一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝，所述的工藝包括以下步驟：（1）將茯苓粉碎過篩成20目粗粉，然后加入5～10倍的去離子水，得到料液；（2）將步驟（1）得到的料液經(jīng)過離心機過濾；（3）將步驟（2）得到的濾液用微濾膜PP棉過濾；（4）將步驟（3）得到的濾液用公稱截留分子量為10000道爾頓的聚砜中空纖維式超濾膜（UF）進一步過濾；（5）將步驟（4）所得濾液通過真空冷凍干燥的方式進行干燥；（6）將步驟（5）制備的茯苓多糖，以果蠅為動物模型，進行抗氧化防衰老的研究；（7）將步驟（5）制備的茯苓多糖。本發(fā)明操作簡單、大提高了多糖的純度及效率。
【專利說明】一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提取及分離【技術(shù)領(lǐng)域】。發(fā)明涉及一種以茯苓為原料制備茯苓多糖的提取分離純化方法，及其降血糖和抗氧化活性的功效評價。
【背景技術(shù)】
[0002]茯苓屬于非褶菌目多孔菌科茯苓屬，為真菌類中藥。味甘、淡、平、歸心、脾、腎經(jīng)，具有利水滲濕、健脾寧心等功效。茯苓中的主要藥效成分為茯苓多糖。茯苓多糖具有抗腫瘤，抗病毒、抗氧化、增強機體免疫力、保肝、催眠、抗炎、消石等作用，可廣泛的應(yīng)用于醫(yī)療保健、食品等領(lǐng)域。茯苓多糖可用于抗腫瘤藥物的研發(fā)、從而為腫瘤、癌癥的治療提供新的方法，還可作為免疫增強劑，用于保健品的開發(fā)與研制。茯苓多糖的生產(chǎn)工藝有很多，目前國內(nèi)外大多采用水提醇沉法、堿提醇沉法、微波超聲波輔助法、發(fā)酵醇沉法提取，再進一步通過季銨鹽沉淀法、分布沉淀法、凝膠層析法等方法對茯苓多糖進行分離純化，成為單一組分多糖。目前的提取分離方法，雖然具有價廉、無毒、操作安全等優(yōu)點，但是浸提時間過長且提取率較低，不能夠得到有效的單一成分的茯苓多糖。
[0003]本發(fā)明的提取分離方法在于采用超聲輔助逆流煮提方法代替?zhèn)鹘y(tǒng)的浸提方法，并結(jié)合集成膜分離制備茯苓多糖。本發(fā)明的提取、膜分離去雜純化工藝具有工藝簡便、提取率高，產(chǎn)品質(zhì)量好、綜合效益顯著的優(yōu)點，適用于工廠擴大化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明要解決的主要技術(shù)問題是:
(1)提供一種有效的去離子水浸提新方法高效提取茯苓多糖；` (2)提供一種新型膜分離技術(shù)分離純化茯苓多糖，該工藝具有操作簡單，條件溫和，分離效率高，已經(jīng)成為多糖分離純化研究的重要手段。
[0005]本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn):
一種有效的去離子水浸提新方法利用的輔助技術(shù)為超聲或者微波；
一種有效的去離子水浸提新方法利用的浸提新工藝為逆流煮提；
一種用于茯苓多糖分離純化的膜分離系統(tǒng)按截留分子量或孔徑分:
微濾陶瓷膜0.1 μ m
微濾膜PP棉I~10 μ m
超濾膜10000~30000
一種膜分離純化茯苓多糖的工藝，所述的工藝包括以下步驟:
(1)將茯苓粉碎過篩成20目粗粉，然后加入5~10倍的去離子水，超聲逆流加熱煮沸IOOmin ;超聲功率0.5~20 MHz，浸提過程中間歇攪拌原料，控制降溫速度為I~10°C /小時，然后留取料液；按照相同條件繼續(xù)煮提三次，合并四次料液；
(2)將步驟(1)得到的料液經(jīng)過離心機過濾，去除200目以下的雜質(zhì)，料液冷卻至30°C以下；(3)將步驟(2)得到的濾液用微濾膜PP棉過濾，操作溫度25~35°C，壓力0.1~0.5Mpa ；
(4)將步驟(3)得到的濾液用公稱截留分子量為10000道爾頓的聚砜中空纖維式超濾膜(UF)進一步過濾，操作溫度25~35 °C，壓力0.05~0.1Mpa ；
(5)將步驟(4)所得濾液通過真空冷凍干燥的方式進行干燥；
(6)將步驟(5)制備的茯苓多糖，以果蠅為動物模型，進行抗氧化防衰老的研究。
[0006](7)將步驟(5)制備的茯苓多糖，采用體外α -葡萄糖苷酶抑制模型進行酶抑制活性研究。
[0007]所述的工藝還包括從步驟(1)到步驟(5)均在密閉容器內(nèi)進行。
[0008]所述的工藝還包括:
(I):步驟(3)中的微濾包括孔徑為0.1~10 μ m的纖維素膜、陶瓷膜或PP棉。
[0009](2):步驟(4)中的超濾膜為公稱截留分子量為10000道爾頓聚砜或聚丙烯超濾膜。
[0010]所述的生產(chǎn)工藝采用冷凍干燥或噴霧干燥或低溫真空帶式干燥將步驟(4)得到的濃縮液進行干燥。
[0011]本發(fā)明有益效果:本發(fā)明所使用的超聲輔助逆流煮提方法能夠大幅度的縮短提取時間，增加有效成分的提取率，減少雜質(zhì)的溶出。該方法不受有效成分極性、分子量大小的限制，加快可溶物質(zhì)有效成分高效充分的溶出、擴散。本發(fā)明采用的膜分離純化方法能有有效的去除茯苓多糖中的大分子蛋白、多酚、色素等物質(zhì)，且與傳統(tǒng)的除蛋白和脫色方法相比，操作簡單、條件溫和、不僅可以避免茯苓多糖在操作過程中活性降低，還大大提高了多糖的純度，也提高了多糖進一步分離純化的效率。
【具體實施方式】
[0012]實施例1
取茯苓5kg，投入浸提罐，加入去離子水30kg后，加蓋密封，控制溫度為90°C，輔助超聲波功率為10 MHz，每小時間歇攪拌5分鐘，浸提80min后，濾出濾液，再分別加入IOkg去離子水進行三次次提取(每次煮提30min)，合并四次煮提液經(jīng)離心機粗過濾后共濾出55kg，冷卻至30°C ;將濾液用孔徑為5 μ m的微濾膜PP棉過濾，操作溫度25°C，壓力0.3Mpa，得到濾液51kg ;得到的濾液用公稱截留分子量10000道爾頓的聚砜超濾膜PS-10進一步過濾，操作溫度25°C，壓力0.05Mpa，得到濾液49kg ;濾液濃縮后經(jīng)冷凍干燥得到茯苓多糖粉末3.7kg。
[0013]實施例2
取茯苓10kg，萃取劑100kg，并投入提取罐，控制溫度為95°C，輔助超聲波功率為15MHz，每小時間歇攪拌10分鐘，浸提，IOOmin后，濾出濾液，再加入50kg萃取劑提取lOOmin，兩次提取液合并后離心過濾去除雜質(zhì)；濾液146kg冷卻至30°C后，用孔徑為10 μ m的微濾膜PP棉過濾，操作溫度30°C，壓力0.5Mpa，得到濾液143kg ;將濾液用公稱截留分子量30000道爾頓的卷式聚丙烯超濾膜HPS-30進一步過濾，操作溫度30°C，壓力0.2Mpa，得到濾液138kg ;濾液濃縮后經(jīng)冷凍干燥得到藏紅花素粉末7.8kg。
【權(quán)利要求】
1.一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝，它包括去離子水煮提、離心過濾、集成膜分離；其特征在于:包括以下步驟: (1)去離子水煮提:將茯苓粉碎過篩成20目粗粉，然后加入5~10倍的去離子水，超聲逆流加熱煮沸IOOmin,提取4次； (2)離心除雜:將提取液經(jīng)過離心機進行分離除雜，合并濾液； (3)微濾膜去除大分子雜質(zhì):經(jīng)離心機分離除雜后的濾液，用微濾膜PP棉過濾，操作溫度 25 ~35°C，壓力 0.1 ~0.5Mpa ； (4)超濾膜分離茯苓多糖:將(3)得到的濾液用公稱截留分子量為10000道爾頓的聚砜中空纖維式超濾膜(UF)進一步過濾，操作溫度25~35 °C，壓力0.05~0.1Mpa ； (5)產(chǎn)品的干燥:將步驟(4)所得濾液通過真空冷凍干燥的方式進行干燥； (6)茯苓多糖抗氧化作用:將步驟(5)制備的茯苓多糖，以果蠅為動物模型，進行抗氧化防衰老的研究； (7)茯苓多糖降血糖作用 :將步驟(5)制備的茯苓多糖，采用體外α-葡萄糖苷酶抑制模型進行降血糖作用研究。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝，其特征在于步驟(1)中超聲逆流煮提方法，其特種在于所述的方法為超聲輔助煮沸的去離子水逆流提取。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝，其特征在于步驟(2)中離心機，其特征在于所述的離心機從平板離心機、臥式離心機和碟式離心機中選擇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝，其特征在于步驟(3)中的膜系統(tǒng)，其特征在于所用的膜是微濾陶瓷膜、微濾PP棉、中空式纖維超濾膜或卷式超濾膜。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝，其特征在于步驟(5)中的干燥方式為冷凍干燥或噴霧干燥。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝，其特征在于步驟(6)中的抗氧化作用研究，以果蠅為動物模型，通過飼喂茯苓多糖進行抗氧化防衰老的研究。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種膜分離純化技術(shù)制備茯苓多糖提取物新工藝，其特征在于步驟(7)中的降血糖作用研究，其特征在于采用體外α-葡萄糖苷酶抑制模型進行降血糖作用研究。
【文檔編號】C08B37/00GK103772523SQ201410015582
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年1月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月14日
【發(fā)明者】何靜仁, 洪峰, 劉莉, 段李歌, 蔡小雙, 齊敏玉 申請人:武漢新國峰科技開發(fā)有限公司