專利名稱：嵌段共聚物與液體組合物和核酸制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種嵌段共聚物，一種含有所述嵌段共聚物的液體組合物，一種核酸制劑，以及所述嵌段共聚物、液體組合物和核酸制劑的制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
RNA干擾是一種由大約二十多個核苷酸組成的雙鏈小分子干擾RNA(SiRNA)介導(dǎo)的基因沉默技術(shù)，它具有序列特異性，因而基于RNA干擾的小核酸在疾病治療中極具應(yīng)用前景。然而，由于包括siRNA在內(nèi)的小核酸分子本身不具備對組織或細胞的靶向能力，穿透細胞膜的能力差，在生理環(huán)境中極不穩(wěn)定，因此其給藥體系，尤其載體是亟需解決的關(guān)鍵問題，這也是小核酸藥物能否最終順利應(yīng)用于臨床的最關(guān)鍵的因素之一。目前國際上用于治療實體瘤的小核酸藥物正在進行臨床試驗，如Tekmira公司研發(fā)的TKM-D80301，SilenceTherapeutics 研發(fā)的 ATU027,以及 Calando Pharmaceutics 公司研發(fā)的 CALAA-01 等。因此，發(fā)展毒副作用小、生物相容性好的小核酸給藥系統(tǒng)和制劑用于疾病的治療非常重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種聚己內(nèi)酯-聚磷酸酯嵌段共聚物、由該嵌段共聚物組成的液體組合物，它們可以作為小核酸藥物的載體且具有良好的穩(wěn)定性、生物相容性和可降解性；此外，本發(fā)明還提供了一種核酸制劑，以及提供上述共聚物和液體組合物的制備方法，和在核酸藥物給藥系統(tǒng)中的應(yīng)用。根據(jù)第一方面，本發(fā)明提供一種嵌段共聚物，其特征在于，該嵌段共聚物由A嵌段和B嵌段組成，其中，所述A嵌段為聚己內(nèi)酯嵌段，所述B嵌段為聚磷酸酯嵌段，且所述聚磷酸酯嵌段具有式I所示的結(jié)構(gòu)單元，
權(quán)利要求
1.一種嵌段共聚物，其特征在于，該嵌段共聚物由A嵌段和B嵌段組成，其中，所述A嵌段為聚己內(nèi)酯嵌段，所述B嵌段為聚磷酸酯嵌段，且所述聚磷酸酯嵌段具有式I所示的結(jié)構(gòu)單元，
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的嵌段共聚物，其中，所述聚己內(nèi)酯嵌段具有式II所示的結(jié)構(gòu)，且所述嵌段共聚物為A-B兩嵌段·共聚物，
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的嵌段共聚物，其中，所述聚己內(nèi)酯嵌段的平均分子量為500-40000。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的嵌段共聚物，其中，所述聚磷酸酯嵌段的平均分子量為500-10000。
5.一種嵌段共聚物的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟， (1)在開環(huán)聚合反應(yīng)條件下，在開環(huán)聚合催化劑存在下，將聚己內(nèi)酯、式III所示的化合物和第一有機溶劑接觸，得到第一產(chǎn)物，
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述聚己內(nèi)酯具有式IV所示的結(jié)構(gòu)，
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述聚己內(nèi)酯的平均分子量為500-40000。
8.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任意一項所述的方法，其中，所述開環(huán)聚合反應(yīng)條件包括，溫度為20-50°C，時間為1-10小時；所述開環(huán)聚合催化劑為異辛酸亞錫；所述第一有機溶劑為四氫呋喃、二甲亞砜、甲苯中的至少一種。
9.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任意一項所述的方法，其中，所述式III所示的化合物的合成方法包括:在酰氯醇解條件下，將式V所示的化合物與2-氯-2氧-1，3，2- 二氧磷雜環(huán)戊烷接觸，
10.由權(quán)利要求5-9中任意一項所述的方法制得的嵌段共聚物。
11.一種液體組合物，其特征在于，該液體組合物含有水和膠束納米顆粒，所述膠束納米顆粒由第二嵌段共聚物形成或由第一嵌段共聚物和第二嵌段共聚物共同形成，其中，所述第一嵌段共聚物為聚己內(nèi)酯-聚乙二醇嵌段共聚物，所述第二嵌段共聚物為權(quán)利要求1-4和10中任意一項所述的嵌段共聚物，且所述第一嵌段共聚物和第二嵌段共聚物的摩爾比為 0-100: I。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的液體組合物，其中，所述膠束納米顆粒的顆粒直徑為10-250 納米，Zeta 電勢為 IO-1OOmV0·
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的液體組合物，其中，所述第一嵌段共聚物為聚己內(nèi)酯-聚乙二醇兩嵌段共聚物。
14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的液體組合物，其中，所述第一嵌段共聚物中，聚己內(nèi)酯嵌段的平均分子量為200-25000 ;聚乙二醇嵌段的平均分子量為200-10000。
15.根據(jù)權(quán)利要求11所述的液體組合物，其中，以該液體組合物的體積為基準，所述液體組合物中，第一嵌段共聚物的濃度為0-5X IO-3M;第二嵌段共聚物的濃度1Χ1(Γ5-5Χ1(Γ3Μ。
16.根據(jù)權(quán)利要求11-15中任意一項所述的液體組合物，其中，至少部分聚乙二醇嵌段為被靶向性物質(zhì)修飾的聚乙二醇嵌段，所述靶向性物質(zhì)為葉酸、糖、具有導(dǎo)向作用的短肽、單克隆抗體和適配子中的至少一種。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的液體組合物，其中，所述糖為乙酰半乳糖。
18.一種液體組合物的制備方法，其特征在于，該方法包括，將第二嵌段共聚物與第二有機溶劑接觸、或?qū)⒌谝磺抖喂簿畚锖偷诙抖喂簿畚锱c第二有機溶劑接觸，得到第一溶液，在攪拌條件下，將第一溶液與水接觸，其中，所述第一嵌段共聚物為聚己內(nèi)酯-聚乙二醇嵌段共聚物，所述第二嵌段共聚物為權(quán)利要求1-4和10中任意一項所述的嵌段共聚物，且所述第一嵌段共聚物和第二嵌段共聚物的摩爾比為0-100: I;所述第二有機溶劑與水互溶。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中，所述第一嵌段共聚物為聚己內(nèi)酯-聚乙二醇兩嵌段共聚物。
20.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中，所述第一嵌段共聚物中，聚己內(nèi)酯嵌段的平均分子量為200-25000 ;聚乙二醇嵌段的平均分子量為200-10000。
21.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中，以所述水的量為基準，所述液體組合物中，第一嵌段共聚物的加入量為0-5Χ 10_3Μ ;第二嵌段共聚物的加入量為IX 10_5-5Χ 10_3Μ。
22.根據(jù)權(quán)利要求18-21中任意一項所述的方法，其中，所述第二有機溶劑為二甲基亞砜、乙腈、C1-C6的醇中的至少一種。
23.根據(jù)權(quán)利要求18-21中任意一項所述的方法，其中，該方法還包括，將第一溶液與水接觸后得到的溶液進行透析，去除其中的第二有機溶劑。
24.根據(jù)權(quán)利要求18-21中任意一項所述的方法，其中，至少部分聚乙二醇嵌段為被靶向性物質(zhì)修飾的聚乙二醇嵌段，所述靶向性物質(zhì)為葉酸、糖、具有導(dǎo)向作用的短肽、單克隆抗體和適配子中的至少一種。
25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中，所述糖為乙酰半乳糖。
26.由權(quán)利要求18-25中任意一項所述的方法制得的液體組合物。
27.一種核酸制劑，其特征在于，該核酸制劑包括載體和作為活性成分的核酸，所述載體為膠束納米顆粒，所述膠束納米顆粒由第二嵌段共聚物形成或由第一嵌段共聚物和第二嵌段共聚物共同形成，所述第一嵌段共聚物為聚己內(nèi)酯-聚乙二醇嵌段共聚物，所述第二嵌段共聚物為權(quán)利要求1-4和10中任意一項所述的嵌段共聚物，且所述第一嵌段共聚物和第二嵌段共聚物的摩爾比為0-100: 1，所述第二嵌段共聚物和核酸的摩爾比為0.1-1000: I。
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的核酸制劑，其中，所述載體中的氮原子與所述核酸的主鏈中的磷原子的摩爾比為1-100: I。·
29.根據(jù)權(quán)利要求27所述的核酸制劑，其中，所述膠束納米顆粒的顆粒直徑為10-250納米，Zeta電勢為10-100mV。
30.根據(jù)權(quán)利要求27所述的核酸制劑，其中，所述第一嵌段共聚物為聚己內(nèi)酯-聚乙二醇兩嵌段共聚物。
31.根據(jù)權(quán)利要求27所述的核酸制劑，其中，所述第一嵌段共聚物中，聚己內(nèi)酯嵌段的平均分子量為200-25000 ;聚乙二醇嵌段的平均分子量為200-10000。
32.根據(jù)權(quán)利要求27-31中任意一項所述的核酸制劑，其中，至少部分聚乙二醇嵌段為被靶向性物質(zhì)修飾的聚乙二醇嵌段，所述靶向性物質(zhì)為葉酸、糖、具有導(dǎo)向作用的短肽、單克隆抗體和適配子中的至少一種。
33.根據(jù)權(quán)利要求32所述的核酸制劑，其中，所述糖為乙酰半乳糖。
34.根據(jù)權(quán)利要求27-31和33中任意一項所述的核酸制劑，其中，所述核酸為siRNA、microRNA、shRNA、反義RNA和適配子中的至少一種。
35.權(quán)利要求1-4和10中任意一項所述的嵌段共聚物、權(quán)利要求11-17和26中任意一項所述的液體組合物或權(quán)利要求27-34中任意一項所述的核酸制劑在制備核酸藥物給藥系統(tǒng)中的應(yīng)用。
36.根據(jù)權(quán)利要求35所述的應(yīng)用，其中，所述核酸藥物能夠治療肺癌、前列腺癌或肝癌。
全文摘要
本發(fā)明提供一種聚己內(nèi)酯-聚磷酸酯嵌段共聚物、由該嵌段共聚物組成的液體組合物、一種核酸制劑以及上述共聚物和液體組合物的制備方法和它們在核酸藥物給藥系統(tǒng)中的應(yīng)用。本發(fā)明得到的嵌段共聚物具有良好的生物相容性、低細胞毒性和可降解性。本發(fā)明提供的膠束，在水溶液中自組裝形成納米顆粒，具有良好的穩(wěn)定性、生物相容性、低細胞毒性和可降解性，而且制備方法簡單，可重復(fù)性高，作為載體能保護siRNA等小核酸免于降解，又能結(jié)合納米顆粒本身的尺度效應(yīng)，用于不同疾病的治療。此外，通過鍵合靶向基團還能夠?qū)崿F(xiàn)對不同癌細胞的特異性識別。
文檔編號C08L67/04GK103073726SQ20111032918
公開日2013年5月1日 申請日期2011年10月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月26日
發(fā)明者張鴻雁, 其他發(fā)明人請求不公開姓名 申請人:蘇州瑞博生物技術(shù)有限公司