本發(fā)明涉及生物，具體涉及一株金耳菌株dzhssje001及其工廠化栽培方法。

背景技術(shù)：

1、金耳(naematelia?aurantialba(bandoni&m.zang)millanes&wedin)是耳包革科、耳包革屬真菌。擔(dān)子果大型，半球形至不定型塊狀，全體呈腦狀至分裂為數(shù)個具深溝槽而粗厚的裂瓣，直徑3-12厘米，高2-8厘米。子實(shí)層遍生外露表層，為一寬廣疏松包含著擔(dān)子的區(qū)域；原擔(dān)子初橢圓形至卵形；成熟下?lián)忧蛐?、近球形，稀有梨形至具短柄狀基部，長13-25微米，寬11.5-19.5皮米。

2、金耳子實(shí)體由毛韌革菌和金耳菌絲組成，金耳孢子在pda上多以芽殖方式生長，目前金耳生產(chǎn)多使用金耳固體種與革菌固體種結(jié)合接種、金耳固體種與革菌液體種結(jié)合、金耳固體種直接做液體菌種接種菌棒等方式，前兩種方式金耳固體種用量大，且菌種不穩(wěn)定易造成批量污染或子實(shí)體發(fā)育不良等問題。金耳固體種直接做液體菌種方式，接種后金耳出現(xiàn)時間不一致，出菇管理難度大，且菌種傳代易退化，菌種無法進(jìn)行長時間保存，工廠化生產(chǎn)批次間質(zhì)量不穩(wěn)定。

3、鑒于上述缺陷，本發(fā)明創(chuàng)作者經(jīng)過長時間的研究和實(shí)踐終于獲得了本發(fā)明。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于解決金耳菌株工廠化栽培質(zhì)量不佳的問題，提供了一株金耳菌株dzhssje001及其工廠化栽培方法。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開了一株金耳菌株dzhssje001，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號分別為cgmcc?no.41289，its序列如seqno.1所示。

3、本發(fā)明還公開了上述金耳菌株dzhssje001的工廠化栽培方法，包括以下步驟：

4、s1，培養(yǎng)基配制：把玉米粉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂加入水中，用電磁爐加熱，攪拌至粘稠狀，分別取500ml，裝入1000ml錐形瓶中，硅膠塞封口，121℃高壓蒸汽滅菌30min，滅菌結(jié)束后放于超凈工作臺涼至25℃以下；

5、s2，接種培養(yǎng)：從試管或平板上取1cm2大小的金耳孢子，接種于25℃以下的步驟s1中的培養(yǎng)基中，接種后，將錐形瓶放于搖床，轉(zhuǎn)速150r/min、溫度18-22℃、避光培養(yǎng)5天。培養(yǎng)結(jié)束后可以用于生產(chǎn)；

6、s3，錐形瓶配制：土豆去皮稱重200g，水煮開放入土豆，保持沸騰20min，關(guān)火加入葡萄糖，分裝2個1000ml錐形瓶，各500ml，硅膠塞封口，121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，滅菌結(jié)束后放于超凈工作臺涼至25℃以下；

7、s4，從試管或平板上取4cm2大小的革菌，接種于25℃以下的步驟s3中的錐形瓶中，培養(yǎng)后進(jìn)行發(fā)酵罐接種；

8、s5，將發(fā)酵罐滅菌后，待溫度降至20℃，等待15min進(jìn)行接種，取浸泡95°酒精的棉條繞接種口一圈，點(diǎn)燃，快速擰開接種口蓋，錐形瓶口在火焰上消毒10s，然后將錐形瓶中革菌液體菌種倒入發(fā)酵罐，剩余10ml檢測，將剩余菌種倒入滅菌過的平板上，檢測是否有污染，接種口蓋子在火焰上消毒10～15s，快速擰緊，22℃培養(yǎng)4天；

9、s6，將革菌液體菌種4～5ml注射入菌棒，隨后將金耳孢子在同一位置注射入0.1～0.3ml；

10、s7，接種完以后的菌棒放于22℃房間內(nèi)，避光，控制二氧化碳濃度低于1000ppm，養(yǎng)菌，養(yǎng)菌30-35天后，接種處原基開始凸起，此時用利刃開口，出菇管理后進(jìn)行采收。

11、所述步驟s1中，培養(yǎng)基的配方為：玉米粉5g、磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂1g、水1l，所述玉米粉過篩80目。

12、所述步驟s3中，錐形瓶配方為：土豆200g、葡萄糖20g、水1l。

13、所述步驟s5中，發(fā)酵罐配方為：土豆粉0.5％、酵母粉0.5％、葡萄糖2％、磷酸二氫鉀0.15％、硫酸鎂0.15％。

14、所述步驟s6中，菌棒的配方為：闊葉木屑88％、麥麩11％、石膏1％，制作過程如下：按配方將材料加水拌勻后，調(diào)整濕度58％-60％，裝袋，滅菌后冷卻至25℃以下可以進(jìn)行接種。

15、所述步驟s7中，養(yǎng)菌的條件為：接種完以后的菌棒放于22℃房間內(nèi)，避光，控制二氧化碳濃度低于1000ppm。

16、所述步驟s7中，出菇管理具體過程如下：開好口的菌棒，轉(zhuǎn)移至出菇房，前15天控制濕度88-95％，二氧化碳濃度低于1000ppm，后15天增加光照，光照強(qiáng)度600-900lx，促進(jìn)其轉(zhuǎn)色。

17、所述步驟s7中，采收具體過程如下：金耳開口25-30天，顏色為金黃色，外形圓潤飽滿時，使用利刃割下，放于周轉(zhuǎn)筐內(nèi)。

18、與現(xiàn)有技術(shù)比較本發(fā)明的有益效果在于：

19、本發(fā)明中的金耳孢子制作簡單，且接種量容易控制，進(jìn)而金耳在菌棒發(fā)育成子實(shí)體時，時間一致，大小一致，工廠化出菇管理更加方便。金耳固體種直接做液體菌種，液體中含有金耳菌絲和革菌菌絲，接種到菌棒的金耳菌絲數(shù)量影響金耳在菌棒上發(fā)育成子實(shí)體的時間大小，通過金耳孢子接種時控制金耳孢子的量，就可以使其發(fā)育時間、大小一致。

技術(shù)特征：

1.一株金耳菌株dzhssje001，其特征在于，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號分別為cgmcc?no.41289，its序列如seq?no.1所示。

2.一種如權(quán)利要求1所述的金耳菌株dzhssje001的工廠化栽培方法，其特征在于，包括以下步驟：

3.如權(quán)利要求2所述的一種金耳菌株dzhssje001的工廠化栽培方法，其特征在于，所述步驟s1中，培養(yǎng)基的配方為：玉米粉5g、磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂1g、水1l，所述玉米粉過篩80目。

4.如權(quán)利要求2所述的一種金耳菌株dzhssje001的工廠化栽培方法，其特征在于，所述步驟s3中，錐形瓶配方為：土豆200g、葡萄糖20g、水1l。

5.如權(quán)利要求2所述的一種金耳菌株dzhssje001的工廠化栽培方法，其特征在于，所述步驟s5中，發(fā)酵罐配方為：土豆粉0.5％、酵母粉0.5％、葡萄糖2％、磷酸二氫鉀0.15％、硫酸鎂0.15％。

6.如權(quán)利要求2所述的一種金耳菌株dzhssje001的工廠化栽培方法，其特征在于，所述步驟s6中，菌棒的配方為：闊葉木屑88％、麥麩11％、石膏1％，制作過程如下：按配方將材料加水拌勻后，調(diào)整濕度58％-60％，裝袋，滅菌后冷卻至25℃以下可以進(jìn)行接種。

7.如權(quán)利要求2所述的一種金耳菌株dzhssje001的工廠化栽培方法，其特征在于，所述步驟s7中，養(yǎng)菌的條件為：接種完以后的菌棒放于22℃房間內(nèi)，避光，控制二氧化碳濃度低于1000ppm。

8.如權(quán)利要求2所述的一種金耳菌株dzhssje001的工廠化栽培方法，其特征在于，所述步驟s7中，出菇管理具體過程如下：開好口的菌棒，轉(zhuǎn)移至出菇房，前15天控制濕度88-95％，二氧化碳濃度低于1000ppm，后15天增加光照，光照強(qiáng)度600-900lx，促進(jìn)其轉(zhuǎn)色。

9.如權(quán)利要求2所述的一種金耳菌株dzhssje001的工廠化栽培方法，其特征在于，所述步驟s7中，采收具體過程如下：金耳開口25-30天，顏色為金黃色，外形圓潤飽滿時，使用利刃割下，放于周轉(zhuǎn)筐內(nèi)。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一株金耳菌株DZHSSJE001及其工廠化栽培方法，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號分別為CGMCC?NO.41289，ITS序列如SEQ?NO.1所示，培養(yǎng)狀態(tài)下呈酵母態(tài)，分生孢子卵圓形，大多為頂端出芽生殖，1.6?2.7x3.4?4.1μm，同時本發(fā)明還公開了這種金耳菌株DZHSSJE001的工廠化栽培方法，解決了金耳菌株工廠化栽培產(chǎn)量不佳的問題。

技術(shù)研發(fā)人員：許天修,馮劍鋒
受保護(hù)的技術(shù)使用者：東至河水山科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10