專利名稱：得到改性聚乙二醇中間體的合成的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供通過合成改性聚乙二醇得到用于制備氨氧基聚乙二醇化連接子的中間體的新型合成。
背景技術(shù)：
在固體基質(zhì)上制備生物分子例如肽或寡核苷酸及其它有機(jī)化合物在采用稱為連接子的雙官能間隔分子時(shí)得到更好地實(shí)施。連接子的兩個(gè)反應(yīng)性官能度之一最常通過穩(wěn)定的酰胺鍵永久地附著于適當(dāng)官能化的樹脂，而生長(zhǎng)中的分子暫時(shí)連接于連接子的另一個(gè)反應(yīng)性位點(diǎn)。盡管大部分連接子依賴于酸解從載體釋放最終分子，但是已經(jīng)開發(fā)了利用不同的機(jī)制(例如光解、氟解(fluoridolysis)和堿催化的β-消除)用于最終裂解。另外，重要的是指出與特定細(xì)胞類型選擇性相互作用的生物活性分子對(duì)于向靶標(biāo)組織傳遞放射性是有用的。例如，用放射性同位素標(biāo)記的肽對(duì)于向腫瘤、梗塞和受感染的組織傳遞放射性核素用于診斷成像和放射治療具有顯著的潛力。wF(其半衰期約110分鐘) 是許多受體成像研究精選的發(fā)射正電子的核素。因此，18F-標(biāo)記的生物活性肽因?yàn)樗鼈冊(cè)?PET中定量檢測(cè)和表征眾多疾病的用途而具有巨大的臨床潛力。新血管可通過兩種不同機(jī)制形成血管發(fā)生(vasculogenesis)或血管再生 (angiogenesis).血管再生是通過從現(xiàn)有血管分支而形成新血管。該過程的主要刺激可能是向組織中的細(xì)胞供給的營(yíng)養(yǎng)物和氧不足(缺氧)。細(xì)胞可通過分泌血管形成 (angiogenic)因子來應(yīng)答，血管形成因子有很多種，一個(gè)經(jīng)常提到的實(shí)例是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)。這些因子啟動(dòng)蛋白水解酶(其分解基底膜的蛋白)以及抑制劑(其限制這些潛在有害的酶的作用)的分泌。血管形成因子的其它顯著作用為引起內(nèi)皮細(xì)胞遷移和分化。附著于基底膜(它在對(duì)腔(contralumenal)側(cè)的血管周圍形成連續(xù)層)的內(nèi)皮細(xì)胞不經(jīng)歷有絲分裂。對(duì)于血管形成因子，附著的喪失和來自受體的信號(hào)的組合效果是引起內(nèi)皮細(xì)胞移動(dòng)、繁殖和自身重排(rearrange)，并最終在新血管周圍合成基底膜。血管再生在組織生長(zhǎng)和重塑(包括傷口愈合和炎性過程)中是顯著的。腫瘤在它們達(dá)到毫米大小時(shí)必須啟動(dòng)血管再生以趕上它們的生長(zhǎng)速率。血管再生伴隨內(nèi)皮細(xì)胞及其環(huán)境的特征變化。除了涉及影響和控制蛋白質(zhì)水解的蛋白質(zhì)的多樣化以外，這些細(xì)胞的表面被重塑以備遷移，并且隱蔽結(jié)構(gòu)在基底膜被降解之處曝露。在腫瘤的情況中，得到的血管網(wǎng)絡(luò)通?；靵y，形成急劇扭結(jié)以及動(dòng)靜脈短路。抑制血管再生也被認(rèn)為是抗腫瘤治療的一個(gè)有前景的策略。伴隨血管再生的轉(zhuǎn)化對(duì)于診斷也是非常有前景的，一個(gè)實(shí)例為惡性疾病， 但是該概念在炎癥和多種炎癥相關(guān)疾病(包括動(dòng)脈粥樣硬化)中也顯示巨大前景，早期動(dòng)脈粥樣硬化性病變的巨噬細(xì)胞是血管形成因子的潛在來源。與細(xì)胞粘附有關(guān)的許多配體含有三肽序列精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)。RGD 序列似乎充當(dāng)呈現(xiàn)該序列的配體與細(xì)胞表面上的受體之間的主要識(shí)別位點(diǎn)。通常認(rèn)為，配體與受體之間的次要相互作用增強(qiáng)相互作用的特異性。這些次要相互作用可發(fā)生在直接鄰近于RGD序列的配體與受體的部分之間或在遠(yuǎn)離RGD序列的位點(diǎn)。
因此，在體內(nèi)與血管再生相關(guān)的整聯(lián)蛋白受體的有效靶向和成像需要選擇性的， 高親合力的基于RGD的載體，該載體在化學(xué)上強(qiáng)健和穩(wěn)定。此外，為了減少背景問題，分泌路徑在設(shè)計(jì)顯像劑時(shí)是重要因素。W006/030291涉及使用基于肽的化合物作為靶向載體，其結(jié)合于與血管再生有關(guān)的受體。另外，WO 2006/030291描述了可快速制備的對(duì)于診斷成像有用的基于肽的化合物。 本發(fā)明描述了得到用于得到改性Boc-保護(hù)的氨氧基，-COOCH(CH3)3，PEG連接子的中間體的新型合成。然后可將該P(yáng)EG連接子附著于基于肽的片段以形成基于Boc-保護(hù)的氨氧基肽的化合物。之后合成基于Boc-保護(hù)的氨氧基肽的化合物以得到可用于血管再生的基于放射性同位素標(biāo)記的肽的化合物。本文的參考文獻(xiàn)的討論或引用不應(yīng)視為承認(rèn)這樣的參考文獻(xiàn)是本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。發(fā)明概述本發(fā)明提供用于得到非對(duì)稱聚乙二醇化連接子的新型中間體合成。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案描繪了用于制備式(Kl)的連接子的方法，該方法包括以下反應(yīng)
權(quán)利要求
1. 一種用于制備形成式(Kl)連接子的中間體El和Ll的方法，所述方法包括以下反 以下的混合物
2.一種用于制備權(quán)利要求1的化合物El和Ll的方法，其中通過提取或結(jié)晶從Ll分離 Hl 禾口 Gl0
3.權(quán)利要求1的方法，其中Cl與El反應(yīng)形成F1、G1和El的混合物，其中通過在兩個(gè)末端羥基引入離去基團(tuán)(LG)從聚丙二醇制備E1。
4.權(quán)利要求3的方法，其中優(yōu)選的溫度為約22°C和優(yōu)選的時(shí)間為約5-8小時(shí)。
5.權(quán)利要求1的方法，其中F1、G1和El的混合物與鄰苯二甲酰亞胺鹽反應(yīng)形成Hl、G1 和Ll的混合物。
6.權(quán)利要求5的方法，其中Fl、Gl和El的混合物與鄰苯二甲酰亞胺鹽在約30°C-約 70°C范圍內(nèi)的溫度反應(yīng)約1小時(shí)-約4小時(shí)形成HI、Gl和Ll的混合物。
7.權(quán)利要求1的方法，其中通過層析或結(jié)晶從Gl分離HI。
全文摘要
本發(fā)明提供用于在得到保護(hù)基氨氧基PEG連接子的合成中得到中間體的新型和更有效的合成。
文檔編號(hào)C08G65/329GK102325823SQ200980157390
公開日2012年1月18日 申請(qǐng)日期2009年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月22日
發(fā)明者T·恩格爾 申請(qǐng)人:通用電氣健康護(hù)理有限公司