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      一種弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基、培養(yǎng)方法及農(nóng)用微生物菌劑的制備方法與流程

      文檔序號(hào):11808529閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基,其特征在于,以重量份計(jì),包括:3~10份玉米粉、3~18份豆粕粉、18~45份秸稈粉、10~30份草炭土、20~50份磷尾礦、1~10份碳酸鈣、40~50份營養(yǎng)液。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基,其特征在于,所述秸稈粉的粒徑細(xì)度為30-50目;所述草炭土細(xì)度為40目;所述磷尾礦粉顆粒細(xì)度在80目以下;

      優(yōu)選的,以重量份計(jì),所述營養(yǎng)液包括1~10份的蔗糖、1~5份的硫酸銨、0.1~1份磷酸二氫鉀、85~92份水。

      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基,其特征在于,培養(yǎng)基以重量份計(jì),包括:5~10份的玉米粉、8~10份的豆粕粉、18~25份的秸稈粉、20~30份的草炭土、30~40份的磷尾礦、2~3份的碳酸鈣和43~48份蔗糖-硫酸銨營養(yǎng)液。

      4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基,其特征在于,培養(yǎng)基包括以下重量份計(jì)的原料:10份玉米粉、10份豆粕粉、18份秸稈粉、30份草炭土、30份磷尾礦、2份碳酸鈣和45份蔗糖-硫酸銨營養(yǎng)液;

      或,培養(yǎng)基包括以下重量份計(jì)的原料:7份玉米粉、15份豆粕粉、20份秸稈粉、20份草炭土、35份磷尾礦、3份碳酸鈣和43份蔗糖-硫酸銨營養(yǎng)液;

      或,培養(yǎng)基包括以下重量份計(jì)的原料:5份玉米粉、8份豆粕粉、25份秸稈粉、25份草炭土、40份磷尾礦、2份碳酸鈣和48份蔗糖-硫酸銨營養(yǎng)液。

      5.一種如權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:

      (A)稱取玉米粉、豆粕粉、磷尾礦、秸稈粉、草炭土、碳酸鈣,混合各原料得到混合物;

      (B)在上述混合物中加入營養(yǎng)液,機(jī)械攪拌混合均勻,自然pH,經(jīng)滅菌處理,得到弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基;優(yōu)選的,所述滅菌處理?xiàng)l件為115-122℃下施加1.0-2.0kg/cm2壓力20~40分鐘。

      6.一種利用權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基進(jìn)行弗氏鏈霉菌孢子的固體發(fā)酵方法,其特征在于,包括以下步驟:

      1)孢子懸液制備:從菌種斜面挑取孢子接種茄瓶斜面,培養(yǎng)后加入無菌水洗脫制備孢子懸液;優(yōu)選的,于茄瓶斜面接種,28~32℃下恒溫靜置培養(yǎng)6~10天,用滅菌蒸餾水洗脫;

      2)液體發(fā)酵:將孢子懸液接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行液體發(fā)酵,至所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基中菌絲體生長進(jìn)入所述弗氏鏈霉菌的對數(shù)生長期,得到液體發(fā)酵種子液;

      3)固體發(fā)酵:將所述液體發(fā)酵種子液接種到弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基中,進(jìn)行固體發(fā)酵,得到固體發(fā)酵培養(yǎng)基。

      7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的弗氏鏈霉菌孢子的固體發(fā)酵方法,其特征在于,步驟2)中,所述液體發(fā)酵過程中,發(fā)酵條件為溫度28~32℃,震蕩頻率150~220r/分鐘,恒溫振蕩培養(yǎng)24~36小時(shí);優(yōu)選的,所述液體發(fā)酵的條件為溫度30~32℃,震蕩頻率180~200r/分鐘。

      8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的弗氏鏈霉菌孢子的固體發(fā)酵方法,其特征在于,步驟3)中,所述弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基的發(fā)酵條件為在28~35℃下培養(yǎng)3~6天;優(yōu)選的,所述弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基的發(fā)酵條件為在30~34℃下培養(yǎng)4~5天。

      9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的弗氏鏈霉菌孢子的固體發(fā)酵方法,其特征在于,

      步驟2)中,所述液體發(fā)酵過程中,以步驟1)制備的孢子懸液作為接種菌液,接種量為液體發(fā)酵培養(yǎng)基體積的3-6%;所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基的成分以重量比計(jì)算,包括2%的豆粕粉和0.5%的葡萄糖懸液,其余為水;

      優(yōu)選的,步驟3)中,所述弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基的發(fā)酵過程包括發(fā)酵初期和產(chǎn)孢期;發(fā)酵初期弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基的水分含量為40~60%,進(jìn)入產(chǎn)孢期后所述弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基的水分含量小于35%;液體發(fā)酵種子液的接種量為所述弗氏鏈霉菌固體培養(yǎng)基質(zhì)量的10~15%。

      10.一種農(nóng)用弗氏鏈霉菌菌劑的制備方法,其特征在于,根據(jù)權(quán)利要求6所述的弗氏鏈霉菌孢子的固體發(fā)酵方法,固體發(fā)酵結(jié)束后,將固體發(fā)酵產(chǎn)物孢子粉與褐煤以及磷尾礦粉復(fù)配得到農(nóng)用弗氏鏈霉菌菌劑粉劑產(chǎn)品;

      優(yōu)選的,所述農(nóng)用弗氏鏈霉菌菌劑的制備過程中,固體發(fā)酵產(chǎn)物與褐煤以及磷尾礦粉的復(fù)配比例為20~40:30~60:60~80,以重量份計(jì)比。

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