專利名稱：聚烯亞胺凝膠的光化學(xué)合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種聚胺類化合物，特別是聚烯亞胺凝膠的光化學(xué)合成方法。
背景技術(shù)：
聚胺類高分子化合物，如包括聚乙烯亞胺(Polyethyleneimine，PEI)、聚丙烯亞胺(polypropyleneimine，PPI)等的聚烯亞胺(Polyalkylene imine)，以及聚異丙烯酰胺(poly N-isopropylacrylamide)等被廣泛地用于基因轉(zhuǎn)染載體及高分子凝聚劑、分散劑等領(lǐng)域。自1995年Boussif等(O.Boussif，F(xiàn).Lezoualc’h，M.A.Zanta，M.D.Merbny，D.Scherman，B.Demeneix，J.P.Behr，Aversatile vector for gene and oligonucleotide transfer into cells in culture and invivopolyethyleneimine，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 92(1995)7297-7301)首先報道了聚乙烯亞胺可作為非病毒載體后，PEI等陽離子聚烯亞胺類聚合物成為重要的真核細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)染載體，并成為研究最為廣泛的非病毒型基因轉(zhuǎn)染載體之一。大量的體內(nèi)和體外的轉(zhuǎn)染實驗證實PEI具有顯著的基因轉(zhuǎn)染效率，在轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中能夠更好地保護(hù)DNA不受其它酶類如DNase1和DNase2的攻擊而降解。
目前國內(nèi)外已有商品化的聚烯亞胺(PEI及PPI等)，其大多為凝膠水溶液，也可冷凍真空干燥成粉末，部分可用于基因轉(zhuǎn)染。它們的光化學(xué)合成方法通常為傳統(tǒng)的化學(xué)方法，如微乳液聚合(Xin Chen et al.，The synthesis andcharacterizations of monodisperse cross-linked polymer microspheres withcarboxyl on the surface，Polymer 43(15)(2003)4147-4152)、多步化學(xué)合成等。而這些合成方法有些步驟較多并繁雜、反應(yīng)時間長；有些副反應(yīng)多且不可控制，產(chǎn)率低；有些危險性較大(如國外常采用氮丙啶單體合成聚乙烯亞胺時)。如果利用PEI、PPI等聚烯亞胺預(yù)聚體合成更高分子量的聚烯亞胺凝膠，則由于其結(jié)構(gòu)[結(jié)構(gòu)式如下，R為(CH2)m，m為≥2的整數(shù)，常見的是2～5]中不含有雙鍵或不穩(wěn)定環(huán)，所以用常規(guī)的化學(xué)法很難引發(fā)其聚合。另外，在 這些常規(guī)的化學(xué)合成工藝中，通常需要一些具有生物毒性的有機溶劑作為反應(yīng)溶劑，或添加一些化學(xué)引發(fā)劑和催化劑，如常用溶劑之一二氯甲烷(YoungHeui Kim，Jeong Hyun Park，et al.，Polyethylenimine with acid-labile linkages asa biodegradable gene carrier，Journal of Controlled Release(2004)(In press))；又如有些是從2-氨基乙醇為起始原料合成，產(chǎn)品中有毒的反應(yīng)物難以除盡，且反應(yīng)物產(chǎn)率很低(Anke von Harpe，et al.，Characterization of commerciallyavailable and synthesized polyethylenimines for gene delivery，Journal ofControlled Release(2000))。這不僅使產(chǎn)品的純化工藝復(fù)雜，嚴(yán)重地污染環(huán)境，而且影響其作為載體在生物醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用的安全性。
另一方面，由于同一類型載體的基因轉(zhuǎn)染效果及安全性等方面可因其理化性質(zhì)不同而有差異，如載體的分子量，分子量的分布，顆粒粒徑大小及其分布等。載體納米粒子在體內(nèi)及體外的吸收對粒徑大小具有依賴性，控制載體納米凝膠的產(chǎn)品在一定的尺度具有窄粒徑分布，有助于提高轉(zhuǎn)染效率，提高產(chǎn)品的利用率、減少用量、減小細(xì)胞毒性?，F(xiàn)有聚烯亞胺合成技術(shù)還不太完善，且所得聚烯亞胺的分子量及粒徑大小不易控制，分布范圍較寬，粒徑大小十分不均勻，分散性差，如PEl分子量有0.6～25kDa不等，但分布范圍較寬，其PCS(photon correlation spectroscopy，中文譯名為光子相關(guān)光譜)結(jié)果提示為多峰分布，粒徑分布較寬(如圖1所示)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是解決上述問題，提供一種聚烯亞胺(凝膠)的光化學(xué)合成方法。
本發(fā)明的目的通過下列技術(shù)方案來實現(xiàn)一種聚烯亞胺凝膠的光化學(xué)合成方法，其將聚烯亞胺預(yù)聚物在堿性條件下，采用抽氫劑進(jìn)行紫外光照合成反應(yīng)。
其中，本發(fā)明所說的聚烯亞胺預(yù)聚物是指結(jié)構(gòu)式如上所示的鏈狀或樹枝分叉狀的不含有雙鍵或不穩(wěn)定環(huán)的現(xiàn)有聚烯亞胺產(chǎn)品，其中結(jié)構(gòu)式中R為(CH2)m，m為≥2的整數(shù)，較佳的是2～5，由此根據(jù)本發(fā)明方法合成的聚烯亞胺納米凝膠是指聚乙烯亞胺、聚丙烯亞胺、聚丁烯亞胺或聚戊烯亞胺等，也可以根據(jù)需要選用上述兩種或兩種以上預(yù)聚物合成其共聚物。本發(fā)明重點研究可作為基因轉(zhuǎn)染載體的聚乙烯亞胺或聚丙烯亞胺凝膠的合成，故n優(yōu)選2或3，即選用聚乙烯亞胺或聚丙烯亞胺預(yù)聚物。
該聚烯亞胺預(yù)聚物分子量相對較低，通常不超過50kDa，目前作為載體的聚乙烯亞胺預(yù)聚物的分子量一般＜25kDa；本發(fā)明中聚烯亞胺預(yù)聚物通常選用其凝膠水溶液；該聚烯亞胺預(yù)聚物在反應(yīng)體系中的重量濃度為0.05-16％，較佳為1-7％。
本發(fā)明在聚烯亞胺預(yù)聚物溶液中還可以加有成核劑，所說的成核劑是指能與聚烯亞胺上的N發(fā)生絡(luò)合，具有可以控制粒度大小并提高聚烯亞胺分散性，從而得到大小更均勻且儲存穩(wěn)定性高的納米凝膠的物質(zhì)。已知化學(xué)領(lǐng)域中能與N絡(luò)合的物質(zhì)，如過渡金屬鹽等均可作為本發(fā)明成核劑，例如鐵、銅、稀土元素等的金屬鹽；優(yōu)選羧酸鐵、氯化亞鐵、氯化銅、氯化亞銅等。
加入的成核劑在反應(yīng)體系中的濃度較佳地為0.07-20mg/ml，更佳為1.5-3.5mg/ml。
而所說的堿性條件是指pH≥7，較佳的是7.6～11，更佳的是8～10。
本發(fā)明中所說的抽氫劑是指在紫外光光照下產(chǎn)生羥基等自由基可以從一些有機物分子上抽取C、N或S等原子上連接的H原子，從而得到新的自由基而引發(fā)一系列的交聯(lián)反應(yīng)的一類分子。其可為現(xiàn)有紫外光合成反應(yīng)中常用的各種光引發(fā)劑，如過氧化物等，本發(fā)明的抽氫劑優(yōu)選過氧化氫，其在反應(yīng)體系中的體積濃度為0.02-3％，較佳為0.05-1％，更佳的是0.1～0.5％。
基于如圖3所示的本發(fā)明合成體系的紫外分光光度吸收光譜圖，本發(fā)明選用的紫外光波長為200～260nm，本發(fā)明選擇能高效產(chǎn)生其中253.7nm短波長紫外光的低壓汞燈為輻照源，其較佳的光照強度為＞0、≤18mw/cm2，更佳的是3～18mw/cm2，光照時間一般不少于5分鐘，最長不超過3小時；本發(fā)明為便于觀察及控制反應(yīng)條件，通常選用光照強度18mw/cm2，光照時間1小時左右。
同大多數(shù)高分子有機反應(yīng)一樣，本發(fā)明合成過程中采用攪拌，優(yōu)選采用140轉(zhuǎn)/分鐘左右的機械攪拌，由于本發(fā)明中需攪拌物質(zhì)流動性較好，所以根據(jù)常規(guī)采用越高的攪拌速度越好，一般為140～500轉(zhuǎn)/分鐘，為便于觀察及控制反應(yīng)條件，本發(fā)明采用140轉(zhuǎn)/分鐘左右的機械攪拌。
而本發(fā)明中所說的紫外光照合成反應(yīng)，同現(xiàn)有紫外光合成反應(yīng)一樣，在除氧條件下進(jìn)行，本發(fā)明采用最簡易的氮氣鼓泡法。
更佳地，尤其為得到更好的基因轉(zhuǎn)染載體，本發(fā)明隨后還包括純化步驟即將上述光化學(xué)合成方法制得的聚烯亞胺納米凝膠先用0.45μm針式濾器純化，再用分子量為10000-12000的透析袋純化去除未經(jīng)反應(yīng)的成分及其它雜質(zhì)。當(dāng)然，也可以根據(jù)不同產(chǎn)品要求，采用其它的過濾、萃取等提純方法。
利用上述本發(fā)明光化學(xué)合成方法可制備粒徑≥20nm的聚烯亞胺凝膠、通常為20-600nm，更佳為30-200nm的聚烯亞胺納米凝膠。以聚乙烯亞胺為例，其PCS結(jié)果為單峰分布，粒徑分布窄，粒徑均勻并分散性較好，多分散系數(shù)(Poly.Index)通常為0.100-0.700；而且其核磁共振碳譜如圖4所示，說明合成的PEI納米凝膠中含有C＝N鍵(δ166.35，164.92)，紅外波譜中m＝1651.92處的弱中峰也證明了C＝N鍵的存在，和反應(yīng)前預(yù)聚體所含有的官能團不一樣。
本發(fā)明采用短波長的紫外光引發(fā)較低分子量的聚烯亞胺預(yù)聚體產(chǎn)生自由基，進(jìn)一步聚合得到高分子量的聚烯亞胺納米凝膠。在聚烯亞胺預(yù)聚體中不含有雙鍵或不穩(wěn)定環(huán)，用常規(guī)的化學(xué)法很難引發(fā)其聚合，而本發(fā)明光化學(xué)合成法是利用抽氫劑在253.7nm波長下產(chǎn)生的羥基自由基抽取預(yù)聚體上的H原子從而使其發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，生成高分子量的分叉狀PEI目標(biāo)產(chǎn)物，另外還可使用成核劑與聚烯亞胺上的N發(fā)生絡(luò)合得到大小更均勻的納米凝膠。以PEI為例，其反應(yīng)過程如圖2所示。
本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于第一、本發(fā)明光化學(xué)合成方法通過紫外光輻照引發(fā)不含雙鍵和不穩(wěn)定環(huán)的物質(zhì)的聚合，不需要添加引發(fā)劑及表面活性劑；具體而言，其使抽氫劑在紫外光照射下分解產(chǎn)生羥基自由基，抽取PEI預(yù)聚體上的氫原子使預(yù)聚體發(fā)生交聯(lián)，最終得到更高分子量的PEI納米凝膠，而PEI預(yù)聚體本身在該波長下是很難發(fā)生光降解的。另外，反應(yīng)在水溶液中進(jìn)行，可以提高其體內(nèi)試驗的安全性；而紫外光可以使大腸菌、紅痢菌、傷寒菌、葡萄球菌、結(jié)核菌、枯草菌、谷物霉菌等細(xì)菌和病毒死亡，保證了樣品的醫(yī)用質(zhì)量。第二、本發(fā)明光化學(xué)合成方法工藝簡單，反應(yīng)時間快，一般僅需5分鐘～1小時，所用試劑生物毒性小，有利于環(huán)保。第三、本發(fā)明光化學(xué)合成方法得到了接近球狀的高分子納米凝膠，并能重復(fù)制備要求粒徑大小的納米凝膠，控制光照的時間即可控制反應(yīng)的時間；由此制得的PEI納米凝膠基因載體粒徑可控，粒徑分布窄，表面呈分叉狀，分散性好，穩(wěn)定性好，從而降低了細(xì)胞毒性和免疫原性，提高了其作為載體在生物醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用的安全性及轉(zhuǎn)染效率。


圖1為現(xiàn)有PEI預(yù)聚體的PCS檢測結(jié)果。
圖2為本發(fā)明采用PEI預(yù)聚體光化學(xué)合成反應(yīng)過程示意圖。
圖3為本發(fā)明各種合成體系的紫外分光光度吸收光譜圖；其中，A圖為現(xiàn)有PEI預(yù)聚體凝膠水溶液；B圖為PEI預(yù)聚體凝膠水溶液加入成核劑后的反應(yīng)體系；C圖為抽氫劑雙氧水的反應(yīng)體系。
圖4為本發(fā)明聚乙烯亞胺納米凝膠的核磁共振碳(C13)譜圖。
圖5為本發(fā)明實施例1中3個重復(fù)樣品的PCS檢測結(jié)果(A圖為1號樣品，B圖為2號樣品，C圖為3號樣品)。
圖6為小劑量聚乙烯亞胺納米凝膠對小鼠肝臟、腎臟和心臟超氧化物歧化酶(SOD)活力的影響圖表；圖7為小劑量聚乙烯亞胺納米凝膠對小鼠肝臟、腎臟和心臟丙二醛(MDA)含量的影響圖表；在圖6～7中，生理鹽水(NS)作為陰性(空白)對照，PEI預(yù)聚體作為陽性對照，其中▲P＜0.05(vs NS)，*P＜0.05(vs PEI預(yù)聚體)，n＝6。
具體實施例方式
下面以聚乙烯亞胺的合成為例，用實施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明光化學(xué)合成方法的操作步驟及其效果，但本發(fā)明并不僅限于此。
其中，PEI預(yù)聚體(Polyethyleneimine)購自日本東京化成工業(yè)株式會社，原液是30％(w/w，重量百分比)水凝膠溶液；水為二蒸水；其余試劑為常規(guī)市售AR試劑。
用英國MARLVEN公司Zetasizer 3000HS型激光粒度散射儀，對本發(fā)明PEI納米凝膠粒子的粒徑進(jìn)行PCS表征，測試時的溫度為25℃，入射激光的波長為633nm，其偏振方向與散射檢測光平面垂直。并使用Nanoscope IIIaAFM原子力顯微鏡(Digital Instruments，Santa Barbara，CA)和LEO1530VP型掃描電子顯微鏡(SEM)對純化后的納米粒子的形貌進(jìn)行表征。
實施例1在50ml石英燒瓶中，加入下列各種組分組成反應(yīng)體系，每種組分的濃度依次為PEI預(yù)聚物的濃度為1.15％(w/w)、羧酸鐵作為成核劑的濃度為1.54mg/ml，加入極少量稀鹽酸溶液(0.5M)調(diào)節(jié)pH值至9.5?？刂茢嚢杷俣葹?40轉(zhuǎn)/分鐘左右，通氮氣除氧30分鐘后，加入3％的雙氧水(過氧化氫)，使其在反應(yīng)液中的濃度為0.057％(v/v)。在連續(xù)通氮氣(氮氣流量80ml/min)的情況下，用紫外低壓汞燈，以光照強度為18mw/cm2光照1h(小時)引發(fā)反應(yīng)。控制如上所述的反應(yīng)條件進(jìn)行三次重復(fù)試驗得到1號、2號、3號三個樣品，對所得三次重復(fù)樣品用0.45μm針式濾器(ANPEL產(chǎn)品)和分子量10000-12000道爾頓的透析袋(華美生物工程公司)純化樣品。
用上述激光粒度散射儀PCS法測量三個納米凝膠樣品的粒徑各三次，結(jié)果示單峰分布，粒徑分布窄(如圖5所示)，所得平均值分別為1號，91.9nm；2號，79.4nm；3號，89.9nm，它們的多分散系數(shù)依次為0.303、0.6、0.439，平均粒徑大小約為87nm。
對樣品進(jìn)行冷凍真空干燥后用掃描電子顯微鏡(SEM)和原子力顯微鏡(AFM)表征其形狀為球形結(jié)構(gòu)，整體分散性較好，局部有團聚現(xiàn)象。作為對照，將現(xiàn)有的上述PEI預(yù)聚體同樣條件下進(jìn)行PCS檢測，結(jié)果如圖1所示，多峰分布，粒徑分布寬，大小十分不均勻，分散性差。
實施例2PEI預(yù)聚物濃度為4.8％(w/w)、氯化亞鐵濃度為3.21mg/ml、加入極少量稀鹽酸溶液調(diào)節(jié)溶液的pH值至10.0。加入3％的過氧化氫，使其在反應(yīng)液中的濃度為0.12％(v/v)，余同實施例1。
將純化后的聚乙烯亞胺納米凝膠樣品用激光粒度散射儀PCS法測量，為單峰分布(圖未示)，該聚乙烯亞胺納米凝膠的粒徑平均值為172.9nm，多分散系數(shù)為0.355。在4℃條件下放置21天后再檢測，其粒徑的平均值為171.7nm，多分散系數(shù)為0.415。結(jié)果表明聚乙烯亞胺納米凝膠樣品在放置過程中基本保持穩(wěn)定，粒徑?jīng)]有發(fā)生明顯變化，具有一定的貯存穩(wěn)定性。經(jīng)真空干燥的聚乙烯亞胺納米凝膠樣品以掃描電子顯微鏡測試該樣品的形狀也同實施例1近于球形，分散性好。
實施例3PEI濃度為1.15％(w/w)、羧酸鐵濃度為1.54mg/ml、加入稀鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至8.0。控制攪拌速度為140轉(zhuǎn)/min左右，通氮氣除氧30min后，加入3％的過氧化氫，使其在反應(yīng)液中的濃度為0.11％(v/v)。在連續(xù)通入氮氣(氮氣流量80ml/min)的條件下，紫外光光照強度為18mw/cm2光照1h引發(fā)反應(yīng)?？刂迫缟纤龅姆磻?yīng)條件每隔一個月進(jìn)行一次重復(fù)試驗，得到4號、5號、6號三個樣品，樣品經(jīng)0.45um針式濾器過濾和三次透析純化后，經(jīng)PCS測量三個納米凝膠樣品的粒徑各三次，結(jié)果示單峰分布，粒徑分布窄(圖未示)，所得平均值分別為4號，136.5nm；5號，146.4nm；6號，150.4nm，它們的多分散系數(shù)依次為0.300、0.437和0.408。
實施例4每種組分的濃度依次為PEI濃度為6.3％(w/w)，不添加成核劑，加入極少量稀鹽酸溶液(0.5M)調(diào)節(jié)pH值＝10.6，在通氮除氧30min后加入過氧化氫使其在反應(yīng)液中的濃度為1.36％(v/v)，控制紫外光光照強度為18mw/cm2，光照反應(yīng)時間為3小時，余同實施例1。純化后用PCS測得結(jié)果示單峰分布，納米凝膠的粒徑為38nm。
實施例5PEI預(yù)聚物濃度為6％(w/w)、成核劑羧酸鐵的濃度為0.1mg/ml、調(diào)節(jié)溶液的pH值至10.0，余同實施例1，用PCS測得結(jié)果示單峰分布，所得納米凝膠的粒徑為341nm。
實施例6PEI濃度為16％(w/w)，成核劑濃度為20mg/ml，調(diào)節(jié)pH值＝9.5，雙氧水在反應(yīng)液中的濃度為2.8％(v/v)，余同實施例1。純化后，用PCS測得結(jié)果示單峰分布，納米凝膠的粒徑為106nm。
實施例7PEI濃度為3.7％(w/w)，成核劑氯化銅濃度為0.7mg/ml，調(diào)節(jié)pH值＝10.6，雙氧水在反應(yīng)液中的濃度為0.05％(v/v)，余同實施例1。純化后用PCS測得結(jié)果示單峰分布，納米凝膠的粒徑為590nm。
實施例8PEI濃度為4.8％(w/w)，成核劑濃度為3.2mg/ml，調(diào)節(jié)pH值＝10.6，加入過氧化鈉，使其在反應(yīng)液中的濃度為0.13％(v/v)，控制紫外光光照強度為3mw/cm2，光照0.5小時，余同實施例1。純化后，用PCS測得結(jié)果示單峰分布，納米凝膠的粒徑為200nm。
實施例9PEI預(yù)聚物濃度為0.05％(w/w)、成核劑濃度為0.56mg/ml、調(diào)節(jié)溶液的pH值至8，加入3％的過氧化氫，使其在反應(yīng)液中的濃度為0.02％(v/v)，紫外光光照強度為18mw/cm2，光照5分鐘引發(fā)反應(yīng)，余同實施例1。純化后的聚乙烯亞胺納米凝膠用PCS測得結(jié)果為單峰分布，其粒徑平均值為256nm。
實施例10PEI預(yù)聚物濃度為3.7％(w/w)、成核劑氯化亞鐵濃度為0.07mg/ml、調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.6，加入3％的過氧化氫，使其在反應(yīng)液中的濃度為0.037％(v/v)，紫外光光照強度為18mw/cm2，光照0.5小時引發(fā)反應(yīng)，余同實施例1。純化后的聚乙烯亞胺納米凝膠用PCS測得結(jié)果示單峰分布，其粒徑平均值為325nm。
應(yīng)用實施例1 PEI納米凝膠作為腫瘤治療基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的安全性在徐州醫(yī)學(xué)院的協(xié)作下，我們對本發(fā)明制備得到的高分子量PEI納米凝膠作為腫瘤治療基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的安全性進(jìn)行了驗證。
給小鼠按5mg/kg體重的劑量，1次/天，連續(xù)3天注射實施例1～4制備得到的各種粒徑的PEI納米凝膠，同劑量的生理鹽水(NS)作為陰性(空白)對照，PEI預(yù)聚體作為陽性對照，采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件LSD方法對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析及差異作統(tǒng)計學(xué)比較，結(jié)果如圖6、7所示，提示本發(fā)明各種粒徑的PEI納米凝膠對小鼠肝臟、腎臟和心臟超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量無顯著影響，但PEI預(yù)聚體降低了小鼠肝臟、腎臟和心臟SOD活力，并顯著提高M(jìn)DA含量，這說明預(yù)聚體對小鼠重要臟器有氧化性損傷。以上實驗結(jié)果證實本發(fā)明的光化學(xué)合成方法制得的PEI納米凝膠比現(xiàn)有PEI產(chǎn)品的細(xì)胞毒性更低，作為載體在生物醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用的安全性更高。
權(quán)利要求
1.一種聚烯亞胺的光化學(xué)合成方法，其將聚烯亞胺預(yù)聚物在堿性條件下，采用抽氫劑進(jìn)行紫外光照合成反應(yīng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光化學(xué)合成方法，其特征在于該聚烯亞胺預(yù)聚物是指聚乙烯亞胺或聚丙烯亞胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光化學(xué)合成方法，其特征在于該聚烯亞胺預(yù)聚物在反應(yīng)體系中的重量百分比為0.05-16％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光化學(xué)合成方法，其特征在于該聚烯亞胺預(yù)聚物中還加入成核劑，其在反應(yīng)體系中的濃度為0.07-20mg/ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的光化學(xué)合成方法，其特征在于該成核劑為過渡金屬鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的光化學(xué)合成方法，其特征在于該過渡金屬鹽選自氯化亞鐵、羧酸鐵和氯化銅中的一種或幾種，其在反應(yīng)體系中的濃度為1.5-3.5mg/ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光化學(xué)合成方法，其特征在于該堿性環(huán)境是指pH7.6～11，該抽氫劑為過氧化物，該紫外光波長為200～260nm。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的光化學(xué)合成方法，其特征在于該過氧化物為過氧化氫，其在反應(yīng)體系中的體積濃度為0.02-3％。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的光化學(xué)合成方法，其特征在于該紫外光波長為253.7nm，其光照強度為＞0、≤18mw/cm2，光照時間為5分鐘至3小時。
10.根據(jù)權(quán)利要求1～9任一項所述的光化學(xué)合成方法，其特征在于其隨后還包括純化步驟將權(quán)利要求1～9制得的聚烯亞胺先用0.45μm針式濾器純化，再用截留分子量10000-12000道爾頓的透析袋純化。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種聚胺類化合物，特別是聚烯亞胺，包括聚乙烯亞胺或聚丙烯亞胺等凝膠的光化學(xué)合成方法，其將聚烯亞胺預(yù)聚物在堿性條件下，采用抽氫劑進(jìn)行紫外光照合成反應(yīng)。本發(fā)明光化學(xué)合成方法工藝簡單，反應(yīng)時間快，所用試劑生物毒性小，有利于環(huán)保，而且可按需控制反應(yīng)起始及結(jié)束；從而本發(fā)明光化學(xué)合成方法可制得聚烯亞胺的納米凝膠，其顆粒粒徑可控，粒徑分布窄，比較均勻，由此降低了細(xì)胞毒性和免疫原性，提高了其可作為載體在生物醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用的安全性及轉(zhuǎn)染效率。
文檔編號C08J3/28GK1743359SQ20051002647
公開日2006年3月8日 申請日期2005年6月3日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月3日
發(fā)明者姚思德, 徐冬梅, 劉永彪, 喬向利, 余家會, 孫漢文, 盛康龍 申請人:中國科學(xué)院上海應(yīng)用物理研究所