本發(fā)明涉及一種金櫻子多糖產(chǎn)品及其制備方法,屬于保健品領(lǐng)域。
背景技術(shù):
1、糖尿病(dm)是一種全身性慢性代謝性疾病,嚴(yán)重威脅全球人類健康。2021年全球約有5.37億糖尿病患者,預(yù)計到2030年這一數(shù)字將增加至約6.43億。根據(jù)不同的病因,糖尿病可分為1型糖尿病、2型糖尿病、妊娠期糖尿病和其他特定類型。其中,二型糖尿病占90%以上,以餐后高血糖、胰島素分泌不足、胰島素抵抗為特征。高血糖會增加氧化應(yīng)激和活性氧的產(chǎn)生,激活氧化還原敏感信號通路并阻斷胰島素信號通路,導(dǎo)致胰島素抵抗和血糖水平的升高。由于高血糖和氧化應(yīng)激之間存在因果關(guān)系,改善氧化應(yīng)激和降低胰島素抵抗被用于糖尿病的臨床治療。研究表明,來自自然界植物中的多糖具有良好的降糖活性,可能與其清除自由基或提高抗氧化酶的活性,從而抑制脂質(zhì)過氧化,減輕體內(nèi)自由基對細(xì)胞的損傷有關(guān)。因此,低毒、副作用少,且具有較強抗氧化作用的天然多糖是潛在的降糖藥物。
2、多糖作為生物體的主要組成部分,廣泛存在于動物,植物,微生物和藻類中,是自然界含量最多的高分子聚合物。近年來,人們發(fā)現(xiàn)從植物中分離的多糖具有多種不同的藥理活性,如抗腫瘤、抗凝血、抗氧化、降血糖、抗病毒和免疫調(diào)節(jié)活性,但對細(xì)胞組織毒性甚微,因此,它們適合于藥物的開發(fā)和應(yīng)用。目前國內(nèi)外已批準(zhǔn)臨床應(yīng)用的多糖有冬蟲夏草多糖、靈芝多糖、、酵母多糖、枸杞多糖、菌類多糖、雪蓮多糖、紫菜多糖、石斛多糖、蘆薈多糖、人參多糖、枸杞多糖、蓮藕多糖、紅棗多糖等。查閱文獻發(fā)現(xiàn),目前多糖的研究主要集中在結(jié)構(gòu)表征和生物活性方面,隨著對多糖構(gòu)-效關(guān)系的逐步深入探究,旨在發(fā)現(xiàn)具有良好生物學(xué)活性的新型多糖,并將其應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè),更好地滿足人民群眾的健康需求。
3、金櫻子屬于薔薇科,廣泛分布于中國東南部和西南部,是一種典型的傳統(tǒng)藥食兩用植物,其干燥成熟的果實常被用來治療尿頻、尿失禁、月經(jīng)不調(diào)、子宮脫垂、白帶和澀味等。金櫻子中的化學(xué)成分決定了其生物活性,目前已從金櫻子中分離和鑒定了100多種次生代謝物,包括三萜類化合物、多糖、黃酮類化合物、有機酸和單寧。其中多糖為金櫻子的主要活性成分,中國藥典(2020年版)規(guī)定金櫻子藥材中多糖含量不得少于25.0%。發(fā)明人對金櫻子中所含多糖進行了系統(tǒng)研究,從中得到一種結(jié)構(gòu)明確的多糖,并對本發(fā)明所涉及的多糖進行了自由基清除實驗和胰島素抵抗細(xì)胞實驗。結(jié)果表明,該多糖通過清除自由基,從而抑制脂質(zhì)過氧化,可以達(dá)到降血糖作用。在高劑量時仍無明顯副作用,可用于研發(fā)安全性高、副作用小的降血糖藥物。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的第一個目的是提供一種金櫻子多糖。本發(fā)明通過從金櫻子的干燥果實中提取分離得到一種酸性多糖rlmp-1,藥理實驗表明制得的金櫻子多糖rlmp-1依賴性的抑制dpph自由基和α-糖苷酶活性,可以增強超氧化物歧化酶sod活性,降低丙二醛mda水平,同時降低葡萄糖消耗,具有潛在的降血糖作用,能開發(fā)成為一種治療糖尿病和預(yù)防衰老的候選藥物。
2、本發(fā)明的第二個目的是提供上述多糖的制備方法。
3、本發(fā)明的第三個目的是提供上述多糖的應(yīng)用。
4、根據(jù)第一個目的,本發(fā)明提供了一種金櫻子多糖rlmp-1,其具有以下結(jié)構(gòu):
5、
6、本發(fā)明中,優(yōu)選的,上述多糖的重均分子量范圍為:8.0~112.3kda。
7、本發(fā)明中,優(yōu)選的,上述多糖的單糖組成包括阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖和半乳糖醛酸,其中各單糖摩爾比為:
8、根據(jù)第二個目的,本發(fā)明提供了一種從金櫻子中提取多糖rlmp-1的方法,包括以下步驟:
9、(1)多糖提取,將金櫻子藥材用乙醇水溶液浸泡或回流脫脂(優(yōu)選乙醇體積分?jǐn)?shù)≥95%),回收乙醇,晾干;采用煎煮法或超聲波法進行多次提取,至提取液經(jīng)苯酚-硫酸法檢測無明顯反應(yīng);提取液經(jīng)濃縮、醇沉、離心,干燥,除蛋白,干燥后得到金櫻子粗多糖粉末;
10、優(yōu)選地,步驟(1)中乙醇水溶液為無水乙醇與蒸餾水按90:10~100:0(體積比)配制;
11、優(yōu)選地,步驟(1)中煎煮法的加水量(ml)與藥材質(zhì)量(g)的比例為10:1~50:1;
12、優(yōu)選地,步驟(1)中煎煮時間為1~4?h,煎煮次數(shù)為1~5次;
13、優(yōu)選地,步驟(1)中超聲頻率為16~100khz,超聲提取溫度為30℃~80℃,超聲時間為10~180min,提取次數(shù)為1~5次;
14、優(yōu)選地,步驟(1)中干燥方法采用真空干燥(真空度-0.1bar~1.0?bar,溫度為30~80℃)或鼓風(fēng)干燥(溫度為30~100℃);
15、優(yōu)選地,步驟(1)中所述金櫻子粗多糖粉末中總多糖的含量不低于25%;
16、(2)多糖純化,取金櫻子粗多糖,加蒸餾水溶解,過濾,濾液置于deae-52陰離子交換樹脂床,依次用水、0.1mol/l氯化鈉、0.2mol/l氯化鈉、0.3mol/l氯化鈉洗脫,收集0.1mol/l氯化鈉洗脫液,濃縮、干燥,得到初步純化的金櫻子多糖rlmp-1,將所得的對金櫻子多糖rlmp-1用蒸餾水溶解,經(jīng)sephdex-g50凝膠洗脫分離,收集0.2?mol/l氯化鈉洗脫液,濃縮,干燥,即得金櫻子多糖rlmp-1;
17、優(yōu)選地,步驟(2)中deae-52樹脂洗脫流速為0.5~3.0?ml/min,sephdex-g50凝膠洗脫流速為0.5~2.0?ml/min;
18、優(yōu)選地,步驟(2)中干燥方法可采用冷凍干燥、真空干燥(真空度-0.1bar~1.0bar,溫度為30~80℃)或鼓風(fēng)干燥(溫度為30~100℃);
19、根據(jù)第三個目的,本發(fā)明提供多糖rlmp-1的具體用途,包括:多糖rlmp-1在制備預(yù)防衰老的藥物或保健品種的用途;多糖rlmp-1在制備用于降低mda水平和提高sod活性的藥物或保健品中的用途;以及多糖在在制備預(yù)防和/或治療糖尿病的藥物或保健品中的用途。
1.一種金櫻子多糖,其具有以下結(jié)構(gòu):
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多糖,其中,所述多糖的重均分子量范圍為:8.0~112.3kda。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的多糖,其中所述多糖的單糖組成包括鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其中各單糖摩爾比為:1.0:20.7:4.3:7.4:65.3:10.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多糖,其提取方法包括以下步驟:
5.(2)多糖純化:取金櫻子粗多糖粉末,加蒸餾水溶解,過濾,濾液置于deae-52陰離子交換樹脂床,依次用蒸餾水、0.1mol/l氯化鈉、0.2mol/l氯化鈉、0.3mol/l氯化鈉洗脫,收集0.1?mol/l氯化鈉洗脫液,濃縮、透析、干燥,得到初步純化的金櫻子多糖,將初步純化的金櫻子多糖用蒸餾水溶解,經(jīng)sephdex-g50凝膠洗脫分離,收集0.2?mol/l氯化鈉洗脫液,濃縮,干燥,即得金櫻子多糖rlmp-1。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其中:
7.權(quán)利要求1-3中任一項所述的多糖rlmp-1在制備預(yù)防和/或治療糖尿病藥物或保健品中的用途。