本發(fā)明涉及功能性多肽螯合亞鐵離子，具體為磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、我國蠶業(yè)資源豐富，其中，每年柞蠶的產(chǎn)量也極高。柞蠶蛹蛋白質(zhì)含量約占干重的55％，含有多種人體必需氨基酸，加工特性優(yōu)良，具有很高的研究價值和開發(fā)潛力。鐵元素是維持人體正常代謝的重要元素，鐵元素的缺乏會導致多種疾病，如貧血、兒童發(fā)育遲緩、頭暈乏力等，嚴重影響身體健康。目前市面上常見的補鐵產(chǎn)品主要包括無機鐵和有機鐵，肽鐵螯合物作為一種新興的補鐵產(chǎn)品，因其具有吸收率高、安全無副作用等優(yōu)點，近年來逐漸被當成新型的理想補鐵劑。

2、磷酸化改性可以增強蛋白質(zhì)分子間的電負性，影響其疏水平衡，并通過影響蛋白質(zhì)分子間的相互聚集使蛋白質(zhì)在溶液中更加分散，從而使蛋白質(zhì)的溶解度得到增強。由于磷酸基團摻入后界面吸附動力學得到改善，界面膜得到強化，磷酸化還被證明是改善蛋白質(zhì)乳化性能的一種有效方法，磷酸化改性可賦予蛋白質(zhì)理想的乳化特性，以穩(wěn)定具有惡劣環(huán)境耐受性的乳液。同樣，磷酸化還可以在一定程度上增強蛋白質(zhì)的起泡性和起泡穩(wěn)定性。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明目的是制備一種具有良好的加工特性磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物，且具有良好的抗氧化性能和消化吸收特性。

2、本發(fā)明所述一種磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物及其制備方法，包括柞蠶蛹蛋白為原料，使用中性蛋白酶和復合蛋白酶對其進行雙酶酶解后，然后進行磷酸化改性，最后通過螯合反應制備磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物，具體按照下列方案進行，具體步驟如下：

3、一種磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物，是將柞蠶蛹蛋白粉添加蛋白酶進行酶解，并進行磷酸化改性，然后通過螯合反應制備磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物。

4、上述的磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物的制備方法，步驟如下：

5、1)雙酶酶解：取柞蠶蛹蛋白粉于燒杯中，超純水溶解，加入中性蛋白酶和復合蛋白酶，攪拌進行雙酶酶解，攪拌，反應完全后煮沸滅酶，在離心，然后取上清液，冷凍干燥，得到柞蠶蛹多肽粉；

6、2)磷酸化改性：取一定量的柞蠶蛹多肽粉，將其溶于的磷酸鹽溶液中，混合后，進行超聲、冷卻、透析、冷凍干燥，得到磷酸化改性柞蠶蛹多肽粉。

7、3)螯合反應：取磷酸化改性柞蠶蛹多肽粉配置溶液，調(diào)ph為7，加入氯化亞鐵和抗壞血酸，進行反應，離心取上清液，加入無水乙醇再次離心，取沉淀，重復操作直至上清液變透明，去除上清液，留取沉淀，進行冷凍干燥，最終得到磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物。

8、上述的制備方法，步驟1)中，中性蛋白酶：復合蛋白酶的體積比為1:1，中性蛋白酶的質(zhì)量分數(shù)為1％，復合蛋白酶的質(zhì)量分數(shù)為1％。

9、上述的制備方法，步驟1)中，所述攪拌是在55℃條件下攪拌8h。

10、上述的制備方法，步驟2)中，所述的磷酸鹽溶液是三聚磷酸鈉或磷酸氫二鈉，磷酸鹽溶液的質(zhì)量分數(shù)是1％～3％，ph為7.0。

11、上述的制備方法，步驟2)中，混合時調(diào)節(jié)ph為8.0，超聲是在45℃、超聲波振幅40％、功率530w下，反應2h，透析是在溫度4℃下進行24h透析操作。

12、上述的制備方法，步驟3)中，磷酸化改性柞蠶蛹多肽溶液的質(zhì)量分數(shù)為1％。

13、上述的制備方法，步驟3)中，按質(zhì)量比，磷酸化改性柞蠶蛹多肽粉：氯化亞鐵為4：1上述的制備方法，步驟3)中，所述反應是在30℃下反應30min。

14、通過采用上述方案，本發(fā)明研究的對象與傳統(tǒng)技術(shù)相比，其亮點在于：

15、(1)對于蛋白來源的選擇，柞蠶蛹蛋白質(zhì)含量約占干重的55％，含有多種人體必需氨基酸，具有很高的研究價值和開發(fā)潛力。

16、(2)鐵元素作為人體中的重要營養(yǎng)元素，具有多種生理作用，目前市面上常見的補鐵產(chǎn)品主要包括無機鐵和有機鐵，而肽鐵螯合物作為一種新興的補鐵產(chǎn)品，具有吸收率高、安全無副作用等優(yōu)點，逐漸被人們所熟知。

17、(3)本發(fā)明結(jié)合磷酸化對柞蠶蛹蛋白肽進行改性，得到的產(chǎn)品在加工特性方面得到提高，特別是持油力和乳化性，此外，磷酸化改性使氨基酸上的羥基被磷酸化，進一步增加多肽與金屬離子的結(jié)合位點，使得多肽的亞鐵結(jié)合能力得到了一定提高。

技術(shù)特征：

1.一種磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物，其特征在于，是將柞蠶蛹蛋白粉用蛋白酶進行酶解，并進行磷酸化改性，然后通過螯合反應制備磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物。

2.權(quán)利要求1所述的磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物的制備方法，其特征在于，步驟如下：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中，中性蛋白酶：復合蛋白酶的體積比為1:1，中性蛋白酶的質(zhì)量分數(shù)為1％，復合蛋白酶的質(zhì)量分數(shù)為1％。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中，所述攪拌是在55℃條件下攪拌8h。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中，所述的磷酸鹽溶液是三聚磷酸鈉或磷酸氫二鈉，磷酸鹽溶液的質(zhì)量分數(shù)是1％～3％，ph為7.0。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中，混合時調(diào)節(jié)ph為8.0，超聲是在45℃、超聲波振幅40％、功率530w下，反應2h，透析是在溫度4℃下進行24h透析操作。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，磷酸化改性柞蠶蛹多肽溶液的質(zhì)量分數(shù)為1％。

8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，按質(zhì)量比，磷酸化改性柞蠶蛹多肽：氯化亞鐵為4：1。

9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，所述反應是在30℃下反應30min。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物及其制備方法，涉及功能性多肽螯合亞鐵離子技術(shù)領域。本發(fā)明所述的磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物是將柞蠶蛹蛋白粉用蛋白酶對其進行酶解，并進行磷酸化改性，然后通過螯合反應制備磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物。本發(fā)明結(jié)合磷酸化對柞蠶蛹蛋白肽進行改性，得到的產(chǎn)品在加工特性方面得到提高，特別是持油力和乳化性。此外，磷酸化改性使氨基酸上的羥基被磷酸化，進一步增加多肽與金屬離子的結(jié)合位點，使得多肽的亞鐵結(jié)合能力得到了一定提高。本發(fā)明所述的磷酸化改性柞蠶蛹多肽亞鐵螯合物具有良好的加工特性和抗氧化活性，推動了在食品和保健品等領域的應用。

技術(shù)研發(fā)人員：李瑋軒,任一非,趙玉靜,胡風慶,張韌恒,寧崇
受保護的技術(shù)使用者：遼寧大學
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10