本發(fā)明涉及食品藥品化學(xué)，更具體地說，它涉及一種蟬花蟲草的均一多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)解析及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、蟬花(cordyceps?cicadae)是一種蟲菌復(fù)合體，屬于菌物界(fungi)子囊菌門(ascomycota)、糞殼菌綱(sordariomycetes)、肉座菌目(hypocreales)、蟲草科(cordycipitaceae)(李增智等.與蟬花有關(guān)的蟲草菌生物多樣性的研究[j].菌物學(xué)報(bào),2020,39(12):2191-2201)。作為藥食兩用真菌，蟬花在食品和藥用領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。蟬花中含多糖、蟲草酸、麥角固醇等多種具有藥理活性的物質(zhì)，是我國傳統(tǒng)名貴中藥材之一，在《證類本草》、《雷公炮炙論》和《本草綱目》中有關(guān)于蟬花藥用的記載?，F(xiàn)代藥理研究表明，蟬花具有免疫調(diào)節(jié)、抗癌抗腫瘤、改善腎功能等多種藥理作用。

2、多糖作為蟬花里含量最豐富的功能活性組分之一，在抗氧化、降血糖、增強(qiáng)機(jī)體免疫等方面展現(xiàn)了一定潛力的藥理作用。olatunji等從蟬花中分離提純了兩種多糖cpa-1和cpb-2，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，cpa-1和cpb-2明顯增強(qiáng)了pc12細(xì)胞的抗氧化性能，保護(hù)pc12細(xì)胞免受谷氨酸致興奮毒性的影響，在治療神經(jīng)疾病方面具有很大的藥物開發(fā)潛力。wang等發(fā)現(xiàn)蟬花多糖提純物spp的降血糖機(jī)制，通過調(diào)節(jié)胰島素信號通路關(guān)鍵pi3k/akt基因的mrna表達(dá)來緩解胰島素抵抗。chen等從蟬花中分離出一種中性分支異多糖(pc0-1)，pc0-1在巨噬細(xì)胞上的生物活性研究表現(xiàn)出中等的免疫刺激活性。

3、但是，過往關(guān)于蟬花多糖的研究主要使用粗多糖，人們對蟬花多糖結(jié)構(gòu)的理解尚不成熟，鑒定多糖的精細(xì)結(jié)構(gòu)，是研究和開發(fā)蟬花多糖功能保健食品及藥品的重要基礎(chǔ)。因此，本發(fā)明旨在提供一種蟬花蟲草的均一多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)解析及應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供一種蟬花蟲草的均一多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)解析及應(yīng)用，本發(fā)明公開了一種高產(chǎn)多糖的蟬花gzuiir_fjdh1，通過采用色譜、質(zhì)譜及核磁共振等多種檢測方法準(zhǔn)確鑒定了蟬花gzuiir_fjdh1人工小麥栽培后的蟲草的均一多糖fjchp-1的化學(xué)結(jié)構(gòu)，并對fjchp-1的應(yīng)用做了對應(yīng)研究，結(jié)果顯示fjchp-1可拮抗lps誘導(dǎo)的raw264.7細(xì)胞炎癥反應(yīng)。

2、本發(fā)明的上述技術(shù)目的是通過以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：一種高產(chǎn)多糖的蟬花，所述蟬花的拉丁名稱為cordyceps?cicadae，菌株號為gzuiir_fjdh1，保藏編號為cctccno：m?2024868，于2024年05月06日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址：武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心。

3、本發(fā)明還提供一種根據(jù)蟬花生產(chǎn)得到的多糖，所述多糖為fjchp-1，其相對分子質(zhì)量為23.15kda，以不定性晶態(tài)存在，具備部分結(jié)晶狀態(tài)，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

4、

5、本發(fā)明還提供一種多糖的制備方法，包括以下步驟：

6、s1、取蟬花gzuiir_fjdh1子實(shí)體，加無水乙醇攪拌去除脂溶性雜質(zhì)，收集沉淀；向沉淀中加純水，60℃水浴提取，收集上清提取液，剩余的沉淀殘?jiān)凑胀瑯拥姆椒ㄖ貜?fù)提一遍；合并兩次提取液，真空旋蒸濃縮至原體積的1/10，加入四倍體積95％乙醇過夜醇沉，再次去除脂溶性雜質(zhì)；離心收集沉淀固體，得到粗多糖提取物；

7、s2、向粗多糖提取物固體中加入純水，使粗多糖充分溶解，加入木瓜蛋白酶，過夜酶解；向水相中加入1/4體積三氯甲烷和正丁醇，充分混勻，收集上層水相；向液體中加入石油醚，充分混勻，收集下層水相；向水相中加入大孔樹脂ab-8，充分混勻，過夜吸附；收集液體，3000da透析袋透析48h除去小分子組分，多糖液冷凍干燥；

8、s3、取定量粗多糖母液，離心取上清液過離子交換柱純化，流速4ml/min；依次采用純水、0.1m、0.2m和0.3m?nacl溶液等梯度洗脫每15ml收集一管，收集所有洗脫液；繪制離子純化洗脫曲線；合并同一個洗脫峰對應(yīng)的各收集管洗脫液，旋蒸濃縮至原體積的1/5；3000da透析袋透析48～72h除鹽；

9、s4、取離子純化后的多糖樣品加入純水，配成一定濃度的多糖母液，離心取上清液過凝膠層析柱分離純化，流速1ml/min；采用純水洗脫1.5倍柱體積，每12ml收集一管，收集所有洗脫液；繪制凝膠純化洗脫曲線；選擇并確認(rèn)洗脫峰；合并同一個洗脫峰對應(yīng)的各收集管洗脫液，旋蒸濃縮至原體積的1/5，冷凍干燥得到多糖。

10、本發(fā)明還提供一種多糖在制備治療細(xì)胞炎癥藥物上的應(yīng)用。

11、綜上所述，本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明通過公開了一種高產(chǎn)多糖的蟬花gzuiir_fjdh1，同時采用色譜、質(zhì)譜及核磁共振等多種檢測方法準(zhǔn)確鑒定了蟬花gzuiir_fjdh1人工小麥栽培后的蟲草的均一多糖fjchp-1的化學(xué)結(jié)構(gòu)，使得對蟬花多糖結(jié)構(gòu)的理解更加成熟，并通過對fjchp-1的應(yīng)用做了對應(yīng)研究，結(jié)果顯示fjchp-1可拮抗lps誘導(dǎo)的raw264.7細(xì)胞炎癥反應(yīng)，便于更好的研究和開發(fā)蟬花多糖功能，為保健食品及藥品的發(fā)展打下了重要基礎(chǔ)。

技術(shù)特征：

1.一種高產(chǎn)多糖的蟬花，其特征是：所述蟬花的拉丁名稱為cordyceps?cicadae，菌株號為gzuiir_fjdh1，保藏編號為cctcc?no：m?2024868。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蟬花生產(chǎn)得到的多糖，其特征是：所述多糖為fjchp-1，其相對分子質(zhì)量為23.15kda，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多糖的制備方法，其特征是：包括以下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多糖在制備治療細(xì)胞炎癥藥物上的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種蟬花蟲草的均一多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)解析及應(yīng)用，涉及食品藥品化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，其技術(shù)方案要點(diǎn)是：采用蟬花GZUIIR_FJDH1進(jìn)行人工小麥栽培，長出蟲草后，對蟲草提取純化得到均一多糖FJCHP?1，通過鑒定得到均一多糖FJCHP?1的具體化學(xué)結(jié)構(gòu)，獲得其相對分子質(zhì)量為23.15kDa，該多糖以不定性晶態(tài)存在，具備部分結(jié)晶狀態(tài)。本發(fā)明提供了一種高產(chǎn)多糖的蟬花GZUIIR_FJDH1，通過采用色譜、質(zhì)譜及核磁共振等多種檢測方法準(zhǔn)確鑒定了蟬花GZUIIR_FJDH1人工小麥栽培后的蟲草的均一多糖FJCHP?1的化學(xué)結(jié)構(gòu)，并對FJCHP?1的應(yīng)用做了對應(yīng)研究，結(jié)果顯示FJCHP?1可拮抗LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞炎癥反應(yīng)。

技術(shù)研發(fā)人員：鄒曉,李春英,費(fèi)罡翔,胡功平,許忠順,周葉鳴
受保護(hù)的技術(shù)使用者：貴州大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9