本發(fā)明涉及生物學(xué)檢測,具體為一種急性心梗早期檢測標(biāo)記物及檢測試劑盒。
背景技術(shù):
1、心梗是心血管病的主要死亡因素之一,心腦血管疾病給人們身體健康和社會經(jīng)濟(jì)造成了極大損失。長期以來,心血管疾病占居人口死亡率的第一位,但是對心血管疾病的診斷鮮有敏感性和特異性高的生物標(biāo)記物,對于心梗更缺少有效的早期診斷方法。
2、臨床上目前主要檢測肌鈣蛋白、肌紅蛋白和肌酸激酶(ck)及肌酸激酶同工酶(ck—mb))等等來作為心梗的診斷方法,此類生物標(biāo)記物主要發(fā)生在心肌受損和心學(xué)管癥狀的臨床中晚期,對于心血管疾病的早期,目前尚無有效特異的早期心血管疾病的診斷方法和生物標(biāo)記物。而且,檢測的方法還是以酶聯(lián)免疫標(biāo)記和免疫發(fā)光技術(shù)為主,缺乏新穎的基因分子生物學(xué)方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明采用目前先進(jìn)的等溫核酸基因擴(kuò)增技術(shù)通過對45例急行心梗基因組外顯子測序結(jié)果的差異化表達(dá)篩選出來的自主開發(fā)的新的基因生物標(biāo)志物,作為急性心梗早期檢測標(biāo)記物,從而為心?;颊咛峁┰缙诟哽`敏度的基因分子診斷,特點(diǎn)為低成本、快速,可在15分鐘內(nèi)得出檢測結(jié)果。
2、本發(fā)明的主要目的是提供急性心梗早期檢測標(biāo)記物及檢測試劑盒,為心血管疾病的早期診斷提供快速特異的診斷方法,降低患病人群的死亡概率。
3、為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提出的急性心梗早期檢測標(biāo)記物,其序列為:
4、
5、可選地,標(biāo)記物序列,還包括:
6、
7、急性心梗早期檢測試劑盒,包括上述所述的任一項(xiàng)標(biāo)記物。
8、優(yōu)選地,所述的標(biāo)記物為ahnak基因。
9、優(yōu)選地,所述的ahnak基因
10、上游引物為:176?20?60.38?50.00?7.00?0.00?tgggtgccaccatctacttt
11、下游引物為:614?20?59.72?60.00?3.00?1.00?cctaagcccacactctgtcc
12、優(yōu)選地,急性心梗早期檢測試劑盒,還包括dna聚合酶和試劑;其中試劑包括dna聚合酶、合成的引物、dntp、緩沖液和純凈水。
13、本發(fā)明設(shè)計和實(shí)驗(yàn)了該ahnak基因能夠在短時間內(nèi)檢測心血管疾病狀態(tài)下基因心梗標(biāo)志物,以此項(xiàng)技術(shù)設(shè)計的試劑盒可以用于心血管疾病的早期快速診斷,當(dāng)血管內(nèi)皮細(xì)胞或心肌細(xì)胞處于異常血流壓力,高血脂蛋白或心肌細(xì)胞受損,細(xì)胞緊張時,通過檢測血液中心肌肌鈣蛋白的磷酸化情況和心肌細(xì)胞中鈣離子通道的變化情況,以及聯(lián)合檢測其他傳統(tǒng)的心梗診斷標(biāo)志物如肌紅蛋白通路上分子的變化,可以早期診斷和預(yù)測心血管疾病特別是心梗的風(fēng)險。
1.一種急性心梗早期檢測標(biāo)記物,其特征在于,包括:其序列為:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的急性心梗早期檢測標(biāo)記物,其特征在于,還包括序列:
3.一種急性心梗早期檢測試劑盒,其特征在于:包括擴(kuò)增及上述所述任一項(xiàng)的標(biāo)記物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的急性心梗早期檢測標(biāo)記物及檢測試劑盒,其特征在于,所述的標(biāo)記物為ahnak基因。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的急性心梗早期檢測標(biāo)記物及檢測試劑盒,其特征在于,所述的ahnak基因上游引物為:176?20?60.38
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的急性心梗早期檢測標(biāo)記物及檢測試劑盒,其特征在于,所述的ahnak基因上游引物為:378?20?60.22
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的急性心梗早期檢測標(biāo)記物及檢測試劑盒,其特征在于,還包括酶和試劑。