一種生物酶法制備肝素鈉的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種生物酶法制備肝素鈉的方法，通過將豬肺粉碎、酶解后，進行去蛋白處理，在進行氧化脫色后利用樹脂交換得肝素鈉溶液，將肝素鈉溶液實施沉淀、脫水、干燥得到肝素鈉精品。本發(fā)明原料來源廣泛，通用性強，活性收率高，工藝品質(zhì)穩(wěn)定，生產(chǎn)成本低廉，實現(xiàn)肝素鈉的低投入、低成本、高回收率。
【專利說明】一種生物酶法制備肝素鈉的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及粘多糖生物制藥領(lǐng)域，尤其涉及一種生物酶法制備肝素鈉的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]肝素鈉(Heparin Sodium)肝素鈉是粘多糖硫酸酯類抗凝血藥。肝素鈉是由豬或牛的粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽，屬粘多糖類物質(zhì)。近年來研究證明肝素鈉還有降血脂作用。目前市面上肝素鈉提取工藝種類繁多，不過多數(shù)采用豬腸來制備，但豬肺中肝素含量大大超過了豬腸，現(xiàn)需要提供一種以豬肺為原料生產(chǎn)成本低廉，工藝簡單的制備肝素鈉的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]基本【背景技術(shù)】存在的技術(shù)問題，本發(fā)明提出了一種制備肝素鈉的方法，原料來源廣泛，通用性強，活性收率高，工藝品質(zhì)穩(wěn)定，生產(chǎn)成本低廉，實現(xiàn)肝素鈉的低投入、低成本、高回收率。
[0004]本發(fā)明提出的一種生物酶法制備肝素鈉的方法，包括如下步驟:
[0005]S1、將豬肺清洗，去除內(nèi)外污物和脂肪后，絞碎成糜狀，并在充分攪拌下，加入水攪拌得到豬肺混合液，其中豬肺和水的質(zhì)量比為1: 1-2;
[0006]S2、向豬肺混合液中加入0.2-0.5mol/L的氫氧化鈉溶液使PH達到8_9，加入以豬肺混合液為基準0.8-1.0被％豬胰中提取的胰蛋白酶，在室溫下以85-95rpm的攪拌速度攪拌70-75min得到一次酶解混合液，然后將一次酶解混合液以2_3°C /min的升溫速率升至35-39°C并以30-40rpm的攪拌速度攪拌240_300min得到二次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為7.0-8.5 ；
[0007] S3、將二次酶解混合液以1-2°C /min的升溫速率升至61-65°C并以30_40rpm的攪拌速度攪拌150-180min得到三次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為8.2-8.7 ；
[0008]S4、向三次酶解混合液加入0.1-0.2mol/L的鹽酸，使液體PH值為4.3-5.4，將溫度升至82-84°C并以70-80rpm的攪拌速度攪拌7_12min，再加入以三次酶解混合液為基準2-4wt%硫酸鈉晶體后，維持溫度為84-85°C并以65_75rpm的攪拌速度攪拌10_15min得到酶失活混合液；
[0009]S5、將酶失活混合液在75_80°C時進行一次過濾得到一次濾液，待一次濾液冷卻至36°C時，用0.2-0.5mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為9_10進行二次過濾后，再滴加
0.l-ο.2mol/L的鹽酸使PH值為8.2-8.7得到二次濾液；
[0010]S6、將二次濾液冷卻至室溫，以50-60rpm的攪拌速度攪拌5_10min后靜置30-40min以進行分層，吸取分層后的下層溶液，將下層溶液升溫至55_65°C，加入以下層溶液為基準3.5-4wt% D217樹脂，以45_50rpm的攪拌速度攪拌3_3.6h后靜置l_2h得到含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液；
[0011]S7、將含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液過濾后得到吸附肝素鈉成分的D217樹月旨，將吸附肝素鈉成分的D217樹脂充分清洗后，用以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準120-140Wt%硫酸鈉溶液進行一次洗脫得到一次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為0.9-1.1mol/L,洗脫時間為4-6h，再以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準40-50wt %進行二次洗脫得到二次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為0.9-1.lmol/L，洗脫時間為l_2h，將一次洗脫液和二次洗脫液混合，用0.02-0.05mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為9.5-9.7，以20_25rpm的攪拌速度攪拌2-4h后靜置5-6h，分層后吸取上層溶液得到物料A ；
[0012]S8、向物料A中滴加0.1-0.2mol/L的鹽酸使PH值為6.0-6.5，加入以物料A為基準120-130wt%乙醇攪拌20-30min，乙醇體積百分比為95%，靜置7_8h進行分層，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B ;
[0013]S9、將物料B用濃度為0.2-0.4mol/L的硫酸鈉溶液完全溶解，加入0.5-0.7mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至10.5-11.5，加入以物料B為基準0.1-0.2wt%雙氧水，將溫度維持在24-260C 10-15h，過濾后加入0.5-0.7mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至10.5-11.5，以30-40rpm的攪拌速度攪拌0.5-0.6h后加入以物料B為基準0.2-0.3wt%雙氧水，將溫度維持在23-24°C，保溫14-15h，過濾后滴加0.03-0.07mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)PH為6.7-7.2，得到二次氧化液，其中雙氧水濃度為3-4% ；
[0014]S10、向二次氧化液加入以二次氧化液為基準180_200wt%，乙醇的體積百分比為35%，在3-4 °C沉淀36-40h，過濾后收集一次過濾物，加入以二次氧化液為基準
0.2-0.5wt%硫酸鈉溶液溶解，硫酸鈉溶液的濃度為8-10%，再加入以二次氧化液為基準120-150wt%乙醇進行沉淀，乙醇的體積百分比為95%，過濾后收集二次過濾物，過濾物脫水、研細后，在35-45°C下真空烘干，即得肝素鈉精品。
[0015]優(yōu)選的，SlO中 真空烘干為紅外真空烘干。
[0016]優(yōu)選的，S9中，將物料B用濃度為0.3mol/L的硫酸鈉溶液完全溶解，加入0.6mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至11，加入以物料B為基準0.15wt %雙氧水，將溫度維持在250C 13h，過濾后加入0.6mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至11，以35rpm的攪拌速度攪拌0.55h后加入以物料B為基準0.23wt%雙氧水，將溫度維持在23.5°C，保溫14.5h，過濾后滴加
0.05mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)PH為7，得到二次氧化液，其中雙氧水濃度為35%。
[0017]本發(fā)明通過采用對豬肺進行酶解生產(chǎn)，使原料來源廣泛，通用性強，再通過氧化脫色后利用樹脂交換得肝素鈉溶液，其中采用D217樹脂，可有效吸附高分子有機物，吸附穩(wěn)定，不易破碎，降低生產(chǎn)成本，再將肝素鈉溶液實施沉淀、脫水、干燥得到肝素鈉精品，活性收率高，工藝品質(zhì)穩(wěn)定，生產(chǎn)成本低廉，實現(xiàn)肝素鈉的低投入、低成本、高回收率。
【具體實施方式】
[0018]下面，通過具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進行詳細說明。
[0019]實施例1
[0020]本發(fā)明提出的一種生物酶法制備肝素鈉的方法，包括如下步驟:
[0021]S1、將豬肺清洗，去除內(nèi)外污物和脂肪后，絞碎成糜狀，并在充分攪拌下，加入水攪拌得到豬肺混合液，其中豬肺和水的質(zhì)量比為1: 2;
[0022]S2、向豬肺混合液中加入0.2mol/L的氫氧化鈉溶液使PH達到9，加入以豬肺混合液為基準0.8wt %豬胰中提取的胰蛋白酶，在室溫下以95rpm的攪拌速度攪拌70min得到一次酶解混合液，然后將一次酶解混合液以3°C /min的升溫速率升至35°C并以40rpm的攪拌速度攪拌240min得到二次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為8.5 ；
[0023] S3、將二次酶解混合液以1°C /min的升溫速率升至65°C并以30rpm的攪拌速度攪拌180min得到三次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為8.2 ；
[0024]S4、向三次酶解混合液加入0.2mol/L的鹽酸，使液體PH值為4.3，將溫度升至84°C并以70rpm的攪拌速度攪拌12min，再加入以三次酶解混合液為基準2wt%硫酸鈉晶體后，維持溫度為85°C并以65rpm的攪拌速度攪拌15min得到酶失活混合液；
[0025]S5、將酶失活混合液在75°C時進行一次過濾得到一次濾液，待一次濾液冷卻至36°C時，用0.5mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為9進行二次過濾后，再滴加0.2mol/L的鹽酸使PH值為8.2得到二次濾液；
[0026]S6、將二次濾液冷卻至室溫，以60rpm的攪拌速度攪拌5min后靜置40min以進行分層，吸取分層后的下層溶液，將下層溶液升溫至55°C，加入以下層溶液為基準4wt% D217樹脂，以45rpm的攪拌速度攪拌3.6h后靜置Ih得到含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液；
[0027]S7、將含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液過濾后得到吸附肝素鈉成分的D217樹月旨，將吸附肝素鈉成分的D217樹脂充分清洗后，用以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準140wt%硫酸鈉溶液進行一次洗脫得到一次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為0.9mol/L，洗脫時間為6h，再以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準40wt%進行二次洗脫得到二次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為1.lmol/L，洗脫時間為lh，將一次洗脫液和二次洗脫液混合，用
0.05mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為9.5，以25rpm的攪拌速度攪拌2h后靜置6h，分層后吸取上層溶液得到物料A ;
[0028]S8、向物料A中滴加0.lmol/L的鹽酸使PH值為6.5，加入以物料A為基準120wt%乙醇攪拌30min，乙醇體積百分比為95%，靜置7h進行分層，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B ；
[0029]S9、將物料B用濃度為0.4mol/L的硫酸鈉溶液完全溶解，加入0.5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至11.5，加入以物料B為基準0.1wt %雙氧水，將溫度維持在26°C 10h，過濾后加入0.7mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至10.5，以40rpm的攪拌速度攪拌0.5h后加入以物料B為基準0.3wt%雙氧水，將溫度維持在23°C，保溫15h，過濾后滴加0.03mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)PH為7.2，得到二次氧化液，其中雙氧水濃度為3% ；
[0030]S10、向二次氧化液加入以二次氧化液為基準200wt%，乙醇的體積百分比為35%，在3°C沉淀40h，過濾后收集一次過濾物，加入以二次氧化液為基準0.2wt%硫酸鈉溶液溶解，硫酸鈉溶液的濃度為10%，再加入以二次氧化液為基準120wt%乙醇進行沉淀，乙醇的體積百分比為95 %，過濾后收集二次過濾物，過濾物脫水、研細后，在45°C下真空烘干，即得肝素鈉精品。
[0031]實施例2
[0032]本發(fā)明提出的一種生物酶法制備肝素鈉的方法，包括如下步驟:
[0033]S1、將豬肺清洗，去除內(nèi)外污物和脂肪后，絞碎成糜狀，并在充分攪拌下，加入水攪拌得到豬肺混合液，其中豬肺和水的質(zhì)量比為1:1;
[0034]S2、向豬肺混合液中加入0.5mol/L的氫氧化鈉溶液使PH達到8，加入以豬肺混合液為基準Iwt %豬胰中提取的胰蛋白酶，在室溫下以85rpm的攪拌速度攪拌75min得到一次酶解混合液，然后將一次酶解混合液以2°C /min的升溫速率升至39°C并以30rpm的攪拌速度攪拌300min得到二次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為7 ;
[0035]S3、將二次酶解混合液以2V /min的升溫速率升至61°C并以40rpm的攪拌速度攪拌150min得到三次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為8.7 ；
[0036]S4、向三次酶解混合液加入0.lmol/L的鹽酸，使液體PH值為5.4，將溫度升至82°C并以80rpm的攪拌速度攪拌7min，再加入以三次酶解混合液為基準4wt%硫酸鈉晶體后，維持溫度為84°C并以75rpm的攪拌速度攪拌IOmin得到酶失活混合液；[0037]S5、將酶失活混合液在80°C時進行一次過濾得到一次濾液，待一次濾液冷卻至36°C時，用0.2mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為10進行二次過濾后，再滴加0.lmol/L的鹽酸使PH值為8.7得到二次濾液；
[0038]S6、將二次濾液冷卻至室溫，以50rpm的攪拌速度攪拌IOmin后靜置30min以進行分層，吸取分層后的下層溶液，將下層溶液升溫至65°C，加入以下層溶液為基準3.5wt%D217樹脂，以50rpm的攪拌速度攪拌3h后靜置2h得到含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液；
[0039]S7、將含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液過濾后得到吸附肝素鈉成分的D217樹月旨，將吸附肝素鈉成分的D217樹脂充分清洗后，用以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準120wt%硫酸鈉溶液進行一次洗脫得到一次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為1.lmol/L，洗脫時間為4h，再以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準50wt%進行二次洗脫得到二次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為0.9mol/L，洗脫時間為2h，將一次洗脫液和二次洗脫液混合，用
0.02mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為9.7，以20rpm的攪拌速度攪拌4h后靜置5h，分層后吸取上層溶液得到物料A ;
[0040]S8、向物料A中滴加0.2mol/L的鹽酸使PH值為6，加入以物料A為基準130wt%乙醇攪拌20min，乙醇體積百分比為95%，靜置8h進行分層，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B ；
[0041]S9、將物料B用濃度為0.2mol/L的硫酸鈉溶液完全溶解，加入0.7mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至10.5，加入以物料B為基準0.2wt%雙氧水，將溫度維持在24°C 15h，過濾后加入0.5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至11.5，以30rpm的攪拌速度攪拌0.6h后加入以物料B為基準0.2wt%雙氧水，將溫度維持在24°C，保溫14h，過濾后滴加0.07mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)PH為6.7，得到二次氧化液，其中雙氧水濃度為4% ；
[0042]S10、向二次氧化液加入以二次氧化液為基準180wt%，乙醇的體積百分比為35 %，在4°C沉淀36h，過濾后收集一次過濾物，加入以二次氧化液為基準0.5wt %硫酸鈉溶液溶解，硫酸鈉溶液的濃度為8 %，再加入以二次氧化液為基準150wt%乙醇進行沉淀，乙醇的體積百分比為95 %，過濾后收集二次過濾物，過濾物脫水、研細后，在35°C下真空烘干，即得肝素鈉精品。
[0043]實施例3
[0044]本發(fā)明提出的一種生物酶法制備肝素鈉的方法，包括如下步驟:
[0045]S1、將豬肺清洗，去除內(nèi)外污物和脂肪后，絞碎成糜狀，并在充分攪拌下，加入水攪拌得到豬肺混合液，其中豬肺和水的質(zhì)量比為1: 1.3;
[0046]S2、向豬肺混合液中加入0.4mol/L的氫氧化鈉溶液使PH達到8.7，加入以豬肺混合液為基準0.9wt %豬胰中提取的胰蛋白酶，在室溫下以90rpm的攪拌速度攪拌73min得到一次酶解混合液，然后將一次酶解混合液以2.2V /min的升溫速率升至37°C并以34rpm的攪拌速度攪拌270min得到二次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為7.6 ；
[0047]S3、將二次酶解混合液以1.50C /min的升溫速率升至63°C并以35rpm的攪拌速度攪拌170min得到三次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為8.5 ；
[0048]S4、向三次酶解混合液加入0.15mol/L的鹽酸，使液體PH值為5，將溫度升至83°C并以76rpm的攪拌速度攪拌IOmin,再加入以三次酶解混合液為基準3wt%硫酸鈉晶體后，維持溫度為84°C并以70rpm的攪拌速度攪拌13min得到酶失活混合液；
[0049]S5、將酶失活混合液在77°C時進行一次過濾得到一次濾液，待一次濾液冷卻至36°C時，用0.3mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為9.3進行二次過濾后，再滴加0.13mol/L的鹽酸使PH值為8.5得到二次濾液；
[0050]S6、將二次濾液冷卻至室溫，以53rpm的攪拌速度攪拌7min后靜置35min以進行分層，吸取分層后的下層溶液，將下層溶液升溫至60°C，加入以下層溶液為基準3.7wt%D217樹脂，以47rpm的攪拌速度攪拌3.3h后靜置1.6h得到含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液；
[0051]S7、將含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液過濾后得到吸附肝素鈉成分的D217樹月旨，將吸附肝素鈉成分的D217樹脂充分清洗后，用以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準130wt%硫酸鈉溶液進行一次洗脫得到一次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為lmol/L，洗脫時間為5h，再以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準45wt%進行二次洗脫得到二次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為lmol/L，洗脫時間為1.5h，將一次洗脫液和二次洗脫液混合，用0.03mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為9.6，以23rpm的攪拌速度攪拌3h后靜置5.6h，分層后吸取上層溶液得到物料A ;
[0052] S8、向物料A中滴加0.13mol/L的鹽酸使PH值為6.3，加入以物料A為基準126wt%乙醇攪拌27min，乙醇體積百分比為95%，靜置7.8h進行分層，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B ；
[0053]S9、將物料B用濃度為0.3mol/L的硫酸鈉溶液完全溶解，加入0.6mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至11，加入以物料B為基準0.15wt%雙氧水，將溫度維持在25 V 13h，過濾后加入0.6mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至11，以35rpm的攪拌速度攪拌0.55h后加入以物料B為基準0.23wt%雙氧水，將溫度維持在23.4°C，保溫14.5h，過濾后滴加0.05mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)PH為7，得到二次氧化液，其中雙氧水濃度為3.5% ;
[0054]S10、向二次氧化液加入以二次氧化液為基準190wt%，乙醇的體積百分比為35%，在3°C沉淀38h，過濾后收集一次過濾物，加入以二次氧化液為基準0.3wt%硫酸鈉溶液溶解，硫酸鈉溶液的濃度為9 %，再加入以二次氧化液為基準140wt%乙醇進行沉淀，乙醇的體積百分比為95%，過濾后收集二次過濾物，過濾物脫水、研細后，在40°C下真空烘干，即得肝素鈉精品。
[0055]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實施方式】，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種生物酶法制備肝素鈉的方法，其特征在于，包括如下步驟: S1、將豬肺清洗，去除內(nèi)外污物和脂肪后，絞碎成糜狀，并在充分攪拌下，加入水攪拌得到豬肺混合液，其中豬肺和水的質(zhì)量比為1: 1-2; S2、向豬肺混合液中加入0.2-0.5mol/L的氫氧化鈉溶液使PH達到8_9，加入以豬肺混合液為基準0.8-1.0被％豬胰中提取的胰蛋白酶，在室溫下以85-95rpm的攪拌速度攪拌70-75min得到一次酶解混合液，然后將一次酶解混合液以2_3°C /min的升溫速率升至.35-39°C并以30-40rpm的攪拌速度攪拌240_300min得到二次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為7.0-8.5 ； S3、將二次酶解混合液以1-2°C/min的升溫速率升至61_65°C并以30_40rpm的攪拌速度攪拌150-180min得到三次酶解混合液，在攪拌過程中維持液體PH值為8.2-8.7 ； S4、向三次酶解混合液加入0.1-0.2mol/L的鹽酸，使液體PH值為4.3-5.4，將溫度升至..82-84°C并以70-80rpm的攪拌速度攪拌7_12min，再加入以三次酶解混合液為基準2_4wt%硫酸鈉晶體后，維持溫度為84-85°C并以65-75rpm的攪拌速度攪拌10_15min得到酶失活混合液； S5、將酶失活混合液在75-80°C時進行一次過濾得到一次濾液，待一次濾液冷卻至.36 0C時，用0.2-0.5 mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為9_10進行二次過濾后，再滴加.0.1-0.2mol/L的鹽酸使PH值為8.2-8.7得到二次濾液； S6、將二次濾液冷卻至室溫，以50-60rpm的攪拌速度攪拌5_10min后靜置30_40min以進行分層，吸取分層后的下層溶液，將下層溶液升溫至55-65°C，加入以下層溶液為基準.3.5-4wt% D217樹脂，以45_50rpm的攪拌速度攪拌3_3.6h后靜置l_2h得到含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液； S7、將含吸附肝素鈉成分D217樹脂混合液過濾后得到吸附肝素鈉成分的D217樹月旨，將吸附肝素鈉成分的D217樹脂充分清洗后，用以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準.120-140Wt%硫酸鈉溶液進行一次洗脫得到一次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為0.9-1.1mol/L,洗脫時間為4-6h，再以吸附肝素鈉成分的D217樹脂為基準40-50wt%進行二次洗脫得到二次洗脫液，硫酸鈉溶液的濃度為0.9-1.lmol/L，洗脫時間為l_2h，將一次洗脫液和二次洗脫液混合，用0.02-0.05mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為9.5-9.7，以20_25rpm的攪拌速度攪拌2-4h后靜置5-6h，分層后吸取上層溶液得到物料A ； S8、向物料A中滴加0.1-0.2mol/L的鹽酸使PH值為6.0-6.5，加入以物料A為基準.120-130wt %乙醇攪拌20-30min，乙醇體積百分比為95 %，靜置7_8h進行分層，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B; S9、將物料B用濃度為0.2-0.4mol/L的硫酸鈉溶液完全溶解，加入0.5-0.7mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至10.5-11.5，加入以物料B為基準0.1-0.2wt %雙氧水，將溫度維持在24-26°C 10-15h，過濾后加入0.5-0.7mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至10.5-11.5，以.30-40rpm的攪拌速度攪拌0.5-0.6h后加入以物料B為基準0.2-0.3wt%雙氧水，將溫度維持在23-24°C，保溫14-15h，過濾后滴加0.03-0.07mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)PH為6.7-7.2，得到二次氧化液，其中雙氧水濃度為3-4% ； S10、向二次氧化液加入以二次氧化液為基準180-200wt%，乙醇的體積百分比為35%，在3-4 °C沉淀36-40h，過濾后收集一次過濾物，加入以二次氧化液為基準.0.2-0.5wt%硫酸鈉溶液溶解，硫酸鈉溶液的濃度為8-10%，再加入以二次氧化液為基準.120-150wt%乙醇進行沉淀，乙醇的體積百分比為95%，過濾后收集二次過濾物，過濾物脫水、研細后，在35-45°C下真空烘干，即得肝素鈉精品。
2.如權(quán)利要求1所述制備肝素鈉的方法，其特征在于，SlO中真空烘干為紅外真空烘干。
3.如權(quán)利要求1所述制備肝素鈉的方法，其特征在于，S9中，將物料B用濃度為.0.3mol/L的硫酸鈉溶液完全溶解，加入0.6mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至11，加入以物料B為基準0.15wt%雙 氧水，將溫度維持在25 V 13h，過濾后加入0.6mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至11，以35rpm的攪拌速度攪拌0.55h后加入以物料B為基準0.23wt%雙氧水，將溫度維持在23.50C，保溫14.5h，過濾后滴加0.05mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)PH為7，得到二次氧化液，其中雙氧水濃度為35%。
【文檔編號】C08B37/10GK103980387SQ201410235764
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月26日
【發(fā)明者】趙厚發(fā), 徐賓朋, 郭慶 申請人:安徽科寶生物工程有限公司