專利名稱：注射用香菇多糖的一種分離純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)，更具體涉及多糖分離純化。
背景技術(shù)：
香菇多糖(lentinan)系傘菇科真菌香菇子實(shí)體中提取純化的一種單一組分多糖(I)，是一 種免疫調(diào)節(jié)型抗腫瘤藥物，它通過增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤免疫防御反應(yīng)而產(chǎn)生細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤 效果，發(fā)揮間接的抗腫瘤作用，對(duì)正常細(xì)胞不產(chǎn)生毒副作用，因此香恭多糖是國(guó)際公認(rèn)安全 有效的抗腫瘤藥物(參考發(fā)明專利200410086152.4)。臨床上香菇多糖主要用于胃癌、肺癌、 腸癌及癌性腹水等惡性腫瘤的治療，另外香菇多糖對(duì)提高肝炎及艾滋病病人的免疫功能均有 較好作用。
1985年香菇多糖最先在日本作為抗腫瘤藥物進(jìn)入臨床，我國(guó)1988年開始進(jìn)口日本味之 素的香菇多糖。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上銷售的主要是南京振中生物工程有限公司生產(chǎn)的注射用香菇 多糖(ZL專利號(hào)00112407.2)，其原料藥生產(chǎn)工藝系參考文獻(xiàn)"Chihara.G., Maeda. Y,, Hamuro.G， et al. Inhibition of mouse sarcoma 180 by polysaccharides from Lentinus edodes(berk.) sing. Nature,
1965，222,687-688"，生產(chǎn)過程中要用到十六垸基三甲基銨、氯仿、正丁醇、醋酸等大量的有 機(jī)試劑，工藝流程十分復(fù)雜，勞動(dòng)強(qiáng)度大，環(huán)境污染大，而且香菇多糖的得率非常低，僅為 0.15%，成本相當(dāng)高，lmg香薛多糖的價(jià)格達(dá)200元以上，極大地限制了香菇多糖的臨床應(yīng)用。 故尋找一種工藝簡(jiǎn)單、產(chǎn)率高、成本低廉的香菇多糖提取純化方法是更好地發(fā)揮香菇多糖制 劑臨床作用的首要任務(wù)，有利于減輕患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，將給廣大癌癥患者帶來(lái)福音，也有利于 節(jié)約資源和保護(hù)環(huán)境，將大大地造福于人類。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供注射用香恭多糖的一種新的分離純化方法，本發(fā)明涉及的技術(shù)路 線系采用水提醇沉法結(jié)合三氯醋酸法去蛋白得到香菇多糖粗品，香菇多糖粗品經(jīng)過氧化氫脫 色得脫色多糖，脫色多糖再經(jīng)超濾得注射用香菇多糖。
本發(fā)明包括以下具體步驟a.取新鮮香菇或干香菇，經(jīng)粉粹或不經(jīng)粉粹；b.采用熱水提 取，濃縮；C.乙醇沉淀分離粗多糖；d.三氯醋酸去蛋白；e.乙醇沉淀；f.過氧化氫脫色；g. 乙醇沉淀；h.超濾除雜質(zhì)多糖和小分子；i.冷凍干燥。
其中所述的采用熱水提取、濃縮的具體方法是加入相當(dāng)于香菇干重8倍體積水，沸水提取2次，濃縮至相當(dāng)于香菇干重的2倍體積，得濃縮液；所還的濃縮液經(jīng)乙醇沉淀分離得 粗多糖的具體方法是向濃縮液中加入乙醇，使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，分離沉淀，得粗 多糖；所述的三氯醋酸去蛋白的具體方法是粗多糖以水溶解得粗多糖溶液，加入粗多糖溶 液體積卜2倍、濃度為5%三氯醋酸溶液，得去蛋白溶液；所述的經(jīng)乙醇沉淀得去蛋白多糖的 具體方法是向去蛋白溶液中加入乙醇，使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，分離沉淀，得去蛋白 多糖所述的的去蛋白多糖以水溶解后用過氧化氫脫色得脫色溶液具體方法是用水溶解去 蛋白多糖，滴加30%過氧化氫溶液，所加的過氧化氫的量為調(diào)過氧化氫終濃度為5~15%，過
氧化氫脫色中水浴溫度為40 60'C水浴，得脫色溶液；所述的脫色溶液經(jīng)乙醇沉淀得脫色多
糖的具體方法是向脫色溶液中加入乙醇，使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，分離沉淀，得脫色 多糖；所述的超濾除雜質(zhì)多糖和小分子的具體方法是取脫色多糖，加0.5M氫氧化鈉溶液溶 解，以0.5M鹽酸溶液調(diào)pH值至6~8,溶液置超濾杯中超濾，超濾膜截留分子量為10 000~300 OOODa，得超濾液；
本發(fā)明得到的注射用香菇多糖為白色粉末，含量為98 102%，重均分子量Mw為400 000 800 000 Da (見圖2 )，得率為0.67°/。(以終產(chǎn)品與干香菇質(zhì)量比計(jì)算)；傅立葉紅外光譜 顯示香菇多搪的特征吸收，主要特征為在3350 3300cn^處為糖環(huán)上O-H的伸縮振動(dòng)、在 2925~2915cm—1處為糖環(huán)上C-H的伸縮振動(dòng)、在110(M000cm"處為糖環(huán)上C-0的伸縮振動(dòng)、 在898 884cm—'處為P吡喃糖的d-H彎曲振動(dòng)，見圖1 。以上香菇多糖特征均符合閨家藥品 標(biāo)準(zhǔn)WS1-320 (X-263) -2004Z。
注射用香菇多糖的含量測(cè)定方法為精密量取香菇多糖對(duì)照品和供試品各25mg,分別加 0.5mol/L氫氧化鈉溶液溶解配成25 U g m廣的對(duì)照品溶液和供試品溶液；精密量取對(duì)照品溶 液和供試品溶液2.5m，分別沿管壁緩緩加至已精密加入硫酸蒽酮溶液5ml的試管中，使分層 (以上操作均在冰浴中進(jìn)行)，待劇烈振搖混勻后，立即置沸水浴中加熱，自振搖起計(jì)時(shí)，準(zhǔn) 確反應(yīng)6分鐘，將試管移至冰浴中冷卻后，放至室溫。自振搖起，應(yīng)在20 40分鐘內(nèi)，以水 為空白，照分光光度法(中國(guó)藥典2005年版二部附錄IV)在625nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度， 計(jì)算即得。
注射用香菇多糖的重均分子量測(cè)定方法為-.
色譜條件PL aquagel MIXED凝膠色譜柱(300mmX 7.5 mm);流動(dòng)相為0.05M的NaCl 溶液,pH7.0;流速0.5mL/min;柱溫3(TC;進(jìn)樣量25uL;標(biāo)樣為已知分子量DEXTRAN(分 子量1 000， 100 000, 40 000, 70 000， 500 000， 2 000 000 Fluka公司)；檢測(cè)器為示差折光 檢測(cè)器。
測(cè)定方法將樣品和已知分子量的標(biāo)樣葡聚糖，分別用流動(dòng)相溶解制成每ImL中約含10mg的溶液，分別注入25uL標(biāo)準(zhǔn)品溶液，記錄示差色譜圖，用WATERS GPC軟件作標(biāo)準(zhǔn) 曲線，計(jì)算重均分子量及其分布。
本發(fā)明提供的香菇多糖分離純化方法與現(xiàn)有的香菇多糖生產(chǎn)工藝相比(見表1)，具有產(chǎn) 率高、污染小、成本低的優(yōu)點(diǎn)，適合于注射用香菇多糖工業(yè)生產(chǎn)。
表l香菇多糖的工藝比較
工藝 所用主要有機(jī)試劑 產(chǎn)率 成本(每克香菇多糖)
原工藝乙醇、醋酸、十六垸基0.15% 8000元
三甲基溴化銨、三氯甲 烷、正丁醇
本工藝 乙醇、三氯醋酸0.67% 40元


圖1為以本發(fā)明方法制得的注射用香菇多糖的傅立葉紅外光譜圖； 圖2為以本發(fā)明方法制得的注射用香菇多糖的高效液相凝膠色譜洗脫圖。
具體實(shí)施方式
實(shí)施實(shí)例1
稱取1000g香菇子實(shí)體，剪碎，沸水煎煮lh，過濾；藥渣加水再煮沸l(wèi)h，過濾；合并2次
濾液，濃縮；向濃縮液中緩緩加入無(wú)水乙醇/95%乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上， 靜置過夜后抽濾，沉淀置低于6(TC干燥，得粗品；力叫.5M氫氧化鈉使粗品溶解，向溶液中加 入1~2倍體積5%三氯醋酸，攪拌，放置過夜，抽濾；濾液調(diào)pH值至6 8，加入無(wú)水乙醇/95% 乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，放置過夜，抽濾，沉淀置低于60。C干燥，得香菇 粗多糖50g。
取香菇粗多糖25.0g,加水溶解成深棕褐色溶液；4(TC水浴，滴加30%過氧化氫溶液，調(diào) 終濃度為5~15%，待溶液顏色變?yōu)榈S色后停止水浴；向溶液中緩慢加入無(wú)水乙醇/95%乙醇 /75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，立即出現(xiàn)乳白色沉淀，靜置過夜；傾去上清，減壓抽 濾，沉淀以乙醇/乙醚/丙酮洗滌數(shù)次，直至濾液無(wú)色，得灰白色沉淀；沉淀置低于6(TC干燥， 得白色塊狀物9.6g。
取脫色多糖1.0g，加0.5M氫氧化鈉溶液溶解呈棕色溶液，加0.5M鹽酸溶液調(diào)pH值至 6~8，溶液置減壓抽濾，取濾液置超濾杯中超濾，超濾膜截留分子量為50 000Da，氮?dú)饧訅海?br> 6壓力控制在0.1 0.2 X103Mpa;當(dāng)超濾杯中溶液體積小于20ml時(shí)加入適量蒸餾水稀釋，開 始下一次超濾；待濾出液電導(dǎo)率小于10X10"即可停止超濾；傾出超濾保留液，置冷凍干燥 機(jī)內(nèi)凍干，得白色粉末狀注射用香菇多糖0.3 0.4g。 實(shí)施實(shí)例2
稱取1000g香菇子實(shí)體，粉碎，沸水煎煮lh，過濾；藥渣加水再煮沸l(wèi)h，過濾；合并2次
濾液，濃縮；向濃縮液中緩緩加入無(wú)水乙醇/95%乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上， 靜置過夜后抽濾，沉淀置低于6(TC干燥，得粗品；加0.5M氫氧化鈉使粗品溶解，向溶液中加 入1~2倍體積5%三氯醋酸，攪拌，放置過夜，抽濾；濾液調(diào)pH值至6 8，加入無(wú)水乙醇/95% 乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，放置過夜，抽濾，沉淀置低于60。C干燥，得香菇 粗多糖50g。
'取香菇粗多糖25.0g，加水溶解成深棕褐色溶液；5CrC水浴，滴加30%過氧化氫溶液，調(diào) 終濃度為5 15%，待溶液顏色變?yōu)榈S色后停止水浴；向溶液中緩慢加入無(wú)水乙醇/95%乙醇 /75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，立即出現(xiàn)乳白色沉淀，靜置過夜；傾去上清，減壓抽 濾，沉淀以乙醇/乙醚/丙酮洗滌數(shù)次，直至濾液無(wú)色，得灰白色沉淀；沉淀置低于60。C干燥， 得白色塊狀物9.6g。
取脫色多糖l.Og，加0.5M氫氧化鈉溶液溶解呈棕色溶液，加0.5M鹽酸溶液調(diào)pH值至 6~8，溶液置減壓抽濾，取濾液置超濾杯中超濾，超濾膜截留分子量為10 000Da，氮?dú)饧訅海?壓力控制在0.1 0.2 X 103Mpa;當(dāng)超濾杯中溶液體積小于20ml時(shí)加入適量蒸餾水稀釋，開 始下一次超濾；待濾出液電導(dǎo)率小于10X10《即可停止超濾；傾出超濾保留液，置冷凍干燥 機(jī)內(nèi)凍干，得白色粉末狀注射用香菇多糖0.3 0.4g。
實(shí)施實(shí)例3
稱取1000g香菇子實(shí)體，剪碎，沸水煎煮lh，過濾；藥渣加水再煮沸l(wèi)h,過濾；合并2次 濾液，濃縮；向濃縮液中緩緩加入無(wú)水乙醇/95°/。乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上， 靜置過夜后抽濾，沉淀置低于60"C干燥，得粗品；加0.5M氫氧化鈉使粗品溶解，向溶液中加 入1~2倍體積5%三氯醋酸，攪拌，放置過夜，抽濾；濾液調(diào)pH值至6 8，加入無(wú)水乙醇/95% 乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，放置過夜，抽濾，沉淀置低于6(TC干燥，得香菇 粗多糖50g。
取香菇粗多糖25.0g，加水溶解成深棕褐色溶液；6(TC水浴，滴加30%過氧化氫溶液，調(diào) 終濃度為5 15%，待溶液顏色變?yōu)榈S色后停止水??；向溶液中緩慢加入無(wú)水乙醇/95%乙醇 /75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，立即出現(xiàn)乳白色沉淀，靜置過夜；傾去上清，減壓抽 濾，沉淀以乙醇/乙醚/丙酮洗滌數(shù)次，直至濾液無(wú)色，得灰白色沉淀；沉淀置低于6(TC干燥，得白色塊狀物9.6g。
取脫色多糖l.Og，加0.5M氫氧化鈉溶液溶解呈棕色溶液，加0.5M鹽酸溶液調(diào)pH值至 6 8，溶液置減壓抽濾，取濾液置超濾杯中超濾，超濾膜截留分子量為150 000Da，氮?dú)饧訅海?壓力控制在0.1 0.2 X103Mpa;當(dāng)超濾杯中溶液體積小于20ml時(shí)加入適量蒸餾水稀釋，開 始下一次超濾；待濾出液電導(dǎo)率小于10X10"即可停止超濾；傾出超濾保留液，置冷凍干燥 機(jī)內(nèi)凍干，得白色粉末狀注射用香菇多糖0.3 0.4g。 .實(shí)施實(shí)例4
稱取1000g香菇子實(shí)體，剪碎，沸水煎煮lh，過濾；藥渣加水再煮沸l(wèi)h，過濾；合并2次 濾液，濃縮；向濃縮液中緩緩加入無(wú)水乙醇/95%乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上， 靜置過夜后抽濾，沉淀置低于6(TC干燥，得粗品；力口0.5M氫氧化鈉使粗品溶解，向溶液中加 入1~2倍體積5%三氯醋酸，攪拌，放置過夜，抽濾；濾液調(diào)pH值至6-8，加入無(wú)水乙醇/95% 乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，放置過夜，抽濾，沉淀置低于6(TC干燥，得香薛 粗多糖50g。
取香菇粗多糖25.0g，加水溶解成深棕褐色溶液；5CTC水浴，滴加30%過氧化氫溶液，調(diào) 終濃度為5 15%，待溶液顏色變?yōu)榈S色后停止水?。幌蛉芤褐芯徛尤霟o(wú)水乙醇/95%乙醇 /75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，立即出現(xiàn)乳白色沉淀，靜置過夜；傾去上清，減壓抽 濾，沉淀以乙醇/乙醚/丙酮洗滌數(shù)次，直至濾液無(wú)色，得灰白色沉淀；沉淀置低于60'C干燥， 得白色塊狀物9.6g。
取脫色多糖1.0g，加0.5M氫氧化鈉溶液溶解呈棕色溶液，加0.5M鹽酸溶液調(diào)pH值至 6 8，溶液置減壓抽濾，取濾液置超濾杯中超濾，超濾膜截留分子量為200 000Da，氮?dú)饧訅海?壓力控制在0.1 0.2 X103Mpa;當(dāng)超濾杯中溶液體積小于20ml時(shí)加入適量蒸餾水稀釋，開 始下一次超濾；待濾出液電導(dǎo)率小于10乂10—6即可停止超濾；傾出超濾保留液，置冷凍干燥 機(jī)內(nèi)凍干，得白色絮狀物0.3 0.4g。
實(shí)施實(shí)例5
稱取1000g香菇子實(shí)體，剪碎，沸水煎煮lh，過濾；藥渣加水再煮沸l(wèi)h，過濾；合并2次
效i液，濃縮；向濃縮液中緩緩加入無(wú)水乙醇/95%乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上， 靜置過夜后抽濾，沉淀置低于60'C干燥，得粗品；力n0.5M氫氧化鈉使粗品溶解，向溶液中加 入1~2倍體積5%三氯醋酸，攪拌，放置過夜，抽濾；濾液調(diào)pH值至6-8，加入無(wú)水乙醇/95% 乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，放置過夜，抽濾，沉淀置低于60。C干燥，得香菇
粗多糖50g。
取香菇粗多糖25.0g，加水溶解成深棕褐色溶液；40'C水浴，滴加30%過氧化氫溶液，調(diào)終濃度為5 15%，待溶液顏色變?yōu)榈S色后停止水??；向溶液中緩慢加入無(wú)水乙醇/95%乙醇 /75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，立即出現(xiàn)乳白色沉淀，靜置過夜；傾去上清，減壓抽 濾，沉淀以乙醇/乙醚/丙酮洗滌數(shù)次，直至濾液無(wú)色，得灰白色沉淀；沉淀置低于60'C干燥， 得白色塊狀物9.6g。
取脫色多糖1.0g，加0.5M氫氧化鈉溶液溶解呈棕色溶液，加0.5M鹽酸溶液調(diào)pH值至 6 8，溶液置減壓抽濾，取濾液置超濾杯中超濾，超濾膜截留分子量為100 000Da，氮?dú)饧訅海?壓力控制在0.1 0.2 X103Mpa;當(dāng)超濾杯中溶液體積小于20ml時(shí)加入適量蒸餾水稀釋，開 始下一次超濾；待濾出液電導(dǎo)率小于10X10"即可停止超濾；傾出超濾保留液，置冷凍干燥 機(jī)內(nèi)凍干，得白色粉末狀注射用香菇多糖0.3 0.4g。
實(shí)施實(shí)例6
稱取1000g香菇子實(shí)體，粉碎，沸水煎煮lh，過濾；藥渣加水再煮沸l(wèi)h，過濾；合并2次
濾液，濃縮；向濃縮液中緩緩加入無(wú)水乙醇/95%乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上， 靜置過夜后抽濾，沉淀置低于60'C干燥，得粗品；加0.5M氫氧化鈉使粗品溶解，向溶液中加 入1~2倍體積5%三氯醋酸，攪拌，放置過夜，抽濾；濾液調(diào)pH值至6-8，加入無(wú)水乙醇/95% 乙醇/75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，放置過夜，抽濾，沉淀置低于60。C干燥，得香菇
粗多糖50g。
取香菇粗多糖25.0g，加水溶解成深棕褐色溶液；6(TC水浴，滴加30%過氧化氫溶液，調(diào) 終濃度為5~15%，待溶液顏色變?yōu)榈S色后停止水浴；向溶液中緩慢加入無(wú)水乙醇/95%乙醇 /75%乙醇使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，立即出現(xiàn)乳白色沉淀，靜置過夜；傾去上清，減壓抽 濾，沉淀以乙醇/乙醚/丙酮洗滌數(shù)次，直至濾液無(wú)色，得灰白色沉淀；沉淀置低于60'C干燥， 得白色塊狀物9.6g。 .
取脫色多糖l.Og，加0.5M氫氧化鈉溶液溶解呈棕色溶液，加0.5M鹽酸溶液調(diào)pH值至 6~8，溶液置減壓抽濾，取濾液置超濾杯中超濾，超濾膜截留分子量為300 000Da，氮?dú)饧訅海?壓力控制在0.1 0.2 X103Mpa;當(dāng)超濾杯中溶液體積小于20ml時(shí)加入適量蒸餾水稀釋，開 始下一次超濾；待濾出液電導(dǎo)率小于10X10"即可停止超濾；傾出超濾保留液，置冷凍干燥 機(jī)內(nèi)凍干，得白色粉末狀注射用香菇多糖0.3 0.4g。
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權(quán)利要求
1.注射用香菇多糖的一種分離純化方法，其特征在于，包括以下步驟a.取新鮮香菇或干香菇，經(jīng)粉粹或不經(jīng)粉粹；b.采用熱水提取，濃縮得濃縮液；c.濃縮液經(jīng)乙醇沉淀分離得粗多糖；d.用三氯醋酸去蛋白，得去蛋白溶液；e.經(jīng)乙醇沉淀，得去蛋白多糖；f.去蛋白多糖以水溶解后用過氧化氫脫色，得脫色溶液；g.脫色溶液經(jīng)乙醇沉淀得脫色多糖；h.經(jīng)超濾除雜質(zhì)多糖和小分子得超濾液；i.將超濾液置冷凍干燥機(jī)內(nèi)凍干，得白色粉末狀注射用香菇多糖。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用香菇多糖的一種分離純化方法，其特征在于，所述的 采用熱水提取，濃縮的具體方法是加入相當(dāng)于香菇干重8倍體積水，沸水提取2次，濃縮 亍相當(dāng)于香菇干重的2倍體積，得濃縮液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用香燕多糖的一種分離純化方法，其特征在于，所述的 濃縮液經(jīng)乙醇沉淀分離得粗多糖的具體方法是向濃縮液中加入乙醇，使溶液乙醇濃度達(dá)50% 以匕分離沉淀，得粗多糖；
4. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用香菇多搪的一種分離純化方法，其特征在于，所述的 三氯醋酸去蛋白的具體方法是粗多糖以水溶解得粗多糖溶液，加入粗多糖溶液體積1 2倍、 濃度為5%三氯醋酸溶液，得去蛋白溶液；
5. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用香菇多糖的一種分離純化方法，其特征在于，所還的 經(jīng)乙醇沉淀得去蛋白多糖的具體方法是向去蛋白溶液中加入乙醇，使溶液乙醇濃度達(dá)50% 以上，分離沉淀，得去蛋白多糖；
6. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用香菇多糖的一種分離純化方法，其特征在于，所述的 的A-蛋白多糖以水溶解后用過氧化氫脫色得脫色溶液具體方法是用水溶解去蛋白多糖，滴 加30%過氧化氫溶液，所加的過氧化氫的量為調(diào)過氧化氫終濃度為5~15%，過氧化氫脫色中 水浴溫度為40 60'C水浴，得脫色溶液；
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用香菇多糖的一種分離純化方法，其特征在于，所述的 脫色溶液經(jīng)乙醇沉淀得脫色多糖的具體方法是向脫色溶液中加入乙醇，使溶液乙醇濃度達(dá)50%以上，分離沉淀，得脫色多糖；
8.根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用香菇多糖的一種分離純化方法，其特征在于，所述的 超濾除雜質(zhì)多糖和小分子的具體方法是取脫色多糖，加0.5M氫氧化鈉溶液溶解，以0.5M 鹽酸溶液調(diào)pH值至6 8，溶液置超濾杯中超濾，超濾膜截留分子量為10 000~300 000Da，得 超濾液；
全文摘要
本發(fā)明提供了注射用香菇多糖的一種新的分離純化方法，該方法采用水提醇沉法結(jié)合三氯醋酸法去蛋白得到香菇多糖粗品，香菇多糖粗品經(jīng)過氧化氫脫色得脫色多糖，脫色多糖再經(jīng)超濾得注射用香菇多糖。本發(fā)明提供的注射用香菇多糖分離純化方法工藝簡(jiǎn)單、產(chǎn)率高、顯著降低制劑成本，有利于減輕患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，節(jié)約資源和保護(hù)環(huán)境，適合于注射用香菇多糖的工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C08B37/00GK101643514SQ200810048720
公開日2010年2月10日 申請(qǐng)日期2008年8月7日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月7日
發(fā)明者玉 張, 王凱平, 明 辜, 陳志祥 申請(qǐng)人:華中科技大學(xué)