專利名稱：一種耐酸堿復(fù)合生物多糖微球制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種耐酸堿復(fù)合生物多糖微球制備方法背景技術(shù)耐酸堿的復(fù)合生物多糖微球是指以復(fù)合生物多糖為材料制備的表面連接有特殊功能基團(tuán)的耐酸堿的高分子微球。
高分子微球的制備方法，國內(nèi)外研究者十分重視。日本專利2554835申請(qǐng)了一種油水乳液微球的制備方法；日本專利公開02-286729申請(qǐng)了一種乙烯基芳香族化合物磁性微球的制備方法；日本專利公開01-133304申請(qǐng)了一種聚硅氧烷磁性微球及其應(yīng)用；日本專利公開62-244438申請(qǐng)了一種吸附不飽和脂肪酸形成的磁性微球及其使用；日本專利公開61-174229申請(qǐng)了一種磁性熱塑性樹脂微球制備；美國專利申請(qǐng)20040126902申請(qǐng)了含有硅和鋁的化合物制備的磁性微球及其用途；中國專利CN1485362、中國專利CN1328083、中國專利CN1290524等申請(qǐng)了殼聚糖微球制備方法及其用途；中國專利CN1314430、中國專利CN1293952等申請(qǐng)了殼聚糖與聚丙烯酸或絲心蛋白等復(fù)配制備高分子微球的方法和用途；中國專利CN1275619、中國專利CN1234444等申請(qǐng)了卡拉膠與葡聚甘露聚糖或魔芋多糖復(fù)配的固定化細(xì)胞載體的制備及其應(yīng)用；上述專利所制得的微球基本上是以乙烯基芳香族化合物、聚丙烯酸等化學(xué)合成材料和天然生物材料殼聚糖、卡拉膠與葡聚甘露聚糖或魔芋多糖等制成，然而上述材料所制得的微球耐酸性較差，溶脹體積較大，限制了其在固定化酶中的應(yīng)用，且成本也較高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述缺陷而提供一種耐酸堿性優(yōu)良，溶脹體積小，成本低的耐酸堿復(fù)合生物多糖微球制備方法。
本發(fā)明一種耐酸堿復(fù)合生物多糖微球的制備方法如下1)選用下述體積份數(shù)的原料復(fù)合生物多糖與殼聚糖復(fù)合水溶液 40～60份；冰醋酸 0.5～1.5份；石油醚與液體石蠟混合溶液 50～70份；
戊二醛水溶液 1.1～2.7份；對(duì)氨基苯磺酸水溶液 40～60份；所述復(fù)合生物多糖為羅望子膠或沙蒿膠；所述的羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中羅望子膠與殼聚糖濃度為0.06-0.08克/毫升，其中羅望子膠與殼聚糖的重量比為2～3∶1；所述沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中沙蒿膠與殼聚糖濃度為0.012～0.02克/毫升，其中沙蒿膠與殼聚糖的重量比為1∶2.5～8；所述的戊二醛水溶液體積濃度為50％；所述的對(duì)氨基苯磺酸水溶液濃度為0.01～0.02克/毫升。
2)在復(fù)合生物多糖與殼聚糖復(fù)合水溶液40～60份中加入冰醋酸0.5～1.5份，攪拌，使多糖充分溶解；3)在500～700轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下，10～15分鐘內(nèi)逐滴將上述多糖復(fù)合溶液加入到石油醚與液體石蠟混合溶液50～70份中；所述石油醚和液體石蠟體積比為7～9∶5～3；15～25分鐘后，加入重量濃度為50％的戊二醛水溶液0.5～1.5份，在500～700轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下反應(yīng)1～2小時(shí)；4)去除上層液體后，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡5～10分鐘、抽濾，制得復(fù)合生物多糖復(fù)合微球；5)在上述制得的復(fù)合生物多糖復(fù)合微球中加入重量濃度為1～2％的對(duì)氨基苯磺酸水溶液40～60份，在100～200轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15～25分鐘，加入50％戊二醛水溶液0.6～1.2份，在100～200轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15～25分鐘，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡5～10分鐘，40～60℃條件下真空干燥，直至抽干，即得表面功能基為-OSO2(C6H4)N＝C(CH2)3CHO復(fù)合生物多糖復(fù)合微球。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明耐酸堿復(fù)合生物多糖微球，微球表面功能基為-OSO2(C6H4)N＝C(CH2)3CHO，微球耐酸堿性強(qiáng)，在pH1-11環(huán)境下穩(wěn)定，使用范圍寬，溶脹系數(shù)小、無毒、生物相容性好，具有良好的操作性能、生產(chǎn)性能和反應(yīng)特性；可以作為酶或其它生物活性分子的載體。
2、本發(fā)明羅望子膠和沙蒿膠均為植物種子多糖，資源豐富，降低了成本。


圖1是本發(fā)明沙蒿膠復(fù)合生物多糖微球形貌。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1在羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液40份中加入冰醋酸0.5份，攪拌，使羅望子膠與殼聚糖充分溶解；所述的羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中羅望子膠與殼聚糖濃度為0.06克/毫升，其中羅望子膠與殼聚糖的重量比為2∶1；在500轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下，10分鐘內(nèi)逐滴將上述羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液加入到石油醚與液體石蠟混合溶液50份中，所述石油醚和液體石蠟體積比為7∶5；15分鐘后加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液0.5份，在500轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下反應(yīng)1小時(shí)；去除上層液體，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡5分鐘、抽濾，制得羅望子膠復(fù)合微球；在上述制得的羅望子膠復(fù)合微球中加入濃度為0.01克/毫升的對(duì)氨基苯磺酸水溶液40份，在100轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15分鐘后，加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液0.6份，在100轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15分鐘，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡5分鐘、抽濾，40℃條件下真空干燥，直至抽干，制得表面功能基為-OSO2(C6H4)N＝C(CH2)3CHO羅望子膠復(fù)合微球。
實(shí)施例2在羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液60份中加入冰醋酸1.5份，攪拌，使羅望子膠與殼聚糖充分溶解；所述的羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中羅望子膠與殼聚糖濃度為0.08克/毫升，其中羅望子膠與殼聚糖的重量比為3∶1；在700轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下，20分鐘內(nèi)逐滴將上述羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液加入到石油醚與液體石蠟混合溶液70份中，所述石油醚和液體石蠟體積比為3∶1；25分鐘后加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液1.5份，在700轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下反應(yīng)2小時(shí)；去除上層液體，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡15分鐘、抽濾，制得羅望子膠復(fù)合微球；在上述制得的羅望子膠復(fù)合微球中加入濃度為0.02克/毫升的對(duì)氨基苯磺酸水溶液60份，在100轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15分鐘后，加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液0.6份，在200轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15分鐘，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡15分鐘、抽濾，60℃條件下真空干燥，直至抽干，制得表面功能基為-OSO2(C6H4)N＝C(CH2)3CHO羅望子膠復(fù)合微球。
實(shí)施例3
在羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液50份中加入冰醋酸1.0份，攪拌，使羅望子膠與殼聚糖充分溶解；所述的羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中羅望子膠與殼聚糖濃度為0.07克/毫升，其中羅望子膠與殼聚糖的重量比為2.5∶1；在600轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下，15分鐘內(nèi)逐滴將上述羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液加入到石油醚與液體石蠟混合溶液60份中，所述石油醚和液體石蠟體積比為2∶1；20分鐘后加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液1份，在600轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下反應(yīng)1.5小時(shí)；去除上層液體，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡10分鐘、抽濾，制得羅望子膠復(fù)合微球；在上述制得的羅望子膠復(fù)合微球中加入濃度為0.015克/毫升的對(duì)氨基苯磺酸水溶液50份，在150轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌20分鐘后，加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液0.9份，在150轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌20分鐘，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡10分鐘、抽濾，50℃條件下真空干燥，直至抽干，制得表面功能基為-OSO2(C6H4)N＝C(CH2)3CHO羅望子膠復(fù)合微球。
實(shí)施例4在沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液40份中加入冰醋酸0.5份，攪拌，使沙蒿膠與殼聚糖充分溶解；所述沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中沙蒿膠與殼聚糖濃度為0.012克/毫升，其中沙蒿膠與殼聚糖的重量比為1∶2.5；在500轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下，10分鐘內(nèi)逐滴將上述沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液加入到石油醚與液體石蠟混合溶液50份中，所述石油醚和液體石蠟體積比為7∶5；15分鐘后加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液0.5份，在500轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下反應(yīng)1小時(shí)；去除上層液體，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡5分鐘、抽濾，制得沙蒿膠復(fù)合微球；在上述制得的沙蒿膠復(fù)合微球中加入濃度為0.01克/毫升的對(duì)氨基苯磺酸水溶液40份，在100轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15分鐘，加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液0.6份，在100轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15分鐘，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡5分鐘、抽濾，40℃條件下真空干燥，直至抽干，制得表面功能基為-OSO2(C6H4)N＝C(CH2)3CHO沙蒿膠復(fù)合微球?qū)嵤├?在沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液60份中加入冰醋酸1.5份，攪拌，使沙蒿膠與殼聚糖充分溶解；所述沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中沙蒿膠與殼聚糖濃度為0.02克/毫升，其中沙蒿膠與殼聚糖的重量比為1∶8；在700轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下，20分鐘內(nèi)逐滴將上述沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液加入到石油醚與液體石蠟混合溶液70份中；所述石油醚和液體石蠟體積比為3∶1；25分鐘后加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液1.5份，在700轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下反應(yīng)2小時(shí)；去除上層液體，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡15分鐘、抽濾，制得沙蒿膠復(fù)合微球；在上述制得的沙蒿膠復(fù)合微球中加入濃度為0.02克/毫升的對(duì)氨基苯磺酸水溶液60份，在100轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15分鐘，加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液0.6份，在200轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15分鐘，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡15分鐘、抽濾，60℃條件下真空干燥，直至抽干，制得表面功能基為-OSO2(C6H4)N＝C(CH2)3CHO沙蒿膠復(fù)合微球。
實(shí)施例6在沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液50份中加入冰醋酸1.0份，攪拌，使沙蒿膠與殼聚糖充分溶解；所述沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中沙蒿膠與殼聚糖濃度為0.016克/毫升，其中沙蒿膠與殼聚糖的重量比為1∶5；在600轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下，15分鐘內(nèi)逐滴將上述沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液加入到石油醚與液體石蠟混合溶液60份中；所述石油醚和液體石蠟體積比為2∶1；20分鐘后加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液1份，在600轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下反應(yīng)1.5小時(shí)；去除上層液體，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡10分鐘、抽濾，制得沙蒿膠復(fù)合微球；在上述制得的沙蒿膠復(fù)合微球中加入濃度為0.015克/毫升的對(duì)氨基苯磺酸水溶液50份，在150轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌20分鐘，加入體積濃度為50％的戊二醛水溶液0.9份，在150轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌20分鐘，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡10分鐘、抽濾，50℃條件下真空干燥，直至抽干，制得表面功能基為-OSO2(C6H4)N＝C(CH2)3CHO沙蒿膠復(fù)合微球。
利用掃描電鏡、紅外光譜等表征耐酸堿的復(fù)合生物多糖微球，在室溫下測(cè)定溶脹系數(shù)，在不同pH值下測(cè)定其耐酸耐堿性。掃描電鏡觀察證實(shí)，磁性微球體呈表面多孔蜂窩狀結(jié)構(gòu)，微球形態(tài)均一，顆粒直徑在1.6×102-5.1×102μm范圍內(nèi)；溶脹系數(shù)為2.34-2.73ml/g，在pH1-11下穩(wěn)定。
權(quán)利要求
1.一種耐酸堿復(fù)合生物多糖微球制備方法，其步驟如下1)選用下述體積份數(shù)的原料復(fù)合生物多糖與殼聚糖復(fù)合水溶液 40～60份；冰醋酸 0.5～1.5份；石油醚與液體石蠟混合溶液 50～70份；戊二醛水溶液 1.1～2.7份；對(duì)氨基苯磺酸水溶液 40～60份；所述復(fù)合生物多糖為羅望子膠或沙蒿膠；所述的羅望子膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中羅望子膠與殼聚糖濃度為0.06-0.08克/毫升，其中羅望子膠與殼聚糖的重量比為2～3∶1；所述沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合水溶液中沙蒿膠與殼聚糖濃度為0.012～0.02克/毫升，其中沙蒿膠與殼聚糖的重量比為1∶2.5～8；所述的戊二醛水溶液體積濃度為50％；所述的對(duì)氨基苯磺酸水溶液濃度為0.01～0.02克/毫升。2)在復(fù)合生物多糖與殼聚糖復(fù)合水溶液40～60份中加入冰醋酸0.5～1.5份，攪拌，使多糖充分溶解；3)在500～700轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下，10～15分鐘內(nèi)逐滴將上述多糖復(fù)合溶液加入到石油醚與液體石蠟混合溶液50～70份中；所述石油醚和液體石蠟體積比為7～9∶5～3；15～25分鐘后，加入重量濃度為50％的戊二醛水溶液0.5～1.5份，在500～700轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下反應(yīng)1～2小時(shí)；4)去除上層液體后，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡5～10分鐘、抽濾，制得復(fù)合生物多糖復(fù)合微球；5)在上述制得的復(fù)合生物多糖復(fù)合微球中加入重量濃度為1～2％的對(duì)氨基苯磺酸水溶液40～60份，在100～200轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15～25分鐘，加入50％戊二醛水溶液0.6～1.2份，在100～200轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下攪拌15～25分鐘，依次用石油醚、丙酮、無水乙醇三種溶劑各浸泡5～10分鐘，40～60℃條件下真空干燥，直至抽干，即得表面功能基為-OSO2(C6h4)N＝C(CH2)3CHO復(fù)合生物多糖復(fù)合微球。
全文摘要
一種耐酸堿復(fù)合生物多糖微球制備方法；該方法以生物多糖羅望子膠與殼聚糖、沙蒿膠與殼聚糖復(fù)合物為原料，戊二醛為交聯(lián)劑，進(jìn)行共聚反應(yīng)。用對(duì)氨基苯磺酸磺?；嗵橇u基，然后與戊二醛脫水縮合制備了耐酸堿性較強(qiáng)的復(fù)合生物多糖微球。微球呈表面多孔蜂窩狀結(jié)構(gòu)，粒徑為1.6×10
文檔編號(hào)C08L5/08GK1752126SQ20051010592
公開日2006年3月29日 申請(qǐng)日期2005年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月30日
發(fā)明者張繼, 王云普, 曾家豫, 張生堂, 葛軒燁, 趙莉, 楊宇靜 申請(qǐng)人:西北師范大學(xué)