：本發(fā)明涉及一株耐鹽微生物濟(jì)州桿菌及其應(yīng)用，屬于微生物。

背景技術(shù)

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背景技術(shù)：

1、酚酸類化合物，是指苯環(huán)上有一個或多個酚羥基取代的芳香羧酸類化合物，也是工業(yè)生產(chǎn)過程中或自然環(huán)境中普遍存在的一類污染物。一般，植物木質(zhì)素降解、芳香族氨基酸的代謝、和其它芳香族化合物降解會產(chǎn)生具有c6-c3結(jié)構(gòu)單元的苯丙類的酚酸化合物，包括苯丙酸及其羥基化衍生物間羥基苯丙酸。此外，高等植物的根系也會產(chǎn)生酚酸類化合物到土壤環(huán)境中，包括肉桂酸、阿魏酸、苯甲酸、對羥基苯甲酸等。這些酚酸類化合物作為植物的自毒物質(zhì)，可以通過影響酶活性、細(xì)胞膜的功能、光合作用、呼吸作用和離子吸收等各種途徑來影響植株的代謝及生長，產(chǎn)生連作障礙。

2、目前，酚酸類化合物的分解的主要途徑是生物降解，即通過依賴微生物自身具有的酚酸類化合物降解途徑進(jìn)行降解，并產(chǎn)生一些有利于自身生長的物質(zhì)，比如琥珀酸、丙酮酸、乙酰輔酶a等。據(jù)報道，許多微生物均能利用酚酸類化合物作為唯一碳源進(jìn)行生長，包括不動桿菌、假單胞菌、節(jié)桿菌、解淀粉芽孢桿菌、多粘類芽孢桿菌等20多個屬，但罕有耐鹽的濟(jì)州桿菌在高鹽條件下降解酚酸類物質(zhì)的報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

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技術(shù)實現(xiàn)要素：

1、本發(fā)明的目的在于提供一株具有耐鹽性的濟(jì)州桿菌，并將其用于酚酸類化合物的降解中。

2、本發(fā)明提供的技術(shù)方案之一，是一株濟(jì)州桿菌，具體為濟(jì)州桿菌(jejubactersp.)dt01。該菌株為從鹽堿地土壤中分離、純化所得，同時具有耐鹽、和降解酚酸類化合物的特性。

3、所述濟(jì)州桿菌(jejubacter?sp.)dt01菌株已于2023年3月9日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱cgmcc)，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編100101，保藏編號為cgmcc?no.26777。

4、所述濟(jì)州桿菌(jejubacter?sp.)dt01菌株具有以下理化特性：

5、(1)革蘭氏陰性菌，在lb固體培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)12h后，菌落呈圓形、凸起、透明、光滑、白色。其形態(tài)特征為桿狀，并有鞭毛，長度為0.8-1.5μm，直徑為0.4-0.8μm；

6、(2)其可在鹽濃度為0-150g/l(優(yōu)選0～90g/l)的培養(yǎng)基中生長，所述的鹽包括但不限于nacl、kcl、mgcl2、mgso4、cacl2、nahco3、nh4cl等；

7、(3)其可在ph值為3～11(優(yōu)選4～10)的培養(yǎng)基中生長；

8、(4)其可在溫度5～55℃(優(yōu)選16～40℃)下生長；

9、(5)運(yùn)動性試驗陽性、氧化酶試驗陰性、過氧化氫酶試驗陽性、硝酸鹽還原試驗陽性、甘油試驗弱陽性、阿拉伯糖試驗陽性、木糖試驗陽性、甘露糖試驗陽性、鼠李糖試驗陽性、麥芽糖試驗陽性、海藻糖試驗陽性、甘露醇試驗陽性、阿拉伯糖醇試驗陽性、葡萄糖酸鉀試驗陽性、纖維二糖試驗陰性、乳糖試驗陰性、淀粉水解試驗陰性、菊粉水解試驗陰性、巖藻糖試驗陰性、棉子糖試驗陰性。

10、本發(fā)明提到的技術(shù)方案之二，是濟(jì)州桿菌(jejubacter?sp.)dt01的應(yīng)用；

11、進(jìn)一步地，是在降解酚酸類化合物中的應(yīng)用；

12、更進(jìn)一步地，所述酚酸類化合物包括但不限于：間羥基苯丙酸、苯丙酸、肉桂酸、阿魏酸、苯甲酸和對羥基苯甲酸等；

13、更進(jìn)一步地，可用于緩解鹽堿地植物的自毒作用，對木質(zhì)素降解產(chǎn)物或植物自身產(chǎn)生的苯丙類酚酸化合物作進(jìn)一步降解。

14、經(jīng)過基因檢測分析發(fā)現(xiàn)，濟(jì)州桿菌(jejubacter?sp.)dt01基因組上含有其它濟(jì)州桿菌沒有的降解酚酸類化合物的相關(guān)基因，從而使其有能力降解酚酸類物質(zhì)。所述檢測到的降解酚酸類化合物的相關(guān)基因包括：黃素型羥化酶編碼基因mhpa、外二醇雙加氧酶編碼基因mhpb、間位裂解復(fù)合水解酶編碼基因mhpc、2-酮基-4-戊烯酸水合酶編碼基因mhpd、4-羥基-2-酮戊酸醛縮酶編碼基因mhpe、乙酰輔酶a脫氫酶編碼基因mhpf；

15、進(jìn)一步地，所述黃素型羥化酶編碼基因mhpa，核苷酸序列如序列表seq?id?no.1所示；

16、進(jìn)一步地，所述外二醇雙加氧酶編碼基因mhpb，核苷酸序列如序列表seq?id?no.2所示；

17、進(jìn)一步地，所述間位裂解復(fù)合水解酶編碼基因mhpc，核苷酸序列如序列表seq?idno.3所示；

18、進(jìn)一步地，所述2-酮基-4-戊烯酸水合酶編碼基因mhpd，核苷酸序列如序列表seqid?no.4所示；

19、進(jìn)一步地，所述4-羥基-2-酮戊酸醛縮酶編碼基因mhpe，核苷酸序列如序列表seqid?no.5所示；

20、進(jìn)一步地，所述乙酰輔酶a脫氫酶編碼基因mhpf，核苷酸序列如序列表seq?idno.6所示。

21、有益效果：

22、濟(jì)州桿菌(jejubacter?sp.)dt01能夠同時在較高鹽濃度(0-150g/l)和較高酚酸類化合物濃度(0-1000mg/l)的條件下正常生長。這使得dt01能夠在類似高鹽濃度的工業(yè)廢水中或者鹽堿地的土壤中仍能對較高濃度的酚酸類化合物進(jìn)行降解并利用。另外，dt01菌株能夠耐受高鹽濃度環(huán)境使得該菌株能夠在高鹽環(huán)境下進(jìn)行非滅菌發(fā)酵生產(chǎn)，從而直接減少了發(fā)酵生產(chǎn)中滅菌所帶來的能耗成本。發(fā)酵過程中還可以使用海水進(jìn)行培養(yǎng)基配制，無需利用淡水，進(jìn)一步降低生產(chǎn)成本，同時減少工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)過程中的淡水消耗問題。

23、濟(jì)州桿菌(jejubacter?sp.)dt01具有底物多樣性。除了普通碳源比如葡萄糖、果糖等可直接利用的碳源外，其不僅能夠分解間羥基苯丙酸、苯丙酸、肉桂酸、阿魏酸、苯甲酸和對羥基苯甲酸等酚酸類化合物，還能夠利用上述酚酸類化合物作為唯一碳源進(jìn)行生長。

技術(shù)特征：

1.一種濟(jì)州桿菌，其特征在于，所述濟(jì)州桿菌具體為jejubacter?sp.dt01，保藏編號為cgmccno.26777。

2.權(quán)利要求1所述濟(jì)州桿菌jejubacter?sp.dt01的應(yīng)用。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，是在降解酚酸類化合物中的應(yīng)用。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述酚酸類化合物包括但不限于：間羥基苯丙酸、苯丙酸、肉桂酸、阿魏酸、苯甲酸和對羥基苯甲酸。

5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，用于緩解鹽堿地植物的自毒作用，對木質(zhì)素降解產(chǎn)物或植物自身產(chǎn)生的苯丙類酚酸化合物進(jìn)行降解。

6.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，是在高鹽非滅菌發(fā)酵中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一株耐鹽微生物濟(jì)州桿菌及其應(yīng)用，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。所述濟(jì)州桿菌(Jejubacter?sp.)DT01，保藏編號為CGMCC?No.26777。濟(jì)州桿菌(Jejubacter?sp.)DT01能夠同時在較高鹽濃度(0?150g/L)和較高酚酸類化合物濃度(0?1000mg/L)的條件下正常生長，并且具有底物多樣性，除了普通碳源比如葡萄糖、果糖等可直接利用的碳源外，其不僅能夠分解間羥基苯丙酸、苯丙酸、肉桂酸、阿魏酸、苯甲酸和對羥基苯甲酸等酚酸類化合物，還能夠利用上述酚酸類化合物作為唯一碳源進(jìn)行生長。

技術(shù)研發(fā)人員：霍毅欣,定婷婷,陳振婭
受保護(hù)的技術(shù)使用者：北京理工大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/11/28