專利名稱：一種具有核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微球表面改性的方法及其應(yīng)用，尤其涉及一種新型的具有核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球的制備方法及相應(yīng)的微球產(chǎn)品和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
目前，微球的制備技術(shù)日益成熟，不同規(guī)格的微球在醫(yī)學(xué)工程、生物技術(shù)、電子技術(shù)等越來越多的領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。微球的廣泛使用得益于本身的特性，1)一般是形狀規(guī)整的微小顆粒，可通過各種規(guī)模化生產(chǎn)技術(shù)來批量制備，而且生產(chǎn)的重復(fù)性、穩(wěn)定性好；2)物理化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，顆粒之間的空隙均勻，耐壓程度也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于同等材料的無定型顆?；蛘咂渌螤畹念w粒；3)比表面積很大，有的微球內(nèi)部還有孔道，可以在有限的填充體積內(nèi)提供令人難以想象的巨大表面。對(duì)微球進(jìn)行表面改性，可優(yōu)化微球的表面性能，賦予微球新的功能，進(jìn)一步提高了微球的綜合優(yōu)勢(shì)。表面改性的方法主要包括表面等離子體處理、紫外光輻照接枝改性、γ-射線輻射改性、臭氧接枝改性和表面活性劑涂敷改性等。經(jīng)特定的改性過程，微球可被賦予不同的表面特性，具備諸如親水性、親合性、pH響應(yīng)性、溫度響應(yīng)性、生物相容性、抗污染性等功能，可用作高分子材料填充劑，還可用作水處理劑、催化劑、傳感器和蛋白質(zhì)等生物大分子的載體，使之廣泛應(yīng)用于材料加工、醫(yī)藥、診斷、生物工程、精細(xì)化工等領(lǐng)域。
在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，常利用抗原-抗體間的特異性結(jié)合來診斷疾病，而微球較大的比表面積能提高診斷的靈敏度，可以更快速、更直觀、更方便地達(dá)到診斷目的。聚苯乙烯為基材的疏水性微球是最早被用于臨床診斷的免疫微球，其特點(diǎn)是利用聚苯乙烯強(qiáng)的疏水性，通過抗體的疏水部位將抗體吸附在微球表面，可不采用化學(xué)法固定。但疏水性表面會(huì)產(chǎn)生非特異性吸附，如 panováA.等的文章“I mmunomagnetic separation anddetection of Salmonella cells using newly designed carriers”(《J.Chromatogr.A》2003，1009215)；Hosaka S.等人的文章“Microparticle-enhanced nephelometric immunoassay of anti-thyroidperoxidase autoantibodies in thyroid disorders”(《Clin.Chem.》1994，40442)公開的技術(shù)開始采用親水性較強(qiáng)的微球作為抗體的載體，如聚(2-羥乙基甲基丙烯酸酯)、聚(甲基丙烯酸縮水甘油酯)微球等。此外，還發(fā)展了一種表面由親水性微區(qū)和疏水性微區(qū)交替組成的微球，如Okubo M.等的文章“Competitive adsorption of fibrinogen and albuminonto polymer microspheres having hydrophilic/hydrophobic heterogenoussurface structures”(《Colloid Polym.Sci.》1993，2711157)以及MaeharaT.等人的“Glycidyl methacrylate-styrene copolymer latex particles forimmunologic agglutination tests”(《Biomaterials》1990，11122)，疏水微區(qū)用于吸附抗體，裸露的親水性微區(qū)可以避免實(shí)際使用時(shí)其他雜蛋白質(zhì)的吸附。Hatakeyama M.等公開的文章“DNA-carrying latex particles forDNA diagnosis 2.Distinction of normal and point mutant DNA using S1nuclease”(《Colloids Surf.B，Biointerfaces》1998，10171)表明微球近年來還被用于DNA診斷，即將DNA單鏈固定在微球上，然后用于捕獲互補(bǔ)的DNA或RNA，可以檢測(cè)出發(fā)生突變的DNA。利用其他的特異性親和作用，微球還可用于其他疾病的診斷。利用藥物和作用靶點(diǎn)的特異性相互作用，還可進(jìn)行藥物的篩選(將靶點(diǎn)固定在微球上)以及藥物作用靶點(diǎn)的探索(將藥物固定在微球上)。
在生物技術(shù)領(lǐng)域，從細(xì)胞培養(yǎng)的載體，到分離純化的介質(zhì)；從固定化酶，到生物芯片，到處都有高分子微球的應(yīng)用。特別是將微球作為分離純化的介質(zhì)，使得層析技術(shù)成為生物活性物質(zhì)分離純化最常用的手段。其中，親和層析由于具有高度的專一性和可逆性，被用于制備高純度的生物活性物質(zhì)。自80年代以來，出現(xiàn)了聚苯乙烯微球(大孔樹脂)、瓊脂糖系列微球、葡聚糖系列微球、聚乙烯醇微球、多羥基化合物覆蓋層的聚苯乙烯微球、新型的聚丙烯酸系列微球和聚丙烯酰胺微球等先后用作分離純化的介質(zhì)。
近年來，將糖基引入材料中，利用糖的生物相容性與識(shí)別作用，在食品、醫(yī)藥、臨床診斷、化妝品、蛋白質(zhì)分離等領(lǐng)域取得了一定成效。公開號(hào)為CN1450907的文獻(xiàn)中，公開了一種通過β聚糖增加細(xì)胞中活化素誘導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)的方法，該方法可用于治療許多病理情況，包括生殖、反應(yīng)、皮膚、骨骼、肝臟、造血和中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。公開號(hào)為CN1417347的文獻(xiàn)中，公開了一種將糖等配體以一定距離共價(jià)連接于基質(zhì)表面，用于鑒定病源微生物及其毒性蛋白。公開號(hào)為CN1460524的文獻(xiàn)中，公開了制備α-烯丙基葡糖苷表面修飾的人工晶狀體，這種白內(nèi)障囊外摘除術(shù)的人工晶狀體光學(xué)部和袢的外表面均帶有α-烯丙基葡糖苷單體的分子層，提高了人工晶狀體的生物相容性，且制法科學(xué)、醫(yī)用移植安全可靠。公開號(hào)為CN1030005的文獻(xiàn)中，公開的技術(shù)將具有酸性官能團(tuán)的二乙胺乙基葡聚糖包被在二氧化硅顆粒上，通過吸附和洗脫從乳清中選擇性地提取金屬蛋白質(zhì)，尤其是固定鐵的金屬蛋白，例如乳鐵傳遞蛋白、乳過氧化物酶和鐵傳遞蛋白。公開號(hào)為CN1130375的文獻(xiàn)中，公開的技術(shù)將多糖衍生物(多糖的酯或氨基甲酸酯衍生物)負(fù)載于用芳烷基甲硅烷基化試劑處理過的表面擁有硅烷醇基團(tuán)的硅膠顆粒上制成旋光異構(gòu)體分離劑，作為反相液相色譜的填充材料，把旋光異構(gòu)體從外消旋化合物中分離出來。公開號(hào)為CN1763126的文獻(xiàn)中，公開了一種以羅望子膠或沙蒿膠與殼聚糖為原料，四氧化三鐵為磁流體，戊二醛為交聯(lián)劑，對(duì)氨基苯磺酸為胺化劑制備的具有一定磁響應(yīng)性的磁性微球，是一種溶脹體積小、耐酸性較好、成本低的復(fù)合生物多糖磁性微球。公開號(hào)為CN1708688的文獻(xiàn)中，提供了用于固化至少一種碳水化合物分子的方法，包括將表面與至少一種單體的等離子體接觸來提供等離子聚合體包被的帶有氨基的表面，及將所述聚合體表面接觸不同的天然多糖溶液諸如透明質(zhì)酸、硫酸皮膚素、硫酸軟骨素、肝素、硫酸乙酰肝素或硫酸角質(zhì)素等，將多糖通過靜電作用被動(dòng)吸附到聚合體表面，固化的多糖在表面有充分的結(jié)合強(qiáng)度，并保留了天然的生物活性。這種糖結(jié)合表面可用于生物傳感器、治療載體、細(xì)胞培養(yǎng)、醫(yī)療裝置、純化基質(zhì)和芯片等方面。
由于糖在生物學(xué)上的獨(dú)特地位，自20世紀(jì)80年代末，糖生物學(xué)成為繼基因組學(xué)和蛋白組學(xué)之后的又一門新興的前沿學(xué)科——糖組學(xué)，得到了越來越多的關(guān)注和應(yīng)用。因此，制備糖基化材料的重要性日趨迫切。但到目前為止，將具有不同生物功能的糖單體直接固定在應(yīng)用廣泛的高分子材料上并不多見，大大限制了糖的生物功能在工業(yè)上的應(yīng)用。本發(fā)明將糖基引入聚丙烯微球的表面，可使糖的生物功能與聚丙烯優(yōu)良的物理化學(xué)性能結(jié)為一體，并能直接用于蛋白質(zhì)的選擇性分離、濃縮或靶向清除。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種操作簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)可行的具有核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球的制備方法，得到的糖基化聚丙烯微球具有良好的機(jī)械強(qiáng)度、優(yōu)良的化學(xué)穩(wěn)定性與熱穩(wěn)定性。
一種具有核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球的制備方法，包括如下步驟(1)將聚丙烯微球浸入含有復(fù)合光引發(fā)劑和帶羥基的丙烯酸酯類單體的溶液中(每1克聚丙烯微球需10毫升單體溶液)，通氮?dú)獗Ｗo(hù)(約10分鐘)后進(jìn)行紫外光輻照接枝聚合，反應(yīng)結(jié)束后分離產(chǎn)物、洗滌、烘干，得到羥基化聚丙烯微球；所述溶液的溶劑是丙酮和水的混合物，其體積比為0.25～4。，所述的復(fù)合光引發(fā)劑為三氯化鐵和二苯甲酮的復(fù)合物，其中三氯化鐵的濃度為0～0.033摩爾/升，二苯甲酮的濃度為0.0007～0.033摩爾/升，帶羥基的丙烯酸酯類單體在溶液中的體積百分?jǐn)?shù)為5～20％；紫外光輻照時(shí)間為10～60分鐘；(2)將羥基化聚丙烯微球浸入糖單體的二氯甲烷溶液中，糖單體的量為微球表面羥基數(shù)的5～20倍當(dāng)量，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下加入三氟化硼乙醚絡(luò)合物進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后分離產(chǎn)物、洗滌、烘干得到表面固定糖基的聚丙烯微球；三氟化硼乙醚絡(luò)合物濃度為糖單體濃度的5倍(質(zhì)量百分比濃度)；在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)，(3)將表面固定糖基的聚丙烯微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙?；?，得到核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球。
步驟(1)所述的聚丙烯微球的直徑為0.2～2000微米。
步驟(1)所述的帶羥基的丙烯酸酯類單體為甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)、甲基丙烯酸羥丙酯(HPMA)、丙烯酸羥乙酯(HEA)、丙烯酸羥丙酯(HPA)或丙烯酸羥丁酯(HBA)等。
步驟(2)所述糖單體可以是任何乙?；Ｗo(hù)的糖(單糖、寡糖、多糖等)，糖基上的保護(hù)基團(tuán)(乙酰基)可以方便地脫除，且可通過重量法快速計(jì)算出聚丙烯微球上結(jié)合的糖基含量。
步驟(2)所述的糖單體為葡萄糖五乙酸酯、甘露糖五乙酸酯、半乳糖五乙酸酯、巖藻糖四乙酸酯、麥芽糖八乙酸酯、乳糖八乙酸酯或蔗糖八乙酸酯中的一種或幾種。
步驟(3)所述的甲醇鈉的甲醇溶液，其濃度為0.5摩爾/升。
步驟(1)所述羥基化聚丙烯微球，接枝率為0～600％(質(zhì)量百分比)步驟(3)所述的核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球，糖基的固定率為0～400％(質(zhì)量百分比)。，本發(fā)明還提供了所述的核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球的應(yīng)用，所述的核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球?qū)μ囟ǖ鞍踪|(zhì)具有選擇性識(shí)別作用，可根據(jù)不同的微球尺寸裝填成柱(在高效液相色譜或質(zhì)譜中)或用作流化床的固體相，直接用于蛋白質(zhì)的分離、濃縮或靶向清除。
本發(fā)明將糖基引入聚丙烯微球的表面，可使糖的生物功能與聚丙烯優(yōu)良的物理化學(xué)性能結(jié)為一體。由于聚丙烯微球的粒徑小，比表面積提高，可一定程度上提高糖基在微球表面的結(jié)合，進(jìn)一步發(fā)揮糖的集簇效應(yīng)；同時(shí)，微球的三維結(jié)構(gòu)使得糖基化聚丙烯微球吸附蛋白質(zhì)時(shí)結(jié)合點(diǎn)多，空間位阻小，吸附速率提高。利用不同糖基對(duì)特定蛋白質(zhì)的選擇性識(shí)別作用，糖基化聚丙烯微球可實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)及微生物的分離、濃縮或靶向清除。這種糖基化聚丙烯微球作為高效液相色譜或流化床的固定相可實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的高效、快速分離，并利于保持生物大分子高的生物活性和回收率。
本發(fā)明方法在室溫下進(jìn)行，操作簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)可行。通過調(diào)節(jié)紫外輻照接枝聚合條件，聚丙烯微球上接枝的帶羥基的丙烯酸酯類單體的接枝率可在很寬的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)(0～600％，質(zhì)量百分比)，采用光引發(fā)劑可以提高的接枝率；利用不同接枝率的聚丙烯微球，進(jìn)而可得到不同糖基化程度的聚丙烯微球(0～400％，質(zhì)量百分比)，可實(shí)現(xiàn)微球表面糖基的集簇效應(yīng)，顯著增強(qiáng)了糖基對(duì)蛋白質(zhì)的選擇性吸附；同時(shí)，這種不同糖基化程度的聚丙烯微球可適用于一系列從低濃度到高濃度的蛋白質(zhì)溶液(0.1克/升～100克/升)的分離和濃縮，使用范圍廣。
本發(fā)明方法得到的糖基化聚丙烯微球是通過帶羥基的丙烯酸酯類接枝聚合鏈將糖基固定在微球表面，在吸附蛋白質(zhì)時(shí)空間位阻小，且糖基與蛋白質(zhì)易于形成多價(jià)結(jié)合，使糖基化微球吸附蛋白質(zhì)的能力提高。具有良好的機(jī)械強(qiáng)度、優(yōu)良的化學(xué)穩(wěn)定性與熱穩(wěn)定性及其低廉的成本，適用范圍廣。在使用過程中性能穩(wěn)定，糖基不會(huì)脫落，用于蛋白質(zhì)的選擇性分離、濃縮或靶向清除時(shí)，可通過吸附、洗脫的循環(huán)方式重復(fù)使用，且能避免產(chǎn)物的污染，大大降低了生產(chǎn)成本。


圖1為糖基化聚丙烯微球的結(jié)構(gòu)示意圖，圖中最內(nèi)層A聚丙烯微球核；中間層B羥基化接枝層；最外層C糖基化殼；具體實(shí)施方式
本發(fā)明中接枝率采用重量法計(jì)算；本發(fā)明中糖基化聚丙烯微球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附分離采用高效液相色譜在線檢測(cè)，分離效果也可用雙向電泳測(cè)定。
糖基化聚丙烯微球的制備實(shí)施例1～13糖基化聚丙烯微球的制備條件及結(jié)果如表1所示。實(shí)施例中涉及的具體的糖基的結(jié)構(gòu)式見表2所示。
實(shí)施例1稱取適量的三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成濃度0.0007摩爾/升的光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為20％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照25分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為23.12％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升五乙?；咸烟?五乙?；咸烟菫榫郾┪⑶虮砻娼又Φ腍EMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到五乙?；咸烟歉男缘木郾┪⑶颉⒃撐⑶蚪爰状尖c的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙?；盟礈?，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為7.76％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例2稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥丙酯(HPMA)，配成體積濃度為20％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照25分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HPMA接枝率為172.66％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升五乙?；咸烟?五乙?；咸烟菫榫郾┪⑶虮砻娼又Φ腍PMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到五乙?；咸烟歉男缘木郾┪⑶?。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙酰基，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為59.54％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例3稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.033摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為20％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照25分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為11.97％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升五乙?；咸烟?五乙?；咸烟菫榫郾┪⑶虮砻娼又Φ腍EMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到五乙?；咸烟歉男缘木郾┪⑶颉⒃撐⑶蚪爰状尖c的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙?；?，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為3.52％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例4稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照25分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為111.19％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升五乙酰基葡萄糖(五乙?；咸烟菫榫郾┪⑶虮砻娼又Φ腍EMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到五乙酰基葡萄糖改性的聚丙烯微球。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙?；?，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為38.34％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例5稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照60分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為197.32％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升五乙?；咸烟?五乙?；咸烟菫榫郾┪⑶虮砻娼又Φ腍EMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到五乙?；咸烟歉男缘木郾┪⑶?。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙酰基，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為103.51％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例6稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照25分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為169.23％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升五乙?；咸烟?五乙?；咸烟菫榫郾┪⑶虮砻娼又Φ腍EMA的5倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到五乙酰基葡萄糖改性的聚丙烯微球。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙?；盟礈?，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為56.41％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例7稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入丙烯酸羥乙酯(HEA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為0.2微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照25分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEA接枝率為336.12％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升葡萄糖五乙酸酯(葡萄糖五乙酸酯為聚丙烯微球表面接枝的HEA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖五乙酸酯改性的聚丙烯微球。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙?；?，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為195.46％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例8稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為2000微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照25分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為10.08％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升葡萄糖五乙酸酯(葡萄糖五乙酸酯為聚丙烯微球表面接枝的HEMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖五乙酸酯改性的聚丙烯微球。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙?；?，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到葡萄糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為2.98％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例9稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照60分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為195.61％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升甘露糖五乙酸酯(甘露糖五乙酸酯為聚丙烯微球表面接枝的HEMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到甘露糖五乙酸酯改性的聚丙烯微球。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙酰基，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到甘露糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為102.83％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例10稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照60分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為203.58％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升半乳糖五乙酸酯(半乳糖五乙酸酯為聚丙烯微球表面接枝的HEMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到半乳糖五乙酸酯改性的聚丙烯微球。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙酰基，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到半乳糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為105.09％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例11稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照60分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為192.17％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升巖藻糖四乙酸酯(巖藻糖四乙酸酯為聚丙烯微球表面接枝的HEMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到巖藻糖四乙酸酯改性的聚丙烯微球。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙?；盟礈?，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到巖藻糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為99.45％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例12稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照60分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為198.24％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升麥芽糖八乙酸酯(麥芽糖八乙酸酯為聚丙烯微球表面接枝的HEMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到麥芽糖八乙酸酯改性的聚丙烯微球。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙酰基，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到麥芽糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為88.99％(質(zhì)量百分比)。
實(shí)施例13稱取適量的二苯甲酮(BP)和三氯化鐵(FeCl3)溶解到以等體積混合的丙酮與水的混合溶劑中，配成各光引發(fā)劑濃度分別為0.033摩爾/升和0.0007摩爾/升的復(fù)合光引發(fā)劑溶液，再加入甲基丙烯酸羥乙酯(HEMA)，配成體積濃度為5％的單體溶液；將直徑為100微米的聚丙烯微球放入10毫升該單體溶液中浸泡1小時(shí)，紫外光(UV)輻照60分鐘，然后取出聚丙烯微球，以丙酮和大量的水清洗，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到HEMA接枝率為201.73％(質(zhì)量百分比)的羥基化聚丙烯微球。取上述羥基化聚丙烯微球置入20毫升乳糖八乙酸酯(乳糖八乙酸酯為聚丙烯微球表面接枝的HEMA的20倍當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中，并于氮?dú)夥障录尤?00倍當(dāng)量的三氟化硼乙醚絡(luò)合物，密封，在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后將反應(yīng)體系移至室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)；停止反應(yīng)，用丙酮洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到乳糖八乙酸酯改性的聚丙烯微球。將該微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液(濃度為0.5摩爾/升)中，室溫下振蕩，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙?；?，用水洗滌，放入40℃烘箱，真空干燥24小時(shí)，得到乳糖糖基化的聚丙烯微球，糖基化率為93.37％(質(zhì)量百分比)。
糖基化聚丙烯微球的應(yīng)用應(yīng)用例1～5的分離效果如表3所示，糖基對(duì)凝集素的選擇性識(shí)別作用如表4所示。
應(yīng)用例1、葡萄糖糖基化聚丙烯微球?qū)Π榈抖骨虻鞍?Con A)的吸附分離取實(shí)施例4制備的葡萄糖糖基化聚丙烯微球(糖基化率為38.34％)浸入10毫升無水乙醇中預(yù)浸潤(rùn)，再以磷酸鹽緩沖溶液(PBS，0.01摩爾/升，pH＝7.36)清洗，放入10毫升伴刀豆球蛋白/花生凝集素(Con A/PNA)的PBS溶液中，密封，其中，Con A的濃度為20克/升，PNA的濃度為20克/升，溶液中CaCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，MnCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，NaCl的濃度為0.1摩爾/升。在25℃下恒溫30分鐘后，取出葡萄糖糖基化聚丙烯微球，并以1摩爾/升的葡萄糖磷酸鹽緩沖溶液沖洗，即可將吸附在微球上的伴刀豆球蛋白洗脫，從而實(shí)現(xiàn)將伴刀豆球蛋白從蛋白質(zhì)的混合溶液中分離的目的。
應(yīng)用例2、葡萄糖糖基化聚丙烯微球?qū)Π榈抖骨虻鞍?Con A)的吸附分離取實(shí)施例7制備的葡萄糖糖基化聚丙烯微球(糖基化率為195.46％)浸入10毫升無水乙醇中預(yù)浸潤(rùn)，再以磷酸鹽緩沖溶液(PBS，0.01摩爾/升，pH＝7.36)清洗，放入10毫升伴刀豆球蛋白/花生凝集素(Con A/PNA)的PBS溶液中，密封，其中，Con A的濃度為100克/升，PNA的濃度為100克/升，溶液中CaCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，MnCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，NaCl的濃度為0.1摩爾/升。在25℃下恒溫30分鐘后，取出葡萄糖糖基化聚丙烯微球，并以1摩爾/升的葡萄糖磷酸鹽緩沖溶液沖洗，即可將吸附在微球上的伴刀豆球蛋白洗脫，從而實(shí)現(xiàn)將伴刀豆球蛋白從蛋白質(zhì)的混合溶液中分離的目的。
應(yīng)用例3、葡萄糖糖基化聚丙烯微球?qū)Π榈抖骨虻鞍?Con A)的吸附分離取實(shí)施例8制備的葡萄糖糖基化聚丙烯微球(糖基化率為2.98％)浸入10毫升無水乙醇中預(yù)浸潤(rùn)，再以磷酸鹽緩沖溶液(PBS，0.01摩爾/升，pH＝7.36)清洗，放入10毫升伴刀豆球蛋白/花生凝集素(ConA/PNA)的PBS溶液中，密封，其中，Con A的濃度為1克/升，PNA的濃度為1克/升，溶液中CaCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，MnCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，NaCl的濃度為0.1摩爾/升。在25℃下恒溫30分鐘后，取出葡萄糖糖基化聚丙烯微球，并以1摩爾/升的葡萄糖磷酸鹽緩沖溶液沖洗，即可將吸附在微球上的伴刀豆球蛋白洗脫，從而實(shí)現(xiàn)將伴刀豆球蛋白從蛋白質(zhì)的混合溶液中分離的目的。
應(yīng)用例4、半乳糖糖基化聚丙烯微球?qū)ㄉ?PNA)的吸附分離取實(shí)施例10中制備的半乳糖糖基化聚丙烯微球(糖基化率為105.09％)浸入10毫升無水乙醇中預(yù)浸潤(rùn)，再以磷酸鹽緩沖溶液(PBS，0.01摩爾/升，pH＝7.36)清洗，放入10毫升伴刀豆球蛋白/花生凝集素(ConA/PNA)的PBS溶液中，密封，其中，ConA的濃度為100g/L，PNA的濃度為100g/L，溶液中CaCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，MnCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，NaCl的濃度為0.1摩爾/升。在25℃下恒溫30分鐘后，取出半乳糖糖基化聚丙烯微球，并以1摩爾/升的半乳糖磷酸鹽緩沖溶液沖洗，即可將吸附在微球上的伴刀豆球蛋白洗脫，從而實(shí)現(xiàn)將花生凝集素從蛋白質(zhì)的混合溶液中分離的目的。
應(yīng)用例5、乳糖糖基化聚丙烯微球?qū)ㄉ?PNA)的吸附分離取實(shí)施例13制備的乳糖糖基化聚丙烯微球(糖基化率為93.37％)浸入10毫升無水乙醇中預(yù)浸潤(rùn)，再以磷酸鹽緩沖溶液(PBS，0.01摩爾/升，pH＝7.36)清洗，放入10毫升伴刀豆球蛋白/花生凝集素(Con A/PNA)的PBS溶液中，密封，其中，Con A的濃度為100g/L，PNA的濃度為100g/L，溶液中CaCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，MnCl2的濃度為0.1毫摩爾/升，NaCl的濃度為0.1摩爾/升。在25℃下恒溫30分鐘后，取出乳糖糖基化聚丙烯微球，并以1摩爾/升的乳糖磷酸鹽緩沖溶液沖洗，即可將吸附在微球上的伴刀豆球蛋白洗脫，從而實(shí)現(xiàn)將花生凝集素從蛋白質(zhì)的混合溶液中分離的目的。
表1 實(shí)施例1～13糖基化聚丙烯微球的制備條件及結(jié)果

a參比物為聚丙烯微球上接枝的帶羥基的丙烯酸酯類單體表2 實(shí)施例1～13中涉及的具體的糖基的結(jié)構(gòu)式

表3 應(yīng)用例1～5的分離效果

表4 應(yīng)用實(shí)例1～13中涉及的具體糖基可識(shí)別的凝集素

權(quán)利要求
1.一種具有核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球的制備方法，包括如下步驟(1)將聚丙烯微球浸入含有復(fù)合光引發(fā)劑和帶羥基的丙烯酸酯類單體的溶液中，進(jìn)行紫外光輻照接枝聚合反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后分離產(chǎn)物、洗滌、烘干，得到羥基化聚丙烯微球；所述的復(fù)合光引發(fā)劑為三氯化鐵和二苯甲酮的復(fù)合物，其中三氯化鐵的濃度為0～0.033摩爾/升，二苯甲酮的濃度為0.0007～0.033摩爾/升，帶羥基的丙烯酸酯類單體在溶液中的體積百分?jǐn)?shù)為5～20％；(2)將羥基化聚丙烯微球浸入糖單體的二氯甲烷溶液中，糖單體的量為微球表面羥基數(shù)的5～20倍，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下加入三氟化硼乙醚絡(luò)合物進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后分離產(chǎn)物、洗滌、烘干得到表面固定糖基的聚丙烯微球；(3)將表面固定糖基的聚丙烯微球浸入甲醇鈉的甲醇溶液中，室溫下振蕩90分鐘，脫去糖基上的保護(hù)基團(tuán)乙酰基，得到核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(1)所述的聚丙烯微球的直徑為0.2～2000微米。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(1)所述的帶羥基的丙烯酸酯類單體為甲基丙烯酸羥乙酯、甲基丙烯酸羥丙酯、丙烯酸羥乙酯、丙烯酸羥丙酯或丙烯酸羥丁酯等。
4.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(1)所述的溶液的溶劑是丙酮和水的混合物，其體積比為0.25～4。
5.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(1)所述的接枝聚合反應(yīng)前，體系通氮?dú)獗Ｗo(hù)，紫外光輻照時(shí)間為10～120分鐘。
6.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(2)所述的糖單體是乙?；Ｗo(hù)的單糖、寡糖或多糖。
7.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于所述的糖單體為葡萄糖五乙酸酯、甘露糖五乙酸酯、半乳糖五乙酸酯、巖藻糖四乙酸酯、麥芽糖八乙酸酯、乳糖八乙酸酯或蔗糖八乙酸酯中的一種或幾種。
8.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(2)所述的三氟化硼乙醚絡(luò)合物濃度為所用糖單體濃度的5倍。
9.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(2)所述的反應(yīng)為在冰水浴中振蕩反應(yīng)2小時(shí)，然后室溫下繼續(xù)振蕩反應(yīng)20小時(shí)。
10.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(3)所述的甲醇鈉的甲醇溶液，其濃度為0.5摩爾/升。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有核殼結(jié)構(gòu)的糖基化聚丙烯微球的制備方法，是以聚丙烯微球?yàn)檩d體材料，在紫外光輻照下接枝帶羥基的丙烯酸酯類單體，得到羥基化的聚丙烯微球；再將乙?；Ｗo(hù)的糖結(jié)合到此微球表面的羥基上；然后把乙?；Ｗo(hù)的糖基化聚丙烯微球浸入甲醇鈉/甲醇溶液中，脫去乙?；?，得到糖基化的聚丙烯微球；本發(fā)明將糖基結(jié)合在微球表面，可直接裝填成柱(高效液相色譜的固定相)或用作流化床的固體相，用于蛋白質(zhì)的分離、濃縮或靶向清除，糖基穩(wěn)定存在于微球表面，易于回收并可重復(fù)使用。
文檔編號(hào)C08L23/00GK101070401SQ200710068480
公開日2007年11月14日 申請(qǐng)日期2007年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月10日
發(fā)明者徐志康, 胡夢(mèng)欣, 萬靈書 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)