ在醚溶劑存在下與下式的吡啶化合物反應(yīng)，式Ⅳ的酰胺化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式Ⅲ吡啶化合物 該反應(yīng)是在約-78℃至約0℃的溫度內(nèi)，優(yōu)選在約-78℃下進(jìn)行約0.5小時(shí)至約8小時(shí)，優(yōu)選約4小時(shí)。
在反應(yīng)路線(xiàn)1的反應(yīng)3中，式Ⅲ單獨(dú)或在非質(zhì)子溶劑(例如二甲基甲酰胺)存在下與式R2-NH2的胺反應(yīng)，式Ⅲ的吡啶化合物可轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式Ⅱ的化合物。該反應(yīng)是在約70℃至約150℃的溫度內(nèi)，優(yōu)選在約100℃下進(jìn)行約1小時(shí)至約8小時(shí)，優(yōu)選約2小時(shí)。
在反應(yīng)路線(xiàn)1的反應(yīng)4中，通過(guò)在極性非質(zhì)子溶劑(如四氫呋喃)存在下用二異丙基氨基鋰處理式Ⅱ可將式Ⅱ的化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式Ⅰ的二氮雜萘-4-(1H)-酮。在約-78℃至約100℃，優(yōu)選約-78℃至60℃的溫度內(nèi)，在約1小時(shí)至約5小時(shí)，優(yōu)選約2小時(shí)內(nèi)向由此生成的反應(yīng)混合物中加入甲酸乙酯。
在反應(yīng)路線(xiàn)2的反應(yīng)1中，通過(guò)式Ⅵ在碳酸鉀和非質(zhì)子溶劑如乙醚的存在下與式(CH3)2NH的胺反應(yīng)，式Ⅵ的醛化合物可轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式Ⅶ的氨基化合物。該反應(yīng)是在約-78℃至約60℃的溫度內(nèi)，優(yōu)選在約-60℃至室溫下進(jìn)行約1小時(shí)至約8小時(shí)，優(yōu)選約4小時(shí)。
在反應(yīng)路線(xiàn)2的反應(yīng)2中，通過(guò)式Ⅶ在非質(zhì)子溶劑如二噁烷的存在下與下式的吡啶化合物反應(yīng)，式Ⅶ的氨基化合物可轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式Ⅷ的吡啶化合物 該反應(yīng)是在約0℃至約150℃的溫度內(nèi)，優(yōu)選約室溫至約80℃下進(jìn)行約0.5小時(shí)至約2小時(shí)，優(yōu)選約1小時(shí)。
在反應(yīng)路線(xiàn)2的反應(yīng)3中，通過(guò)Ⅷ在非質(zhì)子堿性溶劑如吡啶的存在下與式R2NH2的胺反應(yīng)，式Ⅷ的吡啶化合物轉(zhuǎn)化成了相應(yīng)的式Ⅰ二氮雜萘-4(1H)-酮化合物。該反應(yīng)加熱回流約1小時(shí)至約16小時(shí)，優(yōu)選約2小時(shí)。由此得到的中間體用有機(jī)堿如1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯在醚溶劑如二甲氧基乙烷的存在下處理。
本質(zhì)為堿性的式Ⅰ化合物能夠與不同的無(wú)機(jī)和有機(jī)酸生成多種不同的鹽。雖然這些鹽必須是藥學(xué)上可接受的以便對(duì)人體或動(dòng)物給藥，而實(shí)際中常常希望由反應(yīng)混合物中分離出成為不可藥用鹽的式Ⅰ化合物，并且后者隨即通過(guò)用堿性試劑處理直接轉(zhuǎn)化回游離堿，并且進(jìn)一步將游離堿轉(zhuǎn)化為可藥用酸加成鹽。通過(guò)用基本等當(dāng)量的選定的無(wú)機(jī)或有機(jī)酸在水溶劑介質(zhì)中或在適當(dāng)有機(jī)溶劑(如甲醇或乙醇)中處理堿性化合物可很容易制得本發(fā)明堿性化合物的酸加成鹽。在溶劑蒸發(fā)后，易于獲得預(yù)期的固體鹽。由游離堿在有機(jī)溶劑中的溶液、通過(guò)向該溶液中加入適當(dāng)?shù)臒o(wú)機(jī)或有機(jī)酸進(jìn)行沉淀也可以沉淀出預(yù)期的酸加成鹽。氨基的可藥用鹽包括鹽酸鹽(優(yōu)選)、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、醋酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽和對(duì)-甲苯磺酸鹽。式Ⅰ化合物的陽(yáng)離子鹽可按照類(lèi)似方法制備，但只是通過(guò)羧基(如當(dāng)R3是羧基時(shí))與適當(dāng)陽(yáng)離子鹽試劑如鈉、鉀、鈣、鎂、銨、N,N’-二芐基乙二胺、N-甲基葡糖胺(葡甲胺)、乙醇胺、三甲醇氨基甲烷或二乙醇胺的反應(yīng)。
那些本質(zhì)為酸性的本發(fā)明化合物能夠與不同的可藥用陽(yáng)離子生成堿性鹽。此類(lèi)鹽的實(shí)例包括堿金屬或堿土金屬鹽，特別是鈉鹽和鉀鹽。這些鹽均通過(guò)常規(guī)技術(shù)制備?？勺鳛樵噭┯糜谥苽浔景l(fā)明的可藥用堿性鹽的化學(xué)堿是可與本發(fā)明的酸性化合物生成無(wú)毒堿性鹽的那些。所述無(wú)毒堿性鹽包括那些由可藥用陽(yáng)離子如鈉離子、鉀離子、鈣離子和鎂離子等衍生的鹽。通過(guò)用含有預(yù)期可藥用陽(yáng)離子的水溶液處理相應(yīng)酸性化合物，并且隨后使所得溶液蒸發(fā)至于，優(yōu)選在減壓下蒸發(fā)至干，可以很容易制得這些鹽。另外，它們也可以通過(guò)將酸性化合物的低級(jí)烷醇溶液與預(yù)期堿金屬醇化物混合在一起，并且隨后以如上所述的相同方式使所得溶液蒸發(fā)至干來(lái)制備。在任一情況中，優(yōu)選采用化學(xué)計(jì)量量的試劑以確保反應(yīng)完全且預(yù)期終產(chǎn)物的收率最高。
為了在炎性疾病的治療或預(yù)防性處理中對(duì)人體給藥，對(duì)于成年患者(70kg)來(lái)說(shuō)，式Ⅰ化合物或其可藥用鹽(活性化合物)的口服劑量通常為0.1至1000mg/天，分一次或多次給藥。各個(gè)片劑或膠囊一般在適當(dāng)?shù)目伤幱觅x形劑或載體中應(yīng)含有0.1至100mg的活性化合物。靜脈內(nèi)給藥的劑量根據(jù)需要通常每單劑量含有0.1至10mg。為了鼻內(nèi)或吸入給藥，劑量一般配制為0.1至1％(w/v)溶液。在實(shí)踐中，醫(yī)生決定最適合患者個(gè)體的實(shí)際劑量并且根據(jù)年齡、體重和具體患者的反應(yīng)而改變。上述劑量是平均情況的舉例說(shuō)明，但顯然個(gè)別情況中劑量范圍較高或較低，并且所有這些劑量屬于本發(fā)明的范圍內(nèi)。
為了應(yīng)用于人體，本發(fā)明的活性化合物可單獨(dú)給藥，但通常是與根據(jù)給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐選擇的藥用稀釋劑或載體以混合物給藥。例如，它們可以以含有賦形劑如淀粉或乳糖的片劑形式口服給藥，或單獨(dú)或與賦形劑混合以膠囊形式給藥，或以含有矯味劑或著色劑的酏劑或混懸液形式給藥。它們也可經(jīng)非腸道注射；例如，靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮下給藥。為了非腸道給藥，它們最好采用滅菌水溶液的形式，其中可含有其他物質(zhì)；例如，足夠的鹽或葡萄糖使該溶液等滲。
此外，當(dāng)處理皮膚的炎癥時(shí)活性化合物可以局部給藥，并且這可通過(guò)霜?jiǎng)?、膠凍、凝膠、膏劑和軟膏按照標(biāo)準(zhǔn)藥物實(shí)踐進(jìn)行。
治療性化合物也可以施用給除人體以外的哺乳動(dòng)物。對(duì)于哺乳動(dòng)物的給藥劑量應(yīng)取決于動(dòng)物物種和被治療的疾病或病癥。治療性化合物可以膠囊、丸劑、片劑或液態(tài)獸用頓服藥的形式給藥。治療性化合物還可以通過(guò)注射或作為植入物施用給動(dòng)物。按照標(biāo)準(zhǔn)獸醫(yī)實(shí)踐以常規(guī)方式制備此類(lèi)制劑。另外，治療性化合物可與動(dòng)物飼料一起給藥，并且為達(dá)到這種目的可以制備濃縮飼料添加劑或預(yù)混合物用于與普通動(dòng)物飼料混合。
通過(guò)下列實(shí)驗(yàn)可以測(cè)定式Ⅰ化合物或其可藥用鹽乙酯抑制PDE4的能力。對(duì)PDE4同工酶的抑制試驗(yàn)化合物的制備。
將化合物溶解在DMSO中濃度為1×10-2M，或者如果溶解度有問(wèn)題隨后用水1∶25稀釋為所需較高的濃度(化合物濃度4×10-4M，含4％DMSO)。在4％DMSO中進(jìn)一步連續(xù)稀釋以獲得所需濃度。試驗(yàn)中的DMSO終濃度為1％。
以一式兩份，將下列物質(zhì)順序加入閃爍瓶中(所有給出的濃度是在瓶中的終濃度)。
25μl化合物的DMSO溶液(1％，為了空白)25μl含[3H]cAMP的分析緩沖液(1μM[3H]cAMP,50mM Tris,10mMMgCl2,pH 7.5)25μl 5’-核苷酸酶(0.001單位)(Sigma # N5880)2μl PDE4同工酶(在Prep#1中1/1200-1/2400稀釋)搖動(dòng)反應(yīng)瓶并且置于水浴(3.7℃)中30分鐘，此后加入1ml氯化物形式(1∶3的漿液，在蒸餾水中)的Dowex 1×8樹(shù)脂終止該反應(yīng)。向各瓶中直接加入3ml Ready Safte閃爍液。使各瓶充分混合并且當(dāng)樹(shù)脂沉降(室溫下約4小時(shí))后對(duì)放射性計(jì)數(shù)。
數(shù)據(jù)的計(jì)算和解釋通過(guò)下式計(jì)算百分抑制率％抑制=每分鐘計(jì)數(shù)平均值(試驗(yàn)化合物)-每分鐘計(jì)數(shù)平均值(空白)每分鐘計(jì)數(shù)平均值(對(duì)照(無(wú)化合物))-每分鐘計(jì)數(shù)平均值(空白)IC50定義為抑制半數(shù)放射性的化合物濃度并且利用微軟Excel或其他適當(dāng)軟件計(jì)算。
人全血中對(duì)嗜曙紅細(xì)胞脫粒和活化的抑制人血嗜曙紅細(xì)胞脫粒和活化的測(cè)量血液的采集和化合物的溫育由正常志愿者獲得100ml血液置于Vacutainer管#6480(14.3USP單位肝素鈉/ml血)中。在22℃將肝素化血液合并在50ml圓錐形離心管中。一式三份將1ml血液置于含有1ul DMSO或1ul試驗(yàn)化合物的12×75mm硅化玻璃管中?；旌虾?，將玻璃管置于37℃的震蕩水浴中15分鐘。向所有管中加入1ul存在于DMSO中的PGE1使終濃度為1uM?；旌虾?，將100ul PBS(陰性對(duì)照)或存在于PBS中的Sephadex G-15珠(8.25-16.5mg/ml終濃度)加入管中?；旌虾螅钊坎ＡЧ茉?7℃的震蕩水浴中溫育1-2小時(shí)。血漿樣本的制備溫育結(jié)束時(shí)，向各個(gè)試驗(yàn)管中加入20ul存在于PBS中的15％EDTA?；旌虾螅?2℃下以2000rpm(Sorvall 6000B離心機(jī))離心樣本5分鐘。EDN(或EPX)和LTE 4的測(cè)量和化合物的作用檢測(cè)所有血漿樣本的EDN(嗜曙紅細(xì)胞衍生神經(jīng)毒素)和LTE4(白三烯E4)濃度。大量研究表明Sephadex珠引發(fā)人全血中嗜曙紅細(xì)胞介導(dǎo)的EDN和LTE4釋放。通過(guò)放射免疫測(cè)定法(RIA)(Kabi PharmaciaDiagnostics)和酶免疫測(cè)定法(EIA)(Cayman Chemical)測(cè)定EDN和LTE4的水平。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)比利用微軟Excel或其它適當(dāng)軟件計(jì)算出EDN和LTE4水平。對(duì)照EDN或LTE4釋放的水平通過(guò)下式計(jì)算％對(duì)照EDN=[EDN(化合物)-EDN(空白)]/[EDN(總量)-EDN(空白)]％對(duì)照LTE4=[LTE4(化合物)-LTE4(空白)]/[LTE4(總量)-LTE4(空白)]其中空白是Sephadex珠不存在時(shí)EDN或LTE4的水平，并且總量是Sephadex珠存在時(shí)EDN或LTE4的水平。IC30或IC50值分別被定義為化合物特異性抑制30％或50％EDN或LTE4釋放時(shí)的濃度。
對(duì)肺嗜曙紅細(xì)胞的抑制作用為了評(píng)估這些化合物對(duì)肺的功效，我們采用良好特征化的猴哮喘模型(Turner等人，Am.J.Respir Crit.Care Med.149,1153-1159,1994)。令特應(yīng)性獼猴屬fascicularis猴子暴露在抗原下，抗原攻擊24小時(shí)后在這些猴子的支氣管肺泡(BAL)液中觀察到引起炎癥細(xì)胞大量流入。在這種模型中，在抗原攻擊后24小時(shí)PDE4D同工酶選擇性化合物皮下給藥可顯著抑制59-76％的肺嗜曙紅細(xì)胞浸潤(rùn)。然而，這些化合物不影響嗜中性白細(xì)胞或淋巴細(xì)胞滲入，這證明這些化合物選擇性抑制嗜曙紅細(xì)胞反應(yīng)。
對(duì)離體人單核細(xì)胞中的TNF生產(chǎn)的抑制作用在下列體外試驗(yàn)中顯示出式Ⅰ化合物或其可藥用鹽抑制TNF生產(chǎn)的能力，并且由此證明治療涉及TNF產(chǎn)生的疾病的有效性將由志愿者獲得的外周血(100ml)收集在乙二胺四乙酸(EDTA)中。通過(guò)FICOLL/Hypaque并且用不完全HBSS洗滌3次分離出單核細(xì)胞。將細(xì)胞以1×106個(gè)細(xì)胞/ml的終濃度重新懸浮在預(yù)熱的RPMI(含有5％FCS，谷氨酰胺，pen/step和制菌霉素)中。將單核細(xì)胞在24孔平板中鋪板為1×106個(gè)細(xì)胞/1.0ml。將細(xì)胞在37℃下溫育(5％二氧化碳)并且使其在平板上粘著2小時(shí)，此后通過(guò)輕輕洗滌除去未粘著細(xì)胞。隨后將試驗(yàn)化合物(10ml)以各自3-4個(gè)濃度加入細(xì)胞內(nèi)并培育1小時(shí)。在適當(dāng)孔中加入LPS(10ml)。將平板在37℃下溫育過(guò)夜(18小時(shí))。在溫育結(jié)束時(shí)。通過(guò)夾層ELISA(R&D Quantikine試劑盒)測(cè)定TNF?；诰€(xiàn)性回歸分析測(cè)定各個(gè)化合物的IC50。
本發(fā)明通過(guò)下列實(shí)施例舉例說(shuō)明，但不限定其具體內(nèi)容。
實(shí)施例11-(4-氟苯基)-3-(苯甲基)-1,8-二氮雜萘-4(1H)-酮將2.67ml(1.98g,19.6mmol)二異丙胺在30ml四氫呋喃中的溶液冷卻至-78℃并且用7.80ml(19.5mmol)存在于己烷中的2.5M正丁基鋰滴加處理。攪拌5分鐘后，滴加2.16g(6.53mmol)制備例11的化合物在8ml四氫呋喃中的溶液，并且將所得紅色混合物攪拌5分鐘，隨后用0.890ml(0.816g,110mmol)的新蒸餾甲酸乙酯(由氫化鈣)處理。令混合物升至室溫(因干冰浴熔化)，室溫下攪拌2小時(shí)，并且在60℃加熱2小時(shí)。加入5ml的飽和氯化銨水溶液終止冷卻混合物并且在150ml乙酸乙酯和100ml飽和氯化銨水溶液之間分配。用鹽水(1×100ml)洗滌分離的有機(jī)層，干燥(MgSO4)，并且蒸發(fā)得到3.74g黃色固體。通過(guò)快速色譜(預(yù)吸收技術(shù))利用50％EtOAc-己烷作為洗脫劑純化得到1.5g淺黃色固體，該固體由乙酸乙酯重結(jié)晶得到1.3g(收率59％)標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)208-209℃，分析計(jì)算C21H15N2OFC,76.35；H,4.58；N,8.48.實(shí)測(cè)值C,76.13；H,4.59；N,8.47.
實(shí)施例2-6按照實(shí)施例1的方法用下列反應(yīng)物代替制備例11的化合物制備實(shí)施例2-6的化合物。
實(shí)施例73-[(4-乙?；交?甲基]-1-(4-氟苯基)-1,8-二氮雜萘-4(1H)-酮將266mg(0.650mmol)實(shí)施例5的化合物，0.242ml(0.259g,0.716)(1-乙氧基乙烯基)三丁基錫，8mg(0.007mmol)四(三苯基膦)鈀(0)和2ml苯的混合物在80℃加熱16小時(shí)。此時(shí)，加入0.120ml(1-乙氧基乙烯基)三丁基錫和7mg四(三苯基膦)鈀(O)，并且繼續(xù)加熱16小時(shí)。冷卻混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，用乙酸乙酯作為漂洗劑沖洗，濾液用1N鹽酸水溶液、鹽水(1×50ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到700mg白色固體。由EtOAc-己烷重結(jié)晶得到85mg(收率35％)白色粉末的標(biāo)題化合物，mp:227-229℃，1H NMR(CDCl3)d2.55(3H,s),3.97(2H,s),7.18-7.88(10H,m),8.60(1H,dd,J=2,4Hz),8.75(1H,dd,J=2,7Hz)；APcIMS(m/e)373(M++1)實(shí)施例81-(4-氟苯基)-3-[[4-(1-羥乙基)苯基]甲基]-1,8-二氮雜萘-4(1H)-酮將49mg(0.13mmol)的實(shí)施例7化合物在7ml甲醇中的溶液冷卻至0℃并且用5.0mg(0.13mmol)硼氫化鈉處理。在0℃攪拌1小時(shí)并在室溫下2小時(shí)后，加入2ml水終止混合物。濃縮該混合物除去甲醇并且令殘余物在50ml乙酸乙酯和50ml水之間分配。分離的有機(jī)層用鹽水(1×50ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到22mg的白色固體的標(biāo)題化合物，mp:197-198℃，分析的計(jì)算值C23H19N2O2F:C,73.78；H,5.11；N,7.48.實(shí)測(cè)值C,73.41；H,5.20；N,7.41。
實(shí)施例91-(3-二甲基氨基)苯基-3-(苯基甲基)-1,8-二氮雜萘-4(1H)-酮將180mg(0.46mmol)實(shí)施例2的化合物、0.087ml(71mg,0.50mmol)三(二甲基氨基)硼烷、8mg(0.009mmol)三(二亞芐基丙酮)二鈀(O)、6mg(0.018mmol)三-鄰-甲苯基膦、61mg(0.63mmol)的叔丁醇鈉和5ml甲苯的混合物在100℃加熱3小時(shí)。冷卻的混合物用50ml乙酸乙酯稀釋?zhuān)名}水(1×50ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并且蒸發(fā)。發(fā)現(xiàn)殘余物含有未反應(yīng)的起始原料，因此采用與上文相同的方式重新處理16小時(shí)。處理后，將粗產(chǎn)物(150mg)通過(guò)快速色譜用50％EtOAc-己烷洗脫劑純化得到72mg的油，該油放置后固化。由乙酸乙酯-己烷重結(jié)晶得到44mg(收率27％)白色結(jié)晶的標(biāo)題化合物，mp129-130℃,1H NMR(CDCl3)d 2.96(6H,s),3.94(2H,s),6.62-6.80(3H,m),7.15-7.39(7H,m),7.57(1H,s),8.62(1H,dd,J=2,4Hz),8.76(1H,dd,J=2,8Hz)；APcIMS(m/e)356(M++1)實(shí)施例101-(3-氯苯基)-3-(苯基甲基)-1,8-二氮雜萘-4(1H)-酮將185mg(0.603mmol)制備例20的化合物、0.0980ml(118mg,0.926mmol)3-氯苯胺和3ml吡啶的混合物在回流下加熱2小時(shí)。冷卻的混合物在乙酸乙酯和1N鹽酸水溶液之間分配，并且用鹽水洗滌分離的有機(jī)相，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)得到120mg固體。將此固體直接與0.0700ml(71.2mg,0.468mmol)1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯在2ml DME中混合，并且將混合物在60℃下加熱3小時(shí)，在50ml乙酸乙酯和50ml飽和氯化銨水溶液之間分配。分離的有機(jī)層用鹽水(1×50ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到151mg黃色半固體。通過(guò)快速色譜用25％EtOAc-己烷洗脫劑純化得到53mg(收率49％)白色固體的標(biāo)題化合物，mp:169.5-171℃，分析的計(jì)算值C21H15N2OCl:C,72.73；H,4.36；N,8.08.實(shí)測(cè)值C,71.71；H,4.40；N,8.11.
實(shí)施例11反式-1-(4-氟苯基)-3-[[4-(2-羥基-2-丙基)]環(huán)己基]甲基-1,8-二氮雜萘-4(1H)-酮將49mg(0.096mmol)制備例18的化合物、1ml四氫呋喃和25μL的HF-吡啶復(fù)合物(Aldrich)的混合物置于10ml聚四氟乙烯管中。將內(nèi)容物在45℃加熱4天，此時(shí)加入1ml四氫呋喃和25μL的HF-吡啶復(fù)合物。隨后繼續(xù)在45℃加熱3天。冷卻的混合物用過(guò)量碳酸氫鈉固體處理，用乙酸乙酯稀釋?zhuān)⑶医?jīng)玻璃絨毛塞過(guò)濾。蒸發(fā)濾液得到78mg黃色固體，用乙醚研制后，該固體通過(guò)快速色譜用20-75％乙酸乙酯-己烷洗脫劑純化得到17mg(收率45％)白色固體的標(biāo)題化合物，mp:207.5-209℃,1H NMR(CDCl3)d0.91-1.28(6H,m),1.12(6H,s),1.79-1.88(4H,m),2.43(2H,d,J=7Hz),7.20-7.41(5H,m),7.60(1H,s),8.58(1H,dd,J=2.4Hz),8.74(1H,dd,J=2.8Hz),APcIMS(m/e)395(M++1),制備例1反式-1-溴甲基-4-(2-羥基-2-丙基)-環(huán)己烷將1.994g(11.57mmol)反式-對(duì)-甲烷-7,8-二醇(制備可參見(jiàn)Ohloff,G；Giersch,W.《瑞士化學(xué)學(xué)報(bào)》(Helv.Chim.Acta),1980,63,76)、3.035g(11.57mmol)三苯基膦和20ml苯的混合物在冰浴中猝冷并且分次用2.060g(11.57mmol)N-溴琥珀酰亞胺處理。撤去冰浴，室溫下將該混合物攪拌16小時(shí)。用50ml己烷稀釋該混合物，通過(guò)依次用硅藻土和濾紙過(guò)濾除去固體。濾液用0.5 Na2S2O3溶液(2×100ml)、1N氫氧化鈉溶液(1×50ml)、鹽水(1×50ml)洗滌，干燥(NaSO4)并且蒸發(fā)。殘余物用己烷稀釋并過(guò)濾除去三苯基膦氧化物。該殘余物通過(guò)快速色譜用10-50％EtOAc-己烷洗脫劑純化得到3.382g(收率88％)的標(biāo)題化合物，為油狀。1H NMR(CDCl3)d 0.93-1.28(6H,m),1.15(6H,s),1.58(1H,brs),1.83-2.00(4H,m),3.27(2H,d,J=7Hz).
制備例2反式-1-溴甲基-4-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-2-丙基)-環(huán)己烷249mg(1.06mmol)的制備例2化合物在2ml乙烷中的溶液依次用0.246ml(227mg,2.18mmol)2,6-二甲基吡啶和0.365ml(419mg,1.59mmol)TBDSOTf處理。將該混合物室溫下攪拌3小時(shí)，濃縮，并且在50ml己烷和50ml水之間分配。分離水層，有機(jī)層用1N鹽酸水溶液(2×50ml)、飽和碳酸氫鈉溶液(1×25ml)、鹽水(1×25ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到411mg澄清油。通過(guò)快速色譜利用己烷洗脫劑純化得到369mg(100％)油狀的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.05(6H,s),0.84(9H,s),0.85(6H,s),0.93-1.20(6 H,m),1.82-1,97(4H,m),3.26(2H,d,J=6Hz).
制備例3反式-N-甲氧基-N-甲基-4-(2叔丁基二甲基甲硅烷氧基-2-丙基)-環(huán)己烷丙酰胺通過(guò)將39.2ml(98.0mmol)的2.5正丁基鋰在己烷中的溶液加入存在于200ml THF中的13.7ml(9.92g,98.0mmol)二異丙胺內(nèi)可制得二異丙基氨化鋰的溶液，向-78℃的該二異丙基氨化鋰溶液中滴加2.80ml(2.94g,49.0mmol)乙酸(由KMnO4蒸餾)，滴加的速度應(yīng)使放熱不超過(guò)-60℃。當(dāng)加料完畢后，所得混懸液用17.1ml(17.6g,98.0mmol)六甲基磷酰胺處理得到亮褐色溶液，向該溶液中加入存在于5ml四氫呋喃中的8.56g(24.5mmo1)制備例2化合物。將混合物在-78℃攪拌1小時(shí)，加熱至室溫，并且回流16小時(shí)。加入300ml飽和氯化銨溶液終止冷卻的混合物，用300ml乙酸乙酯提取。有機(jī)層用鹽水(1×300ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到9.78g(＞100％)油狀的反式-4-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-2-丙基)-環(huán)己烷丙酸粗品。
上述酸、3.19(32.7mmol)N,O-二甲基羥基胺鹽酸鹽、6.28g(32.7mmol)的DEC·HCl和250ml二氯甲烷的混合物用8.30ml(32.7mmol)三乙胺處理，室溫下將所得混合物攪拌16小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，殘余物在300ml乙酸乙酯和300ml的1N鹽水水溶液之間分配。分離有機(jī)層，與200ml回洗的水層合并，用飽和碳酸氫鈉溶液(1×400ml)、鹽水(1×300ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到7.81g褐色油。通過(guò)快速色譜利用20％乙酸乙酯-己烷洗脫劑純化得到1.08g(10％)褐色油狀的標(biāo)題化合物。1H NMR(CDCl3)d 0.04(6H,s),0.83(9H,s),0.83-1.18(6H,m),1.12(6H,s),1.50(2H,brq,J=7Hz),1.77-1.82(4H,m),2.41(2H,brt,J=8Hz),3.16(3H,s),3.67(3H,s).
制備例4
N-甲氧基-N-甲基-3-苯基丙酰胺將10.2g(68.1mmol)氫化肉桂酸、14.4g(74.9mmol)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽、7.31g(74.9mmol)N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽在250ml二氯甲烷中的混懸液冷卻至0℃并且用19.1ml(13.9g,136mmol)三乙胺處理。將該混合物攪拌16小時(shí)同時(shí)緩慢加熱至室溫，隨后濃縮。殘余物溶解在250ml乙酸乙酯中，用1N鹽酸水溶液(2×150ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(2×100ml)、鹽水(1×100ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并且蒸發(fā)得到13.11g(99％)油狀的標(biāo)題化合物。分析的計(jì)算值C11H15NO2:C,68.37；H,7.82；N,7.25.實(shí)測(cè)值C,68.65；H,8.11；N,7.18.
制備例5和6制備例5和6的化合物是按照制備例4的方法分別用3-(4-溴苯基)丙酸(制備可參見(jiàn)Adamczyk等人的《有機(jī)化學(xué)雜志》1984,49,4226)和3-(4-二甲基氨基苯基)丙酸(制備可參見(jiàn)Lightner,D.A.等人《四面體》1991,47,9759)代替氫化肉桂酸制備的油。制備例6的化合物進(jìn)一步通過(guò)快速色譜利用30-50％EtOAc-己烷作為洗脫劑純化。
制備例71-(2-氟-3-吡啶基)-3-苯基-1-丙酮將2.33ml(1.99g,17.8mmol)二異丙基胺在30ml四氫呋喃中的溶液冷卻至-78℃并且用滴加的7.12ml(17.8mmol)存在于己烷中的2.5M正丁基鋰溶液處理。當(dāng)加料完畢后,在-78℃下將該混合物攪拌5分鐘并且用滴加的1.53ml(1.36g,17.8mmol)新蒸餾2-氟吡啶處理。加料完畢后，-78℃下將黃色混合物攪拌15分鐘并且用滴加的3.44g(17.8mmol)制備例4的化合物在2ml THF中的溶液處理。-78℃下將該混合物攪拌4小時(shí)且加入5ml飽和氯化銨水溶液終止。加熱至室溫后，混合物在175ml乙酸乙酯和150ml飽和氯化銨水溶液之間分配。分離的有機(jī)層用鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到3.49g橙色油。通過(guò)快速色譜利用25％乙酸乙酯-己烷洗脫劑純化得到940mg(23％)黃色油狀的標(biāo)題化合物。1H NMR(CDCl3)d 3.05(2H,t,J=7Hz),3.32-3.64(2H,m),7.17-7.33(6H,m),8.29-8.38(2H,m),APcIMS(m/e)229(M+)制備例8-10制備例8-10的化合物按照制備例7的方法但用下列反應(yīng)物代替制備例4的化合物制得。
制備例111-[2-(4-氟苯氨基)-3-吡啶基]-3-苯基-1-丙酮將3.01g(13.1mmol)制備例7的化合物和5.00ml(5.86g,52.8mmol)對(duì)-氟苯胺的混合物在100℃下加熱2小時(shí)。蒸餾除去過(guò)量的苯胺，將殘余物溶于乙酸乙酯中，用水、鹽水(1×50ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到4.1g黃色固體，隨后在1N鹽酸水溶液中回流1小時(shí)。冷卻的混合物用乙酸乙酯提取，合并的提取液用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到3.6g(收率86％)黃色固體的標(biāo)題化合物。通過(guò)由己烷重結(jié)晶制備分析樣本，mp100.5-102℃，分析的計(jì)算值C20H17N2OF:C,74.98；H,5.35；N,8.74.實(shí)測(cè)值C,74.95；H,5.40；N,8.78.
制備例12-17制備例12-17的化合物按照制備例11的方法但用下列反應(yīng)物代替制備例7的化合物制得。
制備例18反式-3-[[4-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-2-丙基)]環(huán)己基]甲基-1-(4-氟苯基)-1,8-二氮雜萘-4(1H)-酮通過(guò)將1.41ml(3.52mmol)的2.5M正丁基鋰在己烷中的溶液加入存在于7ml THF中的0.493ml(0.356g,3.52mmol)二異丙胺溶液內(nèi)可制得二異丙基氨化鋰的溶液，向-78℃的該二異丙基氨化鋰溶液中滴加0.439g(0.880mmol)制備例17的化合物。當(dāng)加料完畢后,所得橙色混合物依次用0.284ml(0.261g,3.52mmol)甲酸乙酯和0.306ml(0.315g,1.76mmol)六甲基磷酰胺處理。將所得紅色混合物在1小時(shí)內(nèi)加熱至室溫并且加熱回流2小時(shí)。加入50ml飽和氯化銨水溶液終止冷卻的混合物，用乙酸乙酯(2×100ml)提取有機(jī)層。合并的有機(jī)層用鹽水(1×100ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到深色油，其通過(guò)快速色譜利用20-50％乙酸乙酯洗脫劑純化得到123mg(27％)泡沫狀的標(biāo)題化合物。1H NMR(CDCl3)d 0.00(6H,s),0.80(9H,s),0.85-1.05(6H,m),1.08(6H,s),1.73-1.83(4H,m),2.41(2H,d,J=7Hz),7.19-7.40(5H,m),7.58(1H,s),8.57(1H,dd,J=2.4Hz),8 73(1H,dd,J=2,8Hz)APcIMS(m/e)509(M++1),377(堿)制備例19N,N-二甲基-3-苯基-(E)-1-丙烯-1-胺將19.6ml(20.0g,149mmol)肉桂醛、40.6g(298mmol)碳酸鉀和150ml乙醚的混合物冷卻至-60℃并且用預(yù)冷卻(-78℃)的17.8ml(13.5g,300mmol)液態(tài)二甲胺(在-78℃下由氣體冷凝而得到)在20ml乙醚中的溶液處理。在-60℃下攪拌0.5小時(shí)后，令該混合物緩慢升至室溫并且隨后繼續(xù)攪拌3小時(shí)。過(guò)濾該混合物，濃縮，蒸餾得到10.2g(產(chǎn)率42％)黃色液體的標(biāo)題化合物，bp 95-100℃/2.8-3.0托。該液體經(jīng)放置緩慢聚合并且可直接使用。1H NMR(CDCl3)d 2.57(6H,s),3.30(2H,d,J=7Hz),4.35(1H,dt.J=7,14Hz),5.99(1H,dt,J=1,14Hz),7.15-732(5H,m).
制備例201-(2-氯-3-吡啶基)-3-(二甲基氨基)-2-(苯基甲基)-2-丙烯-1-酮向1.239(7.73mmol)制備例19的化合物、1.60ml(1.16g,11.5mmol)三乙胺和10ml二噁烷的混合物中加入1.36g(7.73mmol)2-氯煙酰氯。室溫下將所得橙色混懸液攪拌0.5小時(shí)，隨后在80℃下加熱0.5小時(shí)。冷卻的混合物在100ml乙酸乙酯和100ml飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配，分離的有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50ml)、鹽水(1×50ml)洗滌，干燥(MgSO4)并且蒸發(fā)得到1.6g橙色固體。由冰冷卻的己烷重結(jié)晶得到170mg(收率7％)的標(biāo)題化合物，mp 115-120℃,1H NMR(DMSO-d6)d 2.89(6H,s)3.80-4.02(2H,m),6.82(1H,br s),7.11-7.44(6H,m),7.20(1H,d,J=7Hz),8.40(1H,dd,J=1.5,4.5Hz).
權(quán)利要求
1．下式的化合物 或其可藥用鹽，其中R1和R2各自獨(dú)立地選自氫、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C6-C10)芳基、(C5-C9)雜芳基和(C2-C9)雜環(huán)烷基，其中所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)烷基被鹵素、羥基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、((C1-C6)烷基))2氨基、硫代、(C1-C6)烷硫基、氰基、羧基、羧基(C1-C6)烷基、羥基(C1-C6)烷基、(C1-C6)?；被酋；?、(C1-C6)烷基氨基磺?；?(C1-C6)烷基)2氨基磺?；芜x取代；和R3是氫、鹵素、羥基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、((C1-C6)烷基))2氨基、硫代、(C1-C6)烷硫基、羧基、羧基(C1-C6)烷基、羥基(C1-C6)烷基、(C1-C6)酰基、氨基磺?；?、(C1-C6)烷基氨基磺?；?(C1-C6)烷基)2氨基磺?；?。
2．按照權(quán)利要求1的化合物，其中R1是(C6-C10)芳基或(C5-C9)雜芳基。
3．按照權(quán)利要求1的化合物，其中R2是(C6-C10)芳基或(C5-C9)雜芳基。
4．一種藥物組合物，該組合物含有預(yù)防或治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽和可藥用載體，所述組合物在包括人體的哺乳動(dòng)物中可用于治療呼吸性、變應(yīng)性、類(lèi)風(fēng)濕性、體重調(diào)節(jié)性、炎性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疾病如哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸性疾病綜合征、中毒性休克、纖維變性、肺動(dòng)脈高血壓、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、體重控制、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎癥狀和其他炎性疾病、抑郁癥、多梗塞性癡呆和AIDS。
5．一種用于治療包括人體的哺乳動(dòng)物中的呼吸性、變應(yīng)性、類(lèi)風(fēng)濕性、體重調(diào)節(jié)性、炎性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的方法，所述疾病可例如哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸性疾病綜合征、中毒性休克、纖維變性、肺動(dòng)脈高血壓、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、體重控制、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎癥狀和其他炎性疾病、抑郁癥、多梗塞性癡呆和AIDS，該方法包括向該哺乳動(dòng)物施用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽。
6．一種在包括人體的哺乳動(dòng)物中選擇性抑制PDE4 D同工酶的藥物組合物，該組合物在呼吸性、變應(yīng)性、類(lèi)風(fēng)濕性、體重調(diào)節(jié)性、炎性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疾病如哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸性疾病綜合征、中毒性休克、纖維變性、肺動(dòng)脈高血壓、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、體重控制、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎癥狀和其他炎性疾病、抑郁癥、多梗塞性癡呆和AIDS的治療中可有效調(diào)節(jié)人體嗜曙紅細(xì)胞的活化和脫粒；所述組合物含有施用給哺乳動(dòng)物的抑制PDE4 D同工酶治療有效量的PDE4 D同工酶抑制化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體。
7．一種在包括人體的哺乳動(dòng)物中選擇性抑制PDE4D同工酶的方法，該方法在呼吸性、變應(yīng)性、類(lèi)風(fēng)濕性、體重調(diào)節(jié)性、炎性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疾病如哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸性疾病綜合征、中毒性休克、纖維變性、肺動(dòng)脈高血壓、變應(yīng)性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、牛皮癬、體重控制、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡病質(zhì)、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)膜炎、關(guān)節(jié)炎癥狀和其他炎性疾病、抑郁癥、多梗塞性癡呆和AIDS的治療中可有效調(diào)節(jié)嗜曙紅細(xì)胞的活化和脫粒；該方法包括給所述哺乳動(dòng)物施用抑制PDE4 D同工酶治療有效量的PDE4 D同工酶抑制化合物或其可藥用鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)的化合物或其可藥用鹽,其中R
文檔編號(hào)C07D471/04GK1312810SQ99809505
公開(kāi)日2001年9月12日 申請(qǐng)日期1999年8月5日 優(yōu)先權(quán)日1998年8月11日
發(fā)明者E·F·克雷曼 申請(qǐng)人:輝瑞產(chǎn)品公司