本發(fā)明屬于生物，具體涉及一種小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌的放療抵抗細(xì)胞株及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral?squamous?cell?carcinoma，oscc)是頭頸部常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，約占口腔惡性腫瘤的90％。oscc好發(fā)于舌、頰、牙齦及口底等部位，可導(dǎo)致患者容貌受損以及吞咽、言語(yǔ)和味覺(jué)等功能障礙，極大程度降低了患者的生活質(zhì)量。oscc的發(fā)病率逐年上升，成為全球醫(yī)療保健領(lǐng)域的一個(gè)重大問(wèn)題。根據(jù)全球癌癥觀(guān)察(global?cancerobservatory,gco)最新公布的數(shù)據(jù)，2022年oscc的新發(fā)病例達(dá)到389,846例，死亡病例為188,438例。

2、放療在治療惡性腫瘤中扮演著不可或缺的角色，超過(guò)70％的腫瘤患者需要接受放療治療。盡管放療技術(shù)不斷進(jìn)步，放療抵抗依然是放射治療中的主要挑戰(zhàn)，可能引起腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。惡性腫瘤對(duì)放療抵抗涉及多種因素，如dna損傷反應(yīng)異常、細(xì)胞凋亡、基因突變等。借助放療抵抗細(xì)胞模型的研究，可以為逆轉(zhuǎn)放療抵抗提供基礎(chǔ)。通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)中重復(fù)輻照x射線(xiàn)，篩選出具有放療耐受性的細(xì)胞株進(jìn)行研究，有助于探究放療抵抗機(jī)制。結(jié)合放療在口腔鱗狀細(xì)胞癌的應(yīng)用和研究進(jìn)展，深入研究口腔鱗癌的放療抵抗機(jī)制是當(dāng)前惡性腫瘤治療領(lǐng)域亟待解決的問(wèn)題之一。

3、目前針對(duì)小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法尚未有明確報(bào)道，這給深入研究放療抵抗的分子機(jī)制以及提高放療敏感性帶來(lái)了困難。本發(fā)明旨在提供一種針對(duì)口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法，為深入探究口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗的分子機(jī)制、篩選靶點(diǎn)，并最終提高放療敏感性提供新的思路和方向。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種具有優(yōu)異放療抵抗特性的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株，以及該放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法和用途。

2、本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案為：提供了一種小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株，保藏編號(hào)為cgmcc?no.45842。該細(xì)胞株保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理中心cgmcc，保藏日期為2024年4月11日，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。

3、本發(fā)明還提供了一種上述小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法，包括以下步驟：

4、a、取小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株moc1，采用x射線(xiàn)輻照，劑量率為3.095gy/min，每次2gy，每隔24小時(shí)輻照1次，每輻照5次休息48小時(shí)，如此重復(fù)7次，篩選存活的細(xì)胞株；

5、b、將存活的細(xì)胞株維持培養(yǎng)8周后，得到放療抵抗細(xì)胞株moc1-r。

6、其中，上述小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法中，步驟a所述的x射線(xiàn)由x射線(xiàn)生物輻照儀產(chǎn)生。

7、其中，上述小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法中，所述的x射線(xiàn)生物輻照儀型號(hào)為rs2000系列。

8、其中，上述小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法，步驟a所述的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株moc1，采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，制備成單細(xì)胞懸液，待貼壁生長(zhǎng)時(shí)進(jìn)行輻照。

9、本發(fā)明通過(guò)上述構(gòu)建方法，得到了一株穩(wěn)定的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株，該細(xì)胞株moc1-r具有很強(qiáng)放射抵抗性，在不同劑量的輻照下，moc1-r的存活能力均比moc1親本細(xì)胞強(qiáng)。

10、本發(fā)明還提供了一種上述小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株在篩選放療增敏藥物的細(xì)胞模型中的用途。

11、本發(fā)明還提供了一種上述小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株在篩查放療抵抗基因的細(xì)胞模型中的用途。

12、本發(fā)明還提供了一種上述小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株在研究小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗機(jī)制的細(xì)胞模型中的用途。

13、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：

14、本發(fā)明提供了一種小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株，命名為小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞moc1-r，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理中心cgmcc，保藏編號(hào)為cgmccno.45842。本發(fā)明通過(guò)采用特有的篩選方法，采用x射線(xiàn)輻照，篩選得到一株具有很強(qiáng)放射抵抗性的細(xì)胞株，在不同劑量的輻照下，moc1-r的存活能力均比moc1親本細(xì)胞強(qiáng)。

15、本發(fā)明提供的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株為進(jìn)一步研究小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗的分子機(jī)制、篩選放療抵抗靶點(diǎn)、提高放療敏感性，篩選放療增敏藥物和篩查放療抵抗基因提供了基礎(chǔ)。

技術(shù)特征：

1.小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株，其特征在于：保藏編號(hào)為cgmcc?no.45842。

2.權(quán)利要求1所述的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法，其特征在于：步驟a所述的x射線(xiàn)由x射線(xiàn)生物輻照儀產(chǎn)生。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法，其特征在于：所述的x射線(xiàn)生物輻照儀型號(hào)為rs2000系列。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株的構(gòu)建方法，其特征在于：步驟a所述的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株moc1，采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，制備成單細(xì)胞懸液，待貼壁生長(zhǎng)時(shí)進(jìn)行輻照。

6.權(quán)利要求1所述的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株在篩選放療增敏藥物的細(xì)胞模型中的用途。

7.權(quán)利要求1所述的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株在篩查放療抵抗基因的細(xì)胞模型中的用途。

8.權(quán)利要求1所述的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株在研究小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗機(jī)制的細(xì)胞模型中的用途。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種具有優(yōu)異放療抵抗特性的小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗細(xì)胞株MOC1?R，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理中心CGMCC，保藏號(hào)CGMCC?No.45842；它是由小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株MOC1經(jīng)多次X射線(xiàn)累積輻照和培養(yǎng)后獲得的放療抵抗細(xì)胞株，放射抵抗性強(qiáng)，在小鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌放療抵抗機(jī)制的細(xì)胞模型中具有良好應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：彭星辰,門(mén)可,朱莉莉,楊華菊,秦子健,何玲,劉哲然,代爽,劉映彤
受保護(hù)的技術(shù)使用者：四川大學(xué)華西醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9