專利名稱：雜雙官能的聚乙二醇試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及雜雙官能的聚乙二醇試劑，其生產(chǎn)方法及其使用方法。
背景技術(shù)：
聚乙二醇(PEG)是一種惰性、無(wú)毒的水溶性聚合物。這些和其他所需性能的結(jié)果 是，發(fā)現(xiàn)PEG的衍生物在各種藥物、生物醫(yī)療和生物技術(shù)應(yīng)用中作為試劑。然而，未改性的PEG本身不可用作試劑，因?yàn)樗鼘?duì)端羥基的反應(yīng)性有限。因此，為 了制備有用的PEG試劑，必須改性端羥基之一，使之成為更具有反應(yīng)性的基團(tuán)。根據(jù)現(xiàn)有 技術(shù)的方法，通過(guò)首先以烷基醚或其他非反應(yīng)性官能團(tuán)形式封端其他端羥基，然后將未封 端的端羥基轉(zhuǎn)化成親電中心，例如活化的羧酸酯，從而將新的官能團(tuán)施加到端羥基之一上。 或者，施加官能團(tuán)到一個(gè)端羥基上，并分離單官能化PEG與未改性PEG、單官能化PEG和雙 官能化 PEG 的混合物(Morpurgo 等人，Bioconjugate Chem.，7，363-368，(1996) ；Zalipsky 等人，J. Bioactive and Compatible Polymers，5，227-231，(1990) ；Snow 等人，美國(guó)專利 No. 5，414，135 ；Shadle 等人，美國(guó)專利 No. 4，847，325)。雙官能PEG試劑在PEG分子的兩個(gè)末端上含有反應(yīng)性基團(tuán)。這些雙官能試劑在 PEG的兩個(gè)末端上可含有相同的反應(yīng)性基團(tuán)(即均雙官能PEG試劑)或不同基團(tuán)(即雜雙 官能PEG試劑)。相對(duì)于均雙官能PEG試劑，雜雙官能PEG試劑提供的優(yōu)點(diǎn)在于，雜雙官能 PEG試劑的每一官能團(tuán)可與每一端基上的不同分子形成共價(jià)連接。在這一反應(yīng)中，兩個(gè)單獨(dú) 的分子通過(guò)PEG聚合物連接。然而，尤其當(dāng)在PEG分子的每一末端上希望不同官能團(tuán)(即 雜雙官能試劑)時(shí)，合成雙官能試劑變得復(fù)雜。因此，仍急需開(kāi)發(fā)新的雜雙官能PEG試劑和生產(chǎn)這種試劑的方法。發(fā)明概述本發(fā)明提供一組新型的雜雙官能PEG試劑。本發(fā)明的雜雙官能PEG試劑相對(duì)于現(xiàn) 有技術(shù)具有以上提及的和其他優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的這些試劑包括新的和有用的官能團(tuán)的結(jié)合且 可與一種或多種合適的目標(biāo)分子反應(yīng)。當(dāng)發(fā)生這種反應(yīng)時(shí)，PEG共價(jià)連接到一個(gè)或多個(gè)目 標(biāo)分子上。本發(fā)明的雜雙官能PEG試劑提供可具有不同相對(duì)反應(yīng)性的兩個(gè)官能團(tuán)。在一些實(shí) 施方案中，一個(gè)官能團(tuán)可比另一官能團(tuán)更具有反應(yīng)性。在其他實(shí)施方案中，一個(gè)官能團(tuán)可對(duì) 特定的目標(biāo)分子是優(yōu)選的或者甚至具有選擇性。在其他實(shí)施方案中，一個(gè)官能團(tuán)可與目標(biāo) 在一定反應(yīng)條件下選擇形成共價(jià)鍵。官能團(tuán)之間反應(yīng)性的差別有助于連接到兩個(gè)不同的分子上，因?yàn)樯踔猎诘诙倌?團(tuán)存在下，第一官能團(tuán)可與第一目標(biāo)分子反應(yīng)并形成共價(jià)鍵。隨后，具有不同相對(duì)反應(yīng)性的 第二官能團(tuán)然后可與第二目標(biāo)分子反應(yīng)并形成共價(jià)鍵。
在一個(gè)方面中，本發(fā)明提供含下式(I)的化合物的試劑 其中Y選自C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代 基R2任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈 C2-C6 炔基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè) 氟取代；R1是C6-C14芳基，或含選自N、N(R7)、0、S和S(O)m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C14 雜芳基，其中m為1或2，和其中R1被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；和η 是整數(shù) 1-1500。在化合物(I)的一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù)50-250。在化合物(I)的一些實(shí) 施方案中，R1優(yōu)選是苯基、吡啶基、嘧啶基或萘基，其中該環(huán)被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取 代。在化合物(I)的一些實(shí)施方案中，R1優(yōu)選是苯基和R8是硝基。在另一方面中，本發(fā)明提供含下式(II)的化合物的試劑
(II)其中R6是H，支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，和η 是整數(shù) 1-1500。在化合物(II)的一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù)50-250。在一些實(shí)施方案中，R6 優(yōu)選是H或甲基。在另一方面中，本發(fā)明提供生產(chǎn)式(XIV)的雜雙官能PEG化合物的方法 該方法包括下述步驟(a)使式(III)的化合物與二乙烯基砜反應(yīng)， 形成式(XV)的化合物 和(b)在酯偶聯(lián)劑存在下，使式(XV)的化合物與HO-R4反應(yīng)，形成式(XIV)的化 合物，其中Y選自C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代基R2 任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R5 是 H ；R4是C6-C14芳基，或含選自N、N(R7)、0、S和S(O)m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C14 雜芳基，其中m為1或2，和其中R4被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；和η 是整數(shù) 1-1500。在一些實(shí)施方案中，HO-R4是對(duì)硝基苯酚，和η是整數(shù)50-250。上述方法有利地提供甚至在游離酸存在下，使二乙烯基砜與化合物(III)反應(yīng)的 有效方法。在另一方面中，本發(fā)明提供生產(chǎn)式(XIV)的雜雙官能PEG化合物的方法 該方法包括下述步驟
Io
(a)在酯偶聯(lián)劑存在下，使式(XV)的化合物
與R14-R4反應(yīng)，形成式(XIV)的化合物， 其中Y、R2、R5、R4和η如上所定義，和
R14 選自 HO-、CF3C (0) -0-、CH3S (0) 2_0_、CF3S (0) 2_0_、CH3 (C6H4) S (0) 2_0_、Cl、Br 和
在一些實(shí)施方案中，R14是CF3C(O)-O-, R4是苯基和R8是硝基。 在另一方面中，本發(fā)明提供生產(chǎn)式(VIII)的化合物的方法
該方法包括下述步驟 (a)使式(IV)的化合物
O
與活化基反應(yīng)，形成式(IVa)的化合物
(b)使式(IVa)的化合物與式(V)的化合物反應(yīng)
形成式(VI)的化合物
O
(VI)，
(c)氧化式(VI)的化合物，形成式(VII)的化合物
(VII),
和(d)使式(VII)的化合物脫水，形成式(VIII)的化合物
(VIII),
其中W是C1-C6亞烷基，其中W被一個(gè)或多個(gè)取代基R11任選取代； A是C1-C6I-偏亞烷基(alkanyl-ylidene)，其中A被一個(gè)或多個(gè)取代基R11任選取 代；R11獨(dú)立地選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6 炔基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；Y選自C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代基R2 任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R3是H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， C6-C14芳基，或含選自N、N(R7)、0、S和S(O)m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C14雜芳基，其中 m為1或2，條件是若R3不是H，則R3被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R9 選自 CH3S (0) 2-0-, CF3S (0) 2_0_、CH3 (C6H4) S (0) 2_0_、Cl、Br 禾口 I ；R12選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝 基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R13選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝 基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；和η 是整數(shù) 1-1500。
上述方法有利地提供通過(guò)就地形成乙烯基砜，形成式(IV)的化合物的乙烯基砜 加合物的有效方法。在進(jìn)一步的方面中，本發(fā)明提供生產(chǎn)式(X)的化合物的方法 該方法包括下述步驟(a)使式(IX)的化合物 與活化試劑反應(yīng)，形成式⑴的化合物，其中活化試劑包括Riq-R14,R10是支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基，C6-C14 芳基，或含選自N、N (R7)、0、S和S (0) m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C14雜芳基，其中m為1 或2，其中Rki被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代； R14 選自 HO-、CF3C (0) _0_、CH3S (0) 2_0_、CF3S (0) 2_0_、CH3 (C6H4) S (0) 2_0_、Cl、Br 和 I ；Z 選自-CH2CH2Cl、-CH2CH2Br、-CH2CH21、-CH2CH2OS (0) 2CH3、-CH2CH2OS (0) 2CF3、-CH2CH2 OS (0) 2 (C6H4) CH3 和-CH = CH2 ；Y選自C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代基R2 任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；和η 是整數(shù) 1-1500。在另一方面中，本發(fā)明提供使用雜雙官能PEG形成式(XVI)的媒介物(vector)的
方法
(XVI),該方法包括下述步驟混合本發(fā)明的雜雙官能PEG與⑴和(2)，其中⑴和⑵ 可以是小分子、蛋白質(zhì)、多肽、肽、抗體、聚核苷酸、低聚核苷酸、其他聚合物物質(zhì)、多肽側(cè)鏈 或生物相關(guān)的靶向部分，或其片段、二聚體、三聚體或低聚物。在一些實(shí)施方案中，同時(shí)混合⑴和(2)與雜雙官能的PEG。在其他實(shí)施方案中， 按序混合(1)和(2)與雜雙官能的PEG。在一些實(shí)施方案中，(1)是陽(yáng)離子聚合物。在一些實(shí)施方案中，(2)是靶向部分。 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，(1)是陽(yáng)離子聚合物和(2)是靶向部分。在另一方面中，本發(fā)明提供使用雜雙官能PEG形成式(XVII)的靶向遞送核酸的載
體的方法 該方法包括下述步驟(a)混合本發(fā)明的雜雙官能的PEG與(1)和(2)，和(b)與 核酸混合，其中(1)是陽(yáng)離子聚合物和(2)是靶向部分。在一些實(shí)施方案中，同時(shí)混合(1)和(2)與雜雙官能的PEG。在其他實(shí)施方案中， 按序混合(1)和(2)與雜雙官能的PEG。發(fā)明詳述為了可充分地理解此處描述的發(fā)明，列出下述詳細(xì)說(shuō)明。本發(fā)明提供雜雙官能的 PEG試劑，它含有末端乙烯基砜和酯官能團(tuán)。這些雜雙官能PEG可用于以上所述的各種用 途。有利地，乙烯基砜和酯官能團(tuán)提供不同的反應(yīng)性，以便例如可在乙烯基砜端基處選擇發(fā) 生與陽(yáng)離子聚合物的反應(yīng)。在一個(gè)方面中，本發(fā)明提供含式(I)的化合物的試劑 其中Y選自C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代 基R2任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈 C2-C6 炔基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6
(XVII),烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多1 氟取代； R1是C6-C14芳基，或含選自N、N (R7)、0、S和S (0) m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C
雜芳基，其中m為1或2，和其中R1被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；和η 是整數(shù) 1-1500。在化合物(I)的一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù)5-1000。在一些實(shí)施方案中，η優(yōu) 選是20-500。在一些其他實(shí)施方案中，η優(yōu)選是50-250。在化合物(I)的其他實(shí)施方案中，Y優(yōu)選是亞甲基。在一些實(shí)施方案中，R1優(yōu)選選 自苯基、嘧啶基、吡啶基和萘基；和R1被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代。在一些實(shí)施方案 中，R1優(yōu)選是被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代的苯基。在一些實(shí)施方案中，R1是苯基和R8 是硝基?？扇缦率隽鞒虉DI所示，由合適大小的未官能化或部分官能化的聚乙二醇(PEG)， 合成化合物(I)的PEG試劑及其前體?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)中公知的方法，進(jìn)行特定的反應(yīng)。 在流程

圖1中，化合物(IA)與堿和化合物(ID)反應(yīng)，提供相應(yīng)的PEG烷基酯。該 烷基酯隨后水解，提供化合物(IB)。盡管水解可產(chǎn)生未官能化、雙官能化和單官能化的PEG 的混合物，但可通過(guò)純化，分離單官能化的PEG(參見(jiàn)，例如Zalipsky等人，J. Bioactive andCompatible Polymers, Vol.5,227-231, (1990))。然后，在堿存在下，使化合物(IB)與二乙烯基砜反應(yīng)，提供化合物(IC)。接下來(lái)， 使化合物(IC)與R1-OH和偶聯(lián)劑反應(yīng)，提供化合物(I)?；蛘?，兩步制備化合物(I)。首先，R1-OH與活化試劑反應(yīng)，然后與化合物(IC)反應(yīng)，形成化合物(I)。合適的活化試劑包括但不限于甲磺酰氯、甲苯磺酰氯、三氟乙酸酐和三 氟乙酰氯。在一些實(shí)施方案中，活化試劑是甲磺酰氯。在一些實(shí)施方案中，活化試劑是甲苯 磺酰氯。在一些實(shí)施方案中，活化試劑是三氟乙酸酐。在一些實(shí)施方案中，活化試劑是三氟 乙酰氯?；蛘撸衔?IB)與活化基反應(yīng)，然后與巰基烷基醇反應(yīng)。合適的活化基包括但 不限于甲磺酰氯和甲苯磺酰氯。氧化所得硫醚并脫水，提供化合物(IC)。在另一方面中，本發(fā)明提供含式(II)的化合物的試劑 其中R6是H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，和η 是整數(shù) 1-1500。在一些實(shí)施方案中，R6是H。在其他實(shí)施方案中，R6是烷基。在一些實(shí)施方案中， R6是甲基。在一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù)5-1000。在一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是20-500。 在一些其他實(shí)施方案中，η優(yōu)選是50-250?？扇缫陨系牧鞒虉DI所示，按照與化合物⑴類似的方式，合成化合物(II)的PEG 試劑及其前體。在一些實(shí)施方案中，如以下的流程圖II所示，化合物(II)是化合物(IE)的前體。 在流程圖II中，水解化合物(II)，生產(chǎn)化合物(IIA)?；衔?IIA)隨后與R1-OH 和偶聯(lián)劑反應(yīng)，提供化合物(IE)?；蛘?，兩步制備化合物(IE)。首先，使R1-OH與活化試劑反應(yīng)，然后與化合物(IIA) 反應(yīng)，形成化合物(IE)。合適的活化試劑包括但不限于甲磺酰氯、甲苯磺酰氯、三氟乙酸酐 和三氟乙酰氯。在一些實(shí)施方案中，活化試劑是甲磺酰氯。在一些實(shí)施方案中，活化試劑是 甲苯磺酰氯。在一些實(shí)施方案中，活化試劑是三氟乙酸酐。在一些實(shí)施方案中，活化試劑是三氟乙酰氯。在另一方面中，本發(fā)明提供生產(chǎn)雜雙官能PEG試劑的方法。這一方法尤其是有用 的，因?yàn)樗行У靥峁┖┒艘蚁┗亢王ス倌軋F(tuán)的雜雙官能PEG試劑。根據(jù)這一方面，本發(fā)明提供生產(chǎn)式(XIV)的雜雙官能PEG化合物的方法
該方法包括下述步驟(a)使式(III)的化合物與三乙烯基砜反應(yīng)，
形成式(XV)的化合物 和(b)在酯偶聯(lián)劑存在下，使式(XV)的化合物與HO-R4反應(yīng)，形成式(XIV)的化
合物，其中 Y選自C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代基R2 任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；η 是整數(shù) 1-1500R5 是H;R4是C6-C14芳基，或含選自N、N(R7)、0、S和S(O)m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C14 雜芳基，其中m為1或2，和其中R4被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代。在一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù)5-1000。在一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù)20-500。在一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù)50-250。 在一些實(shí)施方案中，R4優(yōu)選是苯基、吡啶基、嘧啶基或萘基；和R4任選被一個(gè)或多 個(gè)取代基R8取代。在一些實(shí)施方案中，R4優(yōu)選是被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代的苯基， 在該方法的一些實(shí)施方案中，R4是苯基，和R8是硝基。

在另一方面中，本發(fā)明提供生產(chǎn)式(VIII)的化合物的方法
(VIII),
該方法包括下述步驟 (a)使式(IV)的化合物
(IV)
與活化基反應(yīng)，形成式(IVa)的化合物
(IVa);
(b)使式(IVa)的化合物與式(V)的化合物反應(yīng)
-(V),
形成式(VI)的化合物
(VI)；
(C)氧化式(VI)的化合物，形成式(VII)的化合物
(VII)；
和(d)使式(VII)的化合物脫水，形成式(VIII)的化合物
15

(VIII),其中W是C1-C6亞烷基，其中W被一個(gè)或多個(gè)取代基R11任選取代；A是C1-C6I-偏亞烷基，其中A被一個(gè)或多個(gè)取代基R11任選取代；R11獨(dú)立地選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6 炔基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；Y選自(^-(；亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代基R2 任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R3是H、R17、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， C6-C14芳基，或含選自N、N(R7)、0、S和S(O)m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C14雜芳基，其中 m為1或2，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；條件是若 R3不是H或R17，則R3被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R17是保護(hù)基；R9 選自 CH3S (0) 2-0", CF3S (0) 2_0_、CH3 (C6H4) S (0) 2_0_、Cl、Br 禾口 I ；R12選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝 基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R13選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝 基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；和η 是整數(shù) 1-1500。在一些實(shí)施方案中，在式(IV)的化合物中，R3是H。在其他實(shí)施方案中，在式(IV) 的化合物中，R3是烷基。在一些實(shí)施方案中，R3是甲基。在一些實(shí)施方案中，在式(IV)的化合物中，η優(yōu)選是整數(shù)5-1000。在一些實(shí)施方 案中，η優(yōu)選是整數(shù)20-500。在一些實(shí)施方案中，η更優(yōu)選是整數(shù)50-250。在一些實(shí)施方案中，在式(IV)的化合物中，R3選自苯基、吡啶基、嘧啶基和萘基；和R3被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代。在一些實(shí)施方案中，R3是被一個(gè)或多個(gè)取代基R8 任選取代的苯基。在一些更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R3是苯基和R8是硝基。在一些實(shí)施方案中，在式(V)的化合物中，W優(yōu)選是亞甲基和A是偏亞甲基 (methylidene)0在步驟(a)中可使用任何合適的活化基，形成式(IVa)的化合物。合適的活化試 劑包括但不限于三氟乙酸酐、4-甲基苯甲酰氯、對(duì)甲苯磺酰氯和甲磺酰氯。在一些實(shí)施方案 中，活化試劑是三氟乙酸酐。在一些實(shí)施方案中，活化試劑是甲磺酰氯。在步驟(c)中可使用任何合適的氧化劑，形成式(VII)的化合物。合適的氧化劑 包括但不限于過(guò)氧化氫、間氯過(guò)苯甲酸、過(guò)氧單硫酸鉀、二氧化錳和高錳酸鉀。氧化劑可包 括其他組分和/或催化劑，例如鎢酸。在一些實(shí)施方案中，氧化劑是在鎢酸催化劑存在下的 過(guò)氧化氫。在步驟(d)中可使用任何合適的脫水反應(yīng)，形成式(VIII)的化合物。合適的脫水 反應(yīng)包括但不限于與亞硫酰氯和堿反應(yīng)；與甲磺酰氯和堿反應(yīng)；以及與Burgess試劑反應(yīng)。 在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)是用亞硫酰氯和堿反應(yīng)處理。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)是用甲磺酰 氯和堿處理。生產(chǎn)式(VIII)的化合物的方法可進(jìn)一步包括下述步驟添加保護(hù)基到式IV、IVa、 VI、VII或VIII的一種或多種化合物上的羧酸基上?？墒褂帽绢I(lǐng)域已知的任何合適的保護(hù) 基。參見(jiàn)，例如 Greene 等人，Protecting Groups in Organic Synthesis (3rd ed.), John Wileyand Sons, New York(1999)。生產(chǎn)式(VIII)的化合物的方法可進(jìn)一步包括下述步驟從式IV、IVa, VI、VII或 VIII的一種或多種化合物中使保護(hù)基去保護(hù)。去保護(hù)步驟導(dǎo)致式IV、IVa、VI、VII或VIII 的相應(yīng)化合物。該方法可包括大于一個(gè)這樣的去保護(hù)步驟?？墒褂帽绢I(lǐng)域已知的任何合適 的去保護(hù)方法，例如水解。在一些實(shí)施方案中，可同時(shí)進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)保護(hù)步驟與任何步驟(a)-(d)。例如， 可通過(guò)添加R9同時(shí)活化其中R3是H的式IV的化合物，以及通過(guò)添加保護(hù)基，在其游離酸處 保護(hù)，產(chǎn)生式IVa的化合物，其中R3是R17。類似地，可同時(shí)進(jìn)行任何一個(gè)或多個(gè)去保護(hù)步驟 與任何步驟(a)-(d)。例如，可通過(guò)添加R9同時(shí)活化其中R3不是H的式IV的化合物，以及 采用合適的去保護(hù)劑去保護(hù)，產(chǎn)生其中R3是H的式IVa化合物中的游離酸。在另一方面中，本發(fā)明提供生產(chǎn)式(X)的試劑的方法 該方法包括下述步驟(a)使式(IX)的化合物 與活化試劑Rltl-R14反應(yīng)，形成式⑴的化合物，其中R10是支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基，C6-C14 芳基，或含選自N、N (R7)、0、S和S (0) m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C14雜芳基，其中m為1 或2，其中Rki被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R14 選自 HO-、CF3C (0) _0_、CH3S (0) 2_0_、CF3S (0) 2_0_、CH3 (C6H4) S (0) 2_0_、Cl、Br 和 I ；Z 選自-CH2CH2Cl、-CH2CH2Br、-CH2CH2I、-CH2CH2OS (0) 2CH3、-CH2CH2OS (0) 2CF3、-CH2CH2 OS (0) 2 (C6H4) CH3 和-CH = CH2 ；Y選自(^-(；亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代基R2 任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；和η 是整數(shù) 1-1500。在一些實(shí)施方案中，Z是-CH = CH2。在一些實(shí)施方案中，R10優(yōu)選是苯基，R8是硝基和R14是CF3C0-0-。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，Riq是苯基，R8是硝基和R14是H0-，和活化試劑進(jìn)一步 包括酯偶聯(lián)劑。在一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù)5-1000。在一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù) 20-500。在一些實(shí)施方案中，η優(yōu)選是整數(shù)50-250。在一些其他實(shí)施方案中，R10選自苯基、吡啶基、嘧啶基和萘基；和R10被一個(gè)或多個(gè) 取代基R8任選取代。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，Rltl是被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代的 苯基。在一些更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R10是苯基和R8是硝基。當(dāng)R14是HO-時(shí)，可在步驟(a)中使用任何合適的偶聯(lián)劑。合適的偶聯(lián)劑包括但不 限于DCC (1，3- 二環(huán)己基碳二酰亞胺)、EDC (1- (3- 二甲基氨丙基)_3_乙基碳二酰亞胺鹽酸 鹽)、撤1^(0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-隊(duì)隊(duì)& ,N'-四甲基uronium六氟磷酸鹽)和 HBTU (0-苯并三唑-1-基-四甲基uronium六氟磷酸鹽)。在一些實(shí)施方案中，酯偶聯(lián)劑是 DCC。
在另一方面中，本發(fā)明進(jìn)一步提供生產(chǎn)式(XIII)的化合物的方法 該方法包括下述步驟(a)使式(XI)的化合物 與活化試劑反應(yīng)，形成式(XII)的化合物，其中活化試劑包括Rltl-R14 ； 和(b)使式(XII)的化合物脫水，形成式(XIII)的化合物，其中W是C1-C6亞烷基，其中W被一個(gè)或多個(gè)取代基R11任選取代；A是C1-C6I-偏亞烷基，其中A被一個(gè)或多個(gè)取代基R11任選取代；R11獨(dú)立地選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6 炔基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；Y選自C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代基R2 任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R10是支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C 2_C6炔基，C6-C14 芳基，或含選自N、N (R7)、0、S和S (0) m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C14雜芳基，其中m為1 或2，其中Rki被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；
R14 選自 HO-、CF3C (0) _0_、CH3S (0) 2_0_、CF3S (0) 2_0_、CH3 (C6H4) S (0) 2_0_、Cl、Br 和 I ；R12選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝 基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R13選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝 基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；和η 是整數(shù) 1-1500。在一些實(shí)施方案中，R10是苯基，R8是硝基，和R14是CF3-C0-0-。在一些實(shí)施方案中，Rki是苯基，R8是硝基，R14是H0-，和活化試劑進(jìn)一步包括酯偶 聯(lián)劑。在一些其他實(shí)施方案中，R10選自苯基、吡啶基、嘧啶基和萘基；和R10被一個(gè)或多個(gè) 取代基R8任選取代。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，Rltl是被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代的 苯基。在一些更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R10是苯基和R8是硝基。在一些實(shí)施方案中，W是亞甲基。在一些實(shí)施方案中，A是偏亞甲基。當(dāng)R14是HO-時(shí)，在步驟(a)中可使用任何合適的酯偶聯(lián)劑。合適的酯偶聯(lián)劑包括 但不限于DCC (1，3- 二環(huán)己基碳二酰亞胺)、EDC (1-(3- 二甲基氨丙基)-3-乙基碳二酰亞 胺鹽酸鹽)、HATU (0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N' ,N'-四甲基uronium六氟磷酸 鹽)和HBTU (0-苯并三唑-1-基-四甲基uronium六氟磷酸鹽)。在一些更優(yōu)選的實(shí)施方 案中，酯偶聯(lián)劑是DCC。在步驟(b)中可使用任何合適的脫水反應(yīng)。合適的脫水反應(yīng)包括但不限于與亞硫 酰氯和堿反應(yīng)；與甲磺酰氯和堿反應(yīng)；以及與Burgess試劑反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng) 是用亞硫酰氯和堿反應(yīng)處理。在一些實(shí)施方案中，反應(yīng)是用甲磺酰氯和堿處理。在另一方面中，本發(fā)明提供使用雜雙官能PEG形成式(XVI)的媒介物的方法 該方法包括下述步驟混合本發(fā)明的雜雙官能PEG與⑴和(2)，其中⑴和⑵ 可以是小分子、蛋白質(zhì)、多肽、肽、抗體、聚核苷酸、低聚核苷酸、其他聚合物物質(zhì)、多肽側(cè)鏈 或生物相關(guān)的靶向部分，或其部分、二聚體、三聚體或低聚物。在一些實(shí)施方案中，同時(shí)混合⑴和(2)與雜雙官能的PEG。在其他實(shí)施方案中， 按序混合(1)和(2)與雜雙官能的PEG。在一些實(shí)施方案中，(1)是陽(yáng)離子聚合物。在一些實(shí)施方案中，(2)是靶向部分。 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，(1)是陽(yáng)離子聚合物和(2)是靶向部分。在另一方面中，本發(fā)明提供使用雜雙官能PEG形成式(XVII)的靶向核苷酸遞輸用載體:
(XVII),該方法包括下述步驟(a)混合本發(fā)明的雜雙官能的PEG與(1)和(2)，和(b)與 核酸混合，其中(1)是陽(yáng)離子聚合物和(2)是靶向部分。在一些實(shí)施方案中，同時(shí)混合(1)和(2)與雜雙官能的PEG。在其他實(shí)施方案中， 按序混合(1)和(2)與雜雙官能的PEG。在一些實(shí)施方案中，雜雙官能PEG試劑是式(I)的化合物。在其他實(shí)施方案中，雜 雙官能PEG試劑是式(XIV)的化合物。在其他實(shí)施方案中，雜雙官能PEG試劑是式(VIII) 的化合物。合適的核酸包括但不限于重組質(zhì)粒；復(fù)制缺陷型質(zhì)粒；缺少小質(zhì)粒的細(xì)菌序列； 重組病毒基因組；編碼治療肽或蛋白質(zhì)的線性核酸片段；雜交的DNA/RNA雙鏈；雙鏈DNA ； 反義DNA或其化學(xué)類似物；含5-200個(gè)堿基對(duì)的平端、雙平端和突出端(overhanging)的雙 鏈DNA或RNA片段；反義RNA或其化合物類似物；轉(zhuǎn)錄為反義RNA或核酶的線性多核苷酸； 核酶；和病毒基因組。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括15_30個(gè)堿基 對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括15個(gè)堿基對(duì)。在一些 實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括16個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案 中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括17個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、 雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括18個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和 突出端的雙鏈DNA或RNA包括19個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的 雙鏈DNA或RNA包括20個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA 或RNA包括21個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包 括22個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括23個(gè)堿 基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括24個(gè)堿基對(duì)。在 一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括25個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施 方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括26個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平 端、雙平端和突出端的雙鏈DNA或RNA包括27個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端 和突出端的雙鏈DNA或RNA包括28個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端 的雙鏈DNA或RNA包括29個(gè)堿基對(duì)。在一些實(shí)施方案中，平端、雙平端和突出端的雙鏈DNA 或RNA包括30個(gè)堿基對(duì)。形成媒介物有用的合適的陽(yáng)離子聚合物包括但不限于直鏈或支鏈HK共聚物(組 氨酸和賴氨酸的共聚物)，直鏈或支鏈聚乙烯亞胺(PEI)，聚賴氨酸，直鏈或非直鏈的聚酰胺基胺，魚精蛋白硫酸鹽，polybrine,甲殼素，聚甲基丙烯酸酯，聚胺類，精胺類似物和任何 其他合適的聚合物。優(yōu)選的陽(yáng)離子聚合物是HK共聚物。在一些實(shí)施方案中，由聚組氨酸、聚賴氨酸、組 氨酸和/或賴氨酸的任何合適的結(jié)合物，合成HK共聚物。在一些實(shí)施方案中，HK共聚物是 直鏈的。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，HK共聚物是支鏈的。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，支鏈HK共聚物包括多肽主鏈。優(yōu)選地，多肽主鏈包括 1-10個(gè)氨基酸殘基，和更優(yōu)選2-5個(gè)氨基酸殘基。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，多肽主鏈由賴氨酸的氨基酸殘基組成。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，在支鏈HK共聚物上的主鏈數(shù)量比主鏈氨基酸殘基的 數(shù)量大1。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，支鏈HK共聚物含有1-11個(gè)支鏈。在一些更優(yōu)選的實(shí) 施方案中，支鏈HK共聚物含有2-5個(gè)支鏈。在一些甚至更優(yōu)選的實(shí)施方案中，支鏈HK共聚 物含有4個(gè)支鏈。在一些實(shí)施方案中，支鏈HK共聚物中的支鏈包括10-100個(gè)氨基酸殘基。在一些 優(yōu)選的實(shí)施方案中，支鏈包括10-50個(gè)氨基酸殘基。在一些更優(yōu)選的實(shí)施方案中，支鏈包括 15-25個(gè)氨基酸殘基。在一些實(shí)施方案中，支鏈HK共聚物中的支鏈在每5個(gè)氨基酸殘基的 子片段中包括至少3個(gè)組氨酸的氨基酸殘基。在一些其他實(shí)施方案中，支鏈在每4個(gè)氨基 酸殘基的子片段中包括至少3個(gè)組氨酸的氨基酸殘基。在一些其他實(shí)施方案中，支鏈在每3 個(gè)氨基酸殘基的子片段中包括至少2個(gè)組氨酸的氨基酸殘基。在一些其他實(shí)施方案中，支 鏈在每2個(gè)氨基酸殘基的子片段中包括至少1個(gè)組氨酸的氨基酸殘基。在一些實(shí)施方案中，至少50%的HK共聚物中的支鏈包括KHHH序列單元。在一些 優(yōu)選的實(shí)施方案中，至少75%的支鏈包括KHHH序列單元。在一些實(shí)施方案中，HK共聚物支鏈包括除了組氨酸或賴氨酸以外的氨基酸殘基。 在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，支鏈包括半胱氨酸的氨基酸殘基，其中半胱氨酸是N-末端的氨
基酸殘基。在一些實(shí)施方案中，合適的HK共聚物包括但不限于在美國(guó)專利Nos. 6692911、 7070807和7163695中出現(xiàn)的那些，所有這些在此通過(guò)參考引入?？稍诒景l(fā)明的媒介物中使用任何生物相關(guān)的靶向部分。在一些實(shí)施方案中，靶向 部分是小分子、多肽、肽、蛋白質(zhì)、抗體或片段，其二聚體、三聚體或低聚物。合適的生物相關(guān) 的小分子靶向部分包括但不限于靶向血管內(nèi)皮細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子；靶向血管損 傷和腫瘤的FGF2 ；靶向腫瘤的轉(zhuǎn)鐵蛋白；腫瘤靶向的促黑素細(xì)胞激素(a MSH)肽；LDL受體 靶向用ApoE和肽；靶向柯薩奇腺病毒受體(CAR)表達(dá)細(xì)胞用馮威勒布蘭特因子和肽；靶向 神經(jīng)菌毛素(NeuropiIin 1)的PDl和肽；靶向EGF受體表達(dá)細(xì)胞用EGF和肽；靶向葉酸酯 受體用的葉酸和配體；靶向整合素表達(dá)細(xì)胞用RGD肽和任何其他合適的靶向部分。另外，可 使用具有相同或類似靶向性能的上述部分中的任何片段或肽作為它們各自的目標(biāo)。除非另外定義，此處所使用的所有科技術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員通常 理解的那些相同的含義。盡管可在本發(fā)明的實(shí)踐或測(cè)試中使用與此處所述的那些類似或相 當(dāng)?shù)姆椒ê筒牧?，但此處描述了合適的方法和材料。這些材料、方法和實(shí)施例僅僅是闡述性 的，且不意圖限制。此處提及的所有出版物、專利和其他文獻(xiàn)在此通過(guò)參考全文弓I入。在本說(shuō)明書當(dāng)中，措辭“包括”或變體，例如“包含”或“含”要理解為暗含包括所述的整數(shù)或整數(shù)組，但不排除任何其他整數(shù)或整數(shù)組。 為了進(jìn)一步定義本發(fā)明，提供下述術(shù)語(yǔ)和定義。正如以上所使用的，和在整個(gè)說(shuō)明 書中，除非另有說(shuō)明，下述術(shù)語(yǔ)應(yīng)當(dāng)理解為具有下述含義“烷基”是指下述脂族烴基，它可以是直鏈或支鏈且在鏈內(nèi)包括約1-6個(gè)碳原子。 支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)烷基，例如甲基、乙基或丙基連接到直鏈烷基鏈上?！跋┗笔侵赶率鲋鍩N基，所述脂族烴基可以是直鏈或支鏈且含有至少一個(gè) 碳_碳雙鍵。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基，例如甲基、乙基或丙基連接到直鏈的烯基鏈 上。“炔基”是指下述脂族烴基，所述脂族烴基可以是直鏈或支鏈且含有至少一個(gè) 碳-碳三鍵。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基，例如甲基、乙基或丙基連接到直鏈炔基鏈上?！皝喭榛笔侵竿ㄟ^(guò)從以上定義的烷基中除去氫原子獲得的二價(jià)烷基?！胺蓟笔侵负泄曹楇p鍵的芳族單環(huán)或多環(huán)的環(huán)體系，其中與雙鍵締合的π -電 子結(jié)合任何參與的孤對(duì)電子、正電荷或負(fù)電荷滿足2η+2式，其中η是整數(shù)。芳基的實(shí)例包 括但不限于苯基和萘?！半s芳基”是指芳族單環(huán)或多環(huán)的環(huán)體系，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子是除了碳以外的 單獨(dú)或結(jié)合的元素，例如氮、氧或硫。在雜芳基詞根前面的前綴氮雜、氧雜或硫雜是指至少 氮、氧或硫原子分別以環(huán)原子形式存在。合適的雜芳基包括但不限于吡啶、吡咯、呋喃和噻 吩?！皝喯┗笔侵冈跓N鏈內(nèi)含有至少一個(gè)不飽和雙鍵的直鏈或支鏈的2-10個(gè)碳的二 價(jià)烴基。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基，例如甲基、乙基或丙基連接到直鏈亞烯基鏈上。“亞炔基”是指在烴鏈內(nèi)含有至少一個(gè)不飽和三鍵的直鏈或支鏈的2-10個(gè)碳的二 價(jià)烴基。支鏈?zhǔn)侵敢粋€(gè)或多個(gè)低級(jí)烷基，例如甲基、乙基或丙基連接到直鏈亞烯基鏈上?！胞u素”是指氟、氯、溴或碘取代基?！氨Ｗo(hù)基”是指在有機(jī)合成中臨時(shí)掩蓋選擇官能團(tuán)的特征化學(xué)所使用的基團(tuán)。此處 所述的方法和化合物用的合適的保護(hù)基包括但不限于在標(biāo)準(zhǔn)教科書，例如Greene，Τ. W等 A, Protective Groups inOrganic Synthesis, Wiley, N. Y. (1999)中描述的那些?！盎罨笔侵高B接到羥基上的部分，所述部分允許在相鄰碳原子上更面式 (facial)親核取代。合適的實(shí)例包括但不限于甲磺?；腿宜峄?。盡管我們前面列出了本發(fā)明的許多實(shí)施方案，但顯而易見(jiàn)的是，可改變我們的基 本結(jié)構(gòu)，提供利用本發(fā)明方法的其他實(shí)施方案。因此，要理解，通過(guò)所附的權(quán)利要求書，而不 是此處作為實(shí)例列出的具體實(shí)施方案來(lái)定義本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例實(shí)施例1 制備PEG-3400-甲酯將乙酰氯(2. 50ml, 35. 16mmol)加入到250ml甲醇中。攪拌這一混合物5分鐘， 然后加入到 Zalipsky 等人((J Bioactive and CompatiblePolymers, Vol. 5,227-231, (1990))制備的PEG-3400-單羧酸(20. Olg, 5. 81mmol)中。在室溫下攪拌24小時(shí)之后， 濃縮所得溶液至干。將殘?jiān)芙庠诙燃淄?15ml)中，并在劇烈攪拌下，將所得溶液加 入到醚(300ml)中。過(guò)濾所得固體，用醚洗滌，并真空干燥，以白色粉末形式得到所需的PEG-3400-甲酯(18. 93g，94%產(chǎn)率)。實(shí)施例2 制備PEG-3400-甲磺酸甲酯將實(shí)施例1的PEG-3400-甲酯產(chǎn)物(18. 93g，5. 45mmol)溶解在二氯甲烷(IOOml) 內(nèi)。添加二異丙基乙基胺(3. 80ml，21.81mmol)，接著添加甲磺酰氯(1. 27ml，16. 36mmol)。 在室溫下攪拌反應(yīng)18小時(shí)，之后用鹽水(90ml)、水(90ml)和6M HCl (20ml)的混合物分配 它。分離各層，并用二氯甲烷(3X60ml)洗滌水層。在無(wú)水硫酸鎂上干燥結(jié)合的有機(jī)層，過(guò) 濾并濃縮到約20ml。在快速攪拌下將所得材料傾倒在醚(300ml)中。過(guò)濾所得固體，用醚 洗滌，并真空干燥，以灰白色到淺棕色粉末形式得到所需產(chǎn)物(18. 99g,98% )。實(shí)施例3 制備PEG-3400-單羧酸羥基乙基硫化物將來(lái)自實(shí)施例2的PEG-3400-甲磺酸甲酯(18. 99g，5. 19mmol)產(chǎn)物加入到水 (150ml)和巰基乙醇(2. 92ml，41.55mmol)的混合物中。隨后添加2M氫氧化鈉(20. 80ml, 41. 60mmol)到該混合物中。加熱混合物至回流，并攪拌3小時(shí)，之后冷卻到室溫。添加氯 化鈉(50g)，并使用6M HCl酸化該混合物。然后用二氯甲烷(3X60ml)洗滌混合物。在無(wú) 水硫酸鎂上干燥結(jié)合的有機(jī)提取物，過(guò)濾并濃縮到約20ml。在快速攪拌下，將殘?jiān)鼉A倒在 醚(300ml)內(nèi)。過(guò)濾所得固體，用醚洗滌和真空干燥，從而以白色粉末形式提供所需產(chǎn)物 (17. 76g，97%產(chǎn)率)。實(shí)施例4 制備PEG-3400-單羧酸羥基乙基砜將來(lái)自實(shí)施例3的PEG-3400-單羧酸巰基乙醇產(chǎn)物(17. 76g，5. 04mmol)產(chǎn)物溶 解在水(40ml)中。添加鎢酸(1. 19g，4. 76mmol)，接著添加水(30ml)。添加30%過(guò)氧化氫 在水(2. 06ml)內(nèi)的溶液，并在室溫下攪拌反應(yīng)20小時(shí)。從反應(yīng)中過(guò)濾固體，并將氯化鈉 (20g)溶解在濾液內(nèi)。用二氯甲烷(3X60ml)洗滌所得溶液。在無(wú)水硫酸鎂上干燥結(jié)合的 有機(jī)物，過(guò)濾并濃縮到約20ml。在快速攪拌下，添加殘?jiān)矫?300ml)中。過(guò)濾所得固體， 用醚洗滌，并真空干燥，得到所需產(chǎn)物(17.658，98%產(chǎn)率)。實(shí)施例5 制備PEG-3400-甲酯羥乙基砜將乙酰氯(2. 50ml, 35. 16mmo 1)加入到甲醇(250ml)中，并在室溫下攪拌5分鐘。 然后將來(lái)自實(shí)施例4的PEG-3400-單羧酸羥基乙基砜產(chǎn)物(17. 65g，4. 97mmol)加入到該混 合物中。在室溫下攪拌3天之后，濃縮所得溶液至干。將殘?jiān)芙庠诙燃淄?20ml)中， 并在快速攪拌下，將所得溶液加入到醚(300ml)中。過(guò)濾所得固體，用醚洗滌，并真空干燥， 以白色粉末形式得到所需的甲酯(17. 08g，96%產(chǎn)率)。實(shí)施例6 制備PEG-3400-甲酯乙烯基砜將來(lái)自實(shí)施例5的PEG-3400-甲酯羥乙基砜產(chǎn)物(17. 08g, 4. 79mmol)溶解在二氯 甲烷(115ml)中，添加2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(10. 6mg，0. 048mmol)和二異丙基乙基 胺(5.00ml，28. 75mmol)，接著添加甲磺酰氯(1. 12ml，14. 38mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)17 小時(shí)，之后用鹽水(135ml)、水(135ml)和6M HCl (30ml)的混合物分配它。分離各層，并用 二氯甲烷(3X60ml)洗滌水層。在無(wú)水硫酸鎂上干燥結(jié)合的有機(jī)提取物，過(guò)濾并濃縮到約 20ml。在快速攪拌下，將殘?jiān)鼉A倒在醚(300ml)內(nèi)。過(guò)濾該固體，用醚洗滌，并真空干燥，以 灰白色到淺棕色粉末形式得到所需產(chǎn)物(16. 64g，98%產(chǎn)率)。實(shí)施例7 制備PEG-3400-單羧酸乙烯基砜將NaOH(lM在水中，7. 04ml)加入到水(340ml)中，并將稀釋的NaOH溶液加入到
24來(lái)自實(shí)施例6的甲酯乙烯基砜產(chǎn)物(16.64g，4.69mm0l)中。在室溫下攪拌反應(yīng)15分鐘，之 后用6M HCl酸化它。將氯化鈉(96g)溶解在混合物內(nèi)，并用二氯甲烷(5X60ml)提取該產(chǎn) 物。在無(wú)水硫酸鎂上干燥結(jié)合的有機(jī)提取物，過(guò)濾并濃縮到約20ml。在快速攪拌下，將殘?jiān)?傾倒在醚(300ml)內(nèi)。過(guò)濾該固體，用醚洗滌，并真空干燥，以灰白色到淺棕色粉末形式得 到所需產(chǎn)物(16. 00g，97%產(chǎn)率)。實(shí)施例8 制備PEG-3400對(duì)硝基苯酯乙烯基砜(DCC方法)將二環(huán)己基碳二酰亞胺(1. 40mg,6. 80mmol)溶解在二氯甲烷(55ml)中，并添加 4-硝基苯酚(2. 85g，20. 39mmol)。在室溫下攪拌該混合物30分鐘，之后，添加來(lái)自實(shí)施例 7的PEG-3400-單羧酸乙烯基砜產(chǎn)物(16. OOg, 4. 53mmol)和2，6- 二叔丁基-4-甲基苯酚 (10.0mg，0.045mmOl)。在室溫下攪拌反應(yīng)22小時(shí)，之后，用乙酸乙酯(97ml)稀釋它。過(guò)濾 所得沉淀并用乙酸乙酯(50ml)洗滌濾液。濃縮所得溶液到約50ml。過(guò)濾所得沉淀，并用 乙酸乙酯(20ml)洗滌。在快速攪拌下，將所得溶液傾倒在醚(300ml)內(nèi)。通過(guò)過(guò)濾，收集 所得固體，并用醚洗滌，和真空干燥。從含2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(12.4mg)的異丙醇 (IOOml)中重結(jié)晶固體，以灰白色到淺棕色固體形式得到所需產(chǎn)物(15.878，96%產(chǎn)率)。實(shí)施例9 制備PEG-3400對(duì)硝基苯酯乙烯基砜(三氟乙酰基硝基苯酚方法)在含五氧化二磷作為干燥劑的真空干燥器內(nèi)，真空干燥實(shí)施例7制備的PEG-3400 單羧酸乙烯基砜產(chǎn)物(528. 2mg,0. 15mmol)24小時(shí)。將干燥的PEG-3400單羧酸乙烯基砜 (5. 35g，1. 51mmol)和 2,6- 二叔丁基-4-甲基苯酚(3. 34mg，0. 015mmol)溶解在無(wú)水吡啶 (5. 35ml)中。添加三氟乙?；趸椒?1.60g，6.81mmOl)，并在室溫下攪拌反應(yīng)30分鐘。 然后，在快速攪拌下，將該混合物傾倒在醚(300ml)內(nèi)。過(guò)濾所得固體，用醚洗滌，并真空干 燥，以灰白色到淺棕色固體形式得到所需產(chǎn)物(5. 42g，98%產(chǎn)率)。實(shí)施例10 制備PEG-8000對(duì)硝基苯酯乙烯基砜基本上如 Zalipsky 等人(J. Bioactive and Compatible Polymers,5 227-231 (1990))所述，制備PEG-8000單羧酸。根據(jù)前面所述的實(shí)施例1_7和9，制備 PEG-8000對(duì)硝基苯酯乙烯基砜。實(shí)施例11 制備單羧酸乙烯基砜在甲苯(300ml)中共沸干燥根據(jù)Zalipsky 等人(J. Bioactive andCompatible Polymers，Vol. 5，227-231，(1990))制備的 PEG-3400-單羧酸(20. 0g，5. 80mmol)。在干 燥工藝過(guò)程中，通過(guò)蒸餾，除去甲苯(240ml)，并冷卻所得溶液到室溫。添加無(wú)水二氯甲烷 (600ml)，接著添加氫化鈉(60%，1.88g，47mmOl)。在氦氣下，在室溫下攪拌反應(yīng)3小時(shí)，之 后添加二乙烯基砜(29. 5ml，294mmol)。在氦氣下，在室溫下攪拌反應(yīng)24-72小時(shí)，之后添 加冰醋酸(5ml)。然后通過(guò)過(guò)濾除去不溶物，并濃縮濾液到小的體積。將殘?jiān)鼉A倒在冷的 醚內(nèi)。過(guò)濾所得固體，真空干燥，并溶解在含氯化鈉(5g)的水(1000ml)中。用二氯甲烷 (3X300ml)洗滌所得溶液。在無(wú)水硫酸鈉上干燥結(jié)合的有機(jī)提取物，過(guò)濾并濃縮。將殘?jiān)鼉A 倒在冷醚內(nèi)，并過(guò)濾所得固體，和用冷醚洗滌。將所得固體溶解在溫?zé)岬漠惐?50-60°C) 內(nèi)，和允許所得溶液冷卻到室溫過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾收集所得固體，用冷異丙醇洗滌并真空干 燥，提供粗產(chǎn)物(10-14g，50-70%產(chǎn)率)。用四硼酸鉀(在水中10%的溶液)，接著用水處理DEAE-S印hadex柱(直徑1英 寸)(5g)，直到洗脫液達(dá)到中性pH。將粗產(chǎn)物(4g)溶解在水(35ml)中，并在低的氮?dú)鈮毫o助下，施加到柱子上。用水洗脫該柱子，直到洗脫液不含PEG有關(guān)的物質(zhì)，這通過(guò)使用聚 丙烯酸(PAA)試驗(yàn)來(lái)測(cè)定。然后用氯化鈉溶液(8mM在水中)洗脫柱子，并收集餾分，直到 使用PAA試驗(yàn)檢測(cè)不到PEG有關(guān)的物質(zhì)。用冰醋酸酸化含所得產(chǎn)物的餾分到PH4-5，并將產(chǎn) 物提取到二氯甲烷內(nèi)。在無(wú)水硫酸鈉上干燥二氯甲烷，過(guò)濾并濃縮。將殘?jiān)鼉A倒在冷醚內(nèi)， 并過(guò)濾所得固體，和真空干燥，得到所需產(chǎn)物(2. 2g，來(lái)自柱子的產(chǎn)率為55% )。
權(quán)利要求
一種含式(I)的化合物的試劑其中Y選自C1 C6亞烷基、C2 C6亞烯基和C2 C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代基R2任選取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1 C6烷基，支鏈或直鏈C2 C6烯基，支鏈或直鏈C2 C6炔基，羥基，C1 C6烷氧基，CO2H，CO2(C1 C6烷基)，CONH2，CONH(C1 C6烷基)，CON(C1 C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R1是C6 C14芳基，或含選自N、N(R7)、O、S和S(O)m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5 C14雜芳基，其中m為1或2，和其中R1被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H，支鏈或直鏈C1 C6烷基，支鏈或直鏈C2 C6烯基，支鏈或直鏈C2 C6炔基，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1 C6烷基，支鏈或直鏈C2 C6烯基，支鏈或直鏈C2 C6炔基，羥基，NH2，NH(C1 C6烷基)，N(C1 C6烷基)2，C1 C6烷氧基，CO2H，CO2(C1 C6烷基)，CONH2，CONH(C1 C6烷基)，CON(C1 C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；和n是整數(shù)1 1500。FPA00001160954200011.tif
2.權(quán)利要求1的試劑，其中η是整數(shù)5-1000。
3.權(quán)利要求2的試劑，其中η是整數(shù)20-500。
4.權(quán)利要求3的試劑，其中η是整數(shù)50-250。
5.權(quán)利要求1的試劑，其中Y是亞甲基。
6.權(quán)利要求1的試劑，其中R1選自苯基、吡啶基、嘧啶基和萘基。
7.權(quán)利要求1的試劑，其中R1是苯基。
8.權(quán)利要求1的試劑，其中R1是苯基和R8是硝基。
9.生產(chǎn)式(VIII)的化合物的方法， 該方法包括下述步驟 (a)使式(IV)的化合物 與活化基反應(yīng)，形成式(IVa)的化合物 (b)使式(IVa)的化合物與式(V)的化合物反應(yīng) (V),形成式(VI)的化合物 (VI)；(C)氧化式(VI)的化合物，形成式(VII)的化合物 (VII)；和(d)使式(VII)的化合物脫水，形成式(VIII)的化合物 其中W是C1-C6亞烷基，其被一個(gè)或多個(gè)取代基R11任選取代； A是C1-C6I-偏亞烷基，其被一個(gè)或多個(gè)取代基R11任選取代； R11獨(dú)立地選自H、支鏈或直鏈C1-C6烷基、支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔 基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2， 硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；Y選自C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基和C2-C6亞炔基，其中Y被一個(gè)或多個(gè)取代基R2任選 取代；R2獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基，支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝 基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R3是H，支鏈或直鏈C1-C6烷基，支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基，C6-C14芳 基，或含選自N、N (R7)、0、S和S (0) m中的一個(gè)或多個(gè)雜原子的C5-C14雜芳基，其中m為1或 2，和其中R3被一個(gè)或多個(gè)取代基R8任選取代；R7選自H，支鏈或直鏈C1-C6烷基，支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基，其中 在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R8獨(dú)立地選自支鏈或直鏈C1-C6烷基，支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基， 羥基，NH2, NH(C1-C6 烷基)，N(C1-C6 烷基)2，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH(C1-C6烷基)，CON(C1-C6烷基)2，硝基，氰基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一 個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R9 選自 CH3S (0) 2-0-, CF3S (0) 2-0-, CH3 (C6H4) S (0) 2_0_、Cl、Br 禾口 I ；R12選自H，支鏈或直鏈C1-C6烷基，支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基，羥基，C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝基，氰 基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代；R13選自H，支鏈或直鏈C1-C6烷基，支鏈或直鏈C2-C6烯基，支鏈或直鏈C2-C6炔基，羥基， C1-C6 烷氧基，CO2H, CO2 (C1-C6 烷基)，CONH2, CONH (C1-C6 烷基)，CON (C1-C6 烷基)2，硝基，氰 基和鹵素，其中在烷基、烯基或炔基鏈內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氫可被一個(gè)或多個(gè)氟取代； 和η是整數(shù)1-1500。
10.權(quán)利要求9的方法，其中W是亞甲基。
11.權(quán)利要求9的方法，其中A是偏亞甲基。
12.權(quán)利要求9的方法，其中活化步驟(a)包括使式(IV)的化合物與甲磺酰氯和堿反應(yīng)。
13.權(quán)利要求9的方法，其中氧化劑包括過(guò)氧化氫。
14.權(quán)利要求9的方法，其中脫水步驟(d)包括使式(VII)的化合物與亞硫酰氯和堿反應(yīng)。
15.權(quán)利要求9的方法，其中脫水步驟(d)包括使式(VII)的化合物與甲磺酰氯和堿反應(yīng)。
16.權(quán)利要求9的方法，其中η是整數(shù)5-1000。
17.權(quán)利要求16的方法，其中η是整數(shù)20-500。
18.權(quán)利要求17的方法，其中η是整數(shù)50-250。
19.權(quán)利要求9的方法，其中R3是H。
20.權(quán)利要求9的方法，其中R3是甲基。
21.權(quán)利要求9的方法，其中R3選自苯基、吡啶基、嘧啶基和萘基。
22.權(quán)利要求21的方法，其中R3是苯基。
23.權(quán)利要求22的方法，其中R3是苯基和R8是硝基。
全文摘要
本發(fā)明涉及雜雙官能的聚乙二醇試劑，生產(chǎn)它們的方法及其使用方法。
文檔編號(hào)C08G65/334GK101903439SQ200880121726
公開(kāi)日2010年12月1日 申請(qǐng)日期2008年11月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月12日
發(fā)明者D·E·萊維, S·M·夏莫, S·扎里普斯基 申請(qǐng)人:因特拉迪格姆公司