本發(fā)明涉及抗體，具體而言，涉及一種抗穆勒氏管激素抗體、檢測穆勒氏管激素的試劑和試劑盒。

背景技術(shù)：

1、抗穆勒氏管激素(anti-mullerian?hormone，amh)是轉(zhuǎn)化生長因子β超家族中的一員，由professor?alfred?jost于1974年首先發(fā)現(xiàn)。它由兩個70kd的蛋白亞基通過二硫鍵組成的二聚糖蛋白，相對分子質(zhì)量為140kd，其主要作用是影響卵泡的成長和分化。人類編碼amh的基因位于19p13.3號染色體，大小2.4～2.8kb，含有5個外顯子。研究表明，amh的n端區(qū)域?qū)Ρ３值鞍淄暾钚云痍P(guān)鍵作用，在代謝運輸過程中，amh的特定位點(451位氨基酸)可以被切開，形成前體片段(pro-amh，26-451aar)以及成熟片段(mature?amh，452-560aar)，而切開的兩個片段能夠再通過非共價鍵的形式連接在一起。

2、amh在性腺器官發(fā)育過程中起著重要作用，是男女性腺功能的重要標記物之一。在男性胎兒的塞爾托利氏細胞中，轉(zhuǎn)錄因子sox-9(transcription?factor?sox-9，sox9)可激活amh與抗穆勒激素受體ii型(anti-mullerian?hormone?receptor?type?ii，amhr2)相結(jié)合并導致雄性胚胎中的穆勒氏管退化，從而阻止輸卵管、子宮和陰道上部的形成，使男性生殖管道正常發(fā)育。而在女性胚胎中穆勒氏管將分化為子宮管和輸卵管。amh也是女性的竇前卵泡和小竇卵泡顆粒細胞的產(chǎn)物，從青春期開始，血清中amh水平隨時間慢慢降低，并在更年期降低到elisa法檢測不到的水平。amh的正常值界于2-6.8ng/ml之間，數(shù)值越高，代表卵子存量越豐沛，適合受孕的黃金期較長，數(shù)值越低則卵巢功能越差。35歲過后amh值會開始急劇下降，當?shù)陀?.7ng/ml時，表示卵子庫存量已嚴重不足，幾乎難以受孕。若數(shù)值大于6.8時，可考慮有多囊性卵巢癥候群的體質(zhì)。使用排卵針劑、藥物時，卵巢也容易反應過度而排出過多的卵子，造成卵巢過度刺激癥候群。因此可通過檢測amh水平來判斷卵子存量及卵巢功能，并可以作為體外受精聯(lián)合胚胎移植術(shù)(ivf)的卵巢反應性、多囊性卵巢綜合征(pcos)、卵巢過度刺激綜合癥(ohss)的診斷依據(jù)。

3、目前國內(nèi)外臨床上檢測amh的常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法(elisa)、電化學發(fā)光法和化學發(fā)光法。其中elisa方法耗時長、靈敏度低、背景值高、易造成假陽性和假陰性結(jié)果，并且需要專業(yè)人員進行操作。電化學發(fā)光法和化學發(fā)光法如羅氏的elecsys?amh檢測儀目前逐漸替換elisa法，但價格昂貴，不適合單人份和小批量檢測用，加上需要專門的儀器使用人員，維修和檢測成本均較高，不適合大范圍推廣使用。

4、上述方法都需要借助抗amh的單克隆抗體，因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員對于有良好活性和親和力的抗穆勒氏管激素抗體存在著強烈需求。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本申請?zhí)峁┮环N抗體或其功能性片段，為穆勒氏管激素的檢測提供重要的原料來源，且有良好的活性和親和力。

2、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種抗體或其功能性片段，所述抗體或其功能性片段包括hcdr1、hcdr2、hcdr3和lcdr1、lcdr2、lcdr3，所述hcdr1、hcdr2、hcdr3為與seq?id?no:17、18任一所示重鏈可變區(qū)的hcdr1、hcdr2、hcdr3一致的氨基酸序列；所述lcdr1、lcdr2、lcdr3為與seq?id?no:19、20、21、22任一所示輕鏈可變區(qū)的lcdr1、lcdr2、lcdr3一致的氨基酸序列。

3、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第二個方面，提供了一種抗體或其功能性片段，包括重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:17、18任一所示；所述輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:19、20、21、22任一所示。

4、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第三個方面，提供了一種抗體或其功能性片段，包括重鏈和/或輕鏈，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no:23、24任一所示；所述輕鏈的氨基酸序列如seq?id?no:25、26、27、28任一所示。

5、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第四個方面，提供了一種抗體偶聯(lián)物，所述抗體偶聯(lián)物包括上述的抗體或其功能性片段。

6、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第五個方面，提供了一種試劑或試劑盒，所述試劑或試劑盒包括上述的抗體或其功能性片段或上述的抗體偶聯(lián)物。

7、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第六個方面，提供了一種檢測穆勒氏管激素的方法，包括：a)在足以發(fā)生抗體/抗原結(jié)合反應的條件下，使上述的抗體或其功能性片段、抗體偶聯(lián)物，或者試劑或試劑盒與待檢測樣品中的穆勒氏管激素接觸形成免疫復合物；和b)檢測所述免疫復合物的存在，所述復合物的存在指示所述測試樣品中所述抗原的存在。

8、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第七個方面，提供了一種核酸，所述核酸編碼上述的抗體或其功能性片段。

9、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第八個方面，提供了一種載體，所述載體包括上述的核酸。

10、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第九個方面，提供了細胞，所述細胞包括上述的核酸、載體或表達上述的抗體或其功能性片段。

11、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第十個方面，提供了一種制備上述抗體或其功能性片段的方法，所述方法包括培養(yǎng)上述的細胞。

12、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第十一個方面，提供了一種上述的抗體或其功能性片段、抗體偶聯(lián)物、試劑或試劑盒在檢測或制備檢測穆勒氏管激素產(chǎn)品中的用途。

技術(shù)特征：

1.一種抗體或其功能性片段，所述抗體或其功能性片段包括hcdr1、hcdr2、hcdr3和lcdr1、lcdr2、lcdr3，其特征在于，所述hcdr1、hcdr2、hcdr3為與seq?id

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其功能性片段，其特征在于，所述可變區(qū)的hcdr1，hcdr2，hcdr3，lcdr1，lcdr2或lcdr3由kabat、chothia、imgt、abm或contact任意一種系統(tǒng)或多種系統(tǒng)組合定義；

3.一種抗體或其功能性片段，包含重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)，其特征在于，所述重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:17、18任一所示；所述輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?idno:19、20、21、22任一所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的抗體或其功能性片段，所述重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)的組合選自如下任意一組合：

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一所述的抗體或其功能性片段，其特征在于，所述抗體或其功能性片段還包含恒定區(qū)；

6.一種抗體或其功能性片段，包括重鏈和/或輕鏈，其特征在于，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no:23、24任一所示；所述輕鏈的氨基酸序列如seq?id?no:25、26、27、28任一所示。

7.一種抗體偶聯(lián)物，其特征在于，所述抗體偶聯(lián)物包括權(quán)利要求1至6任一項所述的抗體或其功能性片段；

8.一種試劑或試劑盒，其特征在于，所述試劑或試劑盒包括權(quán)利要求1至6任一項所述的抗體或其功能性片段或權(quán)利要求7所述的抗體偶聯(lián)物。

9.一種檢測穆勒氏管激素的方法，其特征在于，包括：

10.一種核酸，其特征在于，其編碼權(quán)利要求1至6任一項所述的抗體或其功能性片段。

11.一種載體，其特征在于，其含有權(quán)利要求10所述的核酸。

12.一種細胞，其特征在于，其含有權(quán)利要求10所述的核酸或權(quán)利要求11所述的載體。

13.一種制備權(quán)利要求1-6任一項所述的抗體或其功能性片段的方法，其特征在于，其包括：培養(yǎng)權(quán)利要求12所述的細胞。

14.權(quán)利要求1-6任一項所述的抗體或其功能性片段、權(quán)利要求7所述的抗體偶聯(lián)物，或者權(quán)利要求8所述的試劑或試劑盒在檢測或制備檢測穆勒氏管激素產(chǎn)品中的用途。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了抗穆勒氏管激素的抗體或檢測穆勒氏管激素的試劑和試劑盒，涉及抗體領(lǐng)域。本發(fā)明公開的抗穆勒氏管激素抗體包括重鏈互補決定區(qū)和輕鏈互補決定區(qū)，該抗體為穆勒氏管激素的檢測提供了重要的原料來源，且具有良好的親和力和活性。

技術(shù)研發(fā)人員：鐘冬梅,孟媛,梁碧,唐麗娜
受保護的技術(shù)使用者：東莞市朋志生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/2