本發(fā)明屬于基因工程，具體涉及一種編碼ko蛋白的基因及其在早期預判芒果未知種矮生性狀中的應(yīng)用

背景技術(shù)：

1、矮化栽培是多年生木本果樹大規(guī)模集約化生產(chǎn)不變的發(fā)展趨勢。植物矮化主要分為遺傳性矮化和生理性矮化。單一基因突變屬于遺傳性矮化，其矮化機理多為基因合成蛋白，蛋白影響激素，激素影響表型；受環(huán)境因素影響，導致植株表型發(fā)生變化，屬于生理性矮化，其矮化作用機理多為環(huán)境變化影響植物激素分泌，最終導致變化。但不論哪種矮化模式，都要通過激素來影響表型，植株生長過程中的激素多與赤霉素(gibberellins，gas)有關(guān)。

2、內(nèi)根-貝殼杉烯氧化酶(ent-kaurene?oxidase，ko)是一類單加氧化酶，其位于赤霉素合成途徑的上游，其將內(nèi)根-貝殼杉烯(ent-kaurene)氧化為內(nèi)根-貝殼杉烯酸(ent-kaurenic?acid)，調(diào)控著赤霉素的合成量。ko存在于植物的各個組織中，在植物體生長旺盛期的的花序、莖、葉及胚中表達量較高，而在年老的葉片和莖中的表達量較低。目前，ko基因已在豌豆、玉米、黃瓜、梨、蘋果、山核桃、石榴等多種植物中被分離和克隆。研究表明，ko基因位點發(fā)生阻斷會導致ko的功能喪失，從而阻斷赤霉素的合成過程，使植株節(jié)間變短，株高變矮。例如，豌豆psko1矮化突變體因ko基因的突變使植物體內(nèi)ga含量缺乏，導致豌豆節(jié)間和根的長度縮短，根系變?nèi)?，植株矮??；擬南芥ga3-1矮化突變體植株由于ko等位基因的一個堿基位點的突變，導致ko的活性減弱，進而抑制了植物的生長發(fā)育；水稻ga缺陷型半矮化突變體d35由于osko2在外顯子的一個核苷酸位點變異，導致osko2的功能喪失，使植株表現(xiàn)出半矮化的表型；通過ems誘變得到一個水稻矮化突變體，研究發(fā)現(xiàn)由于osko1基因上的兩個連續(xù)突變位點，導致細胞色素p450結(jié)構(gòu)域中的蘇氨酸(thr)轉(zhuǎn)化為蛋氨酸(met)，阻斷了ga的生物合成，植物體表現(xiàn)出發(fā)芽延遲、半矮化的表型。同時，ko基因表達水平的變化也會影響植物體的形態(tài)建成，如蘋果m26矮化砧木由于ko的合成較少，從而削弱了植物體內(nèi)赤霉素的合成，導致蘋果砧木的矮化；山核桃中由于ccko的過量表達，改變了ga合成途徑下游ga20ox和ga2ox基因的表達量，三個基因的表達水平協(xié)同調(diào)控作用，促進了植株株高的伸長。

3、通過對比具有喬生特性和矮生特性植物材料ko基因的表達量，可以預判植物其是否具有矮生特性，既省時又省力。目前還未見利用ko基因預判芒果品種是否具有矮生特性的相關(guān)報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了一種編碼ko蛋白的基因及其在早期預判芒果未知種矮生性狀中的應(yīng)用，其可以預判芒果品種是否具有矮生特性，既省時又省力。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明的第一個目的在于提供一種編碼ko蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

4、更為具體的，所述基因的開放閱讀框為1554bp。

5、本發(fā)明的第二個目的在于提供所述的編碼ko蛋白的基因的應(yīng)用，所述編碼ko蛋白的基因在早期預判芒果未知種矮生性狀中的應(yīng)用。

6、本發(fā)明的第三個目的在于提供一種ko蛋白，所述ko蛋白是由所述的基因編碼。

7、更為具體的，所述ko蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

8、更為具體的，所述ko蛋白由517個氨基酸組成，分子重量為58.65kd，理論等電點為8.56。

9、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

10、(1)本發(fā)明從供試材料中獲取ko蛋白基因序列，分析該基因理化活性，把該基因作為調(diào)控矮生性狀的指標。

11、(2)本發(fā)明涉及到ko蛋白基因克隆、與之相對應(yīng)的氨基酸序列分析，通過熒光定量方法測定ko蛋白基因表達量，可以為早期預判供試材料是否具有矮生性狀提供支持。

技術(shù)特征：

1.一種編碼ko蛋白的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的編碼ko蛋白的基因的應(yīng)用，其特征在于，所述基因的開放閱讀框為1554bp。

3.一種權(quán)利要求1所述的編碼ko蛋白的基因的應(yīng)用，其特征在于，所述編碼ko蛋白的基因在早期預判芒果未知種矮生性狀中的應(yīng)用。

4.一種ko蛋白，其特征在于，所述ko蛋白是由權(quán)利要求1所述的基因編碼。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的ko蛋白，其特征在于，所述ko蛋白的氨基酸序列如seq?idno.2所示。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的ko蛋白，其特征在于，所述ko蛋白由517個氨基酸組成，分子重量為58.65kd，理論等電點為8.56。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種編碼KO蛋白的基因及其在早期預判芒果未知種矮生性狀中的應(yīng)用。一種編碼KO蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ?ID?No.1所示。本發(fā)明編碼KO蛋白的基因可以為早期預判供試材料是否具有矮生特性提供支持。

技術(shù)研發(fā)人員：張宇,李穆,譚奕為,莫永龍,張繼,黃國弟,盧業(yè)飛,唐瑩瑩,唐玉娟,趙英,郭麗梅,王美又,郝小玲,楊世安,潘正良
受保護的技術(shù)使用者：廣西壯族自治區(qū)亞熱帶作物研究所（廣西亞熱帶農(nóng)產(chǎn)品加工研究所）
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/17