本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，具體涉及一種環(huán)狀rna?circtcons及其應用。

背景技術：

1、乳腺癌發(fā)病率逐年上升，已成為女性惡性腫瘤中發(fā)病率及死亡率第一位的癌種，嚴重危害女性健康。三陰乳腺癌(triple?negative?breast?cancer，tnbc)是雌激素受體、孕激素受體、人表皮生長因子受體2表達均為陰性的一類乳腺癌,作為預后最差的亞型約占乳腺癌15％，其中約30％-40％患者在隨訪期內(nèi)出現(xiàn)轉移等惡性結果。由于三陰乳腺癌缺乏有效的治療靶點，治療手段有限，相比于其他類型的乳腺癌其預后最差。

2、tnbc被分為六種亞型，免疫調節(jié)型(im)、管腔雄激素受體型(lar)、基底樣1型(bl-1)、基底樣2型(bl-2)、間充質型(m)和間充質干細胞樣型(msl)。這些類型根據(jù)其基因表達組合進行分類。pam50基因固有亞型分析顯示，tnbc中1.6％為管腔a型，3.2％為管腔b型，9.1％為her2過表達，只有86.1％為blbc。越來越多的研究關注ihc替代因子，如ck5/6或ck17ck5/6或p-鈣黏著蛋白(鈣黏素)、ck5/6或ck14均提示基底樣分化，不同的因子具有不同程度的準確性。egfr和ckit同樣與blbc相關。另外一些標志物如p63、平滑肌肌動蛋白(sma)、陷窩蛋白和周期蛋白e也越來越多的被提出，盡管這些因子沒有被納入最新的美國臨床腫瘤學會(asco)指南，但它們對輔助分型、預后評估和治療都有重要作用。

3、基于血液樣本的液體活檢是一類無創(chuàng)診斷方法，通過在血液標本中分析循環(huán)腫瘤細胞(ctc)和循環(huán)腫瘤核酸(ctna)包括循環(huán)腫瘤dna(ctdna)和microrna(mirna)的存在。在癌癥患者血液中發(fā)現(xiàn)的ctdna通常來自原發(fā)腫瘤、ctc、以及腫瘤發(fā)生和進展過程中凋亡和壞死的細胞。血液中腫瘤ctdna的含量取決于原發(fā)灶或轉移灶的大小，因此ctdna的含量可以反應腫瘤負荷的大小。然而，ctc和ctdna半衰期較短，穩(wěn)定性較差，成熟穩(wěn)定表達時間較短，離體標本提取較為困難。且目前多項以ctdna作為診斷或者預后標記物的臨床研究未獲得陽性結果，其準確性及可靠性仍待商榷。

4、因此，迫切需要研發(fā)精確、高效、成本低廉且普適性高的三陰乳腺癌早期診斷、療效預測標記物，以用于臨床三陰乳腺癌早期診斷和預后風險評估。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術的不足之處而提供一種環(huán)狀rna?circtcons及其應用。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術方案如下：

3、第一方面，本發(fā)明提供了一種用于評估三陰乳腺癌預后情況的環(huán)狀rna，所述rna為環(huán)狀rna?circtcons。

4、本發(fā)明的環(huán)狀rnacirctcons在不同基因亞型的三陰性乳腺癌中均高表達，circtcons直接干預細胞骨架蛋白的折疊影響三陰性乳腺癌轉移，可作為三陰性乳腺癌的診斷及預后標記物，彌補了ihc和基因檢測的不足，普適性好，可在所有的三陰乳腺癌患者中進行檢測；本發(fā)明的診斷及預后標記物circtcons成環(huán)性好，體內(nèi)及體外穩(wěn)定性好，無論在體內(nèi)還是體外組織中均可鑒定檢測。

5、作為本發(fā)明所述的用于評估三陰乳腺癌預后情況的環(huán)狀rna的優(yōu)選實施方式，所述環(huán)狀rna?circtcons的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。

6、第二方面，本發(fā)明將識別所述的環(huán)狀rna的標記物在制備診斷治療三陰乳腺癌的試劑中應用，所述的標記物包括但不限于：

7、(1)結合所述環(huán)狀rna的引物/引物組或熒光標記的結合所述環(huán)狀rna的引物/引物組；

8、(2)結合所述環(huán)狀rna的小分子化合物；

9、(3)結合所述環(huán)狀rna的生物大分子，所述的生物大分子包括但不限于：抗體或抗體功能片段、熒光標記的抗體或抗體功能片段、rna結合蛋白或其功能片段、熒光標記的rna結合蛋白或其功能片段。

10、第三方面，本發(fā)明將識別所述的環(huán)狀rna的標記物在制備評估三陰乳腺癌預后情況的產(chǎn)品中應用，所述的標記物包括但不限于：

11、(1)結合所述環(huán)狀rna的引物/引物組或熒光標記的結合所述環(huán)狀rna的引物/引物組；

12、(2)結合所述環(huán)狀rna的小分子化合物；

13、(3)結合所述環(huán)狀rna的生物大分子，所述的生物大分子包括但不限于：抗體或抗體功能片段、熒光標記的抗體或抗體功能片段、rna結合蛋白或其功能片段、熒光標記的rna結合蛋白或其功能片段。

14、第四方面，本發(fā)明提供一種用于評估三陰乳腺癌預后情況的試劑或試劑盒，其特征在于，包含所述的標記物。

15、第五方面，本發(fā)明將所述的環(huán)狀rna在制備診斷三陰乳腺癌的試劑中應用，所述試劑用于識別所述環(huán)狀rna。

16、第六方面，本發(fā)明將所述的環(huán)狀rna在制備治療三陰乳腺癌的藥物中應用，所述藥物用于沉默或敲除所述環(huán)狀rna。

17、第七方面，本發(fā)明將所述的環(huán)狀rna在制備篩選判斷三陰乳腺癌預后情況的評估試劑中應用。

18、與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果為：

19、本發(fā)明的環(huán)狀rnacirctcons在不同基因亞型的三陰性乳腺癌中均高表達，circtcons直接干預細胞骨架蛋白的折疊影響三陰性乳腺癌轉移，可作為三陰性乳腺癌的診斷及預后標記物，彌補了ihc和基因檢測的不足，普適性好，可在所有的三陰乳腺癌患者中進行檢測；本發(fā)明的診斷及預后標記物circtcons成環(huán)性好，體內(nèi)及體外穩(wěn)定性好，無論在體內(nèi)還是體外組織中均可鑒定檢測。本發(fā)明解決了三陰乳腺癌缺乏精確、高效、成本低廉且普適性高的早期診斷、療效預測標記物的難題。

技術特征：

1.一種用于評估三陰乳腺癌預后情況的環(huán)狀rna，其特征在于，所述rna為環(huán)狀rnacirctcons。

2.根據(jù)權利要求1所述的用于評估三陰乳腺癌預后情況的環(huán)狀rna，其特征在于，所述環(huán)狀rna?circtcons的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。

3.識別權利要求1所述的環(huán)狀rna的標記物在制備診斷治療三陰乳腺癌的試劑中的應用，其特征在于，所述的標記物包括但不限于：

4.識別權利要求1所述的環(huán)狀rna的標記物在制備評估三陰乳腺癌預后情況的產(chǎn)品中的應用，其特征在于，所述的標記物包括但不限于：

5.一種用于評估三陰乳腺癌預后情況的試劑或試劑盒，其特征在于，包含權利要求4所述的標記物。

6.權利要求1或2所述的環(huán)狀rna在制備診斷三陰乳腺癌的試劑中的應用，其特征在于，所述試劑用于識別所述環(huán)狀rna。

7.權利要求1或2所述的環(huán)狀rna在制備治療三陰乳腺癌的藥物中的應用，其特征在于，所述藥物用于沉默或敲除所述環(huán)狀rna。

8.權利要求1或2所述的環(huán)狀rna在制備篩選判斷三陰乳腺癌預后情況的評估試劑中的應用。

技術總結
本發(fā)明屬生物醫(yī)藥技術領域，公開了一種環(huán)狀RNA?circTCONS及其應用。本發(fā)明的環(huán)狀RNAcircTCONS在不同基因亞型的三陰性乳腺癌中均高表達，circTCONS直接干預細胞骨架蛋白的折疊影響三陰性乳腺癌轉移，可作為三陰性乳腺癌的診斷及預后標記物，彌補了IHC和基因檢測的不足，普適性好，可在所有的三陰乳腺癌患者中進行檢測；本發(fā)明的診斷及預后標記物circTCONS成環(huán)性好，體內(nèi)及體外穩(wěn)定性好，無論在體內(nèi)還是體外組織中均可鑒定檢測。

技術研發(fā)人員：毛璐會,畢卓菲,姚和瑞,游凱云
受保護的技術使用者：中山大學孫逸仙紀念醫(yī)院
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/10/10