一種香菇多糖的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種香菇多糖的提取方法，包括將干燥的香菇粉碎成粒徑為1~5mm的粉狀物；用10~20倍重量的水?dāng)嚢杈鶆蚝筮M(jìn)行超聲破壁處理；光波提取處理得提取液；過濾、減壓濃縮后加入乙醇溶液使其沉淀，將沉淀物干燥后得香菇多糖粗品；將香菇多糖粗品溶解于水中并過濾，然后對(duì)濾液進(jìn)行脫蛋白和脫色處理；減壓濃縮后加入乙醇溶液使其沉淀，對(duì)沉淀物進(jìn)行洗滌、干燥得香菇多糖精制品。本發(fā)明以水作為溶劑采用超聲協(xié)同光波提取技術(shù)對(duì)香菇中的香菇多糖進(jìn)行提取，大大縮短了提取時(shí)間，最大程度地保留了有效成分的生物活性，對(duì)環(huán)境無污染，并顯著提高提取效率、產(chǎn)率與產(chǎn)品含量。
【專利說明】一種香菇多糖的提取方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物化工【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種從香菇中提取香菇多糖的方法，具體是 一種利用超聲協(xié)同光波技術(shù)提取香燕多糖的方法。
[0002]

【背景技術(shù)】
[0003] 我國是生產(chǎn)食用菌的大國，其中香菇的產(chǎn)量居世界之首。香菇中含有大量的蛋白 質(zhì)、脂肪、碳水化合物等多種營(yíng)養(yǎng)成分，其中香菇多糖具有抗癌、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能和誘 導(dǎo)干擾素的產(chǎn)生等多種生理調(diào)節(jié)功能。香菇多糖不僅具有相應(yīng)的藥物作用，而且具有保健 品保健作用，具有廣闊的市場(chǎng)開發(fā)應(yīng)用前景。
[0004] 目前，提取香菇多糖最常用的方法是熱水浸提法，這種提取方法需耗費(fèi)大量能量、 而且提取效率低，同時(shí)還容易破壞香菇多糖的生物活性。近年來，也有人利用酶法、微波和 凍融法等方法來提取香菇多糖，這些方法雖然在一定程度上提高了香菇多糖的產(chǎn)率，但提 取時(shí)間長(zhǎng)、效率低、操作過程復(fù)雜，且容易造成有效成分的損失。因此，開發(fā)一種高效、簡(jiǎn)便 的提取方法已成為香菇多糖產(chǎn)品開發(fā)的關(guān)鍵。
[0005]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明為了克服目前香菇多糖的提取方法中存在的缺陷，其目的是提供一種利用 超聲協(xié)同光波技術(shù)提取香菇多糖的方法，以保證提取后香菇多糖的生物活性不變。
[0007] 為達(dá)到該目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下： 一種香菇多糖的提取方法，包括如下步驟： (1) 將干燥的香菇粉碎成粒徑為l~5mm的粉狀物； (2) 在香菇粉狀物中加 ΚΓ20倍重量的水?dāng)嚢杈鶆蚝筮M(jìn)行超聲破壁處理； (3) 將超聲處理后的香菇粉液進(jìn)行光波提取處理，得提取液； (4) 將提取液過濾，并將濾液濃縮后加入乙醇溶液使其沉淀，將沉淀物干燥后得香菇多 糖粗品； (5) 將香菇多糖粗品溶解于水中并過濾，然后對(duì)濾液進(jìn)行脫蛋白處理； (6) 將脫蛋白后的上清液進(jìn)行脫色處理； (7 )將脫色后的濾液進(jìn)行濃縮后加入乙醇溶液使其沉淀，對(duì)沉淀物進(jìn)行洗滌、干燥得香 菇多糖精制品。
[0008] 進(jìn)一步，所述的步驟（2)中超聲破壁處理時(shí)間為ΚΓ30分鐘。
[0009] 所述的步驟（3)中光波提取時(shí)間1(Γ50分鐘。
[0010] 光波提取是將香菇粉液置于光波爐中進(jìn)行間歇式加熱提取香菇多糖，其中光波爐 是利用一種燈發(fā)熱，再利用高效能的反射盤把發(fā)出的熱能集中傳遞到一個(gè)能耐高溫的玻璃 面板上,并通過這個(gè)玻璃面板，高速將熱量傳遞到需要加熱容器內(nèi)。
[0011] 所述的步驟（4)、（7)中的乙醇溶液的體積濃度為609Γ100% ;加入乙醇溶液后使濾 液中乙醇體積含量為70% ~75% ;采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在45-55°C對(duì)溶液進(jìn)行減壓濃縮至原體積 的 1/4?1/5。
[0012] 所述的步驟（5)中脫蛋白處理是采用Seavg法脫蛋白，其所用的試劑為氯仿和正 丁醇按體積比為3:1~6:1配成的混合試劑；所述香菇多糖粗品溶液與混合試劑的體積比為 4:1。
[0013] 所述Seavg法脫蛋白是利用氯仿和正丁醇的混合試劑對(duì)香菇多糖粗品溶液進(jìn)行 萃取分離其中的蛋白質(zhì)，其中香菇多糖粗品溶液與混合試劑的體積比為4:1 ;氯仿和正丁 醇的體積比為3:1飛：1。
[0014] 所述的步驟（6)中脫色處理是采用活性炭進(jìn)行脫色。
[0015] 所述的步驟（8)中對(duì)沉淀物用無水乙醇進(jìn)行洗滌后進(jìn)行冷凍干燥。
[0016] 更優(yōu)選的方案是，所述的步驟（2)、（5)中水為去離子水。
[0017] 本發(fā)明的有益效果： 1、本發(fā)明以水作為溶劑采用超聲協(xié)同光波提取技術(shù)對(duì)香菇中的香菇多糖進(jìn)行提取，大 大縮短了提取時(shí)間，最大程度地保留了有效成分的生物活性，對(duì)環(huán)境無污染，并能顯著提高 提取效率。
[0018] 2、本發(fā)明通過超聲波在液體中產(chǎn)生空化作用而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而增加細(xì)胞內(nèi)容 物通過細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)效率； 3、本發(fā)明采用光波法對(duì)香菇中的香菇多糖進(jìn)行提取，光波法加熱是利用一種燈發(fā)熱， 再利用高效能的反射盤把發(fā)出的熱能集中傳遞到一個(gè)能耐高溫的玻璃面板上。通過這個(gè)玻 璃面板，高速將熱量傳遞到需要加熱容器內(nèi)。其相比微波，光波加熱具有加熱速度快、加熱 均勻、能最大限度地保持活性營(yíng)養(yǎng)成分不損失等諸多優(yōu)點(diǎn)。從而提高了其提取的效率，并保 證了香菇多糖的生物活性不被破壞。

【具體實(shí)施方式】
[0019] 實(shí)施例一 取干燥的香菇子實(shí)體200g，粉碎成l~5mm的粉末，加10倍重量的去離子水置于超聲清 洗器中超聲處理10分鐘，然后再置于光波爐中提取10分鐘得提取液；對(duì)提取液過濾后，采 用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將濾液在45°C時(shí)減壓濃縮至原體積的1/5,加入體積濃度為95%的乙醇溶液 并使濾液中乙醇體積含量為70%，將沉淀物干燥得香菇多糖粗品。
[0020] 在上述香菇多糖粗品加入去離子水使其完全溶解，過濾后的濾液用氯仿-正丁醇 按體積比為3:1配成的混合試劑采用Saveg法去蛋白，其中氯仿-正丁醇混合試劑的用量 為濾液體積的1/4,共重復(fù)操作3次；將在其上清液加入活性炭對(duì)其進(jìn)行脫色處理并過濾， 對(duì)濾液同前操作進(jìn)行減壓濃縮并加入乙醇沉淀，對(duì)沉淀物用無水乙醇進(jìn)行洗滌后進(jìn)行冷凍 干燥得香菇多糖精品10. 24g，產(chǎn)品的含量為85%左右，收率為5. 12%。
[0021] 實(shí)施例二 取干燥的香菇子實(shí)體200g，粉碎成l~5mm的粉末，加20倍重量的去離子水置于超聲清 洗器中處理30分鐘，然后置于光波爐中提取50分鐘，過濾，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將濾液在50°C 時(shí)濃縮至原體積的1/4,加入體積濃度為90%的乙醇溶液并使濾液中乙醇體積含量為70%， 將沉淀物干燥得香菇多糖粗品。
[0022] 在上述香菇多糖粗品加入去離子水使其完全溶解，過濾后的濾液用氯仿-正丁醇 按體積比為3:1配成的混合試劑采用Saveg法去蛋白，其中氯仿-正丁醇混合試劑的用量 為濾液體積的1/4,共重復(fù)操作3次；將在其上清液加入活性炭對(duì)其進(jìn)行脫色處理并過濾， 對(duì)濾液同前操作進(jìn)行減壓濃縮并加入乙醇沉淀，對(duì)沉淀物用無水乙醇進(jìn)行洗滌后進(jìn)行冷凍 干燥得香菇多糖精品10. 32g，產(chǎn)品的含量為85%左右，收率為5. 16%。
[0023] 實(shí)施例三 取干燥的香菇子實(shí)體200g，粉碎成l~5mm的粉末，加15倍重量的去離子水置于超聲清 洗器中處理20分鐘，然后置于光波爐中提取30分鐘，過濾，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將濾液在55°C 時(shí)濃縮至原體積的1/4,加入體積濃度為100%的乙醇溶液并使濾液中乙醇體積含量為70%， 將沉淀物干燥得香菇多糖粗品。
[0024] 在上述香菇多糖粗品加入去離子水使其完全溶解，過濾后的濾液用氯仿-正丁醇 按體積比為4:1配成的混合試劑采用Saveg法去蛋白，其中氯仿-正丁醇混合試劑的用量 為濾液體積的1/4,共重復(fù)操作3次；將在其上清液加入活性炭對(duì)其進(jìn)行脫色處理并過濾， 對(duì)濾液同前操作進(jìn)行減壓濃縮并加入乙醇沉淀，對(duì)沉淀物用無水乙醇進(jìn)行洗滌后進(jìn)行冷凍 干燥得香菇多糖精品9. 96g，產(chǎn)品的含量為85%左右，收率為4. 98%。
[0025] 對(duì)比例1 :傳統(tǒng)熱水浸提法提取香菇多糖 取干燥的香菇子實(shí)體200g，粉碎成l~5mm的粉末，加10倍重量的去離子水煮沸l(wèi)h，過 濾，濾液減壓濃縮至原體積的1/5,加入95%的乙醇沉淀，使乙醇含量達(dá)到70%，收集沉淀， 干燥得香菇多糖粗品。將上述粗多糖加入400倍重量去離子水溶解，過濾，用Saveg法(氯 仿-正丁醇4:1的混合液）去蛋白，氯仿-正丁醇混合液的用量為提取液體積的1/4,共去 除3次；溶液加入活性炭進(jìn)行脫色處理，過濾，濾液減壓濃縮，加入乙醇沉淀，收集沉淀物， 用無水乙醇洗滌，冷凍干燥得香菇多糖精品4. 16g，產(chǎn)品的含量為60%左右，收率為2. 08%。
[0026] 對(duì)比例2 :微波提取法提取香菇多糖 取干燥的香菇子實(shí)體200g，粉碎成l~5mm的粉末，加10倍重量的去離子水置于微波爐 中提取30分鐘，過濾，濾液減壓濃縮至原體積的1/5,加入95%的乙醇沉淀，使乙醇含量達(dá)到 70%，收集沉淀，干燥得香菇多糖粗品。將上述粗多糖加入400倍重量去離子水溶解，過濾， 用Saveg法(氯仿-正丁醇4:1的混合液）去蛋白，氯仿-正丁醇混合液的用量為提取液體 積的1/4,共去除3次；溶液加入活性炭進(jìn)行脫色處理，過濾，濾液減壓濃縮，加入乙醇沉淀， 收集沉淀物，用無水乙醇洗滌，冷凍干燥得香菇多糖精品7. 82g，產(chǎn)品的含量為70%左右，收 率為3. 91%。
[0027] 上面實(shí)施例1 - 3與對(duì)比例1 - 2的提取效果對(duì)比如下表所示：

【權(quán)利要求】
1. 一種香菇多糖的提取方法，其特征在于：包括如下步驟： (1) 將干燥的香菇粉碎成粒徑為l~5mm的粉狀物； (2) 在香菇粉狀物中加 ΚΓ20倍重量的水?dāng)嚢杈鶆蚝筮M(jìn)行超聲破壁處理； (3) 對(duì)超聲處理后的香菇粉液進(jìn)行光波提取處理，得提取液； (4) 將提取液過濾，并將濾液濃縮后加入乙醇溶液使其沉淀，將沉淀物干燥后得香菇多 糖粗品； (5) 將香菇多糖粗品溶解于水中并過濾，然后對(duì)濾液進(jìn)行脫蛋白處理； (6) 將脫蛋白后的上清液進(jìn)行脫色處理； (7 )將脫色后的濾液進(jìn)行濃縮后加入乙醇溶液使其沉淀，對(duì)沉淀物進(jìn)行洗滌、干燥得香 菇多糖精制品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步驟（2)中超聲破壁處理時(shí)間為 1(Γ30分鐘。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步驟（3)中光波提取時(shí)間ΚΓ50分 鐘。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步驟（4)、（7)中的乙醇溶液的體 積濃度為609Γ100% ;加入乙醇溶液后使濾液中乙醇體積含量為709Γ75% ;采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 在45-55°C對(duì)溶液進(jìn)行減壓濃縮至原體積的1/Γ1/5。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步驟（5)中脫蛋白處理是采用 Seavg法脫蛋白，其所用的試劑為氯仿和正丁醇按體積比為3:1飛：1配成的混合試劑；所述 香菇多糖粗品溶液與混合試劑的體積比為4:1。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步驟（6)中脫色處理是采用活性炭 進(jìn)行脫色。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步驟（8)中對(duì)沉淀物用無水乙醇進(jìn) 行洗滌后并進(jìn)行冷凍干燥。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步驟（2)、（5)中水為去離子水。
【文檔編號(hào)】C08B37/00GK104250310SQ201410540604
【公開日】2014年12月31日 申請(qǐng)日期:2014年10月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月14日
【發(fā)明者】畢建洪, 方文濤, 畢文杰, 吳煒, 董華澤, 陶文波, 劉輝 申請(qǐng)人:合肥師范學(xué)院