專利名稱:含n-羥乙酰神經(jīng)氨(糖)酸的糖脂及其制備方法
本發(fā)明涉及與神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)的化合物及其制備方法，這些與神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)的化合物具有漢一代二氏抗原(Hanganatziu-Deieher antigen)活性(以下稱為“H-D抗原”)。
本發(fā)明還涉及與N-脂酰基(神經(jīng))鞘氨醇(神經(jīng)酰胺)相關(guān)的化合物，這些化合物是合成上述神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)化合物的中間產(chǎn)物。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞的糖脂是稱為N-脂?；?神經(jīng))鞘氨醇的類脂結(jié)構(gòu)間的配糖鍵，其中脂肪酸用各種化合方法被酰胺鍵合到稱為(神經(jīng))鞘氨醇的長(zhǎng)鏈氨基醇和糖上，例如葡萄糖、半乳糖、N-乙酰葡糖胺、N-乙酰半乳糖胺、巖藻糖和唾液酸，并屬于稱之為神經(jīng)鞘糖脂的范疇。在這類糖脂中，含有唾液酸的物質(zhì)特別稱為神經(jīng)節(jié)苷脂。
H-D抗原是在20年代分別由Hanganatziu和Deicher在用馬抗血清注射過的病人體中發(fā)現(xiàn)的抗原，用馬抗血清注射病人的目的是為了治愈他們的疾病。這種H-D抗原就是通常所說的與注射的受染血清以及各種動(dòng)物(例如羊、馬、豬、兔和豚鼠)的紅血細(xì)胞反應(yīng)的抗原。最近，H-D抗原還可以作為神經(jīng)節(jié)苷脂從馬的紅血細(xì)胞中提取并純化成簡(jiǎn)單的分子形式，此外，已經(jīng)證明具有H-D抗原活性的神經(jīng)節(jié)苷脂是馬的紅血細(xì)胞的主要糖脂組分，稱之為“血糖苷”(hematosides)。
假設(shè)H-D抗原的化學(xué)結(jié)構(gòu)是Gd Neu(2-3)Gal(1-4)GlC-Cer。
此外，目前H-D抗原常常在病人的血清中發(fā)現(xiàn)，無(wú)論異種抗血清是否已被引入。并已認(rèn)識(shí)到這些抗原出現(xiàn)在人類或家禽的癌性淋巴細(xì)胞表面上。
不僅在癌的早期發(fā)現(xiàn)，而且在對(duì)癌的免疫治療法中，H-D抗原似乎很有可能用作標(biāo)志，因此人們總是希望將其應(yīng)用于癌的預(yù)防和治療領(lǐng)域中。
多數(shù)這樣的神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)化合物通常存在于細(xì)胞膜的兩個(gè)分子層的外分子層中，并從近代研究結(jié)果認(rèn)識(shí)到它們?cè)诩?xì)胞的辨別，接受和信息反應(yīng)中，在細(xì)胞受體機(jī)能中，在細(xì)胞的區(qū)別中，以及在細(xì)胞的增生、惡性變化及細(xì)胞行為中起著重要作用。
然而，離析和純化取自活體中的含有唾液酸的低聚糖鏈?zhǔn)欠浅＠щy的，因此，為了說明在這些含有唾液酸低聚糖鏈上的精確生物信息和其分子結(jié)構(gòu)之間的相互關(guān)系，精確合成這些鏈?zhǔn)潜匾暮筒豢扇鄙俚摹?br>本發(fā)明人以前已提出一種用立體選擇法合成糖脂的N-脂?；?神經(jīng))鞘氨醇部分的方法，這種方法具有較好的產(chǎn)率(日本專利公開190745/1985)。
當(dāng)糖鏈部分進(jìn)行糖基化作用時(shí)，上述N-脂?；?神經(jīng))鞘氨醇(I)通常按下述方法轉(zhuǎn)變成苯甲?；幕衔?IV)化合物(I)在吡啶中用三苯甲基氯處理得到三苯甲基化的化合物(II)，然后用苯甲酰氯和二甲基氨基吡啶處理該化合物(II)獲得三苯甲基-苯甲?；幕衔?II)。該化合物(III)用對(duì)甲苯磺酸處理以分離三苯甲基并產(chǎn)生N-脂?；?神經(jīng))鞘氨醇的苯甲?；幕衔?IV)。在這一系列反應(yīng)中，苯甲?；饔每梢栽诓环蛛x化合物(II)和(III)((I)-(IV))的情況下進(jìn)行。
然而，使用上述的苯甲酰化的化合物(IV)的糖基化作用有如下缺點(diǎn)。
苯甲酰化的化合物(IV)在通常用作糖基化的溶劑(例如二氯甲烷、苯或硝基甲苯)中具有較差的溶解性，而且這種糖基化作用僅能夠在低濃度下進(jìn)行，并且從糖基化反應(yīng)中所獲得的產(chǎn)品的產(chǎn)率也不高(約30～35％)。
為了解決上述問題，本發(fā)明人進(jìn)行了深入的研究，結(jié)果意想不到地發(fā)現(xiàn)了用各種類型的甲硅烷基代替上述化合物(IV)中的苯甲酰基產(chǎn)生了顯著的效果，例如即使在上述糖基化的條件下，也增加了化合物(IV)在溶劑中的溶解性，并且已確定出例如在高濃度(超過50％)下能夠進(jìn)行反應(yīng)，產(chǎn)品的產(chǎn)率也有大的提高。這個(gè)發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致了本發(fā)明的成功。
本發(fā)明的目的之一是提供神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)化合物的新的中間產(chǎn)物及其制備方法，這種新的中間產(chǎn)物與上述各醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有關(guān)。
本發(fā)明的另一目的是提供新的N-脂酰基(神經(jīng))鞘氨醇相關(guān)化合物，這些化合物是合成上述神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)化合物的中間產(chǎn)物。
本發(fā)明涉及下式表示的神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)化合物
〔式中R1表示氫原子或SiR3R4R5(其中R3和R4分別表示甲基或苯基，R5表示叔丁基或二甲基苯基甲基)，R2表示氫原子，三苯甲基(Tr)，或
(其中M表示堿金屬原子)〕本發(fā)明還涉及一種制備神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)化合物的方法，其特征在于水解下式表示的化合物
(式中T＝COCOCH3和Ac＝COCH3)以制備下式表示的化合物
(式中M表示堿金屬原子)。
此外，本發(fā)明還涉及一種制備神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)化合物的方法，其特征在于乙?；率奖硎镜幕衔?br> (式中SitBuPn2表示二苯基-叔-丁基甲硅烷基)以制備下式表示的化合物
然后水解該化合物，獲得下式表示的化合物
圖I
圖II
圖III
圖IV
制備流程圖V
下面參照制備流程圖I到V詳述本發(fā)明。在化學(xué)式中T表示OCOCH3而♀表示OCH2C6H5。(1)、化合物(1)的制備用下列方法制備化合物(1)
已知化合物(A)用Monatsh Chem97654(1966)所述的方法制備(參照實(shí)施例1和2)。(2)、化合物(2)的制備首先將上述化合物(1)加入到溶劑如乙酰氯中，并在溶劑中加入氯化氫氣同時(shí)用冰冷卻。在攪拌24小時(shí)后，所得溶液在減壓下濃縮，并將溶劑如甲苯加入到殘余物中，將所得溶液共沸蒸餾以制備化合物(2)。(3)、化合物(3)和(4)的制備化合物(3)和(4)是用化合物(B)與上述化合物(2)在下面述及的反應(yīng)條件下反應(yīng)而制得。
催化劑的例子包括HgBr2，Hg(CN)2，AgCLO4，Ag2CO3，AgOTf(其中Tf表示triflic acid以下用相同方式縮寫)和硅酸銀。AgOTf或比例為1∶3和1∶1之間的HgBr2和Hg(CN)2的混合物作為催化劑更好。此外，CH2CL2、苯、甲苯、氯仿、CH3CN、CH3NO2或四氫呋喃都可用作溶劑，但使用CH2CL2或四氫呋喃作溶劑更好。
反應(yīng)可以在冰冷卻下在約-25℃到約90℃內(nèi)進(jìn)行，但在室溫下進(jìn)行更好。
反應(yīng)在攪拌下進(jìn)行約30分鐘至約24小時(shí)，最好是進(jìn)行約24小時(shí)的攪拌反應(yīng)。
這樣所得反應(yīng)產(chǎn)物用常規(guī)方法(如柱色譜法)提純。(4)、化合物(5)和(6)的制備在下面給出的反應(yīng)條件下，分別地乙?；鲜龌衔?3)和(4)，得到化合物(5)和(6)。
CH3COCL或AC2O能夠用作此反應(yīng)的試劑，但AC2O更好。
吡啶、三乙醇胺(TEA)、二氯甲烷、二氯乙烷或四氫呋喃(THF)都能用作溶劑，并最好將溶于吡啶的催化量的二甲基氨基吡啶加入反應(yīng)溶液中。
反應(yīng)溫度在約0℃至約100℃范圍內(nèi)，但大約為60℃更好。
反應(yīng)可以在攪拌下進(jìn)行約30分鐘至約24小時(shí)，但最好攪拌24小時(shí)。(5)、化合物(7)和(8)的制備在下面給出的反應(yīng)條件下化合物(5)和(6)分別反應(yīng)制備化合物(7)和(8)。
Pd-C，Pd(OH)2，或PtO2在氫氣氛下能夠用作反應(yīng)催化劑。還原劑(例如HCOOH-MeOH)也能夠用作催化劑，但10％的Pd-C催化劑更好。
甲醇、甲醇和水的混合溶劑、甲醇和AcOH的混合溶劑，或AcOH均能用作溶劑，但是甲醇更好。
反應(yīng)溫度在冰冷卻溫度至約60℃范圍內(nèi)，但室溫更好。
反應(yīng)時(shí)間在約1小時(shí)至約24小時(shí)范圍內(nèi)，但24小時(shí)更好。反應(yīng)最好在攪拌下進(jìn)行。
所得反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)過濾提純。(6)、化合物(9)和(10)的制備將上述化合物(7)和(8)在下面給定的反應(yīng)條件下分別地乙?；?，得到化合物(9)和(10)。
AC2O或CH3COCl能夠用作反應(yīng)試劑，但AC2O更好。
吡啶、三乙醇胺(TEA)、二氯甲烷、二氯乙烷、二甲基甲酰胺(DMF)或四氫呋喃(THF)均能用作溶劑，且將溶于吡啶中的催化量的二甲基氨基吡啶加入反應(yīng)溶液中更好。
反應(yīng)溫度在約0℃至約80℃范圍內(nèi)，但約60℃更好。
反應(yīng)時(shí)間在約30分鐘至約24小時(shí)范圍內(nèi)，但最好約為24小時(shí)，并最好攪拌反應(yīng)溶液。
所得反應(yīng)產(chǎn)物用常規(guī)方法(如柱色譜法)提純。(7)、化合物(11)和(12)的制備上述化合物(9)和(10)在下面給出的反應(yīng)條件下分別脫乙酰得到化合物(11)和(12)。
NH2NH2AcOH能夠用作反應(yīng)試劑。
DMF可用作溶劑。
反應(yīng)溫度在室溫至約80℃范圍內(nèi)，但約60℃更好。
反應(yīng)時(shí)間在約5分鐘至約1小時(shí)范圍內(nèi)，最好約為20分鐘，攪拌反應(yīng)溶液更好。
所得反應(yīng)產(chǎn)物用常規(guī)方法(如柱色譜法)提純。(8)、化合物(13)和(14)的制備用Cl3CCN分別地與上述化合物(11)和(12)在下面給定的反應(yīng)條件下反應(yīng)，得到化合物(13)和(14)。
CCl3CN-DBU、CCl3CN-NaH、CCl3CN-K2CO3、或CCl3CN-BuLi均能用作反應(yīng)催化劑，但CCl3CN-DBU更好。
二氯乙烷、苯、甲苯、二氯甲烷或氯仿均能用作溶劑，但二氯甲烷更好。
反應(yīng)溫度在約-25℃至約50℃范圍內(nèi)，但最好約為0℃。
反應(yīng)時(shí)間在約30分鐘至約12小時(shí)范圍內(nèi)，但最好約為4小時(shí)。最好攪拌反應(yīng)溶液。
這樣得到的反應(yīng)產(chǎn)物用常規(guī)方法(如柱色譜法)提純。(9)、化合物(15)和(16)的制備用化合物(C)在下面給出的反應(yīng)條件下分別地與上述化合物(13)和(14)反應(yīng)制得化合物(15)和(16)。
BF3Et2O，TMS triflate，TiCl4，AlCl3或SnCl4均能用作反應(yīng)催化劑，但BF3Et2O更好。
CH2Cl2、C2H4Cl2、四氫呋喃(THF)、苯、甲苯、CH3CN、CH2NO2，或乙醚均可用作溶劑，但CH2Cl2更好。
反應(yīng)溫度在約-25℃至約60℃范圍內(nèi)，但用冰和甲醇冷卻的溫度下更好。
反應(yīng)時(shí)間在約1小時(shí)至約24小時(shí)范圍內(nèi)，但最好約為24小時(shí)，并且最好攪拌反應(yīng)溶液。(10)、化合物(17)和(18)的制備在下面給出的反應(yīng)條件下，上述化合物(15)和(16)分別地反應(yīng)得到化合物(17)和(18)。
Bu4NF或HF能夠用作反應(yīng)催化劑，但使用Bu4NF更好。
THF、CH3CN、CH3NO2、EtOAc、CH2Cl2、CHCl3、DMF、乙醚、苯或甲苯均能用作溶劑，但THF更好。
反應(yīng)溫度在約0℃至約50℃范圍內(nèi)，但室溫更好。
反應(yīng)時(shí)間在約30分鐘至約48小時(shí)范圍內(nèi)，反應(yīng)最好在攪拌下進(jìn)行48小時(shí)。
這樣獲得的反應(yīng)產(chǎn)物用常規(guī)方法(如柱色譜法)提純。(11)、乙?；苽浠衔?17)和(18)在下面給出的反應(yīng)條件下，上述化合物(15)和(16)分別反應(yīng)，獲得化合物(17)和(18)。
Ac2O或CH3COCl可用作反應(yīng)試劑，而Ac2O更好。
吡啶、三乙醇胺(TEA)，或二甲基氨基吡啶可以作為溶劑，而將溶于吡啶的催化量的二甲基氨基吡啶加入反應(yīng)溶液更好。
反應(yīng)溫度在約0℃至80℃范圍內(nèi)，但約60℃更好。
反應(yīng)時(shí)間在約30分鐘至約24小時(shí)范圍內(nèi)，而反應(yīng)最好在攪拌下進(jìn)行6小時(shí)。
這樣得到的反應(yīng)產(chǎn)物用常規(guī)方法(如柱色譜法)提純。(12)、化合物(19)和(20)的制備在下面給出的反應(yīng)條件下將上述化合物(17)和(18)分別地脫乙酰，得到化合物(19)和(20)。
NaH-MeOH、K2CO3-MeOH、TEA-MeOH、KOH-MeOH，或MaOH-MeOH均可用作反應(yīng)催化劑，而NaOCH3較好，0.1N的NaOCH3最好。
甲醇、乙醇、丙醇、四氫呋喃(THF)，或二噁烷可用作溶劑，而甲醇更好。
反應(yīng)溫度在約-10℃至約50℃范圍內(nèi)，但室溫更好。
反應(yīng)時(shí)間大約30分鐘至大約24小時(shí)，但在攪拌下反應(yīng)6小時(shí)更好。
如此獲得的反應(yīng)產(chǎn)物用常規(guī)方法提純，例如中和后進(jìn)行柱色譜提純。(13)、水解以制備化合物(19)和(20)在下面給出的反應(yīng)條件下通過分別水解上述化合物(17)和(18)，得到化合物(19)和(20)。
NaOH、KOH或LiOH可用作反應(yīng)催化劑，但NaOH較好。
MeOH-THF、MeOH-二噁烷乙醇-THF、乙醇-二噁烷、丙醇-二噁烷或丙醇-THF均可用作溶劑，MeOH-THF更好。
反應(yīng)溫度約0℃至約50℃，但室溫更好。
反應(yīng)時(shí)間大約30分鐘到大約24小時(shí)，24小時(shí)更好。反應(yīng)時(shí)攪拌反應(yīng)溶液為佳。
制備N-脂?；?神經(jīng))鞘氨醇相關(guān)化合物的起始物料是上述化合物(22)，N-脂?；拾贝枷嚓P(guān)化合物是本發(fā)明的神經(jīng)節(jié)苷酯相關(guān)化合物的中間產(chǎn)物。N-脂?；拾贝枷嚓P(guān)化合物可以根據(jù)以下描述的步驟獲得。(1)、下式表示的化合物(1)的制備
(式中R3、R4和R5的含義如上所述)在下面給定的反應(yīng)條件下，由化合物(22)獲得化合物(23)(25)和(27)。
Ph2tBusicl、Ph2(CMe2Ph)sicl或Me2(CMePh)sicl可作為反應(yīng)物用于各反應(yīng)，各反應(yīng)在有氯(例如咪唑)存在時(shí)進(jìn)行更好。
二甲基甲酰胺(DMF)、四氫呋喃(THF)、氯仿、吡啶或可力丁可用作溶劑，但DMF更好。
反應(yīng)溫度大約0℃至大約100℃，但室溫至40℃更好。
反應(yīng)時(shí)間約1小時(shí)至2夜，以1至2夜為佳，攪拌反應(yīng)溶液更好。
如此獲得的反應(yīng)產(chǎn)物用常規(guī)方法(如柱色譜法)提純。(2)、下式表示的化合物(24)、(26)和(28)的制備
(式中R1、R2和R3的定義如上所述)甲苯磺酸(下文縮寫為TsOH、CF3COOH、CH3COOH(下文縮寫為AcOH)、HCOOH、HCL可用作各反應(yīng)的催化劑，但TsOH更好。
MeOH-CH2CL2、MeOH-C2H4CL2、CHCL3-MeOH、AcOH-MeOH，THF-MeOH、二噁烷-MeOH、AcOH水溶液、THF水溶液或二噁烷水溶液均可用作溶劑，但MeOH-CH2Cl2更好。
反應(yīng)溫度大約0℃至大約80℃，但室溫更好。
反應(yīng)時(shí)間大約30分鐘至1夜，以1至6小時(shí)為佳，攪拌反應(yīng)溶液更好。
如此獲得的反應(yīng)產(chǎn)物用常規(guī)方法(如柱色譜法)提純。(本發(fā)明的實(shí)用性)神經(jīng)節(jié)苷酯相關(guān)化合物作為信號(hào)對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)癌癥以及癌癥的免疫治療都是有用的。
此外，當(dāng)合成糖脂以及上述神經(jīng)節(jié)苷酯相關(guān)化合物(它們有效地用作腫瘤信號(hào))時(shí)，N-脂?；?神經(jīng))鞘氨醇相關(guān)化合物方便地用于合成N-脂?；?神經(jīng))鞘氨醇部分。
以下參照參考實(shí)施例和實(shí)施例1對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的描述。參考實(shí)施例1(從化合物(A)制備化合物(A′))制備5-N-乙醇酰-3，5-二脫氧-β-D-甘油基-D-半乳糖-2-壬酮糖吡喃糖酸甲酯(nonulopyranosonate)向1.12g(3.4431mmol)N-羥乙酰神經(jīng)氨(糖)酸(NGNA)中加入75ml無(wú)水甲醇和1.12g Dowex 50W-X8(H+)，得到的混合物在室溫下攪拌20小時(shí)，由于殘留NGNA以及反應(yīng)不完全，向反應(yīng)溶液中再加入150ml無(wú)水甲醇和2gDowex 50W-X8(H+)，當(dāng)該混合物在室溫下攪拌4小時(shí)后，NGNA基本溶解。過濾該反應(yīng)溶液，用甲醇洗滌樹脂。將濾液和洗滌溶液混合在一起，得到的混合物在減壓下蒸餾，獲得1.08g無(wú)色無(wú)定形晶體(產(chǎn)率92％)。
用甲醇對(duì)該晶體重結(jié)晶。
(化合物(A′)的物理性質(zhì))熔點(diǎn)170-173℃IRνmaxKBrcm-13400(-OH，-NH)，1745(-COOCH3)，1645(-CONH-)，1550(-CONH-，酰胺II)1H-NMR400MHzppm(DMSO-d6+D2O，TMS)1.721(1H，t，J3ax 3eq＝12.7Hz，J3ax 4＝11.7Hz，H3ax)
2.050(1H，dd，J3ax 3eq＝12.7Hz，J3eq 4＝4.9Hz，H3eq)3.217(1H，dd，J7 8＝9.3Hz，J6 7＝1.0Hz，H-7)3.312(1H，dd，J9 9′＝11.2Hz，J8 9′＝6.8Hz，-H-9′)3.502(1H，ddd，J7 8＝9.3Hz，J8 9′＝6.4Hz，J8 9＝2.5Hz，H-8)3.518-3.671(2H，m，H-9，H-5)3.714(3H，s，-COOCH3)3.845-3.932(3H，m，HOCH2-CONH-，H-6)
3.911(1H，d，J＝16.1Hz，HOCH-CO-)4.034(1H，ddd，J3ax 4＝11.7Hz，J4 5＝10.7Hz，J3eq 4＝4.9Hz，H-4)7.813(1H，d，J＝8.8Hz，-CONH-)元素分析C12H21NO107/10H2OMW＝351.92(339.31)計(jì)算值C40.96 H6.42 N3.98測(cè)定值C40.89 H6.27 N3.88
參考實(shí)施例2(從化合物(A′)制備化合物(1))5-N-乙酸基乙酰基-2、4、7、8-戊-0-乙?；?α、β-D-甘油基-D-半乳糖-2-壬酮糖吡喃糖酸甲酯的制備和提純將1.05g(3.0945mmol)5-N-乙醇酰-3、5-二脫氧-β-D-甘油基-D-半乳糖-2-壬酮糖吡喃糖酸甲酯溶于15ml無(wú)水吡啶中，然后向所得溶液中加入10ml無(wú)水乙酸，得到的混合物在室溫下攪拌42小時(shí)。反應(yīng)溶液在減壓下蒸餾，然后向殘余物中加入甲苯。所得溶液進(jìn)行共沸蒸餾(5次)直到?jīng)]有無(wú)水醋酸的味道，得到1.846g無(wú)定形晶體。在柱中填充185g已懸浮在氯仿中的硅膠，并將1.846g無(wú)定形晶體溶于氯仿，然后加到柱中。使用氯仿和甲醇(50∶1)的混合物作為展開溶劑進(jìn)行展開，以收集餾分，每大約15ml收集一次洗脫液，用TLC分析各餾分液，以便只收集含有標(biāo)題物質(zhì)的餾分液。蒸出溶劑，殘余物溶于水中，進(jìn)行冷凍干燥，然后在真空下干燥(P2O5)得到445mg α-物質(zhì)、518mg β-物質(zhì)和688mg αβ-混合物，總量為1.651g(理論產(chǎn)量1.83g；產(chǎn)率90.2％)。(α-物質(zhì)的物理性質(zhì))熔點(diǎn)74-78℃元素分析C24H33NO162/5H2OMW＝598.74(591.54)計(jì)算值C48.14 H5.69 N2.34測(cè)定值C48.12 H5.57 N2.38IRνmaxkBrcm-13420(-NH)，1750(-COOCH3)，
1690(-CONH-)，1540(-CONH-，amideII)1H-NMR400MHzppm(CDCl3，TMS)2.024(3H，s，-OCOCH3)2.039(3H，s，-OCOCH3)2.109(3H，s，-OCOCH3)2.111(3H，s，-OCOCH3)2.130(3H，s，-OCOCH3)2.182(3H，s，-OCOCH3)2.078(H3ax)2.571(1H，dd，J＝13.0Hz，J＝4.8Hz，α-H3eq)3.768(3H，s，-COOCH3)4.163(1H，dd，J＝12.3Hz，J＝6.0Hz，H-9′)4.175(1H，ddd，J＝10.6Hz，J＝10.4Hz，J＝10.0Hz，H-5)
4.370(1H，dd，J＝12.3Hz，J＝2.5Hz，H-9)
4.787(1H，dd，J＝10.6Hz，J＝2.3Hz，H-6)5.076(1H，ddd，J＝11.8Hz，J＝10.4Hz，J＝4.8Hz，H-4)
5.204(1H，ddd，J＝6.4Hz，J＝6.0Hz，J＝2.5Hz，H-8)5.334(1H，dd，J＝6.4Hz，J＝2.3Hz，H-7)6.197(1H，d，J＝10.0Hz，-CONH-)(β物質(zhì)的物理性質(zhì))熔點(diǎn)80-86℃元素分析C24H33NO167/10H2OMW＝604.15(591.54)計(jì)算值C47.71 H5.74 N2.32測(cè)定值C46.66 H5.43 N2.35IRνmaxKBrcm-13400(-NH)，1750(-COOCH3)，1700(-CONH-)，1530(-CONH-，酰胺II)1H-NMR400MHzppm(CDCl3，TMS)2.023(3H，s，-OCOCH3)2.043(3H，s，-OCOCH3)2.072(3H，s，-OCOCH3)2.145(3H，s，-OCOCH3)2.168(3H，s，-OCOCH3)2.201(3H，s，-OCOCH3)2.102(1H，dd，J＝13.4Hz，J＝11.4Hz，β-H3ax)2.558(1H，dd，J＝13.4Hz，J＝4.7Hz，β-H3eq)3.799(3H，s，-COOCH3)4.103(1H，ddd，J＝10.8Hz，J＝10.2Hz，J＝9.5Hz，H-5)
4.125(1H，dd，J＝12.3Hz，J＝6.7Hz，H-9′)4.188(1H，dd，J＝10.8Hz，J＝2.2Hz，H-6)
4.490(1H，dd，J＝12.3Hz，J＝2.5Hz，H-9)
5.080(1H，ddd，J＝5.1Hz，J＝6.7Hz，J＝2.5Hz，H-8)5.316(1H，dd，J＝5.1Hz，J＝2.2Hz，H-7)5.332(1H，ddd，J＝11.4Hz，J＝10.2Hz，J＝4.7Hz，H-4)5.981(1H，d，J＝9.5Hz，-CONH-)參考實(shí)施例3(從化合物(1)制備化合物(2)向340mg(0.54mmol)化合物(1)中加入50ml乙酰氯，并向該混合物中通入HCL氣體，然后攪拌1夜，再向反應(yīng)溶液中加入甲苯，之后進(jìn)行蒸餾(共沸蒸餾)。(物理性質(zhì))
D21-56.6°C＝0.79 CHCl3300mg(97％)Rf＝0.46(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶2)NMR400MHz，CDCl3，δ(ppm)，TMSδ2.039，2.062，2.095，2.123，2.210(s，OCOCH3，x5)2.295(1H，dd，J＝11.2，13.9Hz，H-3ax)2.796(1H，dd，J＝4.6，13.9Hz，H-3eq)3.888(3H，s，-OCH3)4.074(1H，dd，J＝5.9，12.5Hz，H-9)4.213(td，J＝10.2，10.5Hz，H-5)4.312(d，J＝15.3，-CH2OCO)4.414(1H，t，J＝2.9，H-6)4.443(1H，dd，J＝2.7，5.4Hz，H-9)4.629(1H，d，J＝15.3Hz，-CH2OCO-)5.182(td，J＝2.4，10.0Hz，H-8)5.431(1H，dd，J＝2.2，6.8Hz，H-7)5.469(1H，m，H-4)6.068(d，J＝10.0Hz，NH)參考實(shí)施例4(從化合物(2)制備化合物(3)和(4)A)、向1.5g活化分子篩4A中加入1.4g(1.6mmol)化合物(B)、1.125g(4.5mmol)Hg(CN)2、540mg(1.5mmol)HgBr2和2ml二氯乙烷，所得混合物攪拌1小時(shí)，然后向該混合物中加入500mg(0.8mmol)化合物(2)，化合物(2)事先在MeOH-冰冷卻下已溶于4ml二氯乙烷中，之后攪拌一夜。反應(yīng)溶液在70℃下攪拌1天后用硅藻土過濾，并向?yàn)V液中加乙酸乙酯，用NaHCO3水溶液、水、飽和鹽水洗滌有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后進(jìn)行蒸餾，殘余物用柱色譜法提純(C-300、80g；甲苯∶乙酰乙酯＝2∶1，然后1∶2)，得到195.8mg化合物(3)(產(chǎn)率17.3％)以及81mg化合物(4)(產(chǎn)率7.2％)。B)、向3g活化分子篩4A中加入3g(3.4mmol)化合物(B)、750mg(3mmol)Hg(CN)2、1.08g(3mmol)HgBr2和5ml二氯乙烷，將該混合物攪拌1小時(shí)，然后向混合物中加入1g(1.6mmol)事先在冰-MeOH冷卻下已溶于7ml二氯乙烷中的化合物(2)，再攪拌一夜。反應(yīng)溶液在70℃下攪拌1天后用硅藻土過濾，向?yàn)V液中加入乙酸乙酯。用NaHCO3水溶液、水、飽和鹽水洗滌有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后進(jìn)行蒸餾。殘余物用柱色譜法提純(C-300、200g；甲苯∶乙酸乙酯＝2∶1，然后1∶2)，得到408mg化合物(3)(產(chǎn)率18.1％)以及165mg化合物(4)(產(chǎn)率7.3％)。C)、向1g活化分子篩4A中加入755mg(1mmol)已溶于2.5ml THF中的化合物(B)以及144mg(0.55mmol)的AgOTf，該混合物在-10℃下攪拌30分鐘，再向其中加入300mg(527μmol)已溶于2.5ml THF中的化合物(2)，之后在室溫下攪拌1夜。反應(yīng)溶液在70℃下攪拌1天后用硅藻土過濾，然后向?yàn)V液中加入乙酸乙酯。用NaHCO3水溶液、水、飽和鹽水洗滌有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后進(jìn)行蒸餾。殘余物用柱色譜法提純(C-300、50g；甲苯∶乙酸乙酯＝2∶1，然后1∶2)，得到23.8mg化合物(3)(產(chǎn)率3.5％)以及26.7mg化合物(4)(產(chǎn)率3.9％)。(物理性質(zhì))(化合物3)Rf＝0.574(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶2)[α]D23-3.57(C＝1.10，CHCl3)元素分析理論值C64.53 H6.20 N0.99測(cè)定值C64.48 H6.13 N0.72NMR 400MHz ppm(TMS)1.913，1.966，2.044，2.103，2.183(s，OCOCH3x5)2.555(1H，dd，J＝4.6，13.4Hz，H-3c)3.618(s，OCH3)5.259(1H，td，J＝2.4，8.7Hz，H-8c)5.297(1H，t，J＝2.4Hz)5.333(1H，ddd，J＝4.6，10.9，10.9Hz，H-4c)5.585(1H，d，J＝10.2，NH)7.21-7.37(3OH，m，芐基x6)13C NMR CDCl3ppm99.69(C-2c)，102.29(C-1a)，102.40(C-1b)
化合物(4)Rf＝0.479(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶2)[α]D23-7.12(C＝1.25，CHCl3)元素分析理論值C64.53 H6.20 N0.99測(cè)定值C64.15 H6.26 N1.02NMR 400MHz ppm(TMS)1.883，1.984，2.001，2.100，2.189(s，OCOCH3x5)2.521(1H，dd，J＝4.6，13.1Hz，H-3ceq)3.774(1H，m，-OCH3)4.20(1H，m，H-4c)5.261(1H，dd，J＝1.7，8.0Hz，H-7)5.416(1H，m，H-8)5.808(1H，d，J＝9.7，NH)7.20-7.40(3OH，m，芐基x6)13C NMR 22.5MHz CDCl3ppm99.69(C-2c)，103.75(C-1a)，103.91(C-1b)參考實(shí)施例5(從化合物(3)制備化合物(5)向144mg(101.8μmol)化合物(3)中加入5ml吡啶和5ml無(wú)水乙酸，在60℃下攪拌該混合物一夜，將反應(yīng)溶液完全干燥。
148mg(99.8％)Rf＝0.397(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶1)24-13.30(C＝1.0，CHCl3)元素分析理論值C64.32 H6.16 N0.96測(cè)定值C64.66 H6.17 N1.091H NMR 400MHz ppm CDCl3(TMS)1.819，1.962，2.034，2.106，2.143，2.169(s，OCOCH3x6)2.571(1H，dd，J＝4.6，13.1Hz，H-3ceq)3.444(3H，s，OCH3)4.095(1H，td，J＝10.5，10.5Hz)5.101(1H，m，H-4c)5.378(1H，d，J＝3.2Hz，H-4b)7.23-7.38(3OH，m，苯甲?；?x6)13C NMR ppm CDCl399.25(C-2c)，101.86(C-1a)，102.34(C-1b)參考實(shí)施例6(從化合物(5)制備化合物(7)將390mg(267.7μmol)化合物(5)溶于50ml甲醇，向甲醇溶液中加入200mg 10％的Pd-C200，所得混合物在室溫下催化還原1夜，用硅藻土對(duì)反應(yīng)溶液進(jìn)行過濾，然后干燥。
232mg(94.7％)Rf＝0.632(BuOH∶EtOH∶H2O＝2∶1∶1)[α]D24+20.32(C＝1.08，甲醇)元素分析理論值C47.22 H5.83 N1.53測(cè)定值C47.25 H5.77 N1.78參考實(shí)施例7(從化合物(7)制備化合物(9))向220mg(240.2μmol)化合物(7)中加入8ml吡啶和8ml無(wú)水乙酸，所得混合物在室溫下攪拌3天，將反應(yīng)溶液進(jìn)行蒸餾，殘余物用柱色譜法提純(C-300、20g；甲苯∶乙酸乙酯＝1∶5)。247mg(88％)Rf＝0.833(CHCHl3∶MeOH＝10∶0.5)[α]D24+12.43(C＝1.0，CHCHCl3)元素分析理論值C49.63 H5.61 N1.20測(cè)定值C49.94 H5.61 N1.20參考實(shí)施例8(從化合物(9)制備化合物(11))將220mg(188μmol)化合物(9)溶于2ml DMF中，向所得溶液中加入24mg(240μmol)H2NNH2AcoH，在60℃下將所得混合物攪拌20分鐘，向反應(yīng)溶液中加入乙酸乙酯，用水及飽和鹽水洗滌有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，并進(jìn)行蒸餾，殘余物用柱色譜法提純(C-300、20g；丙酮∶CCl4＝1∶2)。144mg(68％)Rf＝0.58(丙酮∶CCl4＝1∶1)[α]D23+17.40(C＝0.52，CHCl3)元素分析理論值C49.07 H5.64 N1.24測(cè)定值C48.88 H5.67 N1.44參考實(shí)施例9(從化合物(11)制備化合物(13))將140mg(124μmol)化合物(11)溶于1ml二氯甲烷中，在0℃下向所得溶液中加入358l(3.57mmol)Cl3CCN和18l(0.126mmol)DBU，將所得混合物攪拌4小時(shí)。反應(yīng)溶液用柱色譜法提純(C-300、18g；丙酮∶CCl4＝1∶2)。120mg(76％)Rf＝0.367(丙酮∶CCl4＝1∶2)[α]D24+26.98(C＝0.825，CHCl3)元素分析理論值C45.35 H5.07 N2.20測(cè)定值C45.61 H5.04 N2.30
1H MNR CDCl3ppm TMS1.982，2.017，2.043，2.061，2.062，2.069，2.083，2.117，2.152，2.185，2.304(s，OCOCH3x11)1.777(1H，t，J＝12.2Hz，H-3cax)2.436(1H，dd，J＝4.6，13.4Hz，H-3ceq)3.840(s，OCH3)4.349(1H，d，J＝15.6Hz，AcOCH2-CO-)4.601(1H，d，J＝15.3Hz，AcOCH2-CO-)5.043(1H，m，H-4c)5.297(1H，d，J＝2.9Hz，H-4b)5.533(1H，t，J＝9.7Hz，H-3a)6.313(1H，d，J＝10.2Hz，NH)6.474(1H，d，J＝3.6Hz，H-1a)13C NMR CDCl3ppm93.19(C-1a)，99.63(C-2c)，101.15(C-1b)參考實(shí)施例10(從化合物(13)制備化合物(15))向1.5g活化分子篩AW-300中加入100mg(78.6μmol)化合物(13)和70mg(78.8μmol)已溶于3ml二氯甲烷中的化合物(c)，在冰-MeOH冷卻下向所得混合物加入15μl(124μmol)BF3Et2O，將所得混合物攪拌1夜，用硅藻土過濾反應(yīng)溶液，進(jìn)行蒸餾，然后用柱色譜法提純(C-300、25g；甲苯∶乙酸乙酯＝1∶1)。
90.6mg(58％)Rf＝0.229(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶1)[α]D24-11.86(C＝0.42，CHCl3)1H NMR CDC3ppm TMS0.881(6H，t，J＝7.0Hz，-CH2CH3)0.997(9H，s，-CH3x3)1.251(s，-CH2-)1.960，1.981，2.032，2.042，2.052，2.060，2.070，2.088，2.150，2.181，2.302(s，OCOCH3x11)2.434(1H，dd，J＝4.6，13.4Hz，H-4ceq)3.841(3H，s，OCH3)4.350(1H，d，J＝15.3Hz)4.598(1H，d，J＝15.3Hz，-OCH2CONH)5.041(1H，m，H-4c)5.291(1H，d，J＝2.5Hz)7.31-7.40(6H，m，芳香質(zhì)子)7.61-7.76(4H，m，芳香質(zhì)子)參考實(shí)施例11(從化合物(15)制備化合物(17))將20mg(10μmol)化合物(15)溶于1ml THF中，向所得溶液加入11.2μl(11μmol)Bu4NF，所得混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，向所得混合物中加入39.7μg(39μmol)Bu4NF，然后攪拌2天，蒸餾反應(yīng)溶液，向殘余物中加入1ml吡啶和1ml無(wú)水乙酸，在60℃下攪拌所得混合物6小時(shí)，將反應(yīng)溶液進(jìn)行蒸餾，并用柱色譜法提純(C-300、3g；CHCl3∶MeOH＝10∶0.2)。
17mg(94％)Rf＝0.70(CHCl3∶MeOH＝10∶0.25)[α]D27-5.33(C＝0.90，CHCl3)元素分析理論值(1H2O)C59.45 H8.21 N1.54測(cè)定值 C59.05 H7.95 N1.721H NMR CDCl3ppm TMS 400MHz0.880(6H，t，J＝6.5Hz，-CH2CH3x2)1.252(s，-CH2x32)1.771(1H，t，J＝12.2Hz，H-3cex)1.981，2.004，2.040，2.042，2.053，2.060，2.066，2.086，2.150，2.159，2.222，2.295(s，OCOCH3x12)2.438(1H，dd，J＝4.6，12.1Hz，H-3ceq)3.840(3H，s，OCH3)4.349(1H，d，J＝15.6Hz，-OCH2CONH)實(shí)施例1(從化合物(17)制備化合物(19))將16mg(8.3μmol)化合物(17)溶于1.5ml甲醇，向所得溶液加入1ml 0.1N的NaOCH3，在室溫下將所得混合物攪拌6小時(shí)。蒸干反應(yīng)溶液，將1ml MeOH，1ml THF和0.5ml水加到殘余物中。在室溫下將所得混合物攪拌1夜。用羧酸陽(yáng)離子交換樹脂IRC-50中和該反應(yīng)溶液，過濾，然后用交聯(lián)葡聚糖(凝膠)LH-20提純(用CHCL3∶MeOH∶H2O＝5∶3∶0.46洗脫)。10.8mg(94％)Rf＝0.25(BuOH∶EtOH∶H2O＝2∶1∶1)[α]D26-7.60(C＝0.50，CHCl3∶MeOH＝1∶1)NMR 400MHz d6DMSO-D2O(98∶2)TMS ppm0.854(6H，t，J＝6.5Hz，-CH2CH x2)1.240(64H，s，-CH2- x32)2.041(2H，t，J＝7.0Hz，H-2cer)1.934(2H，m，H-6cer)3.057(1H，t，J＝8.0Hz，H-2a)4.176(1H，d，J＝7.57Hz，H-1a)4.193(1H，d，J＝6.1Hz，H-1b)5.372(1H，dd，J＝6.8，15.3Hz，H-4cer)5.557(1H，t，J＝15.3，6.6Hz，H-5cer)參考實(shí)施例13(從化合物(4)制備化合物(6))將5ml吡啶和5ml無(wú)水乙酸加入81mg(57.2μmol)化合物(4)，在60℃下將所得混合物攪拌1夜，然后蒸干反應(yīng)溶液。
84mg(100％)Rf＝0.269(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶1)[α]D24-13.13(C＝0.515，CHCl3)元素分析理論值C64.32 H6.16 N0.96測(cè)定值C64.02 H6.00 N1.08NMR 400MHz ppm CDCl3TMS1.749，1.971，1.997，2.000，2.123，2.185(s，OCOCH3x6)1.851(1H，t，J＝12.4Hz，H-3cax)2.616(1H，dd，J＝4.6，12.7Hz，H-3ceq)4.103(1H，q，J＝10.5Hz，H-5c)5.049(1H，d，J＝2.9Hz，H-4b)5.598(1H，m，H-8c)5.779(1H，d，J＝10.2Hz，NH)7.17-7.39(3OH，m，芐基 x6)參考實(shí)施例14(從化合物(6)制備化合物(8))將232mg(159.2μmol)化合物(6)溶于50ml甲醇，向所得溶液加入150mg 10％的Pd-C，在室溫下將所得混合物進(jìn)行催化還原1夜。用硅藻土過濾該反應(yīng)溶液，然后蒸干。
141mg(97.2％)Rf＝0.632(BuOH∶EtOH∶H2O＝2∶1∶1)[α]D24+24.52(C＝0.50，甲醇)元素分析理論值C46.30 H5.94 N1.50(含1H2O)測(cè)定值C46.53 H5.82 N1.86參考實(shí)施例15(從化合物(8)制備化合物(10))將8ml吡啶和8ml無(wú)水乙酸加到130mg(141.9μmol)化合物(8)中，在室溫下將所得混合物攪拌3天。蒸餾該反應(yīng)溶液，然后用柱色譜法提純(C-300，20g；甲苯∶乙酸乙酯＝1∶5)。151mg(95％)Rf＝0.743(CHCl3∶MeOH＝10∶0.5)[α]D24+11.17(C＝0.60，CHCl3)元素分析理論值C49.36 H5.61 N1.20測(cè)定值C49.21 H5.63 N1.54參考實(shí)施例16(從化合物(10)制備化合物(12))
將140mg(120μmol)化合物(10)溶于2ml DMF，將15mg(160μmol)H2NNH2AcOH加入所得溶液中，在60℃下將所得混合物攪拌25分鐘。將乙酸乙酯加入反應(yīng)溶液，用水和飽和鹽水洗滌有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后進(jìn)行蒸餾。用柱色譜法提純殘留物(C-300，20g；丙酮∶CCl4＝1∶2)。133mg(98％)Rf＝0.549(丙酮∶CCl4＝1∶1)[α]D23+14.26(C＝0.70，CHCl3)元素分析理論值C49.07 H5.64 N1.24測(cè)定值C48.79 H5.70 N1.70參考實(shí)施例17(從化合物(12)制備化合物(14))將116mg(103μmol)化合物(12)溶于1ml二氯甲烷，向所得溶液加入358l(3.53mmol)Cl3CCN和15μl(0.11mmol)DBU，將所得混合物攪拌4小時(shí)。用柱色譜法提純反應(yīng)溶液(C-300，20g；丙酮∶CCl4＝1∶2)。121mg(92％)Rf＝0.278(丙酮∶CCl4＝1∶2)[α]D24+34.0(C＝0.25，CHCl3)元素分析理論值C44.40 H5.20 N1.16(含1.5H2O)
測(cè)定值C44.14 H4.80 N2.52NMR 400MHz CDCl3ppm TMS1.992，2.012，2.054，2.073，2.075，2.084，2.100，2.180，2.186(s，OCOCH3x11)1.683(1H，t，J＝12.4Hz，H-3cax)2.604(1H，dd，J＝4.6，12.7Hz，H-3ceq)3.869(3H，s，OCH3)4.274(1H，d，J＝15.1Hz，-OCOCH3O-)4.571(1H，d，J＝15.3Hz，-OCOCH2O-)4.513(1H，dd，J＝3.4，10.0Hz，H-2a)4.664(1H，d，J＝8.0Hz，H-1b)4.899(1H，d，J＝2.6Hz，H-4b)4.975(1H，m，H-4c)4.962(1H，dd，J＝7.8，10.0Hz，H-2b)5.081(1H，dd，J＝3.9，10.2Hz，H-3b)5.373(1H，dd，J＝2.6，9.2Hz，H-7c)5.500(1H，m，H-8c)5.553(1H，t，J＝9.7Hz，H-3m)5.779(1H，d，J＝10.0Hz，-CONH-)6.492(1H，d，J＝3.6Hz，H-1a)8.649(1H，s，＝NH)
參考實(shí)施例18(從化合物(14)制備化合物(16))將80mg(62.9μmol)化合物(14)和溶在3ml二氯乙烷中的70mg(78.8μmol)化合物(c)加入1.5g活性分子篩AW-300，用冰-MeOH冷卻30分鐘后，將15l(124μmol)BF3Et2O加入所得混合物，將所得混合物攪拌1夜。用硅藻土過濾反應(yīng)溶液，然后進(jìn)行蒸餾，用柱色譜法提純殘余物(C-300，25g；甲苯∶乙酸乙酯＝1∶1)。65.4mg(52％)Rf＝0.131(甲苯∶乙酸乙酯1∶1)[α]D24-11.43(C＝0.35，CHCl3)元素分析理論值C62.54 H8.23 N1.40測(cè)定值C62.49 H8.15 N1.59NMR 400MHz CDCl3ppm TMS0.878(3H，t，J＝5.8Hz，-CH2CH2)0.881(3H，t，J＝5.6Hz，-CH2CH2)0.993(9H，s，叔丁基)1.251(64H，s，-CH2- x32)1.961，1.992，2.013，2.043，2.073，2.075，2.083，2.095，2.175，2.183，2.245(s，OCOCH3x11)2.601(1H，dd，J＝4.6，12.9Hz，H-3eq)3.867(3H，s，OCH3)
4.275(1H，d，J＝15.3Hz，-OCH2COCH3)4.570(1H，d，J＝15.3Hz，-OCH2COCH3)4.428(1H，d，J＝8.0Hz，H-1a)4.640(1H，d，J＝8.0Hz，H-1b)4.950(1H，m，H-4c)5.500(1H，m，H-8c)5.773(1H，d，J＝10.0Hz，NH)7.30-7.42(6H，m，苯環(huán))7.60-7.70(4H，m，苯環(huán))參考實(shí)施例19(從化合物(16)制備化合物(18))將24mg(12μmol)化合物(16)溶于2ml THF，將60μl(59μmol)Bu4NF加入所得溶液，在室溫下將所得混合物攪拌1夜，蒸干反應(yīng)溶液，然后將1ml吡啶和1ml無(wú)水乙酸加入殘余物，在40℃下將所得混合物攪拌1夜。蒸餾反應(yīng)溶液并用柱色譜法提純(C-300，10g CHCl3∶MeOH＝10∶0.2)。14mg(64％)Rf＝0.48(CHCl3∶MeOH＝10∶0.25)[α]D26-9.0(C＝0.70，CHCl3)NMR 400MHz CDCl3ppm TMS0.880(6H，t，J＝7.0Hz，-CH2CH3x2)1.252(64H，s，-CH2-)
1.682(1H，t，J＝12.4Hz，H-3cax)1.991，2.006，2.037，2.041，2.076，2.081，2.090，2.108，2.179，2.184，2.239(s，OCOCH3x12)2.599(1H，dd，J＝4.6，12.6Hz)3.866(3H，s，OCH3)4.274(1H，d，J＝15.3Hz，-OCH2CO-)4.425(1H，d，J＝8.0Hz，H-1a)4.570(1H，d，J＝15.3Hz，-OCH2CO-)4.660(1H，d，J＝8.0Hz，H-1b)5.520(1H，m，H-8c)實(shí)施例2(從化合物(18)制備化合物(20))將12mg(6.6μmol)化合物(18)溶于2ml MeOH將1ml 0.1N的NaOCH3加入所得溶液，在室溫下將所得混合物攪拌1夜。蒸餾該反應(yīng)溶液，將1ml MeOH，1ml THF和0.5ml水加入殘余物，在室溫下將所得混合物攪拌1液，用羧酸陽(yáng)離子交換樹脂IRC-50中和該反應(yīng)溶液，過濾，然后用交聯(lián)葡聚糖(凝膠)LH-20提純(用CHCl3∶MeOH∶H2O＝5∶3∶0.46洗脫)。8.5mg(97％)Rf＝0.25(BuOH∶EtOH∶H2O＝2∶1∶1)[α]D26-0.94(C＝0.425，CHCl3∶MeOH＝1∶1)NMR 400MHz d-6DMSO-D2O(98∶2)TMS ppm
0.852(6H，t，J＝6.3Hz，-CH2CH3x2)1.232(64H，s，-CH2-)1.930(2H，m，H-6cer)2.026(2H，t，J＝7.3Hz，H-2cer)2.757(1H，dd，J＝5.1，11.9Hz，H-3ceq)3.041(1H，t，J＝8.5Hz，H-2a)4.159(1H，d，J＝7.8Hz，H-1a)4.200(1H，d，J＝7.8Hz，H-1b)5.343(1H，dd，J＝7.3Hz，H-4cer)5.534(1H，td，J＝14.9，6.8Hz，H-5cer)參考實(shí)施例20(從化合物(21)制備化合物(22))將1.360g(2.09mmol)化合物(21)溶于30ml吡啶，將722.8mg(2.77mmol)TrCl加入所得溶液，在50℃下將所得混合物攪拌1夜。蒸餾該反應(yīng)溶液，加入氯仿溶解殘余物并用水和飽和鹽水洗滌氯仿層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后蒸餾。用柱色譜法提純殘余物(Wakogel C-300，85g；甲苯∶乙酸乙酯＝5∶1；含Et3N)，得到909mg化合物(22)(45％)。(化合物(22)的物理性質(zhì))Rf＝0.435(甲苯∶乙酸乙酯＝5∶1)[α]D23+2.24(C＝0.75，EtOAc)實(shí)施例3(從化合物(22)制備化合物(23))
將15ml DMF，370mg(1.36mmol)Ph2tBuSiCl和183mg(2.688mmol)咪唑加入800mg(896.4μmol)化合物(22)，在室溫下將所得混合物攪拌1夜。將乙醚加入該反應(yīng)溶液，用水和飽和鹽水洗滌乙醚層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后蒸餾。用柱色譜法提純殘余物(Wakogel C-300，80g；己烷∶乙酸乙酯＝10∶1；含Et3N)，得到1.006g化合物(23)(99％)。(化合物(23)的物理性質(zhì))Rf＝0.57(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)[α]D25+8.38(C＝1.60，EtOAc)NMR 400MHz CDCl3ppm TMS0.880(6H，t，J＝5.8HZ，-CH2CH3x2)0.949(9H，s，叔丁基)1.253(62H，s，-CH2-)1.472(2H，m，H-31)1.749(2H，td，J＝4.7，6.3Hz，H-6)1.884(2H，t，J＝7.2Hz，H-21)3.146(1H，dd，J＝5.3，9.2Hz，H-1)3.298(1H，dd，J＝5.8，9.2Hz，H-1)4.270(1H，m，H-2)4.386(1H，t，J＝4.8，H-3)5.278(1H，d，J＝13.6Hz，-NH)7.192-7.605(25H，m，苯環(huán))
實(shí)施例4(從化合物(23)制備化合物(24))將1.0g(883.4μmol)化合物(23)溶于20ml二氯乙烷和1ml甲醇的混合物，將67mg(352.2μmol)TsOH加入所得溶液。在室溫下將所得混合物攪拌1小時(shí)，加入飽和NaHCO3溶液中和該反應(yīng)溶液并加入氯仿。用水和飽和鹽水洗滌氯仿層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后蒸餾。用柱色譜法提純殘余物(Wakogel C-300，25g；己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)，得到650mg化合物(24)(83％)。(化合物(24)的物理性質(zhì))Rf＝0.113(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)[α]D2513.79(C＝0.425，EtOAc)NMR 400MHz CDCl3ppm TMS0.879(6H，t，J＝6.5HZ，-CH2CH3x2)1.066(9H，s，叔丁基)1.252(62H，s，-CH2-)1.574(2H，m，H-31)1.869(2H，m，H-6)1.962(2H，m，H-2)3.621(1H，ddd，J＝2.9，7.2，11.0Hz，H-1)3.831(1H，m，H-2)3.887(1H，ddd，J＝2.6，4.4，11.1Hz，H-1)4.335(1H，t，J＝3.6，H-3)5.370(1H，dd，J＝15.2，5.5Hz，H-4)5.406(1H，dt，J＝15.2，5.6，H-5)7.34-7.66(10H，m，苯環(huán))
實(shí)施例5(從化合物(22)制備化合物(25))將10ml DMF加入280mg(313.7μmol)化合物(22)中，將82.4mg(387μmol)Me2(CMe2ph)SiCl和54mg咪唑加入所得混合物。室溫下將所得混合物攪拌1夜。將乙醚和水加入該反應(yīng)溶液，以使用乙醚進(jìn)行萃取，用水和飽和鹽水洗滌乙醚層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后進(jìn)行蒸餾，得到480mg化合物(25)。(化合物(25)的物理性質(zhì))Rf＝0.532(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)實(shí)施例6(從化合物(25)制備化合物(26))將480mg化合物(26)溶于10ml CH2Cl3和1mlCH3OH的混合物里，向所得溶液加入60mg TsOH，室溫下將所得混合物攪拌6小時(shí)。將碳酸氫鈉加入反應(yīng)溶液，然后用CHCl3萃取。用水和飽和鹽水洗滌CHCl3層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后進(jìn)行蒸餾。用乙醚傾析殘余物，然后蒸餾出乙醚溶劑。用硅膠柱提純殘余物(C-300，35g；己烷∶EtOAc＝5∶1)，得到61mg化合物(26)(20.5％)。(化合物(26)的物理性質(zhì))Rf＝0.08(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)[α]D26-4.367(C＝0.60，CHCl3)實(shí)施例7(從化合物(22)制備化合物(27))將280mg(313.7μmol)化合物(22)溶于10ml DMF，然后將130mg(387μmol)Ph2(CMePh)SiCl和54mg咪唑加入所得溶液。室溫下將所得混合物攪拌1夜，然后在40℃攪拌1夜。用乙醚萃取該反應(yīng)溶液，用水和飽和鹽水洗滌乙醚層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后進(jìn)行蒸餾。用硅膠柱提純殘余物(C-300，20g；己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)，得到410mg化合物(27)。(化合物(27)的物理性質(zhì))Rf＝0.534(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)實(shí)施例8(從化合物(27)制備化合物(28))(I)將410mg化合物(27)溶于10ml CH2Cl2和1mlCH3OH的混合物，然后將30mg TsOH加入所得溶液，室溫下將所得混合物攪拌1小時(shí)。將碳酸氫鈉加入該反應(yīng)溶液，然后用CHCl3萃取。用水和飽和鹽水洗滌有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后進(jìn)行蒸餾。用乙醚傾析殘余物，然后蒸餾出乙醚溶劑。用硅膠柱提純殘余物(C-300，20g；己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)，得到130mg化合物(28)(43.6％，以化合物(22)計(jì)算)。(化合物(28)的物理性質(zhì))Rf＝0.128(己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)[α]D26-11.11(C＝1.08，CHCl3)(II)將4ml乙醚和6ml甲酸加入60mg化合物(27)里，室溫下將所得混合物攪拌1小時(shí)。將碳酸氫鈉水溶液和乙醚加入該反應(yīng)溶液進(jìn)行萃取。用水和飽和鹽水洗滌乙醚層，用無(wú)水MgSO4干燥，然后進(jìn)行蒸餾。用硅膠柱提純殘余物(C-300，20g；己烷∶乙酸乙酯＝5∶2)，得到10mg化合物(28)(20％)。
權(quán)利要求
(1)下式表示的神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)化合物
〔式中R1表示氫原子或SiR3R4R5(其中R3和R4分別表示甲基或苯基，R5表示叔丁基或二甲基苯基甲基)，R2表示氫原子，三苯甲基，或
(式中M表示堿金屬原子)〕。
(2)一種制備神經(jīng)節(jié)苷酯相關(guān)化合物的方法，其特征在于水解下式表示的化合物
(式中T＝OCOCH3和Ac＝COCH3)以制備下式表示的化合物
(式中M表示堿金屬原子)。
(3)一種制備神經(jīng)節(jié)苷脂相關(guān)化合物的方法，其特征在于乙?；率奖硎镜幕衔?br>(式中SitBuPn2表示二苯基-叔-丁基甲硅烷基)獲得下式表示的化合物
然后水解所得化合物，得到下式表示的化合物
(式中M表示堿金屬原子)。
專利摘要
本發(fā)明提供了式(I)表示的神經(jīng)節(jié)苷酯相關(guān)化合物及其制備方法，[式中R
文檔編號(hào)C07H15/10GK87107993SQ87107993
公開日1988年6月15日 申請(qǐng)日期1987年10月19日
發(fā)明者小川智也, 沼田昌明, 杉本守, 柴山莊平, 吉樹昌治, 伊藤正善, 志島善保 申請(qǐng)人:美克德株式會(huì)社導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan