本發(fā)明涉及基因工程，特別是涉及一種調(diào)控小麥真菌病害抗性的 tamyb1基因、tamyb1蛋白及其應(yīng)用和獲取方法。

背景技術(shù)：

1、小麥?zhǔn)且环N禾本科谷物，其為世界上僅次于水稻的第二大糧食作物。我國是世界上小麥生產(chǎn)與消費(fèi)大國,常年種植面積為2400萬公頃左右,年產(chǎn)量近1.3億噸。作為氣傳性病害可以遠(yuǎn)距離傳播，一旦氣候條件適宜，又有充足的菌種量，會造成病害大流行，嚴(yán)重威脅我國小麥生產(chǎn)和糧食安全。小麥條銹病因其潛在危害性被列入了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《一類農(nóng)作物病蟲害名錄》（2023年）。選育抗病品種是防治小麥條銹病最經(jīng)濟(jì)、安全、有效的方法。當(dāng)前，通過基因工程育種獲得具有抗病性的作物品種是一種行之有效的方法。而該方法中最關(guān)鍵的技術(shù)瓶頸問題是有效抗病基因的篩選與功能發(fā)現(xiàn)。

2、myb轉(zhuǎn)錄因子由轉(zhuǎn)錄激活區(qū)、負(fù)調(diào)控區(qū)以及dna?結(jié)合區(qū)3部分組成，每個區(qū)域的保守性和功能各不相同，dna結(jié)合區(qū)的myb?domain重復(fù)序列為myb的特征識別區(qū)。根據(jù)mybdomain?中重復(fù)序列的位置和數(shù)量，myb?轉(zhuǎn)錄因子可分為1r－myb（mybrelated）、2r－myb（r2r3－myb）、3r－myb、4r－myb?4?個亞家族，myb?domain?重復(fù)數(shù)量的差異影響了各亞家族成員的功能，并且各亞家族的功能具有差異。1r-myb?能調(diào)控晝夜節(jié)律等過程，2r-myb?在響應(yīng)非生物脅迫、花青素生物合成等過程中能發(fā)揮調(diào)控作用，3r-myb?能控制細(xì)胞有絲分裂的過程，4r-myb?對配子體發(fā)育等過程一定影響。目前該家族成員在小麥多重病害的功能尚未見報道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種調(diào)控小麥真菌病害抗性的 tamyb1基因、tamyb1蛋白及其應(yīng)用和獲取方法。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明提供了一種調(diào)控小麥真菌病害抗性的 tamyb1基因，所述 tamyb1基因的cnda核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

4、本發(fā)明還提供了一種調(diào)控小麥真菌病害抗性的tamyb1蛋白，所述tamyb1蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

5、優(yōu)選的，所述小麥真菌病害包括小麥條銹病和/或小麥白粉病。

6、本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述的 tamyb1基因或上述技術(shù)方案所述的tamyb1蛋白在調(diào)控小麥真菌病害抗性中的應(yīng)用。

7、優(yōu)選的，抑制 tamyb1基因表達(dá)提高小麥真菌病害抗性。

8、優(yōu)選的，所述小麥真菌病害包括小麥條銹病和/或小麥白粉病。

9、本發(fā)明還提供了一種感病性小麥植株的獲取方法，包括以下步驟：

10、1）將myb1vigs片段連接到pcabs-γ載體中，得到pcabs-γ-myb1vigs重組載體；

11、所述myb1vigs片段的核苷酸序列如seq?id?no.3所示；

12、2）將pcabs-α載體、pcabs-β載體和步驟1）得到的pcabs-γ-myb1vigs重組載體分別導(dǎo)入到農(nóng)桿菌中，得到pcabs-α重組菌、pcabs-β重組菌和pcabs-γ-myb1vigs重組菌；

13、3）將所述步驟2）得到的pcabs-α重組菌、pcabs-β重組菌和pcabs-γ-myb1vigs重組菌等濃度混合后注射到本生煙，7~10d后，獲取本生煙的注射葉的汁液；

14、4）將所述步驟3）得到的汁液接種小麥植株，得到感病性小麥植株。

15、優(yōu)選的，所述步驟1）myb1vigs片段和pcabs-γ載體都經(jīng)apai限制性內(nèi)切酶酶切后再連接。

16、優(yōu)選的，所述步驟1）獲取myb1vigs片段使用的上游引物的核苷酸序列如seq?idno.4所示，下游引物的核苷酸序列如seq?id?no.5所示。

17、優(yōu)選的，所述pcabs-α重組菌、pcabs-β重組菌和pcabs-γ-myb1vigs重組菌的濃度都為4×107?cfu/ml，注射量為2?μl/葉片。

18、本發(fā)明的有益效果：

19、將本發(fā)明的抗條銹病相關(guān)蛋白的編碼基因干涉（即抑制基因的表達(dá)）后可以降低植物對條銹病、白粉病的感病性，如條銹病的侵染型顯著降低，可獲得對條銹病抗性提高的轉(zhuǎn)基因植株，以作為篩選的防治小麥病害的藥物。因此，本發(fā)明多重病害抗性的相關(guān)蛋白及其基因?qū)ε嘤箺l銹病、白粉病的作物具有重要的意義，適合于推廣應(yīng)用。

技術(shù)特征：

1.一種調(diào)控小麥真菌病害抗性的tamyb1基因，其特征在于，所述tamyb1基因的cnda核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

2.一種調(diào)控小麥真菌病害抗性的tamyb1蛋白，其特征在于，所述tamyb1蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的tamyb1基因或權(quán)利要求2所述的tamyb1蛋白，其特征在于，所述小麥真菌病害包括小麥條銹病和/或小麥白粉病。

4.權(quán)利要求1所述的tamyb1基因或權(quán)利要求2所述的tamyb1蛋白在調(diào)控小麥真菌病害抗性中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，抑制tamyb1基因表達(dá)提高小麥真菌病害抗性。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述小麥真菌病害包括小麥條銹病和/或小麥白粉病。

7.一種感病性小麥植株的獲取方法，其特征在于，包括以下步驟：

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的獲取方法，其特征在于，所述步驟1）myb1vigs片段和pcabs-γ載體都經(jīng)apai限制性內(nèi)切酶酶切后再連接。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的獲取方法，其特征在于，所述步驟1）獲取myb1vigs片段使用的上游引物的核苷酸序列如seq?id?no.4所示，下游引物的核苷酸序列如seq?id?no.5所示。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的獲取方法，其特征在于，所述pcabs-α重組菌、pcabs-β重組菌和pcabs-γ-myb1vigs重組菌的濃度都為4×107?cfu/ml，注射量為2?μl/葉片。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種調(diào)控小麥真菌病害抗性的TaMYB1基因、TaMYB1蛋白及其應(yīng)用和獲取方法。所述TaMYB1基因的cNDA核苷酸序列如SEQ?ID?No.1所示，所述TaMYB1蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?No.2所示。將本發(fā)明的抗條銹病相關(guān)蛋白的編碼基因干涉（即抑制基因的表達(dá)）后可以降低植物對條銹病、白粉病的感病性，如條銹病的侵染型顯著降低，可獲得對條銹病抗性提高的轉(zhuǎn)基因植株，以作為篩選的防治小麥病害的藥物。因此，本發(fā)明多重病害抗性的相關(guān)蛋白及其基因?qū)ε嘤箺l銹病、白粉病的作物具有重要的意義，適合于推廣應(yīng)用。

技術(shù)研發(fā)人員：王鳳濤,藺瑞明,馮晶
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9