本發(fā)明涉及一種新型脂肪酶。

背景技術(shù)：

1、脂肪酶在洗滌用洗滌劑、餐具用洗滌劑、油脂加工、紙漿處理、飼料、醫(yī)藥中間體合成等各種用途中有用。在清潔中，脂肪酶通過將甘油三酯水解，并生成脂肪酸，從而有助于包含油的污垢的除去。

2、現(xiàn)有的清潔組合物或清潔環(huán)境含有抑制脂肪酶的活性或清潔效果的各種成分，要求在那樣的條件下發(fā)揮功能的脂肪酶。作為對清潔有用的脂肪酶，來自疏綿狀嗜熱絲孢菌(thermomyces?lanuginosus)的脂肪酶(以下稱為tll)以lipolase(注冊商標)的商品名銷售。專利文獻1中公開了來自cedecea?sp-16640株的脂肪酶lipr139具有比tll優(yōu)異的清潔性能。專利文獻2中公開了在與1個或多個參照脂肪分解酶比較的情況下具有改善的清潔性能的來自變形桿菌(proteus)屬細菌的脂肪酶(以下稱為pvlip)的突變體。專利文獻3中公開了來自宏基因組的脂肪酶lipr138具有比tll優(yōu)異的清潔性能。lipr139、pvlip和lipr138是屬于包括來自變形桿菌(proteus)屬細菌或耶爾森氏菌(yersinia)屬細菌的脂肪酶在內(nèi)的同一的進化枝(變形桿菌/耶爾森氏菌進化枝)的脂肪酶。

3、許多來自革蘭氏陰性菌的脂肪酶需要脂肪酶特異性伴侶才能折疊成活性型(非專利文獻1)，在通過異源表達的低成本制造上存在問題。報道了通過特異性伴侶的共表達來改善異源表達(非專利文獻2)，但其生產(chǎn)率低，在通過異源表達的低成本制造上依然存在較大的問題。另一方面，變形桿菌/耶爾森氏菌進化枝的細菌脂肪酶不需要特異性伴侶，在通過異源表達的低成本制造上具有優(yōu)勢(非專利文獻3、4)。

4、如上所述，變形桿菌/耶爾森氏菌進化枝的細菌脂肪酶在對清潔的適應性和低成本制造可能性這兩者上，作為清潔用酶具有巨大的潛力。

5、(專利文獻1)日本特表2015-523078號公報

6、(專利文獻2)國際公開第2020/046613號

7、(專利文獻3)日本特表2015-525248號公報

8、(非專利文獻1)hobson,audrey?h.,et?al.proceedings?of?the?nationalacademy?of?sciences?90.12(1993):5682-5686.

9、(非專利文獻2)quyen,thidinh,chihai?vu,and?giangthi?thu?le.microbialcell?factories?11.1(2012):1-12.

10、(非專利文獻3)lee,hong-weon,et?al.biotechnology?letters?22.19(2000):1543-1547.

11、(非專利文獻4)glogauer,arnaldo,et?al.microbial?cell?factories10.1(2011):1-15.

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明涉及下述1)～6)。

2、1)下述任意一種脂肪酶：

3、由序列編號14所示的氨基酸序列或與其具有至少79％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

4、由序列編號16所示的氨基酸序列或與其具有至少76％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

5、由序列編號18所示的氨基酸序列或與其具有至少81％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

6、由序列編號20所示的氨基酸序列或與其具有至少83％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

7、由序列編號22所示的氨基酸序列或與其具有至少96％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

8、由序列編號24所示的氨基酸序列或與其具有至少83％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

9、由序列編號26所示的氨基酸序列或與其具有至少90％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

10、由序列編號28所示的氨基酸序列或與其具有至少82％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

11、由序列編號30所示的氨基酸序列或與其具有至少73％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

12、由序列編號32所示的氨基酸序列或與其具有至少73％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

13、由序列編號34所示的氨基酸序列或與其具有至少79％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

14、由序列編號36所示的氨基酸序列或與其具有至少85％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

15、由序列編號38所示的氨基酸序列或與其具有至少73％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

16、由序列編號40所示的氨基酸序列或與其具有至少71％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；

17、由序列編號42所示的氨基酸序列或與其具有至少72％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶；和

18、由序列編號44所示的氨基酸序列或與其具有至少70％的同一性的氨基酸序列構(gòu)成的脂肪酶。

19、2)一種多核苷酸，其編碼1)所述的脂肪酶。

20、3)一種載體或dna片段，其包含2)的多核苷酸。

21、4)一種轉(zhuǎn)化細胞，其含有3)的載體或dna片段。

22、5)一種清潔劑組合物，其含有1)所述的脂肪酶。

23、6)一種污垢的清潔方法，其中，使用5)所述的清潔劑組合物。

技術(shù)特征：

1.一種脂肪酶，其中，

2.一種多核苷酸，其中，

3.一種載體或dna片段，其中，

4.一種轉(zhuǎn)化細胞，其中，

5.如權(quán)利要求4所述的轉(zhuǎn)化細胞，其中，

6.一種清潔劑組合物，其中，

7.如權(quán)利要求6所述的清潔劑組合物，其中，

8.如權(quán)利要求7所述的清潔劑組合物，其中，

9.如權(quán)利要求7或8所述的清潔劑組合物，其中，

10.如權(quán)利要求9所述的清潔劑組合物，其中，

11.一種污垢的清潔方法，其中，

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種緩和表面活性劑造成的活性抑制，顯示高的清潔效果的脂肪酶。該脂肪酶由序列編號14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42或44所示的氨基酸序列或與這些序列的任意一個具有至少相當程度的同一性的氨基酸序列構(gòu)成。

技術(shù)研發(fā)人員：日置貴大,寺井三佳,川原彰人
受保護的技術(shù)使用者：花王株式會社
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10