本發(fā)明屬于中藥多糖，具體涉及一種協(xié)同促進(jìn)神經(jīng)酰胺合成酶和/或透明質(zhì)酸合成酶表達(dá)的生物多糖及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、神經(jīng)酰胺是皮膚屏障—角質(zhì)層細(xì)胞間脂質(zhì)的主要成分，占細(xì)胞間脂質(zhì)的50％左右，神經(jīng)酰胺與皮膚角質(zhì)細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)通過酯鍵鏈接起到粘合細(xì)胞的作用，神經(jīng)酰胺的缺乏會導(dǎo)致角化細(xì)胞間黏著力下降，導(dǎo)致皮膚干燥，脫屑，呈鱗片狀，進(jìn)一步會引起皮膚瘙癢等癥。皮膚內(nèi)神經(jīng)酰胺是通過復(fù)雜的代謝途徑進(jìn)行內(nèi)生調(diào)控的，主要由其合成酶及分解酶來控制其在皮膚中的含量，其中關(guān)鍵影響因素是內(nèi)生合成。其內(nèi)生速度的關(guān)鍵在于神經(jīng)酰胺合成酶，該酶有六種亞型，每種亞型具有合成不同?；滈L神經(jīng)酰胺的能力。其中神經(jīng)酰胺合成酶2(cers2)是cers家族中表達(dá)最廣泛的基因，是影響神經(jīng)酰胺合成的關(guān)鍵限速酶。

2、透明質(zhì)酸是人類皮膚中所含天然保濕因子(nmf)的重要組成部分，它是一種酸性粘多糖，透明質(zhì)酸具有優(yōu)秀的保水作用，是目前發(fā)現(xiàn)的自然界中保濕性最好的物質(zhì)。人類皮膚成熟和老化過程也隨著透明質(zhì)酸的含量和新陳代謝而變化，皮膚透明質(zhì)酸的缺乏會使皮膚干燥、粗糙、松弛、褶皺等，反之透明質(zhì)酸的充盈，會使皮膚柔嫩、光滑、富有彈性等。皮膚中透明質(zhì)酸的含量受到其合成酶和分解酶的影響，尤其是受到其合成酶的影響，透明質(zhì)酸合成酶(hyaluronan?synthase?has)是一類在透明質(zhì)酸合成過程中關(guān)鍵的限速酶，has可催化合成相當(dāng)水平的透明質(zhì)酸，補(bǔ)充人體在不同階段與部位的透明質(zhì)酸。

3、中國發(fā)明專利申請cn110833516a公開了一種具有補(bǔ)水保濕作用的多肽組合物，該組合物包含可以增加水通道蛋白3含量的多肽、具有促進(jìn)透明質(zhì)酸生成或/和膠原蛋白生成作用的多肽，所述多肽組合物可以添加天然保濕因子，所述多肽組合物還可以進(jìn)一步添加海藻糖或/和多糖類保濕劑，本發(fā)明的多肽組合物通過不同活性成分的復(fù)配，作用于不同靶點，全方位發(fā)揮協(xié)同增效作用，可以實現(xiàn)優(yōu)異的補(bǔ)水保濕效果。但該發(fā)明專利中含有大量的化學(xué)成分多肽，不僅增加了產(chǎn)品的成本，且對產(chǎn)品的貯存條件要求較高。法國發(fā)明專利申請fr2984154a1中公開了利用提取稷(panicummiliaceum?fibers)中的活性成分作為化妝品活性原料，用于改善和/或修復(fù)皮膚屏障功能。但其作用效果有待進(jìn)一步提高。

4、因此亟需提供一種成本低、作用效果好的純中藥制劑用于促進(jìn)神經(jīng)酰胺合成酶和/或透明質(zhì)酸合成酶表達(dá)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，提供了一種協(xié)同促進(jìn)神經(jīng)酰胺合成酶和/或透明質(zhì)酸合成酶表達(dá)的生物多糖及其應(yīng)用。通過對中藥材山藥、玉竹交替式酶解、提取、除雜、分子截留、復(fù)配等工藝，制備出的適促進(jìn)神經(jīng)酰胺合成酶表達(dá)的生物多糖，該多糖還兼具促進(jìn)透明質(zhì)酸合成酶的表達(dá)，可以用在治療和預(yù)防因神經(jīng)酰胺合成酶及透明質(zhì)酸合成酶表達(dá)弱化，所引起干燥、瘙癢及皮膚屏障缺陷的外用制劑中。

2、本發(fā)明的第一個方面在于提供一種協(xié)同促進(jìn)神經(jīng)酰胺合成酶和/或透明質(zhì)酸合成酶表達(dá)的生物多糖，所述生物多糖由以下步驟制備得到：

3、(1)向藥材玉竹、山藥中加入水，先后用纖維素酶、甘露聚糖酶酶解，提取、過濾后，得濾液ⅰ和藥渣；

4、(2)向步驟(1)中的藥渣加入水，先后依次用纖維素酶、甘露聚糖酶酶解，提取、過濾后，得濾液ⅱ；

5、(3)合并濾液ⅰ、濾液ⅱ，截取分子量小于3000道爾頓的部分，經(jīng)300道爾頓膜濃縮設(shè)備濃縮，得到生物多糖濃縮液；

6、(4)將生物多糖濃縮液干燥，即得。

7、優(yōu)選地，所述步驟(1)中玉竹與山藥的質(zhì)量比為1:9-9:1，優(yōu)選3:7。

8、優(yōu)選地，所述步驟(1)中水的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的8-15倍。

9、優(yōu)選地，所述步驟(1)中纖維素酶的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的0.5-2％，酶解溫度為50-70℃，酶解時間為30-60分鐘。

10、優(yōu)選地，所述步驟(1)中甘露聚糖酶的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的0.5-2％，酶解溫度為50-70℃，酶解時間為10-15分鐘。

11、優(yōu)選地，所述步驟(1)中提取溫度為95℃以上，提取時間為30-60分鐘。

12、優(yōu)選地，所述步驟(2)中水的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的5-10倍。

13、優(yōu)選地，所述步驟(2)中纖維素酶的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的0.5-2％，酶解溫度為50-70℃，酶解時間為30-60分鐘。

14、優(yōu)選地，所述步驟(2)中甘露聚糖酶的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的0.5-2％，酶解溫度為50-70℃，酶解時間為10-15分鐘。

15、優(yōu)選地，所述步驟(2)中提取溫度為95℃以上，提取時間為30-60分鐘。

16、優(yōu)選地，所述步驟(3)中濃縮至投入藥材質(zhì)量的80％。

17、優(yōu)選地，所述步驟(4)中干燥為減壓干燥或冷凍干燥。

18、優(yōu)選地，所述步驟(4)中生物多糖濃縮液不經(jīng)過低溫干燥，而是直接將生物多糖濃縮液配制成藥材等重的溶液，其方法為：加入丁二醇、丙二醇、甘油、二丙二醇中的一種或兩種，至質(zhì)量含量為5％，加入防腐劑，并補(bǔ)充去離子水至藥材等重。

19、進(jìn)一步優(yōu)選地，所述防腐劑為1,2-己二醇、對羥基苯乙酮中的至少一種。所述1,2-己二醇的添加質(zhì)量為0.5-3％，優(yōu)選0.5％；所述對羥基苯乙酮的添加質(zhì)量為0.1-1％，優(yōu)選0.5％。

20、本發(fā)明的第二個方面涉及上述生物多糖在制備治療和/或預(yù)防神經(jīng)酰胺和/或透明質(zhì)酸缺乏癥藥物中的應(yīng)用。

21、優(yōu)選地，所述藥物為外用制劑。

22、玉竹，為百合科植物玉竹polygonatum?odoratum(mill.)druce的干燥根莖，具有養(yǎng)陰潤燥，生津止渴的功效?，F(xiàn)代研究表明，玉竹具有較好的抗氧化、降血糖、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫和抑菌等作用。

23、山藥，別名懷山藥、淮山藥、土薯等，中藥材名，為薯蕷科植物薯蕷的塊莖，具有健脾補(bǔ)肺、益胃補(bǔ)腎、固腎益精、聰耳明目、助五臟、強(qiáng)筋骨、長志安神、延年益壽的功效?，F(xiàn)代研究表明，山藥具有較好的免疫調(diào)節(jié)、降血糖、抗衰老、降脂、消炎和抑菌增作用。

24、相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有以下有益效果：通過將山藥、玉竹進(jìn)行纖維素酶和甘露聚糖酶交替式酶解、提取、除雜、分子截留、復(fù)配工藝，制備出的分子量在300-3000的適促進(jìn)神經(jīng)酰胺合成酶表達(dá)的生物多糖，該多糖還兼具促進(jìn)透明質(zhì)酸合成酶的表達(dá)，可以用在治療和預(yù)防因神經(jīng)酰胺合成酶及透明質(zhì)酸合成酶表達(dá)弱化，所引起干燥、瘙癢及皮膚屏障缺陷的外用制劑中。

技術(shù)特征：

1.一種協(xié)同促進(jìn)神經(jīng)酰胺合成酶和/或透明質(zhì)酸合成酶表達(dá)的生物多糖，其特征在于，所述生物多糖由以下步驟制備得到：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物多糖，其特征在于，所述步驟(1)中玉竹與山藥的質(zhì)量比為1:9-9:1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物多糖，其特征在于，所述步驟(1)中水的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的8-15倍；所述步驟(1)中纖維素酶的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的0.5-2％，酶解溫度為50-70℃，酶解時間為30-60分鐘；所述步驟(1)中甘露聚糖酶的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的0.5-2％，酶解溫度為50-70℃，酶解時間為10-15分鐘。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物多糖，其特征在于，所述步驟(2)中水的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的5-10倍；所述步驟(2)中纖維素酶的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的0.5-2％，酶解溫度為50-70℃，酶解時間為30-60分鐘；所述步驟(2)中甘露聚糖酶的加入質(zhì)量為藥材質(zhì)量的0.5-2％，酶解溫度為50-70℃，酶解時間為10-15分鐘。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物多糖，其特征在于，所述步驟(1)和步驟(2)中提取溫度獨立的選自95℃以上，提取時間獨立選自30-60分鐘。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物多糖，其特征在于，所述步驟(3)中濃縮為濃縮至藥材質(zhì)量的80％。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物多糖，其特征在于，所述步驟(4)中干燥為減壓干燥或冷凍干燥。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物多糖，其特征在于，所述步驟(4)中生物多糖濃縮液不經(jīng)過低溫干燥，而是直接將生物多糖濃縮液配制成藥材等重的溶液，其方法為：加入丁二醇、丙二醇、甘油、二丙二醇中的一種或兩種，至質(zhì)量含量為5％，加入防腐劑，并補(bǔ)充去離子水至藥材等重。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的生物多糖，其特征在于，所述防腐劑為1,2-己二醇、對羥基苯乙酮中的至少一種；所述1,2-己二醇的添加質(zhì)量為0.5-3％；所述對羥基苯乙酮的添加質(zhì)量為0.1-1％。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項所述的生物多糖在制備治療和/或預(yù)防神經(jīng)酰胺和/或透明質(zhì)酸缺乏癥外用制劑中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種協(xié)同促進(jìn)神經(jīng)酰胺合成酶和/或透明質(zhì)酸合成酶表達(dá)的生物多糖及其應(yīng)用，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。所述生物多糖以玉竹和山藥為原料，通過交替式酶解、提取、除雜、分子截留、復(fù)配等工藝，制備出的適促進(jìn)神經(jīng)酰胺合成酶表達(dá)的生物多糖，該多糖還兼具促進(jìn)透明質(zhì)酸合成酶的表達(dá)，可以用在治療和預(yù)防因神經(jīng)酰胺合成酶及透明質(zhì)酸合成酶表達(dá)弱化，所引起干燥、瘙癢及皮膚屏障缺陷的外用制劑中。

技術(shù)研發(fā)人員：張志強(qiáng),翟春濤,楊麗娟,金敏蓉
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海植納生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/11/11