本發(fā)明涉及真菌的發(fā)酵培養(yǎng)工藝，具體公開用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、蝙蝠蛾擬青霉(paecilomyces?hepiali)，是從野生冬蟲夏草中分離得到的一種蟲生真菌，1989年由中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所從云南省迪慶州白馬雪山采集的冬蟲夏草樣品(昆蟲為蟲草蝙蝠蛾的幼蟲)上分離獲得，經(jīng)鑒定命名為“蝙蝠蛾擬青霉”，隸屬叢梗孢科瓶梗青霉屬。利用蝙蝠蛾擬青霉菌株通過深層液態(tài)發(fā)酵法產(chǎn)生的蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中含有與冬蟲夏草一致的功能性成分，其優(yōu)勢在于能夠人工控制產(chǎn)生大量的菌絲體，同時(shí)菌絲體做為蝙蝠蛾擬青霉的初始形態(tài)，其多種功能性成分的含量均高于子實(shí)體。蝙蝠蛾擬青霉菌絲體黃棕色、氣香、味微苦，被國家市場監(jiān)督管理總局批準(zhǔn)為可用于保健食品的真菌菌種。

2、蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中含有腺苷、多糖、多肽、不飽和脂肪酸等營養(yǎng)物質(zhì)，其中，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體中的腺苷含量也是考察蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉質(zhì)量水平主要指標(biāo)之一(中國藥典規(guī)定腺苷含量≥0.2％為合格蟲草菌粉)；蝙蝠蛾擬青酶菌絲體多糖還具有抗氧化、抗炎、免疫改善等藥理學(xué)活性。因此，蝙蝠娥擬青霉菌的大規(guī)模、高質(zhì)量的工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)對于促進(jìn)人們身體健康，提高生活質(zhì)量具有重要意義。公開號為cn112322504a的中國專利“一種增加蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵菌絲體中腺苷含量的方法”，其中具體公開了在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加了肌苷酸來提高蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉中的腺苷含量，還能提高蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉產(chǎn)量。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提高蝙蝠蛾擬青霉菌絲體微粉的抗氧化活性，進(jìn)而提供用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

2、本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

3、本發(fā)明提供用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基，由以下重量份的原料組成：葡萄糖20-60份、蛋白胨10-40份、酵母粉10-40份、磷酸二氫鉀1-4份、七水硫酸鎂1-3份和抗氧化前體混合物1-5份；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的ph為5.0-6.5。

4、作為優(yōu)選的實(shí)施方案，用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基，包括以下重量份的原料：葡萄糖30份、蛋白胨20份、酵母粉20份、磷酸二氫鉀2份、七水硫酸鎂1份和抗氧化前體混合物2份。

5、作為優(yōu)選的實(shí)施方案，所述抗氧化前體混合物包括獼猴桃果皮提取物、葡萄籽提取物和蘑菇提取物；所述獼猴桃果皮提取物、葡萄籽提取物和蘑菇提取物等比混合。

6、作為優(yōu)選的實(shí)施方案，所述抗氧化前體混合物的制備方法包括以下步驟：

7、(1)取獼猴桃果皮、葡萄籽和蘑菇干燥后粉碎制成粉末；

8、(2)將獼猴頭果皮粉末、葡萄籽粉末和蘑菇粉末進(jìn)行水提至少2次，每次提取時(shí)間1-1.5h，獲得獼猴桃果皮提取物、葡萄籽提取物、蘑菇提取物；

9、(3)合并三種提取物后進(jìn)行吸附、脫附，脫附液在溫度為70℃、真空度≥-0.06mpa的條件下進(jìn)行濃縮、干燥，過篩后獲得抗氧化前體混合物。

10、作為優(yōu)選的實(shí)施方案，所述步驟(2)中獼猴頭果皮粉末、葡萄籽粉末和蘑菇粉末進(jìn)行水提的料液比為1：(4-5)，水提溫度≥85℃。

11、作為優(yōu)選的實(shí)施方案，所述步驟(3)中吸附劑采用硅膠，以含水流動相為洗脫劑進(jìn)行脫附。

12、本發(fā)明還提供一種產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的制備方法，利用上述述用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)擬青霉菌株。

13、作為優(yōu)選的實(shí)施方案，產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的制備方法，包括以下步驟

14、s1、按重量份將葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氫鉀、七水硫酸鎂和抗氧化前體混合物加入發(fā)酵罐中，在120-125℃下進(jìn)行蒸汽消毒至少30min；

15、s2、使用冷凍水循環(huán)將發(fā)酵罐內(nèi)培養(yǎng)基原料降溫至25℃后，將另一發(fā)酵罐中的擬青霉菌株種子液通過管道傳輸至裝有培養(yǎng)基原料發(fā)酵罐中，保持發(fā)酵罐溫度20-28℃、發(fā)酵培養(yǎng)5-7d；

16、s3、發(fā)酵完成后，獲得菌餅經(jīng)進(jìn)行低溫連續(xù)真空干燥超微粉碎后即得產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體擬青霉菌絲體微粉。

17、作為優(yōu)選的實(shí)施方案，所述步驟s2中擬青霉菌株種子液采用paecilomyceshepiali?3.14870菌株，保藏編號11-137，來源是中國科學(xué)院微生研究所。

18、相較于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有如下有益效果：

19、1、本發(fā)明在用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基中加入包括獼猴桃果皮提取物、葡萄籽提取物和蘑菇提取物的抗氧化前體混合物，抗氧化前體混合物富含黃酮類、多酚類物質(zhì)、硒元素等，能直接被微生物在生物合成過程中結(jié)合到產(chǎn)物分子中去，在不改變發(fā)酵培養(yǎng)基理化性質(zhì)的前提下，利用該發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)能夠提高擬青霉菌絲體中抗氧化活性物質(zhì)含量，增強(qiáng)擬青霉菌絲體微粉的抗氧化性能力。

20、2、利用本發(fā)明提供的培養(yǎng)基及制備方法制備出來的擬青霉菌絲體及其鏟平，抗氧化活性高，尿苷含量高，同時(shí)具有增強(qiáng)免疫力、抗炎鎮(zhèn)痛，緩解體力疲勞，止咳、祛痰、平喘、預(yù)防呼吸系統(tǒng)感染等功效。

21、3、本發(fā)明利用提供的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行擬青霉菌絲體發(fā)酵培養(yǎng)以及相關(guān)微粉產(chǎn)品制備，生產(chǎn)成本低、周期短、不受環(huán)境條件限制，適合大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)和推廣。

22、4、本發(fā)明在利用提供的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)菌絲體時(shí)，使用連續(xù)真空干燥機(jī)對收濾得到的菌絲體進(jìn)行干燥處理，保持菌重要活性物質(zhì)不受高溫破壞，有效保留了菌絲體中活性物質(zhì)的抗氧化活性。

技術(shù)特征：

1.用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于：由以下重量份的原料組成：葡萄糖20-60份、蛋白胨10-40份、酵母粉10-40份、磷酸二氫鉀1-4份、七水硫酸鎂1-3份和抗氧化前體混合物1-5份；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的ph為5.0-6.5。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于：包括以下重量份的原料：葡萄糖30份、蛋白胨20份、酵母粉20份、磷酸二氫鉀2份、七水硫酸鎂1份和抗氧化前體混合物2份。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于：所述抗氧化前體混合物包括獼猴桃果皮提取物、葡萄籽提取物和蘑菇提取物；所述獼猴桃果皮提取物、葡萄籽提取物和蘑菇提取物等比混合。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于：所述抗氧化前體混合物的制備方法包括以下步驟：

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于：所述步驟(2)中獼猴頭果皮粉末、葡萄籽粉末和蘑菇粉末進(jìn)行水提的料液比為1：(4-5)，水提溫度≥85℃。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于：所述步驟(3)中吸附劑采用硅膠，以含水流動相為洗脫劑進(jìn)行脫附。

7.一種產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的制備方法，其特征在于：利用如權(quán)利要求1至6任一所述的用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)擬青霉菌株。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的制備方法，其特征在于，包括以下步驟

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的制備方法，其特征在于，所述步驟s2中擬青霉菌株種子液采用paecilomyces?hepiali?3.14870菌株，保藏編號11-137，來源是中國科學(xué)院微生研究所。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及真菌的發(fā)酵培養(yǎng)工藝技術(shù)領(lǐng)域，具體公開用于產(chǎn)高抗氧化性擬青霉菌絲體微粉的發(fā)酵培養(yǎng)基及其應(yīng)用。其中發(fā)酵培養(yǎng)基由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸二氫鉀、七水硫酸鎂和前體混合物利組成，利用本發(fā)明提供的培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)制備的擬青霉菌絲體粉，抗氧化活性高，生產(chǎn)成本低、周期短、不受環(huán)境條件限制，適合大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)和推廣。

技術(shù)研發(fā)人員：高益槐,鄭春源,李頁瑞,黃雪峰,郭晨
受保護(hù)的技術(shù)使用者：安發(fā)（福建）生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10