本發(fā)明涉及抗體，具體而言，涉及一種抗25羥維生素d抗體、檢測25羥維生素d的試劑和試劑盒。

背景技術(shù)：

1、25羥維生素d是維生素d在體內(nèi)的主要存在形式。維生素d為類固醇衍生物，屬脂溶性維生素，為環(huán)戊烷多氫菲類化合物。維生素d主要由人體皮膚經(jīng)紫外線照射后合成，少部分從食物或補充品中攝入。維生素d不僅僅影響鈣磷代謝，而且具有廣泛的生理作用，是維持人體健康、細胞生長和發(fā)育的必不可少的物質(zhì)，與多種疾病密切相關(guān)。維生素d在肝臟中通過羥基化作用轉(zhuǎn)化成25-羥基維生素d(25-oh-vd)，血清中25-oh-vd的高低可以反映人體維生素d的儲存水平，并且與維生素d缺乏的臨床癥狀是相關(guān)的，如果指標過高可能是維生素d中毒，指標過低可能是維生素d缺乏。

2、25羥維生素d可用于確定維生素d濃度，25羥維生素d的濃度被認為是維生素d的最佳指標，可以判斷體內(nèi)的維生素d含量是否異常。如果檢查發(fā)現(xiàn)25羥維生素d含量過低，常見于鈣、磷吸收障礙，可能表現(xiàn)為骨骼、牙齒無法正常發(fā)育，出現(xiàn)骨質(zhì)疏松、出牙延遲等癥狀，嚴重時可能還會導(dǎo)致佝僂病、軟骨病等，表現(xiàn)為骨質(zhì)疏松、肌肉酸痛，會增加腿抽筋、跌倒及骨折的風(fēng)險。如果25羥維生素d偏高，可能會造成維生素d中毒，引起高鈣血癥，表現(xiàn)為食欲不振、嘔吐、腹瀉等癥狀。

3、目前，常用的25羥基維生素d的檢測方法有化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫法、電化學(xué)發(fā)光法、免疫層析法等，以上檢測方法都需要相關(guān)抗體才能實現(xiàn)，因此，本領(lǐng)域?qū)τ谟辛己玫幕钚院陀H和力的相關(guān)抗體存在強烈需求。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本申請?zhí)峁┮环N抗體或其功能性片段，為25羥維生素d的檢測提供重要的原料來源，且有良好的活性和親和力。

2、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種抗體或其功能性片段，所述抗體或其功能性片段包含具有氨基酸序列seq?id?no:17重鏈可變區(qū)的三個互補決定區(qū)和具有氨基酸序列seq?id?no:18輕鏈可變區(qū)的三個互補決定區(qū)。

3、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第二個方面，提供了一種抗體或其功能性片段，所述抗體或其功能性片段包括如下互補決定區(qū)：

4、hcdr1，其包含seq?id?no:1所示的氨基酸序列，或由其組成；

5、hcdr2，其包含seq?id?no:2所示的氨基酸序列，或由其組成；

6、hcdr3，其包含seq?id?no:3所示的氨基酸序列，或由其組成；

7、lcdr1，其包含seq?id?no:4所示的氨基酸序列，或由其組成；

8、lcdr2，其包含seq?id?no:5所示的氨基酸序列，或由其組成；

9、lcdr3，其包含seq?id?no:6所示的氨基酸序列，或由其組成。

10、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第三個方面，提供了一種抗體或其功能性片段，包括重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:17所示；所述輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:18所示。

11、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第四個方面，提供了一種抗體或其功能性片段，包括重鏈和/或輕鏈，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no:19所示；所述輕鏈的氨基酸序列如seq?id?no:20所示。

12、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第五個方面，提供了一種抗體偶聯(lián)物，所述抗體偶聯(lián)物包括上述的抗體或其功能性片段。

13、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第六個方面，提供了一種試劑或試劑盒，所述試劑或試劑盒包括上述的抗體或其功能性片段或上述的抗體偶聯(lián)物。

14、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第七個方面，提供了一種檢測25羥維生素d的方法，包括：a)在足以發(fā)生抗體/抗原結(jié)合反應(yīng)的條件下，使上述的抗體或其功能性片段、抗體偶聯(lián)物，或者試劑或試劑盒與待檢測樣品中的25羥維生素d接觸形成免疫復(fù)合物；和b)檢測所述免疫復(fù)合物的存在，所述復(fù)合物的存在指示所述測試樣品中所述抗原的存在。

15、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第八個方面，提供了一種核酸，所述核酸編碼上述的抗體或其功能性片段。

16、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第九個方面，提供了一種載體，所述載體包括上述的核酸。

17、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第十個方面，提供了細胞，所述細胞包括上述的核酸、載體或表達上述的抗體或其功能性片段。

18、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第十一個方面，提供了一種制備上述抗體或其功能性片段的方法，所述方法包括培養(yǎng)上述的細胞。

19、為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第十二個方面，提供了一種上述的抗體或其功能性片段、抗體偶聯(lián)物、試劑或試劑盒在檢測或制備檢測25羥維生素d產(chǎn)品中的用途。

技術(shù)特征：

1.一種抗體或其功能性片段，所述抗體或其功能性片段包含具有氨基酸序列seq?idno:17重鏈可變區(qū)的三個互補決定區(qū)和具有氨基酸序列seq?id?no:18輕鏈可變區(qū)的三個互補決定區(qū)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其功能性片段，其特征在于，所述可變區(qū)的hcdr1，hcdr2，hcdr3，lcdr1，lcdr2或lcdr3由kabat、chothia、imgt、abm或contact任意一種系統(tǒng)或多種系統(tǒng)組合定義。

3.一種抗體或其功能性片段，其特征在于，所述抗體或其功能性片段包括如下互補決定區(qū)：

4.一種抗體或其功能性片段，包含重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)，其特征在于，所述重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:17所示；所述輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:18所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一所述的抗體或其功能性片段，其特征在于，所述抗體或其功能性片段還包含恒定區(qū)；

6.一種抗體或其功能性片段，包括重鏈和/或輕鏈，其特征在于，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no:19所示；所述輕鏈的氨基酸序列如seq?id?no:20所示。

7.一種抗體偶聯(lián)物，其特征在于，所述抗體偶聯(lián)物包括權(quán)利要求1至6任一項所述的抗體或其功能性片段；

8.一種試劑或試劑盒，其特征在于，所述試劑或試劑盒包括權(quán)利要求1至6任一項所述的抗體或其功能性片段或權(quán)利要求7所述的抗體偶聯(lián)物。

9.一種檢測25羥維生素d的方法，其特征在于，包括：

10.一種核酸，其特征在于，其編碼權(quán)利要求1至6任一項所述的抗體或其功能性片段。

11.一種載體，其特征在于，其含有權(quán)利要求10所述的核酸。

12.一種細胞，其特征在于，其含有權(quán)利要求10所述的核酸或權(quán)利要求11所述的載體。

13.一種制備權(quán)利要求1-6任一項所述的抗體或其功能性片段的方法，其特征在于，其包括：培養(yǎng)權(quán)利要求12所述的細胞。

14.權(quán)利要求1-6任一項所述的抗體或其功能性片段、權(quán)利要求7所述的抗體偶聯(lián)物，或者權(quán)利要求8所述的試劑或試劑盒在檢測或制備檢測25羥維生素d產(chǎn)品中的用途。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了抗25羥維生素D的抗體或檢測25羥維生素D的試劑和試劑盒，涉及抗體領(lǐng)域。本發(fā)明公開的抗25羥維生素D抗體包括重鏈互補決定區(qū)和輕鏈互補決定區(qū)，該抗體為25羥維生素D的檢測提供了重要的原料來源，且具有良好的親和力和活性。

技術(shù)研發(fā)人員：鐘冬梅,孟媛,梁碧,唐麗娜
受保護的技術(shù)使用者：東莞市朋志生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10