本發(fā)明涉及一種適用于單個(gè)核細(xì)胞分層的離心管。
背景技術(shù)：
目前,外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheralbloodmononuclearcell,pbmc)即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。體外檢測(cè)淋巴細(xì)胞首先要分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，目前主要的分離方法是ficoll-hypaque(葡聚糖－泛影葡胺)密度梯度離心法，因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町?，因此得以分離。紅細(xì)胞和粒細(xì)胞密度大于分層液，同時(shí)因紅細(xì)胞遇到ficoll而凝集成串錢狀而沉積于管底。血小板則因密度小而懸浮于血漿中，唯有與分層液密度相當(dāng)?shù)膯蝹€(gè)核細(xì)胞密集在血漿層和分層液的界面中，呈白膜狀，吸取該層細(xì)胞遞經(jīng)洗滌離心重懸。本法分離單個(gè)核細(xì)胞純度可達(dá)95％，淋巴細(xì)胞約占90％～95％，細(xì)胞獲得率可達(dá)80％以上。
但是在實(shí)際操作過(guò)程中，白膜層的吸取是一項(xiàng)非?？简?yàn)實(shí)驗(yàn)操作人員經(jīng)驗(yàn)的工作，需要小心的將吸管插入單個(gè)核細(xì)胞白膜層上方，沿試管壁周緣吸取該層單個(gè)核細(xì)胞，要盡量避免吸取到白膜層下方的分離液。該操作步驟需要實(shí)驗(yàn)操作人員擁有較為熟練的實(shí)驗(yàn)操作技能，不然會(huì)影響到單個(gè)核細(xì)胞的收集量。為了解決這一問(wèn)題，我們?cè)O(shè)計(jì)了一款專門用于單個(gè)核細(xì)胞密度梯度離心的離心管。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷提供一種適用于單個(gè)核細(xì)胞分層的離心管。
本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的，采用如下技術(shù)方案：一種適用于單個(gè)核細(xì)胞分層的離心管，包括由上至下依次設(shè)置的管蓋、上部管身、中部管身和下部管身；所述上部管身的直徑由上至下逐漸變小，且其下部以150°的圓弧角度向下延伸以形成下管接口；所述中部管身的中間部分為鏤空結(jié)構(gòu)，所述鏤空結(jié)構(gòu)內(nèi)設(shè)置有中間軟管，所述中間軟管的上部與所述上部管身的下管接口連接，所述中間軟管的下部與所述下部管身的上管接口連接；其 中，所述下部管身呈錐型平底結(jié)構(gòu)。
進(jìn)一步的，所述管蓋采用塑料材質(zhì)制成，其直徑為3.4cm,高為1.2cm，厚為0.15cm。
進(jìn)一步的，所述管蓋與所述上部管身螺紋連接，且所述管蓋的外側(cè)設(shè)有一圈防滑豎紋。
進(jìn)一步的，所述上部管身采用塑料材質(zhì)制成，其長(zhǎng)度為53cm，其上部直徑為29cm，其下部直徑為23.6cm。
進(jìn)一步的，所述上部管身的下管接口的長(zhǎng)為6cm，直徑為0.85cm。
進(jìn)一步的，所述中間軟管采用透明橡膠材質(zhì)制成。
進(jìn)一步的，所述下部管身的長(zhǎng)度為43cm。
本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明的離心管在離心時(shí)，白膜層和血漿層會(huì)浮在軟管上層，分離液和紅細(xì)胞層會(huì)沉淀在軟管下層，分離時(shí)只需要用止血鉗夾住軟管，倒出白膜層和血漿層的液體即可，這樣可以確保完全吸盡白膜層細(xì)胞又不會(huì)混入紅細(xì)胞。
附圖說(shuō)明
圖1本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施方式
圖1所示，涉及一種適用于單個(gè)核細(xì)胞分層的離心管，包括由上至下依次設(shè)置的管蓋1、上部管身2、中部管身3和下部管身4；所述上部管身2的直徑由上至下逐漸變小，且其下部以150°的圓弧角度向下延伸以形成下管接口；所述中部管身3的中間部分為鏤空結(jié)構(gòu)，所述鏤空結(jié)構(gòu)內(nèi)設(shè)置有中間軟管31，所述中間軟管31的上部與所述上部管身2的下管接口連接，所述中間軟管31的下部與所述下部管身4的上管接口連接；其中，所述下部管身4呈錐型平底結(jié)構(gòu)。
具體設(shè)計(jì)時(shí)，所述管蓋1采用塑料材質(zhì)制成，其直徑為3.4cm,高為1.2cm，厚為0.15cm。所述管蓋1與所述上部管身2螺紋連接，且所述管蓋1的外側(cè)設(shè)有一圈防滑豎紋。所述上部管身2采用塑料材質(zhì)制成，其長(zhǎng)度為53cm，其上部直徑為29cm，其下部直徑為23.6cm。所述上部管身2的下管接口的長(zhǎng)為6cm，直徑為0.85cm。所述中間軟管31采用透明橡膠材質(zhì)制成。所述下部管身4的長(zhǎng)度為43cm。
經(jīng)測(cè)試，當(dāng)下管接口的孔徑大小設(shè)置為0.85cm時(shí)，能使試管傾倒時(shí)，ficoll表面產(chǎn)生的液體表面張力能確保試管底部的紅細(xì)胞層不會(huì)倒出。
本發(fā)明的這款離心管的總?cè)萘繛?0ml，適用于15ml-20ml血液分離單個(gè)核細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、向離心管中加入20ml淋巴細(xì)胞分離液(剛好位于橡膠軟管下方)，緩慢加入20ml血液，確保液面分層。
2、小心地將離心管放入離心機(jī)中400g離心30分鐘。
3、離心分層后，可見(jiàn)最下層為紅細(xì)胞和粒細(xì)胞(約5-8ml)上一層為20ml淋巴細(xì)胞分離液，軟管上部分為部分淋巴細(xì)胞分離液、白膜層、血漿。
4、取血管鉗夾住軟管，直接將離心管豎直傾倒出軟管上層的液體，即可方便快速的得到全部的單個(gè)核細(xì)胞。
離心時(shí)，白膜層和血漿層會(huì)浮在軟管上層，分離液和紅細(xì)胞層會(huì)沉淀在軟管下層，分離時(shí)只需要用止血鉗夾住軟管，倒出白膜層和血漿層的液體就可以了，這樣可以確保完全吸盡白膜層細(xì)胞又不會(huì)混入紅細(xì)胞。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。