本發(fā)明屬于蛋白肽分離提取，具體涉及一種改善脾胃功能的牛脾肽生產(chǎn)工藝。

背景技術(shù)：

1、多肽，作為蛋白質(zhì)分解的產(chǎn)物，小分子肽大部分生物活性肽由2到20個(gè)氨基酸組成，便于人體的消化吸收已經(jīng)被證實(shí)有許多生物活性肽具有多種功能，如調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、預(yù)防心血管疾病、促進(jìn)骨骼健康等。這些多肽可以通過微生物發(fā)酵、消化酶解、基因工程的人工合成，或者化學(xué)合成等方式獲得。對于調(diào)理脾胃的提取以及病理研究鮮有報(bào)道。

2、脾氨肽，可用于過敏性鼻炎及慢性乙型肝炎的治療。治療細(xì)胞免疫功能低下、免疫缺陷和自身免疫功能紊亂性疾病(反復(fù)呼吸道感染、支氣管炎、肺炎、哮喘、重癥帶狀皰疹及牛皮癬等)；惡性腫瘤病人放、化療及術(shù)后生活質(zhì)量，降低各種原因引起的感冒、發(fā)燒或其它感染發(fā)生率，對人體體質(zhì)改善有重要作用。傳統(tǒng)的脾氨肽生產(chǎn)工藝存在生產(chǎn)周期長、成本高、產(chǎn)品風(fēng)味和色澤差以及適用范圍有限等問題。因此，本發(fā)明的目的是提供一種能夠有效縮短生產(chǎn)周期、降低生產(chǎn)成本、改善產(chǎn)品風(fēng)味和色澤、并擴(kuò)大產(chǎn)品應(yīng)用范圍的新鮮脾氨肽生產(chǎn)工藝，探索一種更加安全、簡單、有效的提取方式以及利用產(chǎn)物預(yù)防和調(diào)節(jié)脾胃功能有積極的意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供一種改善脾胃功能的牛脾肽以及一種能夠有效縮短生產(chǎn)周期、降低生產(chǎn)成本、改善產(chǎn)品風(fēng)味和色澤、并擴(kuò)大產(chǎn)品應(yīng)用范圍的新鮮脾氨肽生產(chǎn)工藝。

2、一種改善脾胃功能的牛脾肽，所述牛脾肽含有以下序列：seq?id?no.1、seq?idno.2、seq?id?no.3多肽或與其多肽序列同源性至少為65％的序列；

3、seq?id?no.1、seq?id?no.2、seq?id?no.3編碼多肽的多核苷酸序列或與其核苷酸序列同源性至少為85％的序列；

4、進(jìn)一步地，所述牛脾肽含有氨基酸序列的植物蛋白：seq?id?no.1：dvnfrveknyp、seq?id?no.2：kttkswlwkk、seq?id?no.3：dvnfsfhrlyg。

5、進(jìn)一步地，所述牛脾肽的組合物在粉劑、泡騰劑、噴劑上的應(yīng)用。

6、進(jìn)一步地，一種改善脾胃功能的牛脾肽生產(chǎn)工藝，所述生產(chǎn)工藝包括：

7、步驟s1，細(xì)胞外基質(zhì)制備；將牛脾作為原料進(jìn)行消毒，并剝離內(nèi)皮，將剝離得到的內(nèi)皮放在tris-hcl溶液中進(jìn)行清洗，利用質(zhì)子素和0.1％edta進(jìn)行滲透，并與含脫氧核糖核酸酶和核糖核素的tris-hcl溶液進(jìn)行反應(yīng)去核，采用干熱式高壓對反應(yīng)去核后的內(nèi)皮進(jìn)行滅菌，得到細(xì)胞外基質(zhì)；

8、步驟s2，將細(xì)胞外基質(zhì)儲(chǔ)存在4攝氏度低溫環(huán)境中，同時(shí)將剝離內(nèi)皮后的牛脾凍干切碎并制成基底纖維粉末，將細(xì)胞外基質(zhì)和基底纖維粉末進(jìn)行混合后得到相容性聚合物載體，在25攝氏度條件下，使用乙醇對相容性聚合物載體進(jìn)行提取并過濾，用水浴和旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器對過濾后相容性聚合物載體進(jìn)行濃縮處理，得到濃縮后相容性聚合物載體；

9、步驟s3，將濃縮后相容性聚合物載體與水解酶進(jìn)行混合反應(yīng)，得到酶解物質(zhì)；

10、步驟s4，通過發(fā)酵菌對酶解物質(zhì)進(jìn)行處理，得到發(fā)酵液體；

11、步驟s5，對發(fā)酵液體進(jìn)行超濾處理，得到活性提取物，對活性提取物進(jìn)行冷凍干燥，得到改善脾胃功能的牛脾肽。

12、進(jìn)一步地，所述生產(chǎn)工藝還包括：

13、步驟s6，用easy?nlc?1200液相串聯(lián)q?exactive?hf質(zhì)譜對活性提取物進(jìn)行檢測，并進(jìn)行測序。

14、進(jìn)一步地，所述的步驟s4中的酶解物質(zhì)的質(zhì)量配比為：中胃蛋白酶20-25份，a-胰凝乳蛋白酶10-25份，堿化酶15-25份。

15、進(jìn)一步地，所述步驟s5中的超濾處理為在25攝氏度下，將2,500ml?75％?ethanol溶液以1:5w/v的稀釋比例與發(fā)酵液體混合，并在24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行提取，利用截留分子量為1kda的陶瓷膜進(jìn)行過濾，接著在40℃的水浴中使用旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮處理。

16、進(jìn)一步地，所述發(fā)酵菌的質(zhì)量配比為：巨大曲霉1-10份、產(chǎn)朊假絲酵母1-5份。

17、進(jìn)一步地，所述步驟s6使用c18柱和以乙腈作為流動(dòng)相，所述流動(dòng)相中以乙腈的濃度分別為10％和90％；活性提取物樣品量為2500μl，流速為30ml/min，檢測波長為210nm，觀察洗脫峰，并將洗脫峰分別進(jìn)行質(zhì)譜分析。

18、進(jìn)一步地，在所述步驟s5中，所述超濾處理的活性提取物為小于1kda的餾分。

19、發(fā)明效果

20、本發(fā)明旨在構(gòu)建一個(gè)簡便的操作體系來執(zhí)行提取物選擇、酶解以及評(píng)估過程，此方法同樣適用于脾臟等類似提取物的處理。在經(jīng)過酶解后，原材料的有效利用程度大幅提升。通過加入適量的酶制劑和水解處理，使得產(chǎn)品中的蛋白提取更為容易，提高了產(chǎn)品和服務(wù)的回收率。通過不使用化學(xué)物質(zhì)的脫色和去味處理，我們保持了對產(chǎn)品的原有生化活性，同時(shí)防止了環(huán)境污染。

技術(shù)特征：

1.一種改善脾胃功能的牛脾肽，其特征在于，包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改善脾胃功能的牛脾肽，其特征在于，所述牛脾肽含有氨基酸序列的植物蛋白：seq?id?no.1：dvnfrveknyp、seq?id?no.2：kttkswlwkk、seq?id?no.3：dvnfsfhrlyg。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改善脾胃功能的牛脾肽，其特征在于：所述牛脾肽的組合物在粉劑、泡騰劑、噴劑上的應(yīng)用。

4.一種應(yīng)用于權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的改善脾胃功能的牛脾肽的生產(chǎn)工藝，其特征在于，包括：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的改善脾胃功能的牛脾肽的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述生產(chǎn)工藝還包括：

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的牛脾肽生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述的步驟s4中的酶解物質(zhì)的質(zhì)量配比為：中胃蛋白酶20-25份，a-胰凝乳蛋白酶10-25份，堿化酶15-25份。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的牛脾肽生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述步驟s5中的超濾處理為在25攝氏度下，將2,500ml?75％ethanol溶液以1:5w/v的稀釋比例與發(fā)酵液體混合，并在24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行提取，利用截留分子量為1kda的陶瓷膜進(jìn)行過濾，接著在40℃的水浴中使用旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮處理。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的牛脾肽生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述發(fā)酵菌的質(zhì)量配比為：巨大曲霉1-10份、產(chǎn)朊假絲酵母1-5份。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的牛脾肽生產(chǎn)工藝，其特征在于：所述步驟s6使用c18柱和以乙腈作為流動(dòng)相，所述流動(dòng)相中以乙腈的濃度分別為10％和90％；活性提取物樣品量為2500μl，流速為30ml/min，檢測波長為210nm，觀察洗脫峰，并將洗脫峰分別進(jìn)行質(zhì)譜分析。

10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的牛脾肽生產(chǎn)工藝，其特征在于，在所述步驟s5中，所述超濾處理的活性提取物為小于1kda的餾分。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于蛋白肽分離提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種改善脾胃功能的牛脾肽以及生產(chǎn)工藝，所述工藝包括：(1)將牛脾為原料，制備細(xì)胞外基質(zhì)以及相容性聚合物載體；(2)在室溫條件下，使用乙醇來提取并經(jīng)過過濾，然后用水浴和旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器來進(jìn)行濃縮處理；(3)接著，將濃縮后的溶液與水解酶進(jìn)行混合反應(yīng)；(4)通過發(fā)酵菌對過濾濃縮的物質(zhì)進(jìn)行處理；(5)將濃縮后的發(fā)酵液體進(jìn)行超濾處理，并在得到活性提取物后進(jìn)行冷凍干燥。具體來說，通過采用本發(fā)明的技術(shù)方案，可以提高牛脾肽的生產(chǎn)效率，減少生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本，同時(shí)，產(chǎn)品可以有效地改善脾胃功能。

技術(shù)研發(fā)人員：閆云霞
受保護(hù)的技術(shù)使用者：天津橙悅生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10