本發(fā)明涉及真菌內(nèi)生細菌，尤其涉及一種真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、內(nèi)生菌是一定階段或全部階段生活于植物的組織和器官內(nèi)部的真菌或細菌，普遍存在于高等植物中，木本、草本植物，單子葉植物和雙子葉植物內(nèi)均有內(nèi)生細菌，已成為生物防治中有潛力的微生物農(nóng)藥、增產(chǎn)菌或作為潛在的生防載體菌而加以利用。

2、生物肥料發(fā)展過程中遇到的主要問題之一是缺少高效菌種資源挖掘，生物肥料企業(yè)亟待更新高效菌種。而菌株的來源一般為根際土壤，動植物內(nèi)生菌等；玉米黑粉菌雖然作為一種致病菌引起玉米瘤黑粉病在玉米的各個部位侵染形成瘤狀物，但是它也可以作為一種美食，對人無害，對固氮菌菌株資源的挖掘與開發(fā)具有重要意義。

3、因此，有必要提供一種真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌擴展植物培育菌株資源。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本申請?zhí)峁┮环N真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌及其應(yīng)用，用于解決固氮菌菌株資源不足的問題。

2、為達到上述技術(shù)目的，本申請采用以下技術(shù)方案：

3、第一方面，本申請?zhí)峁┮环N真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌，其保藏編號為cctcc?m2022708，于2022年5月24日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心。

4、第二方面，本申請?zhí)峁┮环N真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌菌劑，其含有保藏編號為cctcc?m?2022708的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌。

5、第三方面，本申請?zhí)峁┮环N真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌的分離方法，包括以下步驟：

6、s1.將玉米黑粉菌體接種于yepsl液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，得發(fā)酵液，將發(fā)酵液轉(zhuǎn)接至新鮮的yepsl液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，離心、重懸，收集菌體，將菌體加入于裂解液中孵育，離心后，得原生質(zhì)體；

7、s2.將原生質(zhì)體研磨并于無氮培養(yǎng)基中培養(yǎng)，再挑取單菌落純化培養(yǎng)，即得密歇根克雷伯氏菌。

8、優(yōu)選的，玉米黑粉菌體的體內(nèi)含有內(nèi)生細菌。

9、第四方面，本申請?zhí)峁┮环N真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌菌劑在植物培養(yǎng)領(lǐng)域中的應(yīng)用。

10、優(yōu)選的，真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或其培養(yǎng)液或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在增加植物蛋白含量中的應(yīng)用。

11、優(yōu)選的，真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或其培養(yǎng)液或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在定殖小麥中的應(yīng)用。

12、優(yōu)選的，真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或其培養(yǎng)液或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在合成iaa中的應(yīng)用。

13、優(yōu)選的，真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或其培養(yǎng)液或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在植物固氮中的應(yīng)用。

14、第五方面，本申請?zhí)峁┮环N肥料，包含真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌菌劑。

15、本申請的有益效果如下：

16、本申請的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌由可食用真菌分離，對人和環(huán)境友好；

17、本申請的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌的固氮能力強，可在無氮條件下正常生長，其固氮酶活性為646.25±38.61nmol·ml-1·h-1c2h4，同時，還具有定殖小麥、合成iaa及作為產(chǎn)鐵載體的能力，可增加豆類6-8個蛋白含量；

18、本申請的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌生產(chǎn)周期短，使用簡單，在植物促生、生物肥料等領(lǐng)域具有十分廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌，其特征在于，其保藏編號為cctcc?m2022708，于2022年5月24日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心。

2.一種真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌菌劑，其特征在于，其含有保藏編號為cctcc?m2022708的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌。

3.一種如權(quán)利要求1所述的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌的分離方法，其特征在于，包括以下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的密歇根克雷伯氏菌的分離方法，其特征在于，所述玉米黑粉菌體的體內(nèi)含有內(nèi)生細菌。

5.一種如權(quán)利要求1所述的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或如權(quán)利要求2所述的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌菌劑在植物培養(yǎng)領(lǐng)域中的應(yīng)用。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或其培養(yǎng)液或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在增加植物蛋白含量中的應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或其培養(yǎng)液或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在定殖小麥中的應(yīng)用。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或其培養(yǎng)液或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在合成iaa中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或其培養(yǎng)液或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在植物固氮中的應(yīng)用。

10.一種肥料，其特征在于，包含如權(quán)利要求1所述的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌或如權(quán)利要求2所述的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌菌劑。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌及其應(yīng)用，該菌株的保藏編號為CCTCC?M?2022708，于2022年5月24日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心；本申請的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌可在無氮環(huán)境中生長，且固氮酶活性高，因此，可為植物生長發(fā)育提供氮源，本申請的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌擴寬了固氮菌株資源，同時本申請的真菌內(nèi)生密歇根克雷伯氏菌具有定殖小麥、合成IAA及作為產(chǎn)鐵載體的能力，可增加豆類的蛋白含量。

技術(shù)研發(fā)人員：許汝冰,黎妍妍,周燚,董善余,覃永生,熊濤
受保護的技術(shù)使用者：湖北省煙草科學(xué)研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9