本發(fā)明涉及煙草加工,尤其涉及一種果香型煙草增香發(fā)酵液、發(fā)酵方法及應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、目前雪茄煙葉原料存在香氣豐富性不足等問題,通過利用微生物對雪茄煙葉進(jìn)行發(fā)酵,可以有效改善煙葉品質(zhì),提升雪茄煙葉質(zhì)量。已有相關(guān)研究選用了貝萊斯芽孢桿菌(cn117821310a)、將其接種至雪茄煙葉進(jìn)行發(fā)酵,進(jìn)而提升了雪茄奶香香韻,改善雪茄整體風(fēng)味。果香香韻是雪茄煙葉的關(guān)鍵香韻成分之一,果香風(fēng)味成分能豐富煙香,減輕刺激感,且能增加煙葉潤感。目前報道的產(chǎn)果香微生物多為真菌如甘薯長喙殼真菌(cn106978352a)、果香型酵母(cn111213901a)、光滑假絲酵母(cn113416659a),多用于酒精發(fā)酵和果汁釀造。篩選特色產(chǎn)果香增香微生物,進(jìn)行雪茄煙葉發(fā)酵,提升雪茄煙葉果香香韻,目前尚未有相關(guān)研究報道。因此,利用生物技術(shù)手段,選用特色產(chǎn)果香微生物,利用微生物發(fā)酵增加雪茄煙葉風(fēng)味,提升國產(chǎn)雪茄煙葉的品質(zhì),是本領(lǐng)域技術(shù)人員亟需解決的問題。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的就在于為了解決上述問題而提供一種果香型煙草增香發(fā)酵液、發(fā)酵方法及應(yīng)用,本發(fā)明的發(fā)酵液可以使得雪茄煙葉發(fā)酵增香、提升煙葉果香香韻。
2、本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)上述目的:
3、一種果香型煙草增香發(fā)酵液,所述發(fā)酵液中含有馬胃葡萄球菌,所述馬胃葡萄球菌(staphylococcus?equorum),保藏于美國標(biāo)準(zhǔn)菌株保藏中心,保藏編號為atcc?43958。馬胃葡萄球菌菌落顏色為乳白色不透明,菌落橢圓形或不規(guī)則,邊緣整齊中間略有突起。
4、進(jìn)一步方案為,所述發(fā)酵液包括如下(1)或(2)所示的一種或兩種:(1)馬胃葡萄球菌的菌群和/或菌劑;
5、(2)馬胃葡萄球菌的培養(yǎng)物、溶胞物和/或提取物。
6、本發(fā)明另一方面還提供了一種果香型煙草增香的發(fā)酵方法,包括以下步驟:
7、步驟1、將馬胃葡萄球菌活化,并于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到菌種培養(yǎng)液;
8、步驟2、將步驟1中菌種培養(yǎng)液取以6000-8000r/min條件下離心,棄掉上清液,用無菌去離子水對濕菌體進(jìn)行重懸,得到菌懸液,將菌懸液噴施至煙葉;再將步驟1的離心去除菌體的培養(yǎng)液噴施在煙葉或者煙末表面。
9、步驟3、將步驟2中煙葉或者煙末在恒溫恒濕條件下發(fā)酵。
10、進(jìn)一步方案為,所述步驟1中,所述液體培養(yǎng)基為:蛋白胨5g、葡萄糖5g、nacl?10g、cacl2?1.0g、水1000ml,溶解后于121℃高壓滅菌20min。
11、進(jìn)一步方案為,所述步驟1中,培養(yǎng)時間為12-72h。
12、進(jìn)一步方案為,所述步驟2中,菌懸液噴施量為煙葉質(zhì)量的2-35%,菌種培養(yǎng)液噴施噴施量為煙葉質(zhì)量的1-30%。
13、進(jìn)一步方案為,所述步驟3中,發(fā)酵溫度為24-40℃,濕度為40-90%,發(fā)酵時間為24-120h。
14、進(jìn)一步方案為,所述步驟1中菌體培養(yǎng)時間為36h;
15、所述步驟2中菌懸液噴施量為雪茄煙葉質(zhì)量的10%,離心去除菌體的培養(yǎng)液噴施量為雪茄煙葉質(zhì)量的5%;
16、所述步驟3中發(fā)酵溫度為30℃,濕度為70%,發(fā)酵時間為72h。
17、本發(fā)明另一方面還提供了上述的發(fā)酵液在煙草發(fā)酵中的應(yīng)用。
18、本發(fā)明另一方面還提供了上述的馬胃葡萄球菌在煙草發(fā)酵中的應(yīng)用。
19、本發(fā)明的有益效果在于:
20、本發(fā)明的一種果香型煙草增香發(fā)酵液、發(fā)酵方法及應(yīng)用,通過選用馬胃葡萄球菌產(chǎn)生果香成分3-甲基丁酸、2-甲基丁酸,除此之外還產(chǎn)生了甜香成分3,5-二羥基-3-甲基戊酸內(nèi)酯,且含量較高;該菌種產(chǎn)生的果甜香香韻豐富自然,特別適合煙草及煙草制品應(yīng)用;利用該微生物發(fā)酵雪茄煙葉,工藝簡單、條件簡便、操作方便,無需特殊處理;利用該微生物發(fā)酵雪茄煙葉,可用原料適用范圍廣,且適合大規(guī)模發(fā)酵與生產(chǎn)。
1.一種果香型煙草增香發(fā)酵液,其特征在于,所述發(fā)酵液中含有馬胃葡萄球菌,所述馬胃葡萄球菌(staphylococcus?equorum),保藏于美國標(biāo)準(zhǔn)菌株保藏中心,保藏編號為atcc43958。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)酵液,其特征在于,所述發(fā)酵液包括如下(1)或(2)所示的一種或兩種:(1)馬胃葡萄球菌的菌群和/或菌劑;
3.一種果香型煙草增香的發(fā)酵方法,其特征在于,包括以下步驟:
4.如權(quán)利要求3所述的一種果香型煙草增香的發(fā)酵方法,其特征在于,所述步驟1中,所述液體培養(yǎng)基為:蛋白胨5g、葡萄糖5g、nacl?10g、cacl2?1.0g、水1000ml,溶解后于121℃高壓滅菌20min。
5.如權(quán)利要求3所述的一種果香型煙草增香的發(fā)酵方法,其特征在于,所述步驟1中,培養(yǎng)時間為12-72h。
6.如權(quán)利要求3所述的一種果香型煙草增香的發(fā)酵方法,其特征在于,所述步驟2中,菌懸液噴施量為煙葉質(zhì)量的2-35%,菌種培養(yǎng)液噴施噴施量為煙葉質(zhì)量的1-30%。
7.如權(quán)利要求3所述的一種果香型煙草增香的發(fā)酵方法,其特征在于,所述步驟3中,發(fā)酵溫度為24-40℃,濕度為40-90%,發(fā)酵時間為24-120h。
8.如權(quán)利要求3所述的一種果香型煙草增香的發(fā)酵方法,其特征在于,所述步驟1中菌體培養(yǎng)時間為36h;
9.如權(quán)利要求1-2任一項所述的發(fā)酵液在煙草發(fā)酵中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求1-2任一項所述的馬胃葡萄球菌在煙草發(fā)酵中的應(yīng)用。