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      土壤桿菌ZX09,用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性β-葡聚糖及其制備方法及在降低血糖上的應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:3656063閱讀:616來源:國知局
      專利名稱:土壤桿菌ZX09,用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性β-葡聚糖及其制備方法及在降低血糖上的應(yīng)用的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明屬于微生物及微生物胞外多糖技術(shù)領(lǐng)域,特別是一種土壤桿菌 Agrobacteriumsp. ΖΧ09,該菌生產(chǎn)的新型水溶性β -葡聚糖分子及其制備方法和在降低血 糖上的應(yīng)用。
      背景技術(shù)
      葡聚糖廣泛地分布于真菌、細菌和植物體內(nèi),目前藥用、食用菌β-葡聚糖主 要來源于食用、藥用擔子真菌和子囊酵母菌的細胞壁,谷物中的葡聚糖主要存在于燕 麥和大麥胚乳的細胞壁中,從這些物質(zhì)中提取葡聚糖的工藝較復(fù)雜,且產(chǎn)量較低。葡聚糖不僅在各種生物體內(nèi)發(fā)揮多種生物學活性,而且在各種生物間的相 互影響過程中也具有多種功能,是高效的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)因子(BRM)。據(jù)報道,β-葡聚糖 具有抗腫瘤、抗氧化等功能,長時間食用含葡聚糖的食物能夠降低高膽固醇的人血 液中的膽固醇,燕麥中提取的β-葡聚糖可降低糖尿病人的餐后血糖(Jenkins,A. L., D. J. A. Jenkins, U. Zdravkovic, P. Wiirsch and V. Vuksan. 2002. Depression of the glycemic index byhigh levels of β -glucan fiber in two functional foods tested in type 2diabetes. EuropeanJournal of Clinical Nutrition 56,622-628)。然而,β-葡 聚糖功效的發(fā)揮需要一定溶解度、空間結(jié)構(gòu)和合適的分子量的支撐。很多葡聚糖的水 溶性較低,例如,可得然膠是由土壤桿菌或產(chǎn)堿桿菌產(chǎn)生的一種水不溶的凝膠多糖型葡聚 糖,它由D-葡萄糖殘基經(jīng)β-葡萄糖苷鍵在Cl,C3線性連接而成(Kim,Μ. K.,K. Ε. Ryu, W. A. Choi, Y. H. Rhee,andl. Y. Lee. 2003. Enhanced production of (1 — 3)-β-D-glucan by a mutant strain ofAgrobacterium species. Biochem. Eng. J. 16 163-168);香對 腫瘤有抑制作用,但它在水中的溶解度也不高。而非水溶性的葡聚糖進入人體后很難被直 接吸收,使其應(yīng)用范圍收到極大的限制。為解決這一難題,很多學者研究了 β “葡聚糖的衍生化來提高它的水溶性和生 物活性,如在對從虎奶菌(Pleurotus tuber-regium)中提取的β-葡聚糖進行硫酸化 前后抗腫瘤活性的變化研究中,發(fā)現(xiàn)硫酸化后多糖溶解度增大,同時抗腫瘤能力也相應(yīng) 的增力口(Lina Zhang,Mei Zhang,Jing Dong,Ji Guo, Yinyin Song,Peter Chi keung Cheung. 2001. Chemical structure and chain conformation of the water-insoluble glucan isolated fromPleurotus tuber-regium. Biopolymers 59 :457_464·張俐娜,張 玫,張志強,黃榮春?;⒛坦狡暇厶橇蛩狨ピ谒芤褐械逆湗?gòu)象及構(gòu)效關(guān)系。2003年全國高 分子學術(shù)論文報告會)。另外,在中國專利(CN:1583802A)中對非水溶性酵母β -(1,3)-葡 聚糖通過甲酸降解,得到不同分子量的可溶于水的β_(1,3)_葡聚糖。但所有這些解決方 法都增加了獲得所需葡聚糖的難度,使制備成本大大提高,限制了在生產(chǎn)領(lǐng)域中的大 規(guī)模使用。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明的目的在于提供一種生產(chǎn)水溶性β -葡聚糖的土壤桿菌(Agrobacterium sp. ZX09)。本發(fā)明的另一目的是提供一種用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性高粘度β -葡聚糖 及其制備方法。本發(fā)明的目的還在于提供一種用土壤桿菌ΖΧ09生產(chǎn)的水溶性高粘度β -葡聚糖 在降低血糖上的應(yīng)用。實現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)解決方案為一種土壤桿菌ΖΧ09,在山東東營的鹽土中分 離得到菌株,此菌株為土壤桿菌屬菌株(Agrobacterium sp.),菌株已于2010年1月21日 在中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)保藏,保藏編號為CCTCC NO :M2010020o一種用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性β -葡聚糖,結(jié)構(gòu)通式如下所示— {3) -beta-D-Glup- (1 — 3) - [beta-D-Glup- (1 — 3) -beta-D-Glup-] 3-a Ipha-D-G Iup- (1 — 3)_alpha_D_Glup_(l}n —上述結(jié)構(gòu)中的η為100 200。一種用土壤桿菌ΖΧ09生產(chǎn)的水溶性β -葡聚糖的制備方法,步驟如下(1)配置培養(yǎng)液將 NaH2PO4 0. 5%。-2. 5%。,KNO3 2%。-4%。,CaCl2 0. 07%。-0. 15%, MgCl2 0. 2 %0 -0. 5 %o, FeSO4 · 7Η20 0. 005 %0 -0. 0125 %0,MnSO4 0. 001 %0 -0. 003 %0, ZnCl2O. 005% -0. 0075%,NaCl 0_7%,蔗糖 2% -4%溶于 H2O 中,ρΗ 為 5-11,以上鹽濃度為 質(zhì)量比;(2)將培養(yǎng)液加熱110-121 滅菌15-30分鐘,然后冷卻;(3)向步驟(2)中冷卻至30-37°C的滅菌后的培養(yǎng)液內(nèi)加入平皿菌落液,在28°C 30°C發(fā)酵24-48h形成種子培養(yǎng)液;(4)向步驟(2)中冷卻至30-37°C的滅菌后的培養(yǎng)液內(nèi)加入步驟(3)中獲得的種 子培養(yǎng)液,在28°C 30°C發(fā)酵48 72h ;(5)向第(4)步得到的發(fā)酵液內(nèi)注入超過發(fā)酵液兩倍體積的乙醇、丙酮或異戊醇, 沉淀得到粗多糖;(6)對粗多糖去蛋白后得到純品。一種用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性β -葡聚糖的應(yīng)用,將利用土壤桿菌ΖΧ09生 產(chǎn)的葡聚糖應(yīng)用于降低血糖。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,其顯著優(yōu)點(1)菌株新穎,性質(zhì)獨特,可耐鹽生長,生長 過程中不分泌色素;(2)菌種的培養(yǎng)操作簡便,工藝簡單,培養(yǎng)基為全合成培養(yǎng)基,成份明 確,成本低,適宜于工業(yè)化生產(chǎn);(3)所得的葡聚糖為新結(jié)構(gòu)多糖化合物;(4) β-葡聚 糖提取方法簡便,所得的葡聚糖可直接溶于冷水;(5)對小鼠喂食混有淀粉的多糖,能 有效控制餐后血糖的升高。下面結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步詳細描述。


      圖1是菌株的平板菌落、顯微照片和耐鹽生長情況。圖2是葡聚糖組分測定的氣相色譜圖。
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      圖3是葡聚糖的高碘酸氧化結(jié)果。圖4是葡聚糖的紅外光譜。圖5是葡聚糖的核磁共振譜。圖6是小鼠喂養(yǎng)多糖后的血糖變化圖。土壤桿菌的菌株已于2010年1月21日在中國典型培養(yǎng)物保藏中心保存(CCTCC), 保藏單位的地址為湖北省武漢市武昌珞珈山武漢大學保藏中心,保藏編號為CCTCC NO M2010020,其生物材料的分類命名為(Agrobacterium sp. ZX09)。
      具體實施例方式本發(fā)明土壤桿菌(Agrobacterium sp. ZX09)是在山東東營的鹽土中分離得到。該 菌株具有以下特點a.形態(tài)特征在無機鹽瓊脂平板培養(yǎng)基上28 °C培養(yǎng)本菌株3_5天后觀察,菌落呈 白色、圓形,表面光滑,邊緣整齊,菌株分泌大量的胞外多糖。b.生理生化特征能有效還原硝酸鹽,不能降解纖維素,不分泌色素。能夠在7% 的NaCl發(fā)酵液中生長,在含2% NaCl的發(fā)酵液中生長速度最快。以蔗糖或乳糖為碳源能很 好地生長,可疑利用碳源為D-葡萄糖、D-果糖、D-甘露糖、或D-木糖,不能利用碳源為麥芽 糖。發(fā)酵48小時后的發(fā)酵液最高粘度可達到20000mPa 's(NDJ-l RotationalViscometer, Rotor為3,RPM為6,上海天平儀器廠)。圖1中,A為平板培養(yǎng)基上的菌落,B為細菌的顯 微鏡照片,C為菌株在不同鹽濃度的培養(yǎng)液中震蕩培養(yǎng)后的相對生長率。c. 土壤桿菌的16S DNA序列見序列表。d.此菌株為土壤桿菌屬菌株。本發(fā)明從土壤桿菌ZX09的菌株中提取出大分子的胞外水溶性β-葡聚糖,結(jié)構(gòu)通 式如下所示— {3) -beta-D-Glup- (1 — 3) - [beta-D-Glup- (1 — 3) -beta-D-Glup-] 3-a Ipha-D-G Iup- (1 — 3)_alpha_D_Glup_(l}n —上述結(jié)構(gòu)中的η為100 200。上述β-葡聚糖的特性如下a.多糖組分為單一葡萄糖。圖2為氣相色譜圖。同一組分在同一位置出峰。A圖 為水解后的ZX09產(chǎn)多糖的出峰情況,單一的峰說明多糖由單一組分組成。B圖中水解多糖 與甘露糖混合后出現(xiàn)了兩個的峰,而C圖中水解多糖與葡萄糖混合后只有一個峰,這就說 明了組成多糖的單一組分就是葡萄糖。該多糖為葡聚糖。b.高碘酸不能氧化多糖,見圖3。葡聚糖有不同的連接方式。在與高碘酸鹽反應(yīng) 時,以1 — 2或1 — 4位鍵合的糖基,平均每個糖基消耗一分子高碘酸;以1 — 6位鍵合的 糖基或非還原末端基,消耗兩分子高碘酸,而1 — 3位鍵合的糖基,不消耗高碘酸。可溶性 淀粉是以1 — 4位鍵合的葡聚糖,以可溶性淀粉作參照,對ZX09生產(chǎn)的葡聚糖進行高碘酸 氧化,發(fā)現(xiàn)可溶性淀粉消耗了高碘酸鹽,而ZX09生產(chǎn)的葡聚糖不消耗高碘酸鹽,這說明該 葡聚糖的糖基均以1 — 3位鍵合。c.多糖的紅外光譜見圖4,該高聚物并無衍生基團存在。d.多糖的核磁共振譜見圖5。1H NMR中,有兩個信號,表明葡聚糖中存在alpha構(gòu)象(δ 5. 1-5. 3ppm)和 beta 構(gòu)象(δ 4. 92-4. 96ppm) ; 13C NMR 譜中,低場 δ 106. 4,105. 75, 105. 69,105. 51,105. 37,105. 31,105. 14,99. 59,99. Olppm處的峰,表征了 C-I 的beta構(gòu)象, 而高場δ 98,96ppm處的峰,表征了 C-I的alpha構(gòu)象本發(fā)明利用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)水溶性β -葡聚糖,其步驟包括如下a.配置培養(yǎng)液將 NaH2PO4 0. 5% -2. 5%。,KNO3 2% -4%。,CaCl2 0. 07% -0. 15%, MgCl2O. 2 % -0. 5 %o, FeSO4 · 7H20 0. 005 %0 -0. 0125 %0,MnSO4 0. 001 %0 -0. 003 %0, ZnCl2O. 005% -0. 0075%,NaCl 0_7%,蔗糖 2% -4%溶于 H2O 中,pH 5-11,以上鹽濃度為質(zhì)量比。b.將培養(yǎng)液加熱110_121°C滅菌15-30分鐘,然后冷卻;c.向步驟b中冷卻至30_37°C的培養(yǎng)液內(nèi)加入平皿菌落液;d.在28°C 30°C發(fā)酵步驟c中已接種的培養(yǎng)液24_48h形成種子培養(yǎng)液;e.向步驟b中冷卻至30-37°C的培養(yǎng)液內(nèi)加入種子培養(yǎng)液;f.將步驟e中已接種的培養(yǎng)液在28°C 30°C發(fā)酵48 72h ;h.向步驟f中獲得的發(fā)酵液內(nèi)注入超過發(fā)酵液兩倍體積的乙醇、丙酮或異戊醇, 得到粗多糖;i.得到的粗多糖去蛋白后得到純品。通過上述方法制備的葡聚糖的水溶液有很高的粘度,使其具有廣泛的應(yīng)用價 值。利用土壤桿菌ΖΧ09生產(chǎn)的葡聚糖為活性成分的制劑在食品、飲料以及降低餐后血 糖水平上的應(yīng)用。如該葡聚糖或葡聚糖與淀粉混合后,對禁食后的小鼠進行灌喂,檢測 不同時間的餐后血糖值。圖6中只喂食淀粉的小鼠餐后血糖值明顯高于喂食含有本發(fā)明 β-葡聚糖的食物的小鼠。實施例1配置培養(yǎng)液,NaH2PO40. 5g, KNO3 2g, CaCl2 0. 07g, MgCl2 0. 2g, FeSO4 · 7H20 0. 005g,MnSO4 0. OOlgjZnCl2 0. 005g,蔗糖 20g,H2OlOOOmL,pH 5.0。將培養(yǎng)液加熱 121°C滅 菌15分鐘,冷卻至30°C接入平皿菌落液200μ ,28 培養(yǎng)24h,為種子液。向滅過菌(121°C 滅菌15分鐘)并冷卻至30°C的培養(yǎng)液中加入2%的種子培養(yǎng)液,28°C發(fā)酵48h。在該發(fā)酵 液中加入兩倍體積的乙醇,得到β-葡聚糖粗品。禁食15小時的小鼠,直接喂食多糖ZOOmg/kg—1或喂食混有淀粉的多糖200mg/ kg_\能有效控制餐后血糖的上升。實施例2配置培養(yǎng)液,NaH2PO40. 5g, KNO3 2g, CaCl2 0. 07g, MgCl2 0. 2g, FeSO4 · 7H20 0. 0075g, MnSO4 0. 002g, ZnCl2 0. 005g, NaCl 20g,蔗糖 20g,H2OlOOOmL, pH 7.2。將培養(yǎng)液 加熱121°C滅菌15分鐘,冷卻至30°C接入平皿菌落液100μ L,28°C培養(yǎng)24h,為種子液。向 滅過菌(121°C滅菌15分鐘)并冷卻至30°C的培養(yǎng)液中加入10%的種子培養(yǎng)液,28°C發(fā)酵 72h。向發(fā)酵液內(nèi)加入兩倍體積的95%乙醇,得沉淀即為粗多糖,將沉淀取出,重新溶解于水 中,利用sevag法去蛋白3次。去蛋白的上清液中再加入2倍體積乙醇,沉淀多糖,并將該沉 淀再次溶解于水。得到的多糖水溶液經(jīng)過DEAE-32纖維素和瓊脂糖凝膠S印harose CL-4B 分離后,乙醇沉淀,干燥,即得純化的多糖。實施例3
      配置培養(yǎng)液,NaH2PO41. 0g, KNO3 2. 5g, CaCl2 0. 07g, MgCl2 0. 2g, FeSO4 · 7H20 0. 0075g, MnSO4 0. 002g, ZnCl2 0. 005g,NaCl 20g,蔗糖 30g,H2OlOOOmL, pH 7. 2,將培養(yǎng)液加 熱121 °C滅菌15分鐘,冷卻至30°C接入平皿菌落液200 μ L,30 V培養(yǎng)24h,為種子液。向滅 過菌(121°C滅菌15分鐘)并冷卻至30°C的培養(yǎng)液中加入4%的種子培養(yǎng)液,28°C發(fā)酵48h。 向發(fā)酵液內(nèi)加入兩倍體積的95%乙醇,得沉淀即為粗品,將沉淀取出,重新溶解于水中,利 用sevag法去蛋白3次。去蛋白的上清液中再加入2倍體積乙醇,沉淀多糖,并將該沉淀再 次溶解于水。得到的多糖水溶液經(jīng)過DEAE-32纖維素和瓊脂糖凝膠S印harose CL-4B分離 后,乙醇沉淀,干燥,即得純化的多糖。實施例4配置培養(yǎng)液,NaH2PO41. 5g, KNO3 3g, CaCl2 0. 07g, MgCl2 0. 4g, FeSO4 · 7H20 0. 0075g, MnSO4 0. 002g, ZnCl2 0. 005g,NaCl 20g,蔗糖 40g,H2OlOOOmL, pHll,將培養(yǎng)液加熱 121°C滅菌15分鐘,冷卻至30°C接入平皿菌落液100 μ L,28°C培養(yǎng)24h,為種子液。向滅過 菌(121°C滅菌15分鐘)并冷卻至30°C的培養(yǎng)液中加入10%的種子培養(yǎng)液,30°C發(fā)酵48h。 向發(fā)酵液內(nèi)加入兩倍體積的95%乙醇,得沉淀即為粗品,將沉淀取出,重新溶解于水中,利 用利用十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法去蛋白。去蛋白的上清液中再加入2倍體積乙醇, 沉淀多糖,并將該沉淀再次溶解于水。得到的多糖水溶液經(jīng)過DEAE-32纖維素和瓊脂糖凝 膠S印harose CL-4B分離后,乙醇沉淀,干燥,即得純化的多糖。實施例5配置培養(yǎng)液,NaH2PO42. 5g, KNO3 4g,CaCl2 0. 15g, MgCl2 0. 5g, FeSO4 · 7H20 0. 0125g, MnSO4 0. 003g, ZnCl2 0. 0075g, NaCl 70g,蔗糖 40g,H2OlOOOmL, pH 7. 2,將培養(yǎng)液 加熱110°C滅菌30分鐘,冷卻至30°C接入平皿菌落液100 μ L,28°C培養(yǎng)24h,為種子液。向 滅過菌(121°C滅菌15分鐘)并冷卻至30°C的的培養(yǎng)液中加入5%的種子培養(yǎng)液,30°C發(fā)酵 72h,向該發(fā)酵液內(nèi)加入兩倍體積的95%乙醇,得沉淀即為粗品。小鼠喂食同實施例1。
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      權(quán)利要求
      一種土壤桿菌ZX09,其特征在于在山東東營的鹽土中分離得到菌株,此菌株為土壤桿菌屬菌株(Agrobacterium sp.),菌株已于2010年1月21日在中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)保藏,保藏編號為CCTCC NOM2010020,該菌株具有以下特點a.形態(tài)特征在無機鹽瓊脂平板培養(yǎng)基上28℃培養(yǎng)本菌株3 5天后觀察,菌落呈圓形,菌株分泌大量的胞外多糖;b.生理生化特征能有效還原硝酸鹽,不能降解纖維素,不分泌色素,能夠在7%的NaCl發(fā)酵液中生長,在含2%NaCl的發(fā)酵液中生長速度最快;以蔗糖或乳糖為碳源能很好地生長,可疑利用碳源為D 葡萄糖、D 果糖、D 甘露糖或D 木糖,不能利用碳源為麥芽糖。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的土壤桿菌ZX09,其特征在于土壤桿菌(Agrobacteriumsp. ZX09) 16S rDNA 序列為atgcagtcgaCCgCCCCgggaggggagtggcagacgggtgagtaacgggtggcaacctac60cctttcctgcggaatacctccggaaaactggaattaacaccgcatcccccctagggggga120aatatttatcggggaaggattgccccgcgttgtattagctagttgggggggaaacggcct180accaaggcgaccatccatagctgggctgagaggatgatccgcctcgttgggactgacccc240ccccccaccctcctacgggaggcagcgggggaaaatattgaacgatgggcgcacgcctga300tcccgccctgccgggtgagtgaagaaggccttagggttgtaatcttttttcaccgatgaa360aataatgacggtagtcaaaaaagaccccccggctaacttcctgccagccgccgcgataat420acgaagggggctagtgttgttcagaattactgggcgtaaagcgcacgtaggcgtttattt480aagtgggggaagaaatcccgcagctcaactgcggaactgtctttgatgctgggtatgttg540aggatggaagaggtaagtggaattccgagtgtagaggagaaattcgtatatattcggagg600accaccagtggcgaaggcttcttactggtccattactgacgctgaggtgcgaaagcgtgg660ggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgaatgttagccgtc720gggcagtatactgttcggtggcgcagctaacgcattaaacattccgcctggggagtacgg780tcgcaagattaaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggt840ttaattcgaagcaacgcgcagaaccttaccagctcttgacattcggggtatgggcattgg900agacgatgtccttcagttaggctggccccagaacaggtgctgcatggctgtcgtcagctc960gtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaaccctcgcccttagttgccag1020catttagttgggcactctaaggggactgccggtgataagccgagaggaaggtggggatga1080cgtcaagtcctcatggcccttacgggctgggctacacacgtgctacaatggtggtgacag1140tgggcagcgagacagcgatgtcgagctaatctccaaaagccatctcagttcggattgcac1200tctgcaactcgagtgcatgaagttggaatcgctagtaatcgcagatcagcatgctgcggt1260gaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccatgggagttggttttacccg1320aaggtagtgcgctaaccgcaaggaggcagctaaccac1357
      3. 一種用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性葡聚糖,其特征在于結(jié)構(gòu)通式如下所示 —⑶-beta-D-Glup- (1 — 3) - [beta-D-Glup- (1 — 3) -beta-D-Glup-] 3-alpha-D_Glup-(1 — 3)-alpha-D-Glup-(l}n — 上述結(jié)構(gòu)中的η為100 200。
      4.一種用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性β -葡聚糖的制備方法,步驟如下(1)配置培養(yǎng)液將NaH2PO4O. 5 %0 -2. 5 %0’ ΚΝ032 %0 ~4 %0’ CaCl2O. 07 %0 -0. 15 %0’ MgCl2O. 2 % -0. 5 %o, FeSO4 · 7Η200· 005 %0 -0. 0125 %0,MnSO4O. 001 %0 -0. 003 %0, ZnCl2O. 005% -0. 0075%, NaClO-7%,蔗糖 2% -4%溶于 H2O 中,pH 為 5-11,以上鹽濃度為 質(zhì)量比;(2)將培養(yǎng)液加熱110-121°C滅菌15-30分鐘,然后冷卻;(3)向步驟(2)中冷卻至30-37°C的滅菌后的培養(yǎng)液內(nèi)加入平皿菌落液,在28°C 30°C發(fā)酵24-48h形成種子培養(yǎng)液;(4)向步驟(2)中冷卻至30-37°C的滅菌后的培養(yǎng)液內(nèi)加入步驟(3)中獲得的種子培 養(yǎng)液,在28°C 30°C發(fā)酵48 72h ;(5)向第(4)步得到的發(fā)酵液內(nèi)注入超過發(fā)酵液兩倍體積的乙醇、丙酮或異戊醇,沉淀 得到粗多糖;(6)對粗多糖去蛋白后得到純品。
      5.一種用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性β-葡聚糖的應(yīng)用,其特征在于將利用土壤桿菌 ΖΧ09生產(chǎn)的β -葡聚糖應(yīng)用于降低血糖。
      全文摘要
      本發(fā)明公開了一種土壤桿菌ZX09,用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性β-葡聚糖及其制備方法及在降低血糖上的應(yīng)用。其中土壤桿菌ZX09在山東東營的鹽土中分離得到菌株,此菌株為土壤桿菌屬菌株(Agrobacterium sp.),菌株已于2010年1月21日在中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)保藏,保藏編號為CCTCC NOM2010020。用土壤桿菌ZX09生產(chǎn)的水溶性β-葡聚糖,結(jié)構(gòu)通式如下所示→{3)-beta-D-Glup-(1→3)-[beta-D-Glup-(1→3)-beta-D-Glup-]3-alpha-D-Glup-(1→3)-alpha-D-Glup-(1}n→,上述結(jié)構(gòu)中的n為100~200。本發(fā)明菌株新穎,性質(zhì)獨特,可耐鹽生長,生長過程中不分泌色素;菌種的培養(yǎng)操作簡便,工藝簡單,培養(yǎng)基為全合成培養(yǎng)基,成份明確,成本低,適宜于工業(yè)化生產(chǎn)。
      文檔編號C08B37/02GK101935623SQ20101014637
      公開日2011年1月5日 申請日期2010年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月14日
      發(fā)明者修愛慧, 張建法, 朱斌 申請人:南京理工大學
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