專利名稱：氯霉素分子印跡聚合物微球的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種聚合物微球的制備方法。
背景技術：
氯霉素(Chloramphenicol, CAP)是一種殺菌力極強的廣譜抗生素，由于 其優(yōu)良的抗菌性、穩(wěn)定的藥性、低廉的價格，而廣泛作為飼料添加劑，用于治 療細菌性疾病。但研究發(fā)現(xiàn)CAP對骨髓和新生兒有較大的毒性，易引起人體血 中毒、導致不可逆的再生障礙性貧血等嚴重的毒副作用，對人類的健康構成巨 大的潛在烕脅。
痕量CAP檢測方法(微生物法、免疫分析法、色譜法、色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、 超臨界流體色譜法等)已經(jīng)比較成熟。但由于樣品中CAP殘留濃度低，基體成 分復雜，且常規(guī)樣品前處理方法步驟繁瑣，嚴重限制了常規(guī)快速檢測方法和儀 器分析方法對樣品中CAP殘留的有效檢測。并且常用的吸附劑選擇性較差，在 富集分析物的同時，大量基體和干擾物質(zhì)也被富集，導致洗脫液中仍含有基體 和雜質(zhì)，干擾最后的色譜分析。
分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymers, MIPs)是一種具有較強 分子識別能力的新型高分子仿生材料，其具有類抗體的特異性、高選擇性、高 強度等優(yōu)點，具有預定性、識別性和實用性等特點，可以滿足作為吸附劑的要 求。分子印跡聚合物的制備多采用本體聚合法，此制備方法雖然簡單，但是其 后處理過程過于冗長和繁瑣(要經(jīng)過研磨、篩分、漂洗，加之得到的顆粒不規(guī) 則，嚴重影響了聚合物對模板分子的特異性選擇。目前制備分子印跡微球 (molecularly imprinted polymeric microspheres, MIPM)的方法主要有分散聚合 法、多步溶脹法和沉淀聚合法等，采用分散聚合法可以制備粒徑可控、形狀規(guī) 則的分子印跡微球，但是所使用的全氟代高聚合物分散劑價格昂貴；而多步溶 漲法雖然可以在極性溶劑中制備印跡微球，但是操作過程繁瑣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術問題是為了解決采用本體聚合法得到的分子印跡聚合物顆粒不規(guī)則、容易團聚的問題，提供了一種氯霉素分子印跡聚合物微球 的制備方法。
本發(fā)明氯霉素分子印跡聚合物微球的制備方法如下 一、將甲基丙烯酸與 氯霉素按照2 : 1的摩爾比溶于乙腈中，其中氯霉素與乙腈的比為1 mmol : 100 mL，然后在震蕩頻率為110Hz的條件下震蕩5h，再加入乙二醇二甲基丙烯酸 酯和偶氮二異丁腈，得到混合物，將混合物在超聲頻率為40KHz、超聲功率 為150W條件下超聲處理5min，再充氮氣除氧后密封；二、將密封后的混合 物在60。C恒溫水浴中加熱24h，然后冷卻、離心、棄去上清液，得到沉淀物， 再將沉淀物自然干燥；三、將步驟二得到的沉淀物用體積濃度為10%的乙酸甲 醇溶液洗滌脫除去氯霉素，直至用高效液相色譜檢測不到氯霉素，再用甲醇洗 滌5h、干燥，即得氯霉素分子印跡聚合物微球；步驟一中乙二醇二甲基丙烯 酸酯與氯霉素的摩爾比為26 : 1;步驟一中乙二醇二甲基丙烯酸酯與偶氮二異 丁腈的比為26mmo1 : 8 mg。
采用本發(fā)明方法得到的氯霉素分子印跡聚合物微球的顆粒形狀規(guī)則，大小 均一，沒有團聚現(xiàn)象，增加了氯霉素分子印跡聚合物微球的比表面積，從而提 高了氯霉素分子印跡聚合物微球的吸附性。本發(fā)明方法簡單，所用的原材料氯 霉素分子可以回收利用，減少了生產(chǎn)成本，本發(fā)明所得的氯霉素分子印跡聚合 物微球具有預定性、識別性和實用性的特點，可以用做固相萃取柱和基質(zhì)固相 分散技術的填料，能夠分離、富集樣品中的痕量氯霉素。沉淀聚合又稱非均相 溶液聚合，是指聚合反應所使用的單體和交聯(lián)劑及引發(fā)劑可溶于分散劑中，產(chǎn) 生的聚合物不溶而易沉淀，而本發(fā)明方法不需在反應體系中加入任何穩(wěn)定劑， 因此制備的聚合物微球表面潔凈，可避免由穩(wěn)定劑或表面活性劑對模板分子的 非選擇性吸附。


圖1是具體實施方式
一所得氯霉素分子印跡聚合物微球的掃描電鏡顯微 照片。圖2是具體實施方式
一所得氯霉素分子印跡聚合物單個微球放大20000 倍的掃描電鏡顯微照片。
具體實施例方式
本發(fā)明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式
，還包括各具體實施方式
間的任意組合。
具體實施方式
一本實施方式中氯霉素分子印跡聚合物微球的制備方法如 下 一、將甲基丙烯酸與氯霉素按照2 : 1的摩爾比溶于乙腈中，其中氯霉素
與乙腈的比為lmmol : 100 mL，然后在震蕩頻率為110Hz的條件下震蕩5 h， 再加入乙二醇二甲基丙烯酸酯和偶氮二異丁腈，得到混合物，將混合物在超聲 頻率為40KHz、超聲功率為150W條件下超聲處理5min，再充氮氣除氧后密 封；二、將密封后的混合物在60'C恒溫水浴中加熱24h，然后冷卻、離心、 棄去上清液，得到沉淀物，再將沉淀物自然干燥；三、將步驟二得到的沉淀物 用體積濃度為10%的乙酸甲醇溶液洗滌脫除去氯霉素，直至用高效液相色譜檢 測不到氯霉素，再用甲醇洗滌5h、干燥，即得氯霉素分子印跡聚合物微球； 步驟一中乙二醇二甲基丙烯酸酯與氯霉素的摩爾比為26 : 1;步驟一中乙二醇
二甲基丙烯酸酯與偶氮二異丁腈的比為26mmo1 : 8 mg。
圖1是本實施方式所得所得氯霉素分子印跡聚合物微球放大5000倍的掃 描電鏡顯微照片。由圖1可以看出采用本發(fā)明方法得到的氯霉素分子印跡聚合 物微球的顆粒形狀規(guī)則，大小均一，沒有團聚現(xiàn)象，增加了氯霉素分子印跡聚 合物微球的比表面積，從而提高了氯霉素分子印跡聚合物微球的吸附性。
圖2是本實施方式所得氯霉素分子印跡聚合物單個微球放大20000倍的掃 描電鏡顯微照片。由圖2可知在氯霉素分子印跡聚合物微球表面結構中有孔 穴，此孔穴在痕量檢測氯霉素時，有利于氯霉素的富集。
具體實施方式
二本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟三中在索氏 提取器中用乙酸甲醇溶液洗滌步驟二得到的沉淀物。其他與具體實施方式
一相 同。
具體實施方式
三本實施方式中利用沉淀聚合法制備不加氯霉素模板分子 的空白聚合物的制備方法如下 一、將2 mmol甲基丙烯酸溶于100 mL乙腈 中，然后在震蕩頻率為110Hz的條件下震蕩5h，再加入乙二醇二甲基丙烯酸 酯和偶氮二異丁腈，得到混合物，將混合物在超聲頻率為40KHz、超聲功率 為150W條件下超聲處理5min，再充氮氣除氧后密封；二、將密封后的混合 物在60。C恒溫水浴中加熱24h，然后冷卻、離心、棄去上清液，得到沉淀物， 再將沉淀物自然干燥；三、將步驟二得到的沉淀物用體積濃度為10%的乙酸甲醇溶液洗滌脫除去殘余的單體和交聯(lián)劑等物質(zhì)，再用甲醇洗滌5 h去除乙酸、 干燥，即得氯霉素分子印跡聚合物；步驟一中乙二醇二甲基丙烯酸酯與偶氮二 異丁腈的比為26mmo1 : 8 mg。
分別稱取具體實施方式
一所得的氯霉素分子印跡聚合物微球和具體實施 方式三所得的空白聚合物微球30.00mg，然后分別置于兩個磨口錐形瓶中，再 向兩個磨口錐形瓶中加入5mL氯霉素濃度為lng/ml的氯霉素乙腈溶液，恒溫 振蕩12h，然后過濾，采用美國Waters公司生產(chǎn)的型號為2695的高效液相色譜 儀對濾液進行測試，平行測定3次，取平均值，分別計算平衡吸附液中游離氯 霉素的濃度，計算氯霉素分子印跡聚合物和空白聚合物對氯霉素的吸附量QOxg /g)，計算結果如表l:
表l
聚合物吸附量Q(嗎/g)吸附率 (%)相對標準偏差 RSD (%)
具體實施方式
一所得氯霉素分 子印跡聚合物微球511293.2 1042.8
空白印跡聚合物微球42340 471.6
由表l看出采用具體實施方式
一的方法制備的氯霉素分子印跡聚合物微球 對氯霉素的吸附量、吸附率均比空白聚合物的吸附量、吸附率高，即采用具體 實施方式一的方法制備的氯霉素分子印跡聚合物微球?qū)β让顾氐奈叫Ч谩?br> 權利要求
1、氯霉素分子印跡聚合物微球的制備方法，其特征在于氯霉素分子印跡聚合物微球的制備方法如下一、將甲基丙烯酸與氯霉素按照2∶1的摩爾比溶于乙腈中，其中氯霉素與乙腈的比為1mmol∶100mL，然后在震蕩頻率為110Hz的條件下震蕩5h，再加入乙二醇二甲基丙烯酸酯和偶氮二異丁腈，得到混合物，將混合物在超聲頻率為40KHz、超聲功率為150W條件下超聲處理5min，再充氮氣除氧后密封；二、將密封后的混合物在60℃恒溫水浴中加熱24h，然后冷卻、離心、棄去上清液，得到沉淀物，再將沉淀物自然干燥；三、將步驟二得到的沉淀物用體積濃度為10％的乙酸甲醇溶液洗滌脫除去氯霉素，直至用高效液相色譜檢測不到氯霉素，再用甲醇洗滌5h、干燥，即得氯霉素分子印跡聚合物微球；步驟一中乙二醇二甲基丙烯酸酯與氯霉素的摩爾比為26∶1；步驟一中乙二醇二甲基丙烯酸酯與偶氮二異丁腈的比為26mmol∶8mg。
2、 根據(jù)權利要求1所述的氯霉素分子印跡聚合物微球的制備方法,其特征在于步驟三中在索氏提取器中用乙酸甲醇溶液洗滌步驟二得到的沉淀物。
全文摘要
氯霉素分子印跡聚合物微球的制備方法，它涉及一種聚合物微球的制備方法。本發(fā)明解決了采用本體聚合法得到的分子印跡聚合物顆粒不規(guī)則、容易團聚的問題。本方法如下一、將甲基丙烯酸與氯霉素溶于乙腈中震蕩后再加入乙二醇二甲基丙烯酸酯和偶氮二異丁腈，得到混合物，將混合物超聲處理，再充氮氣除氧后密封；二、將密封后的混合物加熱聚合數(shù)小時后冷卻、離心，再將沉淀物自然干燥；三、將沉淀物脫除去氯霉素，再用甲醇洗滌5h、干燥，即得氯霉素分子印跡聚合物微球。采用本發(fā)明方法得到的氯霉素分子印跡聚合物微球的顆粒形狀規(guī)則，大小均一，沒有團聚現(xiàn)象，增加了氯霉素分子印跡聚合物微球的比表面積，從而提高了吸附性。
文檔編號C08J9/26GK101591412SQ20091007216
公開日2009年12月2日 申請日期2009年6月3日 優(yōu)先權日2009年6月3日
發(fā)明者佘永新, 靜 王, 王培龍, 王榮艷 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術研究所