高穩(wěn)定性聚乙二醇-聚酯聚合物及其應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術領域】，涉及一種高穩(wěn)定性聚乙二醇-聚酯聚合物及其應用，具體涉及一種具有親水嵌段和具有末端羥基的疏水嵌段的兩親性嵌段共聚物，其中所述的疏水嵌段末端羥基被膽酸基團取代。親水A嵌段選自聚乙二醇單甲醚、聚乙二醇、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮其中任意一種；其中疏水B嵌段選自聚丙交酯、聚丙交酯-共-乙交酯、聚乙交酯、聚己酸內酯、聚丙交酯-共-己酸內酯、聚乙交酯-共-己酸內酯和聚丙交酯-共-乙交酯-共己酸內酯其中任意一種。該聚合物在水性介質中可自發(fā)形成具有高度穩(wěn)定性的膠束，可作為各種水難溶性藥物的載體。
【專利說明】高穩(wěn)定性聚乙二醇-聚酯聚合物及其應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種高穩(wěn)定性聚乙二醇-聚酯聚合物及其應用，具體涉及包含親水A 嵌段和具有末端羥基的疏水B嵌段的兩親性嵌段共聚物及其應用。
【背景技術】
[0002]聚合物膠束作為一種有效的藥物運送載體已經(jīng)受到廣泛關注，聚合物膠束是由兩親性的高分子材料在水中自發(fā)形成的一種自組裝結構，它具有疏水性內核和親水性外殼的典型結構。其中，疏水嵌段形成包載藥物的疏水性內核，而親水嵌段包繞在外形成親水性外殼起到保護性作用。與其它載體相比，嵌段共聚物膠束具有如下優(yōu)點:(I)粒徑較小， 使之不易被網(wǎng)狀內皮組織RE S吞噬，因而能長時間在血液中循環(huán)并保持穩(wěn)定，見W e i s s i g V, Whiteman KR, Torchilin VP.Accumulation of protein-loaded long-circulating micelles and liposomes in subcutaneous Lewis lung carcinoma in mice [J].Pharm Res, 1998，15(10): 1552-1556.; (2)納米級的粒徑使載藥膠束在靶位表現(xiàn)出更佳的細胞穿透能力，參考 Maeda H，Wu J, Sawa T, et al.Tumor vascular permeability and the EPR effect in macromoIecuIar therapeutics: a review [J].J Control Release, 2000，65(1-2): 271-284.； (3)具有較低的臨界膠束濃度(CMC)值，參考 Lavasanifar A, Samuel J, Kwon GS.Poly (ethylene oxide)-block-poly(L-amino acid) micelles for drug delivery [J].Adv Drug Deliv Rev, 2002, 54(2): 169-190,在血液循環(huán)中不易被血液稀釋而破壞膠束結構，較穩(wěn)定；(4)增溶難溶性藥物，將難溶性藥物包裹在聚合物膠束的內核中，提高生物利用度，由于大分子膠束外部有親水部分的保護，使其不易與蛋白質和吞噬細胞吸附與識別，不易因酶降解而失活，從而保證在血漿與組織中的停留時間，通過增加滲透與滯留效應達到被動靶向的效果。
[0003]在這些具有親水表面的納米大小的藥物載體中，聚合物膠束通常包括幾百個嵌段共聚物，直徑大約為20nm到lOOnm。聚合物膠束具有兩個球狀共-中心區(qū)域，負責荷載疏水藥物的密集排列的疏水物質的核心和能在血液中長時間循環(huán)用于躲避身體RES的由親水物質組成的外殼。盡管它們有獨特的優(yōu)點例如尺寸小、溶解度高、滅菌簡單和控制藥物釋放，但是由于在體內可能出現(xiàn)結合了的藥物被迅速釋放，因此這些載體的物理穩(wěn)定性是個關鍵問題。
[0004]如果共聚物的濃度在臨界膠束濃度(CMC)之上，那么膠束就是熱力學穩(wěn)定的。這樣，使用具有低CMC值的共聚物體系就可能提高膠束的體內穩(wěn)定性。動力學穩(wěn)定性指的是膠束的分解速率。分解速率取決于膠束核心的物理狀態(tài)。由包含具有高玻璃態(tài)轉化溫度的疏水嵌段的共聚物形成的膠束將比那些具有低玻璃態(tài)轉化溫度的膠束解離 慢。它們也可能受許多能影響膠束間單聚體交換速率的相同因素的影響。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)單聚體的交換速率取決于許多因素例如核心中的溶劑含量、共聚物的疏水含量以及親水和疏水嵌段的長度。
[0005]現(xiàn)有的聚乙二醇單甲醚-聚丙交酯(mPEG-PDLLA)聚合物膠束因其具有良好的生物相容性已經(jīng)進入臨床研究階段。臨床前體內研究表明載紫杉醇的mPEG-PDLLA聚合物膠束相比于游離紫杉醇，其最大耐受劑量(MTD)提高了 3倍。包括肝、脾、腎在內的組織內紫杉醇藥物濃度是游離紫杉醇的2-3倍。但是其物理穩(wěn)定性差，載藥膠束在室溫下24小時即開始出現(xiàn)明顯的藥物泄漏，載藥量大幅度降低。由于這個缺點的存在，該給藥系統(tǒng)在制備、 保存以及臨床應用上都受到了很大的限制。例如在制備過程中，水化的溫度需要控制在35 攝氏度以下，滅菌過程中也不能接觸高溫。在保存方面，載藥膠束只能在24小時之內保持穩(wěn)定，因此也不能以溶液的形式進行運輸，保存。在臨床應用方面，由于該聚合物膠束向靶器官分布主要是依靠被動靶向，這一過程需要一段時間來完成，如果膠束的穩(wěn)定性較差，在到達靶器官之前就會發(fā)生藥物泄漏，使得療效降低，毒性增大。因此，如何提高該聚合物膠束的穩(wěn)定性是一個十分重要的問題。
[0006]改進聚合物膠束穩(wěn)定性的一個方法是提高聚合物的疏水性。為了這樣做，就應該調節(jié)聚合物的分子量或濃度，然而，隨著分子量的增加，其生物可降解性也在降低，因此， 聚合物從身體的排泄就不充分，它們聚集在器官中在那引起毒性作用。另外，在美國專利 US6458373 BI中，低水溶性藥物被溶解在帶有a -生育酚的乳劑形式中。根據(jù)這個專利，為了穩(wěn)定乳劑，使用了作為表明活性劑的PEG化維生素E。PEG化維生素E具有與兩親嵌段共聚物相似的結構，其中嵌段共聚物包含親水嵌段和疏水嵌段，高疏水性的生育酚提高了共聚物與低水溶性藥物的親和力，這樣便能溶解低水溶性藥物。

【發(fā)明內容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種藥物載體，這種藥物載體具有載藥量大和穩(wěn)定性高的特點。
[0008]本發(fā)明是通過如下技術方案實現(xiàn)的:
本發(fā)明的藥物載體含有親水A嵌段和疏水B嵌段，其結構為A-B型二嵌段共聚物或 B-A-B型三嵌段共聚物。其中所述的疏水B嵌段末端羥基被膽酸(cholic acid, CA)取代。 其中親水A嵌段選自聚乙二醇單甲醚、聚乙二醇、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮其中任意一種；其中疏水B嵌段選自聚丙交酯、聚丙交酯-共-乙交酯、聚乙交酯、聚己酸內酯、聚丙交酯-共-己酸內酯、聚乙交酯-共-己酸內酯和聚丙交酯-共-乙交酯-共己酸內酯其中任意一種。
[0009]親水A嵌段和疏水B嵌段的重量比在10:90~90:10，優(yōu)選:40:60~60:40。
[0010]其中親水A嵌段的數(shù)均分子量為396到49984道爾頓，優(yōu)選:1496~5984道爾頓。 [0011 ] 其中疏水B嵌段的數(shù)均分子量為360到49968道爾頓，優(yōu)選:1800~3960道爾頓。
[0012]其中疏水B嵌段的末端羥基的膽酸基團取代率在5%_100%之間，優(yōu)選:30_75%。
[0013]本發(fā)明的嵌段共聚物可以用于制備載藥膠束溶液，所述的制備方法為薄膜分散法、溶劑蒸發(fā)法、凍干法和透析法等。薄膜分散法即將聚合物和藥物溶于一種有機溶劑中， 超聲使其充分溶解之后，減壓條件下，旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑得到含有藥物的薄膜，再加入合適的水化介質水化薄膜，得到澄清帶有乳光的載藥膠束溶液，離心，微孔濾膜過濾，即得膠束溶液。[0014]溶劑蒸發(fā)法即將嵌段共聚物、藥物溶于極性或非極性溶劑中，在攪拌下逐漸滴加水或與水相進行混合，然后在一定溫度下下蒸去有機溶劑，即得膠束溶液。
[0015]凍干法系指將藥物和聚合物溶于可用于凍干的有機溶劑(乙醇、叔丁醇等)后，再與水混合，經(jīng)凍干除去溶劑后即得載藥膠束，經(jīng)水化后形成膠束溶液。
[0016]所述的嵌段共聚物膠束可以用于包載各種疏水性藥物，包括抗腫瘤藥物(如紫杉醇、5-氟尿嘧啶、依托泊苷、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、六甲三聚氰胺、甲氨喋呤、甲環(huán)亞硝脲、去甲長春花堿、替尼泊苷、高三尖衫酯堿、羥基喜樹堿等)、抗生素(如氯霉素、紅霉素、 依托紅霉素、琥乙紅霉素、麥迪霉素、交沙霉素、克拉霉素、羅他霉素、磺胺嘧啶、甲氧芐胺嘧啶、呋喃妥因、利福平、利福昔明、異丁哌利福霉素、氨苯砜、醋氨苯砜、咪康唑等)、心血管藥物(如硝苯地平、尼卡地平、尼群地平、尼伐地平、桂利嗪、哌克昔林、嗎多明、洋地黃毒甙、地高辛)、非留體抗炎藥(如賽庚啶、苯噻啶、酮替芬等)。疏水性藥物在嵌段共聚物膠束中的載藥比例在1%~50%之間，優(yōu)選為5%~30%之間。載藥膠束的粒徑在15nm~500nm之間， 優(yōu)選為20nm~200nm之間。
嵌段共聚物臨界膠束濃度(CMC)的測定:本發(fā)明中的CMC值是采用精確、可靠的熒光光譜法測得。熒光光譜法需要使用一種熒光探針物質，常用的是芘。芘是一種疏水性芳香化合物，對環(huán)境極性敏感。當兩親性分子的濃度低于CMC時，溶液中不會形成膠束，芘溶解在極性的水中；隨著兩親性分子的濃度高于CMC，膠束形成，芘向膠束內核的疏水部分分配， 從而進入非極性環(huán)境，繼而在其熒光光譜中可以觀察到一系列變化，如熒光強度將增加，發(fā)射光譜中振動精細結構發(fā)生變化。因此，通過以芘的發(fā)射光譜中I1A3比(在固定的激發(fā)波長下掃描，Ii>I3分別代表發(fā)射光譜中第一和第三強峰的突光強度比)或激發(fā)光譜中 t匕(激發(fā)光譜中波長分別為338nm和333nm的熒光強度比)對兩親分子的濃度作圖即可獲得兩親分子的表觀CMC。圖中斜率發(fā)生變化的點即是形成膠束的臨界點，對應的兩親分子的濃度即是CMC。
[0017]本發(fā)明提供的膽酸修飾的兩親性嵌段共聚物相對于原共聚物具有如下的優(yōu)勢:1.提高了共聚物疏水嵌段的疏水性，并未明顯改變原共聚物的分子量和生物可降解性；2.共聚物疏水嵌段末端膽酸基團的修飾顯著提高了疏水嵌段與水難溶性藥物的親和力，因此， 共聚物的載藥量更高，載藥膠束的穩(wěn)定性更好。3.膽酸基團的疏水作用力有助于提高載藥膠束在制備和放置過程中的穩(wěn)定性，有利于簡化工業(yè)化生產(chǎn)過程；4.膽酸基團的疏水作用力有助于減少藥物在血液循環(huán)中的泄漏，有利于提高載藥膠束的靶向性，從而獲得更好的治療效果。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0018]圖1為mPEG-PDLLA-CA的化學結構式。
[0019]圖2為聚乙二醇-聚丙交酯-膽酸(取代度30%)的NMR圖譜。
[0020]圖3為聚乙二醇-聚丙交酯-膽酸(取代度60%)的NMR圖譜。
[0021]圖4為聚乙二醇-聚丙交酯-膽酸(取代度75%)的NMR圖譜。
[0022]圖5為聚乙二醇-聚丙交酯-膽酸(取代度90%)的NMR圖譜。
[0023]圖6為聚丙交酯-共-乙交酯-聚乙二醇-聚丙交酯-共-乙交酯的NMR圖譜。
[0024]圖7為聚乙二醇單甲醚-聚丙交酯-共-乙交酯的NMR圖譜。
[0025]圖8為測定CMC值所作圖譜。
[0026]圖9為載紫杉醇聚合物膠束的粒徑。
[0027]圖10為載兩性霉素B聚合物I父束的粒徑。[0028]圖11為載阿霉素聚合物膠束的粒徑。
[0029]圖12為載伊曲康唑聚合物膠束的粒徑。
[0030]圖13為載紫杉醇聚合物膠束的物理穩(wěn)定性實驗。
[0031]圖14為載紫杉醇聚合物膠束的釋放曲線。
【具體實施方式】
[0032]下面為本發(fā)明的實施例，但下述實施例并不限制本專利的權利范圍。
[0033]實施例1兩親性嵌段共聚物mPEG-PDLLA-CA的合成
采用開環(huán)聚合方法合成mPEG -PDLLA兩嵌段共聚物。聚合管經(jīng)鉻酸洗液浸泡后，蒸餾水洗滌，干燥后備用。稱取一定比例的聚乙二醇單甲醚(mPEG2000)與丙交酯單體裝入干燥的聚合管中，再加入催化劑異辛酸亞錫Sn (Oct)2 (用量為反應物重量的1%。)，經(jīng)高純氮氣除氧后，真空下封管，在烘箱140°C下反應6h，得到淡黃色透明的半固體產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物冷卻，用少量二氯甲烷溶解后轉移到小燒杯中，冷阱中用大量乙醚進行沉淀，抽濾結晶物， 此操作重復兩次得較純凈的兩段聚合物。之后再放入真空干燥器中，干燥3天，產(chǎn)率在80% 以上。通過調節(jié)投入的聚乙二醇單甲醚和丙交酯的比例，分別得到了 mPEG:PDLLA質量比為
4:6、5:5和6:4的嵌段共聚物。
[0034]分別稱取一定量已合成的mPEG-PDLLA，羰基二咪唑和膽酸于燒杯中，用適量DMF 使其完全溶解，將膽酸/DMF溶液和羰基二咪唑/DMF溶液轉移至圓底燒瓶中，室溫攪拌30 分中進行活化，然后將mPEG-PDLLA/DMF溶液加入其中，60攝氏度反應48小時。停止反應后，將產(chǎn)物轉移入透析的中，透析三天除去未反應的小分子物質。然后冷凍干燥得產(chǎn)物。產(chǎn)物的結構式見圖1，其中X為親水嵌段的聚合物，介于9~1136，優(yōu)選34~136，y為疏水嵌段的聚合物，介于5~694，優(yōu)選25~55。
[0035]采用峰面積比較法測定膽酸的取代度。膽酸18位碳原子上連著的氫原子化學位移是0.72，mPEG-PDLLA中的端基甲氧基上連著的氫原子化學位移是3.4，由于這兩個化學位移附近干擾較少，且在各自的分子中不重復出現(xiàn)，選擇這兩個峰進行面積，計算取代度 (D%=A0.72/A3.4)o膽酸與聚合物投入量的比例分別為摩爾比1:3、3:4、1:1和2:1時，合成了膽酸取代度分別為30%，60%、75%和90%的mPEG-PDLLA-CA。
[0036]mPEG-PDLLA-CA (不同膽酸取代度)的NMR圖譜(氘代氯仿為溶劑)見圖2_5。聚丙交酯-共-乙交酯-聚乙二醇-聚丙交酯-共乙交酯，聚乙二醇單甲醚-聚丙交酯-共-乙交酯的NMR圖譜分別為圖6，圖7.實施例2嵌段共聚物CMC的測定
(1)儲備液的配制
芘儲備液的配制:稱取6mg芘置于50mL棕色容量瓶中，加入丙酮溶解并稀釋至刻度配成6X 10_4mol ? L—1的芘溶液。精密量取1.0mL至25mL容量瓶中，加入丙酮定容，得到濃度為2.4X10_5 mol L-1的芘溶液，精密吸取10mL至100mL棕色容量瓶中，丙酮定容至終濃度為2.4X 10_6 mo l ? L_1得到芘的儲備液。
[0037]聚合物儲備液的配制:稱取20mg mPEG-PDLLA-CA嵌段共聚物置于20mL容量瓶中， 蒸餾水溶解并稀釋至刻度，得到濃度為1 mg ? mL—1的聚合物儲備液。
[0038](2) CMC 的測定樣品的配制:向10 mL容量瓶中分別加入500uL芘儲備液，在60°C水浴揮去丙酮， 然后加入不同濃度的聚合物溶液，定容，使聚合物的濃度范圍10_4-10_4 ? L—1，芘濃度為
1.2 X IO^mol ? L'超聲30min，震蕩數(shù)次使溶液均勻，樣品制好后應先超聲30min，避光暗處放置過夜使芘和膠束之間充分平衡。
[0039](3)熒光條件確定
按照以激發(fā)波長確定最大發(fā)射波長，以發(fā)射波長測定最大激發(fā)波長的原則，確定芘探針的發(fā)射波長為390 nm。掃描樣品的激發(fā)光譜，測定一系列不同濃度的樣品在338 nm、333 nm處的熒光強度I338和1333，以共聚物濃度(g -T1)的對數(shù)值為X軸，1338/1333為Y軸作圖， 通過曲線的突變點確定聚合物的CMC值。
[0040]熒光條件:發(fā)射波長390nm 激發(fā)波長范圍305~350nm 激發(fā)和發(fā)射狹縫寬度均為5nm。
[0041]石英樣品池I cmXl cm
結果表明在pH7.4、37°C條件下，通過作曲線的切線(見圖8)測得mPEG-PDLLA-CA (取代度75%)共聚物膠束的臨界膠束濃度為3.24X 10VL,與膽酸取代之前的聚合物 mPEG-PDLLA的CMC (6.26X 10VD相比，CMC較低，說明嵌段共聚物有更低的臨界膠束濃度，可以較穩(wěn)定的存在。
[0042]實施例3載紫杉醇聚合物膠束的制備及粒徑測定
凍干法:先稱取7mg紫杉醇溶于叔丁醇中，再與含有mPEG-PDLLA-CA嵌段共聚物20mg 的水溶液混合，使水/叔丁醇體積比為70:30。混合溶液在4°C攪拌3h后用0.22um的微孔濾膜過濾除菌，冷凍干燥，即得載紫杉醇聚合物膠束凍干膠束，臨用前注射用水或其它溶媒稀釋即可。
[0043]透析法:分別稱取`mPEG-PDLLA-CA嵌段共聚物20mg和紫杉醇7mg溶于IOmlL DMSO 中，超聲lOmin，攪拌過夜使其鏈段充分伸展，預先滴入20%的蒸餾水，攪拌2h，用蒸餾水透析24h,每隔一段時間更換透析介質。最后10000 rpm/min離心IOmin,去除游離的PTX和聚合物，產(chǎn)品以0.22um微孔濾膜濾過除菌，得到透明的膠束溶液。
[0044]薄膜分散法:分別稱取mPEG-PDLLA-CA嵌段共聚物20mg和紫杉醇7mg于茄形瓶中，量取IOmL乙腈，超聲使聚合物充分溶解，60°C條件下水浴，旋轉蒸發(fā)30分鐘除去有機溶劑，然后加入IOmL生理鹽水，30°C條件下水化15分鐘。水化結束之后，12000r/min離心十分鐘，取上清，產(chǎn)品以0.22 微孔濾膜濾過除菌，即得到載紫杉醇聚合物膠束溶液。
[0045]使用馬爾文粒徑測定儀，采用動態(tài)光散射法技術，分別測得凍干法，透析法和薄膜分散法制備的紫杉醇聚合物膠束的粒徑為89.47nm，44.72nm和54.35nm。其中薄膜分散法制得的載藥膠束粒徑見圖9。
[0046]實施例4載兩性霉素B聚合物膠束的制備及粒徑測定
稱取mPEG-PDLLA-CA嵌段共聚物，并量取5mL的兩性霉素B儲備液于茄形瓶中，量取 IOmL乙腈，超聲使聚合物充分溶解，60°C條件下水浴，旋轉蒸發(fā)30分鐘除去有機溶劑，然后加入IOmL生理鹽水，30°C條件下水化15分鐘。水化結束之后，12000r/min離心十分鐘，取上清，產(chǎn)品以0.22 y m微孔濾膜濾過除菌，即得到載兩性霉素B聚合物膠束溶液。
[0047]使用馬爾文粒徑測定儀，采用動態(tài)光散射法技術，測得兩性霉素B聚合物膠束的粒徑為47.51nm。見圖10。
[0048]實施例5載阿霉素聚合物膠束的制備及粒徑測定
稱取mPEG-PDLLA-CA嵌段共聚物，并量取5mL阿霉素儲備液于茄形瓶中，超聲使聚合物充分溶解，60°C條件下水浴，旋轉蒸發(fā)30分鐘除去有機溶劑，然后加入IOmL生理鹽水，30°C 條件下水化15分鐘。水化結束之后，12000r/min離心十分鐘，取上清，產(chǎn)品以0.22 y m微孔濾膜濾過除菌，即得到載阿霉素聚合物膠束溶液。
[0049]使用馬爾文粒徑測定儀，采用動態(tài)光散射法技術，測得阿霉素聚合物膠束的粒徑為 16.95nm。見圖 11。
[0050]實施例6載伊曲康唑聚合物膠束的制備及粒徑測定
分別稱取mPEG-PDLLA-CA嵌段共聚物20mg和伊曲康唑8mg于茄形瓶中，量取IOmL乙腈，超聲使聚合物充分溶解，60°C條件下水浴，旋轉蒸發(fā)30分鐘除去有機溶劑，然后加入 IOmL生理鹽水，30°C條件下水化15分鐘。水化結束之后，12000r/min離心十分鐘，取上清， 產(chǎn)品以0.22um微孔濾膜濾過除菌，即得到載伊曲康唑聚合物膠束溶液。
[0051]使用馬爾文粒徑測定儀，采用動態(tài)光散射法技術，測得伊曲康唑聚合物膠束的粒徑為84.18nm。見圖12。
[0052]實施例7不同載體材料載紫杉醇膠束物理穩(wěn)定性的比較
分別取不同載體材料(mPEG與TOLLA嵌段質量比分別為4:6、5:5和6:4的mPEG-PDLLA 和膽酸取代度分別為30%，60%, 75%的mPEG- PDLLA-CA)制備的載紫杉醇膠束20ml，置于25°C 恒溫箱中，分別于2、4、6、9、21、24、30、48小時，取樣，過濾，取續(xù)濾液，分別測定紫杉醇含量，結果見圖13。可見mPEG-PDLLA-CA載紫杉醇膠束的穩(wěn)定性大大高于mPEG-PDLLA，且隨著膽酸取代度的增加，穩(wěn)定性增強。
[0053]HPLC法測定紫杉醇的含量:
色譜柱:Hypersil ODS C18 柱(4.6X150 mm, 5 um,迪馬)
流動相:乙腈-水(60:40, v/v)
流速:1.0 mL ? mirf1 柱溫:25°C 檢測波長:230 nm 進樣量:20 UL0
[0054]實施例8載紫杉醇mPEG-PDLLA-CA聚合物膠束和mPEG-PDLLA膠束釋放度的比較將制備得到的mPEG-PDLLA (4:6)載紫杉醇膠束和mPEG-PDLLA-CA (取代度75%)載紫
杉醇膠束分別用生理鹽水稀釋至0.25 mg/mL,精密移取0.5 mL至MWC03500透析袋中，以
0.5% Tween 80的pH 7.4磷酸鹽緩沖液50 mL作為釋放介質，裝入100 mL具塞錐形瓶中， 置于 37°C搖床中，轉速 100 rpm，分別于 0.25、0.5、1、2、4、6、8、10、12、24、36、48h 取 I mL 同時補充I mL空白介質，稀釋續(xù)濾液后，進液相測定含量，并繪制累積釋放曲線。采用高效液相色譜法測定釋放介質中的藥物濃度，計算累積釋放量并繪制累積釋放曲線，見圖14。經(jīng)膽酸修飾前后的載藥聚合物膠束的釋藥行為與修飾之前相比較更為緩慢。累積釋放度計算公式如下:
【權利要求】
1.一種高穩(wěn)定性聚乙二醇-聚酯聚合物，含有親水A嵌段和疏水B嵌段，其特征在于，疏水B嵌段的末端羥基被膽酸基團取代；其中親水A嵌段選自聚乙二醇單甲醚、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮或聚丙烯酰胺；其中疏水B嵌段選自聚丙交酯、聚丙交酯-共-乙交酯、聚己酸內酯、聚丙交酯-共-己酸內酯、聚乙交酯-共-己酸內酯或聚丙交酯-共-乙交酯-共己酸內酯。
2.根據(jù)權利要求1的聚乙二醇-聚酯聚合物，其特征在于，聚合物的分子結構是A-B型二嵌段共聚物或B-A-B型三嵌段共聚物。
3.根據(jù)權利要求1的聚乙二醇-聚酯聚合物，其特征在于，親水A嵌段和疏水B嵌段的重量比為10:90~90:10，優(yōu)選40:60~60:40。
4.根據(jù)權利要求1的聚乙二醇-聚酯聚合物，其特征在于，其中親水嵌段的數(shù)均分子量為396到49984道爾頓，優(yōu)選1496~5984道爾頓。
5.根據(jù)權利要求1的聚乙二醇-聚酯聚合物，其特征在于，其中疏水嵌段的數(shù)均分子量為360到49968道爾頓，優(yōu)選1800~3960道爾頓。
6.根據(jù)權 利要求1的聚乙二醇-聚酯聚合物，其特征在于，其中疏水嵌段的末端羥基的膽酸基團取代率在5%-100%之間，優(yōu)選30~75%。
7.根據(jù)權利要求1所述的聚乙二醇-聚酯聚合物，其特征在于，親水A嵌段為聚乙二醇，疏水B嵌段為聚丙交酯-膽酸。
8.權利要求1-7任何一項所述的聚乙二醇-聚酯聚合物在制備載藥聚合物膠束中的應用。
9.根據(jù)權利要求8所述的應用，其特征在于，所述藥物選自抗腫瘤藥物、抗生素藥物、 心血管藥物、抗糖尿病藥物或非留體抗炎藥物。
10.根據(jù)權利要求8所述的應用，其特征在于，所述藥物為紫杉醇、5-氟尿嘧啶、依托泊苷、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、六甲三聚氰胺、甲氨喋呤、甲環(huán)亞硝脲、去甲長春花堿、替尼泊苷、高三尖衫酯堿、羥基喜樹堿、氯霉素、紅霉素、依托紅霉素、琥乙紅霉素、麥迪霉素、交沙霉素、克拉霉素、羅他霉素、磺胺嘧啶、甲氧芐胺嘧啶、呋喃妥因、利福平、利福昔明、異丁哌利福霉素、氨苯砜、醋氨苯砜、咪康唑、硝苯地平、尼卡地平、尼群地平、尼伐地平、桂利嗪、 哌克昔林、嗎多明、洋地黃毒甙、地高辛、賽庚啶、苯噻啶、酮替芬。
【文檔編號】C08G63/91GK103601878SQ201310598786
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年11月25日 優(yōu)先權日:2013年11月25日
【發(fā)明者】喬明曦, 曾劍夫, 陳大為, 朱嘉, 胡海洋, 趙秀麗 申請人:沈陽藥科大學