本發(fā)明屬于花卉病害研究,具體涉及一種培養(yǎng)霜霉病菌的方法和應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、云南是切花月季的主產(chǎn)區(qū),在切花月季設(shè)施栽培條件下,霜霉病的發(fā)生有很大的偶然性,只要濕度條件一達到,發(fā)病和擴散的速度極快,一兩天內(nèi),整個大棚的切花月季就會全部感病,當茬花的損失率可達70~100%。雨季棚內(nèi)濕氣無法排出,發(fā)病率尤其高。而霜霉病為活體營養(yǎng)型真菌病害,不能通過培養(yǎng)基等方式進行培養(yǎng)。要有穩(wěn)定的病原菌來進行科學研究,極為不易,所以霜霉病的研究較其他病害,相對滯后。要解決以上問題,需要創(chuàng)制一種合適而簡約的方法培養(yǎng)病原菌,從而開展霜霉病的后續(xù)研究,為云南切花月季的設(shè)施栽培提供保障,減少霜霉病帶來的經(jīng)濟損失。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供一種培養(yǎng)霜霉病菌的方法和應(yīng)用,針對活體營養(yǎng)真菌不易培養(yǎng)的問題,能解決病害條件不可控的情況,能高效地對月季進行霜霉病菌侵染,從而獲得感病植物和病原菌。
2、本發(fā)明提供了一種培養(yǎng)霜霉病菌的方法,包括以下步驟:在空氣濕度大于80%的密閉空間內(nèi),向健康月季上接種霜霉病菌。
3、優(yōu)選的,所述密閉空間包括設(shè)施大棚,且在所述設(shè)施大棚內(nèi)外接噴灌裝置;
4、在所述設(shè)施大棚的底部不與地面直接接觸,鋪設(shè)促進所述設(shè)施大棚內(nèi)形成蒸汽壓的材料。
5、優(yōu)選的,在所述設(shè)施大棚內(nèi)地面上墊石材,或?qū)⑺鲈O(shè)施大棚直接放于水泥地面,避免接觸泥土。
6、優(yōu)選的,所述接種的方法包括自然接種法,所述自然接種法包括在所述密閉空間中,同時種植染霜霉病菌的月季植株和健康月季植株,且所述健康月季植株呈輻射狀均勻分布在染霜霉病菌的月季植株的四周。
7、優(yōu)選的,相鄰兩棵健康月季植株的冠幅自然接觸。
8、優(yōu)選的,所述接種的方法包括孢子接種法,所述孢子接種法包括利用霜霉病菌的孢子液噴施健康月季植株。
9、優(yōu)選的,所述霜霉病菌的孢子液的制備方法,包括將采集的帶有霜霉孢子的月季葉片,剪下染病部位后與水混合,混合液過40目細胞篩后,收集濾液,得所述孢子液。
10、優(yōu)選的,所述孢子液的工作液濃度為1×105個分生孢子/ml。
11、優(yōu)選的,所述培養(yǎng)時采用自然光照,還包括在每日下午4點以后噴水,直到葉片和地面上結(jié)有厚重的水珠。
12、本發(fā)明還提供了上述方法的應(yīng)用,包括以下至少一種:
13、(1)鑒別月季對霜霉病菌抗性;
14、(2)篩選抗霜霉病菌的藥物;
15、(3)研制抗霜霉病菌的藥物。
16、有益效果:本發(fā)明提供了一種培養(yǎng)霜霉病菌的方法,在封閉小環(huán)境內(nèi)培養(yǎng)霜霉病菌,既能保持足夠的濕度,可以對不同品種的月季盆苗進行霜霉病害鑒定,也為月季霜霉病的基礎(chǔ)研究工作提供材料保障。相比于離體培養(yǎng)法,管理更加簡單,可實現(xiàn)粗放管理,大量產(chǎn)孢;從材料方面,塑料小棚價格低廉,使用的塑料薄膜來源廣泛、價格便宜,甚至可以使用淘汰的塑料大棚塑料膜。該方法適合云南地區(qū)的月季霜霉病培養(yǎng)。
17、利用本發(fā)明所述方法,對比常用的葉盤法和水瓊脂培養(yǎng)法,采用棚內(nèi)小環(huán)境培養(yǎng)法能夠更穩(wěn)定的獲得月季霜霉病菌,不僅方便易得,也能實現(xiàn)長期儲存。是培養(yǎng)霜霉病菌的最優(yōu)培養(yǎng)方法。在采用棚內(nèi)小環(huán)境培養(yǎng)法對月季霜霉病菌進行培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn),月季霜霉病菌侵染月季葉片后,月季葉片會表現(xiàn)出多樣的病癥:葉片褪綠,出現(xiàn)大塊黃色;葉表面出現(xiàn)紫黑色小斑點分布在葉片上,斑點大小不均勻,形狀從點到塊狀;葉面不均勻褪綠,導致葉表面顏色分布不均,有點或塊狀深綠色呈現(xiàn)在葉表面;葉片有時會出現(xiàn)輕微反卷,還會在葉片上出現(xiàn)大面積黑色斑塊,有似被火灼燒的痕跡。其次葉背面產(chǎn)孢與濕度具有很大的關(guān)系,當濕度達到80%以上,很容易在葉背面觀察到產(chǎn)孢的情況,且大部分出現(xiàn)在新葉上。除了容易受到侵染的葉片,花梗等新嫩部位也容易受到侵染。
1.一種培養(yǎng)霜霉病菌的方法,其特征在于,包括以下步驟:在空氣濕度大于80%的密閉空間內(nèi),向健康月季上接種霜霉病菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,所述密閉空間包括設(shè)施大棚,且在所述設(shè)施大棚內(nèi)外接噴灌裝置;
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法,其特征在于,在所述設(shè)施大棚內(nèi)地面上墊石材,或?qū)⑺鲈O(shè)施大棚直接放于水泥地面,避免接觸泥土。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,所述接種的方法包括自然接種法,所述自然接種法包括在所述密閉空間中,同時種植染霜霉病菌的月季植株和健康月季植株,且所述健康月季植株呈輻射狀均勻分布在染霜霉病菌的月季植株的四周。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法,其特征在于,相鄰兩棵健康月季植株的冠幅自然接觸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,所述接種的方法包括孢子接種法,所述孢子接種法包括利用霜霉病菌的孢子液噴施健康月季植株。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述方法,其特征在于,所述霜霉病菌的孢子液的制備方法,包括將采集的帶有霜霉孢子的月季葉片,剪下染病部位后與水混合,混合液過40目細胞篩后,收集濾液,得所述孢子液。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述方法,其特征在于,所述孢子液的工作液濃度為1×105個分生孢子/ml。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法,其特征在于,所述培養(yǎng)時采用自然光照,還包括在每日下午4點以后噴水,直到葉片和地面上結(jié)有厚重的水珠。
10.權(quán)利要求1~9任一項所述方法的應(yīng)用,包括以下至少一種: