本發(fā)明涉及一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方,特別涉及一種加入在常規(guī)培養(yǎng)基而促進氧化硫硫桿菌快速增殖的營養(yǎng)液。
背景技術:
氧化硫硫桿菌是一種礦質化能自養(yǎng)菌,專性好氧,嗜酸,革蘭氏染色陰性,呈桿狀,寬0.3~0.5μm,氧化硫硫桿菌以氧化單質硫或還原態(tài)的硫化物來獲得自身細胞生長和代謝所需要的能量,以NH4+為氮源,以空氣中CO2為碳源。氧化硫硫桿菌被廣泛應用于輸油管道、儲油罐和飛機油箱中,在微生物浸礦、微生物脫硫方面也多有應用。人們發(fā)現(xiàn),氧化硫硫桿菌在污水治理、土壤治理方面也具有顯著的效果。近年來,氧化硫硫桿菌在醫(yī)藥、環(huán)保、農業(yè)、生物能源等方面的應用得到重視,許多國家加大對氧化硫硫桿菌微生物資源的開發(fā)和利用。
氧化硫硫桿菌是一種專性化能自養(yǎng)菌,常用的培養(yǎng)基有Waksman medium、Staeky medium、9K-medium等常規(guī)培養(yǎng)基。但是,用這些常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)氧化硫硫桿菌,其生長速度慢,難以達到滿足工業(yè)化制備的需要。因此,氧化硫硫桿菌微生物的快速培養(yǎng)技術備受關注。目前,對如何加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)方法很少有研究報道。本發(fā)明通過向常規(guī)培養(yǎng)基中添加復合營養(yǎng)液,這些營養(yǎng)液參與氧化硫硫桿菌的生長代謝過程而加速其生長繁殖速度,從而解決氧化硫硫桿菌常規(guī)培養(yǎng)增殖速度慢的問題。
技術實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是提供一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方。
一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方按以下步驟實現(xiàn)。
一種能加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基:在常規(guī)培養(yǎng)基中加入營養(yǎng)液,所述營養(yǎng)液為蛋白胨和酵母粉。所述的促進氧化硫硫桿菌快速增殖的營養(yǎng)液,是以重量百分數(shù)計蛋白胨和酵母粉在常規(guī)培養(yǎng)基中的添加量均為0.5%~1%。即本發(fā)明的能加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方為:按重量百分含量計,0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉、0.5%~1%蛋白胨和0.5%~1%酵母粉。
作為優(yōu)選,在上述的一種能加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基中加以重量百分數(shù)計為5%~10%的紅糖。
本發(fā)明作為一種促進氧化硫硫桿菌快速增殖的培養(yǎng)基,與常規(guī)培養(yǎng)基相比有著明顯的促進菌株生長、縮短培養(yǎng)時間的效果。利用該培養(yǎng)基培養(yǎng)氧化硫硫桿菌的結果表明,在培養(yǎng)過程中,隨著菌體生長、漂浮在水面的硫磺粉顆粒逐漸下沉并分散于水中、溶液由澄清逐漸變?yōu)闇啙岬臅r間,與常規(guī)培養(yǎng)基相比,提前了5-7天,菌株生長速度顯著高于常規(guī)培養(yǎng)基。
具體實施方式
本發(fā)明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式,還包括各具體實施方式間的任意組合。
實施例1。
本實施方式的一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方按以下步驟實現(xiàn)。
常規(guī)培養(yǎng)基配方:按重量百分含量計,0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉。
添加營養(yǎng)液的培養(yǎng)基配方:按重量百分含量計,0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉、0.5%蛋白胨和0.5%酵母粉。
在添加蛋白胨和酵母粉的培養(yǎng)基中接種氧化硫硫桿菌,以常規(guī)培養(yǎng)基為對照,培養(yǎng)條件為30℃、180rpm恒溫振蕩培養(yǎng)。與常規(guī)培養(yǎng)基相比,添加蛋白胨和酵母粉的培養(yǎng)基,漂浮在水面的硫磺粉顆粒下沉并分散于水中、溶液由清澈變?yōu)闇啙?,細菌?shù)量增加,OD600達到2.8以上,與常規(guī)培養(yǎng)基比較,細菌總數(shù)提高,時間提前了5天。結果表明,在常規(guī)培養(yǎng)基中添加蛋白胨和酵母粉,可明顯提高氧化硫硫桿菌的生長繁殖速度,縮短培養(yǎng)時間,實現(xiàn)氧化硫硫桿菌的快速繁殖生長。
實施例2。
本實施方式的一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方按以下步驟實現(xiàn)。
常規(guī)培養(yǎng)基配制:按重量百分含量計,0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉。
添加營養(yǎng)液的培養(yǎng)基配制:按重量百分含量計,0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉、0.5%蛋白胨、0.5%酵母粉和10%紅糖。
在添加紅糖的培養(yǎng)基中接種氧化硫硫桿菌,以常規(guī)培養(yǎng)基為對照,30℃、180rpm恒溫振蕩培養(yǎng)氧化硫硫桿菌。與常規(guī)培養(yǎng)基相比,添加紅糖的培養(yǎng)基,漂浮在水面的硫磺粉顆粒下沉并分散于水中、溶液由清澈變?yōu)闇啙?,溶液由清澈變?yōu)闇啙幔毦鷶?shù)量增加,OD600達到2.5以上,與常規(guī)培養(yǎng)基比較,細菌總數(shù)提高,時間提前了7天。結果表明,在常規(guī)培養(yǎng)基中添加紅糖,可明顯提高氧化硫硫桿菌的生長繁殖速度,縮短培養(yǎng)時間,實現(xiàn)氧化硫硫桿菌的快速繁殖生長。