專利名稱：一種富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種鐵線蓮皂苷的純化方法，特別是涉及一 種利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化松樹(shù)皮中鐵線蓮皂苷的方法。
背景技術(shù)：
鐵線蓮拉丁文名Clematisflorida Thunb.，英文名clematis hybridas，別 名番蓮、威靈仙、山木通，為毛茛科(Rarumculaceae)、鐵線蓮屬植物，多為木質(zhì)藤本，長(zhǎng)約 1-2米，莖棕色或紫紅色，鐵線蓮皂苷是一種存在于天然植物中的一種三萜類化合物，主要功效有利尿，理 氣通便，活血止痛。用于小便不利，腹脹，便閉；外用治關(guān)節(jié)腫痛，蟲(chóng)蛇咬傷。近年來(lái)，人們發(fā) 現(xiàn)天然植物鐵線蓮中含有大量的鐵線蓮皂苷，從中提取鐵線蓮皂苷并且取得了可喜進(jìn)展， 原料鐵線蓮來(lái)源較廣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服常規(guī)技術(shù)提取率相對(duì)較低、提取純度低等缺點(diǎn)，提供一種 利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其步驟如下(1)將干鐵線蓮粉碎后用純化水加熱回流提??；(2)將經(jīng)步驟(1)處理的鐵線蓮提取液抽濾，得提取液并減壓濃縮的初提物；(3)將所獲初提物用純化水加熱溶解，加入甲醇萃取，靜置、抽濾、減壓濃縮得鐵線 蓮皂苷粗提物；(4)將所得鐵線蓮皂苷粗提物用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附；(5)用不同濃度的乙醇對(duì)大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集鐵 線蓮皂苷各階段洗脫液；(6)將鐵線蓮皂苷各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得鐵線蓮皂苷半成品，其含量為 35%以上；(7)將所得鐵線蓮皂苷半成品上硅膠層析柱，用甲醇以不同濃度進(jìn)行洗脫，薄層色 譜法跟蹤檢測(cè)，收集鐵線蓮皂苷各階段洗脫液；(8)將所收集的鐵線蓮皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得鐵線蓮皂 苷，其含量在95%以上。所述的步驟(1)中，鐵線蓮粉碎后過(guò)10 80目篩在進(jìn)行純化水加熱回流提取。所述的步驟(1)中，提取時(shí)間為4 8小時(shí)。所述的步驟(1)中，加入純化水的體積為鐵線蓮粉碎體積的10 20倍。所述的步驟(3)中，加入甲醇的量按體積計(jì)算為提取物水溶液的10 20倍所述的步驟中所用的大孔吸附樹(shù)脂為天津南開(kāi)大學(xué)所產(chǎn)生的X-5、NKA-9、S-8、D 3520、D4006、H103、D4020、AB-8H和NKA-II型樹(shù)脂中的一種，吸附為靜態(tài)吸附或動(dòng) 態(tài)吸附。所述的步驟(5)中所述的洗脫為用10 95%的乙醇進(jìn)行洗脫。所述的在步驟( 和(7)中，所采取的檢測(cè)方法均為薄層色譜法跟蹤檢測(cè)。所述的步驟(7)中所采取的甲醇的濃度為30 90%。本發(fā)明應(yīng)用大孔吸附技術(shù)分離純化鐵線蓮皂苷，對(duì)鐵線蓮皂苷的吸附選擇性良 好，吸附快解析也快，吸附容量較大；提取方便快捷，原料來(lái)源豐富，生產(chǎn)成本低廉，分離效 果明顯，提取純度高，可以得到含量35%以上的鐵線蓮皂苷半成品和含量95%以上的鐵線 蓮皂苷終產(chǎn)品，克服了常規(guī)提取率相對(duì)較低、提取純度低的缺點(diǎn)。本發(fā)明選用理化性質(zhì)穩(wěn)定、表面積較大、交換速度較快、機(jī)械強(qiáng)度高、抗污染能力 強(qiáng)、熱穩(wěn)定性好的大孔吸附樹(shù)脂，不容于酸、堿及有機(jī)媒，對(duì)有機(jī)物選擇性較好，不受無(wú)機(jī)鹽 類及強(qiáng)離子低分子化合物存在的影響，可以通過(guò)物理吸附從溶液中有選擇地吸附鐵線蓮皂 苷，吸附快、解析也快，吸附容量較大。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 一種利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其步驟 如下(1)將干鐵線蓮粉碎后過(guò)60目篩，用鐵線蓮粉體積10倍的純化水加熱回流提取4 小時(shí)；(2)將經(jīng)步驟(1)處理的鐵線蓮提取液抽濾，得提取液并減壓濃縮得初提物；(3)將所獲初提物用純化水加熱溶解，加入體積為提取物水溶液體積20倍的甲醇 進(jìn)行萃取，靜置、抽濾、減壓回收溶劑得鐵線蓮皂苷粗提物；(4)將所得鐵線蓮皂苷提物用大孔吸附樹(shù)脂層析柱上進(jìn)行吸附，所用的大孔樹(shù)脂 為天津南開(kāi)大學(xué)所生產(chǎn)的NKA-II型樹(shù)脂；(5)用 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95% 的乙醇在大孔
吸附樹(shù)脂層柱中依次進(jìn)行梯度洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集鐵線蓮皂苷各階段洗脫 液；(6)將鐵線蓮皂苷各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量為37%鐵線蓮皂苷半成
P
m ；(7)將所得鐵線蓮皂苷半成品上硅膠層析柱，用甲醇濃度為30 90%進(jìn)行梯度洗 脫，薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集鐵線蓮皂苷各階段洗脫液；(8)將所收集的鐵線蓮皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得到含量 95%鐵線蓮皂苷。實(shí)施案例2 —種利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其步 驟如下(1)將干鐵線蓮粉碎后過(guò)10目篩，用鐵線蓮粉體積20倍的純化水加熱回流提取2 次，每次3小時(shí)；(2)將經(jīng)步驟(1)處理的鐵線蓮提取液抽濾，得提取液并減壓濃縮得初提物；(3)將所獲初提物用純化水加熱溶解，加入體積為提取物水溶液體積10倍的甲醇
4進(jìn)行萃取，靜置、抽濾、減壓回收溶劑得鐵線蓮皂苷粗提物；(4)將所得貼心連皂苷粗提物用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附，所用的大孔樹(shù)脂為天津 南開(kāi)大學(xué)所生產(chǎn)的D4006型樹(shù)脂；(5)用10%、30%、50%、70%、90%的乙醇在大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行洗脫，用薄層色譜 法跟蹤檢測(cè)，收集鐵線蓮皂苷各階段洗脫液；(6)將鐵線蓮皂苷各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量38%鐵線蓮皂苷半成
品 ；(7)將所得鐵線蓮皂苷半成品上硅膠層析柱，用甲醇濃度為30 90%進(jìn)行梯度洗 脫，薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集鐵線蓮皂苷各階段洗脫液；(8)將所收集的鐵線蓮皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得到含量 97%鐵線蓮皂苷。實(shí)施案例3 —種利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其步 驟如下(1)將干鐵線蓮粉碎后過(guò)80目篩，用鐵線蓮粉體積15倍的純化水回提取6小時(shí)；(2)將經(jīng)步驟(1)處理的鐵線蓮提取液抽濾，得提取液并減壓濃縮得初提物；(3)將所獲初提物用純化水加熱溶解，加入體積為提取物水溶液體積15倍的甲醇 進(jìn)行萃取，靜置、抽濾、減壓回收溶劑得鐵線蓮皂苷粗提物；(4)將所得鐵線蓮皂苷粗提物用大孔吸附樹(shù)脂層析柱子、上進(jìn)行吸附，所用的大孔 樹(shù)脂為天津南開(kāi)大學(xué)所生產(chǎn)的NKA-9型樹(shù)脂；(5)用20^30^^60^^80%的乙醇在大孔吸附樹(shù)脂層析柱子中依次進(jìn)行梯度洗 脫，用薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集鐵線蓮皂苷各階段洗脫液；(6)將鐵線蓮皂苷各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量38%鐵線蓮皂苷半成
品 ；(7)將所得鐵線蓮皂苷半成品上硅膠層析柱，用甲醇濃度為30 90%進(jìn)行梯度洗 脫，薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集鐵線蓮皂苷各階段洗脫液；(8)將所收集的鐵線蓮皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得到含量 98%鐵線蓮皂苷。
權(quán)利要求
1.一種利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其特征在于，其步驟 如下(1)將干鐵線蓮粉碎后用純化水加熱回流提??；(2)將經(jīng)(1)處理的鐵線蓮提取液過(guò)濾，得流浸膏狀初提物；(3)將所收獲流浸膏狀初提物用水充分洗滌后干燥得到干浸膏，用甲醇溶解后脫色，脫 色液經(jīng)回收甲醇后加水析出大量沉淀，分離、收集沉淀物，并用水洗滌至中性，得到鐵線蓮 皂苷的粗提物。(4)將所得鐵線蓮皂苷粗提物用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附；(5)用不同濃度乙醇水溶液對(duì)大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行洗脫，收集鐵線蓮皂苷各階段洗脫液；(6)將鐵線蓮皂苷洗脫液濃縮回收洗脫劑，得鐵線蓮皂苷半成品；(7)將所得鐵線蓮皂苷半成品上硅膠層析柱，并用甲醇以不同濃度進(jìn)行洗脫，收集鐵線 蓮皂苷各階段洗脫液；(8)將所收集到得鐵線蓮皂苷洗脫液進(jìn)行精制的鐵線蓮皂苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法 其特質(zhì)是所述的步驟(1)中，鐵線蓮粉后過(guò)10 80目篩再進(jìn)行純化水加熱回流提取。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的利用大孔吸附樹(shù)脂富集純鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法， 其特征是在所屬的步驟⑴中，提取時(shí)間為4 8小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其 特征是所述的步驟(1)中，提取的方法為浸漬法、回流提取法，滲漉法、煎煮法、連續(xù)提取 法中的一種或一種以上。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其 特征是；所屬的步驟(1)中，加入純化水的體積為鐵線蓮粉體積的10 20倍。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其 特征是在所述的步驟(3)中，加入甲醇的量按體積計(jì)為提取物水溶液的10 20倍。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法， 其特征是步驟中所述吸附為靜態(tài)吸附或動(dòng)態(tài)吸附步驟(5)中所述的洗脫為用10 95%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其 特征是在步驟( 和(7)中，洗脫過(guò)程中采用薄層色譜法跟蹤檢測(cè)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法，其 特征是步驟(7)中所采用甲醇濃度為30 90%。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法， 其特征是在步驟(8)中，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法進(jìn)行精制。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種利用大孔吸附樹(shù)脂富集純化鐵線蓮中鐵線蓮皂苷的方法。其特點(diǎn)是應(yīng)用大孔吸附技術(shù)分離純化鐵線蓮皂苷，對(duì)鐵線蓮皂苷的吸附選擇性良好，吸附快解析也快，吸附容量較大；提取方便快捷，原料來(lái)源豐富，生產(chǎn)成本低廉，分離效果明顯，提取純度高，可以得到含量35％以上的鐵線蓮皂苷半成品和含量95％以上的鐵線蓮皂苷終產(chǎn)品，克服了常規(guī)提取率相對(duì)較低、提取純度低的缺點(diǎn)。本發(fā)明選用理化性質(zhì)穩(wěn)定、表面積較大、交換速度較快、機(jī)械強(qiáng)度高、抗污染能力強(qiáng)、熱穩(wěn)定性好的大孔吸附樹(shù)脂，可以通過(guò)物理吸附從溶液中有選擇地吸附鐵線蓮皂苷，吸附快、解析也快，吸附容量較大。
文檔編號(hào)C08B37/00GK102120778SQ20101062294
公開(kāi)日2011年7月13日 申請(qǐng)日期2010年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月20日
發(fā)明者姚德利, 姚德坤, 姚航, 鄭君, 閆峰, 黃運(yùn)生 申請(qǐng)人:大興安嶺嘉迪歐營(yíng)養(yǎng)原料有限公司