專利名稱：一種女貞子多糖的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種女貞子多糖的制備方法，尤其是一種利用壓榨、Sevage法和超濾 膜技術(shù)提取純化女貞子多糖的方法。
背景技術(shù)：
女貞子多糖是女貞子具有多種功效的物質(zhì)基礎(chǔ)之，現(xiàn)代藥理研究表明女貞子多糖 有抗氧化、抗衰老、增強免疫等功效，經(jīng)鑒定主要由鼠李糖，阿拉伯糖，葡萄糖及巖藻糖四種 糖組成，分子量在2-100萬之間。鼠李糖為甘露糖6位的一個羥基被氫取代的衍生物，即6-脫氧-L-甘露糖。又稱 甲基戊糖。和墨角藻糖并列的典型6-脫氧己糖的一種。是甘露糖的第6位脫氧，最后變 成-CH3的化合物，天然分布的是L型，也有稱為6-脫氧-L-甘露糖(6-de-oxy-L-marmose) 的。分子式C6H1205。純品鼠李糖為無色結(jié)晶性粉末，能溶于水和甲醇，微溶于乙醇，其結(jié)晶 呈兩種形式，α型和β型。α型含有一分子結(jié)晶水，加熱后失去結(jié)晶水，轉(zhuǎn)變?yōu)棣滦?分 子量為164. 16) ； β型極易吸濕，在空氣中吸潮轉(zhuǎn)變?yōu)棣列汀３Ｒ姷臑棣?L-鼠李糖，其分 子量為182. 11在通常的條件下得a-L-鼠李糖一水合物結(jié)晶，片狀晶體，熔點82_92°C，比 旋光度-7. 7° — +8. 9°，溶于水和乙醇；β -L-鼠李糖(無水)為針狀晶體有吸濕性，熔點 122-126°C，+38.4° —+8.9°，溶于水和乙醇。有甜味，在水溶液中以吡喃形式存在。有還 原性，用溴水氧化生成鼠李酸，經(jīng)硝酸氧化生成L-阿拉伯三羥戈二酸。用鈉汞齊還原則得 鼠李糖醇。L-阿拉伯糖，又被稱為L(+)_樹膠醛糖、L(+)_阿戊糖、果膠糖等，英文名稱為 L-Arabinose，分子式C6H1205。L-阿拉伯糖為白色結(jié)晶性粉末，無氣味，有甜味(甜度為蔗糖 的 50%左右)，熔點 159-160°C，相對密度 1.625，比旋光度+190. 5° — +104. 5° (C = 3)， 溶于水，但溶解度低于蔗糖；對熱和酸的穩(wěn)定性高。葡萄糖(glucose)生化簡寫G，是己醛糖，化學(xué)式=C6H12O6，分子量180。白色晶體， 易溶于水，味甜，熔點146 °C。巖藻糖(fucose)是六碳糖的一種，又稱6_脫氧_L_半乳糖，并可以看做是一種甲 基戌糖。自然界存在的巖藻糖絕大多數(shù)為L-巖藻糖，D構(gòu)型的巖藻糖僅作為稀有糖，發(fā)現(xiàn)于 一些糖甘類化合物中。L-巖藻糖較大量地存在于海藻及樹膠中，也發(fā)現(xiàn)于某些細(xì)菌的多糖 中。巖藻糖作為糖蛋白中糖鏈的組成部分，廣泛存在于各類細(xì)胞表面的質(zhì)膜上。巖藻糖比一 般六碳糖在第六碳原子上少一個羥基，所以巖藻糖比其他單糖親水性弱，而疏水性強一些。 在某些血型物質(zhì)分子中的巖藻糖是一定的血型的標(biāo)記。0-1^-巖藻糖結(jié)晶，熔點1451。分 子式=C6H12O5，分子量164。有關(guān)女貞子多糖的提取方法報道很少，方法比較局限。現(xiàn)有方法是原料脫脂，醇 提，水提、濃縮、萃取、脫色、洗滌、干燥，得到產(chǎn)品，如張興輝等《不同產(chǎn)地女貞子中多糖的含 量測定》，李曼玲等《女貞子不同部位多糖的提取及含量測定》。脫脂使用石油醚，用量大、毒 性大；工藝所用有機溶劑種類多，容易導(dǎo)致有效成分流失。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種操作簡單，生產(chǎn)安全，純度較高的女貞子 多糖制備方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案1)壓榨將女貞子提取過三萜酸的殘渣在常溫下壓榨，藥渣加入溫水浸泡3_5h， 常溫壓榨2-3次，合并壓榨液；2)洗滌將壓榨液低壓濃縮為浸膏，用無水乙醇洗滌3次，得殘留固體；3)脫蛋白殘留固體用去離子水復(fù)溶，用Sevage法去除少量的殘留蛋白質(zhì)，得脫 蛋白溶液；4)超濾將脫蛋白溶液通過超濾膜濃縮，截留相烘干即得女貞子多糖。上述的制備方法，其特征在于1)步驟壓榨壓力為80-100Mpa，水溫30-50°C，每次 用量為原料的3-5倍量(V/W)。上述的制備方法，其特征在于2)步驟無水乙醇3次用量分別為浸膏質(zhì)量的4-6 倍、3-5 倍、3-4 倍(V/W)。上述的制備方法，其特征在于3)步驟條件去離子水用量為殘留固體的10倍量， Sevage試劑為氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液，用量為水溶液的1/5。上述的制備方法，其特征在于4)步驟超濾膜系統(tǒng)為聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)，截 留分子量為20000。綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點本工藝采用浸泡壓榨提取女貞子多糖，溶劑簡 單；超濾除具有明顯的濾除膠體雜質(zhì)的性能外，還具有良好的脫色效果；女貞子多糖在水 中的溶解度隨溫度變化敏感，結(jié)晶效果好；有機溶劑用量少，毒性低，生產(chǎn)較安全。采用上述技術(shù)方案制備女貞子多糖，操作簡單，成本較低，純度較高，利于大生產(chǎn) 操作。下面將結(jié)合具體實施方式
對本發(fā)明做進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不 局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1取女貞子提取過三萜酸的殘渣1kg，加入每次3L30°C溫水浸泡，80Mpa重復(fù)壓榨2 次，合并壓榨液。壓榨液濃縮為浸膏282g，先后用1.2L、850ml、850ml無水乙醇洗滌浸膏。 殘留固體用3L去離子水分散，加600ml氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液用Sevage法除 去蛋白質(zhì)。最后將剩余溶液通過截留分子量20000的聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)濃縮，烘干 即得女貞子多糖3. 8g，經(jīng)HPLC檢測，純度為98. 5%。實施例2取女貞子提取過三萜酸的殘渣1kg，加入每次4L40°C溫水浸泡，90Mpa重復(fù)壓榨2 次，合并壓榨液。壓榨液濃縮為浸膏294g，先后用1.5L、1.5L、900ml無水乙醇洗滌浸膏。殘 留固體用3L去離子水分散，加600ml氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液用Sevage法除去 蛋白質(zhì)。最后將剩余溶液通過截留分子量20000的聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)濃縮，烘干即得女貞子多糖3. 9g，經(jīng)HPLC檢測，純度為98. 6%。 實 施例3取女貞子提取過三萜酸的殘渣1kg，加入每次5L40°C溫水浸泡，IOOMpa重復(fù)壓榨3 次，合并壓榨液。壓榨液濃縮為浸膏302g，先后用1.5L、1.2L、1.2L無水乙醇洗滌浸膏。殘 留固體用3L去離子水分散，加600ml氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液用Sevage法除去 蛋白質(zhì)。最后將剩余溶液通過截留分子量20000的聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)濃縮，烘干即 得女貞子多糖3. 8g，經(jīng)HPLC檢測，純度為99. 2%。實施例4取女貞子提取過三萜酸的殘渣1kg，加入每次3L50°C溫水浸泡，IOOMpa重復(fù)壓榨3 次，合并壓榨液。壓榨液濃縮為浸膏282g，先后用1.6L、1.4L、850ml無水乙醇洗滌浸膏。殘 留固體用3L去離子水分散，加600ml氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液用Sevage法除去 蛋白質(zhì)。最后將剩余溶液通過截留分子量20000的聚礬中空纖維超濾膜系統(tǒng)濃縮，烘干即 得女貞子多糖4. Og,經(jīng)HPLC檢測，純度為99. 5%。
權(quán)利要求
一種女貞子多糖的制備方法，其特征在于包含以下步驟1)壓榨將女貞子提取過三萜酸的干燥殘渣加入溫水浸泡1-2h，常溫壓榨2-3次，合并壓榨液；2)洗滌將壓榨液低壓濃縮為浸膏，用無水乙醇洗滌3次，得殘留固體；3)脫蛋白殘留固體用去離子水復(fù)溶，用Sevage法去除少量的殘留蛋白質(zhì)，得脫蛋白溶液；4)超濾將脫蛋白溶液通過超濾膜濃縮，截留相烘干即得女貞子多糖。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于1)步驟壓榨壓力為80-100Mpa，水溫 30-50°C，每次用量為原料的3-5倍量(V/W)。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于2)步驟無水乙醇3次用量分別為浸膏質(zhì) 量的 4-6 倍、3-5 倍、3-4 倍(V/W)。
4.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于3)步驟條件去離子水用量為殘留固體 的10倍量，Sevage試劑為氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液，用量為水溶液的1/5。
5.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于4)步驟超濾膜系統(tǒng)為聚礬中空纖維超濾 膜系統(tǒng)，截留分子量為20000。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種女貞子多糖的制備方法，工藝以女貞子提取過三萜酸的干燥殘渣為原料，用每次3-5倍量(V/W)30-50℃溫水浸泡1-2小時，重復(fù)壓榨2-3次，合并的壓榨液低壓濃縮為浸膏，用無水乙醇洗滌3次，得到得固體用去離子水復(fù)溶，用Sevage法去除蛋白質(zhì)，脫蛋白溶液用超濾膜濃縮，即得產(chǎn)品。該工藝操作簡單，成本較低，純度較高，利于大生產(chǎn)操作。
文檔編號C08B37/00GK101805413SQ201010137438
公開日2010年8月18日 申請日期2010年4月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月1日
發(fā)明者劉東鋒, 張翼, 李法慶 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司