一種微流控芯片、使用其合成功能納米顆粒的方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種微流控芯片、使用其合成功能納米顆粒的方法及應(yīng)用。所述微流控芯片按流體的流向包括第一通道、第二通道、第三通道、第四通道、第五通道、第六通道、第七通道和第八通道；所述第一通道和第二通道分別分布于所述第三通道兩側(cè)并與所述第三通道交叉于第一交叉點(diǎn)；所述第四通道起始于所述第一交叉點(diǎn)，并分叉成第五通道和第六通道；所述第五通道和第六通道分別分布于所述第七通道兩側(cè)并與所述第七通道交叉于第二交叉點(diǎn)；所述第八通道起始于第二交叉點(diǎn)，具有對(duì)流體的混合功能。本發(fā)明的微流控芯片具有集成化高、操控簡(jiǎn)便、易于控制及傳質(zhì)傳熱迅速的優(yōu)點(diǎn)，可用于功能納米顆粒的合成。
【專利說(shuō)明】一種微流控芯片、使用其合成功能納米顆粒的方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及微流控【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種微流控芯片、使用其合成功能納米顆粒的方法及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]功能納米顆粒可以持續(xù)傳遞藥物到特定細(xì)胞，也可作為納米級(jí)顯像劑輔助成像，具有比表面積大、生物相容性好、生物利用度高以及藥物可控釋放等性質(zhì)，利于提高疾病治療療效、降低藥物毒性、增強(qiáng)疾病檢測(cè)和預(yù)后能力，在疾病診斷、治療和預(yù)后判斷等方面應(yīng)用廣泛。
[0003]目前常用的制備兩親性分子包裹聚合物型功能納米顆粒的方法主要有兩種:一是兩步法，即通過納米共沉淀或分子自組裝分別制備核心納米顆粒和兩親性分子組成的空泡納米顆粒，隨后通過擠出、超聲、靜電組裝等處理產(chǎn)生雙層兩親性分子包裹聚合物的納米顆粒；二是一步法，即兩親性分子和聚合物分子混合，通過與水混合、震蕩，使納米共沉淀和分子自組裝同時(shí)完成，形成單層兩親性分子包裹聚合物的納米顆粒。
[0004]上述常規(guī)制備方法通常具有復(fù)雜的合成步驟和程序，從而增加了對(duì)實(shí)驗(yàn)條件控制的難度，因而易導(dǎo)致所合成的顆粒粒徑不均一以及批間重復(fù)性差等問題。此外，常規(guī)合成方法需要攪拌、超聲、勻質(zhì)等多種儀器以及離心、過濾、層析等多種后處理步驟?？傊壳俺Ｓ玫膸追N納米顆粒合成方法存在著不同的缺點(diǎn)，如步驟繁瑣、反應(yīng)條件不易控制、需要多種儀器以及傳熱傳質(zhì)不均勻等。
[0005]為了提升實(shí)驗(yàn)條件的可控性以及提高實(shí)驗(yàn)裝置的集成性，研究人員開始使用微流控平臺(tái)進(jìn)行納米顆粒的快速合成。微流控芯片可以精確操控微通道內(nèi)的流體和反應(yīng)條件，因此越來(lái)越多的被應(yīng)用于制備結(jié)構(gòu)均一、性質(zhì)穩(wěn)定的納米顆粒。但是目前尚未見能夠完全克服上述問題的結(jié)構(gòu)合理的微流控芯片報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種微流控芯片、使用其合成功能納米顆粒的方法及應(yīng)用。所述微流控芯片具有集成化高、操控簡(jiǎn)便、易于控制及傳質(zhì)傳熱迅速的優(yōu)點(diǎn)；使用其合成功能納米顆粒的方法具有條件精確可控、合成的功能納米顆粒形貌均一、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)；且可通過簡(jiǎn)單地改變進(jìn)樣順序、液體流速來(lái)調(diào)控功能納米顆粒的結(jié)構(gòu)和粒徑。
[0007]在第一方面，本發(fā)明提供一種微流控芯片，所述微流控芯片按流體的流向包括第一通道、第二通道、第三通道、第四通道、第五通道、第六通道、第七通道和第八通道；所述第一通道和第二通道分別分布于所述第三通道兩側(cè)并與所述第三通道交叉于第一交叉點(diǎn)；所述第四通道起始于所述第一交叉點(diǎn)，并分叉成第五通道和第六通道；所述第五通道和第六通道分別分布于所述第七通道兩側(cè)并與所述第七通道交叉于第二交叉點(diǎn)；所述第八通道起始于第二交叉點(diǎn)，具有對(duì)流體的混合功能。
[0008]優(yōu)選地，所述第一通道和第二通道分別有獨(dú)立的入口。[0009]優(yōu)選地，所述第一通道和第二通道有共同的入口。
[0010]優(yōu)選地，所述第八通道呈雙螺旋狀、矩形波狀或菱形串珠狀。
[0011]優(yōu)選地，所述第八通道呈“ S ”狀或“ Z ”狀。
[0012]優(yōu)選地，所述第三通道和第七通道分別有獨(dú)立的入口。
[0013]優(yōu)選地，所述第八通道有唯一的獨(dú)立出口。
[0014]在第二方面，本發(fā)明提供一種使用第一方面所述的微流控芯片合成功能納米顆粒的方法，包括以下步驟:按流體的流向，向所述第一通道和第二通道通入水性液體，向所述第三通道通入高分子聚合物有機(jī)溶液，向所述第七通道通入兩親性分子有機(jī)溶液。
[0015]在第二方面，本發(fā)明還提供一種使用第一方面所述的微流控芯片合成功能納米顆粒的方法，包括以下步驟:按流體的流向，向所述第一通道和第二通道通入水性液體，向所述第三通道通入兩親性分子有機(jī)溶液，向所述第七通道通入高分子聚合物有機(jī)溶液。
[0016]在第三方面，本發(fā)明提供一種第一方面所述的微流控芯片在合成功能納米顆粒中的應(yīng)用。
[0017]本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明的微流控芯片具有兩級(jí)混合結(jié)構(gòu)，首先第一通道、第二通道和第三通道交叉于第一交叉點(diǎn)，流體在此混合，其中的高分子聚合物析出形成納米顆?；蛘咂渲械膬捎H性分子自組裝形成空泡；然后第五通道、第六通道和第七通道交叉于第二交叉點(diǎn)，流體在此混合，高分子聚合物納米顆粒與兩親性分子相遇或者兩親性分子空泡與析出的高分子聚合物納米顆粒相遇；最后通過具有對(duì)流體的混合功能的第八通道自組裝形成核殼型納米顆粒。所述微流控芯片具有集成化高、操控簡(jiǎn)便、易于控制及傳質(zhì)傳熱迅速的優(yōu)點(diǎn)；使用其合成功能納米顆粒的方法具有條件精確可控、合成的功能納米顆粒形貌均一、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)；且可通過簡(jiǎn)單地改變進(jìn)樣順序、液體流速來(lái)調(diào)控功能納米顆粒的結(jié)構(gòu)和粒徑。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0018]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0019]圖2為本發(fā)明實(shí)施例2的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0020]圖3為本發(fā)明實(shí)施例3的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0021]圖4為本發(fā)明實(shí)施例4的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0022]圖5為本發(fā)明實(shí)施例5的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0023]圖6為本發(fā)明實(shí)施例6的微流控芯片的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0024]圖7為本發(fā)明試驗(yàn)例I制得的單層磷脂包裹的高分子聚合物納米顆粒的透射電鏡圖。
[0025]圖8為本發(fā)明試驗(yàn)例2制得的雙層磷脂包裹的高分子聚合物納米顆粒的透射電鏡圖。
[0026]圖9為本發(fā)明試驗(yàn)例3制得的磷脂-AIE納米顆粒的透射電鏡圖。
[0027]圖10為本發(fā)明試驗(yàn)例4中的納米顆粒在磷酸鹽緩沖液中的顆粒粒徑隨時(shí)間的變
化結(jié)果。
[0028]圖11本發(fā)明試驗(yàn)例4中的納米顆粒在磷酸鹽緩沖液中的顆粒多分散系數(shù)(PDI)隨時(shí)間的變化結(jié)果。[0029]圖12為本發(fā)明試驗(yàn)例5中納米顆粒的粒徑隨溶液流速的變化結(jié)果。
[0030]圖13為本發(fā)明試驗(yàn)例6中載藥納米顆粒對(duì)Hela細(xì)胞(左)和HUVEC細(xì)胞(右)的殺傷作用結(jié)果。
[0031]圖14為本發(fā)明試驗(yàn)例7中熒光納米顆粒用于細(xì)胞成像的熒光圖片。
【具體實(shí)施方式】
[0032]下面通過【具體實(shí)施方式】詳細(xì)描述本發(fā)明的技術(shù)方案。
[0033]微流控芯片的制作工藝是目前比較成熟的技術(shù)，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以根據(jù)其具有的專業(yè)知識(shí)選擇合適的工藝實(shí)現(xiàn)，比如可以通過模具在基質(zhì)材料上制作出有微流控通道的片層，然后將所述片層的有微流控通道的一面與底部封接基片緊密貼合即形成所述微流控芯片；或者通過刻蝕工藝在基質(zhì)材料上制作出有微流控通道的片層，然后將所述片層的有微流控通道的一面與底部封接基片緊密貼合即形成所述微流控芯片；根據(jù)需要可以在合適的位置打孔，使微流控通道與外界連通即可。其中，基質(zhì)材料可使用聚二甲基硅氧烷(polydimethylsi loxane, PDMS)、聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate, PMMA)或聚碳酸酯(Polycarbonate，PC)等；底部封接基片可使用玻璃、PMMA、PDMS、PC或硅片等。所述微流控芯片上的通道可通過塑料管等與注射器相連，液體流速由與注射器連接的注射泵控制。
[0034]下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，以下實(shí)施例僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，以便于更好地理解本發(fā)明，因而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。
[0035]下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法；所用的實(shí)驗(yàn)材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為自常規(guī)生化試劑廠商購(gòu)買得到的。
[0036]實(shí)施例1
[0037]如圖1所示，本實(shí)施例的微流控芯片，按流體的流向包括第一通道1、第二通道2、第三通道3、第四通道4、第五通道5、第六通道6、第七通道7和第八通道8 ;所述第一通道I和第二通道2分別分布于所述第三通道3兩側(cè)并與所述第三通道3交叉于第一交叉點(diǎn)；所述第四通道4起始于所述第一交叉點(diǎn)，并分叉成第五通道5和第六通道6 ;所述第五通道5和第六通道6分別分布于所述第七通道7兩側(cè)并與所述第七通道7交叉于第二交叉點(diǎn)；所述第八通道8起始于第二交叉點(diǎn)，具有對(duì)流體的混合功能。本實(shí)施例的第一通道I和第二通道2分別有獨(dú)立的入口(圖中圓柱狀結(jié)構(gòu))，第三通道3和第七通道7分別有獨(dú)立的入口(圖中圓柱狀結(jié)構(gòu))，第八通道8呈雙螺旋狀，有唯一的獨(dú)立出口(圖中圓柱狀結(jié)構(gòu))。
[0038]本實(shí)施例的微流控芯片可通過以下兩種進(jìn)樣方式實(shí)現(xiàn)功能納米顆粒的合成。
[0039]第一種方式:分別從第一通道I和第二通道2的入口通入水性液體，從第三通道3的入口通入高分子聚合物有機(jī)溶液，在第一通道1、第二通道2和第三通道3的交匯處，高分子聚合物析出形成納米顆粒；從第七通道7的入口通入兩親性分子有機(jī)溶液，在第五通道
5、第六通道6和第七通道7的交匯處，高分子聚合物納米顆粒與兩親性分子相遇，經(jīng)過雙螺旋狀的第八通道8的均勻混合，兩親性分子自組裝到高分子聚合物納米顆粒表面，形成以高分子聚合物納米顆粒為核心、兩親性分子層為外層的核殼型納米顆粒。
[0040]第二種方式:分別從第一通道I和第二通道2的入口通入水性液體，從第三通道3的入口通入兩親性分子有機(jī)溶液，在第一通道1、第二通道2和第三通道3的交匯處，兩親性分子自組裝形成空泡；從第七通道7的入口通入高分子聚合物有機(jī)溶液，在第五通道5、第六通道6和第七通道7的交匯處，兩親性分子空泡與析出的高分子聚合物納米顆粒相遇，經(jīng)過雙螺旋通道的均勻混合，形成以高分子聚合物納米顆粒為核心、雙層兩親性分子為外層的核殼型納米顆粒。
[0041]其中，所述水性液體比如可以是二次水、三次水、去離子水和蒸餾水等，優(yōu)選三次水；所述高分子聚合物例如聚乳酸(PLA)、聚羥基乙酸(PGA)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)、聚己內(nèi)酯(PCL)、聚丙烯腈(PAN)和聚羥基烷酸酯(PHA)等；所述兩親性分子包括常用的磷脂分子和表面活性劑，例如氫化大豆磷脂(HSPC)、蛋黃卵磷脂(PC)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)U-棕櫚?；?2-油酰基磷脂酰膽堿(P0PC)、二油?；字Ｄ憠A(D0PC)、二硬脂?；字Ｄ憠A(DSPC)、二芥酰磷脂酰甘油(DEPG)、1，2-棕櫚酰磷脂酰甘油(DPPG)、二硬脂?；字Ｒ掖及?DSPE)、二芥?；字Ｒ掖及?DEPE)、二棕櫚?；字＝z氨酸(DPPS)、二油?；字＝z氨酸(D0PS)、二肉豆蘧酰磷脂酸(DMPA)、二硬脂酰磷脂酸(DSPA)、硬脂酰溶血卵磷脂(S-LysoPC)、十八胺、吐溫等，以及聚乙二醇(PEG)、生物素或熒光素等修飾的磷脂分子；所述有機(jī)溶液中的有機(jī)溶劑可以是能與水以任意比例混溶的有機(jī)溶劑，例如，甲醇、乙醇、丙酮、三氟乙醇、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、羥基丙酸、乙二醇或甘油等。
[0042]本實(shí)施例的微流控芯片可用于載藥納米顆粒的制備，將需要運(yùn)載的藥物與高分子聚合物溶液混合，并按照上述兩種方式進(jìn)行納米顆粒的制備，從而獲得核心裝載藥物的納米顆粒；或者將藥物與兩親性分子溶液混合，并按照上述兩種方式進(jìn)行納米顆粒的制備，從而獲得殼層裝載藥物的納米顆粒；也可通過將不同藥物分別與高分子聚合物溶液和兩親性分子溶液混合，并按照上述兩種方式進(jìn)行納米顆粒的制備，從而獲得同時(shí)裝載不同藥物的多種納米顆粒。
[0043]其中，所述藥物包括可用納米顆粒裝載的常用藥物，例如阿霉素、紫杉醇、喜樹堿、康普立停、長(zhǎng)春新堿和甲氨蝶呤等。
[0044]本實(shí)施例的微流控芯片可用于成像用納米顆粒的制備，將所需熒光分子或其它成像相關(guān)顆粒與高分子聚合物溶液或兩親性分子溶液混合，或者直接使用與熒光分子共價(jià)連接的高分子聚合物分子或兩親性分子，并按照上述兩種方式進(jìn)行納米顆粒的制備，從而獲得具有熒光的納米顆粒。
[0045]其中，所述熒光分子包括常用熒光分子，例如羅丹明、DiD、DiO、DAP1、Cy3、Cy5、剛果紅、尼羅紅、苯并噻唑或鈣黃綠素；所述成像相關(guān)顆粒包括量子點(diǎn)和金屬納米顆粒等用于成像的常用顆粒。
[0046]實(shí)施例2
[0047]如圖2所示，本實(shí)施例的微流控芯片與實(shí)施例1的微流控芯片的差別僅在于所述第八通道8呈矩形波狀，其它技術(shù)特征與實(shí)施例1的微流控芯片相同。
[0048]實(shí)施例3
[0049]如圖3所示，本實(shí)施例的微流控芯片與實(shí)施例1的微流控芯片的差別僅在于所述第八通道8呈“S”狀，其它技術(shù)特征與實(shí)施例1的微流控芯片相同。
[0050]實(shí)施例4[0051]如圖4所示，本實(shí)施例的微流控芯片與實(shí)施例1的微流控芯片的差別僅在于所述第八通道8呈菱形串珠狀，其它技術(shù)特征與實(shí)施例1的微流控芯片相同。
[0052]實(shí)施例5
[0053]如圖5所示，本實(shí)施例的微流控芯片與實(shí)施例1的微流控芯片的差別僅在于所述第八通道8呈“Z”狀，其它技術(shù)特征與實(shí)施例1的微流控芯片相同。
[0054]實(shí)施例6
[0055]如圖6所示，本實(shí)施例的微流控芯片與實(shí)施例1的微流控芯片的差別僅在于所述第一通道I和第二通道2有共同的入口，所述第八通道8呈矩形波狀，其它技術(shù)特征與實(shí)施例I的微流控芯片相同。
[0056]試驗(yàn)例1:單層磷脂包裹的高分子聚合物納米顆粒的合成及表征
[0057]取45.5mg DPPC和4.8mg高純膽固醇溶于IOmL乙醇中，振蕩30min使其混勻，得磷脂溶液。取IOOmg PLGA溶于6.5mL 二甲基甲酰胺和3.5mL三氟乙醇的混合物中，振蕩過夜使其混勻，得PLGA溶液。在實(shí)施例1的微流控芯片的第一通道I和第二通道2的入口處接裝三次水的注射器，在第三通道3的入口處接裝PLGA溶液的注射器，在第七通道7的入口處接裝磷脂溶液的注射器，在第八通道8的出口處接裝收集管。使用注射泵控制三次水的流速20mL/h，磷脂溶液和PLGA溶液的流速0.5mL/h，待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道8的出口收集納米顆粒。
[0058]取10 μ L上述納米顆粒懸浮液,滴于碳膜銅網(wǎng)上,靜置5min后用濾紙從側(cè)面吸去多余液體。使用2%磷鎢酸染色lOmin，用濾紙吸去多余液體，干燥后使用透射電子顯微鏡進(jìn)行觀察，可見顆粒形態(tài)完好、粒徑均一(圖7)。
[0059]試驗(yàn)例2:雙層磷脂包裹的高分子聚合物納米顆粒的合成及表征
[0060]取46.4mg DSPE和8.5mg DSPE-PEG溶于IOmL甲醇中，振蕩30min使其混勻，得磷脂溶液。200mg PLA溶于IOmL氯仿中，振蕩過夜使其混勻，得PLA溶液。
[0061]在實(shí)施例1的微流控芯片的第一通道I和第二通道2的入口處接裝三次水的注射器，在第三通道3的入口處接裝磷脂溶液的注射器，在第七通道7的入口處接裝PLA溶液的注射器，在第八通道8的出口處接裝收集管。使用注射泵控制三次水的流速10mL/h，磷脂溶液和PLA溶液的流速0.5mL/h，待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道8的出口收集納米顆粒。透射電鏡觀察，可見顆粒形態(tài)完好、粒徑均一(圖8)。
[0062]試驗(yàn)例3:磷脂-AIE納米顆粒的合成
[0063]取38.9mg 二月桂酰磷脂酰甘油DLPG和4.8mg高純膽固醇溶于IOmL乙醇中，振蕩30min使其混勻，得到磷脂溶液。取IOOmg AIE分子(TPE-1ndo)溶于IOmL DMSO中，振蕩過夜使混勻，得到TPE-1ndo溶液。
[0064]在實(shí)施例6的微流控芯片的第一通道I和第二通道2的共同入口處接裝三次水的注射器，在第三通道3的入口處接裝磷脂溶液的注射器，在第七通道7的入口處接裝TPE-1ndo溶液的注射器，在第八通道8的出口處接裝收集管。使用注射泵控制三次水的流速50mL/h，磷脂溶液和TPE-1ndo溶液的流速lmL/h，待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道8的出口收集磷脂-AIE納米顆粒。透射電鏡觀察，可見顆粒形態(tài)完好、粒徑均一(圖9)。
[0065]試驗(yàn)例4:顆粒穩(wěn)定性表征
[0066]取900 μ L納米顆粒懸浮液(試驗(yàn)例1)，加入IOOyL的IOXPBS (配方:NaC180g/L，KC12g/L，Na2HPO4H.4g/L，KH2P042.4g/L)，使用激光粒度儀監(jiān)測(cè)顆粒的粒徑變化(圖10)和多分散性變化(圖11)。由結(jié)果可知，利用本發(fā)明所述方法制備的納米顆粒在13天內(nèi)粒徑和多分散系數(shù)(PDI)均穩(wěn)定；而單獨(dú)由兩親性分子或高分子聚合物組成的納米顆粒則發(fā)生了明顯的聚集，粒徑和多分散系數(shù)均明顯增大。
[0067]試驗(yàn)例5:顆粒粒徑調(diào)控
[0068]在實(shí)施例1的微流控芯片的第一通道I和第二通道2的入口處接裝三次水的注射器，在第三通道3的入口處接裝PLGA溶液的注射器，在第七通道7的入口處接裝DPPC溶液的注射器，在第八通道8的出口處接裝收集管。利用注射泵控制各液體的流速，使三次水的流速固定為20mL/h，PLGA溶液和DPPC溶液的流速在0.125mL/h?2mL/h范圍內(nèi)變化。收集不同流速下制備的納米顆粒，利用激光粒度儀進(jìn)行檢測(cè)，可知隨著PLGA溶液和DPPC溶液流速的增大，制備所得納米顆粒的粒徑增大(圖12)。因此，可通過簡(jiǎn)單地調(diào)節(jié)溶液流速來(lái)獲得粒徑不同的納米顆粒。
[0069]試驗(yàn)例6:載藥納米顆粒的合成
[0070]取45.5mg DPPC、4.8mg高純膽固醇和2mg康普立停溶于IOmL乙醇中，振蕩30min使其混勻，得到磷脂與藥物的混合溶液。IOOmg PLGA和0.65mg阿霉素溶于6.5mL 二甲基甲酰胺和3.5mL三氟乙醇的混合物中，振蕩過夜使其混勻，得到PLGA與藥物的混合溶液。
[0071]在實(shí)施例2的微流控芯片的第一通道I和第二通道2的入口處接裝三次水的注射器，在第三通道3的入口處接裝磷脂與藥物的混合溶液的注射器，在第七通道7的入口處接裝PLGA與藥物的混合溶液的注射器，在第八通道8的出口處接裝收集管。使用注射泵控制三次水的流速20mL/h，磷脂與藥物的混合溶液以及PLGA與藥物的混合溶液的流速lmL/h，待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道8的出口收集納米顆粒。
[0072]Hela細(xì)胞和HUVEC細(xì)胞與制備好的載藥納米顆粒共孵育，分別在孵育0h、3h和20h后利用激光共聚焦掃描顯微鏡觀察細(xì)胞(圖13)。由結(jié)果可知，所制備的納米顆粒對(duì)兩種細(xì)胞均有明顯殺傷作用，說(shuō)明本方法所制備的納米顆粒成功包裹了康普立停和阿霉素兩種藥物。
[0073]試驗(yàn)例7:熒光納米顆粒的合成
[0074]取46.4mg DSPE,8.5mg DSPE-PEG 和 19.2mg DiD 溶于 IOmL 甲醇中，振蕩 30min 使混勻，得磷脂溶液。取200mg PLA和20mg羅丹明溶于IOmL氯仿中，振蕩過夜使其混勻，得PLA溶液。
[0075]在實(shí)施例3的微流控芯片的第一通道I和第二通道2的入口處接裝三次水的注射器，在第三通道3的入口處接裝PLA溶液的注射器，在第七通道7的入口處接裝磷脂溶液的注射器，在第八通道8的出口處接裝收集管。使用注射泵控制三次水的流速25mL/h，磷脂溶液和PLA溶液的流速0.6mL/h，待微流控芯片中液流穩(wěn)定后從第八通道8的出口收集熒光納米顆粒。
[0076]制備所得熒光納米顆?？捎糜诩?xì)胞的熒光標(biāo)記。將上述制備所得熒光納米顆粒與Hela細(xì)胞共孵育lh，圖14顯示藍(lán)色熒光來(lái)自Hoechst33342染色的細(xì)胞核(圖中A處箭頭指示)，綠色熒光來(lái)自包裹在PLA核心的羅丹明(圖中B處箭頭指示)，紅色熒光來(lái)自包裹在外層磷脂分子層中的DiD (圖中C處箭頭指示)。圖中橙黃色熒光為綠色熒光和紅色熒光重疊所得，證明本方法可實(shí)現(xiàn)兩種熒光分子的同時(shí)包裹。[0077] 申請(qǐng)人:聲明，本發(fā)明通過上述實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明的詳細(xì)特征以及詳細(xì)方法，但本發(fā)明并不局限于上述詳細(xì)特征以及詳細(xì)方法，即不意味著本發(fā)明必須依賴上述詳細(xì)特征以及詳細(xì)方法才能實(shí)施。所屬【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對(duì)本發(fā)明的任何改進(jìn)，對(duì)本發(fā)明選用組分的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍和公開范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種微流控芯片，按流體的流向包括第一通道、第二通道、第三通道、第四通道、第五通道、第六通道、第七通道和第八通道；所述第一通道和第二通道分別分布于所述第三通道兩側(cè)并與所述第三通道交叉于第一交叉點(diǎn)；所述第四通道起始于所述第一交叉點(diǎn)，并分叉成第五通道和第六通道；所述第五通道和第六通道分別分布于所述第七通道兩側(cè)并與所述第七通道交叉于第二交叉點(diǎn)；所述第八通道起始于第二交叉點(diǎn)，具有對(duì)流體的混合功能。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述第一通道和第二通道分別有獨(dú)立的入口。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述第一通道和第二通道有共同的入口。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的微流控芯片，其特征在于，所述第八通道呈雙螺旋狀、矩形波狀或菱形串珠狀。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的微流控芯片，其特征在于，所述第八通道呈“S”狀或
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的微流控芯片，其特征在于，所述第三通道和第七通道分別有獨(dú)立的入口。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的微流控芯片，其特征在于，所述第八通道有唯一的獨(dú)立出口。
8.一種使用權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的微流控芯片合成功能納米顆粒的方法，包括以下步驟:按流體的流向，向所述第一通道和第二通道通入水性液體，向所述第三通道通入高分子聚合物有機(jī)溶液，向所述第七通道通入兩親性分子有機(jī)溶液。
9.一種使用權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的微流控芯片合成功能納米顆粒的方法，包括以下步驟:按流體的流向，向所述第一通道和第二通道通入水性液體，向所述第三通道通入兩親性分子有機(jī)溶液，向所述第七通道通入高分子聚合物有機(jī)溶液。
10.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的微流控芯片在合成功能納米顆粒中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C08L67/04GK103878039SQ201410114187
【公開日】2014年6月25日 申請(qǐng)日期:2014年3月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月25日
【發(fā)明者】蔣興宇, 張璐, 孫佳姝 申請(qǐng)人:國(guó)家納米科學(xué)中心