專利名稱：超臨界CO₂萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法及大蒜多糖在制備酸奶中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種超臨界CO2逆流萃取及純化大蒜多糖的方法及大蒜多糖在制備酸奶中的應用。
背景技術：
大蒜為百合科蔥屬多年生草本植物生蒜Sativum L.)的地下鱗莖。它原產于歐洲南部和亞洲西部，最早在古埃及、古羅馬和古希臘等地中海沿岸國家栽培；公元前116年，由張騫從西域引入中國陜西漢中地區(qū)，以后遍及全國；9世紀初傳入日本；16世紀前葉擴展到非洲和南美洲，18世紀后葉北美開始栽培，現(xiàn)在己遍及全世界，我國的各省區(qū)多有栽培。
由于大蒜的多種藥理作用，使之成為常用的中藥和重要的保健食品之一。從古至今，人類對其食用和藥用價值從認識到研究，經歷了一個漫長的過程，現(xiàn)如今已有了突破性的進展，大蒜以無過敏反應、無副作用、無毒性的獨特優(yōu)點，己跨入了醫(yī)藥領域。近年來國內外學者專家對大蒜的生理作用、藥理作用和臨床應用加強了研究，經研究證實大蒜有以下幾方面的作用
1)研究認為大蒜提取物中的皂角苷類物質有降低膽固醇的作用，減少得心血管疾病的危險。另外，大蒜還有改變凝血時間的作用；
2)研究認為大蒜中的甲基硒代胱氨酸和Y-谷氨酰-S-烷基硒代胱氨酸可能是大蒜中的抗癌物質；大蒜還具有降低胃液中致癌物亞硝酸鹽、亞硝胺的作用和抗染色體畸變等作用；
3)大蒜中的二烯丙基二硫化物和阿霍烯能夠抑制HIV病毒的繁殖；
4)有研究人員發(fā)現(xiàn)大蒜有降低血糖的作用，其機理可能是大蒜促進胰島素的合成，增加組織細胞對葡萄糖的吸收利用；
5)有資料表明大蒜浸提液對機體細胞免疫功能具有明顯的增強作用，試驗發(fā)現(xiàn)大蒜注射液對小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬機能有明垃促進作用，淋巴母細胞轉化率和玫瑰花瓣狀反應均顯著增高；
6)在小鼠膳食中添加5%的蒜粉可增加肝細胞膜的完整性、增加谷胱甘肽的含量和谷胱甘肽轉移酶的活性；
7)大蒜中的果膠質類多糖有促進有絲分裂、調節(jié)腸道免疫系統(tǒng)、抗?jié)兊淖饔茫?br> 8)大蒜的提取物可以作為過氧化物陰離子的清潔工，對黃曲霉毒素BI等真菌毒素的傷害有保護作用；飼喂或注射大蒜提取液可預防眼鏡蛇的蛇毒液對小鼠肝和胃組織的損害?，F(xiàn)在普遍認為，大蒜所具有的醫(yī)療保健功能是與其富含的大蒜素、有機鍺、硒、超氧化歧化酶(SOD)等活性成分有關。鮮蒜中的碳水化合物含量可達26. 5%，其中少部分碳水化合物是以糖蛋白的形式存在，如大蒜的蒜氨酸酶分子含有5%木糖，洋蔥中蒜氨酸酶分子含有1%木糖，含有木糖的多聚糖增加了它所依附的蛋白的免疫原性，因此Frank認為碳水化合物構成的不同，決定了大蒜、洋蔥免疫學性質上的差異。低聚果糖(FOS)是由蔗糖和f 3個果糖通過B. 1，2鍵與蔗糖中的果糖基結合而成的蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖及其混合物，它在人體腸道內不被消化吸收，熱量值低，到達大腸內可被雙歧桿菌利用，并能顯著抑制有害菌，是雙歧桿菌增殖因子。FOS存在于經常食用的天然植物，例如香蕉、球蔥、大蒜、西紅柿、蘆筍和菊芋等植物中，F(xiàn)OS約占大蒜總糖質的3. 9%。大蒜中發(fā)現(xiàn)的典型三糖是蔗果三糖和新蔗果三糖，蔗果三糖是大蒜中果聚糖的基礎，大蒜中低聚果糖和多聚果糖的總含量在12. 59Γ23. 5% (濕重)，大蒜增進健康的作用與二 者密切相關。在大蒜腌制品的乳酸發(fā)酵過程中由于果聚糖的水解，可使產品風味更佳。大蒜多糖的提取方法包括熱水提取法，酶法提取，酸堿提取等，然而，現(xiàn)有技術中，大蒜多糖的提取純度一般不高，而且步驟繁瑣，也沒有較好的開發(fā)大蒜多糖在飲食中的飲用。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種超臨界CO2逆流萃取及純化大蒜多糖的方法及大蒜多糖在制備酸奶中的應用。本發(fā)明所采取的技術方案是
超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，包括以下步驟
1)鮮蒜切碎后與水混合，向其中加入果膠酶進行充分酶解；
2)超臨界C02逆流萃取上步充分酶解后的產物，得到大蒜多糖的水溶液；
3)將含有大蒜多糖的水溶液進行初除蛋白，除果膠，Sevag法復除蛋白，乙醇分級醇析，制粗多糖溶液；
4)將上步得到的粗多糖溶液充分靜置沉淀，將沉淀干燥粉碎即可。鮮蒜與水的質量比為I: (I. 5-2)。果膠酶的用量為鮮蒜質量的O. 4-0. 6%ο酶解的溫度為45_47°C。所述的酶解為半密封有氧酶解。大蒜多糖在制備酸奶中的應用，將提取及純化得到的大蒜多糖、雙歧桿菌、當歸精油、純牛奶混合，進行發(fā)酵至得到酸奶即可。大蒜多糖、雙歧桿菌、當歸精油、純牛奶的用量比為(l-5g) (O. 2-0. 5g)(O.05-0. 15ml) :330ml。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明提取純化大蒜多糖的方法簡單，產率較高，將大蒜多糖應用于制備酸奶中，獲得了營養(yǎng)價值較高的食品。


圖I為大蒜多糖的紅外圖譜。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發(fā)明做進一步的說明
實施例I:
一種提取及純化大蒜多糖的方法，包括以下步驟
1)原料的前處理鮮蒜切碎后用與水混合，其中，鮮蒜水=1:1.5 (質量比)，再加入果膠酶(液體果膠酶，Novozymes公司，酶活5000FDU/ml)進行酶解3_4h，其中果膠酶的用量為鮮蒜質量的0.4%，采用的儀器為恒溫振蕩器，酶解條件為溫度45°C，時間150Min，振速為120rpm,半密封有氧酶解；
將酶解后的產物置入萃取釜中，通入二氧化碳，通過高壓泵將壓力升高至1(T35 MPa,溫度設定為32 50°C，靜態(tài)萃??；
2)開動高壓泵動態(tài)萃取，萃取壓1(T35MPa ;萃取溫度32 5(TC;再通過一級分離釜和·二級分離釜進行分離；
3)萃取完畢后，從二級分離釜中放出大蒜油；
4)從萃取釜的放液口放出含有大蒜多糖的萃余液；
5)向脫脂粗多糖液中加入冰醋酸調pH至4.5,然后離心(1000 r/min, 10 min,共兩次)，得除去部分蛋白質的上清液；
6)將初除蛋白的汁液用氨水調至pH=8.5，然后再加入5wt%的CaCl2溶液至Ca2+濃度為O. I mol/L,離心(1000 r/min, 10 min),得除去果膠的粗多糖液；
7)取氯仿-正丁醇(預先配制成體積比為41混合液)溶液加入到上述粗多糖液中，加入量為粗多糖液體積的1/3，充分攪拌30 min后離心(4000 r/min, 5 min)，將所得上清液重復此步操作數(shù)次，直至除盡蛋白質，即得到除去蛋白質的多糖液；
8)用旋轉蒸發(fā)儀除去60-80vol%的水，向裝有上述已知體積多糖液的燒杯中分5次等量添加無水乙醇，當燒杯中乙醇濃度達到50%(v/v)時，停止滴加乙醇，將混合液放入冰箱中靜置24h，收集沉淀出的多糖，真空干燥粉碎即為醇析多糖粉；
經過計算，最后的產率為25%。如圖I為大蒜多糖的紅外圖譜。實施例2:
大蒜多糖在制備酸奶中的應用，將實施例I得到的大蒜多糖、雙歧桿菌、當歸精油、純牛奶混合，進行發(fā)酵至得到酸奶即可；大蒜多糖、雙歧桿菌、當歸精油、純牛奶的用量比為(l-5g)(0.2-0. 5g) (0. 05-0. 15ml):330ml。具體的制作步驟如下
O首先將需要用到的玻璃儀器，藥勺置于高壓殺菌鍋內殺菌消毒；
2)按配方向殺菌消毒后的錐形瓶中倒入牛奶并加入菌種，用報紙和棉花密封；
3)最后發(fā)酵貯存將裝有接了菌種的牛奶的錐形瓶放入恒溫水浴鍋中，調至38°C，發(fā)酵6 8小時即可。經過10名志愿者服用，結果表明志愿者都認為加了大蒜多糖后，酸奶口感變得溫和滑膩；而當歸精油，散發(fā)濃烈當歸香氣，掩蓋了酸奶以及大蒜多糖的原本風味。
權利要求
1.超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于包括以下步驟 1)鮮蒜切碎后與水混合，向其中加入果膠酶進行充分酶解； 2)超臨界CO2逆流萃取上步充分酶解后的產物，得到大蒜多糖的水溶液； 3)將含有大蒜多糖的水溶液進行初除蛋白，除果膠，Sevag法復除蛋白，乙醇分級醇析，制粗多糖溶液； 4)將上步得到的粗多糖溶液充分靜置沉淀，將沉淀干燥粉碎即可。
2.根據(jù)權利要求I所述的一種超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于鮮蒜與水的質量比為I: (I. 5-2)。
3.根據(jù)權利要求I所述的一種超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于果膠酶的用量為鮮蒜質量的O. 4-0. 6%。
4.根據(jù)權利要求I所述的一種超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于酶解的溫度為45-47°C。
5.根據(jù)權利要求I所述的一種超臨界CO2萃余液中提取及純化大蒜多糖的方法，其特征在于所述的酶解為半密封有氧酶解。
6.大蒜多糖在制備酸奶中的應用，其特征在于將按照權利要求I的方法提取及純化得到的大蒜多糖、雙歧桿菌、當歸精油、純牛奶混合，進行發(fā)酵至得到酸奶即可。
7.根據(jù)權利要求6所述的一種大蒜多糖在制備酸奶中的應用，其特征在于大蒜多糖、雙歧桿菌、當歸精油、純牛奶的用量比為(l_5g) :(0. 2-0. 5g) (0. 05-0. 15ml) :330ml。
全文摘要
本發(fā)明公開了超臨界CO2逆流萃取及純化大蒜多糖的方法，包括以下步驟1)鮮蒜切碎后與水混合，向其中加入果膠酶進行充分酶解；2)超臨界CO2逆流萃取上步充分酶解后的產物，得到大蒜多糖的水溶液；3)將含有大蒜多糖的水溶液進行初除蛋白，除果膠，Sevag法復除蛋白，乙醇分級醇析，制粗多糖溶液；4)將上步得到的粗多糖溶液充分靜置沉淀，將沉淀干燥粉碎即可。大蒜多糖在制備酸奶中的應用，將按萃取及純化得到的大蒜多糖、雙歧桿菌、當歸精油、純牛奶混合，進行發(fā)酵至得到酸奶即可。本發(fā)明提取純化大蒜多糖的方法簡單，產率較高，將大蒜多糖應用于制備酸奶中，獲得了營養(yǎng)價值較高的食品。
文檔編號C08B37/00GK102911277SQ20121034012
公開日2013年2月6日 申請日期2012年9月14日 優(yōu)先權日2012年9月14日
發(fā)明者劉特彬 申請人:廣州市衛(wèi)斯理日化實業(yè)有限公司